PRÁCTICA N°4: CARBOHIDRATOS

Estudiante: César Andrés Vásquez Donet

Facultad: Facultad de Medicina

Universidad: Universidad Nacional de Cajamarca

Curso: Química Orgánica

Docente: Cecilio Enrique Vera Viera

18 de abril del 2021

 Estudio de Carbohidratos
Prof. Cecilio Enrique Vera Viera
I. Introducción:
El término "carbohidratos", o "hidratos de carbono" procede de la antigua forma de
escribir la fórmula empírica de algunos de los más importantes, como Cn (H2O) n. Uno
de los carbohidratos, la celulosa, es la sustancia orgánica más abundante en el conjunto
de los seres vivos terrestres.

Según el resultado de su hidrólisis, los carbohidratos se pueden clasificar

"polisacáridos", formados por muchas unidades separables por hidrólisis,
"oligosacáridos", formados por unas cuantas unidades, y "monosacáridos", que son las
unidades elementales que no producen, por hidrólisis, unidades de tamaño menor. A
diferencia de lo que sucede en el caso de las proteínas, en el que no existe un corte
nítido entre un polipéptido grande y una proteína pequeña, entre oligosacáridos y
polisacáridos naturales existe una división clara. Los oligosacáridos tienen menos de
20 unidades, mientras que los polisacáridos comienzan en los centenares.
Los hidratos de carbono (carbohidratos) representan un papel fundamental en la dieta
humana, constituyendo la principal fuente de energía para la mayoría de la población
mundial. Aportando entre 55-75% (promedio mundial igual a 63%) de la energía total
consumida, siendo mayor su contribución en los países menos desarrollados.

Son después del agua los componentes más abundantes de los alimentos y los más
ampliamente distribuidos. El origen de todos estos compuestos es la glucosa (del
griego gleukos, vino dulce) proveniente del proceso de fotosíntesis realizado por las
plantas (Figura). Casi todos los compuestos orgánicos que se encuentran en las plantas
y animales son derivados de los hidratos de carbono.
Fuente:[Link]
[Link]

II. Instrumentos e Insumos:

a. Instrumentos:
 Tubos de Ensayo y gradilla
 Gotero
 Pipetas graduadas
 Reloj de vidrio
 Pinzas y Bisturí
 Recipientes para muestras
b. Insumos:
 Reactivo de Molisch
 Reactivo de Bial
 Reactivo de Seliwanoff
 Reactivo de Benedict
 Lugol
 Ácido Sulfúrico
 Muestras de Carbohidratos
III. Procedimiento:
1. Observe las experiencias que se presentan en los videos.
A. Identificación de Carbohidratos por Reacciones Coloridas (Primer Vídeo):
 Prueba de Molisch: Sirve para identificar carbohidratos en
general, ya sea presencia de un carbohidrato o una azúcar.
Se van a utilizar 6 muestras: Glucosa, Fructosa, Sacarosa,
Lactosa, Xilosa, Ribosa y además una muestra problema
(Sprite). Para realizar esta prueba se necesita el Reactivo de
Molisch combinado con ácido sulfúrico concentrado y esto
serpa mezclado con cada una de las muestras en los tubos
de ensayo. Una vez colocado por medio de un gotero en el
tubo de ensayo se formará un anillo violáceo, que muestra la presencia de
carbohidratos; la intensidad del color del anillo dependerá del carbohidrato
que se esté muestreando, generalmente los disacáridos tienden a tener un
color más intenso que los monosacáridos.
-Glucosa Positivo (Tenue) ∴Esta prueba era
-Fructosa Positivo (Intenso) exclusivamente
-Sacarosa Positivo (Intenso) para identificar sin
-Lactosa Positivo (Tenue) son carbohidratos;
por ello todos
-Xilosa Positivo (Tenue)
salen positivos
-Ribosa Positivo (Tenue)
-Sprite Positivo (Tenue)
 Reacción de Bial: Sirve para identificar pentosas, moléculas
con 5 carbonos, las muestras siguen siendo los mismos
carbohidratos que la prueba pasada; solo cambia el reactivo,
se agrega 1ml del reactivo Bial a cada uno de los tubos de
ensayo, se debe tener cuidado; ya que, el reactivo se hace
con ácido clorhídrico; por lo que, presenta vapores tóxicos.
Para que la reacción sea positiva se debe dar un color azul o
verde, que demuestre la presencia de pentosas. Una vez colocado el reactivo
se colocan los tubos en baño María y esperamos.
-Glucosa Negativo ∴En los resultados se
-Fructosa Negativo puede observar un
-Sacarosa Negativo cambio de color de
-Lactosa Negativo los monosacáridos,
-Xilosa Positivo (Pentosa) pero este al no ser
verde o azul indica
-Ribosa Positivo (Pentosa) que no son pentosas
-Sprite Negativo
 Reacción de Seliwanoff: Está prueba se usa para identificar
fructosa, la fructosa es una cetosa que tiene un grupo
cetona. Se van a usar las mismas muestras, pero ahora se
usará 1ml del reactivo de Seliwanoff. El color en este caso
que indicará positivo es un rojo rubí, después de agregar el
reactivo también se someterá a baño María
 -Glucosa Negativo ∴ La sacarosa y el Sprite da
-Fructosa Positivo positivo porque al
-Sacarosa Positivo desdoblarse por acción del
-Lactosa Negativo calor tiene como componente
a la fructosa que es el
-Xilosa Negativo
compuesto por el cual esta
-Ribosa Negativo reacción da positivo
-Sprite Positivo
 Reacción de Fehling: Esta prueba se usa para identificar
azúcares reductores, estos van a reducir al ión cobre que
reducen a la solución de Fehling que presenta un color
azuláceo. Esta prueba nos dará un rojo ladrillo para demostrar
cuales son los azúcares reductores después de colocar las
mismas muestras de las reacciones pasadas con la solución de
Fehling en baño María.
-Glucosa Positivo ∴La sacarosa en el
experimento del video dio
-Fructosa Positivo positivo, esto se debe a la
-Sacarosa *Negativo acción del calor que separó
-Lactosa Positivo sus componentes obteniendo
-Xilosa Positivo monosacáridos que sí eran
-Ribosa Positivo reductores, a diferencia de la
sacarosa que no lo es.
-Sprite Positivo
Fuente: [Link]

