ESCUELA SUPERIOR POLITÉCNICA DE CHIMBORAZO
“ESPOCH”
FACULTA DE CIENCIAS PECUARIAS
CARRERA DE MEDICINA VETERINARIA
TRABAJO GRUPAL
MICROBIOLOGÍA
SANDRA VILLAGOMEZ
Integrantes:
Milycen Heredia
Ana Lucía Navarrete
Camila Perugachi
Lesly Ramón
Kerly Sánchez
Riobamba – Ecuador
2022
Introducción:
Los hongos y las levaduras, a través de los años han sido un muy importante objeto de estudio
en el campo de diversas ciencias, pues, además de ser elementos patógenos, muchos cuentan
con cualidades representativas que contribuyen a la industria alimenticia y al tratamiento de
distintas enfermedades. La Micología, es aquella ciencia que se encarga del estudio de las
características, estructuras y composición de las setas, mohos y levaduras. Sin embargo, la
Micología Veterinaria, se orienta más a un campo patológico, comprendiendo los signos y
síntomas que son significativos en las enfermedades ocasionadas por hongos, ya sean micosis
o micotoxicosis. En el mundo existen aproximadamente entre 2 y 4 millones de hongos, de
los cuales solo 148 mil han sido descritos por la ciencia, y, así mismo, de los cuales se tiene
conocimiento que unos 300-400 son potencialmente patógenos. Las infecciones causadas por
hongos generalmente afectan a la piel, no sólo en humanos, sino también en animales, por
eso, es importante conocer sus protocolos de muestreo e identificación para su posterior
análisis y tratamiento.
Objetivos:
Objetivo General
Reconocer e identificar los diferentes hongos y levaduras causantes de afecciones de
dermatofitosis en las diferentes especies de animales, por medio, de rigorosas investigaciones
sobre sus lesiones y sus medios de identificación.
Objetivos Específicos:
1. Realizar investigaciones en fuentes confiables sobre los diferentes hongos y levaduras
responsables de dermatofitosis.
2. Identificar sus características microbiológicas de los hongos y levaduras; y las afecciones
que causan.
3. Establecer sus medios de identificación, junto a, los resultados que arrojan ante su
presencia.
Revisión literaria:
1. Microsporum canis
1.1. Características microbiológicas
Microsporum canis es un hongo asexual,
filamentoso, dermatofito y zoofílico. Dentro de
sus características macroscópicas podemos
hallar que sus colonias son de desarrollo
intermedio, aproximadamente de 6 a 8 días a
temperaturas de entre 25–30 °C, estas cuentan
con un micelio blanco, de aspecto lanoso y
bordes desflecados; su pigmento es muy ligero Ilustración 1: Aspecto microscópico de Microsporum canis
con tonalidades cremas, grises o pardas en cultivos viejos y en el reverso se puede identificar
un abundante tinte amarillo rojizo.
Hablando de características microscópicas se destaca
la presencia de abundantes macroconidios que son
fusiformes y grandes, con un tamaño de
aproximadamente 35-110 x 12-25 µm; además de ser
pluriseptados (de 6 a 12 células), de paredes muy
gruesas y rugosas (2 µm), con tabiques transversales
Ilustración 2: Cultivo de Microsporum canis que circunscriben amplias celdillas. Los microconidios
piriformes de 1-2 µm habitualmente son escasos, en breves racimos o sésiles, que brotan
lateralmente de la hifa. Las hifas se observan en raquetas, escasas espirales y clamidosporas
e hifas están pectinadas en los cultivos viejos.
Además de estas características, otro punto a destacar sobre Microsporum canis, es que se
han descrito tres subespecies dentro de esta especie, las cuales son: M. canis var. distortum,
M. canis var. pulverulentum y M. canis var. obesum.
1.2. Enfermedades que produce
La dermatofitosis es una infección de los tejidos queratinizados, uñas, pelo y estrato córneo
causada por varios tipos de hongos dermatofitos, entre ellos se encuentra el Microsporum
canis. El mismo que puede afectar a perros, gatos y ocasionalmente a humanos, en los que la
dermatofitosis toma el nombre de “tiña” acompañado de la región corporal donde se
presente.
