Antony Píriz - G43 Fmed

BCM 
Bioquímica 

 
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Enzimas
Las células tienen una vida muy activa la cual está sustentada por una enorme cantidad de
reacciones químicas.

En esta imagen se representan algunas de las múltiples actividades celulares.

❖ Una de ellas es el movimiento de solutos y agua a través de su membrana, que como se
esquematiza en la imagen, utiliza diversos mecanismos moleculares y celulares
➢ Los transportadores de membrana y distintos mecanismos de endocitosis

La célula debe ​movilizarse​, ​dividirse ​y r​ ealizar múltiples tareas de mantenimiento​, conocidas

como tareas de ​“mantenimiento doméstico”​, las cuales son aquellas que permiten el
mantenimiento básico de las funciones celulares, algunas de estas tareas son la producción de
energía, la reposición de proteínas dañadas y la reparación del ADN.
❖ Para realizar estas actividades, la célula debió evolucionar una maquinaria química que le
permitiera aumentar enormemente la velocidad de las reacciones químicas con respecto a
las reacciones que ocurren fuera de los organismos vivos
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Enzimas - Catalizadores biológicos

❖ Provocan una aceleración de la velocidad de reacción
❖ No modifican los productos de reacción con respecto a la reacción no catalizada
❖ No se consumen durante la reacción
❖ No modifican el equilibrio de la reacción
❖ Son eficaces a muy bajas concentraciones
❖ Si la reacción es reversible, catalizan la reacción en ambos sentidos

Características de las enzimas (distintivas de los catalizadores)

❖ La enorme mayoría son proteínas
❖ Son altamente específicas para la reacción
❖ Son inhibibles en forma competitiva
❖ Son regulables
❖ Cada molécula de enzima puede procesar la transformación de miles a millones de
moléculas por segundo, esto se cuantifica mediante el número de recambio

Número de recambio
Número máximo de moléculas de sustrato que una enzima puede transformar en producto por unidad
de tiempo

En esta imagen se muestra el número de recambio de diferentes enzimas

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Incremento de la velocidad de reacción

La gran magnitud de los números de recambio, son los que permiten el incremento en la velocidad de
reacción que provocan las enzimas.

Nomenclatura
❖ Las enzimas se denominan haciendo referencia al tipo de reacción que catalizan
(frecuentemente)
❖ Seguidas del sufijo ​-asa
➢ Por lo tanto, las que catalizan la hidrólisis del enlace peptídico se denominan
peptid​asas
➢ Las que hidrolizan los ésteres de fosfato, se denominan fosfat​asas
➢ Las que intervienen en la síntesis de biomoléculas, se denominan sintet​asas
En forma particular, a las enzimas que catalizan reacciones específicas se las suele llamar haciendo
mención a la reacción que catalizan. Por ejemplo,​ la enzima que cataliza la deshidrogenación del
lactato, se denomina ​lactato deshidrogenasa​, etc
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Mecanismo de acción
Unión al sustrato
Para ejercer su efecto catalítico, las enzimas deben unirse al sustrato

Consideremos un ejemplo simple.

De una reacción donde el sustrato es escindido en forma irreversible en dos productos diferentes

❖ La enzima presenta una estructura, que en general presenta una hendidura en la

superficie de la estructura proteica, que recibe el nombre de bolsillo, que realiza
interacciones con el sustrato, esta región se denomina ​sitio activo​.
➢ Se divide en dos regiones:
■ Sitio de unión: ​Establece interacciones débiles con el sustrato y
contribuye a la aproximación de los grupos químicos que se verán
afectados por la reacción con el sitio catalítico
■ Sitio catalítico:​ Tiene lugar la catálisis
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Sitio de unión
En esta imagen, se observan algunos de lso tipos de interacciones con el sustrato, que pueden tener
lugar en este sitio.
❖ En color se observan las cadenas laterales de los aminoácidos que participan de la unión con
el sustrato.
➢ Para este sustrato, la enzima establece numerosos puentes de hidrógeno y un
enlace iónico
➢ Cuando el sustrato es hidrofóbico, también tiene lugar interacciones hidrofóbicas
❖ Las interacciones con el sitio de unión, posicionan adecuadamente al sustrato y esto
contribuye al incremento tan enorme de la velocidad de reacción que provocan las enzimas

En la siguiente imagen se muestra el bolsillo del sitio activo de una enzima, mediante un diagrama
de cinta de la misma.
❖ La estructura secundaria de la enzima y la superficie del sitio activo, está constituida por
hélices alfa y hojas beta
❖ El sustrato en azul, se dispone en el centro de la hendidura
❖ En turquesa, se indican los grupos R de los aminoácidos que establecen las interacciones
con el sustrato
❖ La ubicación precisa de los grupos R de lso aminoácidos en el espacio para establecer
interacciones con diferentes ligandos, con el sustrato para el caso de las enzimas, es la
principal razón del tamaño y complejidad estructural de las proteínas
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Sitio activo
En la siguiente imagen de contorno de superficie de una enzima, puede apreciarse el bolsillo del sitio
activo.

Modelo de llave-cerradura
Emil Fischer-1890 (Premio nobel)
De acuerdo a este modelo, la enzima tiene un sitio de estructura complementaria a la del sustrato,
esto le permite al sustrato unirse a la enzima como si fuera una llave en su cerradura.
❖ Otra llave no logra abrir la cerradura
❖ La enzima se une al sustrato y forma un complejo enzima sustrato

Modelo de ajuste inducido

Daniel Koshland, Jr-1958
En este modelo, la conformación del sitio activo de una enzima no es exactamente complementario al
sustrato, sino que cuando se contacta con el sustrato, cambia la conformación y estructura
apropiadas del sitio activo, para formar el complejo enzima sustrato apropiado para realizar la
catálisis.
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Hexoquinasa
En esta imagen se ve la representación a escala de la enzima y su sustrato, antes de formar el
complejo. Se puede ver el gran bolsillo del sitio activo, mucho más grande que el espacio que ocupa
el sustrato.
En la segunda imagen se ve el cambio conformacional que sufre el bolsillo luego de la interacción
con el sustrato.

Pérdida de la función catalítica

La actividad catalítica de las enzimas, depende de la ubicación precisa en el espacio de los grupos
químicos que interactúan con el sustrato, por lo tanto los factores que provoque una
desnaturalización de la enzima, es decir, la pérdida de sus estructuras superiores, determinarán una
pérdida de la actividad enzimática.
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Mecanismo de acción
Catálisis
Los mecanismos catalíticos utilizados por las enzimas son diversos
❖ Catálisis ácido-base
➢ En este tipo de catálisis ocurre una transferencia de protones o iones hidroxilo que
provienen ya sea del medio acuoso que rodea la enzima, o de los grupos funcionales
de la propia enzima
❖ Catálisis por iones metálicos
➢ Estos iones pueden formar parte de grupos prostéticos o de cofactores de la
enzima.. o también asociarse débilmente a la enzima
❖ Catálisis covalente
❖ Efectos por proximidad
❖ Efectos por orientación
❖ Catálisis por unión preferencial al estado de transición

Catálisis covalente
Si bien por definición de catalizador, las enzimas no quedan modificadas al final de la reacción, es
frecuente que pasen por estados intermedios en el cual la enzima se modifica por su reacción con el
sustrato.
❖ En un estado intermedio, se forma un enlace covalente con el sustrato, ocurre la catálisis,
uno de los productos se libera y el otro permanece en la enzima unido en forma covalente,
luego se rompe el enlace covalente y se libera el segundo producto
❖ Al final de la reacción la enzima vuelve a sus estado inicial
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Cofactores de enzimas
❖ Componentes no proteicos necesarios para la actividad de algunas enzimas
➢ Iones metálicos (por ejemplo Fe​2+​, Cu​2+​, Mn​2+​, etc)
➢ Moléculas orgánicas o metalorgánicas.
■ Se las llama coenzimas
■ La mayoría son derivadas de las vitaminas
➢ Puede estar unido en forma estable a la enzima, en este caso se los llama ​grupo
prostético

Coenzimas
A diferencia de las enzimas, las coenzimas quedan modificadas al final de la reacción, suelen ser
dadores o aceptores de grupos químicos diversos y en este sentido se comportan como
transportadores

El esquema muestra como la coenzima se une al sitio activo y queda modificada al recibir un grupo
químico del sustrato. Para regenerar a la coenzima a su estado original es necesario una nueva
reacción catalizada por otra enzima representada en al imagen con “E2”
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Modificaciones covalente de la actividad enzimática

Algunas enzimas puede sufrir una modificación covalente que cambia su actividad, una de estas
situaciones es cuando la enzima se sintetiza como un precursor inactivo (proenzima) de mayor peso
molecular que la enzima activa, para activar la enzima, es necesaria una reacción que pueda
involucrar una segunda enzima o cambios en el pH del medio que provoque la hidrólisis de la enzima
en los sitios apropiados y determine su activación

Otra situación tiene lugar cuando a la enzima le es transferido un grupo químico en forma covalente
que afecta su actividad.
❖ Esta reacción es catalizada por otra enzima representada por “E2” en la imagen de abajo.
❖ Por la incorporación de este grupo químico, la enzima puede activarse o inhibirse
dependiendo de la enzima
❖ Frecuentemente el dador es el ATP que transfiere su grupo fosfato y queda transformado en
ADP
❖ Este tipo de modificación puede ser revertido por la acción de otra enzima que remueve el
grupo químico (Indicada con “E3)
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Isoenzimas
Enzimas del mismo organismo, con propiedades físicas y químicas diferentes, que catalizan la misma
reacción.
❖ Debido a que difieren en sus propiedades físicas y químicas es posible separarlas e
identificarlas
❖ Frecuentemente tienen una distribución particular en los tejidos del organismo donde gracias
a sus diferentes propiedades les permite modular mejor el metabolismo de acuerdo a las
necesidades del tejido
❖ Ejemplo: Lactato deshidrogenasa
➢ Se trata de una enzima bigomérica que tiene 4 subunidades
➢ Existen dos tipos de subunidades con distintas propiedades
■ H: Por corazón en inglés
■ M: Por músculo
➢ Las subunidades se combinan de todas las formas posibles y forman 5 isoenzimas
que se denominan de acuerdo a su composición como indica la tabla
■ Puede observarse que las distintas isoenzimas predominan en forma
diferencial en algunos tejidos

Composició Localización
n

HHHH Corazón y eritrocitos

HHHM Corazón y eritrocitos

HHMM Cerebro y riñón

HMMM Músculo esquelético e

hígado

MMMM Músculo esquelético e

hígado
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Utilidad en la práctica médica

Diagnóstico:
❖ Cuando las enzimas intracelulares están presentes en sangre indican destrucción de los
tejidos de origen de las mismas
❖ Solo resultan de utilidad las enzimas que tienen una distribución exclusiva o predominante en
un tejido particular
❖ Ejemplos de estudios enzimáticos para detectar daños de órganos
➢ Enzimograma hepático
■ Se analiza la presencia de enzimas hepáticas en sangre, estas aumentan en
diversas afecciones en las que hay destrucción de tejido hepático tales como
la hepatitis o la cirrosis
➢ Enzimas y proteínas del músculo cardíaco:
■ Entre varias de las enzimas se buscan las​ isoformas de las lactato
dehidrogenasa

Deficiencias enzimáticas
El aumento de la velocidad de reacción determinado por las enzimas, es tan enorme que las
carencias o deficiencias de una enzima (a menos que existan vías alternativas de obtener el mismo
producto) determina que la reacción no tenga lugar y pueda generar consecuencias muy graves.
❖ Hay reacciones tan fundamentales para la célula que la carencia congénita total de la enzima
que las cataliza provoca la muerte en la etapa embrionaria o fetal
❖ Las deficiencias donde la carencia no es total, dependiendo de la enzima generan
enfermedades
❖ Solamente conociendo cuál de las enzimas está alterada y cuál son las consecuencias de su
deficiencia en la fisiología celular es posible tratar al paciente para que pueda sobrellevar la
enfermedad
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Glucólisis
Consiste en una secuencia de 10 reacciones catalizadas diferentes enzimas, que metabolizan una molécula de
glucosa, para formar 2ATP y 2 piruvato.
El destino del metabolito del piruvato:
❖ Fermentación láctica:​ En algunos microorganismos y eucariotas superiores
❖ Fermentación alcohólica:​ En levaduras y otros microorganismos
❖ Oxidación completa a CO​2​ y ATP​ (en condiciones aeróbicas)

❖ Casi todos los organismos utilizan glucosa como fuente de energía

❖ Es una ruta metabólica común a casi todas las células, tanto procariotas como eucariotas
❖ En eucariotas la glucólisis ocurre en el citosol
❖ La glucosa es prácticamente el único combustible utilizado por el cerebro (excepto durante el ayuno), y
es el único combustible que pueden utilizar los glóbulos rojos.

Ingreso de glucosa a la célula

La entrada se produce por difusión facilitada, mediada por un grupo de receptores/transportadores de
membrana, denominados ​GLUT​.
❖ El GLUT 5 se expresa principalmente en el intestino delgado y a su vez es el único que transporta
fructosa
❖ El GLUT 2 se encuentra principalmente en el hígado, riñón y páncreas, a diferencia de los demás tiene
un valor de Km muy elevado para la glucosa y asegura que estos tejidos metabolizan la glucosa
solamente cuando es abundante en sangre.
❖ Los GLUT 3 se encuentran principalmente en el cerebro a nivel neuronal y se unen a la glucosa con
alta afinidad, lo que permite captar la glucosa especialmente cuando los niveles de glucosa en sangre
son bajos.
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El GLUT 4
Se destacan los GLUT 4 que se encuentran principalmente en el músculo esquelético y en el tejido adiposo,
estos tejidos son especialmente sensibles a la insulina, y por ejemplo en respuesta a un alto nivel de glucosa en
sangre esta hormona va a ser liberada por el páncreas y de alguna forma va a actuar estimulando la
movilización de los GLUT 4 que se encuentran contenidos en vesículas, y de esta forma se liberan, se fusionan
con la membrana plasmática y van a poder facilitar el ingreso de glucosa en estos tejidos.
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Estrategia general de la glucólisis

Es atrapar la glucosa que ingresa en la célula y metabolizarla en un proceso de 10 reacciones que se puede
dividir en 2 etapas.
❖ 1er etapa: Fase preparatoria:​ Se invierten 2 moléculas de ATP en la conversión de glucosa en dos
moléculas fosforiladas de 3 carbonos: gliceraldehído-3P (G-3P) y dihidroxiacetona-P (DHAP)
❖ 2da fase: fase de obtención de energía:​ 2 moléculas de G-3P son convertidas en 2 moléculas de
piruvato. Como resultado de estas reacciones de oxidación se obtienen 2NADH y 4 ATP.

Fase preparatoria

Fase de obtención de energía

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¿Cuál es la función de estos grupos fosfato?