B. Identificación de Carbohidratos (Segundo Vídeo):

 Reacción de Benedict: En esta reacción el cobre del reactivo de Benedict
reacciona con el hidroxilo anomérico que tienen los carbohidratos para
poder dar una coloración y así identificar el compuesto que nos interesa. Se
coloca 1ml del Reactivo de Benedict en 3
tubos de ensayo, y en cada tubo se agregará
una muestra diferente; 1ml de dextrosa, 1ml
de leche y 1ml de almidón, respectivamente.
Luego, se lo agita para una buena
combinación y se coloca en baño María entre
3 a 5 minutos, para que nos dé positivo tendrá
que poseer una coloración rojiza lo que
demostrará la presencia de carbohidratos.
-Dextrosa Positivo (Positivo)
-Leche Positivo (Tenue)
-Almidón *Negativo
∴Las reacciones positivas presentan diferentes grados de intensidad, lo que
indica las cantidades de carbohidratos; además el almidón sale negativo en el
video; sin embargo, el almidón es un carbohidrato y sale negativo porque es
un heteropolisacárido; es decir, tiene un componente que no es carbohidrato.
  Identificación por Lugol: Se colocarán en diferentes vidrios de reloj
colocaremos un pedacito de salchicha, plátano y papa; para posteriormente
agregarles 1 o 2 gotitas de Lugol,
para identificar la presencia de
almidón. Si las muestras se tiñen de
un color morado o azul intenso
hasta llegar hasta negro podemos
decir que hay presencia de almidón
-Salchicha Positivo (Presencia de almidón)
-Plátano Positivo (Presencia de almidón)
-Papa Positivo (Presencia de almidón)

∴La salchicha posee almidón; ya que, en la industria

alimentaria se usa para darle consistencia al producto, y en la
papa y plátano el almidón se reserva en los leucoplastos

