Separación DE PARTICULAS
CENTRIFUGACIÓN
PRINCIPIOS
TIPOS DE CENTRIFUGA Y ROTORES
USOS Y CUIDADOS
LIC. VALERIANO ROSALES
ANDRADE
SEPARACIÓN DE PARTICULAS
DOS TIPOS DE PROCESO:
¿FILTRACIÓN ?
¿CENTRIFUGACIÓN?
¿Qué es la separación de partículas?
Es proceso de separación de partículas sólidas de un líquido utilizando
un material poroso llamado filtro. La técnica consiste en verter la
mezcla sólido-líquido que se quiere tratar sobre un filtro que permita el
paso del líquido pero que retenga las partículas sólidas.
Filtración
DEFINICIÓN: El procedimiento de filtración consiste en
retener partículas sólidas por medio de una barrera, la
cual puede consistir de mallas, fibras, material poroso
o un relleno sólido.
FILTRACIÓN
Centrifugación
Muchas partículas o células en suspensión líquida después de un tiempo
se instalarán en el fondo de un contenedor debido a la gravedad. Sin
embargo, la cantidad de tiempo necesaria para tales separaciones no
resulta práctica.
Otras partículas extremadamente pequeñas no podrán separarse en la
solución a menos que se las someta a una gran fuerza centrífuga.
Cuando una suspensión rota a determinada velocidad o revoluciones por
minuto (RPM), la fuerza centrífuga hace que las partículas se alejen del
eje de rotación en forma radial.
La fuerza ejercida sobre las partículas (en comparación con la gravedad)
se llama Fuerza Centrífuga Relativa (FCR).
CENTRIFUGACIÓN
Es una técnica de sedimentación, acelerada gracias al uso de fuerza centrífuga.
Se aplica al análisis o a la separación de mezclas de partículas, células, orgánulos
o moléculas.
Según la velocidad:
Centrifugación a baja velocidad
menos de 10.000 rpm
Centrifugación a alta velocidad
entre 10.000 y 20.000 rpm
Ultra centrifugación más de
20.000 rpm
ROTORES
Dos tipos:
2. Rotor basculante.
bien separadas.
1. ROTOR ANGULAR O DE ÁNGULO
FIJO: utilizan para la
Aplicación: separación
sedimentación con fuerzas donde de moléculas de ácido
se obtienen sólo 2 fracciones: nucleico, purificación de ácidos
sedimento y sobrenadante nucleicos, etc.
CENTRÍFUGA MICRO HEMATOCRITO
PARTES DE UNA INCUBADIRA O ESTUFA
1.Interruptor . 4.Resistencias calefactoras.
2.Control de 5. Cámara.
Temperatura
3.Termómetro 6. Chasis.
7. Puerta
No usar en la estufa materiales o sustancias que sean
inflamables o explosivas.
Evitar derrames interiores de soluciones acidas o que
formen vapores corrosivos.
Utilizar elementos de protección personal (guantes de
cuero aislados, anteojos de seguridad y pinzas etc.
PARTES DEL BAÑO MARÍA:
Introducción
Una centrífuga es una máquina que pone en rotación una muestra para
separar por fuerza centrífuga sus componentes o fases (generalmente
una sólida y una líquida, aunque también pueden separarse líquidos con
diferentes densidades).
Existen diversos tipos de estos, comúnmente para objetivos específicos.
Algunos de ellos son: Acelerar el proceso de sedimentación, dividiendo el
plasma y el suero en un proceso de análisis de laboratorio.
ANTECEDENTES
En 1848 se creó la primera máquina centrífuga para la depuración de
caña de azúcar atribuida a Shotter y Dubrunfaut, pero la patente fue
concedida a David Weston, en 1852.
La máquina fue llamada, separador centrifugador, y fue construido en la
plantación Lihue, en Honolulu, Hawái.
La máquina ahorraba mucho del tiempo en los procesos de separación.
