TEMA 8-PARTE I COCOS GRAM (+).

TEMA CARACTERÍSTICAS DE LOS

8 MICROORGANISMOS IMPLICADOS EN
PARTE I
PROCESOS INFECCIOSOS.
COCOS GRAMPOSITIVOS.
PRUEBAS DE IDENTIFICACIÓN BACTERIANA.

1.- COCOS GRAMPOSITIVOS.

Los cocos son bacterias que reciben este nombre por su forma redondeada, estos
cocos según las necesidades de oxigeno pueden ser a su vez aerobios o anaerobios
facultativos.

CLASIFICACIÓN.

FAMILIA MICROCCOCACEAE: Los microorganismos se agrupan de forma

irregular o en tétradas. En ella se incluyen los géneros:

- Staphylococcus.
- Micrococcus.

GÉNERO STREPTOCOCCUS: Los microorganismos incluidos en él

tienen personalidad propia y no se incluyen en ninguna familia.

1.1. FAMILIA MICROCOCCACEAE. STAPHYLOCOCCUS.

Este género está formado por cocos Gram (+), aerobios y anaerobios facultativos,
de forma ligeramente ovoide, que suelen agruparse en racimos (aunque también pueden
hacerlo en parejas, tétradas o cadenas cortas de menos de 4 elementos).

Son inmóviles, generalmente no capsulados y no

esporulados, catalasa (+) (los diferencia de los Estreptococos
que no producen catalasa), y descomponen los azucares por
fermentación.

Algunas de sus especies se pueden aislar en el hombre ya que forman parte de la

flora normal de piel y mucosas. También intervienen en procesos patógenos como
infecciones supurativas e intoxicaciones alimentarias.

Las especies con mayor importancia clínica son:

TEMA 8-PARTE I COCOS GRAM (+). 2

S. EPIDERMIDIS Y S. SAPROPHYTICUS.

Son bacterias no patógenas que viven en la piel y en las mucosas, por lo que se
consideran contaminantes de los productos patológicos.
Actualmente el S. epidermidis, tiene importancia porque, al ser un patógeno
oportunista, la mayoría de las infecciones que provoca son de origen hospitalario y se
producen en inmunodeprimidos o como complicaciones de procedimientos invasivos
(catéteres intravasculares, válvulas cardíacas, etc.).
El S. saprophyticus es causante ocasional de infecciones urinarias en las mujeres
jóvenes.

Son formas no pigmentadas (colonias

blancas) que solo tienen en común que no
producen coagulasa (coagulasa -).

S. AUREUS.

Se le denomina estafilococo dorado porque forma un pigmento amarillo dorado. Es

con diferencia la especie más patógena.

En general, se asocia a patologías como: Granos, forúnculos, neumonía, osteomielitis,

meningitis y artritis.
Crece a una temperatura entre 35-37ºC, y lo hace mejor si el medio tiene un 7% de
ClNa (bacterias halófilas). Resiste el calor y la desecación mejor que otras bacterias y se
diferencia de otras especies porque fermenta el manitol con producción de ácido láctico.
Por todo ello para su aislamiento e identificación se utiliza el medio de CHAPMAN
(agar manitol salado) el medio es de color rojo (rojo fenol) al fermentar el manitol produce
ácido láctico, el medio se acidifica y vira a amarillo.
TEMA 8-PARTE I COCOS GRAM (+). 3

La exotoxina más importante que produce es la coagulasa (es una sustancia que actúa
sobre la fibrina y forma un coagulo), que permite diferenciar el [Link] (coagulasa +) de
S. epidermidis (coagulasa -).

S. aureus S. epidermidis S. saprophyticus

Coagulasa + - -
Manitol + - -
Novobiocina Sensible(S) Sensible (S) Resistente(R)
Pared: Proteína A + - -
Ribitol + - +
Glicerol - + +/-

ACCIÓN PATÓGENA.

Se debe a la acción de:

Los antígenos que se encuentran en la pared celular.
Las toxinas que produce.
Los enzimas o fermentos que produce.

