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PROCESO GESTION DE APOYO A LA ACADEMIA FECHA: 02/09/2016
FORMATO GUÍA PARA PRÁCTICAS DE LABORATORIO VIGENCIA: 2016
LABORATORIO DE MICROBIOLOGIA
UNIDAD
ACADEMICA: PROGRAMA DE ENFERMERIA
CURSO: MICROBIOLOGIA Y PARASITOLOGIA
OTROS MICROORGANISMOS DE IMPORTANCIA CLINICA -
PRACTICA Nº 7: PRUEBAS SEROLÓGICAS
1. OBJETIVOS
• Definir conceptos fundamentales para comprender la acción entre un antígeno y un
anticuerpo.
• Comprender las reacciones de aglutinación in-vitro entre un antígeno anticuerpo.
•
Establecer las diferencias básicas entre una reacción de hemaglutinación y una
reacción de aglutinación.
2. CONSULTA PREVIA
• Consulte las venas y arterias adecuadas para la extracción de muestras sanguíneas
• Describa paso a paso como se realiza una extracción de sangre con el sistema al vacio
o vacutainer.
• ¿Qué es una reacción de aglutinación directa e indirecta?
• ¿Qué es el grupo sanguíneo y el factor Rh?
• ¿Cuál es la diferencia entre las pruebas treponémicas y no treponémicas?
• Describa el fundamento de las pruebas de IFI, RIA, ELISA, WESTERN BLOT
3. FUNDAMENTO TEORICO
Conceptos fundamentales.
Antígeno: es toda molécula, sustancia o agente patógeno que desencadena la formación de
anticuerpos y puede causar una respuesta inmunitaria
Anticuerpos (también conocidos como inmunoglobulinas, son glicoproteínas del
tipo gamma globulina.
Afinidad: es la fuerza de unión del antígeno con el anticuerpo, interviene la flexibilidad de la
molécula del anticuerpo para reaccionar con el antígeno. Está influenciada por factores como
la temperatura y las condiciones del solvente.
Especificidad: es la complementariedad entre el antígeno y el anticuerpo; el antígeno puede
unirse a uno o varios anticuerpos dependiendo del número de determinantes que posea.
Valencia: sitios del anticuerpo capaces de unirse con el antígeno, depende del número de
monómeros que presente el anticuerpo: monómero (IgG), posee dos valencias, el pentomero
(IgM), posee diez valencias.
Avidez: fuerza de unión del antígeno con el anticuerpo (suma de afinidades), interviene la
velocidad de la unión y el número de determinantes antigénicos.
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Sensibilidad: es la capacidad de detectar mínimas cantidades de antígeno o anticuerpo
según se desee; a menor cantidad detectada, mayor sensibilidad.
Tipos de reacción inmunológica.
Según su complejidad las reacciones inmunológicas se pueden clasificar como:
• 1ª generación: pruebas de menor sensibilidad y de rápida realización, en este grupo se
encuentran: las pruebas de aglutinación (PCR, RA test, ASO), inhibición de la aglutinación
(p.ej. gravindex), hemaglutinación (p.ej. Hemoclasificación) y floculación (p.ej. Venereal
Disease Research Laboratory - VDRL).
• 2ª generación: pruebas de mayor sensibilidad y especificidad, tales como: precipitación única
y doble (Fluorescent treponemal antibody absorption FTA-ABS).
• 3ª generación: pruebas de alta sensibilidad y especificidad: IFI, ELISA, WESTERN BLOT, RIA.
4. EQUIPOS, MATERIALES Y REACTIVOS
Equipos Materiales Sustancias y/o Reactivos
Un tubo al vacío rojo o tubo reactivos de inmunología
lila, lanceta (por alumno), para pruebas de RA- test,
Gasa, ASO, PCR y
Centrifuga Algodón Hemo clasificadores
Laminas sanguíneos.
Palillos Hipoclorito de sodio,
Alcohol al 70%
5. PROCEDIMIENTO O METODOLOGÍA
◦ Realizar un procedimiento de venopunción en tubo tapa roja, y realizar las pruebas;
centrifugar la muestra para obtener suero. No olvide marcar los tubos.
◦ Para la realización de las pruebas de PCR, RA TEST Y ASO, siga las indicaciones
dadas por la docente durante la clase y de acuerdo con los reactivos disponibles.
◦ PUNCION CAPILAR:
▪ Una vez localizado el sitio de punción (yema del dedo ver imagen Nº1), dar un
ligero masaje en el área, para concentrar la sangre.
▪ Limpiar el sitio con alcohol etílico al 70%.
▪ Con una mano sostenga el dedo o área a puncionar y con la otra sostenga la
lanceta.
▪ Haga una punción con la lanceta, realizando un movimiento rápido, firme y
profundo.
▪ Después de puncionar, descartar la primera gota de sangre, que contiene
liquido tisular, limpiando la zona con el algodón seco.
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▪ Presione el dedo para hacer salir la sangre procurando sea de manera
ininterrumpida y colocar tres gotas en una lámina portaobjeto.
▪ Coloque el algodón sobre el sitio puncionado haciendo presión para parar el
sangrado.
Imagen Nº1 Imagen Nº2. Reacción de
Hemoclasificación directa.
6. RESULTADOS
• Luego de observar las pruebas realizadas en clase, identifique su importancia
en el diagnóstico clínico.
• Realice un cuadro donde relacione 5 enfermedades causadas por bacterias,
hongos o parásitos que se diagnostiquen con pruebas serológicas y describa el
paso a paso de su técnica de diagnóstico con su correspondiente
interpretación.
• Desarrolle el informe en el cuaderno de forma individual.
7. BIBLIOGRAFIA
• Jawetz, Melnick y Adelberg. Microbiologia medica. Ed. Mc Graw Hill. 25 ed. 2010.
• Florentino, Susana. La inmunología en el diagnóstico clínico.
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