❖ Dado que la membrana plasmática no presenta transportadores para azúcares fosforilados, los
intermediarios glucolíticos una vez fosforilados pueden ser retenidos en la célula
❖ Son esenciales para conservar la energía metabólica
❖ La energía liberada de la ruptura de enlaces fosfoanhídrido (como el ATP) puede ser parcialmente
conservada en la formación de enlaces éster (como en la glucosa 6-P)
❖ Los compuestos de alta energía formados en la glucólisis (como el 1,3-bifosfoglicerato y el
fosfoenolpiruvato pueden donar u grupo fosfato al ADP para formar ATP
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Paso 1. 1) Fosforilación de la glucosa

Una vez que la glucosa entra en la célula, tiene como destino principal el ser fosforilada por el ATP para ser
Glucosa 6-P (G6P).
❖ La transferencia del grupo fosforilo es una de las reacciones fundamentales en bioquímica, y las
enzimas que catalizan la transferencia inter molecular del grupo fosforilo desde el ATP a un aceptor​, se
llaman kinasas.
❖ La enzima​ ​hexoquinasa ​es la encargada de catalizar la transferencia del grupo fosforilo​ del ATP
al grupo hidroxilo del átomo de carbono 6´ de la glucosa para formar entonces la glucosa 6P.
❖ Una particularidad de estas enzimas es que requieren para su actividad Mg+ u otro ion metálico
equivalente, dado que de esta forma se forma un complejo con el ATP y lo estabiliza para su reacción
❖ Estudios cristalográficos han demostrado que la unión de la glucosa produce un cambio conformacional
en la estructura de la enzima y de esta forma estos cambios favorecen la reacción.
❖ La Hexoquinasa se encuentra en la mayoría de los tejidos y tiene una amplia especificidad por el
sustrato, ya que por ejemplo puede fosforita otras hexosas, como la manosa, el bajo valor de Km de
esta enzima (Km=0.1mM) asegura que la glucosa en la célula va a ser convertida en forma rápida y
eficiente en glucosa 6P
❖ A su vez en el hígado hay una isoforma de esta enzima que se llama glucoquinasa, la cual es
específica para la glucosa.
➢ La hexoquinasa es inhibida por su producto, la glucoquinasa es inhibida por fructosa-6-fosfato.
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Paso 1. 2) Isomerización de la glucosa-6P en fructosa 6P: Fosfaglucosa isomerasa

Se cataliza la conversión de una aldosa en una cetosa, es decir que el anillo piranósico de 6 miembros de la
glucosa 6P se convierte en el anillo furanósico de 5 miembros de la fructosa 6P.
❖ Esta reacción es reversible y es catalizada por la enzima ​fosfaglucosa isomerasa
❖ Isomerización: Conversión de una aldosa (hemiacetal) en una cetosa (hemicetal)

3) Fosforilación de la fructosa 6P en fructosa-1,6 BiP: Fosfofructosaquinasa

La fructosa 6P es fosforilada por el ATP. En este caso hay una transferencia del grupo fosfato del ATP al grupo
hidroxilo del carbono 1 de la fructosa 6P para formar la Fructosa 1,6 BiP.
❖ Es catalizada por la enzima fosfofrucctoquinasa
❖ Es una enzima alostérica
❖ La enzima está controlada por el nivel de ATP y otos moduladores alostéricos
➢ Moduladores positivos: ADP, AMP, F-2,6BiP
➢ Modulares negativos: ATP, citrato
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Paso 1. 4) Ruptura de la fructosa-1,6BbiP en DHAP y G-3P: Aldolasa

Se produce una ruptura de unazúcar de 6 carbonos para formar dos azúcares de 3 carbonos (DHAP y G-3P)
❖ Reacción catalizada por la aldolasa
❖ Reacción inversa a la condensación aldólica

Paso 1. 5) Isomerización de triosas fosfato: Triosa fosfato isomerasa (TPI)

La dihidroxiacetona-fosfato se isomeriza a gliceraldehído-3-fosfato para poder continuar la segunda etapa, la
enzima es la triosa fosfato isomerasa y es una reacción reversible.
❖ Esta reacción completa la fase preparatoria de la glucólisis.
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Paso 2. 6) Conversión de la energía, la fosforilación está acoplada a la oxidación del G-3P:

gliceraldehído 3P deshidrogenasa
Esta reacción es de óxido reducción y genera un compuesto fosforilado que es el acilfosfato, el cual es un
anhídrido mixto de un ácido fosfórico y un ácido carboxílico. Este compuesto tiene la particularidad de tener un
elemento potencial de transferencia de grupo fosforilo.
❖ La reacción procede en dos pasos:
➢ Por un lado hay una oxidación del grupo aldehído del carbono 1, que se convierte en un grupo
carboxilo.
■ En este caso el NAD+ es el aceptor de electrones que se reduce a NADH
➢ Por otro lado está la unión del grupo carboxilo al grupo fosfato, para formar el acilfosfato y
dando lugar al 1,3-bifosfo glicerato

❖ Un aspecto crucial de la formación del 1,3-biFG, es que una reacción termodinámicamente

desfavorable está dirigida por una reacción termodinámicamente favorable, la oxidación de un aldehído
❖ Estas dos reacciones están acopladas mediante un éster tiólico, un intermediario en la enzima que
retiene parte de la energía desprendida de la reacción de oxidación
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Paso 2. 7) Transferencia del Pi desde el 1,3-biFG al ADP: Fosfogicerato quinasa

❖ El 1,3-biFG es un compuesto de alta energía con un potencial para la transferencia del grupo fosforilo
❖ La fosforilación de ATP mediante la transferencia de un grupo fosforilo proveniente de un sustrato
fosforilado se llama ​fosforilación a nivel de sustrato
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Paso 2. 8) Conversión del 3-fosfoglicerato en 2-fosfoglicerato: Fosfoglicerato mutasa

El enzima fosfoglicerato mutasa cataliza un desplazamiento reversible del grupo fosforilo entre C-2 y C-3 del
glicerato. El magnesio es esencial para esta reacción.
❖ Mutasa: Enzima que cataliza el movimiento intermolecular de un grupo químico

Paso 2. 9) Deshidratación del 2-fosfoglicerato a fosfoenolpiruvato: Enolasa

La enzima enolasa promueve la eliminación reversible de una molécula de agua del 2-fosfoglicerato, dando
fosfoenolpiruvato (PEP).
❖ Esta reacción de deshidratación es importante, dado que como resultado el fosfoenolpiruvato, va a
elevar el potencial de transferencia del grupo fosforilo
❖ Esta diferencia se debe a una óxido-reducción intramolecular con redistribución de energía en el PEP
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Paso 2. 10) Transferencia del grupo fosforilo del PEP al ADP

❖ Reacción catalizada por el piruvato quinasa, que requiere potasio, magnesio o manganeso. Es la
segunda fosforilación a nivel de sustrato, por lo cual se forma ATP.
❖ Moduladores positivos: F-1,6DP
❖ Moduladores negativos: ATP, acetil-CoA, ácidos grasos de cadena larga, alanina.
❖ El piruvato quinasa también posee regulación covalente, se inhibe por fosforilación (en hígado).
❖ Fosforilación a nivel de sustrato
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Balance energético de la glucólisis

Regulación de la glucólisis
Las etapas de la glucólisis están reguladas por enzimas clave.
❖ Son generalmente reacciones fuertemente exergónicas e irreversibles en las condiciones celulares
❖ Están limitadas por la enzima y no por el sustrato
❖ Están lejos del equilibrio en el estado estacionario metabólico

Variaciones de energía libre en las reacciones de la glucólisis

❖ En la siguiente imagen se ve un diagrama de los cambios de energía libre en los diferentes pasos de la
glucólisis en el músculo cardíaco. ​Las reacciones 1, 3 y 10 ​son irreversibles y regulan el flujo de la vía.
❖ Las otras reacciones operan cercanas al equilibrio
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Regulación de la glucólisis
Las reacciones de la glucólisis que se encuentran reguladas son aquellas catalizadas por:
❖ Hexoquinasa (reacción 1)
❖ Fosfofructoquinasa (reacción 3)
❖ Piruvatoquinasa (reacción 10)

Regulación de la glucólisis: reacción 1

La primer reacción es catalizada por la hexoquinasa para pasar de glucosa a glucosa.6P, esta enzima presenta
un bajo valor de Km=0,1mM, esto asegura que la glucosa en las células pueda ser convertida de forma rápida y
eficiente en glucosa-6P.
❖ La hexoquinasa es inhibida por su propio producto, por lo que si una vez formada la glucosa-6P se
inhiben los siguientes pasos en los cuales las Glucosa-6P pueda ser metabolizada, se va a acumular y
de esta forma se inhibirá la hexoquinasa, inhibiendo así su formación.
❖ Si se inhibe la enzima fosfofructoquinasa, que cataliza el paso 3 de la glucólisis, como resultado va a
aumentar el nivel de glucosa-6P, conduciendo a la inhibición de la hexoquinasa.
❖ En los hepatocitos hay una isoforma de la hexoquinasa que es la glucoquinasa, esta enzima cataliza la
misma reacción pero no resulta inhibida por su producto, dado que la glucoquinasa tiene un valor de
Km= 10mM, eso nos dice que la enzima va a fosforilar a la glucosa cuando esta sea abundante, esto
ocurre por que la función de la glucoquinasa es suministrar glucosa y fosfato para otros destinos, por
ejemplo para ser utilizada en la síntesis de glucógeno y de esta forma almacenar la glucosa
❖ Si bien la hexoquinasa es una enzima reguladora, no es el paso limitante de la velocidad de la
glucólisis, la razón de esto es que la glucosa-6P no es únicamente intermediario de la glucólisis, sino
que también dependiendo de las necesidades metabólicas puede transformarse en glucógeno o bien
tener otros destinos como oxidarse en la vía de las pentosas fosfato y generar ribosa 5P y NADPH.
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Regulación de la glucólisis: reacción 3

La siguiente etapa en la que se puede regular la glucólisis es la catalizada por la enzima fosfofructoqunasa.
❖ Este es el punto más importante de la vía glucolítica en mamíferos
❖ Esta enzima es tetramérica, presentando 6 sitios de unión
➢ 2 de ellos son para cada uno de los sustratos: ATP y Fructosa-6P
➢ Los otros 4 sitios restantes son diferentes a los de sitio activo, que son en los cuales se unen
los moduladores alostéricos
■ Dentro de estos, por ejemplo el ATP, es un modulador que actúa de forma de inhibir
la enzima, este se une a su sitio de unión, genera un cambio conformacional y de
esta forma disminuye la afinidad de la enzima por su sustrato, esta acción inhibitoria
del ATP puede ser por el AMP, de modo que cuando la carga energética de la célula
es baja va a haber más AMP que ATP, y en ese caso la glucólisis se va a estimular
❖ La enzima es inhibida también por citrato, que es uno de los compuestos iniciales del ciclo de krebs,
este entonces va a inhibir a la enzima y de esta forma potencia efecto inhibitorio que también tenía el
ATP
❖ Otro de los activadores de la enzima es la fosfofructoquinasa 2,6-biP, este compuesto se forma por la
fosforilación de la Fructosa-6P en una reacción que está catalizada por la fosfofructoquinasa 2, que es
una enzima diferente a la fosfoructoquinasa 1.
➢ Entonces esta enzima va a activar a la fosfofructoquinasa hepática para aumentar así su
afinidad por el sustrato y disminuir el efecto inhibitorio del ATP
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Regulación de la glucólisis: reacción 10

La piruvato quinasa es la enzima que cataliza el último paso de la vía glucolítica y también es un paso
importante de regulación.
❖ La regulación de esta enzima se realiza de forma alostérica:
➢ Modulador alostérico positivo: Fructosa 1,6-biP
➢ Moduladores alostéricos negativos:
■ ATP, alaina
■ Acetil-CoA
■ ác. grasos cadena larga
❖ A su vez la enzima puede ser regulada por modulación covalente por fosforilación
➢ Cuando descienden los niveles de glucosa en sangre por ejemplo por una señal hormonal va a
desencadenar la fosforilación de esta enzima y de esta forma va a inactivar disminuyendo su
actividad
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Glúcidos que alimentan la glucólisis

❖ Además de la glucosa hay otros monosacáridos, como la fructosa, manosa y galactosa pueden ingresar
en la ruta glucolítica
❖ Estos glúcidos provienen de:
➢ Polisacáridos: Glucógeno y almidón
➢ Disacáridos: Maltosa, lactosa, sacarosa y trehalosa
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Galactosa
Se obtiene de la hidrólisis del disacárido lactosa, formado por glucosa y galactosa, la galactosa se podrá
convertir en el intermediario de la glucólisis (glucosa 6P), mediante una serie de 4 reacciones.
❖ La primera de ellas catalizada por la galactoquinasa a expensas de ATP

Manosa
La malosa que es el epímero en el carbono 2 de la glucosa, puede entrar en la vía glucolítica luego de su
conversión a fructosa 6P, es este caso esta conversión se realiza en dos pasos, el primero catalizado por una
hexoquinasa, que fosforila la manosa para formar manosa 6-P, y luego fosfomanosa isomerasa lo convierte en
glucosa 6P.
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Fructosa
Sabemos que la hidrólisis del disacárido sacarosa, libera fructosa y glucosa.
❖ Hay dos vías de dónde actuaría la fructosa:
➢ En el músculo la fructosa puede ser fosforilada a expensas de una hexoquinasa, dando lugar a
la fructosa-6-P y de esa manera puede ingresar en la vía glucolítica
➢ En el hígado la fructosa se metaboliza utilizando una vía diferente que involucra 2 pasos:
■ El primer paso es la fosforilación de la fructosa, formando la fructosa 1P
■ Luego puede escindirse en gliceraldehído y dihidroiacetona fosfato, luego el
gliceraldehído se vuelve a fosforilar a expensas de ATP para formar el gliceraldehído
3P y la dihidroxiacetona fosfato puede ser isomerisada para formar ese mismo
producto
❖ Algo a tener en cuenta es que frente a un escenario de elevados niveles de fructosa, por ejemplo frente
a una ingesta en exceso, el catabolismo de la fructosa en el hígado elude un importante punto de
control a nivel metabólico que la fosfofructo quinasa, dado que el producto de la metabolización de la
fructosa a nivel hepático ingresa en la glucólisis a través del gliceraldehído 3-P
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Destinos del piruvato

Fermentación alcohólica
❖ Se produce en levaduras y otros microorganismos
❖ En el primer paso hay una descarboxilación del piruvato dando lugar al acetaldehído
➢ Catalizada por la piruvato decarboxilasa
❖ En un segundo paso el acetaldehído se reduce a expensas de NADH dando lugar a la formación de
etanol
➢ Catalizada por Alcohol deshidrogenasa
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Fermentación láctica
Se produce en algunos microorganismos y en células de organismos superiores por ejemplo en células con alta
tasa de proliferación celular o cuando la cantidad de oxígeno es limitada como ocurre en el músculo durante la
contracción muscular intensa.
❖ La reducción del piruvato por el NADH da lugar a la formación de lactato
➢ Catalizada por la enzima lactato deshidrogenasa
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Oxidación del piruvato a acetil-CoA

El piruvato puede ser oxidado en una reacción catalizada por el complejo multienzimático piruvato
deshidrogenasa.
❖ En esta reacción que ocurre en la mitocondria y en condiciones aeróbicas, el piruvato se descarboxila
dando lugar a la formación de acetil-CoA
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Mitocondria y piruvato deshidrogenasa

La mitocondria:
❖ Es un orgánulo celular presente en casi la totalidad de células eucariotas
❖ El número de mitocondrias en la célula depende del estado energético (0 a más de 2000)
❖ Forma variable
❖ Mide entre 0,5-1 nm de diámetro
❖ En la imagen de la izquierda de usó un fluoróforo, es decir, una molécula que es fluorescente y que por
lo tanto en una microscopía de fluorescencia se puede ver y esta molécula se dirige específicamente
hacia la mitocondria

Estructura de la mitocondria
❖ Membrana mitocondrial externa (MME)
❖ Espacio intermembrana (EI)
❖ Membrana mitocondrial interna (MMI) y crestas
❖ Matriz mitocondrial
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Membrana mitocondrial externa

❖ Bicapa lipídica altamente permeable a iones, metabolitos y algunos polipéptidos.
❖ Presenta muchas copias de una proteínas denominadas porinas que forman un canal acuoso
responsable del pasaje de moléculas de hasta 5000 daltons
❖ Esta membrana no es una membrana que permite diferenciar el espacio intermembrana del citosol de
la célula
Espacio intermembrana
❖ Composición similar al citosol de la célula
❖ Presencia de algunas enzimas y proteínas específicas (adenilato quinasa, carnitina, etc)
Membrana mitocondrial interna
❖ Es impermeable para iones y muchas moléculas
❖ Para lograrlo es más hidrofóbica (cambia la composición de lípidos) y presenta transportadores
específicos
Crestas
❖ Son un sistema membranoso conectado con la MMI
❖ Allí se encuentran los complejos de la cadena respiratoria, la ATP sintasa, la ATP/ADP translocasa, la
translocasa de Pi.
❖ La cantidad de crestas varía con el tipo celular y las condiciones energéticas
Matriz
❖ Su composición en iones y metabolitos es distinta al citosol
❖ Contiene metabolitos y enzimas de rutas metabólicas centrales
❖ Contiene ADN, ARN transferencia , mensajero y ribosómico

En las últimas dos micrografías se puede ver que si

bien las dos mitocondrias presentan crestas, el
número de estas en la mitocondria del músculo
esquelético es mucho mayor que las de las células
epiteliales; esto se vincula con el rol que cumplen
estas crestas, ya que la cadena respiratoria y la
síntesis de ATP van a estar asociados a las crestas
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La mitocondria cumple un rol central en el metabolismo celular

❖ Es la fuente de poder de la célula
➢ Produce energía en forma de ATP mediante la degradación completa de los compuestos
orgánicos a CO​2​ y H​2​O en presencia de O​2
➢ Oxidación de los nutrientes celulares: glucosa, ácidos grasos, aminoácidos.
❖ Es fuente de precursores biosintéticos​, dando precursores para la síntesis de ácidos grasos,
glucosa, aminoácidos, colesterol, grupo hemo, etc.
❖ Es el sitio de degradación de los compuestos nitrogenados​ (ciclo de la urea)

Otras funciones de la mitocondria

2+
❖ Metabolismo del Ca​
❖ Rol central en el proceso de Muerte celular programada​ (apoptosis)
❖ Rol central en la señalización celular:​ Formación de especies reactivas del oxígeno y formación de
acetil-CoA que es capaz de acetilar proteínas. Estos mecanismos regulan la proliferación celular,
diferenciación y adaptación al estrés.

