CK - MB (INMUNOINHIBICIÓN)

Reactivo líquido para la determinación de la actividad de la isoenzima MB

de la Creatín Quinasa(activada por N-acetil Cisteína) en suero o plasma.

Para uso en el diagnóstico in Vitro. Apto para usar en autoanalizador.

SIGNIFICANCIA CLINICA MUESTRA

La enzima Creatin Quinasa (CK) es un dímero conformado por la Utilizar suero fresco libre de hemólisis o plasma heparinizado. La CK es
combinación de las subunidades inmunológicamente diferentes, M y B. estable por 24 horas a temperatura ambiente y 14 días entre 2° y 8°C.
Existe como las isoenzímas MM, MB y BB.
Las CK-MM y CK-MB se distribuyen básicamente en en el músculo MATERIAL NECESARIO NO INCLUIDO
esquelético y cardíaco, en tanto la isoforma CK-BB está presente
principalmente en el tejido cerebral y en tejidos compuestos por Espectrofotómetro manual o automático o fotocolorímetro de filtros
músculo liso. Ante un infarto al miocardio, la CK-MB aumenta con cubeta termoestable, capaz de medir absorbancia a 340 nm, baño
considerablemente, y constituye un marcador altamente específico termoregulado, cronómetro, pipetas, calibrador y sueros controles.
para el diagnóstico del infarto.
TECNICA
FUNDAMENTOS DEL METODO
Llevar el reactivo a la temperatura de reacción (30° ó 37°C) y poner el
El método VALTEK® se basa en la medición de la actividad de la CK en espectrofotómetro en cero contra blanco de agua destilada.
presencia de un anticuerpo dirigido contra el monómero M. Este
anticuerpo inhibe totalmente la isoenzima CK-MM, y la mitad de la Reactivo trabajo (mL) 1.00
actividad de la forma CK-MB, sin afectar la actividad del monómero B de Muestra (mL) 0.05
las isoenzimas MB y BB. Dado que la isoenzima CK-BB no se encuentra
Mezclar y transferir a la cubeta del equipo. Incubar 2 minutos a la
normalmente en la sangre, la determinación de la actividad del
temperatura de medición (30° ó 37°C). Leer la absorbancia inicial, y
monómero B es prácticamente específica para la forma MB.
repetir la lectura a intervalos de 60 segundos por los próximos 3
minutos.
REACTIVOS
Adaptaciones para la aplicación de este reactivo en autoanalizadores
Conservados entre 2° y 8°C. y protegidos de la luz, estables hasta la
están disponibles a solicitud. Es responsabilidad del laboratorio validar
fecha de caducidad indicada en la etiqueta.
esta aplicación.
Composición del Reactivo 1:
CALIBRACION
Buffer Imidazol pH 6,6 0,10 mol/L
 En caso de calibración se recomienda utilizar un calibrador sérico
Mg2+ 10 m M
específico para CK-MB.
EDTA 2mM
 Se recomienda recalibrar en cualquier momento que se evidencie
N-Acetil Cisteina 20mM
alguno de estos acontecimientos:
Anticuerpo anti CK-M humana en
 El lote de reactivo cambia
cantidad suficiente para inhibir hasta 1500 UI/l de CK-MM
G-6-PDH >3.000 U/L  Se realiza un mantenimiento preventivo del equipo
HK >3.000 U/L  Los valores de control han cambiado o se encuentran fuera
Estabilizantes y preservantes c.s. de escala.

Composición del Reactivo 2: CALCULOS

Determine el cambio de absorbancia por minuto (∆Abs/min)
Buffer Tricine pH 7,5 40mM
Adenosina-5'-monofosfato (AMP) 5 mM
Actividad CK (UI/l)= ∆Abs/min x 8095
Creatina fosfato 30 mM
Adenosina-5'-difosfato (ADP) 2 mM
NADP+ 2 mM FACTOR= Vt x 1000 = 8095
D-Glucosa 20 mM p-NADPH 340 x P x Vm
Estabilizantes y preservantes c.s.
Vt= Volumen total de reacción
Preparación del Reactivo de Trabajo: Mezclar 1 mL. de Reactivo 1 con NADPH 340= Coef. de extinción molar del NADPH a 340 nm
200 ul. de Reactivo 2 o preparar el volumen requerido manteniendo la P= Espesor del paso de luz en la cubeta
proporción. Protéjase este reactivo de la luz directa. Vm= Volumen de muestra
Si la actividad de CK-Total determinada con el kit VALTEK® CK-NAC fuese
Estabilidad del reactivo de trabajo: 10 días entre 2° y 8°C., superior a 1500 UI/l, diluir la muestra 1:1 con suero fisiológico antes de
Descartar el reactivo si su absorbancia contra blanco de agua es mayor efectuar el ensayo de CK-MB. El resultado obtenido en este caso, se
de 0,7 O.D. a 340 nm. multiplica por 2.

