ESCUELA SUPERIOR POLITÉCNICA DE CHIMBORAZO

FACULTAD DE CIENCIAS
CARRERA DE INGENIERIA AMBIENTAL

GUÍA DE LABORATORIO DE MICROBIOLOGIA

PRÁCTICA No.: 5.
TINCION GRAM

1. DATOS GENERALES:

NOMBRES: CÓDIGOS:

DARWIN JAHIR CHACHA ZURITA 436

GRUPO No.: 1

FECHA DE REALIZACIÓN: FECHA DE ENTREGA:

22/12/2022 05/01/2023
2. OBJETIVO(S):

2.1 GENERAL:
Diagnosticar el área del laboratorio para así poder esterilizar bien los materiales a usar en
la práctica y así poder conseguir diferenciar los diferentes grupos de bacterias que pueden
llegar a existir para así poder estudiarlas y clasificarlas y revelar qué tipo de bacteria es
mediante el microscopio.

2.2 ESPECÍFÍCOS:
 Establecer como se obtiene la tinción GRAM.
 Describir su realización paso a paso con sus respectivos tiempos y su orden para la
obtención de la tinción GRAM.
 Distinguir mediante la práctica que tipo de bacteria se obtuvo (GRAM+ o GRAM-)
como su identificación bacteriana en base a su morfología.

3. METODOLOGÍA
Esterilización de materiales
 Con el papel craft cortamos en 3 partes.
 Envolvemos los 3 bisturís dándole forma de manera correcta para la esterilización.
 Una vez colocado el papel craft colocamos cinta masque para sellarlo de manera
correcta.
 Preparamos el Autoclave a una medida mínima de agua.
 Colocamos los materiales en el equipo lo sellamos y dejamos que avance hasta una
temperatura de 125°C.
 Una vez llegada a esa temperatura lo dejamos 8 min más revisando cada vez su
temperatura.
 Sacamos los materiales con cuidado por el gas caliente que desprende el equipo.
 Damos por finalizado la esterilización de los materiales.
 Tinción GRAM positiva – GRAM negativa
 Colocamos una gota de agua en el porta objetos.
 Con un isopo agarramos un poco de nuestra muestra de cultivo natural con la
bacteria.
 Pasamos el isopo con la muestra por la gota de agua y lo extendemos.
 Fijamos la muestra colocada en el porta objetos y esperar a que se seque.
 Como primera sustancia para la tinción colocamos el cristal violeta por el tiempo
estimado de un 1 minuto.
 Pasado este tiempo lavamos con agua.
 Añadimos ahora lugol sobre la muestra y la dejamos por el lapso de otro minuto.
 Nuevamente volvemos a lavar con agua.
 Ahora añadimos la cetona para la decoloración de la muestra por un tiempo
estimado de 15 a 30 segundos.
 Lavamos con agua.
 Y como ultima sustancia colocamos la safranina por el lapso de 2 min.
 Por ultimo lavamos con agua.
 Pasamos el porta objetos por el mechero de alcohol hasta que se seque la muestra.
 Observamos en el microscopio que tinción GRAM obtuvimos.

4. EQUIPOS Y MATERIALES, REACTIVOS Y SUSTANCIAS:

4.1 EQUIPOS Y MATERIALES:

 Bisturís  Cubre objetos

 Autoclave  Mechero de alcohol
 Papel craft  Chispero
 Cinta masqui  Microscopio
 Porta objetos  Piseta
 4.2 REACTIVOS Y SUSTANCIAS:

 Agua
 Cristal violeta
 Lugol
 Alcohol cetona
 safranina

5. MARCO TEÓRICO:

TINCIÓN GRAM
¿Qué es una tinción de Gram?
La tinción de Gram es una
prueba que detecta bacterias
en el lugar donde se sospecha
una infección, como la
garganta, los pulmones, los
genitales o las lesiones en la
piel. Las tinciones de Gram
también se pueden usar para
detectar bacterias en ciertos fluidos corporales, como la sangre o la orina. (Gutierrez, 2021)
Hay dos categorías principales de infecciones bacterianas, Gram positivas y Gram negativas.
Las categorías se diagnostican según cómo reacciona la bacteria a la tinción de Gram. La
tinción de Gram es de color púrpura. Cuando la tinción se combina con la bacteria en una
muestra, la bacteria puede seguir de color púrpura o volverse rosadas o rojas. Si se
mantienen púrpura, son grampositivas. Si se vuelven rosadas o rojas, son gramnegativas.
Las dos categorías causan tipos diferentes de infecciones:
Las infecciones grampositivas incluyen el Staphylococcus aureus resistente a la meticilina
(SARM), las infecciones por estreptococos y el shock tó[Link] infecciones gramnegativas
incluyen salmonela, neumonía, infecciones del tracto urinario y [Link] si las
bacterias son grampositivas o gramnegativas ayuda a su profesional de la salud a identificar
el tipo de infección y los antibióticos más eficaces. (Gutierrez, 2021)
Nombres alternativos: Coloración de Gram

¿Para qué se usa?

La tinción de Gram se suele usar para saber si usted tiene una infección bacteriana. Si es así,
la prueba muestra si la infección es grampositiva o gramnegativa.
La tinción de Gram también puede usarse para diagnosticar infecctiones por hongos.
(Gutierrez, 2021)
¿Por qué necesito una tinción de Gram?
Usted puede necesitar esta prueba si tiene síntomas de una infección bacteriana. El dolor,
la fiebre y la fatiga son síntomas comunes de muchas infecciones bacterianas. Otros
síntomas dependen del tipo de infección y de la parte del cuerpo afectada. (Gutierrez, 2021)
¿Qué ocurre durante una tinción de Gram?
El profesional de la salud necesita tomar una muestra del lugar donde se sospecha que hay
una infección o de ciertos fluidos corporales. Esto depende del tipo de infección. Los tipos
más comunes de tinción de Gram se enumeran a continuación. (Gutierrez, 2021)
Muestra de una herida:
El profesional de la salud usa un hisopo especial para tomar una muestra del lugar de la
herida.
  Análisis de sangre:
El profesional de la salud toma una muestra de sangre de una vena de un brazo
 Análisis de orina:
Usted entrega una muestra de orina estéril en un recipiente siguiendo las instrucciones de
su profesional de la salud
 Cultivo de garganta:
El profesional de la salud inserta un hisopo especial en la boca para obtener una muestra
de la parte trasera de la garganta y las amígdalas
 Cultivo de esputo: El esputo es la mucosidad espesa que se expulsa de los pulmones
al toser. Es diferente de un escupitajo o de la saliva. (Gutierrez, 2021)
El médico le pedirá que tosa el esputo en una taza especial, o puede usar un hisopo especial
para tomar una muestra de la nariz
¿Debo hacer algo para prepararme para la prueba?
La tinción de Gram no requiere ningún preparativo especial.
¿Tiene algún riesgo esta prueba?
Las pruebas con hisopo, de esputo y de orina no tienen ningún riesgo.
Los riesgos de un análisis de sangre son mínimos. Tal vez sienta un dolor leve o se le forme
un moretón donde se inserta la aguja, pero la mayoría de los síntomas desaparecen
rápidamente. (Gutierrez, 2021)
¿Qué significan los resultados?
Su muestra se colocará en el portaobjetos
de un microscopio y se tratará con la tinción
de Gram. Un profesional del laboratorio
examinará la muestra con un microscopio.
Si no se encuentran bacterias, eso significa
que usted probablemente no tiene una
infección bacteriana o que no había
suficientes bacterias en la muestra.
(Santillana, 2018)
Si se encuentran bacterias, éstas tienen ciertas características que pueden entregar
información importante sobre su infección:
Si la bacteria es de color púrpura, es probable que tenga una infección grampositiva
Si la bacteria es rosada o roja, es probable que tenga una infección gramnegativa
Sus resultados también incluyen información sobre la forma de las bacterias de la muestra.
La mayoría de las bacterias son esféricas ("cocos") o tienen forma de vara ("bacilos"). La
forma también puede indicar cuál es el tipo de infección. (Santillana, 2018)
Aunque los resultados no identifiquen el tipo exacto de bacteria en su muestra, pueden
darle pistas al profesional de la salud sobre la causa de su enfermedad y la mejor forma de
tratarla. Quizás necesite más pruebas, como un cultivo de bacterias para confirmar qué tipo
de infección tiene. (Santillana, 2018)
Los resultados de la tinción de Gram también pueden mostrar si tiene una infección por
hongos y su categoría, si es una candidiasis o una infección por moho. Pero tal vez necesite
más pruebas para saber qué infección fúngica específica tiene.
Si tiene preguntas sobre sus resultados, consulte con su médico o profesional de la salud.
Obtenga más información sobre pruebas médicas, rangos de referencia y cómo entender
los resultados. (Santillana, 2018)
¿Debo saber algo más sobre la tinción de Gram?
Si le diagnostican una infección bacteriana, es probable que le receten antibióticos. Es
importante que tome su medicamento siguiendo las indicaciones del médico, incluso si sus
síntomas son leves. Esto puede evitar que la infección empeore y cause complicaciones
graves. (Santillana, 2018)