Precursores del acetil-CoA

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Piruvato
Vías de formación de piruvato en el citosol
❖ Piruvato quinasa (último paso de la glucólisis)
❖ Lactato deshidrogenasa (desde el lactato)
❖ Enzima málica (desde malato)
❖ Alanina transaminasa (desde alanina)
❖ Otros aminoácidos glucogénicos: Serina, treonina, glicina, cisteína y triptófano

Destinos del piruvato citosólico

❖ Lactato deshidrogenasa

❖ Ingreso del piruvato a la mitocondria

➢ Atraviesa membrana mitocondrial externa (porinas)
➢ Transportadores en MMI: familia de proteínas denominadas MPC por “mitochondrial pyruvate
carrier”, que ingresa en un simporte con H​+​ (es decir entra un piruvato y entra también un
protón)
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Complejo piruvato deshidrogenasa (PDH)

Cataliza descarboxilación oxidativa del piruvato, esto significa que el piruvato perderá un carboxilo y que en esa
descarboxilación hay una reacción de óxido-reducción.
Como podemos ver el grupo carboxilo pasa a CO2 que es la forma más oxidada del carbono.
❖ A partir de una molécula de 3 carbonos (el piruvato), se pasa a una de dos carbonos (que se denomina
grupo acetilo)
❖ Al producirse una oxidación (del piruvato), hay un transportador de electrones, en este caso el NAD+,
que se transforma en NADH
❖ Por lo tanto el piruvato junto con el NAD+ y CoA-SH, van a generar el Acetil-CoA, CO​2​ y NADH
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Composición de la piruvato deshidrogenasa

3 enzimas:
❖ E1 Piruvato deshidrogenasa
❖ E2 Dihidrolipoil transacetilasa
❖ E3 Dihidrolipoil deshidrogenasa

5 coenzimas:
❖ Coenzima A: Va a ser esterificada (unida) al grupo acetilo para formar acetil-CoA
❖ Pirofosfato de Tiamina
❖ Lipoamida (ácido lipoico asociado a lisina de enzima)
❖ FAD
❖ NAD+

2 enzimas reguladoras:
❖ Piruvato deshidrogenasa quinasa:​ Fosforila la enzima E1 y la inhibe
❖ Piruvato deshidrogenasa fosfatasa: ​desfosforila la enzima E1 y la activa
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E1 piruvato deshidrogenasa
❖ El piruvato reacciona con el pirofosfato de tiamina (TPP) unido a E1
❖ Se libera CO2 y el acetaldehído queda unido al TPP (hidroxietil-TPP)
❖ P iruvato + T P P ⇒ H idroxietil − T P P + C O2
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E2 Dihidrolipoil transacetilasa
❖ El hidroexietil-TPP reacciona con la lipoamida dando lugar a acetil-lipoamida y TPP
❖ H idroexietil − T P P + Lipoamida ⇒ acetil − lipoamida + T P P

❖ E2 también cataliza la reacción entre acetil-lipoamida y la coenzima A (CoA-SH).

➢ El grupo acetilo se une a la Co-A formando Acetil-CoA y la lipoamida queda reducida:
Dihidroxilipoamida
❖ acetil − lipoamida + C oA − S H ⇒ dihidroxilipoamida + Acetil − C oA
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Reacción de la E2

E3 dihidrolipoil deshidrogenasa
❖ La dihidrolipoamida se oxida a lipoamida (se forma el enlace disulfuro) a expensas de FAD (siempre
unido a una enzima) asociado a E3
❖ El FAD es reducido a FADH​2
❖ Luego el FADH​2​ transfiere lo e​-​ al NAD​+​, generando NADH que es producto de la reacción
❖ Dihidrolipoamida + N AD + ⇒ Lipoamida + N ADH + H +
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Regulación del complejo PDH

❖ Modulación alostérica
➢ Negativa: ATP, Acetil-CoA, NADH, ácidos grasos
➢ Positivos: AMP, CoA-SH, NAD+
❖ Modificación covalente:
➢ Se realiza una modificación en la propia enzima que se da de forma reversible
➢ La PDH quinasa fosforila 3 residuos de serina de E1 que cataliza el paso de la reacción
➢ Negativa: Fosforilación por PDH quinasa
➢ Positiva: Desfosforilación por PDH fosfatasa
➢ La PDH quinasa:
■ se activa por aumento de acetil-CoA y NADH
■ Se inhibe por CoA-SH y NAD
■ El aumento de ADP inhibe la PDH quinasa
■ Hay regulación de la expresión de las quinasas y fosfatasas, lo que modifica los
niveles de proteínas
❖ El estado energético de la célula regula la actividad de esta enzima:
➢ NADH/NAD+:​ El aumento de esta relación lleva a la inhibición de la PDH tanto la modulación
alostérica y por activación de la PDH quinasa
➢ Acetil-CoA/CoA-SH: ​El aumento de esta relación lleva a la inhibición de la PDH por
modulación alostérica y por activación de la PDH quinasa
➢ ATP/ADP:​ El aumento de esta relación activa la PDH quinasa e inhibe por modulación
alostérica la enzima
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Deficiencia de actividad piruvato deshidrogenasa 1

❖ La deficiencia se debe a mutaciones en genes que codifican distintas subunidades del complejo.
➢ El 80% son mutaciones en E1 provocando que haya menos proteína o una proteína de muy
baja actividad
➢ La acumulación de piruvato lleva a un aumento en la formación de lactato.
■ Una característica de esta enfermedad es la acidosis láctica
➢ El cerebro se ve muy afectado en esta condición, lo que se expresa en síntomas neurológicos
más o menos graves según el grado de déficit (hipotonía muscular, retraso del desarrollo, falta
de coordinación, problemas respiratorios y cardiovasculares, entre otros)

Deficiencia de actividad piruvato deshidrogenasa 2

❖ La intoxicación con arsenito o mercurio que reaccionan con los grupos -SH, así como el déficit en la
ingesta de tiamina conducen a una inactivación de la actividad PDH
❖ Tiamina o vitamina B1: El déficit de tiamina afecta el metabolismo ya que el pirofosfato de tiamina es
cofactor en varias reacciones de descarboxilación (PDH, alfa-cetoglutarato deshidrogenasa)
❖ La patología asociada al déficit de tiamina es conocida como el Beriberi o síndrome de
Wernicke-Korsakoff
➢ Afecta fundamentalmente el catabolismo de carbohidratos, por lo tanto los órganos o
funciones más afectados son el cerebro, la contracción muscular y la conducción nerviosa
❖ Se encuentran en casos de malnutrición, alcoholismo.
➢ Puede producirse en casos de trastornos en la absorción intestinal o aumento de la demanda
❖ Presente en cereales integrales, carnes y legumbres.
➢ Se agrega en algunos países a productos generados con harina
➢ Hay poco en frutas y verduras o lácteos
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Ciclo de krebs
Topología del metabolismo:
Siempre que nos referimos a una vía metabólica tenemos que localizarla dentro de la célula y dentro de un
organismo.
• En el caso del CK tiene lugar en la mitocondria
• La localización de un ciclo en un lugar específico de la célula implica que las enzimas del mismo se
encuentran en ese lugar
• En el ciclo de Krebs tiene lugar 8 enzimas
o 7 se encuentran en la matriz mitocondrial
o 1 en la MMI (Membrana mitocondrial interna) (succinato deshidrogenasa)
•
Distintos destinos del piruvato
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Panorámica del ciclo de Krebs

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1- Formación de citrato
• Es catalizada por la citrato sintasa
• Es una reacción de condensación, donde el grupo acetilo de la acetil-CoA se condensa con el oxalacetato de
4 carbonos, para formar citrato
• El citrato tiene 3 grupos carboxilo, por eso es un ácido tricarboxílico
• Lo que se condensa son 2 carbonos más un ácido dicarboxílico (que además está formado por 4 carbonos),
sintetizándose el citrato que es de 6 carbonos
• Se libera CoA-SH que puede ser sustrato de la PDH (piruvato deshidrogenasa) para tomar otro grupo acetilo
• El enlace tioéster de la acetil-CoA es de alta energía, por lo que esta reacción es irreversible porque es un
reacción altamente exergónica por la hidrólisis de este enlace

2- Isomerización de citrato a isocitrato

• Catalizada por la enzima aconitasa
• La enzima favorece el reordenamiento de el OH y el H en el carbono 2 y 3 respectivamente
• Se isomeriza el citrato a isocitrato
• En la reacción sale una molécula de H2O y se forma un compuesto transitorio que es el cis-aconitato y
entra la molécula de H2O y se forma el isocitrato
• La aconitasa tiene centros Fe-S que actúa como centro de fijación de sustratos y centro catalítico
• Se sigue teniendo un compuesto de 6 carbonos
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3- Oxidación del isocitrato a α-cetoglutarato y CO2

• Catalizada por la isocitrato deshidrogenasa
• Se produce la primera descarboxilación, es decir, la salida de un grupo carboxilo para formar CO2
o Es una oxidación, ya que se pasa a un estado más oxidado del carbono que es el CO2
• La oxidación libera e- que son captados por el NAD+ que pasa a NADH, porque la enzima es NAD
dependiente
• Se obtiene el α-cetoglutarato, cuyo esqueleto es de 5 carbonos
• La energía liberada por la liberación de e-, parte de la misma se conserva en el NADH
• Existen dos formas diferentes de isocitrato deshidrogenasa:
o NAD dependientes (matriz mitocondrial)
o NADP dependiente (matriz mitocondrial y citosol)

4- Oxidación del α-cetoglutarato a succinil-CoA y CO2

• Catalizada por la α-cetoglutarato deshidrogenasa
• El α-cetoglutarato de 5 carbonos se descarboxilasa, el grupo carboxilo pasa a CO2
• Se produce otra descarboxilación oxidativa donde entra CoA-SH y se forma succinil-CoA
• El succinil-CoA es de 4 carbonos
• Es una reacción NAD+ dependiente y la oxidación del α-cetoglutarato va a liberar e- que va a ser captados
por el NAD+ que pasa a NADH
• El complejo α-cetoglutarato deshidrogenasa es muy parecido al complejo PDH, tanto en estructura como en
función, únicamente cambia su especificidad
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5- Conversión del succinil-CoA en succinato

• Catalizada por la succinil-CoA sintetasa
o Lleva ese nombre porque hace referencia a la reacción inversa, en la que se forma el succinil-CoA a
partir de succinato
• Se cataliza la hidrólisis del enlace tioester que une la CoA con el succinato
• Es una reacción muy exergónica y a causa de esto se le acopla otra reacción de formación de GTP
• Se libera CoA-SH y GTP
• Se obtiene un ácido dicarboxílico y de 4 carbonos, el succinato
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6- Oxidación del succinato a fumarato

• Catalizada por la succinato deshidrogenasa
• Los carbonos 2 y 3 se oxidaron y se forma un doble enlace entre ellos
• Los e- liberados por el succinato pasan al FAD que pasa a FAD2
• En eucariotas, la succinato deshidrogenasa se encuentra unida a la MMI, contiene tres centros hierro-azufre
diferentes y una molécula de FAD unida covalentemente

El malonato es un fuerte inhibidor competitivo de

la succinato deshidrogenasa

7- Hidratación del fumarato y producción de malato

• Catalizada por la enzima fumarasa
• Entra una molécula de H2O y se rompe el doble enlace
• L-Malato es una molécula de 4 carbonos con dos grupos carboxilos, pero en vez de tener el doble enlace tiene
un grupo OH en un carbono y 2H en otro (los dos carbonos centrales)
• La enzima es específica para fumarato y el L-malato
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8- Oxidación del malato a oxalacetato

• Catalizada por la enzima malato deshidrogenasa
• Es una reacción NAD dependiente
• Se regenera el oxalacetato y puede comenzar nuevamente el CK

Balance del ciclo de Krebs

𝐴𝑐𝑒𝑡𝑖𝑙 − 𝐶𝑜𝐴 + 2𝐻2 𝑂 + 3𝑁𝐴𝐷 + + 𝐹𝐴𝐷 + 𝐺𝐷𝑃 + 𝑃𝑖
↓
2𝐶𝑂2 + 3𝑁𝐴𝐷𝐻 + 𝐹𝐴𝐷𝐻2 + 𝐶𝑜𝐴 − 𝑆𝐻 + 𝐺𝑇𝑃

La energía de la oxidaciones del ciclo se conserva con eficiencia

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Los carbonos de los ácidos grasos entran al CK mayoritariamente vía acetil-CoA

Los carbonos de los aminoácidos entran al ciclo de Krebs en diferentes puntos

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Los componentes del ciclo son importantes intermediarios biosintéticos (vía anfibólica)
• Anfibólica: Catabólica y anabólica
• Reacciones de relleno o apapleróticas (marcadas con rojo)
o Permiten que es ciclo siga adelante
o Ejemplo: Se tiene una producción alta de piruvato y se encuentra activada la PDH, generándose una
gran cantidad de acetil-CoA
▪ Si no tengo suficiente oxalacetato se enlentecerá la formación de citrato y por ende todo el
ciclo
▪ Entonces, la Piruvato carboxilasa se va a activar y se catalizará el pasaje de piruvato a
oxalacetato

Las reacciones anapleróticas reponen los intermediarios del CK

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Regulación del Ciclo de Krebs

Piruvato deshidrigenasa
• Regulación alostérica:
o Inhibidores:
▪ ATP
▪ Acetil-CoA
▪ NADH
▪ Ácidos grasos de cadena larga
o Activadores
▪ AMP
▪ CoA
▪ NAD+
• Modulación covalente:
o Además de E1, E2 y E3 el complejo PDH contiene 2 enzimas reguladoras capaces de modificar
covalentemente a E1
o E1 quinasa: Al fosforilar a E1 la inactiva
▪ Esta quinasa es activada por NADH y acetil-CoA
o E1 fosfatasa: Al desfosforilar a E1 la activa
▪ Esta fosfatasa es activada por Mg++ y Ca++
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Regulación del CK
• Disponibilidad de sustratos
o Si se agrega sustrato el ciclo comienza a funcionar
• La inhibición por acumulación de productos
• Regulación de las siguientes enzimas:
o Citrato sintasa
▪ Inhibidores: NADH, succinil-CoA, citrato, ATP
▪ Activadores: ADP
o Isocitrato deshidrogenasa
▪ Inhibidores: ATP
▪ Activadores: Ca++, ADP
o α-cetoglutarato deshidrogenasa
▪ Inhibidores: succinil-CoA, NADH
▪ Activadores: Ca++
[NAD+]
El factor más importante es la relación intramitocondrial de
[NADH]
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Oxidación de ácidos grasos

Ácidos grasos:
• Son ácidos carboxílicos de cadena larga
• Presentan un grupo fucncional: Carboxilo
• El grupo funcional está acompañado de una cadena hidrocarbonada de entre 4 y 16 carbonos
• Encontramos ácidos grasos:
• Saturados: Sin enlaces dobles
• Insaturados: Con enlaces dobles

Fuente de ácidos grasos

Generalmente se encuentran formando parte de moléculas más complejas, como los triacilgliceroles (triglicéridos),
los ésteres de colesterol y los fosfolípidos
• Lípidos de la dieta:
o Triacilgliceroles, fosfolípidos, ésteres de colesterol – ácidos grasos
• Lípidos almacenados en el tejido adiposo:
o Triacilgliceroles – ácidos grasos
• Lípidos sintetizados en el hígado:
o Glúcidos en exceso – ácidos grasos
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Lípidos ingeridos en la dieta

Quilomicrón
Es una lipoproteína que presenta en su interior a los triglicéridos y ésteres de colesterol, y en su superficie
encontramos a los lípidos anfipáticos, como los fosfolípidos, las moléculas de colesterol sin esterificar y las
apolipoproteínas.
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Lípidos almacenados en el tejido adiposo

• Principalmente formados por triglicéridos:
o Moléculas formadas por una molécula de glicerol en la cual hay esterificados 3 ácidos grasos

Los ácidos grasos se encuentran formando gotas lipídicas dentro de los adipocitos (células del tejido
adiposo)
• Estas gotas lipídicas en su superficie presentan moléculas de periplina
• Frente a la llegada de un estímulo, como le glucagón o la epinefrina, se activa la lipasa sensible a
hormonas y la periplina comenzando el proceso de movilización de los lípidos presentes en la gota lipídica.
• Los triacilgliceroles van a ser hidrolizados a ácidos grasos y glicerol
• Luego los ácidos grasos viajan por la sangre unidos a la albúmina sérica
o La albúmina sérica es una proteína mayoritaria de la sangre y puede unir en forma no covalente
hasta 10 moléculas de ácidos grasos
o Así viaja el ácido graso por la sangre hasta llegar hasta llegar al tejido “blanco” y ahí se encuentra
con una proteína transportadora de ácidos graos
Oxidación de ácidos grasos
Una vez en la célula, comenzará el proceso de oxidación de ácidos grasos, la cual presenta 4 etapas.

