Objetivos.
Objetivos.
1. Realizar un examen microscópico del semen.
2. Describir las características morfológicas de los espermatozoides humanos
a través de su observación in vivo.
3. Identificar las principales modificaciones estructurales de los
espermatozoides.
4. Clasificar los espermatozoides de acuerdo a la motilidad.
5. Interpretar los resultados obtenidos comparándolos con valores de
referencia.
Antecedentes.
Anatomía del aparato reproductor
masculino.
- Escroto: estructura de sostén de los testículos, está compuesta por piel
laxa y fascia superficial que cuelga de la raíz del pene. Internamente, el
septo divide al escroto en dos sacos, cada uno con su testículo. El tabique
está formado por una fascia superficial y tejido muscular llamado musculo
Dartos. Asociado a cada testículo en el escroto se encuentra el músculo
cremáster.
- Testículos: glándulas ovales de 5 cm de largo y 2.5 cm de diámetro. Cada
uno pesa entre 10-15g. Serosa (túnica vaginal) los cubre parcialmente.
Dentro de esta se encuentra una capsula fibrosa blanca compuesta por
tejido conectivo, la túnica albugínea, la cual se extiende hacia el interior
formando tabiques que dividen al testículo en compartimientos conocidos
como lóbulos.
- Túbulos seminíferos: Cada uno de los 200-300 lóbulos contienen 1-3
túbulos muy enrollados, donde se producen los espermatozoides. Contiene
células espermatogenicas y células de Sertoli.
- Epidídimo: Órgano con forma de coma de unos 4 cm de largo localizado
sobre el borde superior de cada testículo consta principalmente de un
conducto epididimario muy enrollado.
- Conducto deferente: Cerca de la cola del epidídimo, el conducto
epididimario aumenta su diámetro y se vuelve menos enrollado, mide
alrededor de 45cm de largo.
- Conducto eyaculador: mide 2cm de largo y está formado por la unión del
conducto de la vesícula seminal y la ampolla del conducto deferente.
- Uretra: Conducto terminal para el
aparato reproductor y el aparato
urinario. Mide aproximadamente 20
cm de largo, pasa a través de la
próstata, músculos profundos del
periné y el pene.
- Vesículas seminales: Par
de estructuras complejas en forma de
bolsa de unos 5cm de largo, ubicadas
en sentido posterior a la base de la
vejiga urinaria y anterior al recto.
- Próstata: Glándula única de
tamaño similar a una pelota de golf,
se encuentra debajo de la vejiga
urinaria y rodea la uretra prostática.
- Glándula de Cowper: Par
de glándulas de tamaño de un
chícharo. Localizadas debajo de la
uretra membranosa, entre los
músculos profundos del periné y sus conductos se abren dentro de la
uretra.
- Pene: Tiene forma cilíndrica y se divide en cuerpo, glande y raíz. El cuerpo
se compone de 3 masas de tejido fibroso llamados cuerpos eréctiles. Las
dos masas dorsales son los cuerpos cavernosos, la masa vetromedial es el
cuerpo esponjoso. El tejido eréctil tiene su propia túnica albugínea, se
compone de numerosas sinusoides sanguíneos, revestido por células
endoteliales y rodeado por musculo liso. El extremo distal del cuerpo
esponjoso forma una porción levemente agrandada con forma de bellota,
llamada glande.
Características morfológicas del
espermatozoide.
Los espermatozoides constan morfológicamente de tres partes notoriamente
diferenciadas:
♥ Cabeza (1)
♥ Cuello (2)
♥ Cola (3)
3 2 1
La cabeza contiene el núcleo del espermatozoide (haploide) y una estructura
altamente especializada denominada acrosoma. La alta condensación de la
cromatina del núcleo permite disminuir el volumen de la cabeza, lo que facilita el
movimiento del espermatozoide a través de los fluidos, El acromosoma es un
orgánulo secretor que contiene proteasas y enzimas hidrológicas, como la
hialuronidasa, cuya función es la separación de las células del cumulo que rodea
al ovocito mediante la hidrolisis del ácido hialuronico que las mantiene unidas.
También contiene acrosina, que es una enzima hidrolitica que rompe la zona
pelucida del ovocito para que el espermatozoide pueda penetrar en el interior del
ovocito.
La pieza intermedia o cuello está situada entre la cabeza y el flagelo, y en su
interior se encuentran las mitocondrias, a partir de las cuales se obtiene la energía
necesaria para permitir el movimiento de los espermatozoides.