Referente a la sintomatología, se puede
apreciar que aparecen una o varias lesiones,
con diversos grados de descamación y con
mayor o menor formación de costras y
pérdida de pelo. Los pelos suelen romperse
justo a nivel de la salida de la piel. En perros,
la mayoría de los casos de dermatofitosis se
ven con mayor frecuencia en cachorros, en
perros adultos la enfermedad no es muy
habitual, sin embargo, sí se puede dar en Ilustración 3: Lesiones por dermatofitosis en perros
ocasiones en que los perros se encuentran inmunodeprimidos. Las lesiones pueden aparecer
sobre cualquier parte del cuerpo y en general se presentan como áreas circulares de alopecia;
los pelos normalmente se quiebran en la base. El centro de la lesión en general contiene
escamas de piel pálida, lo que le otorga un aspecto polvoriento y los bordes normalmente son
eritematosos. En estadios posteriores, la lesión suele cubrirse con una costra cuyos bordes
están inflamados. Las lesiones individuales pueden unirse formando grandes manchas
irregulares.
En gatos, es muy poco común observar
lesiones debidas a la enfermedad. Los gatos
adultos de pelo largo, especialmente, pueden
ser portadores asintomáticos; en cambio, en
otros casos, los gatos pueden presentar
lesiones mínimas que consisten en zonas
irregulares de pelo rasposo, alopecia y placas
Ilustración 4: Lesiones por dermatofitosis en gatos escamosas, visibles sólo a la inspección
cercana. Los casos sintomáticos son habituales en crías, con lesiones tempranas en cara,
orejas y patas. Generalmente, las lesiones constan de un área de alopecia focal, con escamas
y costras que tienen algunos pelos quebrados. En el área puede aparecer una costra fina y de
color blanco grisáceo o una escara espesa y húmeda, que puede o no ser pruriginosa.
1.3. Protocolo de muestreo en animales
Esta enfermedad no es posible de diagnosticar de
manera clínica, debido a que las lesiones que
ocasiona son muy parecidas a las de otras entidades
clínicas. Por tanto, es necesario la toma y
procesamiento de muestras para su diagnóstico.
La toma de muestras se puede realizar en el pelo, la
Ilustración 5: Toma de muestra por método de
piel o las uñas del animal, dependiendo de donde Mackenzie
se presenten las lesiones. Para tomar muestras del pelo, se debe arrancar con una pinza
mosquito de la zona periférica de la lesión y de las zonas descamativas. También se utiliza una
técnica denominada como técnica de Mackenzie, la cual consiste en cepillar al animal con un
cepillo de dientes estériles, recogiendo los pelos y los restos de queratina que se arrojen, este
procedimiento se emplea principalmente en animales asintomáticos o que tengan lesiones
difusas.
Las muestras de la piel se obtienen mediante un raspado de los márgenes de la lesión, el cual
se realiza después de que se haya limpiado la zona afectada con una gasa mojada con alcohol
de 70° y se haya dejado secar. Y, por último, las muestras de las uñas se obtienen simplemente
cortando una uña, de la cual se deshecha la parte distal, es necesario que la muestra se tome
de una parte intermedia para su análisis.
1.4. Protocolo de procesamiento en el laboratorio
El medio universalmente utilizado para el aislamiento de
los dermatofitos es el agar glucosado de Sabouraud, pH 5,6,
al que se le pueden añadir antibióticos (cloranfenicol,
gentamicina, tobramicina), o antifúngicos (cicloheximida),
para inhibir el crecimiento de bacterias y hongos
contaminantes. Las muestras se siembran sumergiendo las
Ilustración 6: Agar glucosado de escamas de piel, fragmento de uñas o pelos por debajo de
Sabouraud
la superficie con un gancho de alambre o asa de inoculación. Todos los medios de cultivo
sembrados para dermatofitos se incuban a 22-25 °C, o a temperatura ambiente. Los cultivos
se mantendrán en incubación, al menos, durante 30 días antes de descartarlos como
negativos, examinándolos cada 5 días. Generalmente, la esporulación se produce a los 7-10
días de incubación; aproximadamente a las dos semanas es el mejor momento para observar
el aspecto característico de las colonias y su morfología microscópica.
Además del cultivo de las muestras, otra manera de diagnosticar esta enfermedad se da
mediante el método de Wood, en el que se usa una lámpara de luz ultravioleta para examinar
el pelaje e identificar hongos, esto se puede hacer debido a que algunas subespecies de
Microsporum canis son fluorescentes. También se puede realizar un examen microscópico
de las muestras en hidróxido de potasio (KOH), debido a que este permite revelar las hifas o
las conidias.
1.5. Reporte de resultados
Dentro de los resultados que debe arrojar el laboratorio para saber si nos encontramos frente
a un caso de dermatofitosis por Microsporum canis deberían estar los siguientes:
Resultados de laboratorio
Examen de KOH Cultivo
Características Características
microscópicas macroscópicas
Tiempo de crecimiento: 7 Tinción: Hifas delgadas,
días. septadas, ramificadas,
Coloración de las colonias: macroconidios en forma de
Positivo
Amarillento limón con el huso, pared externa gruesa,
tiempo color canela. rugosa, con septos delgados.