Etapas de la oxidación de ácidos grasos:

1. Captación de los ácidos grasos por la célula
2. Activación del ácido graso (síntesis de acetil-CoA)
3. Transporte del acetil-CoA a la mitocondria
4. Oxidación del acetil-CoA a accetil-CoA en la matriz mitocondrial en la β-oxidación
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1- Captación de los ácidos grasos por la célula

• Difusión pasiva (ácidos grasos < 12 carbonos)
• Difusión facilitada por proteínas de transporte (ácidos grasos > 12 carbonos)
• En este proceso participan proteínas:
o Transportadora de ácidos grasos
o Translocasa de ácidos grasos

2- Activación de ácidos grasos

Una vez en el citosol, comienza el proceso de activación.
• La acil-CoA sintetasa cataliza la reacción de activación
• La pirofosfatasa inorgánica cataliza la hidrólisis de PPi
• El proceso es muy exergónico

• La acil-CoA sintetasa presenta tres isoenzimas diferentes con distinta especificidad para ácidos de cadena
muy larga, mediana o corta.
o Estas isoenzimas comparten el mismo mecanismo de reacción que involucra la formación de un
aciladenilato (anhídrido mixto de la enzima)
o Este aciladenilato se forma cuando el ácido graso ataca el ATP, se libera el PPi y se forma el
aciladenilato
• Luego la CoA-SH ataca al aciladenilato, se libera el AMP y se forma el Acil-CoA
• El PPi será hidrolizado en la reacción catalizada por la pirofosfatasa inorgánica para dar dos fosfatos
inorgánicos
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Reacción global de la activación

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3- Transporte del acil-CoA a la mitocondria

• Para el transporte a la mitocondria el ácido graso se une transitoriamente al grupo hidroxilo de la carnitina
• Se une por enlace éster el ácido grado al grupo hidroxilo

Proceso de transporte
En este proceso participan 2 enzimas y un transportador
• Enzima carnitina aciltransferasa l (carnitina palmitoiltransferasa 1, CPT1)
o 𝐴𝑐𝑖𝑙 − 𝐶𝑜𝐴 + 𝑐𝑎𝑟𝑛𝑖𝑡𝑖𝑛𝑎 →𝐶𝑃𝑇1 𝑐𝑎𝑟𝑛𝑖𝑡𝑖𝑛𝑎 + 𝐶𝑜𝐴
• Transportador acil-carnitina/carnitina
• Carnitina aciltransferasa 2 (carnitina palmitoiltransferasa 2, CPT2)
o 𝑐𝑎𝑟𝑛𝑖𝑡𝑖𝑛𝑎 + 𝐶𝑜𝐴 𝐴𝑐𝑖𝑙 →𝐶𝑃𝑇2 𝐴𝑐𝑖𝑙 − 𝐶𝑜𝐴 + 𝑐𝑎𝑟𝑛𝑖𝑡𝑖𝑛𝑎
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4- β-oxidación de los ácidos grasos

Esta ruta consta de 4 reacciones catalizadas por 4 enzimas distintas.
1. Oxidación
2. Hidratación
3. Oxidación
4. Tiólisis
Al finalizar la ruta se obtendrá: Acetil-CoA que será liberado del extremo carboxilo del ácido graso y un acil-CoA 2
carbonos más corto que el acil-CoA del que se parte.

1- Primera reacción: Oxidación

En la primera reacción lo que ocurre es una oxidación en la cual se forma un doble enlace entre el carbono α y el
carbono β
• Es una reacción de oxidación
• Los e- son captados por FAD que se reduce a FADH2
• La reacción es catalizada por la acil-CoA deshidrogenasa
• Existen diferentes isoenzimas de acil-CoA deshidrogenasa según el largo de la cadena de los ácidos grasos
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2- Segunda reacción: Hidratación del doble enlace

• Se adiciona una molécula de agua al doble enlace
• Se forma un grupo hidroxilo el carbono β
• El carbono β se ha oxidado y por eso la ruta es denominada β-oxidación
• La reacción es catalizada por la Enoil-CoA hidratasa

3- Tercera reacción: Oxidación a un grupo ceto

• El grupo hidroxilo del L-β-Hidroxi-acil-CoA es oxidado a un grupo carbonilo
• Los e- son aceptados por el NAD+ que se reduce a NADH
• Es catalizada por la β-hidroxiacil-CoA deshidrogenasa

1- Cuarta reacción: Tiólisis liberando acetil-CoA y acil-CoA (2C más corto)

• β-cetoacil-CoA va a ser clivado por una molécula de CoA-SH
• Es una reacción de tiólisis catalizada por la tiolasa
• El grupo tiól es el que rompe el enlace por eso se llama tiólisis
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Repetición de la ruta
El miristoil-CoA formado en la ruta entrará nuevamente en la β-oxidación liberando nuevamente una molécula de
acetil-CoA y un acil-CoA 2 carbono más corto que el que entra.
Este proceso se repetirá hasta que todo el ácido graso se convierta en acetil-CoA (hasta que el resultado de la β-
oxidación sean 2Acetil-CoA)

Balance luego del pasaje por la β-oxidación

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Destinos del acetil-CoA formado en la β-oxidación

• Puede ser oxidado en el ciclo de Krebs
o El acetil-CoA es oxidado a CO2 y los e- liberados son utilizados para reducir 3 moléculas de NAH+ a
NADH y una molécula de FAD+ a FADH2
o En este proceso también se forma una molécula de GTP
• Los NADH y FADH2 formado del acetil-CoA así como los formados en el proceso de β-oxidación entregan
luego sus e- a la cadena respiratoria mitocondrial
o El transporte de los e- por los complejos hasta llegar al oxígeno es un proceso exergónico que libera
energía y la misma el utilizada para la síntesis de ATP

Cuánto ATP forma una molécula de Palmitoil-CoA

La formación de palmitoil-CoA a partir de palmitato, consumía 2 enlaces de alta energía, por lo que habrá que
restárselos a los ATPs formados.
La oxidación completa de la glucosa rinde entre 36 y 38 moléculas de ATP
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Acetil-CoA en el hígado
Puede ser utilizado para formar cuerpos cetónicos

Destinos del acetoacetato

Es un cuerpo cetónico que a su vez da origen a dos cuerpos cetónicos diferentes
• El D-β-Hidroxibutirato: Reacción de reducción, en la cual los e- son aportados por el NADH
o Catalizada por la D-β-Hidroxibutirato deshidrogenasa
• La acetona: Reacción que puede ocurrir espontáneamente o catalizada por la acetoacetato descarboxilasa
La acetona es un compuesto volátil que es exhalado, mientras que el acetoacetato y el D-β-Hidroxibutirato formados
en el hígado se exportan a otros tejidos donde pueden ser utilizados como fuente de energía, por ejemplo al cerebro,
al músculo etc.
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Oxidación de ácidos grasos insaturados

La mayoría de los ácidos grasos presentes en los triacilgliceroles y fosfolípidos de animales y plantas son
insaturados.
• Se necesita además de las enzimas de la β-oxidación:
o Enoil-CoA isomerasa
o 2,4-dienoil-CoA reductasa
•
Oxidación de ácidos grasos de cadena impar
La mayoría de los ácidos grasos tienen un número par de carbonos y son oxidados totalmente a acetil-CoA.
Los ácidos grasos de cadena impar (sintetizados por plantas y organismos marinos) rinden acetil-CoA y una molécula
de propionil-CoA.
• Propionil-CoA: Molécula que tiene 3 carbonos
o Una vez formada va a ser transformada en succinil-CoA en un proceso en el que están involucradas
las enzimas:
▪ Propionil-CoA
▪ D-metilmalonil-CoA
▪ L-metilmalonil-CoA
▪ Succinil-CoA
El Succinil-CoA es un intermediario del ciclo de Krebs y entra al ciclo y ahí puede tener distintos destinos
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Regulación de la oxidación de los ácidos grasos: captación de ácidos grasos

La oxidación de los ácidos grasos se encuentra regulada a distintos niveles
1- Regulación de la captación de ácidos grasos por la mitocondria:
a. Inhibición alostérica de CPT1 por el malonil-CoA
b. Paso limitante de la oxidación de los ácidos grasos
c. Una vez que el ácido graso haya ingresado a la mitocondria será oxidado en la β-oxidación
d. Se regula a nivel de la malonil-CoA (es un intermediario en la síntesis de ácidos grasos)
i. Esto es importante porque esta evita que la síntesis y oxidación de ácidos grasos ocurra de
manera simultanea
e. La formación de malonil-CoA depende de las enzimas:
i. Acetil-CoA carboxilasa (ACC): Importante en la síntesis de ácidos grasos
1. Se encuentra muy regulada por la quinasa dependiente de AMP, por lo tanto, la
actividad de esta enzima y la cantidad de malonil-CoA dependerán también del
estado energético de la célula
ii. Malonil-CoA decarboxilasa (MCD)

Regulación de la oxidación de los ácidos grasos: β-oxidación

2- Regulación de la actividad de las enzimas de la β-oxidación
a. Retroalimentación negativa por los productos de la vía
b. Cuando los niveles de NADH/NAD+ se encuentran aumentados se inhibe la acil-CoA deshidrogenasa
c. El Acetil-CoA inhibe la tiolasa
d. Esto impide que se lleve a cabo oxidación de ácidos grasos cuando tenemos suficientes productos
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Regulación: Control transcripcional de los niveles de enzimas de la vía

• Regulación de la vía a largo plazo (los dos anteriores son a corto plazo)
• En esta regulación participan los factores de transcripción:
o Receptores activados por proliferadores peroxisomales (PPAR)
• PPAR α: Promueve la transcripción de:
o proteína transportadora de ácidos grasos
o translocasa de ácidos grasos
o carnitina aciltransferasa I
o carnitina aciltransferasa II
o acil-CoA deshidrogenasas
o Frente a la llegada de un ligando lleva un cambio conformacional a la asociación con otras proteínas,
migra al núcleo donde se une al elemento de respuesta
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Cadena respiratoria y fosforilación oxidativa

Tienen lugar en la membrana mitocondrial interna, es decir que es una vía un poco distinta a las anteriores vías (CK,
etc.).

Fases de la respiración celular

1. Oxidación de ácidos grasos, glucosa y algunos aminoácidos: Produce e acetil-CoA
2. Los grupos acetilo se incorporan al ciclo de Krebs, se oxidan a CO 2 y la energía liberada se conserva en
forma de ATP y en las coenzimas reducidas NADH y FADH2
3. Los electrones transportados por el NADH y el FADH2 se transfieren a la cadena respiratoria, donde fluyen
hacia el O2 para formar H2O y promover la formación de ATP en el proceso de fosforilación oxidativa.

4.
5.
Antony Píriz- Grupo 43 Fmed
Antony Píriz- Grupo 43 Fmed

Los electrones pasan a través de una serie de transportadores de membrana

Esos transportadores pueden transportar átomos de H o directamente como e- ya que son grupos capaces de
reducirse y oxidarse, además de aceptar y ceder e-
a) Ubiquinona:
a. Es el único componente de la cadena respiratoria que es de naturaleza lipídica
b. Es una molécula pequeña
c. Al ser liposoluble se mueve de una forma bastante rápida dentro de la bicapa lipídica
d. Por lo que se tiene una forma oxidada de la ubiquinona, que se representa con Q o también
coenzima Q
e. Gana un protón y un e- y pasa a radical semiquinona (QH*)
f. Gana un protón y un e- y se encuentra en su forma más reducida, el ubiquinol (QH 2)
g. Entonces la ubiquinona transporta e-, captando H+ + e-, por ende, lo que capta son hidrógenos y de
esta manera se reduce o se deshidrogena oxidándose.
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b) Citocromo:
a. Son proteínas que tienen grupos prostéticos hemo, o sea anillos de porfidina que como se muestra
en la imagen, contienen átomos de Fe que pueden pasar de Ferroso a férrico, o a la inversa, es decir
que captan e- y ceden e- únicamente
b. A diferencia de la ubiquinona y las flavinas, la transferencia de e- en los citocromos no está ligada a
la unión y liberación de protones, sino al estado redox del átomo de Fe (+2/+3)
c. Por lo que son transportadores de e-

c) Centros Fe-sulfurados
a. A diferencia de la ubiquinona y las flavinas, la transferencia de e- en los centros Fe-S no esta ligada
a la unión y liberación de protones
b. Son la coordinación de átomos de Fe con los azufres de cisteínas
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Cálculo de variación de energía libre

Los potenciales redox estándares permiten predecir el flujo de electrones

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Los inhibidores de la cadena respiratoria permiten confirmar experimentalmente dicha secuencia

• Si inhibo con rotenona que actúa sobre el complejo 1, es decir las primeras etapas, voy a tener NAD reducido
(NADH) y todos los demás componentes oxidados
• La antimicina A que deja reducidos NADH, Q y cyt b, mientras que los demás todos oxidados.
• Cianuro que inhibe la citocromo oxidasa deja todos los componentes reducidos a excepción del O2 que no se
puede reducir

Complejos de la cadena respiratoria

1. El citocromo c tiene una característica y es que es una molécula muy pequeña de 13KDa que se mueve más
rápido del lado externo de la membrana mitocondrial interna
o Transfiere e- de un complejo a otro
o No forma parte de los complejos debido a su naturaleza liposoluble
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Pasaje de e- a la Q (ubiquinona)
1. El NADH producido en el CK principalmente, es capaz de oxidarse por un complejo que tiene la actividad
NADH deshidrogenasa (es el complejo l)
o Se cataliza por medio de la liberación de e- y H+ que van a ir a FMN (Flavin mononucleótido) y el
posterior pasaje de e- únicamente a los centros Fe-S
o Posteriormente estos e- irán a reducir a la Q a partir de H+ que se tomarán del medio
2. En el complejo ll, a partir del succinato en una forma FAD dependiente oxida al succinato, es decir que el
succinato libera e-, y pasan a los centros Fe-S para su posterior pasaje a la Q
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El complejo l: NADH Ubiquinona oxidorreductasa

• El nombre tiene que ver con que es una oxidación de NADH y una reducción de la Q
• Luego de oxidado el NAD a NAD+, este podrá regresar al ciclo de Krebs a colectar hidruros (e - + 1p+ + 1p+
que se libera)
• Los e- que ingresan al complejo pasan a:
o Reducir el FMN
o Pasaje a los centros Fe-S
o Y el último término: 2e- + 2p+ van a reducir a la Q (ubiquinona) a QH2 (ubiquinol, reducida)
• En este complejo se genera un primer punto de bombeo de H+ al espacio intermembrana, es decir, es un
espacio que se le llama “positivo” que se va a generar un gradiente por lo que va a ser más positivo (más
negativo del lado de la matriz mitocondrial)
• El complejo l oxida al NADH y reduce a la Q: Parte de la energía liberada de la trasferencia de e-, se
conserva en un gradiente de H+

¿Cómo sería el pasaje de e- en el complejo l?

1. Del NADH al FMN que se reduce
2. Luego el FMNH2 pasa sus e- a los centros Fe-S
3. Los Fe-S pasan sus e- a la CoQ (ubiquinona) obteniendo su forma reducida CoQH2 (ubiquinol)
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Complejo ll: Succinato ubiquinona oxidorreductasa

El complejo II contiene a la enzima succinato deshidrogenasa del ciclo de Krebs y transfiere electrones del succinato
a la ubiquinona.
• La enzima succinato deshidrogenasa es la única que se encuentra en la membrana mitocondrial interna, y
esto tiene que ver con que en el momento en el que entra el succinato y se oxida a fumarato se liberan e- y
se reduce el FAD a FADH2, luego los e- pasan a los centros Fe-S y de estos, 2e- y 2H+ pasan a la Q (la
reducirán a QH2)
• Otras enzimas FAD dependientes como la glicerol-3P-deshidrogenasa y como las enzimas de la beta-
oxidación ceden sus e- directamente a la Q.
• O sea que cuando los e- entran por el succinato, me salteo el primer punto de bombeo de H+ que estaban en
el complejo l (teniendo consecuencias posteriores en el balance final)

Oxidación del succinato al fumarato

En eucariotas la succinato deshidrogenasa se encuentra unida a la membrana mitocondrial interna, es FAD
dependiente y tiene centros Fe-S
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Complejo lll: citocromo bc1 (Ubiquinona citocromo c oxidorreductasa)

Ya sea que los e- hayan entrado por el NAD o FAD, tengo la ubiquinona reducida, es decir QH2
• El complejo lll va a tomar los e- de la QH2
• Se le llama citocromo bc1 porque está compuesto por el citocromo b y el c1 en un complejo
transmembrana
• Tiene centros Fe-S
• Se oxida la QH2 y esos electrones de transferirán al citocromo c
o El citocromo c no se encuentra formando ningún complejo que está en la cara externa de la
membrana mitocondrial interna y se mueve fácilmente en 2D
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La ubiquinona
1. Primero la Q por acción de los e- que vienen del complejo l y ll, se reduce a QH2
2. Posteriormente cede esos e- al complejo lll, quedando oxidada y pudiendo ir nuevamente a recoger e- del
complejo l y/o ll
3.
Citocromo c
Transfiere electrones desde el citocromo c1 hacia la citocromo oxidasa. Se une muy débilmente a la membrana
mitocondrial interna

Complejo lV: citocromo aa3 o citocromo oxidasa

Es un complejo de varias moléculas que cataliza la reducción de oxígeno a H2O
• 𝑂2 + 4𝑒 + 4𝐻 + → 2𝐻2𝑂
−

• Tengo otro de los componentes de la oxidación completa de la glucosa o ácidos grasos