ANTIGENOS DE PARED CELULAR: El S. aureus presenta alrededor de 30 Ag

en su pared celular, de los que cabe destacar:

 POLISACÁRIDO A (N-acetilglucosamina): Es un Ag específico de especie

que induce la formación de Ac y tiene actividad antifagocitaria.

 PROTEÍNA A: Se une a la capa de peptidoglicano o a la membrana

citoplasmática y tiene afinidad por la Fc de las Ig G inactivándola.

 FACTOR DE AGREGACIÓN (Coagulasa): Esta proteína es un destacado

factor de virulencia, que se une al fibrinógeno y lo convierte en fibrina, lo que
hace que los estafilococos se agreguen o formen grupos. Su detección es la
prueba principal de identificación del S. aureus.

 CEPAS MUCOIDES CAPSULADAS: Algunas cepas de S. aureus poseen

una cápsula mucosa que dificulta la fagocitosis por parte de los neutrófilos, y
que le permite adherirse mejor
tanto a sustancias orgánicas como
inorgánicas (catéteres, etc.).

 ÁCIDOS TEICOICOS (Ribitol):

Estimulan una respuesta humoral
específica cuando se encuentran
unidos al peptidoglucano.
TEMA 8-PARTE I COCOS GRAM (+). 4

TOXINAS: Son producidas por S. aureus en medios adecuados y desarrollan

su efecto en zonas distantes del foco de infección. Son:

 HEMOLISINAS: exotoxinas que lisan los hematíes y tienen acción tóxica sobre
otras células como leucocitos, macrófagos, etc. Pueden ser : α, β, γ, δ.

 LEUCOCIDINAS: Se fijan a los fosfolípidos de la membrana de los leucocitos

y macrófagos alterando la permeabilidad y causando la muerte de los fagocitos.

 TOXINA EXFOLIATIVA: Actúa extracelularmente, difunde por la sangre a

partir de una lesión local y llega a la piel (dermotropa) produciendo
enrojecimiento y lesiones que dan lugar al síndrome de la piel escaldada.

 TOXINA DEL SINDROME DEL SHOCK TÓXICO (TSST): Es una

exotoxina producida por S. aureus que se asocia con el uso de tampones de
gran absorción por parte de mujeres menstruantes (en las que los estafilococos
forman parte de su flora vaginal).

 ENTEROTOXINA: Es resistente al calor (termoestable) y al jugo gástrico

(fermentos proteolíticos). Se fija a los receptores nerviosos del tubo digestivo
provocando náuseas, vómitos y diarreas (no fiebre) a las pocas horas de ingerir un
alimento contaminado (sobre todo si es rico en hidratos de carbono y proteínas).

ENZIMAS O FERMENTOS: Actúan en zonas próximas al foco de infección.

Hay que destacar:

 CATALASA: Descompone el H 2O2 y libera oxígeno.

 COAGULASA: coagula el plasma sanguíneo al

activar el fibrinógeno Es responsable de la
TEMA 8-PARTE I COCOS GRAM (+). 5

producción de Sepsis. Al recubrirse la bacteria de fibrina hace que la bacteria

sea más difícil de fagocitar.

 FIBRINOLISINA O ESTAFILOQUINASA: Rompe las mallas de fibrina y

facilita la penetración del S. aureus en el foco inflamatorio y es responsable de
la formación microémbolos.

 HIALURONIDASA: disocia la sustancia fundamental del tejido conectivo,

facilitando la penetración de la bacteria en los tejidos.

 β-LACTAMASA: inactiva los antibióticos β-lactámicos (penicilinas y

cefalosporinas) porque abre el anillo β-lactámico. Crea resistencia a estos
antibióticos.

 OTROS ENZIMAS como : Lipasas, nucleasas, fosfatasas y proteasas que

colaboran en el proceso de la infección y en la producción de lesiones en el
enfermo

EPIDEMILOGÍA.