El resultado fue una azúcar con una gran calidad
Hawái
Estado de los
Estados Unidos
DEFINICIÓN
La palabra centrífuga se originó en el griego “kentron” en el sentido
de “aguijón”.
Los griegos cuando medían los terrenos, clavaban un “kentron” o
estaca en la tierra y a él le ataban una cuerda con la que hacían
círculos. El latín tomó el vocablo griego “kentron” como “centrum”
= “centro” a lo que para formar centrífuga se le añadió el verbo
“fugare” que significa “fugar” o “huir”.
Es por ello que centrífuga es la denominación que se le da a
aquella fuerza que se aleja de un punto.
PARTES DE LA CENTRIFUGA
TIPOS DE CENTRIFUGAS
Los aparatos en los que se lleva a cabo la centrifugación son
las centrifugadoras. Contienen dos componentes esenciales:
Motor y un Rotor.
•Existen dos tipos de rotores:
Fijos. Los tubos se alojan con un ángulo fijo con respecto al eje
de giro. Se usan para volúmenes grandes.
Basculantes. Los tubos se hallan dentro de carcasas colgantes,
unidas al rotor con un eje. Se mueven cuando el mecanismo
centrifugador gira. Se usan para volúmenes pequeños y para
separar partículas de coeficiente de sedimentación igual o casi
igual. El mecanismo centrifugador está colocado en el interior
de una cámara acorazada, a unos 4ºC. Si no existiera esta
cámara, al comenzar la centrifugación, debido al rozamiento
con el aire, se incrementaría la temperatura de la muestra y
podría desnaturalizarse.
•Existen dos grandes grupos de centrifugadoras:
Analíticas. Posibilitan obtención de datos moleculares: masa molecular,
coeficiente de sedimentación. Son muy caras y escasas.
Preparativas. Con ellas se aíslan y purifican las muestras.
Hay de cuatro tipos:
De mesa. Alcanzan unas 5 000 revoluciones por minuto (rpm). Se
produce una sedimentación rápida. Con las micro centrifugadoras, que
llegan a 12 000–15 000 rpm, se obtiene el precipitado en menos tiempo.
De alta capacidad. Se utilizan para centrifugar volúmenes de cuatro a
seis litros. Alcanzan hasta 6 000 rpm. Son del tamaño de una lavadora y
están refrigeradas.
De alta velocidad. Son del mismo tamaño que las de alta capacidad y
llegan a 25 000 rpm.
Ultracentrifugadoras. Pueden alcanzar hasta 100 000 rpm. También
están refrigeradas. Son capaces de obtener virus.
Micro centrifugadora es una máquina centrífuga especializada
utilizada en el laboratorio clínico. Ésta pone en rotación una muestra
más pequeña para separar por fuerza rotatoria sus componentes o
fases (generalmente una sólida y una líquida), en función de su
densidad. Esta es de uso para los tubos capilares.
Paquete globular. Plasma fresco Centrifugar 3.500 rpm
Temperatura =20 a 24 Tiempo 5’
El Bafficoat. Concentrado de plaquetas Centrifugar 1000 rpm,
Temperatura 20 a 24 ° c Tiempo 4’
PROGRAMAS PARA CENTRIFUGACIÓN DE UNIDADES DE
SANGRE
FASE DE
PROG TIEMP PARAME
METODOLOGIA CENTRIFUGACIÓ OBJETIVO R.P.M. Tº
. O TROS
N
PLASMA RICO EN
PLAQUETAS- ACEL. RAPID
PRP PRIMERA 1 2100 7 20
PAQUETE DESACEL. LEN
GLOBULAR
PLASMA FRESCO
CONGELADO-
ACEL. RAPID
PRP SEGUNDA CONCENTR. 2 3500 5 20
DESACEL. RAPID
PLAQUETAS
BUFFY COAT
ACELERACION
(BOLSA PLASMA / BUFFY
8
CUADRUPLE CON PRIMERA COAT / 3 3800 9 min 20
DESACELERACIO
CPD/OPTISOL) PAQ. GLOB.