Aspecto de las colonias:
Algodonosas, ilimitadas,
planas, radiadas.
2. Trichophyton mentagrophytes
2.1. Características microbiológicas
De manera general el género Trichophyton son hongos de la división Ascomycota, conocidos
como hongos dermatofitos. Estos hongos presentan una estructura macroscópica, las cuales
se visualizan en los cultivos que se realizan para su detección, proyectando colonias
generalmente planas, de color blanco o crema, con textura pulverulenta, granulosa o
aterciopelada y al reverso se observa con pigmento amarillento o café rosado a rojo café.
Microscópicamente se observan hifas hialinas, septadas y ramificadas, abundantes
microconidios esféricos o semiesféricos, los cuales se producen solitariamente a lo largo de
la hifa o en acúmulos que semejan racimos de uvas; también pueden observarse
clamidoconidios esféricos, hifas en espiral, en raqueta y cuerpos nodulares.
Otra de sus características, es su forma de infección, dado que, es contraída esencialmente
por contacto directo con el agente, que se adquiere por contacto simple con pelo, piel o
costras contaminadas de un portador sintomático o asintomático, otra forma de transmisión
es indirecta, con el contacto de material contaminado, siendo el gato el principal portador.
Ilustración 7: Cultivo de complejo T. mentagrophytes Ilustración 8: Macroconidios en clave teñidas con tinta
incubado en agar Saboureaug glucosa china
2.2. Enfermedades que produce
Los Trichophyton mentagrophytes causan generalmente lesiones en la queratina de la piel,
pelos y uñas; a medida que el hongo crece, aparecen en la piel cambios hiperplásicos,
acompañados de foliculitis y forunculosis, en algunos casos con contaminación bacteriana
secundaria.
La tiña es la lesión más significativa y característica de este hongo. Se basa en una afección
cutánea, en la que aparecen una o varias lesiones, con diversos grados de descamación y con
mayor o menor formación de costras y pérdida de pelo. Los pelos suelen romperse justo a
nivel de su salida de la piel. En el curso de la infección, en algunos casos el hongo tiende a ser
eliminado en el centro de las lesiones y la piel de esas áreas recupera su aspecto normal,
mientras que en la periferia de la lesión el microorganismo permanece activo. Ello produce
una lesión característica en forma de anillo.
La Foliculitis-forunculosis facial se caracterizada por áreas alopécicas, eritematosas y
costrosas, acompañadas de pápulas y pústulas en la zona dorsal del tabique nasal que pueden
extenderse a toda la cara.
El término querion se usa para definir una lesión nodular, bien delimitada, alopécica,
exudativa y con trayectos fistulosos que se desarrolla debido a la sobreinfección por
estafilococos de una dermatofitosis inicial.
La onicomicosis es otra enfermedad frecuente en el perro y se caracteriza por la presencia de
onicodistrofia (uñas anormales) y perioniquia (inflamación del tejido periungueal) así como
de alopecia y descamación de la piel próxima a la uña.
2.3. Protocolo de muestro en animales
El diagnóstico de laboratorio se realiza a partir del cultivo de muestras de raspados o
fragmentos de la lesión. La identificación es fundamentalmente convencional basándose en
observaciones macro y micromorfológicas de las colonias y pruebas bioquímicas y fisiológicas.
Al ser afecciones cutáneas las muestras se obtienen mediante raspadura o mediante toma
con moqueta estéril pasándola sobre las lesiones o, en ausencia de lesión visible, sobre los
lugares más frecuentemente afectados (hocico, orejas, patas) o sobre el conjunto del cuerpo,
por el contrario, se puede obtener análisis a partir del pelaje.
2.4. Protocolo de procesamiento en el laboratorio
Para la detección de este hongo existen varias pruebas que pueden ser óptimas para la
detección o comprobación de su existencia. Uno de los más usados son los medios de cultivos
donde los pelos y la descamación recogidos se depositan con cuidado (sin apretar) en la
superficie del medio y se incuba en la oscuridad a temperatura ambiente, es decir, a unos 25-
30°C en agar Sabouraud glucosa entre 6-7 días, otro cultivo a usar es el DTM (Dermatophyte
Test Medium), donde se sigue el mismo proceso.