Por último, la estructura flagelar, que tiene una longitud de aproximadamente 50
m, permite el desplazamiento del espermatozoide a lo largo del tracto reproductor
femenino para poder fecundar al ovulo, a una velocidad de aproximadamente 3-
3.5mm/min. Está recubierto por una vaina fibrosa y por la membrana flagelar.
Fisiología del semen.
El semen es una mezcla de espermatozoides formados en los túbulos seminíferos
en los testículos y las secreciones de las vesículas seminales, próstata y glándulas
bulbo uretrales. Este líquido denominado seminal provee a los espermatozoides
de un medio de transporte, nutrientes y protección.
Los testículos contribuyen con una secreción del 10-15% del volumen eyaculado.
La vesícula seminal contribuye con el 40-80% del volumen total. La próstata
aporta entre el 10-30%.
Eyaculación.
La eyaculación se puede dividir en varias fases:
♥ Emisión. Durante esta etapa, los conductos deferentes y las ampollas
deferenciales se contraen para impulsar los espermatozoides desde el
epidídimo en sentido distal hacia la uretra prostática. Donde se va
mezclando con los fluidos de las vesículas seminales, próstata y glándulas
bulbo uretrales. El semen se acumula en la uretra prostática debido a que el
complejo esfinteriano interno y el esfínter estriado externo permanecen
cerrados. Esta fase está regulada por el sistema nervioso simpático
dorsolumbar.
♥ Cámara de alta presión. La uretra prostática se transforma en una cámara
de alta presión cuando permanecen cerrados los dos esfínteres. Al
contraerse el esfínter interno el veru montanum se acerca hacia la luz.
Actúa en forma de tapón y dilata la uretra prostática durante un breve
periodo de tiempo. Gracias, por último, a la rigidez del pene erecto, se
comporta como si de un arma de fuego se tratase. Esta fase es controlada
por los sistemas simpático y parasimpático.
♥ Expulsión. El aumento de presión en la cámara anterior, junto con las
contracciones clónicas de los músculos perineales y el peristaltismo uretral,
condicionan una proyección anterógrada del eyaculado. La salida del
semen no es continua, sino discontinua, rítmica, espasmódica. El primer
chorro, con una velocidad superior a 50km/h, permite alcanzar las zonas
más profundas de la vagina; los siguientes impulsos son de menor
velocidad.
Tras la abertura del esfínter externo, manteniéndose cerrado el interno, y
mediante estas contracciones rítmicas que forman parte del proceso
eyaculatorio, el semen es propulsado hacia la uretra peneana. Forzado por
la presión de la cámara, los pulsos de eyaculado de semen empiezan a
fluir. El semen comienza a expulsarse violentamente desde el pene durante
la primera o segunda contracción del orgasmo.
Esterilidad masculina.
La infertilidad masculina involucra alrededor del 35% al 45% de la casuística total
de la infertilidad. Las causas de la infertilidad masculina pueden ser congénitas
(criptorquidia, hipostasias), infecciosas (parotiditis pospuberal, enfermedades de
transmisión sexual), por patología urológica (prostatitis, litiasis), traumáticas,
consecuencia de cirugía inguinoescrotal, asociadas a enfermedades pulmonares
crónicas, disfunciones sexuales (eréctiles, eyaculatorias), trastornos
inmunológicos, genéticas, por lesiones neurológicas, por factores ambientales, y
tóxicos, tumorales o idiopáticas. Aunque, la mayoría de los casos, se deben a
varicocele, infección de las glándulas sexuales accesorias, falla testicular u
obstrucción, pero en muchos otros se considera de naturaleza idiopática.
♥ Varicocele. La insuficiencia valvular venosa de las venas espermáticas,
manifestada por una dilatación del plexo pampiniforme o varicocele, es una
causa importante de infertilidad que se presenta hasta en el 40% de los
varones infértiles a diferencia de una frecuencia del 15% en la población
fértil. Sin embargo, para que el varicocele pueda ser considerado como una
causa de infertilidad, debe estar relacionado con alteraciones en el análisis
del semen. En base a ello, el varicocele es responsable de alrededor del
20% de los casos de infertilidad masculina en nuestro medio.
Involucra anomalías estructurales de la cabeza del espermatozoide,
oligozoospermia, disminución del volumen testicular, reducción de las
funciones de las células de Leydig, patología epididimaria y presencia de
anticuerpos antiespermatozoides. Estas alteraciones cuantitativas y
cualitativas de los parámetros seminales se relacionan con el aumento de la
temperatura testicular, la hipoxia local, el reflujo de catecolaminas
suprarrenales y el incremento local de productos tóxicos, como los radicales
libres o especies reactivas al oxígeno (radicales libres), todo lo cual afecta
la regulación endocrinológica intratesticular.
