UNIVERSIDAD DE CUENCA
FACULTAD DE CIENCIAS QUÍMICAS
CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA
Nombre: Angie Flores, Doménica Flores.
Fecha de
Profesor: Dra. Carmen Lucía López
entrega:
Nivel: Quinto, Grupo: 1, Subgrupo: 2. 18/10/2021
Asignatura: Micología Clínica.
Cuenca – Ecuador.
Práctica #1
1. TÍTULO: Métodos de esterilización y desinfección.
2. OBJETIVOS:
● Conocer los procedimientos físicos,mecánicos y químicos que se emplean para
destruir, inactivar o retener gérmenes en general y patógenos en particular.
● Conocer los equipos que se encuentran en el laboratorio y su utilidad.
● Aprender el manejo del material de vidrio y otros insumos.
● Realizar el proceso de esterilización mediante calor húmedo.
3. LOGROS DE APRENDIZAJE:
● Los estudiantes estarán en capacidad de aplicar los métodos de desinfección, normas
de seguridad e instrucciones de manejo de microorganismos, equipos e instrumentos en
el laboratorio de microbiología.
4. DATOS A REGISTRAR:
● Métodos de esterilización físicos, químicos y mecánicos
Agentes Físicos: Entre estos podemos mencionar el uso del calor como un agente
esterilizante, pudiendo actuar en forma de calor húmedo que destruirá a los
microorganismos al desnaturalizar sus proteínas y el calor seco, que emplea la
oxidación celular para destruirlos (Gutiérrez de Gamboa, 2008).
En el primer caso se emplea un equipo conocido como Autoclave que genera calor a
partir del vapor de agua, este brindará las condiciones óptimas de temperatura y presión
para llevar a cabo la esterilización. De esta manera serán esterilizados tanto materiales
limpios como medios de cultivo a 121°C con 15lb de presión durante 15 minutos
mientras que el material contaminado deberá someterse a 130°C con la misma presión
durante 20 a 30 minutos.
En cuanto al calor seco, proveerá calor a través de un horno de esterilización que
trabaja a 160-180°C en donde se colocará material que no se desintegre en el calor
como de metal y vidrio, durante una hora y media a tres horas.
En esta sección está también la incineración, que es la combustión completa de la
materia orgánica tal que esta sea reducida a cenizas, se lleva a cabo en hornos y muflas
con la capacidad de alcanzar altas temperaturas (870-980°C).
La radiación también puede ser empleada para esterilizar entendiéndose ésta como la
emisión y propagación de energía a través de un medio. La radiación ionizante (Rayos
gamma, beta) puede emplearse para materiales termolábiles como plásticos, también
tiene uso en la esterilización de material médico, odontológico y farmacéutico mientras
que la no ionizante se puede utilizar para controlar áreas cerradas como un quirófano
(López-Díaz & García-Tarrau, 2013).
Agentes mecánicos: En los que encontramos la filtración, que es un proceso que
impide el paso de microorganismos de un ambiente a otro al retenerlos sobre la
superficie de un material. La filtración en líquido se realiza con filtros especializados
con poros muy pequeños y en condiciones asépticas (Gutiérrez de Gamboa, 2008).
La filtración del aire tiene un lugar importante en la esterilización de ambientes,
especialmente si son lugares que trabajan con agentes de alto riesgo biológico, en este
punto podemos mencionar los filtros HEPA.
Agentes químicos: Existen algunas sustancias que pueden ser empleadas para
esterilización que han probado su efectividad al promover reacciones químicas capaces
de dañar componentes celulares de microorganismos como membranas, proteínas, entre
otros. Suele emplearse para instrumentos delicados y termolábiles, su eficiencia tiene
mucho que ver con la concentración y el tiempo de exposición a estos. Entre estos
podemos mencionar el óxido de etileno y el peróxido de hidrógeno (López-Díaz &
García-Tarrau, 2013).