• En este complejo se da una nueva etapa de bombeo de protones y este es contra gradiente, ya que se está
aumentando la concentración de H+ en el espacio intermembrana, para esto se requiere energía, la cuál es
tomada de la liberación e- y la transferencia de e- al oxígeno para formar H2O.
o Los electrones llegan desde el citocromo c y se transfieren al Cu a y luego al Cu b
o Posteriormente esos e- se transfieren al O2 y al agregar H+ se forma H2O
o La energía de esa transferencia es utilizada en gran parte para el bombeo de H+
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Pasaje de e- lll-lV
1. La QH2 se oxida, libera e- que al Fe+++ (férrico) que se convierte a Fe++ (ferroso) – cit. B566
2. Luego el Fe++ (ferroso) pasa a Fe+++ (férrico) del cit. B562
3. Posteriormente pasa por los centros Fe-S
4. Luego pasan al c1
5. El c1 cede sus e- al cit. C
6. El cit. C cede sus e- a la citocromo oxidasa

En suma
• En el complejo ll, lll y lV: Parte de la energía generada por la transferencia de e- es conservada en un
gradiente de H+
• Se tiene a la Q y cit. C como moléculas móviles
• Tanto complejo l como el ll, pasan e- a la Q
• El complejo lll pasa e- al cit. C
• El cit. C pasa sus e- al citocromo lV
• En suma:
o Comencé con e- que entraron por el NADH que era el más electronegativo
o Y los e- terminaron en el O2 que es el más electropositivo
o Entre el NADH y O2, se tienen componentes con potenciales redox intermedios
• Entonces la transferencia de e- se da desde potenciales mucho más negativos a más positivos
• Hay generación de energía libre de Gibbs que se conserva en forma de gradiente de H+, energía
potencial que se puede usar para realizar trabajo
• Algo importante es que si los e- entran por el complejo l, se tienen 3 puntos de gradiente de H+, mientras
que, si ingresan por el succinato, se tienen 2 puntos de gradiente de H+
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El gradiente de protones genera un gradiente electroquímico

El gradiente electroquímico se utiliza para la síntesis de ATP

Una vez que el proceso de cadena respiratoria se dan equivalentes de reducción y O2, generándose un gradiente
electroquímico, un delta pH, el gradiente es la fuerza proto motriz que permite la síntesis de ATP.
• Hay un quinto componente denominado “partícula F0-F1” que cataliza la síntesis de ATP a partir de ADP y Pi
o F0 está embebida en la membrana
o F1 está hacia el interior de la matriz mitocondrial
o F0 sería un transportador de protones
o F1 sería una ATPasa o ATP sintasa
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Complejo de la ATP sintasa: F1

Tiene un hexámero que es muy importante que va a cumplir la catálisis, que es alfa, beta, alfa, beta, alfa, beta y una
especie de tallo que va a acoplar a F1 a F0
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El modelo de Boyer para la ATP sintasa

Existen 3 conformaciones posibles
β-ADP+Pi, β-ATP y β-Vacío
Los sitios donde se da la síntesis de ATP es en la subunidad β, frente a la entrada de protones desde el espacio
intermembrana hacia la matriz, esa entrada genera un cambio conformacional y este hace que el ADP+Pi pasen a
ATP, que en el β-vacío entre ADP+Pi, y que el ATP en el β sea liberado.
• Por cada 3 protones que bombean se forma 1ATP

Inhibidores del transporte de electrones

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Agentes desacoplantes
• Actúa como ionóforo disipando el gradiente de protones.
• Desacoplan la cadena respiratoria de la fosforilación oxidativa

Inhibidores de la ATPasa
• Ejemplo: El antibiótico oligomicina bloquea el flujo de protones a través de F0
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Inhibidores

Los inhibidores de la cadena respiratoria inhiben la síntesis de ATP

Esquema de estudios de cinéticas de consumo de O2 en mitocondrias aisladas.
Lo que se tiene es un curso temporal, en el que se mide consumo de oxígeno y síntesis de ATP.
• Si se agrega ADP+Pi al sistema: No hay síntesis de ATP y hay un leve consumo de O2
• Luego se agrega succinato: Al agregarlo se le está dando electrones a la cadena respiratoria entonces a
través del complejo ll, por lo tanto al tener electrones, la cadena respiratoria comienza a transportar
electrones al O2 y por eso se ve un aumento considerable del consumo de oxígeno y síntesis de ATP
• Al agregar Cianuro, se inhibe la cadena respiratoria, por lo que se detiene el bombeo de protones y ya no
hay gradiente electroquímico quedando sin energía para producir ATP y cesa la síntesis de ATP
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Los inhibidores de la síntesis de ATP bloquean el transporte de electrones

• Se agrega succinato y ADP+Pi, comenzando el consumo de O2 y síntesis de ATP
• Cuando agrego un inhibidor de la ATP sintasa, lo que se frena es la entrada de H+ a través de F0 y a causa
de esto el gradiente de H+ comienza a aumenta y por lo tanto la cadena respiratoria se empieza a enlentecer
y prácticamente tiende a 0, y por ende no se sintetiza ATP
• Luego si se agrega un agente desacoplantes. Al disipar este el gradiente hace que la cadena respiratoria
vuelva a bombear H+, pero estos no se pueden utilizar para sintetizar ATP

El gradiente de protones es utilizado también para el transporte

Algo importante a tomar en cuenta es cómo se va el ATP de la mitocondria.
• Lo hace a través de transportadores, que serían transportadores “antiporter”, es decir que transporta ATP4-
para fuera de la matriz mitocondrial y ADP3- para dentro de la matriz utilizando el gradiente porque ya que en
el espacio intermembrana hay más cargas positivas (H+) que, en la matriz mitocondrial, por lo que se
favorece el pasaje de ATP con 4 cargas negativas, hacia el exterior y ADP3- interior.
• El H2PO4- también es transportado al interior de la mitocondria, por un “symporter”, que utiliza a los H+ (al
gradiente), para hacer entrar fosfato.
• Entonces, ingresa ADP3- y entra H2PO4-, se forma ATP4- en la cadena respiratoria y sale de la matriz.
o Es decir que tengo dos transportadores que utilizan el gradiente de H+, lo que se traduce en una
forma de ahorrar ATP en un lugar donde el gradiente de H+ ya es energía que puede servir para el
transporte de estas moléculas.
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Otros transportadores que utilizan el gradiente de protones

• Se puede ver el trans porte de Malato que es un transportador de dicarboxilato que lo que hace es entrar
fosfato y sacar malato
• El citrato y el malato que se intercambian por un transportador de tricarboxilato
• El piruvato que también entra favoreciéndose el gradiente, en este caso intercambiando OH-
• La mayor parte de los transportadores específicos de la membrana mitocondrial interna utilizan el gradiente
de H+ para transportar moléculas de un lado al otro. (entre matriz y espacio intermembrana)
• Lo que se muestra es que la MMI es altamente selectiva y tiene trasportadores específicos
o Por ejemplo, el oxalacetato nunca sale ni entra a la matriz ya que no hay transportadores
o El piruvato que se formó en la glucólisis y que luego es sustrato de la PDH, entre medio tiene que se
transportado a la matriz mitocondrial por el transportador de MMI.
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La MMI es impermeable al NAD+

Hay sistemas de lanzadera para sacar equivalentes de reducción.
• Lanzadera del aspartato malato (corazón, hígado, riñón)
o Se presenta un transportador malato-α-cetoglutarato y un transportador glutamato-aspartato
o Transporte del malato:
▪ Se tiene el NADH producido en la glucólisis, ya que no puede pasar a través de la MMI lo
que hace es que hay una malato-deshidrogenasa que cataliza la reducción de oxalacetato a
malato
▪ Se oxida el NADH a NAD+ que puede ir a pasar por la glucólisis nuevamente
▪ El malato entra mediante el transportador malato-α-cetoglutarato a la matriz y por acción de
la malato deshidrogenasa se oxida a oxalacetato, libera e- y estos son captados por el NAD+
presente en la matriz mitocondrial
▪ Como consecuencia queda que una molécula de NADH en el espacio intermembrana
corresponde con una molécula de NADH de la matriz mitocondrial y este pasa a la cadena
respiratoria
▪ Hay toda una oxidación del oxalacetato que pasa a aspartato por acción de la aspartato
aminotransferasa
▪ El aspartato sale de la matriz por el transportador glutamato-aspartato y se transamina a
oxalacetato por acción de la aspartato aminotransferasa y ese oxalacetato puedo ir a recoger
otro NADH para pasar nuevamente a malato.
▪ Lo que hace esta lanzadera es pasar NADH citosólico a NADH mitocondrial
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Lanzadera glicerol 3P (cerebro y músculo esquelético)

• Esta lanzadera está compuesta por:
o La glicerol 3P deshidrogenasa citosólica y una mitocondrial (en la MMI)
o Lo que sucede es que a partir de NADH formado en la glucólisis la dihidroxiacetona fosfato pasa a
glicerol 3P por acción de la enzima la glicerol 3P deshidrogenasa citosólica, es decir que el NADH
cede sus e-, la dihidroxiacetona fosfato se reduce a glicerol 3P
o Luego, pro acción de la glicerol 3P deshidrogenasa mitocondrial, el glicerol 3P vuelve a oxidarse a
dihidroxiacetona fosfato
▪ Los e- liberados aquí pasan al FAD, porque esta enzima (la glicerol 3P deshidrogenasa
mitocondrial) es FAD dependiente, y el FADH2 pasa sus e- a la Q (ubiquinona)
▪ Es decir que ese pasaje es el equivalente a que los e- entren a nivel del complejo ll, se
pierden el bombeo de H+ del complejo l
o Entonces por cada NADH producido en la glucólisis y que entre en la lanzadera glicerol 3P se tendrá
un FADH2, por lo que ya no son 3 sitios de caída de energía, sino que son 2 sitios (pierdo la caída de
energía del complejo l)
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Diferentes entradas de NADH

• Por cada una de las caídas de energía, se tiene energía suficiente para sintetizar una molécula de ATP, se
puede decir que el NADH, por cada 2 e- que entran por el NADH se sintetizan 3 moléculas de ATP, mientras
que si entran por el FADH2, se sintetizan dos moléculas de ATP
• Si el NADH que entra a través de la lanzadera del aspartato malato, este NADH valdrá 3 moléculas de ATP
o Mientras que si entra por la lanzadera del glicerol 3P, entra por el FADH2, ese NADH de la glucólisis
corresponderá a 2 moléculas de ATP
•
Producción de ATP
• Por cada molécula de glucosa oxidada completamente a CO2 Y H2O:
o En la glucólisis:
▪ 2 NADH
▪ 2ATP
o Oxidación del piruvato (2 por glucosa):
▪ 2NADH
o Acetil-CoA oxidación (2 por glucosa):
▪ 6 NADH (3 por cada acetil-CoA)
▪ 2 FADH2 (1 por cada acetil-CoA)
▪ 2 ATP o 2 GTP (1 por cada Acetil-CoA)
• Considerando que por cada NADH se producen 3 moléculas de ATP y por cada FADH2 se producen 2
moléculas de ATP
o La oxidación completa de la glucosa genera 38 ATP
• En caso que los NADH citosólicos entren por la lanzadera del glicerol 3P:
o Los primeros 2 NADH producidos en la glucólisis producirán 2 moléculas de ATP
o La oxidación completa de la glucosa generará 36 moléculas de ATP
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Interpretación de gráfico de consumo de oxígeno

• Los e- ingresan a la cadena de transporte de electrones a nivel del complejo l y ll
• Estos electrones son transportados a través de los complejos mitocondriales al O2 que es el aceptor final de
la cadena de transporte de e-
• A medida que se transportan los e- por la cadena, se genera un gradiente de protones
o El mismo es utilizado por la ATP sintasa para sintetizar ATP a partir de ADP y fosfato inorgánico
• En la práctica, se realizan medidas de concentración de O2, con el fin de estudiar la actividad mitocondrial
o Para esto, se utiliza un electrodo que censa la concentración de dentro de un espacio cerrado en el
cual se encuentra la muestra, en este caso, las mitocondrias aisladas
• A partir de estas medidas, se construyen gráficos de concentración de O2 en función del tiempo, esto es
posible, ya que una mitocondria con su cadena de transporte de e- funcional, consume O2
• Este tipo de gráficos se obtiene a partir de mitocondrias aisladas, por lo que es necesario agregar sustratos
que aporten e- a la cadena de transporte de e-
o Piruvato como sustrato del complejo l
o Succinato como sustrato del complejo ll
• Al agregar piruvato a un preparado de mitocondrias aisladas, el mismo ingresa en la matriz mitocondrial
donde sufre una descarboxilación oxidativa catalizada por la PDH, donde se donan los e- al NAD+ y
formando NADH
o El NADH transfiere estos e- al complejo l que pasan por medio de la Q al complejo lll para luego
pasar esos e- al citocromo, el cual los transfiere al complejo lV el cual reduce al O2 que pasa a H2O
▪ Esto se observa en la pendiente de la curva
o A medida que los e- van pasando por los complejos mitocondriales, los complejos l, lll y lV bombean
protones desde la matriz mitocondrial hacia el espacio intermembrana, generando así el gradiente
electroquímico de H+
o Luego del agregado de sustrato se agrega el ADP, lo cual estimula la ATP sintasa para que esta
sintetice ATP a partir de ADP y Pi disipando el gradiente de H+
o Esto genera que la cadena respiratoria aumente la velocidad de transporte de e- para recuperar el
gradiente de H+ disipado, lo cual se evidencia en un aumento de la pendiente de la recta
o Esto ocurre en mitocondrias acopladas
▪ El acoplamiento de mitocondrias se refiere a que la síntesis de ATP por la ATP sintasa lleva
al aumento del transporte de e-por la cadena respiratoria
o En mitocondrias desacopladas no se observa un aumento en la pendiente de la recta frente al
agregado de ADP, ya que el gradiente de H+ en estas mitocondrias desacopladas está siendo
disipado por otros procesos que no implican la síntesis de ATP
▪ Un ejemplo sería la producción de calor
Antony Píriz-G43 Fmed
• Si a un preparado de mitocondrias aisladas se le agrega succinato, este le donará directamente los e- al FAD
del complejo ll, generando un flujo de e- a la cadena respiratoria hasta el O2 como aceptor
o Esto de traduce en un aumento en la pendiente de la recta
o Luego del agregado de ADP, estimulándose la síntesis de ATP a partir de ADP y Pi, conduciendo en
un aumento del transporte de e-, traduciéndose en un aumento en la pendiente de la curva, ya que
las mitocondrias consumen más O2, en caso de que las mitocondrias se encuentren acopladas

• En presencia de Rotenona, un inhibidor del complejo l, frente al agregado de piruvato, los e- no ingresan en
la cadena respiratoria, por lo que no llegan al complejo lV y las mitocondrias no consumen O2
o Si se agrega ADP tampoco se observa un cambio en la concentración de O2
o Frente al agregado de succinato, los e- ingresan en la cadena de transporte de e- por el complejo ll,
por lo tanto en mitocondrias inhibidas por rotenona igualmente se observa un aumento en la
pendiente de la curva, ya que los e- continuarán por la cadena consumiendo O2
Antony Píriz-G43 Fmed
• En presencia de los inhibidores lll o lV, los inhibidores no podrán llegar al O2, por lo que no disminuirá la
concentración de O2 en el preparado mitocondrial

• Los desacoplantes mitocondriales, como por ejemplo el FCCP, disipan el gradiente de H+ de forma
independiente de la ATP sintasa, esto genera un gran aumento en el flujo de e-, con el intento de mantener el
gradiente de H+, lo cual se observa en un gran aumento en el consumo de O2, que se evidencia con un
aumento de la pendiente de la recta
Antony Píriz-G43 Fmed

Ruta de las pentosas fosfato

• ¿Cuáles son los destinos de la Glucosa-6P?