Los estafilococos forman parte de la flora habitual de personas sanas,

encontrándose en la mucosa nasal (20-40%), en la piel (10-20%) y sobre todo en manos y
periné.
Las principales fuentes de infección son el aparato respiratorio, piel del hombre y
los fómites contaminados.
La patogenicidad del S. aureus depende, además del microorganismo en sí, de otros
factores que afectan al huésped y que disminuyen sus mecanismos naturales de defensa,
como son:

- Factores locales: Heridas, quemaduras, aceites y grasa que irritan la piel.

- Factores generales: Edad (Recién nacidos y ancianos), infecciones, afecciones
debilitantes (diabetes, cirrosis, cáncer, drogadicción), deficiencias inmunológicas,
tratamientos con rayos X, antibióticos, etc.

Las infecciones por S. aureus son más frecuentes en los hospitales porque allí
concurren una serie de factores que predisponen su aparición, como son:

- La existencia de numerosas fuentes de infección: Enfermos con lesiones

abiertas; portadores sanos que forman parte del personal sanitario y albergan
estafilococos resistentes a los antibióticos (en fosas nasales, garganta y piel)
como consecuencia de su elevado uso en el hospital.
- La facilidad de transmisión: Asistencia al enfermo, vía aérea, y asepsia
deficiente.
- La existencia de una población más susceptible a las infecciones: Enfermos
hospitalizados.
TEMA 8-PARTE I COCOS GRAM (+). 6

MANIFESTACIONES CLÍNICAS.

• Los estafilococos intervienen en la mayoría de las infecciones y pueden actuar por:

- Acción directa debido a su capacidad invasiva: Supuraciones, necrosis,
abscesos.
- Sus toxinas: Inflamación del tubo digestivo (enterotoxina) o en la piel (toxina
exfoliativa)

• Son responsables de la producción de.

- Infecciones supurativas:
- Impétigo: Vesículas llenas de pus.
- Foliculitis: Impétigo que afecta a los folículos pilosos.
- Forúnculos: Nódulos cutáneos llenos de pus y dolorosos.
- Carbunco: Unión de forúnculos.
- Bacteriemia y endocarditis.
- Neumonía por aspiración y Empiema.
- Osteomielitis.
- Artritis Séptica.
- Enfermedades mediadas por toxinas: Toxiinfecciones alimentarias, síndrome
del shock tóxico (por liberación en sangre de gran cantidad de toxinas dando
lugar a fiebre, erupción descamativa de la piel, hipotensión y afectación
multiorgánica), y Síndrome de la piel escaldada.
- Infecciones de heridas, aparato genitourinario, infecciones de catéteres,
prótesis, etc.

DIAGNÓSTICO DE LABORATORIO.

Es necesario aislar el agente etiológico para poder realizar un diagnóstico definitivo

de la infección por estafilococos.

TOMA DE MUESTRA:

Se debe realizar con las condiciones de asepsia necesarias para evitar la

contaminación por gérmenes comensales. Son microorganismos que resisten bien las
condiciones adversas y por tanto no es necesario tomar precauciones especiales para su
transporte y conservación.
La muestra se toma en la forma habitual: Mediante hisopos en lesiones
superficiales de piel y mucosas, o por punción en procesos de órganos; o mediante
hemocultivos en los procesos generalizados (bacteriemia, sepsis).

EXAMEN DIRECTO:

Se realiza una tinción de Gram, en la que se observaran cocos G (+) agrupados en

racimos y leucocitos o células de pus.
En los medios de cultivo se observará el tamaño, forma, aspecto de los bordes y
textura de la superficie de las colonias.
En medios de agar sangre se observará la aparición de hemólisis alrededor de la
colonia.
CULTIVO-AISLAMIENTO:
TEMA 8-PARTE I COCOS GRAM (+). 7

Es diferente dependiendo de si el producto está contaminado o no:

 Productos contaminados: Proceden de esputos, orina, heridas, abscesos,

lesiones abiertas, etc. Se cultivan en un medio selectivo que permita el
crecimiento de los estafilococos e inhiba el crecimiento de los gérmenes
acompañantes. Para ello se utiliza el medio de CHAPMAN (agar-manitol-
salado) que además vira a color amarillo cuando en él crece el S. aureus.