Fuente: [Link]
2. Haga un comentario de las observaciones.
Los diferentes tipos de reacciones que hemos podido observar a lo largo de la
práctica tienen fines diferentes, pero englobando a los carbohidratos; ya que cada
uno sirve para clasificarlos por diferentes aspectos, la prueba de Molisch la de
Benedict son las más generales para identificar si hay presencia de carbohidratos,
la reacción de Bial para identificar si son penosas, la reacción de Seliwanoff para
identificar fructosas o para ser más específico cetohexosas, la reacción de Fehling
para identificar a los azúcares reductores, o la identificación con Lugol para
carbohidratos.
Cada reacción tiene un desarrollo diferente, aunque muchas de ellas tienen el mismo
procedimiento como es el caso de Fehling, Seliwanoff, Bial o Benedict que después
de realizar la condensación se los pone a baño María para que actúe el calor como
un impulsor de la reacción y se pueda determinar su respectiva característica. En
estos casos, se ha visto en las pruebas muchas variantes que teóricamente no
deberían realizarse, esto se debe a los factores presentes en cada muestra y como se
van a ir expresando estos durante el experimento hasta llegar al punto de poder
cambiar el resultado esperado; algunos ejemplos e esto son cuando la sacarosa da
positivo o negativo por acción del desdoblamiento de sus componentes debido a la
acción de calor y dan un resultado que en un inicio no debería dar o el almidón que
resulta negativo en la identificación con Lugol para carbohidratos, siendo este un
carbohidrato pero al ser un hetero polisacárido primo su otro componente.
Todos estos experimentos nos logran dar un alcance de las características
funcionales y morfológicas que posee cada carbohidrato muestreado ya sea por una
identificación por número de carbonos, pentosas, o la misma identificación si hay
presencia de carbohidratos; así como también la identificación del grupo funcional
cetónico, fructosa, o la presencia de azúcares reductores para lo cual se necesitaba
tener un grupo carbonilo intacto, grupo hemiacetal, para que en este puedan
reaccionar otras moléculas en posteriores reacciones.
3. Relaciona las observaciones, comentarios con fuentes de información científica.
Las pruebas colorimétricas para la determinación de azúcares se basan en la
reacción específica de estos compuestos con determinados reactivos para dar
derivados coloreados. La formación de color se toma como resultado positivo e
indica la presencia del compuesto en cuestión, mientras que la no formación de
color es indicativo de su ausencia (Abril, N., Jorrín, J. y Bárcena J.).
La mayoría de las reacciones se producen por
acción de los furfurales que se forman a partir
de los carbohidratos, esto se da porque los
monosacáridos en caliente y medio muy
ácido, sufren una deshidratación que conduce
a la formación de un anillo pentagonal de
furfural o hidroximetilfurfural, según se parta
de pentosas o hexosas. Estos compuestos
reaccionan con otros dando reacciones
coloreadas. (Abril, N., Jorrín, J. y Bárcena, J.)
En caso de la reacción de Molisch es una reacción de furfural e hidroximetil-furfural
con α-naftol, dando lugar a derivados de color púrpura. Es una prueba general de
azúcares. (Abril, N., Jorrín, J. y Bárcena, J.)
En caso de la reacción de Bial la reacción del
furfural e hidroximetil-furfural con orcinol en
medio con HCl, dando lugar a derivados de
color azul. Es una prueba específica de
pentosas. Y en los ácidos nucleicos la pentosa
del DNA y RNA puede evidenciarse por la
reacción con orcinol. El ácido sulfúrico
ORCINOL
hidroliza las uniones fosfodiéster y N-
glicosídicas, liberando ribosa, bases púricas, pirimidínicas y ácido fosfórico.
(Universidad Nacional de la Patagonia, Argentina, 2011)
En caso de la reacción de Seliwanoff la reacción del furfural e hidroximetil-furfural
con resorcinol, dando lugar a derivados de color rosa-rojo. Es una prueba específica
de hexosas. Las cetosas en medio ácido se deshidratan más rápidamente que las
aldosas, por lo que ambos grupos pueden diferenciarse en función del tiempo que
tarda en aparecer el producto coloreado. (Abril, N., Jorrín, J. y Bárcena, J.)
En caso de la reacción de Fehling los azúcles reductores son aquellos azúcares que
poseen su grupo carbonilo (grupo funcional) intacto, y que a través de este pueden
reaccionar como reductores con otras moléculas ya que al menos tienen un -OH
hemiacetálico libre a la reacción con reactivo de Fehling y la Reacción de Benedict.
Es decir que presentan equilibrio con la forma abierta, presentan mutarrotación,
(cambio espontáneo entre las dos formas cicladas α (alfa) y β (beta)), o decir que
forma osazonas. (EcuRed)
En caso de la reacción de Benedict se basa en la reducción de Cu2+ a Cu+ en medio
básico débil. Aunque es similar a la reacción de Fehling, el medio básico débil y el
estabilizante (citrato sódico) utilizados hacen que esta prueba sea más sensible y
estable. (Universidad de Alicante)
4. Escribe las reacciones que has observado en los videos.
 Prueba de Molisch: La prueba de Molisch se da en un carbohidrato, pero para
que la reacción se debe dar su fórmula tiene que ser cíclica y no lineal para que
puedan reaccionar con los demás compuestos; mediante el ácido sulfúrico
donde se va a deshidratar al carbohidrato obteniendo el furfural o
hidroximetilfurfural luego mediante una condensación con el α-naftol va a
producir un compuesto más complejo reduciéndose al final produciendo el
producto que reflejará el color violáceo por su longitud de onda.