Otro método es por medio de la lampara de Wood, el cual se basa en la capacidad de emitir
fluorescencia verde-amarillenta que tienen algunas cepas de dermatofitos cuando se
iluminan con luz ultravioleta. La lámpara debe dejarse calentar durante 3-5 min. y luego, en
la oscuridad se iluminan las zonas de la piel o los pelos obtenidos como muestra sospechosos
de estar infectados. Este examen puede poner de manifiesto lesiones muy discretas y permite
orientar la toma de muestra en el animal y en el individuo afectado.
Un examen microscópico directo, es otro de los métodos en el que a partir del raspado y
especialmente de los pelos se somete a una observación por medio del microscopio, donde
en algunas gotas de solución que digiera la queratina (hidróxido de potasio al 30%, negro de
clorazol E).
2.5. Reporte de resultados
Dentro de las pruebas en medios de cultivos se da como resultado:
RESULTADOS DE CULTIVOS
CRECIMIENTO Rápido de 5-6 dias
COLONIAS Polvorosas, vellosas, reverso incoloro
MICROCONIDIOS Numerosos, redondeados, dispuestos en matas
MACROCONIDIOS Lisos, escasas, en mazas
PARTICULARIDAD Filamentos articulados en ángulo recto
Por el contrario, para las pruebas de microscopio directo, su examen resulta positivo se existe
presencia de filamentos miceliales en las escamas.
3. Microsporum gypseum
3.1 Características microbiológicas
Microsporum gypseum es un dermatofito asociado al suelo que ocasionalmente coloniza e
infecta las capas muertas superiores de la piel de los mamíferos. Este hongo es otra especie
dermatofítica que también posee distribución mundial, presenta un porcentaje de
aislamiento que varía desde 0,6% a 14% en gatos/perros asintomáticos, y 1,56% a 5% en
gatos/perros con lesiones dérmicas. Es la única especie geofílica con clara capacidad patógena
para el hombre, aunque resulta poco habitual y puede transmitirse en forma clínica entre
animales, entre humanos, y de animales a humanos. Se menciona como responsable de una
serie de casos de dermatofitosis en gatos y en
brotes interespecíficos de gatos/perro y
humanos. M. gypseum ha sido descrito como
causante de infecciones oportunistas en
pacientes con el virus de inmunodeficiencia
Ilustración 9: Aspecto microscòpico Microsporum
humana (VIH).
gypseum
3.2. Enfermedades que produce
La tiña es una afección cutánea contagiosa causada
por un hongo (dermatofito) que habita en el pelo y
los folículos pilosos. Supone un problema en primera
instancia para los gatos, pero también pueden
infectarse perros y otros animales.
Ilustración 10: Lesiones por tiña en gatos.
En el gato, la causa del 8.3% de los casos es el
dermatofito Microsporum gypseum, está en especial causa el contagio con espacios/suelos
infectados.
Los gatos/perros se pueden infectar por contacto directo con el hongo o por vivir en el mismo
entorno, o bien por compartir objetos de aseo o zonas de descanso. Las esporas son muy
resistentes y pueden persistir en el ambiente hasta dos años; se depositan sobre la piel y
germinan para producir hifas que invadirán la piel y el pelo. No se sabe cuántas esporas son
necesarias para producir la infección.
Los gatos presentan una enfermedad cutánea severa, mientras que otros no tienen lesiones,
o son imperceptibles. Las lesiones típicas son poco aparentes y se dan de la siguiente manera:
• Tienen tendencia a ser circulares y alopécicas, particularmente en cabeza, orejas y patas.
• Los pelos que rodean estas zonas suelen estar rotos.
• La piel aparece descamada puede parecer inflamada.
Al igual que en la dermatofitosis causada por
Trichophyton mentagrophytes, también se produce
querion por Microsporum gypseum. A diferencia de la
típica lesión anular descamativa, que se extiende a la
periferia y que normalmente presenta curación en la
zona central, el querion suele aparecer de forma
Ilustración 11: Querion dermatofìtico en perros.
aguda, de aspecto eritematoso, exudativo y sin
tendencia a la diseminación.
3.3. Protocolo de muestreo en animales
El cultivo fúngico es el método de elección. Los pelos
elegidos se recogen y se colocan en unos medios especiales
de cultivo para después incubarse en un laboratorio. Hay
más posibilidades si se eligen los pelos rotos, cercanos a la
lesión o que hayan mostrado fluorescencia bajo la lámpara
de Wood.
Ilustración 12: Toma de muestra en
lesión de la piel por dermatofitosis.
Para la toma de muestras obtenemos un poco de pelo de la
lesión con presencia de zonas descamativas. Utilizamos la técnica de Mackenzie para poder
observarlas en el microscopio. Para la obtención de la muestra de la piel hay que limpiar la
zona afectada con una gasa húmeda con alcohol de 70°, posteriormente dejamos secar y
procedemos al raspado de los márgenes de la lesión.
