Objetivos

General
● Realizar el análisis microbiológico de una muestra de agua y comprender su importancia en
el ámbito de la salud pública

Particular
● Saber leer e interpretar los resultados en las tablas de McCrady para el NMP
● Entender la diferencia entre Coliformes totales y Coliformes fecales

Introducción
La vida, tal y como la conocemos hoy en día, sería totalmente imposible sin la existencia de agua,
pues desde los organismos más sencillos, hasta los animales y plantas más complejos, este
elemento es indispensable para su supervivencia. Aseguran los expertos de la Organización
Mundial de la Salud OMS (1967) que la polución del medio por las materias residuales que resultan
de las actividades humanas es uno de los problemas más importantes, difíciles y complejos con los
que deben enfrentarse los servicios de sanidad pública.
El hombre es el reservorio más frecuente de los agentes causales de las enfermedades infecciosas
humanas y en menor proporción los animales o plantas. Muchos de estos agentes son eliminados
con las excretas (heces y orina) y, en menor cuantía, por otras vías de salida (boca, nariz,
conjuntiva, etc.) contaminando las aguas. La transmisión de las enfermedades, fundamentalmente
las alimentarias o enterógenas, se efectúa de diversas formas a partir de las excretas y aguas
residuales, ya sea por contacto directo, por mediación con insectos, por alimentos o por el agua
contaminada. El agua es el elemento de contagio directo al transmitir directa o indirectamente los
agentes productores de enfermedades.
En el agua pueden encontrarse una gran variedad de microorganismos, los cuales afectan en
mayor o menor medida a la calidad sanitaria del agua Además de la flora normal presente en
cualquier sistema acuático (ejemplos: Bacillus, Pseudomonas, etc.), pueden existir otros
microorganismos contaminantes, algunos de ellos patógenos para el ser humano y/u otros
animales. Una de las fuentes principales de contaminación son las aguas residuales que contienen
materia fecal que puede ser vehículo de transmisión de patógenos. El agua es un recurso natural
necesario para el desarrollo de un gran número de actividades humanas. Su creciente degradación
por disminución de su calidad implica la reducción del número de usos que se le da; es por ello, lo
que se hace necesario la realización de estudios que permitan determinar la calidad del agua. Los
análisis que se pueden realizar al agua para controlar su calidad son: físicos, químicos,
microbiológicos, en esta ocasión se hará una determinación microbiológica Todos los
microorganismos que se encuentran en el agua son importantes en el momento de establecer el
control de la calidad de la misma de su medio natural de vida en el agua o medios transitorios
introducidos por el ser humano; si su crecimiento lo propician los nutrientes presentes en el
escurrimiento natural. Para esta parte solo se pudo realizar la determinación por el NMP para
grupos coliformes y ver si el agua muestra está dentro de los límites permisibles que establecen en
la NOM-127, también se hizo la prueba de IMViC para observar si el resultado de las 4 pruebas
bioquímicas son las correctas para [Link], además que se utilizó un medio de S.S para también
inocular una bacteria, que se demostrara si tambien es [Link]

Metodología (diagrama de flujo)

Imagen 2. Prueba NMP para la muestra de agua de una purificadora

Rojo Fenol más Carbohidratos Interpretación

2 [ ] RF + Lac 10 mL (+) (+) (+)

[normal] RF + Lac 1 mL (+) (+) (+)

[normal] RF + Lac 0.1 mL (-) (-) (-)