♥ Infección de las glándulas accesorias masculinas. Las infecciones del tracto
reproductor masculino son una causa importante de infertilidad masculina.
En general, las infecciones de los testículos, epidídimos, próstata y vías
urinarias, asociadas con pioespermia, contribuyen con alrededor del 5% de
las causas de infertilidad masculina. Estas infecciones pueden producir
atrofia testicular, compromiso de las glándulas accesorias u obstrucciones
de las vías seminales, además de su relación con fenómenos
inmunológicos como consecuencia de la producción de anticuerpos
antiespermatozoides, así como incrementos de los niveles de leucocitos
seminales y radicales libres. Entre los gérmenes implicados con más
frecuencia están: Chlamydia trachomatis, Nisseria gonorrhoeae,
Ureoplasma urealyticum, Escherichia coli, Staphylococcus aureus,
Streptococcus viridans, Enterococcus, Mycobacterium tuberculosis y
orquitis virales, entre otros.
♥ Factor genético. Las causas genéticas involucran a menos del 5% de los
casos, las cuales son más frecuentes cuando el número de
espermatozoides es menor de 10 millones por mL, en los casos de
hipogonadismo hipergonadotrópico o en los hombres mayores de 40 años;
no obstante, se ha observado que las causas genéticas pueden involucrar
aún más casos (alrededor del 24%), cuando los hombres presentan
azoospermia u oligozoospermia severa. La forma más común de trastorno
cromosómico numérico asociado a falla testicular es el síndrome de
Klinefelter, caracterizado por una fórmula cromosómica 47 XXY, hábito
eunuco, retraso mental leve, ginecomastia y azoospermia, por
hipogonadismo hipergonadotrópico. En estos casos, cuando se realiza la
biopsia testicular se observa hialinización de los túbulos seminíferos,
ausencia de espermatogonias e hiperplasia de las células de Leydig.
Sin embargo, desde hace tiempo se conoce la existencia de varones
azoospermicos con cariotipo normal, pero con deleciones en el brazo largo
del cromosoma Y.
♥ Factor inmunológico. Las causas inmunológicas constituyen alrededor del
5% de la casuística. En general, los anticuerpos antiespermatozoides
afectan la fertilidad de algunos individuos, debido a reacciones de
citotoxicidad, aglutinación e inmovilización espermática, o alteración de las
reacciones de capacitación o reacción acrosómica.
♥ Factor endocrino. Los trastornos endocrinos constituyen menos del 5% de
las causas de infertilidad en el hombre; sin embargo, lógicamente ellos
implican mayor relevancia clínica, independientemente de la infertilidad. Por
ejemplo, los casos de hipogonadismo hipogonadotrópico son muy poco
frecuentes, representando alrededor del 1% de la casuística total, pero
involucran otros factores que comprometen la salud del individuo. A su vez,
algunos hombres obesos pueden padecer de infertilidad, al manifestar
niveles séricos reducidos de las hormonas luteinizantes, testosterona (T) y
globulina sexual fijadora de las hormonas sexuales, asociado a un aumento
de la aromatización de la T, que modifica negativamente el radio
T/estradiol. Por su parte, la diabetes mellitus puede provocar disfunción
sexual eréctil por neuropatía autónoma simpática, que está directamente
relacionada con el control y la duración de la enfermedad.
La hiperprolactinemia se manifiesta en el hombre como un hipogonadismo
hipogonadotrópico, debido a que reduce la pulsatilidad de la hormona
hipotalámica liberadora de gonadotropinas (GnRH). Este hecho refleja una
reducción de los niveles de gonadotropinas y andrógenos, lo cual explica
las manifestaciones clínicas que se presentan con mayor frecuencia, como
son la disfunción sexual y la disminución de la libido. En forma crónica,
puede alterarse la espermatogénesis, y presentarse ginecomastia y
galactorrea.
♥ Enfermedades sistémicas. El síndrome de Kartagener se caracteriza,
estructuralmente, por la ausencia de los brazos internos y externos del
axonema y, clínicamente, por infecciones respiratorias recurrentes
(bronquiectasia y sinusitis), dextrocardia y esterilidad. Otras entidades
nosológicas que relacionan la infertilidad con las patologías crónicas del
tracto respiratorio son el síndrome de Young (similar al síndrome de
Kartagener pero sin la afectación cardiaca), y la fibrosis quística, una
enfermedad metabólica con patrón de herencia autosómico recesivo,
común en la raza aria, caracterizada por azoospermia obstructiva debido a
ACCD. Las afecciones renales y otras enfermedades sistémicas pueden
comprometer de manera indirecta la fertilidad.