Fases de la vía de las pentosas fosfato

• Fase oxidativa irreversible
• Fase no oxidativa reversible
Fase oxidativa irreversible
• La glucosa-6P es oxidada a Ribosa-5P
• El NADP+ es el aceptor de electrones de la oxidación reduciéndose a NADPH
• Se tienen 2 etapas en esta vía, donde se forman NADPH
• En la primera etapa que es realizada por la Glucosa-6P deshidrogenasa
▪ La glucosa-6P pasa a 6-Fosfogluconato-δ-lactona para luego pasar a 6-Fosfogluconato por la
lactonasa
• En la segunda etapa que es realizada por la 6-Fosfoglluconato deshidrogenasa el 6-
Fosfogluconato para a Ribulosa-5P para luego por acción de la fosfopentosa isomerasa pasar a
Ribosa-5P
Antony Píriz-G43 Fmed
Antony Píriz-G43 Fmed

Resultado de la primera fase de la vía: Fase oxidativa irreversible

• Se forma:
o NADPH
o Ribosa 5P
• El destino o la cantidad que se forme de cada producto dependerá de las necesidades de la célula
•
Fase no oxidativa reversible
• Las pentosas fosfato son transformadas en hexosas-fosfato y triosas fosfato (intermediarios de la glucólisis)
• Síntesis de ribosa-5P a partir de intermediarios de la glucólisis

Cómo un azúcar de 5C se transforma en uno de 6 como la F-6-P

• La ribosa-5P y Xyulosa-5P van a sufrir una reacción catalizada por la transcetolasa, donde se van a
unidades de 2C, para formar Sedoheptulosa 7-P y Gli-3-P
• Luego la transaldolasa va a activar la transferencia de unidades de 3C para formar Fluctosa-6P y
Eritrosa-4P
• Luego otra trancetolasa va a actuar transfiriendo 2C entre a Xilyulosa-5P y Eritrosa-4P, para finalmente
formar Gliceraldehído-3P y Fructosa-6P
• En esta fase se comparten intermediarios en la glucólisis y la gluconeogénesis
• Todas las enzimas son citosólicas
Antony Píriz-G43 Fmed
• Primer reacción: Transcetolasa

• Segunda reacción: Transaldolasa

• Tercera reacción: Trancetolasa

Antony Píriz-G43 Fmed

Según las necesidades de la célula

• NADPH
o Biosíntesis:
▪ Ácidos grasos, colesterol, hormonas esteroideas, aminoácidos (hígado, gl. Mamaria, tej.
Adiposo y corteza adrenal ricos en enz PP)
o Mantener el estado reductor en la célula
▪ Reducción del glutanión (GSH), defensa contra el aumento de oxidantes
• Ribosa-5P
o Síntesis de nucleóidos (ATP, NADH, ácidos nucléicos)
Antony Píriz-G43 Fmed

¿Qué se realiza según la necesidad de la célula?

• Si las céulas necesitan NADPH y ribosa-5P: Fase oxidativa
• Si las células necesitan NADPH: Fase oxidativa y fase no oxidativa
• Si las células necesitan Ribosa-5P: Fase no oxidativa en sentido inverso (poco probable en las células)

Balance global de la vía de las pentosas fosfato

6G6P + 12NADP+
↓
5F6F + 6CO2 + 12NADPH

Regulación de la vía de las pentosas fosfato

• La regulación involucra a la primera enzima de la vía
o La Glucosa-6P deshidrogenasa es inhibida por NADPH
o La relación NADPH/NADP+ va a determinar si la vía está inhibida o funcional
o 100:1 normal
o El NADP+ es un modulador alostérico positivo de la enzima
Deficiencia de G6PDH
• A partir de la G6P y formándose la ribosa-5P se genera el NADPH, necesario para mantener el glutatión
(GSH) reducido (GSSG)
• El GSH debe estar reducido porque la célula genera compuestos oxidantes que causan mayor oxidación en
la células, por lo que se forman los agregados de hemoglobina entrecruzadas denominadas “cuerpos de
Heinz”, y someten a las células a un estes mecánico cuando tratan de pasa a través de pequeños capilares
• Resulta en la hemólisis y la causa de anemia hemolítica
• Enfermedad hereditaria ligada al cromosoma X
• La enfermedad puede causar una hemolisis severa al ingerir las “Favas”
• Los eritrocitos al no poseer la maquinaria para generar poder reductor se mueren
▪ La destrucción acelerada por parte del bazo de los eritrocitos afectados ofrece una
resistencia real contra la malaria y contra la anemia de drepanosítca
• Se produce una desregulación del crecimeinto celular y la señalización
• Problemas de desarrollo embrionario
• Mayor suceptibilidad a enfermedades degenerativas
•
Aumento de G6PDH
• Patologías asociadas:
o Fallas del corazón
o Diabetes tipo 2
o Hipertensión
o Cáncer
Deficiencia parcial de transcetolasa
• La enzima requiere tiamina como cofactor
• Síndrome de Wernicke-Korsakoff
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Gluconeogénesis
• Concepto: Síntesis de glucosa a partir de precursores no carbohidratados
• La glucosa en la sangre es la principal fuente de energía en el cerebro, médula renal, testículos y eritrocitos

Después de la comida, la glucosa es la fuente de energía en sangre, siendo oxidada por el hígado mediante
glucólisis, donde se convierte en piruvato y el exeso de este es guardado como glucógeno mediante la
glucogenogénesis.
Durante el ayuno, el hígado libera glucosa a la sangre de forma que los tejidos dependientes de glucosa no sufran
por pérdida de energía. Hay dos mecanismos involucrados en este proceso, la glucogeno lisis y la síntesis de glucosa
a partir de precursores no carbohidratados.
Los niveles de glucosa en sangre también tienen que ser mantenidos durante el ejercicio y las células musculares
toman glucosa de la sangre para oxidarla y proveerse de energía.
Las hormonas, particularmente insulina y glucagón dictan si la glucosa flye a través de la glucólisis o si las reacciones
van en la dirección opuesta y se produce glucosa vía gluconeogénesis.

¿Dónde ocurre la gluconeogénesis?

• Ocurre en:
o Hígado: 90%
o Riñón: 10%
o Ocurre en condiciones de ayuno
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Precursores gluconeogénicos
• Priductos de la glucólisis: Lactao y priuvato
• Esqueleto carbonado de la mayoría de los amioácidos (aminoácidos glucogénicos)
• Glicerol proveniente de los triacilglicéridos
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Precursor piruvato
• Tanto aminoácidos como lactato y propionil-CoA (proveniente de los ácidos grasos de cadena impar)
convergen en el oxalacetato, el cual es un intermediario del CK, es un intermediario de alta energía, porque
su descarboxilación exergónica, provee la energía necesaria para la síntesis de fosfoenolpiruvato
• Los ácidos grasos con número ipar de carbonos que son obtenidos principalemte de vegetales ingeridos
producen propionil-CoA, estos carbonos pueden ser precursores de glucosa, pero es un fuente menor
o El propionil CoA es convertido en metilmalonil-CoA, para luego pasar a succinil-CoA y luego a
oxalacetato ya que es un intermediario del CK.
o Los otros carbonos de la cadena impar dan acetil-CoA, a partir del cual no se puede sintetizar
glucosa
• EL glicerol pasa directamente a un punto de la vía más avanzado que es su transformación en
dihidroxiacetona fosfato
• El piruvato se produce en el hígato a partir de precursores gluconeogénicos como el lactato y la alanina
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Precursor lactato
• El lactato que entra en el hígado es oxidado a piruvato por la lactato deshidrigenasa
• El piruvato es convertido en glucosa por la gluconeogénesis en el hígado
• La glucosa generada pasa a la sangre y es absorvida por el músculo esquelético
• De esta manera el hpigado suminidtra glucosa para la contracción muscular
• El músculo obtiene ATP al convertir la glucosa en lactato para que este pase nuevamente a la sangre y
vuelve al hígado
• Este ciclo de reacciones son denominadas en conjunto “ciclo de Cori”
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Precursores: aminoácidos
• Vienen principalemte del pool de aminoácidos en el músculo, donde pueden ser obteidos a partir de la
degradación de proteínas
• La alanina que es el mayor aminoácido gluconeogénico, se produce en el músculo a paritr de otros
aminoácidos y luego el destino final es la glucosa
• Algunos aminoácidos forman intermediarios del CK los cuales a su vez pueden generar glucosa
• Los únicos aminoácidos que no pueden ser convertidos en oxalacetato en animales son la lisina y la leucina,
porque su ruptura da lugar a acetil-CoA y no hay rutas en los animales para poder convertir acetil-CoA a
oxalacetato y por lo tanto a glucosa
o Se ve que esos aminoácidos son cetogpenicos, es decir que son capaces de sintetizar cuerpos
cetónicos
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Alanina
• La alanina como el lactato es un precursor importante en el músculo
• Se forma del piruvato por transaminación en un reacción cataizada por la alanina aminotransferasa
o La reacción inversa tiene lugar en el hígado
o A este ciclo de reacciones se le denomina “ciclo de la alanina”
• La alanina generada en el músculo, puede ser utilizada para generar glucosa en el hígado
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Precursor: Glicerol
• Se produce liberándose de las reservas adiposas de triglicériodos, dando ácidos grasos y glicerol, reacción
catalisada por la lipasa
• Esos ácidos grasos van a sufrir beta-oxidación y formarán acetil-CoA
• El glicerol es transformado en dihidroxiacetona-fosfato y entra en la vía gluconeogénica para sintetizar
glucosa
• El glicerol también es capaz de generar NADH pasando antes por la transformación de dihiddroxiacetona-
fosfato
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Enzimas de la glucólisis
• Había 3 reacciones que eran muy exergónicas en condiciones reales y por lo tanto prácticamente
irreversibles
• La mayoría de la reacciones de la gluconeogénesis son reaccione sinversas de la glucólisis, sin envargo, las
enzimas de la glucólisis son todas citosólicas, mientras que en la gluconeogénesis hay agunas que son
citosólicas y en otros casos hay enzimas como la glucosa-6-fosfatasa que está unida al retículo
endoplásmico, la piruvato carboxilasa que es una enzima mitocondrial
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1- Conversión de piruvato a fosfoenolpiruvato

• En la glucólisis el fofoenolpiruvato se convierte en piruvato catalizado por la piruvato quinasa
• En la gluconeogénesis, el íruvato se tranformará en fosfoenolpiruvato por la acción de 2 enzimas, la fosfoenol
piruvato carboxiquinasa y la piruvato carboxilasa
• En la mitocondria:
o El piruvato se va a carboxilar por medio del carbonato generado a partir del CO2 y usando ATP, se
convertirá en oxalacetato, liberando fosfato inorgánico
o Reacción catalizada por la piruvato carboxilasa que usa biotin

• Citosol o mitocondria:
o El oxalacetato se transforma en fosfoenlpiruvato por acción de la fosfoenolpiruvato carboxiquinasa
o Esta reacción utiliza GTP
o En el citosol (reversible en condicones intracelulares)
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La gluconeogénesis necesita NADH en el citosol

• Según el precursor hay dos posibles caminos
o Malato deshidrigenasa
o Lactato deshidrogenasa
• El oxalacetato generado a partir del piruvato en la reacción catalizada por la piruvato carboxilasa, o a partir
de aminoácidos que forman intermediarios del CK, no pued atravesar la MMI
o Si el oxalacetacetato se transportara a traves de la MMI como malato o como aspartato, depende de
las necesidades de equivalente de reducción en el citosol
▪ En el cictosol nosotros necesitamos tener NADH para reducir el 1,3-bifosfoglicerato a
gliceraldehído-3P durante la gluconeogénesis
o Por lo tanto el oxalacetato es descarboxilado a fosfoenol piruvato, esto pued ocurrir en la miocondrial
o para que el malato o aspartato atraviece la MMI, se vale de la lanzadera malato-aspartato
o En esta lanzadera el malato sale de la mitocondria y se convierte en el citosol a oxalacetato,
generando el NADH para que la síntesis de glucosa pueda darse
o El oxalacetato que sale por la lanzadera de malato-aspartato es convertido en PEP por la
fosfoenolpiruvato carboxiquinasa citosólica
• Si el precursor es lactato el transporte de malato es inhibido
o Esto se debe a que ya se genera NADH en el citosol cuando el lactato se transforma en piruvato en
la reacción catalizada por la lactato deshidrigenasa
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Siguientes pasos de la gluconeogénesis

• Conzando con el fosfoenolpiruvato formado en el primer rodeo podemos ver que los sigueintes pasos de la
gluconeogénesis ocuirren en el citosol en pasos reversos de la glucólisishasta que se llega al gliceraldehído-
3P que se isomeriza a dihidroxiacetonafosfato se condezan y forman la fructosa-1,6-bifosfosfato
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2- Conversión de la fructosa-1,6-bifosfato en fructosa 6P

• La enzima fructosa-1,6-bifosfatasa libera un Pi de la fructosa-1,6-bifosfato convirtiéndola en fructosa-6P
• No es la reacción inversa a la catalizada por la PFK-1, el ATP no se produce cuando se remueve el fosfato
de la posición 1 de la fructosa, y esto se debe a que es un enlace fosfato de baja energía
• La sigueinte reacción de la gluconeogénesis, en la cual la fructosa 6P se convierte en glucosa 6P, se utiliza la
misma enzima isomerasa que se utiliza en la reacción inversa que se da en la glucólisis
(Fosfohexoisomerasa)

3- Conversión de Glucosa-6-P en glucosa

• La glucosa-6-fosfatasa hidroliza el fosfato, liberando Pi, de la glucosa-6P
• Se forma gucosa que puede ir a la sangre
• En el caso de esta reacción, no es la inversa a la de la glucólisis
• Esta enzima no solo es utilizada en la gluconeogénesis sino que también es utiliza en la producción de
glucosa por la ruptura del glucógeno
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Balance de la gluconeogénesis
• Además de ocurrir en ayuno, la gluconeogénesis también es estimulada en el ejercicio prolongado, por un
dieta rica en proteínas y bajo condiciones de estrés
• En la tabla se muestran las reacciones que se dan x2
• Durante las reacciones gluconeogénicas, se rompen 6 enlaces fosfato de alta energía
• Se necesitan 2 piruvatos para la síntesis de 1mol de glucosa
• Como 2 moles de pituvato son carboxilados para formar oxalacetatos se requieren 2 ATPs
• Ese oxalaceta luego, para formar fosfoenolpiruvato necesita 2 GTP
• Por otro lado en la reacción catalizada para la formación de 1,3-bifosfoglicerato se utilizan otros 2 ATPs
• Se requiere energía en formas de equivalentes, los cuales son utilizados para en la reacción de 1,3-
bifosglicerato para dar gliceraldehído-3P
• En condiciones de ayuno, la energía requerida para la gluconeogénesis es obtenida de la beta-oxidación
• Comparando el balance de la gluconeogénesis con el de la inversa de la glucólisis, se puede observar que en
la gluconeogénesis se tienen 2ATP y 2GTP más
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¿Cómo se regula la gluconeogénesis?

• La glucólisis y la gluconeogénesis están reguladas en forma recíproca
• La gluconeogénesis es estimulada por el flujo de los sustratos desde los tejidos perfiéricos al hígado
o El glicerol es liberado desde el tejido adiposo cuando los niveles de insulina son bajos o los niveles
deglucagón u otras hormonas gluconeogénicas que aumentan en sangre
o El lactato es producido por el músculo durante el ejecicio y por los eritrocitos
o Por otro lado los aminoácidos son liberados desde el músculo si el nivel de insulina es bajo o cuando
el cortisol es elevado
▪ También se utilizan aminoácidos para la gluconeogénesis cuando la ingesta de proteínas es
alta y la de carbohidratos es baja
• Los factores que promueven el flujo de carbonos desde el piruvato a la glucosa incluye:
o La disponibilidad de sustrato
▪ Velocidad de glicólisis: Controlada por la concentración de glucosa
▪ Veloccidad de gluconeogénesis: Controlada por la concentración de lactato y otros
precursores
▪ Cambios en la cantidad y actividad de enzimas
• Las cantidades y actividades de las enzimas de cada ruta están controladas de tal
manera que que no pueden darse ambas rutas simultaneamente
• Las 3 vías de rodeo de la gluconeogénesis están reguladas por:
o Piruvato carboxilasa
o Fructosa-1,6-bifosfatasa
o Glucosa-6 fosfatasa
Antony Píriz-G43 Fmed
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Regulación e la reacción fosfoenolpiruvato/piruvato

• El piruvato es un sustrato clave para la gluconeogénesis, el cual deriva del lacato y de aminoácidos,
particularmente la alanina
• El piruvato no se va a convertir a acetil-CoA en las condicones que favorecen la gluconeogénesis porque la
piruvato deshidrigenasa va a estar inhibida. Por lo tanto, el piruvato se convertirá en oxalacetato por la
piruvato carboxilasa
• La piruvato carboxilasa está activada cuando la acetil-CoA está aumentado y la misma inhibe la PDH
• No solo el actil-CoA va a activar a la piruvato carboxilasa, sino que va a tener también una regulación
negativa por el ADP
• La carga energética alta o niveles de precursores de glucosa altos hacen que disminuya la glucólisis y
amente la gluconeogénesis
Antony Píriz-G43 Fmed

Regulación de la fructosa-1,6-bifosfatasa
• Una modulación muy importante de la misma viene dada por la fructosa 2,6-bifosfato
o Como se vió con la PFK-1 este modulador era un activador de la enzima
o En el caso de la fructosa-1,6-bifosfatasa el modulador actúa como inhibidor
o La fructosa-2,6-bifosfato es el principal regulador de la PFK-1 y de la fructosa-1,6-fosfatasa
• Cuando disminuye la fructosa-2,6-bifosfato, se estimula la gluconeogénesis y cuando aumenta activa la
glucólisis
• A la vez se tiene al glucagón como regulador de esta enzima
o Cuando disminuye la glucosa se libera glucagón, liberándose AMPc, se activa la quinasa dependinte
de de AMPc y se fosforila la PFK-2 y se esa forma se inactiva la fructosa-1,6-bifosfatasa