 Productos no contaminados: Proceden de lesiones

localizadas (abscesos, artritis, meningitis, etc.) y por
ello se siembran en AGAR-SANGRE que además
permite observar las características de las colonias, la
presencia de pigmentos y la de hemólisis. Si son
procesos generalizados se siembra en frascos de
hemocultivo.

 En el caso de las toxiinfecciones alimentarias hay que tener en cuenta que no

son producidas por el germen directamente, sino por sus enterotoxinas, por lo
que el cultivo sería inútil.

PROPIEDADES BIOQUÍMICAS.

Los estafilococos son catalasa positivos (lo que los diferencia de los estreptococos)
y fermentan carbohidratos con producción de ácido (sobre todo láctico).
S. aureus es coagulasa positivo (se diferencia del [Link], que es coagulasa -
), Dnasa (+) (Estudia la capacidad que tienen algunas bacterias para producir el enzima
DNAsa, que produce la degradación del DNA que contiene el medio de cultivo.)
y Manitol (+). Reducen los nitratos a nitritos.

CATALASA + Dnasa +

Diagnóstico de laboratorio
TEMA 8-PARTE I COCOS GRAM (+). 8

? COCOS GRAM POSITIVOS

?
CATALASA REDUCCIÓN DE NITRATOS

NEGATIVAS POSITIVAS

GÉNERO GÉNERO
Streptococcus Staphylococcus

PRUEBAS BIOQUÍMICA PARA COCOS GRAM POSITIVOS:

S
COCOS GRAM + POSITIVOS E
N
S
CATALAS REDUCCIÓN DE NITRATOS I
B
I
POSITIVAS L
I
D
A

S. aureus COAGULASA
D SENSIBILIDAD A
S. epidermidis A LA NOVOBIOCINA
S. saprophyticus
? POSITIVA NEGATIVA L
A

Staphylococcu
s aureus
S. epidermidis
S. saprophyticus
? N
O
SENSIBLE-SIN RESISTENTE-CON
V
O CRECIMIENTO CRECIMIENTO
B
I
O
+ - C
I
S. epidermidis S. saprophyticus
N
A

TRATAMIENTO.
Resistentes a los β lactamicos (penicilinas-cefalosporinas) y los semisintéticos
(meticilina, oxacilina, dicloxacilina).
Sensibles a la Vancomicina de elección en hospitales. Los antibióticos orales
utilizados son: clindamicina, trimetropin-sulfametoxazol y doxiciclina.
El número de microorganismos para que se produzca la infección debe ser muy
elevado, a no ser que exista un cuerpo extraño en la herida, con limpieza correcta y
desinfectantes (Yodo, hexaclorofeno) es suficiente para eliminar el microorganismo.
TEMA 8-PARTE I COCOS GRAM (+). 9

1.2. GÉNERO STREPTOCOCCUS (ESTREPTOCOCO)

Cocos Gram (+) de forma esférica, agrupados en cadenas o en parejas, la mayoría

de las especies son anaerobios facultativos, algunas especies crecen en una atmósfera
enriquecida con dióxido de carbono.
Son catalasa (-), y fermentan los azucares con formación de ácido láctico.
Generalmente poseen cápsula rica en ácido hialurónico, especialmente en cultivos
jóvenes.

Son más exigentes que los estafilococos en sus necesidades nutritivas y de cultivo
(enriquecidos con sangre o suero), y presentan una resistencia variable a los agentes
externos.
El carácter Gram (+) puede perderse conforme envejecen los cultivos, dando lugar
a bacterias Gram (-).
Este género está formado por gran variedad de especies con hábitats muy
diferentes, algunos forman parte de la flora normal del hombre y por tanto producen
infecciones oportunistas. También hay especies patógenas para el hombre como son
[Link] y S. pneumoniae.

CLASIFICACIÓN.