 BACTERIA GRAM POSITIVA

En microbiología, se denominan bacterias
Gram positivas a aquellas bacterias que se
tiñen de azul oscuro o violeta por la tinción
de Gram: de aquí el nombre de "Gram-
positivas" o también "grampositivas". Esta
característica está íntimamente ligada a la
estructura de la envoltura celular por lo que refleja un tipo natural de organización
bacteriana. Son uno de los principales grupos de bacterias, las otras son las bacterias Gram
negativas. (Smith, 2019)
La envoltura celular de las bacterias Gram-positivas comprende la membrana
citoplasmática y una pared celular compuesta por una gruesa capa de peptidoglicano, que
rodea a la anterior. La pared celular se une a la membrana citoplasmática mediante
moléculas de ácido lipoteicoico. La capa de peptidoglicano confiere una gran resistencia a
estas bacterias y es la responsable de retener el tinte durante la tinción de Gram. A
diferencia de las Gram-negativas, estas bacterias no presentan una segunda membrana
lipídica externa. (Smith, 2019)
Incluyen especies tanto móviles (vía flagelos) como inmóviles con forma
de bacilo (Bacillus, Clostridium, Corynebacterium, Lactobacillus, Listeria)
o coco (Staphylococcus, Streptococcus); con gruesas paredes celulares o sin ellas
(Mycoplasma). Algunas especies son fotosintéticas, pero la mayoría son heterótrofas.
Muchas de estas bacterias forman endosporas en condiciones desfavorables. Realmente,
no todas las bacterias del grupo son Gram-positivas (no se tiñen por la aplicación de ese
método), pero se incluyen aquí por su similitud molecular con otras bacterias Gram-
positivas. (Smith, 2019)
Estructura
La célula bacteriana está rodeada por
una envoltura que observada al
microscopio electrónico, se presenta
como una capa gruesa y homogénea
denominada pared celular. Entre
la membrana plasmática y la pared
celular se encuentra el periplasma o
espacio periplasmático, luego en sección
(corte) se observa una estructura
semejante a dos líneas paralelas formada
separando una capa menos densa; esto
corresponde a la membrana plasmática.
En el interior de la membrana plasmática
se encuentra el citoplasma que está
constituido por una disolución acuosa, el
citosol, en el cual se
encuentran ribosomas y otros agregados
de macromoléculas, y en el centro se
ubica la zona menos densa llamada nucleoide, que contiene una madeja de hebras difícil de
resolver (distinguir) y cuyo principal componente es el ADN. (Hernández, 2022)
La pared externa de la envoltura celular de una bacteria Gram positiva tiene como base
química fundamental el peptidoglucano, que es un polímero de N-acetil-2-D-glucosamina,
unido en orientación ß-1,4 con N-acetil murámico, a éste se agregan por el grupo lactilo
cuatro o más aminoácidos. Esta molécula se polimeriza gran cantidad de veces, de modo
que se forma una malla especial, llamada sáculo de mureína. Dicho compuesto es de vital
importancia para conservar la forma y darle rigidez a la célula bacteriana (si este compuesto
no existiese, la célula reventaría debido a su gran potencial osmótico). (Hernández, 2022)
Las siguientes características son presentes generalmente en una bacteria Gram-positiva:

 Membrana citoplasmática.
 Capa gruesa de peptidoglicano.
 Ácidos teicoicos y lipoteicoicos, que sirven como agentes quelantes y en ciertos
tipos de adherencia.
 Polisacáridos de la cápsula.
 Si algún flagelo está presente, este contiene dos anillos como soporte en oposición
a los cuatro que existen en bacterias Gram-negativas porque las bacterias Gram-
positivas tienen solamente una capa membranal.

