UNIVERSIDAD DE LOS LLANOS INFORME DE LABORATO-

Facultad de Ciencias básicas e ingenierías RIO

Departamento de Biología y Química PRINCIPIOS QUÍMICOS

caracterización Química De Aminoácidos Y Proteínas

Mayra Alejrandra Duarte Catimay 121004815

Lina Maria Guarin Clavijo 121004819

MVZ – Grupo 1

Docente: Lissette Johana Hernández Arrieta

Facultad de Ciencias Agropecuarias Y Recursos Naturales

Programa De Medicina Veterinaria Y Zootecnia

Resumen
En el laboratorio Nº 011, se busca analizar el comportamiento de los aminoácidos y proteínas en diferentes reacciones quí -
micas también comprobar y desnaturalizar la proteína de albumina mediante diferentes agentes y solventes. Por medio de la
extracción de la clara de huevo, dividiéndola en 2 y agregando a una de las partes agua destilada para diluirla. Para la prue-
ba de solubilidad se ocuparon 4 tubos de ensayo con tres ml de clara de huevo diluida y 3 ml de las siguientes sustancias:
agua destilada, NaCO 3 al 10%, NaOH al 10% y HCl al 0.2%. para la desnaturalización de dicha proteína se usaron agentes
como: calor, alcohol, metales pesados (AgNO 3 al 5%), ácidos orgánicos fuertes ( Tricloroacético al 5%.), observando los
cambios presentes y confirmando al utilizarlos, desnaturalizaban de una u otra manera la albumina. Por ultimo se obtuvie-
ron resultados de las reacciones químicas provocadas por los reactivos usados tales como: Ninhidrina, Biuret, xantoprotei-
ca, ensayo de azufre y acido Glioxilico.

Palabras clave: aminoácidos, proteínas, desnaturalización, solventes, recciones.

1. Introducción la desnaturalización de proteínas es la cocción del [Link]

clara del huevo está compuesta en gran parte por aguay
La albumina es una proteína de alta calidad producida por el
albúminas, un tipo de proteínas. Al aumentar la temperatura
hígado y ejerce diversas funciones en el organismo, siendo
las proteínas de la clara del huevo se desnaturalizan, pierden
la principal proteína de la sangre, y una de las más
susolubilidad y la clara del huevo deja ser líquida y
abundantes en el ser humano. la albúmina también puede
transparente y pasa a ser opacade colorblanco y sólida.
ser consumida en la forma de suplemento, que es apenas
(Ticona, 2018)
compuesto por la clara de huevo.(SEQC,2020)
Observar el comportamientode la proteína de la albúmina de
Solubilidad
huevo endiferentes medios(temperatura y PHextremos)
La solubilidad es debida a los radicales libres de los observar los cambios en su estructura.
aminoácidos que, al ionizarse, establecen enlaces débiles
(puentes de hidrógeno) con las moléculas de agua. Así,
cuando una proteína se solubiliza queda recubierta de una 2 Objetivos
capa de moléculas de agua (capa de solvatación) que impide  Comprobar la solubilidad de la proteína albúmina, en
que se pueda unir a otras proteínas lo cual provocaría su diferentes solventes.
precipitación (insolubilización).(Menéndez, 2014)  Desnaturalizar la albúmina mediante diferentes agentes.
Desnaturalización  Analizar el comportamiento de aminoácidos y proteínas
en diferentes reacciones químicas
a la pérdida de las estructuras de orden superior (secundaria,
terciaria y cuaternaria), El ejemplo más famoso para ilustrar 3 Materiales y reactivos
 DILATACIÓN TERMICA
Claudia Patricia Negrete Varela, Ana María Petro Villalba