♥ Displasia de la vaina fibrosa del espermatozoide. Hoy se sabe que la displasia
de la vaina fibrosa del espermatozoide es una rara causa de infertilidad y de
incidencia familiar, que se caracteriza por espermatozoides de baja
motilidad. Por otra parte, cuando se afecta el centríolo del espermatozoide,
el espermatozoide está desalineado, pero sin pérdida de su capacidad
fecundante, aunque no ocurre la singamia y el clivaje.
♥ Alteraciones nerviosas de la eyaculación. La eyaculación retrógrada ocurre
cuando el esfínter urinario interno del cuello vesical presenta fallas al
momento de la eyaculación, permitiendo el paso del semen a la vejiga.
Usualmente, los trastornos eyaculatorios orgánicos se encuentran en
pacientes que toman medicamentos antihipertensivos como los
bloqueadores adrenérgicos o que tienen antecedentes de diabetes,
esclerosis múltiple, mielitis transversa, lesiones neurológicas
postraumáticas de la columna vertebral u operaciones previas como
prostatectomía transuretral, simpatectomía lumbar o disección de nódulos
linfáticos retroperitoneales.
♥ Factor psicológico. La eyaculación precoz, que impide una inseminación
vaginal adecuada, puede tener una causa sistémica por esclerosis múltiple
o prostatitis, pero la más común es la psicológica. También pueden
involucrar causas psicológicas la aneyaculación o ausencia de la
eyaculación, además de la eyaculación retrógrada. Adicionalmente, muchos
hombres presentan reacciones importantes de estrés, desde su inclusión en
una consulta de andrología.
♥ Cáncer testicular. Se ha observado un aumento de la prevalencia del cáncer
testicular en hombres infértiles que se ha asociado a enfermedades
genéticas, exposición a gonadotoxinas y otras causas. Por otra parte, la
infertilidad masculina es también una forma de presentación del cáncer
testicular, que afecta principalmente a los varones jóvenes de 30 a 40 años.
El adenocarcinoma es el cáncer más frecuente, con predominio del
seminoma de acuerdo con la variante histológica. Adicionalmente, después
del tratamiento se pueden presentar diferentes grados de infertilidad como
obstrucciones, desarrollo de anticuerpos antiespermatozoides, ausencia de
eyaculación o eyaculación retrógrada, así como compromiso de las células
germinales como consecuencia del tratamiento con radio o quimioterapia.
♥ Gonadotoxinas. El alcohol tiene un efecto inhibitorio directo sobre la
biosíntesis de T por las células de Leydig y sobre el metabolismo hepático
de los estrógenos; en consecuencia, se producen niveles bajos de T y altos
de estradiol en la circulación, por tanto, el alcohol induce efectos directos
sobre el espermatozoide generando una disminución de su motilidad. El
abuso de otras drogas como la marihuana y la cocaína también
comprometen la fertilidad.
Del mismo modo, los varones expuestos a ciertos solventes presentan
menores concentraciones de LH, mientras los hombres expuestos a ciertos
pesticidas tienen niveles séricos de estradiol elevados, disminución de la
motilidad y del cálculo de los espermatozoides con incremento en las
formas anormales.
Ciertas drogas de la farmacopea también tienen efectos muy negativos
sobre la espermatogénesis; entre ellas destacan la sulfasalazina, la
cimetidina, el ketoconazol y los agentes alquilantes como la ciclofosfamida,
entre otros. Por último, como es ampliamente conocido que las radiaciones
pueden provocar cambios en los cromosomas, no es extraño que se haya
reportado que la radioterapia tiene mayor efecto lesivo sobre las
espermatogonias.
Actividades.
Actividades.
Aspermia.
Aspermia es la ausencia total de
secreción de semen en el hombre,
por lo que se relaciona con
infertilidad. El hombre no es capaz
de expulsar ningún fluido en su
eyaculación. Esta alteración
relacionada con el volumen de
semen puede ser debida a
la eyaculación retrógrada o a la
obstrucción del conducto eyaculador
principalmente.
Azoospermia.
La azoospermia es una alteración espermática caracterizada por la ausencia total de
espermatozoides tras la eyaculación. La
azoospermia es un trastorno que no tiene
síntomas perceptibles para el hombre.
