BIOQUÍMICA GENERAL DBIO 1076 202220
Laboratorio 4: Enzimas de Utilidad Clínica
Reporte
Nombres: Linda Cavero, Nicole Cavero, Gustavo Vargas.
Fecha: 06/11/2022 Sección: P71 Puntaje ___/20 Nota ____________
Fundamento del método utilizado para la determinación cuantitativa de
las enzimas séricas
1. (2 puntos) ¿Por qué los sustratos de las enzimas GPT y GGT deben estar en
exceso?
Para contextualizar, cuando hablamos de la actividad enzimática nos referimos
a la velocidad de la reacción que las enzimas están catalizando y se medirá con
la desaparición de sustrato o aparición de producto en una unidad de tiempo.
Los sustratos de las enzimas GPT y GGT deben estar en exceso para poder
medir la velocidad de la reacción enzimática. Esta velocidad será proporcional a
la cantidad de enzima activa presente en la muestra que estemos analizando.
Por lo tanto, se debe contar con un exceso de sustrato para favorecer la
reacción de todas las enzimas activas presentes y que la reacción ocurra de
manera eficiente.
Determinación de la actividad de GPT (ALT)
2. (5 puntos) Complete la siguiente tabla a partir de los datos experimentales,
y después realice los cálculos necesarios para determinar la actividad
enzimática de las muestras N y P.
Medición Absorbancia340 Variación Absorbancia340 Variación
minutos Muestra N Absorbancia/min Muestra P Absorbancia/min
1 2,287
1,697
0,016 0,033
2 1,664
2,271
0,019 0,021
3
2,252 1,643
0,013 0,032
4
2,239 1,611
N
Δ Absorbancia= Absorbancia 1- Absorbancia 2=> 2,287- 2,271= 0,016
Δ Absorbancia= Absorbancia 2- Absorbancia 3=> 2,281- 2,252= 0,019
Δ Absorbancia= Absorbancia 3- Absorbancia 4=> 2,252- 2,239= 0,013
Promedio ΔAbs/min = (0,016+ 0,019+ 0,013) / 3= 0,016 Abs/min
Actividad enzimática GPT(U/L) = (Δ Absorbancia ₃₄₀nm/min) x Factor (Factor
37°= 2143)
Actividad enzimática GPT(U/L) =0,016 x 2143= 34 U/L
Δ Absorbancia= Absorbancia 1- Absorbancia 2=> 1,697- 1,664= 0,033
Δ Absorbancia= Absorbancia 2- Absorbancia 3=> 1,664- 1,643= 0,021
Δ Absorbancia= Absorbancia 3- Absorbancia 4=> 1,643- 1,611= 0,032
Promedio ΔAbs/min = (0,033+ 0,021+ 0,032) / 3= 0,029 Abs/min
Actividad enzimática GPT(U/L) = (Δ Absorbancia ₃₄₀nm/min) x Factor (Factor
37°= 2143)
Actividad enzimática GPT(U/L)=0,029 x 2143= 56 U/L
Determinación de la actividad de gammaglutamiltransferasa
3. (5 punto) Complete la siguiente tabla a partir de los datos experimentales,
y después realice los cálculos necesarios para determinar la actividad
enzimática de las muestras N y P.
Medición Absorbancia405 Variación Absorbancia405 Variación
minutos Muestra N Absorbancia/min Muestra P Absorbancia/min
1 1,015
1,520
0,013 0,032
2 1,552
1,028
0,014 0,027
3
1,042 1,579
0,013 0,026
4
1,055 1,605
N
Δ Absorbancia= Absorbancia 2- Absorbancia 1=> 1,028- 1,015= 0,013
Δ Absorbancia= Absorbancia 3- Absorbancia 2=> 1,042- 1,028= 0,014
Δ Absorbancia= Absorbancia 4- Absorbancia 3=> 1,055- 1,042= 0,013
Promedio ΔAbs/min = (0,013+ 0,014+ 0,013) / 3= 0,013 Abs/min
Actividad enzimática GGT(U/L) = (Δ Absorbancia ₄₀₅nm/min) x Factor (Factor
37°= 1158)
Actividad enzimática GGT(U/L)= 0,013 x 1158= 15 U/L
Δ Absorbancia= Absorbancia 2- Absorbancia 1=> 1,552- 1,520= 0,032
Δ Absorbancia= Absorbancia 3- Absorbancia 2=> 1,579- 1,552= 0,027
Δ Absorbancia= Absorbancia 4- Absorbancia 3=> 1,605- 1,579= 0,026
Promedio ΔAbs/min = (0,032+ 0,027+ 0,026) / 3= 0,028 Abs/min
Actividad enzimática GGT(U/L) = (Δ Absorbancia ₄₀₅nm/min) x Factor (Factor
37°= 1158)
Actividad enzimática GGT(U/L)= 0,028 x 1158= 32 U/L
4. (6 puntos) Analice los resultados obtenidos para el paciente N (GPT y GGT)
y para el paciente P (GPT y GGT) con el rango normal para las enzimas
determinadas. Explique una patología con su respectivo fundamento
bioquímico que pudiera presentar el o los pacientes.