Equipo Materiales Reactivos y/o Reacciones químicas: Los aminoácidos como unidades
sustancias constitutivas de las proteínas, contienen una gran
Campana de -Tubos de en- -Reactivo de cantidad de grupos químicamente activos, lo que hace que
extracción sayo (8) Biuret una proteína tenga una amplía reactividad frente
-Gradilla para -Reactivo de a compuestos orgánicos. Esta es la base de las siguientes
tubos de ensa- Ninhidrina reacciones:
yo (1) -Etanol 95% Reacción con la Ninhidrina: Los aminoácidos dan com-
-Mechero (1) -Ácido Nítrico puestos de color violeta o purpura con este
-Vaso precipi- concentrado reactivo.
tado de 50 ml -Hidróxido de Reacción Biuret: El sulfato de cobre alcalino reacciona con
(2) Sodio 10% compuestos que contienen dos o más enlaces
-Acetato de peptídicos dando un complejo de coloración violeta. La in-
Plomo. tensidad del color es una medida del número de
enlaces peptídicos que contienen proteína a analizar.
4 Marco teórico Reacción Xantoproteíca: Los aminoácidos que contienen
un núcleo aromático, forman nitro-derivados de
Aminoácidos: son compuestos orgánicos que contienen color amarillo cuando se calienta con ácido nítrico concen-
grupos amino y carboxílicos en la misma trado y por álcali pasan a un color anaranjado
molécula, por lo tanto, poseen propiedades ácidas y básicas. oscuro.
De los 22 o más aminoácidos encontrados en Ensayo de Azufre: Si una solución de proteína se hierve
una proteína casi todos son alfa-aminoácidos. con KOH o NaOH concentrado y luego con
Desnaturalización: Es el cambio del ordenamiento de la acetato de plomo se forma un precipitado negro, esto si en
estructura tridimensional ordenada de la molécula la proteína están presentes los aminoácidos
nativa a otro de una configuración más desordenada. cistina, cisteína y/o metionina.
Durante la desnaturalización se rompe los puentes de hidro- Reacción de Millón: El reactivo consta de una solución de
geno y hay un incremento en el grado de nitrato mercúrico en HNO 3. Los compuestos
desorden de la molécula con pérdida de la actividad biológi- que componen un grupo de hidroxibenceno reaccionan con
ca. En la mayoría de los casos no es posible este reactivo formando compuestos de color
restituir las proteínas su estado nativo luego de haber sido rojo. Los aminoácidos que pueden dar positiva esta prueba
desnaturalizada. son la tirosina y sus derivados.
Agentes desnaturalizantes: Estos pueden ser de varias cla- Reacción del Ácido Glioxílico: El grupo indólico del trip-
ses, entre ellas se encuentran: tófano reacciona con el ácido glioxílico en
a. Físicos: Calor, luz, presión, congelamiento, rayos X, rayo presencia del ácido sulfúrico concentrado dando color pur-
ultravioleta, ultrasonido y agitación pura. El ácido acético glacial que ha sido expuesto
mecánica. a la luz contiene ácido glioxílico.
b. Químicos: Solventes orgánicos: alcohol, éter, acetona, Reacción de Sakaguchi: El único aminoácido que contiene
etc. grupos guanidinos es la arginina, esta
c. Bases orgánicas: Amidas y urea. reacciona con el alfa-naftol y un agente oxidante tal como el
d. Detergentes. agua de bromo, dando un color rojo.
e. Valores de pH altos o muy bajos. 5 Sección experimental
f. Sales de metales pesados (Hg y Pb). Se ingresó al laboratorio con la debida indumentaria (bata,
g. Ácidos fuertes: Tricloroacético, perclórico, sulfúrico, guantes, vestimenta cubierta, tapabocas), reconociendo el
clorhídrico. material de laboratorio, y recibiendo la instrucción docente
h. Bases fuertes. y del auxiliar de laboratorio.
i. Biológicos: Enzimas proteolíticas.
j. Las proteínas desnaturalizadas tienen a formar agregados Se comenzó con la preparación base para la experimenta-
moleculares y se precipitan. Esto se ción, comportamiento de aminoácidos y proteínas.
conoce con el nombre de coagulación. Dividir la cara de huevo en 2 porciones, diluir una de ellas
con agua destilada.
2
 S o lu b ilid a d d e u n a p ro te in a

4 tubos de ensayo
con clara diluida

Agua destilada,
NaCO3 , NaOH y HCl

Medir pH

Desnaturalizacion de proteinas
Calor Alcohol Metales Pesados Acidos Org. Fuertes
caliente A 2ml de albúmina A 2 ml de albúmina Tome un tubo de dos
suavemente 2ml sin diluir agregue 2 diluida agregue 5 ml de albúmina diluida
de albúmina sin ml de etanol al 90%. gotas de AgNO al agregue 1 ml de ácido
diluir hasta que 5%. Tricloroacetico al 5%.
observe el primer
cambio.

Reacciones Quimicas
Ninhidrina Biuret Xantoproteica Ensayo de Azufre Acido Glioxilico
A 1 ml de albúmina A dos ml de A tres ml de albúmina tome dos ml de A dos ml de albúmina sin
diluida agréguele un albúmina diluida sin diluir, añada cinco albúmina sin diluir, diluir, añada dos ml de
ml de solución agréguele dos ml gotas de NaOH al añada 5 gotas de NaOH ácido acético glacial,
Ninhidrina. Caliente del reactivo de 40%, hierva con al 40%, hierva. Agregue luego deje caer
el tubo hasta que Biuret. cuidado hasta que 10 gotas de solución de lentamente por las
observe un cambio. observe el primer acetato de plomo. paredes del tubo 2 ml de
cambio. acido sulfurico
concentrado hasta que
se formen 2 capas.

6 Resultados y análisis

Evidencia Reacción Explicación

Prueba de solubilidad Agua Destilada: Precipitado.
de una proteína a dife- NaCO3: solubilidad total.
 DILATACIÓN TERMICA
Claudia Patricia Negrete Varela, Ana María Petro Villalba

rentes valores de pH. NaOH: Solubilidad Parcial.

