-Amilasa CC* FS**

Reactivo de diagnóstico para la determinación cuantitativa In Vitro de -amilasa en suero,

plasma u orina en equipos fotométricos.

Información de Pedido Reactivos

Nº de pedido Tamaño del envase
1 0501 99 10 021 R1 5x 20 mL + R2 1 x 25 mL
Componentes y Concentraciones
1 0501 99 10 026 R1 5x 80 mL + R2 1 x 100 mL R1: Amortiguadora pH 7,15 0,1 mol/L
1 0501 99 10 023 R1 1 x 800 mL + R2 1 x 200 mL NaCl 62,5 mmol/L
1 0501 99 10 704 R1 8x 50 mL + R2 8 x 12,5 mL MgCl2 12,5 mmol/L
1 0501 99 10 930 R1 4x 20 mL + R2 2 x 10 mL
1 0501 99 10 917 R1 8x 60 mL + R2 8 x 15 mL -Glucosidasa  2 kU/L
1 0501 99 10 191 R1 4x 36 mL + R2 4 x 9 mL R2: Amortiguadora pH 7,15 0,1 mol/L
1 0501 99 10 940 R1 8x 60 mL + R2 8 x 15 mL EPS-G7 8,5 mmol/L
1 0501 99 90 314 R1 10 x 20 mL + R2 2 x 30 mL
Instrucciones de Almacenamiento y Estabilidad del
Resumen [1,2] Reactivo
Las –amilasas son enzimas hidrolíticas que transforman el Los reactivos son estables hasta el final del mes indicado
almidón en maltosa. En el cuerpo humano las –amilasas como fecha de expiración, si es almacenado entre 2 – 8 °C,
se originan en diferentes órganos: la amilasa pancreática protegido de la luz y si se evita la contaminación.
es producida por el páncreas y liberada en el tracto ¡No congelar los reactivos!
intestinal, la amilasa salival se sintetiza en las glándulas Advertencias y Precauciones
salivales y secretadas en la saliva. La amilasa presente en 1. La saliva y la piel contienen –amilasa, por
la sangre se elimina a través del riñón y es excretada en la consiguiente nunca pipetear los reactivos con la boca y
orina. Por consiguiente, la elevación en la actividad sérica evite el contacto de la piel con los reactivos.
está reflejada en un incremento de la actividad de la 2. Los reactivos contienen azida de sodio (0.95 g/L)
amilasa urinaria. como preservante. ¡No ingerir! Evitar el contacto con
La medición de la –Amilasa en suero y orina es utilizada la piel y las membranas mucosas.
principalmente para el diagnóstico de desórdenes 3. Tomar las precauciones necesarias para el uso de
pancreáticos así como también para detectar el desarrollo reactivos de laboratorio.
de complicaciones. En la pancreatitis aguda la actividad de
amilasa pancreática sanguínea se incrementa a las pocas Manipulación de Desechos
horas después del ataque de dolor abdominal, alcanza el Por favor remítase a los requerimientos legales locales.
máximo aprox. después de 12 horas y regresa a valores Preparación del Reactivo
dentro del rango de referencia a más tardar después de 5
días. La especificidad de –amilasa para los desórdenes Inicio con Sustrato
pancreáticos no es muy alta debido a que niveles elevados Los reactivos están listos para usar.
también son medidos en varias enfermedades no– Inicio con muestra
pancreáticas, por ejemplo, parotiditis e insuficiencia renal.
Mezclar 4 partes de R1 + 1 parte de R2
Por consiguiente, para la confirmación de una pancreatitis
(p. ej. 20 mL R1 + 5 mL R2) = monoreactivo
aguda debe realizarse adicionalmente la medición de la
Estabilidad: 6 meses de 2 a 8 °C
lipasa.
4 semanas de 15 a 25 °C
Método ¡El monoreactivo debe ser protegido de la luz!
Los tests enzimáticos fotométricos utilizan el substrato Materiales requeridos pero no suministrados
4,6–Etilideno–(G7)–p–nitrofenil–(G1)––D– Solución de NaCl 9 g/L
maltoheptaosido (EPS–G7) el que es dividido por la – Equipo general de laboratorio
amilasa en varios fragmentos. Éstos, posteriormente, son
hidrolizados en un segundo paso por la –glucosidasa Tipo de muestra
produciendo glucosa y p-nitrofenol. El incremento en la Suero, plasma heparinizado o con EDTA, orina
absorbancia representa el total (pancreática y salival) de la Estabilidad en suero o plasma [5]:
actividad de la amilasa en la muestra [3,4].. 7 días de 20 a 25 °C
7 días de 4 a 8 °C
Principio 1 año a - 20 °C
5 EPS-G7 + 5 HO < -Amilasa > 2 Etilideno-G + 2 GPNP Estabilidad en orina [5]:
+ 2 Etilideno-G + 2 GPNP
+ Etilideno-G + GPNP
2 días de 20 a 25 °C
10 días de 4 a 8 °C
2 G2PNP + 2 G3PNP + G4PNP + 14 H 2O <-Glucosidasa > 5 PNP +14 G 3 semanas a - 20 °C
¡Desechar las muestras contaminadas!
(PNP = p-Nitrofenol, G =Glucosa)