3.4. Protocolos de procesamiento en el laboratorio
Se describe los siguientes métodos para el procesamiento de las muestras dentro del
laboratorio:
Con la lámpara ultravioleta de Wood se dirige la luz hacia el
pelo en una habitación oscura y los pelos infectados pueden
mostrar fluorescencia con un característico color verde
manzana. Se cree que esta fluorescencia es debida a un
metabolito producido por el M gypseum.
Ilustración 13: Método de Wood para
detectar hongos en la piel.
Si se realiza un examen microscópico de los pelos
sospechosos luego de haber realizado la técnica de Mackenzie, procedemos a examinar las
muestras obtenidas, puede dar un diagnóstico rápido y muy fiable si se observan elementos
fúngicos y esporas asociados a ellos.
Y, por último, para realizar un cultivo, los pelos y la descamación
recogidos se depositan con cuidado en la superficie del medio y
se incuba en la oscuridad a temperatura ambiente. Se utilizan
como medios de cecimiento: Sabouraud y DTM (Dermatophyte
Ilustración 14: Medio de cultivo
para Microsporum gypseum
Test Medium), 28°C adicionado con cicloheximida y cloranfenicol, -lactrimel etc.
También se puede realizar un examendirecto con K(OH) al 20%, azul de lactofenol y blanco
de Calcofluor, se usa esta tinción ya que este hongo se tiñe con gran dificultad.
3.5. Reporte de resultados
Resultados de laboratorio
CULTIVO AGAR Cultivo
Características Características
microscópicas macroscópicas
Positivo Colonia de Microsporum
Se observan en las costras o
gypseum, la cual creció en
declamación.
agar Sabouraud
Resultados de laboratorio
LÁMPARA DE WOOD Cultivo
Características Características
microscópicas macroscópicas
Se observan en las costras o
dentro de los tallos del pelo
cerca de la porción basal de
Positivo la raíz, como elementos Tinción: la parte afectada se
miceliales, estrechamente tiñe de color verde manzana
tabicados, hialinos; o como mostrando florescencia.
cadenas o vainas de esporas
(artrosporas) en la superficie
externa del pelo.
4. Trichophyton erinacei
4.1. Características microbiológicas
Estos organismos, denominados dermatofitos, son los miembros
patogénicos de los hongos cc (que digieren la queratina) del
suelo. Sobre su hábitat, son antropofílicos, geofílicos o zoofílicos,
si bien es cierto que cada especie tiene un hábitat, de los cuales
los dermatofitos zoofílicos regularmente infectan a los animales
(Romero, 2017). Microscópicamente, las macroconidias son
Ilustración 15: Microconidios
alargados dispuestos a lo largo de escasas, se suelen disponer individualmente, casi nunca
las hifas característicos de
Trichophyton erinacei. agrupadas. Tienen una pared fina y lisa, en forma de cigarro, huso
o cilindro y presentan de 1 a 12 septos. Las microconidias suelen ser muy abundantes, con
forma globosa, piriforme o alargada y se disponen individualmente a lo largo de los lados de
las hifas o agrupadas en racimos, pudiendo ser sésiles o pedunculadas. El aspecto
macroscópico de este género es variable y presenta diferencias entre las distintas especies,
por lo que las colonias pueden ser pulverulentas, algodonosas, cerebriformes, velludas, etc.
El reverso de éstas puede mostrar una pigmentación rojiza o marrón. Las microconidias tienen
forma de perla o lágrima y dan positiva la prueba de la ureasa; también pueden aparecer hifas
en espiral y las macroconidias habitualmente están ausentes (Molina, 2011).
4.2 Enfermedades que produce
La tinea faciei es una enfermedad contraída esencialmente
por contacto directo con el agente, que se adquiere por
contacto simple con pelo, piel o costras contaminadas de
un portador sintomático o asintomático. Otra forma de
transmisión es indirecta, con el contacto de material
contaminado con propágulos o fómites, siendo el gato el
principal portador.
La mayoría de las infecciones por Trichophyton se
Ilustración 16: Lesiones circulares y
sospecha que se deben al contacto con roedores alopécicas en canino y felino
infectados o sus nidos (Romero, 2017). Otra de las causas de contagio es transmitida por
contacto directo entre un animal infectado a otro no infectado, o por transmisión de objetos
de aseo, collares, ropa o por la exposición a un ambiente contaminado. (Siso, 2021)
Los principales síntomas son la aparición de lesiones circulares sobre la piel y enrojecimiento,
la alopecia localizada, la aparición de costras o escamas amarillentas, la inflamación de los
pliegues de las uñas y un fuerte hedor desprendido por la piel del animal. Para confirmar que
el canino o felino está evidentemente afectado por Tinea faciei, el profesional veterinario
deberá realizar un análisis a partir de la toma de muestra y se realizará un combinado con un
cultivo de hongo con la muestra de piel infectada.