HCl: solubilidad total.
Agua Destilada Como prueba cualitativa, encontramos que
NaCO3 los resultados no correspondían a la respuesta
NaOH esperada según los diferentes métodos que
HCl utilizamos para demostrar la desnaturaliza-
ción y caracterización de esta proteína. En
estos ambientes, encontramos que depen-
diendo del pH de la muestra tomada, la albú-
mina muestra una solubilidad parcial o total
en la mayoría de los medios alcalinos como
el hidróxido y carbonato de sodio, mientras
que en HCl es ácido. , precipita debido a
cambios en el pH, incluida una fuerte dismi-
nución de la solubilidad, a medida que apare-
cen depósitos hidrofóbicos internos en la su-
perficie.

HCl: 7 (ácido débil)

NaCO3: 12 (base fuerte)
Agua Destilada: 10 (base)
NaOH: 13 (base fuerte)

4
Calor: caliente suave- Desnaturalización de las proteínas
mente 2 ml de albúmina Es la pérdida de las estructuras de orden su-
sin diluir hasta que ob- perior (secundaria, terciaria y cuaternaria),
serve el primer cambio. quedando la cadena polipeptídica (formada
Compare con la albúmi- por aminoácidos) reducida a un polímero sin
na no calentada y anote ninguna estructura tridimensional fija. La
la diferencia desnaturalización provoca la precipitación de
la proteína.

Alcohol: A 2ml de al- reacciona con la albúmina, una proteína que

búmina sin diluir agre- contiene el huevo y se encarga de que la cla-
gue 2 ml de etanol al ra pase de estar de color transparente a blan-
90%. Anote el resulta- co. La reacción química, llamada desnaturali-
do. zación. El alcohol va desnaturalizando las
proteínas del huevo, que se encuentran prin-
cipalmente en la clara.

Metales Pesados: en las pruebas anteriores evidenciamos la

Tome dos tubos cada desnaturalización y todos los factores que
uno de 2 ml de albúmi- permiten este fenómeno como lo son la tem-
na diluida. A uno de peratura, el pH y las concentraciones de solu-
ellos agregue 5 gotas de to, el cual se debe a que los enlaces que man-
AgNO3 al 5%. tienen la conformación globular se rompen
 DILATACIÓN TERMICA
Claudia Patricia Negrete Varela, Ana María Petro Villalba

Ácidos Orgánicos la proteína adopta la conformación filamen-

Fuertes: Tome un tubo tosa. De este modo, la capa de moléculas de
de dos ml de albúmina agua no recubre completamente a las molé-
diluida agregue 1 ml de culas proteicas, las cuales tienden a unirse
ácido Tricloroacético al entre sí dando lugar a grandes partículas que
5%. precipitan.

Ninhidrina: A un ml de POSITIVA: da una coloración violeta debi-

albúmina diluida agré- do a la formación de un producto de conden-
guele un ml de solución sación entre el aminoácido y el reactivo.
Ninhidrina. Caliente el
tubo hasta que observe
el primer cambio.

Biuret: A dos ml de al- POSITIVO: es aquel que detecta la presen-

búmina diluida agrégue- cia de proteínas.
le dos ml del reactivo de
Biuret. Observe y repor-
te sus observaciones.

6
 Xantoproteíca: A tres NEGATIVO: No aplica para ser proteína
ml de albúmina sin di- con aminoácidos portadores de grupos aro-
luir, añada cinco gotas máticos según este muestreo.
de NaOH al 40%, hier-
va con cuidado hasta
que observe el primer
cambio.

Ensayo de Azufre: POSITIVO: nos indica que se ha formado

tome dos ml de albúmi- sulfuro de plomo, utilizando el azufre de los
na sin diluir, añada 5 aminoácidos, lo que nos sirve para identificar
gotas de NaOH al 40% proteínas que contienen aminoácidos con
hierva durante dos mi- azufre.
nutos.

6. Conclusiones

• La desnaturalización se ha demostrado en todos los factores en los que puede ocurrir esta interacción proteica, la
cual puede ser determinada por el pH, la temperatura y la concentración del medio.
 DILATACIÓN TERMICA
Claudia Patricia Negrete Varela, Ana María Petro Villalba

• Precipitación y solubilidad de las proteínas, cómo se produce y qué provoca este comportamiento

• Para cada forma del reactivo, la albúmina tiene un comportamiento característico, ya que cada reacción se da de
acuerdo con la composición de la proteína, la cual tiene en cuenta los aminoácidos que la componen.

8
 DILATACIÓN TERMICA
Claudia Patricia Negrete Varela, Ana María Petro Villalba

7 Conclusiones

El informe debe incluir una sección donde se describan las principales conclusiones del estudio presentado, derivado del
análisis de los resultados. Esta sección debe ser clara y precisa y debe tener una extensión adecuada concordante con los re-
sultados del trabajo.
Las conclusiones son la respuesta a los objetivos propuestos y deben ir separadas en ítems. Puede haber más conclusiones
que objetivos pero nunca lo contrario.

8 Referencias.
En esta sección se debe incluir las citas de los libros, artículos o demás trabajos utilizados para la realización del informe.
Para esto, use el anexo a continuación donde se explica con ejemplos el uso de las normas APA para referenciación.

9 Anexos
Imágenes tomadas, textos u otros que considera importante.

10