Imagen 2. Prueba IMViC para la bacteria inoculada

I RM VPI C

- No se realizó, pero No se realizó, pero +

Imagen 3. Medio Agar Salmonella Shigella inoculado

Forma Circular

Tamaño Mediano

Color Rosado

Borde Ondulado

Superficie Lisa

Elevación Elevado

Luz reflejada Mate

Luz transmitida Opaco

Otras Pigmentación: color rosado,

Análisis de resultados.
Para la parte de NMP, lo único que se pudo realizar es la prueba presuntiva como tal, también la
prueba de confirmación total, a medias debido a que no se hicieron las pruebas bioquímicas de
RMVP, por falta de material y de tiempo; pero sí se pudieron realizar la de Indol, a través de la
prueba de SIM, y la prueba de Citrato de Simmons. También se pudo realizar una siembra de una
bacteria, que se dijo que se trataba de [Link], pero por los resultados se sospecha que no se
trataba de esa bacteria. Pero empecemos primero por la prueba presuntiva, con ayuda de la Tabla
de Número Más Probable para serie de tres tubos, en los resultados tenemos que para los tubos
de doble concentración los tres tubos resultaron totalmente positivos, se confirma por el color
amariilo y la producción de gas, entonces desde aquí tenemos una serie de 3; para los tubos de
concentración normal en donde se agregó de muestra de agua 1 mL también resultaron los tres
positivos ya que se tornaron color amrillo y hay notoriedad de gas, entonces tenemos la segunda
serie 3; por último tenemos a los otros tubos donde está una concentración normal donde se le
agregó 0.1 mL de la muestra de agua de la purificadora, se tiene que los tres tubos son de
resultados negativos debido al color rojo y que no hay producción de gas en esos tubos, entonces
la tercera serie que necesitamos para leer en la tabla es de 0. Lo que se tiene es la siguiente
combinación: 3-3-0, lo cual este dato si se puede encontrar en la tabla para NMP, en la
combinación de 3-3-0 nos dice que tenemos 240 NMP organismos/100 mL, desde aquí podemos
ver que el agua está muy contaminada ya que excede por completo los límites permisibles que
indica en la NOM-127, lo que quiere decir que en la purificadora de donde se recuperó el agua, no
tiene buenas técnicas para hacer que el agua no se riesgosa para la salud
Para la prueba de confirmación total, tenemos que para I(-) y para C(+), desde antes de inocular, se
indicó que la bacteria es [Link]; sin embargo estos resultados no concuerdan para esta bacteria ya
que para Indol y Citrato deben dar para Indol positivo, y para citrato debe dar negativo. Como se
indica en la tabla de resultados para el IMViC no se realizaron las pruebas para RM y VP debido a
circunstancias ajenas al trabajo en el laboratorio; con el resultado para SIM es negativo y para
citrato positivo, según el control que se consultó, se puede sospechar de 4 bacterias: Salmonella
spp., Klebsiella spp., Shigella spp., Proteus mirabilis. Para discernir a estas bacterias, podemos
comparar esta colonia, con otra que se hizo en la práctica 14 de pruebas bioquímicas, si
comparamos ese medio con el que se hizo para esta práctica tenemos que son las mismas
características y en la práctica 14 se dice que se trata de Klebsiella pneumoniae, lo cual nos dice
que efectivamente no se trata de [Link], también lo que quiere decir que el microorganismo es un
Coliforme total.
Conclusiones
Esta práctica resulta interesante, debido a que, si se hubiera realizado por completo, se están
aplicando todos los conocimientos aprendidos durante el semestre, desde clasificar a las bacterias
por género y especie hasta la aplicación de pruebas bioquímicas; a pesar que se limitaron las
pruebas ahora se tiene un buen conocimiento sobre como es el procedimiento para saber si el
agua tiene contaminación de microorganismos que pueden ser riesgoso para el humano.
Referencias
● López B. Coliformes: características, tipos, géneros, enfermedades[Internet]. Lifeder. 2019[citado el
23 de octubre de 2022]. Disponible en: [Link]
● Cuáles son las características físicas y químicas del agua? [Internet]. iAgua. 2020 [citado el 12 de
noviembre de 2022]. Disponible en:
[Link]
● Cuáles son las propiedades organolépticas del agua [Internet]. GC Tratamiento. 2021 [citado el 12 de
noviembre de 2022]. Disponible en: [Link]
● Coliformes [Internet]. bioMérieux España. [citado el 12 de noviembre de 2022]. Disponible en:
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● DOF - Diario Oficial de la Federación [Internet]. [Link]. [citado el 12 de noviembre de 2022].
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● Rojas-Badía A;., María M, Romeu-Álvarez ;., Rojas-Hernández B;., Jeny A, Larrea-Murrell MM, et al.
Bacterias indicadoras de contaminación fecal en la evaluación de la calidad de las aguas: revisión de
la literatura [Internet]. [Link]. [citado el 12 de noviembre de 2022]. Disponible en:
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