Hematospermia.
La sangre en el semen se denomina hematospermia. Puede
darse en cantidades demasiado pequeñas para ser vistas,
excepto con un microscopio, o puede ser visible en el fluido de
la eyaculación.
Leucospermia.
La leucospermia es la presencia de una
cantidad elevada de leucocitos en una
muestra seminal. La presencia de
leucocitos en la muestra es indicativo de
que existe una infección o inflamación
del tracto urinario o de las vías seminales
y se puede producir una disminución de
la calidad de la muestra seminal debido a
que los leucocitos expulsan especies
reactivas del oxígeno para intentar
eliminar a los patógenos que se encuentren produciendo la infección .
Necrozoospermia.
Necrospermia es el término empleado cuando
más del 42% de los espermatozoides del
eyaculado están muertos. Esta alteración del
semen es una de las principales causas
de infertilidad masculina.
Oligozoospermia.
La oligozoospermia, también denominada oligospermia, es una
causa de infertilidad masculina por factor espermático. En
concreto, la oligospermia hace referencia a la cantidad de
espermatozoides en el eyaculado, que se encuentra en menor
número si lo comparamos con el eyaculado de varones
considerados fértiles.
El grado de oligospermia puede ser leve, moderado o severo,
en función del número de espermatozoides presentes en el
eyaculado.
Teratozoospermia.
La teratozoospermia es una alteración que
afecta al semen del varón en la que la
mayoría de los espermatozoides tienen forma
anormal.
Debido a su mala morfología, los
espermatozoides no pueden fecundar el óvulo
y causan esterilidad.
Astenozoospermia.
La astenozoospermia o astenospermia es
una alteración en los parámetros del
semen que hace referencia a problemas
de movilidad en los espermatozoides.
Cuando los espermatozoides tienen
problemas de movilidad, coloquialmente
se conoce como espermatozoides vagos o
lentos.
Cámara de Neubauer.
La cámara de recuento es un dispositivo hecho de vidrio óptico especial que es
usado para contar células o partículas en suspensiones bajo el microscopio como
por ejemplo: leucocitos, eritrocitos, trombocitos, bacterias, espermatozoides y
esporas de hongo.
Es parecido a un grueso portaobjetos de cristal,
dividido en 3 secciones, mide 3mm de alto por
A 3mm de ancho por 0.1mm de profundidad.
A
El cuadrante a utilizar dependerá de la cantidad y
tipo de célula y tipo de célula a contar, de manera
B rutinaria se cuentan en los cuadrantes A a los
glóbulos blancos y en los B a los glóbulos rojos,
plaquetas y espermatozoides.
Pipeta de Thoma.
Las pipetas de Thoma son pipetas constituidas por una porción y puntiaguda
seguida por una cámara o ampolleta de mezclado y una boquilla donde se aprecia
una marca numérica que nos indica el número de volúmenes totales.
La parte del tallo marcado con dos, o en algunas ocasiones hasta 10, esas marcas
utilizadas para medir la muestra y el diluyente. La cámara de mezclado, aquí la
muestra junto al diluyente se combinan perfectamente gracias a una perla, que
además de ayudar al mezclado identifica la pipeta, roja para eritrocitos y blanca
para leucocitos, esta zona tiene 100 o 10 veces el volumen del tallo, cuentan con
una marca que indica el número de volúmenes totales de la pipeta, siendo 11
para leucocitos y 101 para eritrocitos.
Llenado de la pipeta de Thoma.
1. Tomar la pipeta de Thoma con la boca e introducirla a la muestra.
2. Sujetando con los dientes y labios, succionar lentamente hasta la marca 0.5
de la pipeta.
3. Sacar la pipeta de la muestra y limpiar la parte externa con algodón rápido,
desde el bulbo hacia la punta.
4. Colocar la boquilla de nuevo en la boca y tapar el orificio con la lengua,
introducir la punta de la pipeta en el diluyente adecuado y aspirar hasta la
marca superior (11 o 101).
5. Sacar la pipeta del diluyente y colocar de manera horizontal, quitar la
boquilla.
6. Mezclar con movimientos circulares en posición horizontal por 10min.
Llenado de la cámara.
1. Los soportes exteriores se humedecen con agua destilada utilizando un
hisopo de algodón, luego se coloca el cubreobjetos en el borde de la
cámara sobre los soportes y se desliza hacia el otro extremo.
2. La creación de líneas de interferencia entre los soportes exteriores y el
cubreobjetos indica que el cubreobjetos está colocando correctamente.