Valtek S.A. Av. Marathon 1943, Ñuñoa, Santiago de Chile / Tel. + (562) 654 1100
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CONTROL DE CALIDAD

 Es conveniente analizar junto con las muestras sueros controles -Exactitud: Los reactivos VALTEK no muestran diferencias sistemáticas
valorados para CK-MB por este método. significativas cuando se comparan con otros reactivos comerciales. Los
 Si los valores obtenidos para los controles se encuentran fuera del detalles del estudio comparativo están disponibles bajo solicitud.
rango de tolerancia, revisar el instrumento, el reactivo y el
calibrador. - Reproducibilidad interserie: n=10
 Cada laboratorio debe disponer de su propio Control de Calidad y
establecer las correcciones necesarias en caso de que no se Nivel Media (U/Lt) C.V.
cumpla con las tolerancias permitidas para los controles. Patológico 190 3,71 %

ADVERTENCIAS Y MEDIDAS DE PRECAUCION: Estos datos han sido obtenidos utilizando la técnica manual. Los
resultados pueden variar al cambiar de instrumento
 El factor podría variar en autoanalizadores por diferencia en el
espesor de paso de luz. En este caso utilizar un calibrador sérico - Certificado de Conformidad y Trazabilidad disponible a solicitud
para obtener el factor.
RANGOS DE REFERENCIA
 Si la actividad de CK-Total determinada con el kit VALTEK® CK-NAC
fuese superior a 1500 UI/l, diluir la muestra 1:1 con suero Cada laboratorio debe establecer sus propios rangos de referencia en
fisiológico antes de efectuar el ensayo de CK-MB. El resultado función de la población de pacientes. Los rangos de referencia que se
obtenido en este caso, se multiplica por 2. enumeran a continuación están tomados de la bibliografía existente.
 Los volúmenes de reactivo y muestra pueden ser alterados
proporcionalmente de acuerdo a los requerimientos del Temperatura medición 30°C 37°C
espectrofotómetro.
 A pesar de la ausencia de la isoenzima CK-BB en condiciones CK-MB (UI/l) 0 a 10 0 a 25
normales o en pacientes con infarto, se ha descrito en algunos
casos una forma macro de la CK-BB que podría sobreestimar la Sospecha de infarto al miocardio:
medición del monómero B.
 Se sospecha la presencia de esta forma macro si el valor obtenido CK-MB > 6% de la actividad CK-Total cuando:
para la CK-MB es superior al 20% de la actividad CK total. a 30°C CK-MB > 10 UI/l y CK-Total > 160 UI/l
 Evitar el uso de sueros hemolizados ya que se pueden obtener a 37°C CK-MB > 25 UI/l y CK-Total > 420 UI/l
resultados falsamente elevados.
 Los rangos normales deben informarse de acuerdo a la
PRESENTACIONES DISPONIBLES
temperatura a la cual se realiza el ensayo.
 Consultar en nuestra página WEB la ficha de seguridad de este
CODIGO CONTENIDO
reactivo y observar todas las medidas de precaución necesarias
300110 Reactivo 1 1 x 40 mL
para la manipulación y eliminación de residuos.
Reactivo 2 1 x 8 mL
 Contiene Azida de Sodio 0.05% (Nº CAS 26628-22-8) No peligroso
200110 Reactivo 1 1 x 40 mL
a esta concentración. No ingerir. En contacto con metales
pesados, como tuberías de cobre o plomo, podría formar azida Reactivo 2 1 x 8 mL
metal que es explosiva, elimine los residuos con grandes
volúmenes de agua y/o de conformidad con las regulaciones BIBLIOGRAFIA
locales [Link], N.W., Fundamentals of Clinical Chemistry, 2nd Ed.,
 En autoanalizadores debe utilizarse contenedores de reactivos [Link], Philadelphia, PA., 1976.
nuevos. [Link], G., Clin. Chem. 22 (650), 1976.
 Utilizar los reactivos guardando las precauciones habituales de [Link], L.G., et al., Clin. Chem. 23(1569), 1977.
trabajo en el laboratorio de análisis clínicos. [Link], D.S., et al., Clin. Chem. 21(10), 1975.
[Link], A.H.B., Bowers, C.N., Clin. Chem. 28(2017), 1982.
ESPECIFICACIONES DE DESEMPEÑO: 6. Young D.S., Effects of drugs on clinical laboratory tests,
4th ed. AACC Press,1995.
-Linealidad: hasta 400 U/L.
Para valores superiores a 400 U/L, diluir la muestra con suero fisiológico
y el resultado obtenido se multiplica por el factor de dilución. REV Nº 2

-Límite de detección: 5 U/L.

-Interferencias: Hemoglobina sobre 1,0gr/dL, bilirrubina sobre 20mg/dL

y la lipemia (triglicéridos sobre 500 mg/dL) podrían interferir en la
técnica. Otros medicamentos y sustancias podrían interferir (6).