Una vez confirmado el diagnóstico, el tratamiento puede variar. Normalmente, se suele
aplicar un tratamiento sintomático tópico, con lociones o pomadas antifúngicas que impiden
la proliferación del hongo. Esta medida debe aplicarse hasta que la presencia del hongo sea
negativa en los controles médicos.
Como medidas de control y prevención adicionales, es importante bañar periódicamente a
nuestro perro con un champú adecuado, así como mantener nuestro entorno doméstico lo
más higiénico posible. (Rodriguez, 2019)
4.3. Protocolo de muestreo en animales
La toma de muestras se realiza a partir de un raspado o fragmentos de la lesión del canino o
felino. La técnica consiste en arrastrar la cuchilla en sentido del crecimiento del pelo,
mediante movimientos cortos y repetidos hasta obtener sangrado capilar abundante. La
identificación es fundamentalmente convencional basándose en observaciones macro y
micromorfológicas de las colonias y pruebas bioquímicas y fisiológicas (Rivas, 2015).
4.4. Protocolo de procesamiento en el laboratorio
Se requiere la toma de muestras de escamas cutáneas, las que son inoculadas en placas de
agar Sabouraud-glucosa suplementado con cloranfenicol, con y sin gentamicina, y en tubos
de agar Sabouraud-glucosa con y sin cicloheximida. El examen microscópico resultará
compatible con Trichophyton erinacei (Rivaya, 2020)
Medios de cultivo
Medio de cultivo Sabouraud-glucosa Tubo de agar Sabouraud-glucosa
Ilustración 17 y 18: Observación microscópica de Trichophyton erinacei teñido con solución de azul de
Lactofenol.
4.5. Reporte de resultados
Resultados de laboratorio
Cultivo Agar-Sabouraud Cultivo
Características microscópicas Características macroscópicas
Tiempo de crecimiento: Tinción:
7 días Cepas con morfología de tipo
granular y aspecto
Aspecto de las colonias: pulverulento, de color
La característica más blanquecino o cremoso y
destacable es la presencia de bordes desflecados e
abundantes microconidias irregulares, con reverso de
Positivo color marrón oscuro o rojizo y
sésiles, redondas o
las cepas con morfología de
subesféricas, formando
tipo aterciopelado, con
racimos o grupos a lo largo de pliegues radiados y circulares y
las hifas maduras. Las cepas de micelio blanco brillante y muy
tipo aterciopelado suelen denso que suele virar a rosado
producir también en las colonias más viejas, su
microconidias en forma de reverso es de color amarillento
lágrima. a rojizo.
5. Levaduras
5.1. M. pachydermatis
5.1.1. Características microbiológicas
El género Malassezia incluye levaduras lipófilas que tienen como hábitat principal la piel de
una gran variedad de aves y mamiferos. Se consideraba formado por dos especies, la especie
lipodependiente M. furfur, característica de la piel del hombre y la especie no
lipodependiente M. pachydermatis, asociada a los animales.
Es una levadura lipofílica no dependiente de lípidos.
Las colonias son de color crema o amarillento, de lisas
a arrugadas y convexas con un margen que posee una
apariencia ligeramente lobulada. Las células tienen
forma ovoide y su tamaño oscila entre 3,0 y 6,5 x 2,5
μm. Las colonias crecen a través de gemación unipolar,
y las hifas rara vez se ven en cultivo.