3. Llenar la pipeta de Thoma con la muestra y el diluyente y mezclar.
4. Desechar las primeras 3 a cuatro gotas de la pipeta sobre una gasa o
algodón.
5. Tapar la pipeta con el dedo para evitar que se tire la muestra.
6. Colocar la pipeta en el borde del cubreobjetos y la cámara teniendo cuidado
de no mover el cubreobjetos.
7. Liberar la presión del dedo para permitir el paso de aire y así fluya la
muestra.
8. Cuando veamos que la gota o gotas se distribuyen uniformemente sin
derramarse a los lados, volvemos a evitar el flujo de aire con el dedo y
retiramos la pipeta.
9. Colocar la pipeta de manera horizontal en algún lugar donde no se ruede y
se rompa, no lavarla hasta haber terminado el recuento.
Recuento.
1. Una vez cargada la cámara localizar la cuadricula desde 10x ubicar el
cuadrante correspondiente.
2. Posicionarse en el 1er cuadro superior izquierdo.
3. Iniciar el conteo de izquierda a derecha y de arriba abajo.
4. Las células a contar serán todas las que se encuentran en el interior del
conjunto de cuadros rodeadas por la línea gruesa o tres líneas, las células
que se encuentren sobe las líneas gruesas solo se contaran las que estén
sobre el límite superior y el izquierdo.
5. Una vez contabilizando las células se aplica la siguiente fórmula para
calcular la concentración de células por mm3:
Realización de frotis sanguíneo.
De material se utiliza un portaobjetos de vidrio para microscopia de alta calidad, de
75x25mm con bordes biselados y sangre coagulada con EDTA.
Método.
1. En el extremo del portaobjetos limpio y seco, con una pipeta Pasteur
colocar una gota de sangre anticoagulada de aproximadamente 3mm de
diámetro.
2. Otro portaobjetos limpio y seco se coloca en un ángulo de 35-45, delante
de la gota de sangre del portaobjetos de
soporte.
3. El portaobjetos extensor se desliza hasta
tener contacto con la gota de sangre y se
sostiene en esa posición hasta que la sangre
se esparza en todo lo ancho del portaobjetos.
4. El portaobjetos extensor se desliza con
rapidez y suavidad hacia el otro extremo del
portaobjetos de soporte.
Tinción de Giemsa.
1. Fijar durante 3 min con metanol los frotis secos. Quitar el exceso de
metanol sin enjuagar.
2. Colocar colorante de Giemsa diluido sobre el frotis hasta cubrirlo en su
totalidad y dejar teñir de 7-10min.
3. Enjuagar el frotis con agua destilada y dejarlo secar al aire en posición
vertical.
4. Observar al microscopio óptico con 10x para verificar la calidad del frotis.
Tinción de Wright.
1. Cubrir el frotis con colorante de Wright durante 2 min.
2. Sobre el frotis con colorante, añadir agua destilada sin que se derrame y
dejar teñir durante 4-5min hasta que aparezca una capa metálica.
3. Enjuagar el frotis con agua destilada y dejarlo secar en posición vertical.
4. Observar al microscopio con objetivo 10x para verificar la calidad del frotis.
Referencias.
♥ Teppa-Garrán AD, Palacios-Torres A. Evaluación actual de la infertilidad
masculina. Invest Clin [Internet]. 2004 [citado el 4 de septiembre de
2022];45(4):355–70. Disponible en: http://ve.scielo.org/scielo.php?
script=sci_arttext&pid=S0535-51332004000400008
♥ Gómez MB, Jordán JMS, Rodrigo A, Cayetano SR, Reus R. ¿Qué es la
azoospermia? - Causas, diagnóstico y tratamiento [Internet]. Reproducción
Asistida ORG. 2021 [citado el 4 de septiembre de 2022]. Disponible en:
https://www.reproduccionasistida.org/azoospermia/
♥ Juan A. CN. Tratado de Andrologia y Medicina Sexual. Editorial Medica
Pnamericana; 2012.
♥ Dohle G. Guia clinica sobre la infertilidad masculina. Europan Association of
Urology; 2010.
♥ Carrel D. The Genetics of Male Infertility. Totowa, NJ, Estados Unidos de
América: Humana Press; 2007.
♥ Kruger T. Male infertility: Diagnosis and treatment. Informa UK Led; 2007.
♥ Lippert H. Anatomia con orientacion clinica. La Villa y Corte de Madrid,
España: Marban Libros; 2005.