Previo a cualquier interpretación de los resultados obtenidos desde un
punto de vista bioquímico es esencial la evaluación inicial que debe
contener un desarrollo de una buena anamnesis, ya que, en el caso de las
alteraciones funcionales hepáticas anormales incluye notablemente la
obtención de antecedentes para identificar posibles factores de riesgo de
enfermedad hepática (como el consumo excesivo de alcohol, obesidad,
diabetes, dislipidemia, consumo habitual de medicamentos e hipertensión)
y la realización de un examen físico para buscar datos clínicos sobre la
etiología y signos de enfermedad hepática crónica.
Luego de entender esta acotación inicial, es importante comprender que
existe un patrón en las anomalías obtenidas desde el examen de
laboratorio, ya que, cada biomarcador representa una posible causa
subyacente, en el caso lesión en los hepatocitos existe un aumento en las
aminotransferasas (GOT/AST y GTP/ALT) y en el caso del aumento en la
fosfatasa alcalina (FA) y (GGT) se relaciona con una colestasis (obstrucción
parcial o total de la vía biliar). La ALT es un marcador más específico de
daño hepático en comparación con la AST, esto se explica en la siguiente
cita:
“AST is present in the liver and other organs including cardiac muscle,
skeletal muscle, kidney, and brain. In children, levels decline with age, more so
in girls than boys after age 11. ALT is present primarily in the liver, and thus is
a more specific marker of hepatocellular cell injury.” (Lawrence S Friedman,
MD, 2022, pág 3)
Para poder realizar el análisis de los resultados obtenidos para los
pacientes N y P utilizaremos los intervalos de referencia presentes en la guía
de laboratorio los que presentamos a continuación: (Extraídos de la Guía de
laboratorio Bioquímica General DBIO-1076, 2022)
GPT (glutamato-piruvato
transaminasa) 0 – 55 U/L (adultos)
GGT (gama glutamil Hombres: 12 – 64 U/L (adultos)
transpeptidasa) Mujeres: 9 – 36 U/L (adultos)
La interpretación de los resultados obtenidos es la siguiente:
Transaminasa Paciente N Paciente P
GPT El valor de GPT (ALT) es El valor para GPT es de 56
(glutamato-piruvato de 34 U/L. U/L.
transaminasa) El paciente N, se El paciente P, tiene sus
encuentra con el biomarcadores en una
biomarcador GPT dentro elevación leve a
de los rangos normales ya moderada en el caso de
que el valor es de 34 U/L, GPT, ya que su alza no es
siendo mayor a 0 U/L que más de 15 veces el valor
es el valor límite inferior y límite superior del rango
menos a 55 U/L que es el normal.
valor límite superior.
Según: Lawrence S
Friedman (2022);
“Mild to moderate
elevation — Mild to
moderate elevations of
the serum
aminotransferases (less
than 15 times the upper
limit of normal) are often
seen with chronic liver
disease, although
transient elevations may
also be seen in patients
with mild hepatic insults
(eg, intake of nontoxic
doses of acetaminophen).
(pág 17)”
GGT (gama glutamil El valor de GGT El valor para GGT es de
transpeptidasa) corresponde a 15 U/L. 32 U/L.
El paciente N, se Para el paciente P, los
encuentra con el valores de GGT se
biomarcador GGT dentro encuentran dentro de los
de los rangos normales, rangos normales,
considerando que pudiera
debido a que, tiene un
ser un paciente adulto
valor de GGT de 15 U/L
puesto que no sabemos
siendo mayor a 0 U/L que edad ni sexo del paciente.
es el valor límite inferior y
menos a 55 U/L que es el
valor límite superior.
Luego de la distinción del rango perteneciente a los valor del GTP del
paciente P (leve a moderada), nos enfocaremos en las posibles patologías que
podrían afectar al paciente:
“Uso de medicamentos
Hepatitis viral crónica (hepatitis B, C, D)
Enfermedad hepática alcohólica
Hemocromatosis
Enfermedad del hígado graso no alcohólico
Hepatitis autoinmune
Enfermedad de Wilson
Deficiencia de alfa-1 antitripsina
Hepatopatía congestiva
Ductopenia biliar del adulto
Infiltración maligna (más a menudo cáncer de mama, cáncer
de pulmón de células pequeñas, linfoma, melanoma o
mieloma)
Trastornos musculares (p. ej., errores congénitos subclínicos
del metabolismo muscular)
Trastornos de la tiroides
Enfermedad celíaca
Insuficiencia suprarrenal
Anorexia nerviosa
Macro-AST”
(Lawrence S Friedman, MD, 2022, pág 17-18)
Debido a la variedad de posibles patologías es importante recordar la
importancia de una buena anamnesis para su posterior diagnóstico.
