Cátedra de Química Orgánica II

Departamento de Química – Facultad de Ingeniería

Universidad Nacional del Comahue

TRABAJO PRÁCTICO N°1

QUÍMICA ORGÁNICA II
Ingenierías Química
Profesorado en Química

Equipo Docente:
PROFESORAS: M. Eugenia Parolo – M. Eugenia Roca Jalil

ASISTENTE DE DOCENCIA: Israel Funes

AYUDANTE DE DOCENCIA: Ioana Gianoglio

AYUDANTES ALUMNO: Luciano Duarte

2023

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Pautas de trabajo
 Antes de asistir al Laboratorio, es importante conocer las actividades a desarrollar y las
medidas de seguridad, lo cual será evaluado con un cuestionario previo.

 La desaprobación del cuestionario inhabilita a realizar el laboratorio.

 Dicho cuestionario tiene una instancia recuperatoria que, siendo desaprobada nuevamente,
implicará la pérdida de la regularidad de la materia.

 Es OBLIGATORIO asistir con los elementos de seguridad personal: guardapolvo, gafas de

seguridad y guantes. Si no cuentan con ellos, no pueden ingresar al laboratorio según lo
indicado en el Manual de Seguridad en el Laboratorio del Departamento de Química.

Manipulación de sustancias químicas

Muchos de los reactivos y solventes que se utilizarán en el laboratorio pueden ser
tóxicos, corrosivos, inflamables o explosivos y no es posible reemplazarlos. Sin embargo, el
riesgo será mínimo si se adoptan correctamente las medidas de seguridad indicadas por la
cátedra.

“El fuego es un gran riesgo en el laboratorio de química orgánica dado que muchos
solventes son altamente inflamables”. Un fuego producido por solventes puede llevar la
temperatura del ambiente por encima de los l00 °C en unos pocos segundos!!!!!

 Si trabaja con mecheros mantenga alejados y evite manipular solventes

orgánicos.
 Todo reactivo volátil, debe manipularse bajo campana de extracción de aire.
 Evite el contacto de gases, líquidos o sólidos con la piel.

 El resto de las normas de seguridad y acciones a llevar a cabo en el laboratorio se

encuentran detalladas en el Anexo II – Instructivo de seguridad, desarrollado por el
departamento de química. Se deberá completar la declaración jurada (ANEXO III –
Declaración alumno) previo al trabajo de laboratorio. Ambos anexos se encuentran en
PEDCO.

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TRABAJO PRACTICO de LABORATORIO N° 1: CARBOHIDRATOS

MARCO TEÓRICO

Los hidratos de carbono, también llamados carbohidratos, glúcidos, sacáridos o azúcares,

químicamente son polihidroxi-aldehídos o polihidroxi-cetonas, o compuestos que por hidrólisis los
pueden originar.
Constituyen un grupo muy numeroso de compuestos naturales que se encuentran en todos los
seres vivos, desempeñando un papel muy importante en la nutrición de las plantas, animales y el
hombre. Algunos tienen importancia industrial como la celulosa y sus derivados.
Su fórmula general es Cn(H2O)n . Un carbohidrato que no se puede hidrolizar a un compuesto
más simple se denomina monosacárido, aquel que se puede hidrolizar a dos moléculas de
monosacárido se llama disacárido y un carbohidrato que se puede hidrolizar a muchas moléculas de
monosacárido se denomina polisacárido.

Otra clasificación de los carbohidratos, que tiene en cuenta la presencia de una función
aldehído o cetona, los denomina aldosas o cetosas respectivamente, y de acuerdo con el número de
átomos de carbono: tetrosas, pentosas, hexosas, etc. Por ejemplo, una aldohexosa es un
monosacárido de seis átomos de carbono que posee un grupo aldehído.
Los carbohidratos poseen algunas de las propiedades de sus funciones carbonilo y oxhidrilo,
y además algunas específicas. Todos son ópticamente activos.
Debido a la presencia de un grupo carbonilo, los hidratos de carbono reaccionan con
fenilhidrazina formando productos cristalinos característicos llamados osazonas.
Los carbohidratos que reducen a los reactivos de Fehling y Tollens se conocen como azúcares
reductores. Todos los monosacáridos, sean aldosas o cetosas, son reductores, así como también la
mayoría de los disacáridos.
También sufren reacciones de oxidación por medio de otros reactivos como agua de bromo,
HIO4, HNO3.
La acción de álcalis produce isomerización y descomposición de la cadena del monosacárido.