N 1
TOP&TOP
ÁREAS DONDE SE USA LA CENTRIFUGA
La centrifuga se usa en las siguientes
áreas:
Bioquímica
Banco de Sangre
Hematología
Uro análisis
CUIDADO DE LA CENTRIFUGA
Durante el proceso de trabajo con las
centrifugas se recomienda personal altamente
capacitado, con el fin de preservar la integridad
de la muestra.
Antes de comenzar a trabajar, además de cargar la
centrifuga y cerrarla, hay que asegurarse que esté bien
cerrada y posteriormente regular la velocidad de
encendido, así como el tiempo en el que va a trabajar.
MANTENIMIENTO Y RECOMENDACIONES
Rotores:
1.Registrar la fecha de compra de cada uno de los rotores,
incluyendo información relacionada con el número de serie
y modelo.
2. Leer y entender los manuales de los rotores equipo y
tubos, antes de que los mismos sean utilizados. Cumplir
con las indicaciones de uso y cuidado que especifica el
fabricante.
3. Utilizar los rotores únicamente en las centrífugas para las
cuales han sido fabricados. No intercambiar rotores sin
verificar la compatibilidad con la centrífuga en la cual se
instalo.
MANTENIMIENTO Y RECOMENDACIONES
4.Utilizar las recomendaciones de velocidad máxima y densidad de las
muestras que recomienda el fabricante. Cada rotor está diseñado para
soportar un máximo nivel de esfuerzo
6. Acatar las recomendaciones relativas a reducir la velocidad de
operación cuando se trabaja con soluciones de alta densidad, con
tubos de acero inoxidable o adaptadores plásticos.
7. Utilizar rotores de titanio si se trabaja con soluciones salinas
frecuentemente.
8. Proteger el recubrimiento de los rotores para evitar que se deteriore
el metal base. No utilizar detergentes alcalinos o soluciones
limpiadoras que pudieran remover la película protectora.
TUBOS
1. Lavar los tubos, adaptadores y demás accesorios a mano, utilizando
un detergente suave, diluido en una relación de 1:10 en agua y un
cepillo de textura suave –no metálico–. Evitar usar lavaplatos
automáticos.
2. Evitar el uso de alcohol y acetona, pues dichos materiales afectan la
estructura de los tubos. Los fabricantes recomiendan el tipo de solvente
que debe utilizarse con cada tipo de material con que se fabrican los
tubos de centrifugación.
3. Evitar secar los tubos en un horno de secado. Secar siempre con un
chorro de aire seco.
TUBOS
5. Para esterilizar, previamente es necesario verificar el tipo de material del tubo, pues
no todos soportan la esterilización por calor. La cristalería se esteriliza normalmente
con vapor a 121 °C durante 30 minutos.
6. Almacenar los tubos y las botellas en un lugar seco, oscuro y fresco, alejado de
fuentes de vapores químicos o fuentes de radiación ultravioleta.
7. Verificar los niveles de llenado y el selle en los tubos de pared delgada, para evitar
su colapso dentro del rotor por acción de la fuerza centrífuga. Cumplir las
recomendaciones de los fabricantes.
CONCLUSIÓN
Una centrifuga es una máquina que pone en rotación una muestra
para separar por fuerza centrífuga sus componentes o fases
(generalmente una sólida y una liquida), en función de densidad.
Centrifugas modernas disponen de dispositivos para detectar el
equilibrio del eje del rotor, por tanto, al ser otro elemento de
seguridad, será bueno disponer, si es posible, de este tipo de
centrifugas.
Los tubos utilizados pueden romperse la rotura es más probable que
ocurra si las instrucciones del fabricante no son seguidas, tales como
el uso de tubos de tamaño no correcto y la no utilización de
amortiguadores.
GRACIAS POR SU ATENCIÓN