Ciclos fútiles o de sustrato

• La fructosa 6P pasando a fructosa 1,6-bifosfato
o Si la reacción se da hacia un lado o el otro, se da de igual manera un gasto de ATP
o No se producen fisiologicamente gracias a la regulación conjunta de ambas vías:
▪ Glucolítica
▪ Gluconeogénica

La ingesta de alcohol y la gluconeogénesis

• Se puede observar que a partir del etanol se forma acetaldehído por la alcohol deshidrigenasa
o En esta reacción se genera NADH
o Si se ingiere mucho alcohol esta reacción se dará muchas veces por lo que la concentración
de NADH se verá aumentada
o Se tendrá un exeso de NADH en el citosol, por lo que se inhibirá la gluconeogénesis hepática:
▪ Ya que no se tendrá lactado ni malato disponible para que entre en gluconeogénesis
▪ Se consume piruvato y oxalacetato: inhibición de la gluconeogénesis
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Síntesis de ácidos grasos

Generalidades de la síntesis:
• Es una vía metabólica diferente a la beta oxidación:
o Sitio: Citosol
o Intermediarios unidos a -SH de ACP/CoA
o El poder reductor para la síntesis es NADPH vs. NADH y FADH2
• Utiliza un precursor de unidades de 3 carbonos: Metionil-CoA
• Los animales no pueden convertir AG en glucosa
• Si bien la síntesis se produce en la mayoría de las células, el hígado es el principal sitio de esta vía
metabólica

La síntesis y degradación de AG se parecen en las reacciones químicas

• Si bien son diferentes vías, las reacciones presentan cierta analogía
• En la beta-oxidación, en un principio se tiene:
1. Oxidación
2. Hidratación
3. Nueva oxidación
4. Ruptura de una unidad de 2 carbonos
• Mientras que en la síntesis de AG se tiene:
1. Condensación: A partir del grupo activado malonil-CoA
▪ Se introducen 2C, es decir que el malonil-CoA pero introduce 2
2. Reducción
3. Deshidratación
4. Reducción
• Lo que se tiene entonces en la síntesis de AG es una beta-reducción dependiente del NADPH
• Se diferencian en la dependencia de NADPH (en beta-ox es NADH y FADH2) y en la necesidad de un
intermediario activado malonil-CoA

Generalidades de la síntesis de AG
• Síntesis de malonil-CoA
• Proteína transportadora de acilo (ACP)
• Ácido graso sintasa (SAG)
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1) Síntesis de malonil-CoA: Paso limitante de la vía: Acetil-CoA carboxilasa

• Es una reacción de carboxilación, se parte de acetil-CoA formándose malonil-CoA
• Se consume 1ATP
• La enzima Acetil-CoA carboxilasa utiliza biotina como transportador de CO2, es decir que la carboxilación se
debe a que la coenzima de la acetil-CoA carboxilasa es la biotina
• Es una enzima limitante de la síntesis, ya que está al comienzo, es decir, si no hay malonil-CoA
(intermediario activado), no hay síntesis de AG)
• Acetil-CoA carboxilasa
o Dímero de aproximadamente 500kDa.
o El dímero es inactivo, pero en presencia de citrato se polimeriza en una forma filamentosa
(observable en ME) activa
o Los acetil-CoA de cadena larga favorecen la despolimerización

2) Los intermediarios de la síntesis están unidos a una proteína transportadora de Acilos (ACP)
• Todos los intermediarios de la SAG se activan por unión de una ACP
• Proteína pequeña de aprox. 77 kDa
• Su grupo prostético es la fosfopanteteína
• Esta proteína actúa como “brazo oscilante” durante la SAG
o Se le llama “oscilante” porque la síntesis está dada por un complejo multienzimático y la enzima permite
movimientos para que el producto de una reacción enzimática se encuentre rápidamente con la otra enzima y
sea su sustrato
Antony Píriz-G43 Fmed

Síntesis de AG: Cebado del complejo de la AG sintasa

• La ACP interviene en la síntesis de SAG a través de las actividades acetil-CoA tranacilasa y malonil-CoA
tranacilasa
• En la primera reacción el acetil-CoA con la ACP dan Acetil-ACP y CoA, para que luego el Malonil-CoA y el
ACP reaccionen y formen malonil-ACP y CoA

Síntesis de AG: Complejo de la AG sintasa

• En animales está formada por dímero de dos subunidades idénticas de masa molecular 272 kDa cada una
o Cada subunidad presenta 7 actividades enzimáticas, es una enzima multifuncional
• En E. coli, una bacteria, son 7 enzimas individuales
• Las reacciones 1 y 2 son de “cebado” de la enzima, donde un grupo acilo de acetil-CoA se une al -SH de una
cisteína y un grupo malonil de un malonil-CoA se une al -SH del grupo prostético fosfo-panteína de la ACP
• La reacción 3 es la condensación entre malonilo-ACP y el grupo acetilo para formar beta-hidroxiacil-ACP con
liberación de CO2
• Las reacciones 4 y 6 son reducciones a expensas de NADPH y deshidratación
• La reacción 7 es la hidrólisis del grupo acilo por una tioesterasa para formar Ácido palmítico (16C)
o La tioesterasa es la que controla el largo de la cadena
• AG sintasa
o AT: acetil-CoA transacilasa
o MT: malonil-CoA transacilasa
o KS: beta-cetoacil-ACP sintasa
o KR: beta-cetoacil-ACP reductasa
o HD: beta-hidroxiacil-ACP deshidratasa
o ER: Enoil-ACP reductasa
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Antony Píriz-G43 Fmed

Síntesis de AG: Cebado del complejo de la AG sintasa

• Incorporación de un acetilo + un malonilo a la ACP
• Cuando ya están unidos el acetilo y malonilo, se produce un ataque al carbono del acetilo por parte del
malonilo (después de la imagen se explica)

Cebado- 4 reacciones sucesivas de condensación, reducción, deshidratación y reducción

1) Condensación
• Se tiene la enzima cebada, unida a la ACP: 1 malonilo y un acetilo
• Hay un ataque al carbono que está unido a azufre del grupo acetilo para producir una condensación por parte
de la beta-cetoacil-ACP sintasa (KS)
• Es la primera reacción de condensación
• Que da un SH libre y al otro azufre (donde estaba unido el malonilo) le queda unida una molécula de 4
carbonos, donde en carbono beta hay un grupo carbionilo
• Sucedió una condensación y una decarboxilación, es decir, se libera CO2
Antony Píriz-G43 Fmed

2) Reducción
• Se produce una reacción de reducción, catalizada por la beta-cetoacil-ACP reductasa (KR)
• Es NADPH dependiente
• Se reduce el carbono beta que pasa de carbonilo a alcohol
• Obteniéndose, un D-3-hidroxi-butiril-ACP
• Es una beta-reducción, es posible gracias a los e- que aporta el NADPH

3) Deshidratación
• Similar a la hidratación que se da en la beta-oxidación
• Se forma entre alfa y beta un doble enlace
• El producto es un trans-delta2-enoil-ACP
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4) Reducción
• El trans-delta2-enoil-ACP sufre una reducción en el carbono 2 y 3, quedando saturada la cadena
• Se obtiene butiril-ACP, un grupo acilo saturado
• El butiril-ACP está listo para que una vez que entre acetilo en el grupo SH libre, comience un nuevo ciclo y se
den nuevamente las 4 reacciones

Reacciones sucesivas de la síntesis de AG

• Luego de producirse las 4 reacciones sucesivas, entra otro malonilo, se producen nuevamente las 4
reacciones, obteniendo cada 4 reacciones 2 carbonos más en la cadena anterior
• Se produce hasta formar una cadena de 16 carbonos, que corresponde al palmitato
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Balance de la síntesis de ácido palmítico

• 1 molécula de acetil-CoA aporta 2 carbonos y 7 moléculas de malonil-CoA aportan 14 carbonos, para formar
el palmitato
• Se puede hacer un balance tomando en cuenta la reacción de síntesis de malonil-CoA, catalizada por la
malonil-CoA carboxilasa
Antony Píriz-G43 Fmed

Transporte mitocondrial de Acetil-CoA

• Para la síntesis de ácidos grasos se utilizan grupos acilos de la ingesta de lípidos (triglicéridos o ácidos grasos
directamente) y también se pueden usar acetilos de la acetil-CoA que se genera durante la descarboxilación mitocondrial
del piruvato (por ej. Proveniente de la glucosa)
• La acetil-CoA no puede salir de la matriz mitocondrial para llegar al citosol
• Transporte por lanzadera del citrato/malato y este actúa como precursor de acetil-COA en el citosol
o Este sistema de lanzadera también genera parte del NADPH necesario en síntesis de ácidos grasos
• Lanzadera aspartato/malato
o El piruvato proveniente de la glucólisis, por acción de la PDH pasa a acetil-CoA (también los aminoácidos
cetogénicos pueden formar acetil-CoA)
o Se da la reacción de condensación que es la primera reacción del CK, donde el oxalacetato y acetil-CoA forman
citrato, el cual puede salir de la mitocondria
o Entonces, 2 carbonos del acetilo se condensan con 4 carbonos del oxalacetato y forman citrato de 6 carbonos
o Sale el citrato y por acción de una enzima citosólica que es la citrato liasa, se produce un pasaje de citrato a
oxalacetato, y esas 2 moléculas de carbono del citrato, se unen a CoA-SH, para formar Acetil-CoA
o Es una reacción que requiere ATP, ya que se formará un enlace tioester
o El oxalacetato por la malato deshidrogenasa citosólica puede pasar a malato y este entrar por su transportador
específico para volver a dar oxalacetato
o También el malato, por una enzima citosólica, la enzima málica, que es una malato deshidrogenasa, cataliza una
decarboxilación oxidativa del mato, este se decarboxilasa a piruvato, liberando CO2 y se oxida a piruvato
(decarboxilación oxidativa), se liberan e- y estos se conservan el NADP+ que pasa a NADPH
o Entra el piruvato a la matriz, se carboxila (con gasto de ATP, enzima: piruvato carboxilasa), forma oxalacetato y
pasa a formar parte del pool de oxalacetato intramitocondrial de la matriz y puede comenzar un nuevo ciclo
Antony Píriz-G43 Fmed

Fuentes de NADPH para la síntesis de AG

• Vía de las pentosas fosfato
• Enzima málica
Integración metabólica en la síntesis de AG
• La síntesis de AG requiere de la cooperación de otras rutas metabólicas localizadas en diferentes organelos
celulares
• En la vía de las pentosas, la glucosa pasa a ribulosa y posteriormente a ribosa generando poder reductor en
forma de NADPH
• La enzima málica sería la otra fuente de poder reductor
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Elongación y modificación del ácido palmítico

• La AGS produce ácido palmítico (16:0) el cual es elongado y modificado a nivel de la mitocondria y del
retículo endoplasmático para formar los demás ácidos grasos de la célula
• Hay Δ9, Δ5 y Δ6 acil-CoA desaturasas que generan dobles enlaces
• Las células hepáticas de mamíferos no pueden introducir dobles enlaces más allá del carbono 9, por lo que el
ácido linoleico (18:2Δ9,12) y el ácido linolénico (18:2Δ9,12,15) deben ser obtenidos en la dieta. (ácidos grasos
esenciales)
Antony Píriz-G43 Fmed

Regulación de la síntesis de AG
• La enzima limitante el acil-CoA carboxilasa es la que se encuentra al comienzo de la síntesis porque es
cuando se activa el malonilo pasando a malonil-CoA
• El citrato actúa como activador de la acil-CoA carboxilasa, es decir, cuando el citrato comienza a salir de la
mitocondria, se ve estimulada la síntesis de AG
• Un aumento en la concentración de palmitoil-CoA inhibe a la acil-CoA carboxilasa
• Estas enzimas están también reguladas a través de hormonas y transducción de señales
• La insulina favorece la activación de la citrato liasa
• Glucagón y la adrenalina desencadenan la fosforilación/inactivación
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Regulación de la acil-CoA carboxilasa por fosforilación AMP-dependiente

• Modulación además de alostericamente, también se da de forma covalente por fosforilación
• La forma activa es la forma desfosforilada
• La forma inactiva es la forma fosforilada
• La fosforilación es catalizada por una enzima proteín kinasa, AMP dependiente, gasta una molécula de ATP
• Es desfosforilasa por una protein-fosfatasa

Efecto de la concentración de citrato sobre la actividad de la enzima acil-CoA carboxilasa

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Metabolismo del glucógeno: Degradación y síntesis

Glucosa como combustible
• La glucosa es el combustible y bloque estructural universal en la mayoría de los organismos vivos
• En el cerebro, médula renal, testículos y eritrocitos la glucosa en sangre es la única o la principal fuente de
energía
• Sólo el cerebro humano requiere más de 120g de glucosa diaria (160g/día para todo el cuerpo)
• El contenido de glucosa en líquidos corporales es de aprox. 20g y como glucógeno de 190g

Estructura del glucógeno

• Es la forma de almacenamiento de la glucosa
• Es un polímero de glucosa ramificado
• Las cadenas lineales se unen por enlace alfa-1,4 y las ramificaciones por enlace alfa-1,6
• Se tienen extremos reductores y no reductores
o El extremo no reductor es en el que la glucosa tiene formando el enlace a su C1 quedando libre su
carbono 4
o El extremo reductor es el que tiene el C1 libre
o El glucógeno crece en el sentido del extremo no reducto (del extremo reductor al extremo no
reductor)

Molécula de glucógeno
• La proteína glucogenina está en el centro de la molécula de glucógeno
o Los extremos no reductores forman la superficie del gránulo, sobre la cual tiene lugar la degradación
de glucógeno
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Esquema de un gránulo de glucógeno

• En una SE de hepatocitos se pueden ver los gránulos de glucógeno
• Presenta proteínas, las cuales son enzimas implicadas en el metabolismo del glucógeno, por lo tanto es una
fase donde ocurre tanto síntesis como degradación de glucógeno

Principales tejidos de síntesis y almacenamiento de glucógeno

• Hígado:
o Depósito: hasta 6% del peso
o Función: mantenimiento de la glicemia normal
• Músculo esquelético:
o Depósito: aprox. 1% del peso
o Función: combustible para contracción muscular

Diferencia funcional del glucógeno hepático y muscular

• En el músculo se utiliza como combustible para la contracción
• En el hígado se utiliza como mantenimiento de la glicemia
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Glucogenogénesis y glucogenólisis
• Glucogenogénesis: Síntesis de glucógeno
• Glucogenólisis: Degradación de glucógeno
• La síntesis y degradación de glucógeno son procesos regulados principalmente a nivel hormonal:
o Insulina
o Glucagón
o Adrenalina

La Glucosa-6P es una encrucijada metabólica

• En el hígado hay presente una enzima, la glucosa-6 fosfatasa que pasa de G6P a Glucosa y la libera a los
tejidos
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La degradación de glucógeno requiere de varias enzimas

• La glucógeno fosforilasa “lisa” los enlaces alfa-1,4 de cada ramificación dejando una longitud de 4 residuos
en cada rama
• Una transferasa desplaza un bloque de 3 residuos de una rama a otra
• Una alfa-1,6 glicosidasa elimina el último residuo de la ramificación

Glucógeno fosforilasa
• Cataliza la liberación de último residuo por entrada de una molécula de Pi
• Se obtiene una Glucógeno (glucosa)n-1 y Glucosa-1-P

La degradación de glucógeno requiere de varias enzimas

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La glucógeno fosforilasa
• Es una reacción de fosforólisis
• A diferencia de la hidrólisis (que ocurre por ejemplo en la digestión intestinal) parte de la energía liberada se
conserva en el enlace éster fosfato
• El piridoxal actúa como cofactor a través de su grupo fosfato

Reacción catalizada por la fosfoglucomutasa

• Cataliza una reacción reversible entre Glucosa-1P y Glucosa-6P
• Se tiene un intermediario: Glucosa-1,6-bifosfato
• Una serina de la fosfoglucomutasa se fosforila

La glucosa-6P
• La Glucosa-6P producida en el músculo esquelético puede entrar a la glucólisis de forma de mantener la
contracción muscular
• La glucosa-6P producida en el hígado es liberada al torrente sanguíneo por acción de la glucosa-6-fosfatasa

Lo que ocurre en el hígado

• La glucosa-6 fosfatasa es una enzima que se encuentra en el retículo endoplásmico
• Glucosa-6P tiene un transportador específico por el cual entra al retículo endoplásmico
• Dentro del retículo, la Glucosa-6P por acción de la Glucosa-6 fosfatasa pasa a glucosa y Pi
• La glucosa puede salir al citosol y liberarse al torrente sanguíneo
• Esta enzima (la Glucosa-6 fosfatasa) se encuentra únicamente en el hígado
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La glucógeno fosforilasa
• Músculo esquelético:
o La enzima a generalmente activa (R)
o La enzima b generalmente inactiva (T)
o Predomina la forma b (inactiva), que es activada por AMP e inhibida alostericamente por ATP y
gluocsa-6P
o La fosforilasa a es activa (R) independientemente de los niveles de ATP, AMP o glucosa-6P
o Frente a un aumento de AMP se indica que está faltando ATP para la contracción muscular, se pasa
a la forma activa de la fosforilasa b