PARTE EXPERIMENTAL

Materiales: Reactivos: Soluciones: (5%)

 Gradilla.  H2SO4(C)  Glucosa.
 Tubos de ensayo.  Reactivo Molisch: α-naftol  Galactosa.
 Vaso de (1% en CH3CH2OH)  Fructosa.
precipitado.  Reactivo de Thomas: β-naftol  Xilosa.
 Trípode. (1% en CH3CH2OH)  Sacarosa.
 Tela de amianto.  Reactivo de Seliwanoff:  Almidón (0,2%).
 Mechero. Resorcinol (0,05%)  Incógnitas.
 Pipetas de 2 ml.  HCl (5 N)
 Propipeta.  R. de Fehling A: CuSO4 (5%)
 Cronómetro.  R. de Fehling B: Tartrato
doble de sodio y potasio
(15%) e NaOH (20%)
 Reactivo de Tollens: AgNO3
(5%)/NaOH/NH3(C)
 2,4-dinitrofenilhidracina (3%
en H2SO4 13% )
 Reactivo de Lugol: I2/KI
 NaOH (40%)

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 EXPERIENCIA N°1: REACCIÓN DE MOLISCH

Objetivo: identificar carbohidratos

Fundamento teórico: en esta reacción se someten los carbohidratos a la acción deshidratante del
ácido sulfúrico, originándose furfural en el caso de que el carbohidrato se trate de una pentosa y 5
hidroxi-metil-furfural en el caso de que sea una hexosa, tal como se muestra en las siguientes
reacciones:
O O
O HO
O
Pentosas + H2SO4 H Hexosa + H 2SO4 H

Estos derivados heterocíclicos reaccionan con aminas aromáticas y con varios fenoles, originando
complejos coloreados. En este caso se empleará -naftol como complejante, con el cual tanto el
furfural como el 5- hidroxi metil furfural dan un complejo violeta intenso.

Técnica: colocar en un tubo de ensayo 0,5 ml de solución (muestra de carbohidrato) y agregar 0,5 ml
del reactivo de Molisch. Agitar el tubo, inclinar el mismo y verter por la pared 0,5 ml ácido sulfúrico
concentrado (evitando agitar las fases). Se formarán dos capas y en la interfase se verá el anillo
coloreado.

Muestras para ensayar: glucosa y muestra incógnita.

NOTA: ensayar con ambas muestras al mismo tiempo para comparar los colores.

 EXPERIENCIA N°2: REACCIÓN DE THOMAS

Objetivo: diferenciar pentosas de hexosas.

Fundamento teórico: al igual que en la reacción de Molisch, se somete al carbohidrato a una

deshidratación con ácido sulfúrico. La diferencia estriba en el uso del complejante, que en éste caso
es -naftol, y forma con el furfural un complejo azul y con el 5-hidroximetilfurfural un complejo
marrón, permitiendo de ésta manera diferenciar uno de otro.

Técnica: colocar en un tubo de ensayo 0,5 ml de solución (muestra de carbohidrato) y agregar 0,5 ml
del reactivo de Thomas. Agitar el tubo, inclinar el mismo y verter por la pared 0,5 ml ácido sulfúrico
concentrado (evitando agitar las fases). Se formarán dos capas y en la interfase se verá el anillo
coloreado.

Muestras para ensayar: glucosa, xilosa y muestra incógnita.

NOTA: ensayar con todas las muestras al mismo tiempo para comparar los colores.

 EXPERIENCIA N°3: REACCIÓN DE SELIWANOFF

Objetivo: diferenciar cetosas de aldosas.

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Fundamento teórico: se someten los carbohidratos a la acción deshidratante de un ácido mineral, en

este caso ácido clorhídrico, originándose furfural o 5 hidroxi-metil-furfural según corresponda. Se
agrega resorcinol (m-hidroxifenol) para formar un complejo color rojo con los productos de
deshidratación. La velocidad de formación del complejo dependerá de la velocidad de deshidratación
del carbohidrato. Debido a que las cetosas se deshidratan más fácilmente que las aldosas este
ensayo permite diferenciarlas.

Técnica: colocar en un tubo de ensayo 0,5 ml de solución (muestra de carbohidrato) y agregar 0,5 ml
del reactivo de Seliwanoff (resorcinol diluido en ácido clorhídrico 5 N). Agitar el tubo y llevar a baño
María (aproximadamente 80°C) hasta resultado positivo. Se considera resultado positivo si al cabo
de 2-3 minutos el medio se torna color rojo. Es importante regular el tiempo de calentamiento,
porque, extendiéndonos en el tiempo las aldosas también reaccionarán.

Muestras para ensayar: glucosa, fructosa y muestra incógnita.

NOTA: ensayar con todas las muestras al mismo tiempo para comparar los colores y los tiempos de
reacción.

 EXPERIENCIA N°4: REACCIÓN DE FEHLING

Objetivo: diferenciar carbohidratos reductores de no reductores.

