Caldo Luria (Caldo LB Miller) Cat.
1551
Para estudios de genética molecular en [Link]
Información práctica
Aplicaciones Categorias
Preparación y recuperación de células competentes Escherichia coli
Industria: Medios de cultivo para Biología molecular
Principios y usos
Caldo Luria (Caldo LB Miller) se basa en el medio LB, según la descripción de Miller, para el crecimiento y mantenimiento de las cepas recombinantes
de E. coli utilizadas en procedimientos de microbiología molecular.
Estas cepas generalmente derivan de E. coli K12, que no pueden producir vitamina B, por lo que este medio está formulado para promover el
crecimiento de microorganismos nutricionalmente exigentes. Esta cepa de E. coli se ha modificado aún más a través de una mutación específica para
crear una cepa auxotrófica que no es capaz de crecer en medios nutricionalmente deficientes.
La triptona proporciona nitrógeno, vitaminas, minerales y aminoácidos esenciales para el crecimiento. El extracto de levadura es fuente de vitaminas,
particularmente del grupo B El cloruro de sodio suministra electrolitos esenciales para el transporte y el equilibrio osmótico.
Si se desea, agregar asépticamente 10 ml de solución estéril al 20% de glucosa y mezclar bien para un mejor crecimiento. Las bacterias que contienen
plásmidos tienden a crecer mejor en caldos que contienen entre 5 y 10 g de sal. También pueden agregarse cofactores al caldo cuando se trabaja con
ciertos tipos de bacteriófagos. Por ejemplo, el bacteriófago labmda requiere un exceso de magnesio en el caldo para infectar bacterias de forma
adecuada.
El Caldo Luria (Caldo LB Miller) tiene un nivel de cloruro de sodio distinto al de otros medios como el Caldo LB (Lennox) (Cat. 1231) o el Caldo Luria
(Modificación de Miller) (Cat. 1266). Esto permite seleccionar la concentración de sal óptima del medio para una cepa específica.
Fórmula en g/L
Cloruro sódico 10 Triptona 10
Extracto de levadura 5
Fórmula típica g / L * Ajustada y/o suplementada según sea necesario para cumplir con los criterios de rendimiento.
Preparación
Suspender 25 gramos de medio en un litro de agua destilada. Mezclar bien y disolver por calentamiento agitando con frecuencia. Hervir durante un
minuto hasta la disolución completa. Distribuir en recipientes apropiados y esterilizar en autoclave a 121 °C durante 15 minutos.
Instrucciones de uso
- LLevar a cabo el procedimiento experimental de acuerdo con el uso o propósito adecuado.
- Inocular e incubar a una temperatura de 35±2 ºC durante 18-24 horas.
Control de calidad
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Solubilidad Apariencia Color del medio deshidratado Color del medio preparado Final pH (25ºC)
Sin restos Polvo fino Beige Ámbar 7,0±0,2
Test microbiológico
Condiciones de incubación: (35±2 ºC / 18-24 h)
Condiciones de inoculación: Productividad cualitativa (<100 cfu)
Microrganismos Especificación
Escherichia coli ATCC 23724 Buen crecimiento / Turbidez (2)
Escherichia coli ATCC 33694 Buen crecimiento / Turbidez (2)
Escherichia coli ATCC 33849 Buen crecimiento / Turbidez (2)
Escherichia coli ATCC 39403 Buen crecimiento / Turbidez (2)
Escherichia coli ATCC 47014 Buen crecimiento / Turbidez (2)
Almacenamiento
Temp. Min.:2 ºC
Temp. Max.:25 ºC
Bibliografía
Atlas, R. M., L.C. Parks (1993). Handbook of Microbiological Media. CRC Press, Inc. London.
The condensed protocols from molecular cloning: a laboratory manual/ Joseph Sambrook, David W. Russell.
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