• Hígado:
o La fosforilasa a hepática muestra una transición R-T muy sensible (no hacia la fosforilasa b) y la
misma se encuentra modulada por glucosa
o La glucosa desplaza el equilibrio hacia el estado T de baja actividad
▪ Frente a un aumento de la glucosa libre, la enzima disminuye su actividad
o En humanos las isoenzimas hepáticas y muscular tienen una identidad amino acídica de 90%

El glucógeno se sintetiza y degrada por diferentes vías

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Hallazgos de Luis Leloir

• Para que la síntesis de glucógeno esté favorecida termodinámicamente, la glucosa se tiene que “activar” a
través de la formación de UDP-glucosa
• El C anomérico se une a un nucleótido para formar un nucleótido-azúcar, unido por enlace fosfodiéster
• Los nucleótido-azúcar participan de la síntesis de todos los polímeros de glucosa y otros procesos relevantes
metabólicamente (síntesis de aminohexosas, vitamina C, entre otras)

La UDP-glucosa es la forma activa de la glucosa

• La UDP-glucosa fosforilasa cataliza la reacción

• La pirofosfatasa permite el impulso termodinámico para que la misma sea irreversible, contribuyendo a la
irreversibilidad de la síntesis de glucógeno
• Esta reacción “marca” a la glucosa para que no sea usada con otros fines:
o Genera un fondo de glucosa para la biosíntesis
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La glucógeno sintasa utiliza como sustrato UDP-glucosa

• Cataliza la reacción de incorporación de la glucosa por el extremo no reductor a la molécula de glucógeno y
la liberación de UDP
• Se obtiene una molécula de glucógeno con una molécula de glucógeno más
▪ Siempre y cuando n sea mayor que 4

Formación de ramificaciones en el glucógeno

• La glucógeno sintasa únicamente cataliza la formación de enlaces alfa-1,4
• Luego de la adición de 10 o más residuos actúa la enzima ramificante (amilo-alfa-1,4→1,6-glucan
transferasa)
• Luego quedan dos extremos no reductores, para que la glucógeno sintasa elongue el glucógeno en ambos
extremos
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Inicio de una nueva cadena de glucógeno

• La glucógeno sintasa no puede iniciar de novo una nueva cadena de glucógeno
• La glucogenina es una proteína que actúa como cebador para unir la primera molécula de glucosa a un
residuo de Tyr
• Posteriormente por su actividad de alargamiento incorpora 7 nuevos residuos
• En este punto comienza a actuar glucógeno sintasa extendiendo más la cadena
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El metabolismo del glucógeno está sometido a un control hormonal estricto: modulación covalente
• Etapas limitantes de la velocidad de reacción
o Glucogenogénesis → glucógeno sintasa
o Glucogenólisis → glucógeno fosforilasa

Estas enzimas son reguladas recíprocamente

CUANDO UNA ESTÁ ACTIVA
LA OTRA ES INACTIVA
Esquema de primer y segundo mensajero:
• Primer mensajero
o Es generalmente una hormona
• Segundo mensajero
o Pequeñas moléculas que indican dentro de la célula que se tiene que activar o desactivar un
mecanismo
• En el caso de la imagen el primer mensajero es el glucagón y el segundo mensajero sería el AMPc (en otros
casos puede ser Ca++ el segundo mensajero)
• El glucagón (hormona hiperglucemiante) que tiene un receptor específico, la unión del glucagón genera un
cambio a nivel del receptor que se transduce en proteínas G que finalmente terminan activando al adenilato
ciclasa
• La adenilato ciclasa cataliza la formación de AMPc a partir de ATP
• El AMPc puede ser inactivado por la fosfodiesterasa
• Esto quiere decir que esta reacción va a ocurrir únicamente si hay primer mensajero
• Este sistema se denomina transducción de señal, la hormona nunca entra en la célula ya que es una
hormona hidrosoluble, sino que le indica al receptor que se tiene que activar la adenilato ciclasa
o Cuando desaparece la hormona en sangre, el AMPc únicamente tendrá como destino hidrolizarse
• Entonces el AMPc modula alostericamente una enzima, una protein quinasa a (dependiente de AMPc) que
va a fosforilar más de una proteína
o Algunas fosforiladas van a estar activas y otras van a estar inactivas
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Hay una características en la transducción de señales y es la amplificación, es decir, generar sus respuestas
amplificadas, cada paso siguiente activa miles de moléculas activadas por esa molécula (Una adenilato ciclasa activa
miles de AMPc)
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El metabolismo del glucógeno está sometido a un control hormonal estricto: modulación covalente
• La fosforilasa quinasa cuando está activa (fosforilada) cataliza el pasaje de fosforilasa b (inactiva) a
fosforilasa a (activa)
• La fosforilación estimula la degradación de glucógeno
o Se encuentra favorecida en casos que se necesite glucosa, como en el músculo esquelético para la
contracción o a nivel hepático para aumentar la glucemia
• La proteína quinasa y la fosforilasa b quinasa catalizan la fosforilación de la glucógeno sintasa y la glucógeno
fosforilasa
o En el caso de la glucógeno sintasa la fosforilación implica inactivación (disminución de la actividad)
o En el caso de la glucógeno fosforilasa se activa
o Es decir que una misma modulación covalente me inhibe la síntesis de glucógeno y me estimula la
degradación de glucógeno
o La desfosforilación provoca la activación de la glucógeno sintasa a y la inactivación de la glucógeno
fosforilasa
▪ La desfosforilación estimula la síntesis de glucógeno e inhibe la degradación de glucógeno
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El metabolismo del glucógeno está sometido a un control hormonal estricto: modulación covalente
• El hígado es rico en receptores para el glucagón y libera glucosa para el mantenimiento de la glicemia
• El músculo es rico en receptores para adrenalina, entonces favorece la liberación de glucosa a nivel
intracelular para mantener la glucólisis muscular
o También tiene receptores para la insulina con el fin de aumentar la captación de glucógeno y
favorecer una disminución de la glicemia
• Los eritrocitos y el cerebro carecen de receptores para la insulina, es decir, son independientes, van a captar
glucosa
o En casos de ayunos prolongados el cerebro podría cambiar su metabolismo hacia cuerpos cetónicos

Esquema del sistema posta

• Hay una conexión directa entre páncreas e hígado
• El glucagón y la insulina producidos en el páncreas van directamente al hígado
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Contenido de glucógeno a lo largo del día

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Integración del metabolismo intermediario

• Metabolismo: actividad celular muy coordinada y dirigida en la que muchos sistemas multienzimático
cooperan para cumplir 4 funciones:
o Obtener energía química a partir de nutrientes ricos en energía
o Convertir nutrientes en moléculas características de la propia célula
o Polimerizar precursores monoméricos a proteínas, ácidos nucleicos, lípidos, polisacáridos entre otros
o Sintetizar y degradar biomoléculas requeridas en funciones celulares especializadas
• Características principales del metabolismo
o Las vías metabólicas son irreversibles
o Las vías anabólicas y catabólicas tienen un primer paso limitante
o Todas las vías metabólicas están reguladas finamente
o En los eucariotas, las vías metabólicas transcurren en localizaciones específicas
• Cosas clave generales
o El catabolismo es oxidativo y el anabolismo es reductor, ejemplos:
▪ La glucosa se degrada oxidativamente a piruvato
▪ La beta-oxidación
▪ El CK como una vía anfibólica de la cual surgen reacciones de síntesis

Requerimientos energéticos y reservas

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Cada tejido tiene funciones específicas por ende, distintas actividades metabólicas
• El hígado transforma y distribuye los nutrientes
• El tejido adiposo almacena y suministra ácidos grasos
• El músculo utiliza ATP para el trabajo mecánico
• El cerebro emplea energía para la transmisión de impulsos eléctricos

La homeostasis metabólica a nivel de órganos y tejidos es regulada por hormonas

Mecanismo de acción hormonal

El hígado
• El sistema porta comunica directamente algunos órganos con el hígado
• En el intestino, a nivel de la ingesta hay una circulación que va directamente al hígado, de alguna manera, lo que ingerimos
y procesamos a nivel del tracto digestivo va a ser “filtrado” a nivel hepático
o Luego, por medio de la vena hepática los resultados de ese “filtro” van a la circulación
• También, dentro del sistema porta hay una estrecha vinculación del hígado, el páncreas y el riñón, donde se sabe que los
dos últimos son productores de hormonas, por lo que en ambos casos hay una conexión directa con el hígado a través de
este sistema
• Tiene como función principal el mantener los niveles de nutrientes en sangre para ser utilizados por el resto
de los órganos y tejidos
• Su ubicación favorece su función: Los nutrientes absorbidos por el intestino se liberan al sistema porta
• El hígado, en contraste con músculo esquelético y células adiposas, es permeable a la glucosa, por lo que la
insulina no regula la captación de glucosa en este órgano
• La expresión de glucoquinasa frente a aumento de la glicemia de la glicemia explica la capacidad de remover
glucosa de la circulación en etapas postprandiales (la glucoquinasa comienza a hacer significativa su
actividad frente a aumentos de la glicemia)
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Hígado: Los destinos de la G6P varían con los requerimientos metabólicos

1. Para promover glucosa a otros órganos
2. Frente a una baja demanda corporal de glucosa
3. Como combustible para uso propio
4. La mayor parte de la Acetil-CoA derivada de la glucólisis, es utilizada para síntesis de ácidos grasos y
colesterol (precursor de sales minerales)
5. Como fuente de poder reductor y pentosas

Relación entre síntesis de AG y glucólisis

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El hígado puede degradar y sintetizar AG

• Frente a una alta demanda de combustibles metabólicos los ácidos grasos son degradados a acetil-CoA y a
cuerpos cetónicos que se exportan a tejidos periféricos por la sangre
• Frente a una baja demanda de combustibles metabólicos, los ácidos grasos son usados para sintetizar
triacilglicéridos, que se secretan a sangre como VLDLs, y captados por el tejido adiposo
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Hígado: Metabolismo de aminoácidos

Los aminoácidos son combustibles metabólicos relevantes

Hígado: Metabolismo de aminoácidos

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Receptores de insulina en el hígado

• Los hepatocitos tienen receptores de insulina y cuando estos la reconocen, se estimula la síntesis de
glucógeno y se inhibe la degradación
o Es decir que la hormona hipoglucemiante favorece a nivel hepático la Glucogenogénesis
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Músculo: Fuente de energía para la contracción

• En el músculo los mayores combustibles son glucosa derivada de glucógeno, ácidos grasos y cuerpos
cetónicos
• Si bien no puede exportar glucosa, es un reservorio de energía en períodos de ayuno prolongado:
movilización de aminoácidos a partir de las proteínas contráctiles
• Posee receptores para adrenalina, pero no para glucagón: en el músculo el aumento de AMPc estimula la
glucogenólisis y la glucólisis, a diferencia del hígado, donde un aumento de AMPc estimula glucogenólisis y
gluconeogénesis, con la consecuente exportación de glucosa
• Normalmente el músculo en reposo, va a tener como principal combustible a la beta-oxidación para la
producción de ATP, también puede utilizar glucosa que a través de receptores de la célula muscular
o A través de la respiración se produce ATP y esto sería lo que mantendría los niveles basales
• Frente a la necesidad de un ejercicio intenso, el músculo moviliza glucógeno de su propia reserva para
formar glucosa-1P y posteriormente G6P para luego metabolizarla hasta lactado, de forma que se obtenga
rápidamente ATP

El ciclo de Cori
• El lactato producido a partir de la degradación de glucosa es eliminado al torrente sanguíneo pudiendo ser
captado por el hígado para la gluconeogénesis y esa glucosa sea utilizada por el músculo nuevamente
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Músculo
• Las células musculares tienen receptores beta-adrenérgicos, por lo que son capaces de reconocer adrenalina
y a través de este sistema de la adenilato ciclasa aumentar la concentración de AMPc
• Un aumento de AMPc a nivel muscular estimula la glucogenólisis, entonces, estimula la degradación de
glucógeno, además se estimula el pasaje de G6P a piruvato que luego puede ir por la vía aeróbica o la
anaeróbica reduciéndose a lactato y ser eliminado a la sangre
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Fatiga muscular: un mecanismo de protección para las células

• Definición: estado refractario en el cual el tejido contráctil de un músculo pierde su respuesta a la
estimulación como secuencia de la hiperactividad. Suele ser un período tras la estimulación durante el cual el
músculo no responde a un segundo estímulo
1) La fatiga no es causada por el agotamiento de glucógeno, sino por una disminución del pH intracelular que
llega a niveles de 6,4. Esta disminución es debida principalmente a los H+ liberados durante la glucólisis y
seguidamente por la producción de lactato
2) Secundariamente, el aumento de la concentración de Pi se una a Ca++, formando precipitados,
disminuyendo la capacidad contráctil, por disminución de la concentración de Ca++
• La fatiga muscular es una forma de evitar la muerte celular por agotamiento de ATP, necesario también para
el resto de las funciones celulares

Músculo cardíaco
• Es un órgano muscular que debe mantener actividad contráctil continua y no intermitente
• Es rico en mitocondrias: hasta 40% del citoplasma
• Los ácidos grasos son su principal combustible. También utiliza (en períodos de mayor actividad) glucosa,
cuerpos cetónicos, lactato y piruvato
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Cerebro
• Presenta muy alta tasa de respiración: en un adulto constituye el 2% de su masa corporal, pero es
responsable del 20% del consumo total de O2
• Este consumo independiente de la actividad mental: prácticamente no varía si se compara por ejemplo el
sueño y una actividad de concentración intensa
• La mayor parte de la energía se utiliza en la Na+/k+ ATPasa de membrana
o En condiciones normales la glucosa es su único combustible. En períodos de ayuno el cerebro se
adapta a utilizar cuerpos cetónicos
• Es el órgano más afectado por la hipoglicemia, pudiendo llegar al estado de coma en situaciones críticas (por
ejemplo, en sobredosis de insulina)

Homeostasis del metabolismo: las hormonas

• Hormonas pancráticas
o Islotes de Langerhans
o Células alfa: Glucagón (degradación de glucógeno)
o Células beta: Insulina (síntesis de glucagón)
• Hormonas de la médula adrenal
o Norepinefrina y su derivado metilado la epinefrina, sintetizados a partir de la Tyr. Estimulan la
glucogenólisis (músculo), gluconeogénesis (hígado) y la lipólisis (adipocito)
• Hormonas de la corteza adrenal
o Glucocorticoides (afectan el metabolismo de carbohidratos, lípidos y proteínas de manera opuesta a
la insulina) ejemplo, el cortisol

La insulina, una hormona hipoglucemiante

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Alteraciones en el metabolismo: Ayuno prolongado

• Reservas energéticas de un adulto sano:
o Glucógeno en el hígado y músculo esquelético (pequeñas cantidades)
o Triacilglicéridos en el tejido adiposo (grandes cantidades)
o Proteínas tisulares (se degradan en condiciones de falta de combustible)

En estados de buena nutrición el hígado es principalmente lipogénico

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En estado de ayuno el hígado es principalmente gluconeogénico

Las respuestas al ayuno prolongado, tras consumirse las reservas de glúcidos (o en diabetes mielitus no
controlado)
• Lo que comienza a suceder es la movilización de proteínas desde los tejidos para ser degradadas a
aminoácidos, los cuales por su degradación pueden entrar al CK y en el hígado ser gluconeogénicos o
directamente utilizarse como fuente de energía
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Las vías de ayuno y la glicemia

• En las diferentes vías de ayuno, la glicemia va disminuyendo mientras que van aumentando los cuerpos
cetónicos

En ayuno se consumen las reservas de glucógeno y lípidos, aumenta la gluconeogénesis

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La obesidad, un desajuste metabólico

• El IMC es mantenido por un estricto control metabólico de la síntesis y la degradación de ácidos grasos
• El tejido adiposo no es únicamente un tejido de reserva, es una glándula endócrina que secreta leptina
• La leptina es el gen ob, descubrimiento en 1950

La leptina
• Los ratones que carecen del gen ob presentan un apetito limitado
• Los receptores de leptina se encuentran en el núcleo arcuato de hipotálamo: regulación del comportamiento
alimenticio
• Estímulo simpático: secreción de noradrenalina que en t. adiposo promueve termogénesis, actividad lipasa,
movilización de ácidos grasos
• Núcleo arcuato: estímulo de neuronas anoxerigénicas-inhibición de neuronas orexigénicas
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Cáncer y adelgazamiento
• La mayoría de los tumores no responden al control hormonal
• Usualmente establecen un “ciclo de cori”
• En estos casos las células del centro del tumor son frecuentemente hipóxicas, lo cual a su vez induce HIF-
alfa: alto consumo de glucosa
• La respuesta del organismo al tumor incluye usualmente interleuquinas (IL-1 e IL-6) y TNF-alfa que produce
astenia y adinamia