● Desinfectantes útiles en el laboratorio de Microbiología
- Glutaraldehído: es utilizado en una concentración al 2% para tratar instrumental
clínico debido a que no es corrosivo con los metales ni deteriora plásticos. Permite la
destrucción de microorganismos a través de la desnaturalización de proteínas.
- Formaldehído: en una concentración al 8% mezclado con alcohol 70% permite la
inactivación de los microorganismos debido a que provocan la destrucción de su
pared celular, inactivación de enzimas y precipitación de proteínas.
- Ácido peracético: se trata de un oxidante fuerte que requiere de estar en contacto con
la superficie a desinfectar por 25 minutos, es un sustancia eficaz frente a materia
orgánica a bajas concentraciones (<1%).
- Detergentes catiónicos en alcohol: son empleados en soluciones acuosas entre 0,1-
1% para desinfectar suelos, paredes, muebles, permiten lesionar la membrana celular,
desnaturalizar proteínas esenciales y desactivar enzimas.
- Peróxido de hidrógeno: oxida de forma fuerte a lípidos, proteínas y ADN. En
concentraciones del 3% actúa como bacteriostático, al 6% como bactericida y al 10%
como desinfectantes de alto nivel (Lurá, 2008).
● Principales equipos del laboratorio de Microbiología
- Centrífuga: permite la separación de una muestra en sus componentes o fases,
acelera el proceso de sedimentación.
- Incubadora: es un equipo con el que se puede controlar condiciones específicas de
temperatura y humedad para el adecuado desarrollo de cultivos microbiológicos.
- Autoclave: este equipo emplea altas presiones y temperaturas para esterilizar material
de laboratorio.
- Horno esterilizador: emplea calor seco para la esterilización de material de vidrio,
porcelana y metal.
- Baños María: permite mantener una temperatura constante a las sustancias con las
que se trabajan o permite el calentamiento lento de las mismas (Custodio, 2009).
5. MATERIALES Y EQUIPOS:
Materiales Equipos
- Cajas Petri. - Erlenmeyer. - Autoclave
- Papel empaque. - Tijeras.
- Papel aluminio. - Pipetas.
- Tubos de ensayo. - Cinta masking.
- Gasas de algodón. - Cinta indicadora de esterilidad.
6. PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL:
1) Preparar el material de vidrio para someter a esterilización.
2) Esterilizar el material mediante el proceso de calor húmedo.
3) Conocer todos los equipos que se encuentran en el laboratorio.
4) Elaborar un diagrama de flujo del tema de la práctica.
5) Elaborar un informe.
7. CONCLUSIONES:
● Es importante conocer los protocolos de desinfección y esterilización para evitar que
se produzca algún accidente biológico en los estudiantes o cualquier persona que tiene
contacto con el laboratorio de Microbiología.
● Es indispensable conocer los equipos e instrumentos que utilizan en laboratorio para
evitar una incorrecta manipulación de los mismos provocando daños en estos.
8. BIBLIOGRAFÍA:
Custodio, J.A. (2009). Materiales y equipos de uso frecuente en Microbiologís
Aislamiento e identificación de bacterias Gram +. 5-9.
https://es.slideshare.net/jcustodio91/guia-ii
Gutiérrez de Gamboa, S. (2008). Métodos de esterilización. 1,2. Caracas: UCV Caracas.
López-Díaz, Z., & García-Tarrau, M. (19 de 09 de 2011). Métodos de esterilización.
Obtenido de Universidad Virtual de Salud Manuel Fajardo:
http://uvsfajardo.sld.cu/tema-7-metodos-de-esterilizacion
Lurá, M. C. (2008). Aspectos microbiológicos de la bioseguridad. 225–253.
https://bibliotecavirtual.unl.edu.ar:8443/bitstream/handle/11185/5533/
aspectosmicrobiologicos.pdf?sequence=1&isAllowed=y