Fundamento teórico: los carbohidratos reductores son aquellos que poseen uno o más hidroxilos
hemiacetálicos libres, los cuales pueden ser oxidados por un agente oxidante débil.
El reactivo de Fehling es un agente oxidante débil, constituido por dos soluciones denominadas
Fehling A y Fehling B. El reactivo Fehling A es una solución de sulfato cúprico, donde el cobre (+2)
es el agente oxidante débil propiamente dicho. Fehling B es una solución de hidróxido de sodio, que
se utiliza para promover el equilibrio ceto-enólico, y de tartrato de sodio y potasio, que compleja al
catión cúprico debido a que este precipita en medio alcalino.
Cuando se ponen en contacto un carbohidrato reductor y el reactivo de Fehling se produce una
óxido-reducción. El grupo carbonilo se oxida a carboxilo (ácido aldónico) y el ión cúprico se reduce a
óxido cuproso. Esto se evidencia por la formación de un precipitado color rojo-ladrillo de óxido
cuproso.

Técnica: colocar en un tubo de ensayo 0,5 ml de solución (muestra de carbohidrato) y agregar 0,1 ml
del reactivo de Fehling A (CuSO4) y 0,1 ml de Fehling B (NaOH/C4H6O6KNa). Agitar el tubo y llevar a
baño María. Se considera resultado positivo la formación de un precipitado color rojo-ladrillo.

Muestras para ensayar: galactosa, sacarosa y muestra incógnita.

NOTA: ensayar con todas las muestras al mismo tiempo para comparar los resultados.

 EXPERIENCIA N°5: REACCIÓN DE TOLLENS

Objetivo: diferenciar carbohidratos reductores de no reductores.

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Fundamento teórico: el reactivo de Tollens es un agente oxidante débil, formado por una solución de
nitrato de plata en medio amoniacal.
El catión plata (+1) es el agente oxidante débil propiamente dicho. El amoníaco proporciona el medio
básico, para promover el equilibrio ceto-enólico, y además compleja al ión plata que de otra forma
precipitaría.
Cuando se ponen en contacto un carbohidrato reductor y el reactivo de Tollens se produce una
reacción redox. El grupo carbonilo se oxida a carboxilo (ácido aldónico) y el ión plata se reduce a
plata metálica. Esto se evidencia por la formación de un precipitado gris metalizado que se deposita
sobre la pared del tubo de ensayo y que se denomina espejo de plata.

Técnica: colocar en un tubo de ensayo 0,5 ml de solución (muestra de carbohidrato) y agregar 0,35
ml del reactivo de Tollens (AgNO3). Agitar el tubo y llevar a Maño maría (una vez que se deja el tubo
de ensayo en el baño NO se lo debe perturbar para permitir que la deposición del precipitado se
realice sobre sus pareces). Se considera resultado positivo la formación de un precipitado gris
metalizado.

Muestras para ensayar: manosa y almidón.

NOTA: ensayar con todas las muestras al mismo tiempo para comparar los resultados.

 EXPERIENCIA N°6: REACCIÓN DE CONDENSACIÓN

Objetivo: evidenciar la presencia de grupos carbonilos y diferenciar carbohidratos epímeros en C-3 y

C-4.

Fundamento teórico: los monosacáridos y disacáridos reductores pueden combinarse con la

fenilhidrazina de manera análoga a aldehídos y cetonas. A temperatura ambiente sólo reaccionan
con una molécula de fenilhidrazina dando hidrazonas incoloras, por lo general solubles en agua. En
cambio al calentar, los monosacáridos y algunos disacáridos (los que poseen OH- hemiacetálicos
libres) se combinan con dos moléculas de fenilhidrazina dando osazonas (sólidos cristalinos e
insolubles en agua).

Técnica: colocar en un tubo de ensayo 0,5 ml de solución (muestra de carbohidrato) y agregar 0,5 ml
del reactivo 2,4-dinitrofenilhidracina (H2N-NH-C6H4(NO2)2). Agitar el tubo y llevar a baño maría
durante 10-15 minutos. Se considera resultado positivo la formación de un precipitado color
amarillo a naranja.

Muestras para ensayar: , galactosa, ribosa, fructosa, sacarosa y muestra incógnita.

NOTA: ensayar con todas las muestras al mismo tiempo para comparar los resultados.

 EXPERIENCIA N°7: RECONOCIMIENTO E HIDRÓLISIS DE ALMIDÓN

Objetivo: evidenciar la presencia de almidón en muestras de alimento y reconocer su estructura

polimérica.