 Reacción de Bial: La reacción de Bial se da para hallar pentosas, compuestos

de 5 carbonos, mediante un medio ácido condicionado por ácido clorhídrico
para obtener el furfural y no el hidroximetilfurfural; ya que, ese compuesto es
el resultado de la interacción de las hexosas, desprendiendo 3H2O. Luego este
furfural interactuará está vez con el orcinol va a ocasionar un compuesto más
complejo que va a ser el responsable de la coloración positiva.
 Reacción de Seliwanoff: La reacción de Seliwanoff se da para hallar
cetohexosas, como la fructosa, mediante un medio ácido condicionado por
ácido clorhídrico para obtener el hidroximetilfurfural y desprendiendo 3H 2O
este al actuar está vez con el resorcinol va a ocasionar un compuesto más
complejo que va a ser el responsable de la coloración positiva.

 Reacción de Fehling: Se produce en el radical hemiacetálico del grupo

carbonilo que mediante una oxidación por el Cu+2 en un medio básico
condicionado por el hidróxido de sodio, va a adquirir un grupo OH- y Oxido de
cobre sedimentado.

 Reacción de Benedict: Al igual que la reacción de Fehling se da en el radical

hemiacetálico del grupo carbonilo que por acción del cobre, pero a diferencia
de la reacción anterior, esta se da en un medio ácido. Aquí la reacción en vez
de acoplar un oxígeno este va a reemplazar al hidrógeno y va a dejar óxido de
cobre sólido.
 5. Elabora conclusiones.
 Todas estas reacciones demuestran el gran espectro de reacciones que pueden
realizarse con estos compuestos orgánicos; además de su gran complejidad y
variación que tienen entre ellos mismos y como estos influencian en las
reacciones.
 Otro aspecto para considerar es el enfoque cualitativo que tienen todas estas
reacciones, esto implica que no miden cuantificativamente los indicadores que
cada una representa sino da resultados aproximados de como estos se expresan,
esto se ve en la diferencia de tonalidades colorimétricas que se dan de acuerdo
con el carbohidrato muestreado.

IV. Metacognición:
- ¿Qué aprendizajes he logrado en esta experiencia observada?
Ha poder identificar la cantidad de reacciones que se dan con los carbohidratos, como
se dan estas y para que nos sirven; hallando las diferentes características que presentan
cada uno de ellos y como se estructuran.
- ¿Qué importancia tiene esta experiencia en mi formación profesional?
Es muy importante; ya que, al ser los carbohidratos una de las principales biomoléculas
orgánicas presentes en el ser vivo, nos ayuda a poder apreciar y entender como este
reacciona y se constituye; para así poder entender los procesos bioquímicos que se dan
en nuestro organismo.
- ¿Qué dudas han quedado en esta experiencia?
Ninguna; ya que, todo lo abordado y complementado por los videos y fuentes
consultadas detalla muy claramente como es el proceso de estudio de los carbohidratos.

V. Bibliografía:
o Abril, N., Jorrín, J. y Bárcena, J. Reacciones coloreadas para la determinación
cualitativa de azúcares. Universidad de Córdoba. España. Recuperado el 18 de
abril del 2021 de [Link]
mol/pdfs/20%20REACCIONES%20COLOREADAS%20DE%20AZUCARE
[Link]
o Caicedo, W. (2014). Prueba de Molisch. Recuperado el 18 de abril del 2021 de
[Link]
o EcuRed (2015). Azúcares Reductores. Recuperado el 18 de abril del 2021 de
[Link]
o Universidad de Alicante (2017). Segunda práctica: identificación de azúcares.
Facultad de Ciencias. Recuperado el 18 de abril del 2021 de
[Link]
universitaria/ven-a-hacer-practicas/2017/bioquimica-identificacion-de-
[Link]
o Universidad Nacional de la Patagonia San Juan Bosco (2011). Ácidos
nucleicos. Recuperado el 18 de abril del 2021 de
[Link]
content/uploads/2011/04/[Link]