Tanto las bacterias Gram-positivas y las Gram-negativas pueden tener una membrana
llamada capa S. En las bacterias Gram-negativas, la capa S está unida directamente a
la membrana externa. En bacterias Gram-positivas, la capa S está unida a la capa de
péptidoglicano. Es único a las bacterias Gram-positivas la presencia de ácidos teicoicos en
la pared celular. Algunos ácidos teicoicos particulares, los ácidos lipoteicoicos, tienen un
componente lipídico y pueden asistir en el anclaje del péptidoglicano, en tanto el
componente lipídico sea integrado en la membrana. (Hernández, 2022)
Filogenia de las bacterias Gram-positivas

Uno de los filos originales de bacterias Gram-positivas es Firmicutes, que incluye muchos
géneros bien conocidos tales
como Bacillus, Listeria, Staphylococcus, Streptococcus, Enterococcus, y Clostridium.
Este filo se ha expandido con la introducción de los Mollicutes, bacterias similares
a Mycoplasma que pierden las paredes celulares y no pueden ser teñidas por el método de
Gram, pero son derivadas de tales formas. Actinobacteria es el otro grupo principal de las
bacterias Gram-positivas; éstas y los Firmicutes son referidos, respectivamente, como
grupos G+C altos y bajos basándose en el contenido de guanosina y la citosina en su ADN.
Si la segunda membrana (la membrana externa) es una condición derivada, estos dos filos
podrían ser basales entre las bacterias; de lo contrario serían probablemente un grupo
monofilético reciente. También han sido considerados como posibles ancestros de las
arqueas y eucariontes, dado que estos grupos carecen de la segunda membrana y debido a
varias similitudes bioquímicas tales como la presencia de esteroles. (Hernández, 2022)
Las bacterias Deinococcus-Thermus también presentan bandas Gram-positivas, aunque son
similares estructuralmente y se clasifican con las bacterias Gram-negativas. (Hernández,
2022)
 BACTERIA GRAM NEGATIVA
En microbiología, se denominan bacterias Gram
negativas a aquellas bacterias que no se tiñen de
azul oscuro o violeta por la tinción de Gram: de ahí
el nombre de "Gram-negativas" o también
"gramnegativas". Esta característica está
íntimamente ligada a la estructura de la envoltura
celular, por lo que refleja un tipo natural de
organización bacteriana. Son uno de los principales grupos de bacterias, las otras son
las bacterias Gram positivas. (Vazquez, 2018)
Las bacterias Gram-negativas presentan dos membranas lipídicas entre las que se localiza
una fina pared celular de peptidoglicano, mientras que las bacterias Gram-positivas
presentan sólo una membrana lipídica y la pared de peptiglicano es mucho más gruesa. Al
ser la pared fina, no retiene el colorante durante la tinción de Gram. (Vazquez, 2018)
Muchas especies de bacterias Gram-negativas causan enfermedades. Los cocos Gram-
negativos causan la gonorrea (Neisseria gonorrhoeae), meningitis (Neisseria meningitidis) y
síntomas respiratorios (Moraxella catarrhalis), entre otros. Los bacilos Gram-negativos
incluyen un gran número de especies. Algunos de ellos causan principalmente
enfermedades respiratorias (Hemophilus influenzae, Klebsiella pneumoniae , Legionella
pneumophila, Pseudomonas aeruginosa), enfermedades urinarias (Escherichia coli, Proteus
mirabilis, Enterobacter cloacae, Serratia marcescens) y enfermedades gastrointestinales
(Helicobacter pylori, Salmonella enteritidis, Salmonella typhi). Otros están asociadas a
infecciones nosocomiales (Acinetobacter baumanii). (Vazquez, 2018)
Estructura
La envoltura celular de las bacterias Gram-negativas está compuesta por una membrana
citoplasmática (membrana interna), una pared celular delgada de peptidoglicano, que
rodea a la anterior, y una membrana externa que recubre la pared celular de estas bacterias.
Entre la membrana citoplasmática interna y la membrana externa se localiza el espacio
periplásmico relleno de una sustancia denominada periplasma, la cual
contiene enzimas importantes para la nutrición en estas bacterias. (Lugo, 2020)
La membrana externa contiene diversas proteínas, siendo una de ellas las porinas o canales
proteícos que permiten el paso de ciertas sustancias. También presenta unas estructuras
llamadas lipopolisacáridos (LPS), formadas por tres regiones: el polisacárido O (antígeno O),
una estructura polisacárida central (KDO) y el lípido A (endotoxina). (Lugo, 2020)
Las bacterias Gram-negativas
pueden presentar una capa
S que se apoya directamente
sobre la membrana externa, en
lugar de sobre la pared de
peptidoglicano como sucede en