Fundamento teórico: El almidón es un polímero formado por otros dos polímeros denominados
amilosa (fracción soluble) y amilopectina (fracción insoluble), cuyas proporciones típicas son 20% y
80% respectivamente. El bloque fundamental de estas dos fracciones es la glucosa, y la única
diferencia entre ellos, además del tamaño, es el tipo de unión que poseen los monómeros, lo que
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define su estructura molecular. La amilosa está constituida por largas cadenas, cada una de las
cuales contiene 1000 o más unidades de glucosa ligadas entre sí por enlaces α-1,4; la cadena se
ramifica muy poco o nada. Esta es la fracción del almidón que da el color intensamente azul con
iodo. El análisis de rayos X indica que su cadena se halla enrollada en forma de espiral (como una
escalera de caracol), en cuyo interior hay espacio suficiente para acomodar una molécula de iodo. El
color azul se debe a las moléculas de iodo atrapadas. La amilopectina por su parte tiene una
estructura muy ramificada formada por varios centenares de cadenas cortas de unas 20 a 25
unidades de glucosa cada una, unidas (al igual que la amilosa) por uniones α-1,4. Sin embargo, su
estructura es más compleja que la de la amilosa, dado que los extremos de cada una de estas
pequeñas cadenas se unen por medio del C-1 al C-6 de la siguiente cadena.
Por tratamiento con ácido o por la acción de enzimas, los componentes del almidón se hidrolizan
lentamente, dando sucesivamente dextrina (una mezcla de polisacáridos de bajo peso molecular),
maltosa y finalmente glucosa.

Técnica:

1) Reconocimiento del polisacárido: colocar en un tubo de ensayo 0,5 ml de solución

(muestra de carbohidrato) o una porción de alimento sólido y agregar 0,1 ml del reactivo de Lugol
(I2/KI). Se considera resultado positivo la formación de un complejo color azul intenso. No debe
calentarse la solución puesto que el color desaparece.

2) Hidrólisis del Almidón: preparar una gradilla con 6 tubos de ensayo y agregar a c/u 2
ml de suspensión de almidón. Dejar un tubo de ensayo como testigo. Agregar a cada tubo de los 5
restantes 2 gotas de ácido clorhídrico concentrado y llevar a baño maría. Retire uno a uno los tubos
de ensayo del B. M. una vez que hayan transcurrido 3, 6, 9, 12 y 15 minutos respectivamente,
enfriando de inmediato en un baño de agua fría. Separe el contenido de cada muestra en 2 tubos de
ensayo y realice los ensayos correspondientes. A una porción se le agrega 0,1 ml de solución de
Lugol y a la otra porción se le realiza el ensayo de Fehling (agregar previamente 2 gotas de hidróxido
de sodio 40% para neutralizar el pH).

NOTA: neutralizar y realizar los ensayos de caracterización rápidamente, una vez cumplidos los
tiempos de hidrólisis dado que el material seguirá hidrolizándose a causa del medio ácido y no podrá
observarse el gradiente de colores al finalizar el ensayo.

Muestras a ensayar con lugol: galactosa, solución de almidón, alimentos a base de almidón (harina,
pan, polenta, arroz) y muestra incógnita.

Pautas para la Realización de Informes de Laboratorio

El informe del laboratorio debe cumplir con los siguientes ítems:

1. Carátula

La carátula debe incluir el nombre de la universidad, facultad, departamento, cátedra, título del
informe, nombre y legajo del alumno y año.

2. Fundamento Teórico

Es una breve introducción teórica referida a los conceptos a tratar en el informe.

3. Parte Experimental

Para las experiencias realizadas se deben detallar:

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a) Materiales y Reactivos: Los materiales y reactivos empleados en el ensayo.

b) Procedimiento: Es la técnica usada en la experiencia.
c) Resultados: Los resultados pueden contener:

-Observaciones: Las observaciones incluyen todos los detalles del ensayo que pueden
apreciarse con los sentidos.
-Interpretaciones: Es la interpretación, con fundamentos teóricos, de lo que se ha observado o
medido experimentalmente. Aquí pueden incluirse ecuaciones químicas, tablas, gráficos y figuras
que faciliten la explicación.
-Conclusiones: Se debe concluir en base a las hipótesis que podrían haberse planteado y a la
interpretación de los resultados.

4. Bibliografía

En particular, para el informe del trabajo de laboratorio de Carbohidratos, deben incluirse en

los resultados:
 Para la experiencia de hidrólisis del almidón, una tabla como la siguiente:

Reacción/Tiempo 0 min 3 min 6 min 9 min 12 min 15 min

Lugol
Fehling

Donde se indique con (+) si se produce reacción química y con (-) si no se produce reacción
química
 Una posible estructura para la muestra incógnita, dentro de las siguientes: glucosa, fructosa,
galactosa, lactosa, xilosa, almidón. Fundamentar en base a lo obtenido experimentalmente.
 Una tabla de carbohidratos y ensayos realizados:

Carbohidrato Molisch Thomas Seliwanoff Fehling Tollens Fenilhidrazina

Donde se indique con: (+): Se produce reacción química (-): No se produce reacción química
Para las reacciones no realizadas debe indicar N/R (+) si reaccionaría con dicho reactivo o bien
N/R (-) en caso contrario.

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