Es importante entender que todas las patologías asociadas al aumento
de leve a moderado de GTP, se relacionan con la destrucción de los
hepatocitos, ya que, la GTP como es una transaminasa que cataliza reacciones
donde se transfieren grupos amino entre moléculas y como es de tipo GTP está
exclusivamente relacionado a los hepatocitos.
Es relevante considerar que para un mejor análisis es relevante conocer
la edad y el sexo del paciente. En este caso nos estamos basando en los
valores considerados para una persona adulta.
Por otro lado, debemos considerar que este análisis se realizó bajo
valores de referencia recaudados en la guía de Laboratorio, sin embargo estos
intervalos de referencia varían según el lugar donde se está realizando el
análisis en este caso de transaminasas.
Además, estos valores obtenidos están sujetos a un margen de error ya
que los reactivos utilizados deben conservarse a una temperatura adecuada,
no tener contaminación, revisar la fecha de apertura entre otras
consideraciones, y se debe incluir un porcentaje de error de elaboración por el
operador, o margen de error en el equipo si no ha tenido mantención durante
la semana para corroborar su sensibilidad. Por lo tanto, realizamos esta
referencia solo para concluir la importancia de validar los resultados antes de
poder realizar un diagnóstico presuntivo.
Dentro de las patologías asociadas al sector leve y moderado, la más
común en la población según: James Maurice y Pinelopi Manosou (2018)
“NAFLD has a global prevalence of 25% and has become one of the leading
causes of chronic liver disease” (pág 1), la NAFLD es el acrónimo de
“Non-alcoholic fatty liver disease” (Enfermedad del hígado graso no alcohólico),
desde un punto de vista de los factores de riesgo este se puede dividir en tres,
los asociados a enfermedades, los asociados a factores metabólicos y los
factores genéticos. Extraído de James Maurice y Pinelopi Manosou (2018), pág
2.
Con respecto a las dos primeras clasificaciones presentamos algunos ejemplos
de factores de riesgo:
a) Asociados a enfermedades
- Obesidad (por la grasa abdominal)
- Diabetes mellitus tipo II o resistencia a la insulina
- Dislipidemia
- Hipertensión
b) Factores metabólicos
- Lipotoxicidad (almacenamiento de lípidos fuera de los
adipocitos en exceso)
- Lesión y muerte hepatocelular
- Inmunidad inata
- Microbioma
En el desarrollo de la enfermedad del hígado graso no alcohólico, existe
un acúmulo de ácidos grasos en los hepatocitos, por lo que aumenta la sintesis
de trigliceridos, eventualmente los ácidos grasos se acumulan y se inicia la
lipotoxicidad, por la producción de ROS (especies reactivas de oxígeno). La
hiperglucemia, hiperinsulinemia y la resistencia de insulina generan
acumulación adicional de ácidos grasos, generando inflamación crónica de
hepatocitos y fibrosis hepática debido a la activación de las células estrelladas
hepáticas, generando que se liberen transaminasa hepáticas por la necrosis la
apoptosis hepática, por esto, en el caso de la NAFLD (enfermedad del hígado
graso no alcohólico) si el cociente AST/ALT es elevado es probable que se trate
de una esteatohepatitis no alcohólica, pero no es concluyente el resultado.
La mortalidad asociada a esta enfermedad se distribuye principalmente
en enfermedades cardiovasculares y en segunda opción por cirrosis.
Desde el punto de vista del tratamiento la dieta cetogénica y actividad
física se caracterizan por tener muy buenos resultados en un corto periodo de
tiempo.
5. (2 puntos) Cite en formato APA 2 fuentes bibliográficas utilizadas en su
fundamento.
1. Jiménez, M., Pedraza, T., Galar, M.M. y Eugui, J. Determinación
cuantitativa de isoenzimas de fosfatasa alcalina separados por
electroforesis en gel de azarosa después de tratamiento con
neuraminidasa. Valores de referencia. Técnicas de laboratorio, (228)
1998; 17 – 21.
2. Ettinger, S.J y Feldman, E.C. Tratado de medicina interna veterinaria.
Elsevier, 2007; 1422 – 1434.
3. Balcells, A. La Clínica y el Laboratorio. Masson – Salvat, 1989; 295 –
308.
4. Sánchez Visconti, G. Utilidad del proteinograma en clínica de pequeños
animales. Pequeños Animales, 2005; 65 – 70.
5. Facultad de Medicina y Ciencia, Universidad San Sebastián. (2022). Guía
de Laboratorio. Bioquímica General DBIO 1076, (1), 34-45.
6. Maurice, J., & Manousou, P. (2018). Non-alcoholic fatty liver disease.
Clinical medicine (London, England), 18(3), 245–250.
https://doi.org/10.7861/clinmedicine.18-3-245
7. Friedman, L. S. (2022, 5 abril). Approach to the patient with abnormal
liver biochemical and function tests. UptoDate.
https://www.uptodate.com.bdigitaluss.remotexs.co/contents/approach-t
o-the-patient-with-abnormal-liver-biochemical-and-function-tests?search
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