Ilustración 19: Morfología microscópica de
El crecimiento óptimo ocurre entre 30 y 37 ° C (86 y Malassezia pachydermatis (tinción de Gram)
99°F) y la maduración se produce en cinco días. Es la única especie de Malassezia capaz de
crecer sin la presencia de ácidos grasos. Aunque no depende de los lípidos, su crecimiento se
ve favorecido por la presencia de lípidos. Su ADN se caracteriza por un contenido de 56% de
guanina-citosina
5.1.2. Enfermedades que produce
En los tejidos que se encuentran infectados, esta levadura ocasiona varias enzimas como la
proteinasa, la hialuronidasa, la fosfolipasa y la condroitina-sulfatasa. La fosfolipasa y la
proteinasa se liberan también en infecciones que se encuentran relacionadas con Candida
albicans y se ha descubierto que ayudan a su virulencia al inducir poros en las membranas de
las células huésped. Es considerada una levadura zoofílica porque está presente en la piel y
conducto auditivo externo de animales silvestres y domésticos, pudiendo provocar en éstos
dermatitis y otitis. (Cruz & Vieille, 2015)
La dermatitis por M. Pachydermatis se presenta más en perros adultos y gatos. Afecta de
manera igual a los dos sexos. La infección por M. Pachydermatis suele estar asociada a: Un
síndrome de hiperpigmentación e hiperqueratosis, eritema y costras. Estas lesiones son
pruriginosas con un grado leve o severo. En la lesión se puede apreciar un olor rancio y
desagradable, pude haber seborrea grasa, pero se pueden encontrar lesiones secas, también
se presentan lesiones crónicas con alopecia. Suele ser más frecuente en meses cálidos, ya que
se presenta mayor presencia de parásitos cutáneos, alérgenos y existe también una mayor
humedad ambiental. La lesión suele comenzar en el abdomen y se extiende hacia las ingles,
axilas y zona ventral del cuello. En gatos, la dermatitis por M. Pachydermatis aparece como
dermatitis pruriginosa con alopecia, eritema, seborrea seca o aceitosa. (Suarez, 2015). Entre
los principales síntomas están la irritación y picazón, manchas en la piel, alopecia, piel
escamosa y enrojecimiento de las zonas afectadas.
La otitis externa asociada a M. pachydermatis es una enfermedad inflamatoria común del
canal auditivo externo de los perros y de los gatos. A menudo se caracteriza por la presencia
de un exudado céreo oscuro y húmedo, con presencia de eritema y prurito. Existe una serie
de factores que desencadenan la aparición de una otitis por M. pachydermatis, procesos
alérgicos, cuerpos extraños (espigas, semillas, etc.), parásitos, neoplasias, afecciones
autoinmunes, trastornos hormonales (hipotiroidismo), reacciones adversas a fármacos. Los
síntomas más frecuentes que presenta el animal al tener otitis son: ladeo de cabeza, dolor
intenso a la palpación, olor a rancio en el conducto auditivo afectado y aumento de la
secreción color marronáceo y aspecto grasoso.
5.1.3. Protocolo de muestreo en animales
En la consulta veterinaria se utilizan distintas
técnicas citológicas para poder evaluar y valorar
las poblaciones de M. pachydermatis. La toma
de muestras por medio de la cinta adhesiva
muestra una gran aceptación ya que posibilita
una forma más sencilla la recuperación de
células de la capa más externa de la piel y sus
Ilustración 20: Levaduras globosas M. pachydermatis.
microorganismos asociados. Posteriormente, se Examen de cinta adhesiva teñida con safranina al 0,5 %
tiñen mediante una tinción rápida de Diff-Quik y se observan al microscopio. Sin embargo,
como se indica en estas recomendaciones, los recuentos elevados no tienen por qué ser
necesariamente relevantes desde el punto de vista clínico en todos los casos. También puede
obtenerse una muestra por raspado superficial y aplicar KOH al 40%, azul de metileno o
blanco de calcoflúor.
5.1.4. Protocolo de procesamiento en el laboratorio
Las muestras que son obtenidas por raspado de piel deben ser
sembradas en agar Sabouraud, y para su aislamiento de otras
especies en medio Dixon o Leeming y Notman por 10 días a 32°C.
Ilustración 21: Colonia de M.
El agar Sabouraud con aceite de oliva es útil, sin embargo, tiene pachydermatis en CHROMagar.
Malassezia a 32ª C por 10 días.
menor sensibilidad que los otros medios. El cultivo en CHROMagar Malassezia a 32°C por 10
días permite, por el color de las colonias, diferenciar algunas especies del género.
La prueba de asimilación de Tween se lleva a cabo realizando cuatro orificios y rellenándolos
con gotas de Tween 20, 40, 60 y 80; respectivamente, a colonias homogenizadas en agar
Sabouraud estéril fundido y luego solidificado. Las placas son incubadas a 32°C por 10 días.
M. pachydermatis asimila las Tween 40, 60 y 80.
La morfofisiología puede no ser suficiente en la identificación de algunas cepas
lipodependientes, por lo que la secuencia de algunos genes (por ejemplo, ITS-5.8s y 26S rRNA
D1D2) o el uso de nuevas herramientas como MALDI-TOF pueden ser necesarias.
5.1.5. Reporte de resultados
Resultados de laboratorio
Examen de KOH al 40% Cultivo con Agar Sabouraud
Características Características
microscópicas macroscópicas
Tiempo de crecimiento: 10 Tinción: Ausencia de hifas.
días.