-Amilasa CC FS – Página 1 * Complete color = Coloración completa

** Fluid Stable = líquido estable
Procedimento del Ensayo Especificidad/Interferencias
Hay disponibles a petición aplicaciones para No aparece interferencia con el ácido ascórbico hasta
sistemas automáticos. 30 mg/dL, bilirrubina hasta 40 mg/dL, lipemia hasta
Longitud de onda Hg 405 nm 1000 mg/dL de triglicéridos. La hemoglobina interfiere aún
Paso óptico 1 cm en concentraciones bajas.
Temperatura 37 °C Límite de Detección
Medición Contra blanco de reactivo El límite más bajo de detección es 3 U/L.
Inicio con sustrato Precisión
Blanco
Suero/ Orina en la serie valor DE CV
Plasma n = 20 medio [U/L] [%]
Muestra/Calibrador - 20 µL 10 µL [U/L]
Reactivo 1 1000 µL 1000 µL 1000 µL Muestra 1 184 2,00 1,08
Mezclar, incubar durante aprox. 1 min., luego añadir: Muestra 2 398 2,67 0,67
Reactivo 2 250 µL 250 µL 250 µL Muestra 3 841 4,96 0,59
Mezclar, leer la absorbancia después de 2 min. (37 °C) y
empezar a cronometrar. Leer nuevamente la absorbancia
de un día a otro valor medio DE CV
después de 1, 2, y 3 min.
n = 20 [U/L] [U/L] [%]
Inicio con muestra Muestra 1 180 1,82 1,01
Muestra 2 383 3,74 0,97
Blanco
Suero/ Orina
Muestra 3 817 7,48 0,92
Plasma
Muestra/Calibrador - 20 µL 10 µL Método de Comparación
Monoreactivo 1000 µL 1000 µL 1000 µL Una comparación entre DiaSys –Amilasa CC FS (y) con el
Mezclar, leer la absorbancia después de 2 min. (37 °C) y metodo recomendado de rutina (x) utilizando 51 muestras
empezar a cronometrar. Leer nuevamente la absorbancia dio los siguientes resultados:
después de 1, 2, y 3 min. y = 0,964 x – 2,455 U/L; r = 0,998.

Cálculo Una comparación entre DiaSys –Amilasa CC FS (y) y un

test comercialmente disponible (x) utilizando 51 muestras
Con factor dio los siguientes resultados:
De las lecturas de absorbancia calcular A/min. y y = 1,031 x – 3,613 U/L; r= 0,994.
multiplicar por el correspondiente factor de la tabla de más
abajo: Valores de Referencia [6]

A/min. x factor = Actividad de la Amilasa [U/L] Mujeres Hombres

Suero / Plasma < 100 U/L < 100 U/L
Inicio con Inicio con muestra Orina < 447 U/L < 491 U/L
sustrato
Suero / Plasma 5670 4554 Cada laboratorio debería comprobar la transmisibilidad de
Orina 11250 9018 los valores de referencia de sus propios grupos de
Con calibrador pacientes y, dado el caso, determinar sus propios valores
de referencia.
A / min Muestra
  Amylase [U / L] 
A / min Calibrador
x C onc. Calibrador [U / L] Bibliografía
1. Lorentz K. -Amylase. In: Thomas L, editor. Clinical
laboratory diagnostics. 1st ed. Frankfurt: TH-Books
Calibradores y Controles Verlagsgesellschaft; 1998. p.192-202.
2. Moss DW, Henderson AR. Digestive enzymes of
Para la calibración de sistemas fotométricos automatizados
pancreatic origin. In: Burtis CA, Ashwood ER, editors.
se recomienda el uso del calibrador DiaSys TruCal U. Para
Tietz Textbook of Clinical Chemistry. 3rd ed.
el control interno de calidad los controles DiaSys TruLab N Philadelphia: W.B Saunders Company; 1999.
y P como TruLab Orina deberán probarse con cada lote de p.689-98.
muestras. 3. Kruse-Jarres JD, Kaiser C, Hafkenscheid JC,
Cat. No. Presentación Hohenwallner W, Stein W., Bohner J et al. Evaluation
TruCal U 5 9100 99 10 063 20 x 3 mL of a new alpha-amylase assay using 4,6-ethylidene-
5 9100 99 10 064 6 x 3 mL (G7)-1-4-nitrophenyl-(G1)-alpha-D-maltoheptaoside
TruLab N 5 9000 99 10 062 20 x 5 mL as substrate. J Clin Chem Biochem 1989; 27: 103-13.
5 9000 99 10 061 6 x 5 mL 4. Schumann G, Aoki R, Ferrero CA et al. IFCC primary
TruLab P 5 9050 99 10 062 20 x 5 mL reference procedures for the measurement of catalytic
5 9050 99 10 061 6 x 5 mL activity concentrations of enzymes at 37 °C. Clin Chem
TruLab Orina Nível 1 5 9170 99 10 062 20 x 5 mL Lab Med 2006; 44(9): 1146-1155
5 9170 99 10 061 6 x 5 mL 5. Guder WG, Zawta B et al. The Quality of Diagnostic
TruLab Orina Nível 2 5 9180 99 10 062 20 x 5 mL
Samples. 1st ed. Darmstadt: GIT Verlag; 2001;
5 9180 99 10 061 6 x 5 mL
p. 16-7, 50-1.
Características Fabricante
Rango de medida DiaSys Diagnostic Systems GmbH
El test ha sido desarrollado para determinar las actividades Alte Strasse 9 65558 Holzheim Alemania
de la amilasa las cuales corresponden a un máximo
A/min. de 0.35.
Si tal valor es excedido la muestra debe ser diluida 1 + 10
con solución de NaCl (9 g/L) y los resultados multiplicados
por 11.

-Amilasa CC FS – Página 2 844 0501 10 06 00 Agosto 2008/12