las Gram-positivas. Si presenten
flagelos, estos tienen cuatro
anillos de apoyo en lugar de los
dos de las bacterias Grma-
positivas porque tienen dos
membranas. No
presentan ácidos teicoicos ni
ácidos lipoteicoicos, típicos de
las bacterias Gram-positivas. Las
lipoproteínas se unen al núcleo
de polisacáridos, mientras que
en las bacterias Gram-positivas
estos no presentan
lipoproteínas. La mayoría no forma endosporas (Coxiella burnetti, que produce estructuras
similares a las endosporas, es una notable excepción). (Lugo, 2020)
Patogenia y tratamiento
Muchas especies de
bacterias Gram-negativas
causan enfermedades. Una
de las varias características
únicas de las bacterias
Gram-negativas es la
estructura de la membrana
externa. La parte exterior
de la membrana
comprende un complejo de lipopolisacáridos cuya parte lípida actúa como
una endotoxina y es responsable de la capacidad patógena del microorganismo.[1] Este
componente desencadena una respuesta inmune innata que se caracteriza por la
producción de citocinas y la activación del sistema inmunológico. La inflamación es una
consecuencia común de la producción de citocinas, que también pueden producir toxicidad.
Si la endotoxina entra en el sistema circulatorio, provoca una reacción tóxica con aumento
de la temperatura y de la frecuencia respiratoria y bajada de la presión arterial. Esto puede
dar lugar a un shock endotóxico, que puede ser fatal. (Lugo, 2020)
Esta membrana externa protege a las bacterias de varios antibióticos, colorantes y
detergentes que normalmente dañarían la membrana interna o la pared celular de
peptidoglicano. La membrana externa proporciona estas bacterias resistencia a la lisozima y
a la penicilina. Afortunadamente, se han desarrollado otros tratamientos alternativos para
combatir la membrana externa de protección de estos patógenos, tales como la lisozima
con EDTA, y el antibiótico ampicilina. También pueden usarse otras drogas, a
saber, cloranfenicol, estreptomicina y ácido nalidíxico. (Lugo, 2020)
Filogenia de las bacterias Gram-negativas
Dentro del grupo de las bacterias Gram-negativas podemos distinguir dos
subgrupos: Eobacteria y Glycobacteria que se distinguen por la composición de la
membrana externa. En los primeros, la membrana externa presenta solo simples
 fosfolípidos, mientras que en los segundos además
presenta la inserción de moléculas complejas de
lipopolisacáridos (la estructura típica descrita
anteriormente). Por ello se considera
que Eobacteria son las bacterias más primitivas. Incluye
a Chlorobi (bacterias fotosintéticas anoxigénicas) y a Deinococcus-
Thermus (quimiorganotrofos extremófilos); estos últimos, aunque dan positivo en la tinción
de Gram son estructuralmente similares a las bacterias Gram-negativas. (Lugo, 2020)
El resto de las bacterias Gram-negativas se clasifican en Glycobacteria.
Las proteobacterias son uno de los grupos principales, incluyendo a Escherichia coli,
otras enterobacterias, Pseudomonas, Moraxella, Helicobacter, Stenotrophomonas, Bdello
vibrio, bacterias del ácido acético, Legionella y las proteobacterias alfa como Wolbachia y
muchas otras. Otros grupos notables son las cianobacterias, espiroquetas y las bacterias
verdes del azufre y no del azufre. (Lugo, 2020)
6. PROCEDIMIENTO
Primero empezamos esterilizando nuestros materiales envolviéndolos en el papel craft y
metiéndolos en el autoclave, lo dejamos a 125°C por unos 10 minutos y procedemos a
esterilizar. Empezamos con el proceso de tinción, colocamos una gota de agua en el porta
objetos, con el isopo colocamos en el medio de cultivo natural con la bacteria y este mismo
lo pasamos por la gota de agua homogenizando la muestra en el porta objeto, fijamos
nuestra muestra por el mechero de alcohol y esperamos que quede seca y empezamos
hacer el procedimiento de tinción, colocamos una gota de cristal violeta en la muestra fijada
por el lapso de 1 minuto y lo lavamos con agua, repetimos el proceso con el lugol, echándole
una gota y dejándolo a este por el tiempo de 1 minuto y lo volvemos a lavar con agua, lo
volvemos hacer con la cetona para dar la decoloración, pero este solo tiene que ser por un
tiempo de 15 a 30 segundos porque si nos pasamos se pierde toda la muestra y tendríamos
que volver a repetir todo el proceso la cual lo volvemos a lavar con agua y finalmente
añadimos la Safranina por el tiempo de 2 minutos, dándonos así el resultado final de nuestra
tinción Gram dándonos en este caso una tinción Gram Positiva.
6.1DIAGRAMA DE FLUJO DE LA PRÁCTICA:

INICIO
En el porta objetos
Colocamos el papel craft en cada
bisturís y los sellamos con masqui.

Preparamos el Autoclave y Aplicar

colocamos los materiales. cada
sustanci
a
Colocamos una gota de agua
Tempera
tura de Con una muestra del medio de
125°C cultivo homogenizamos en el agua

Cristal violeta 1 min y lavamos

Materiales esterilizados Lugol 1 min y lavamos

Decoloramos con Alcohol cetona

15 a 30 seg

Tinción
Gram+ y Safranina por 2 min
Gram-

Cristal violeta
Observar en
Lugol el
microscopio

Alcohol Acetona Colonias, cocos, bacilos, etc.

Safranina
FIN
6.2REACCIONES:
Realizamos la respectiva tinción paso a paso viendo cómo reacciona el cristal violeta
el lugol la acetona o la safranina para llegar a tener el resultado de una respectiva
tinción Gram.
6.3 ANALISIS DE RESULTADOS:
Se tiene en cuenta cada sustancia de colorantes que fueron empleados en esta
práctica de tinción Gram donde se puede observar cada grupo bacteriano, así como
su morfología ya que familia de bacteria pertenece.
6.4 OBSERVACIONES:
 Una observación muy importante para mi podría ser como se llega a obtener la
tinción Gram para saber a qué grupo bacteriano pertenece.
 En la práctica se llegó a observar en mi caso la bacteria Gram positiva dándonos así
cocos en una colonia.
7. CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES:
 Con esta práctica ahora sabemos más detalladamente como se puede llegar a
obtener una bacteria como también saber a qué grupo pertenece y si es Gram
positiva o Gram negativa lo cual en mi caso fue una Gram positiva.
 En los diferentes grupos bacterianos que existen se llega a la conclusión de que
un medio de cultivo no solo puedes encontrar un solo grupo sino varios la cual
por medio del microscopio para mi ver esto fue algo único.
 Se recomienda llevar todas las medidas de laboratorio como guantes, mascarilla,
cofias, y mandil de laboratorio para no tener ningún inconveniente al hacer la
práctica.
8. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS:

BIBLIOGRAFÍA

Gutierrez, C. (13 de Marzo de 2021). MedlinePlus. Obtenido de MedlinePlus:

[Link]
Hernández, M. (13 de Febrero de 2022). UNAM. Obtenido de UNAM:
[Link]
/contenido/[Link]
Lugo, D. (05 de Julio de 2020). Microbioenergética. Obtenido de Microbioenergética:
[Link]
positivas
Santillana, F. (09 de Octubre de 2018). Prezi. Obtenido de Prezi:
[Link]
Smith, T. (19 de Mayo de 2019). [Link]. Obtenido de [Link]:
[Link]
Vazquez, A. (23 de Septiembre de 2018). studocu. Obtenido de studocu:
[Link]
bacteria-gram-negativa/3636173

9. ANEXOS

Ilustración 1 Preparación de papel craft Ilustración 2 Preparación de los bisturís

 Ilustración 3 Preparación del Autoclave Ilustración 4 Preparación para la esterilización

Ilustración 5 Identificación de presiones en PSI o BAR Ilustración 6 Temperatura a 125°C

Ilustración 7 identificación de tinción Gram Positiva Ilustración 8 Bacteria, colonia Gram positiva