Positivo Coloración de las colonias:
Presentan un color rosa
pálido.
Aspecto de las colonias:
Colonias lisas
5.2. Candida Albicans
5.2.1. Características microbiológicas
Es un habitante normal de las mucosas del aparato
digestivo, las vías aéreas superiores y los genitales de los
mamíferos. En forma de levadura presenta un aspecto de
células redondas u ovaladas, de 3-8 x 2-7 micras de
tamaño, agrupadas en pequeños grupos, crece
normalmente a 37ºC en el huésped, se comporta como Ilustración 22: Citología realizada con
tinción 15, se observan C. albicans 100x
saprofita, conviviendo en simbiosis con el huésped. (objeto de inmersión en aceite).
5.2.2. Enfermedades que produce
En caninos, las lesiones en las membranas mucosas
se presentan como úlceras las cuales no cicatrizan,
cubiertas por placas blanco-grisáceas, rodeadas de
un halo eritematoso, y suelen ser malolientes y
dolorosas. En la piel, la infección comienza como
pápulas, evolucionan a pústulas, para
Ilustración 23: Eritema marcado, úlceras y posteriormente formar placas exudativas
exudado blanquecino.
blanquecinas, rodeadas de un halo eritematoso. Las
mismas son pruriginosas y pueden ser dolorosas. Afectan zonas donde la humedad esta
aumentada, como pliegues cutáneos, espacios interdigitales y lechos ungueales. Cuando la
infección afecta la mucosa genital, los caninos presentan un flujo blanquecino prepucial o
vulvar. En el conducto auditivo externo, se presenta como una otitis exudativa, eritematosa
y pruriginosa. (Loaiza & Duarte, 2017)
En los gatos, las lesiones infecciosas cutáneas son muy
poco frecuentes. Estas consisten en eritema, ulceras,
exudación y costras, se suelen localizar en zonas
intertriginosas, extremidades y uniones mucocutáneas.
También puede producir otitis externa exudativa y Ilustración 24: Felino hembra, con lesión
ulcerada en el tronco po C. Albicans.
ulcerativa. En algunos casos se ha informado de
vesículas y úlceras en uniones mucocutáneas de la boca, nariz, ano, genitales y cavidad bucal.
5.2.3. Protocolo de muestreo en animales
Tomar la muestra del borde de la zona más activa de la
lesión. Las lesiones secas se raspan con bisturí, cucharilla
o borde del portaobjetos, las lesiones húmedas emplean
escobillones o torundas estériles, en el caso de pelos
arrancar con pinzas los pelos que se encuentren rotos,
raspando también las lesiones escamosas, recoger
cantidad suficiente de material patológico (escamas,
pelos), hacer caer el material directamente en un Ilustración 25: Colonias de C. Albicans,
donde se observa su aspecto
característico.
portaobjeto teñido con blanco de calcoflúor. También se lo puede realizar por hisopado nasal
5.2.4. Protocolos de procesamiento en el laboratorio
El cultivo micológico, se realiza en agar dextrosa sabouraud, donde se observa luego de 3 a 5
días el crecimiento de colonias color crema, de aspecto cremoso y opacas. Luego se obtienen
muestras de las mismas para su observación al microscopio óptico e identificación. El estudio
histopatológico, rara vez revela la presencia de las levaduras, ya que el procedimiento de
rutina para procesar las muestras puede eliminarlas de la superficie de la piel. Se pueden
observar en el estrato córneo, pero a veces penetran en la epidermis. Se prefiere utilizar la
tinción de P.A.S. (ácido peryódico de shiff) o la metenamina de plata de Gomori. En general
se observan pústulas epidérmicas superficiales, levaduras y pseudohifas en costras o pústulas.
5.2.5. Reporte de resultados
Cultivo con Agar Sabouraud
Características Características
microscópicas macroscópicas
Tiempo de crecimiento: 3 a Tinción: Hifas, blastosporas y
7 días. tubos germinales.
Coloración de las colonias:
Presentan un color crema.
Aspecto de las colonias:
Colonias lisas de aspecto
cremoso y blandas
6. Conclusiones
• Existen diferentes hongos que causan infecciones de la piel o del tejido queratinizado en
animales como los perros y gatos, estos toman el nombre de Dermatofitos y
principalmente pertenecen a los géneros: Microsporum y Trichophyton.
• Los hongos tienen distintas características morfológicas, sin embargo, muchos pueden
causar afecciones con lesiones muy parecidas.
• Conocer los distintos métodos de identificación de los hongos que causan enfermedades
es importante para poder distinguir un tratamiento adecuado de la enfermedad.
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