Existen tres sistemas diferentes para clasificar a estos microorganismos:

1) Patrones hemolíticos: hemólisis completa (beta [β]), hemólisis incompleta (alfa

[α]) y ausencia de hemólisis (δ)
2) Propiedades serológicas: grupos de Lancefield (inicialmente, A a W).
3) Propiedades bioquímicas (fisiológicas).

1.- PATRONES HEMOLÍTICOS. TIPO DE HEMOLISIS:

• β- hemolíticos: Hemólisis total alrededor de la colonia

• α- hemolíticos: Pequeña zona de hemólisis de color verdoso
• γ- Hemolíticos: No hay hemólisis y por tanto no modifican el medio.
Enterococcus sp
Enterococcus sp
( algunas ( algunas cepas)

Streptococcus
pneumoniae

Streptococcu
sviridans

Streptococcus
agalactiae
Grupo D no Enterococcus Streptococcus
(Streptococcus bovis)
pyogenes
Enterococcus sp.
TEMA 8-PARTE I COCOS GRAM (+). 10

2.- ESTRUCTURA ANTIGENICA: Los antígenos se pueden encontrar en la pared

celular (permiten clasificar al microorganismo en grupos serológicos denominados
grupos de Lancefield), o en la cápsula:

 ANTÍGENOS DE LA PARED CELULAR:

 Ag de grupo: El más importante es el Carbohidratos o sustancia C (o Poliósido

C), y ha permitido clasificar a los estreptococos en grupos que se designan
desde la A hasta la W.

 Ag de tipo: Es más especifico y pueden ser proteínas o hidratos de carbono

con antigenicidad especifica de tipo. Los más importantes son:

 Proteína M: constituye el principal factor de virulencia del S. pyogenes.

Esta proteína se dispone en forma de proyecciones que emergen de la
pared a modo de pelos. Si el huésped no dispone de Ac contra ella, los
neutrófilos verán muy dificultado el proceso de fagocitosis. También
facilita la adherencia a las células que invade. De acuerdo con esta
proteína los del grupo A de lancefield se clasifican en Tipos, se designan
con números, tipo 1, 2…..Se conocen unos 80.
 Sustancia T

 Nucleoproteínas o sustancia p.

Cápsula Ag proteicos (M, T, R)

Ac. hialurónico Carbohidrato C de Grupo*
Glucopéptido

Pili
Recubierto
de Ac.
Lipoprotéic
o Grupo A Citoplasma

Membrana citoplamática

* Grupos Lancefield A, B, C…. Pared celular

 ANTÍGENOS DE LA CAPSULA BACTERIANA:

 Los estreptococos del grupo A y C tienen una cápsula de ácido hialurónico

que no es antigénica pero que tiene propiedades antifagocitarias.

 Los estreptococos del grupo B en su cápsula tienen sustancia S que permite

clasificar este grupo en cuatro tipos diferentes.

3.- PROPIEDADES FISIOLÓGICAS: Atendiendo a ellas se distinguen

cuatro grupos:
TEMA 8-PARTE I COCOS GRAM (+). 11

 Grupo A: Son Inhibidos por la Bacitracina

 Grupo B: Hidrolizan el hipurato sódico
 Grupo D: Incluye los estreptococos que crecen en presencia de bilis, hidrolizan
la esculina y crecen en concentraciones de un 6,5% de ClNa. El más importante
es el S. faecalis.
 Neumococo: No produce catalasa, no se destruye por la bilis y es inhibido por
la optoquina.

ESTREPTOCOCOS DE INTERÉS EN PATOLOGÍA HUMANA.

 β Hemolíticos, siendo el grupo A el más importante (S. pyogenes)
 Enterococos: Forman parte del grupo D (S. faecalis)
 Estreptococos del grupo Viridans: Excepto los comprendidos dentro del
grupo D
 Neumococo

Especies de estreptococos de interés en patología humana

PIÓGENOS
S. pyogenes Grupo A Hemólisis β
S. agalactiae Grupo B Hemólisis β
S. npeumoniae No grupo Hemólisis α

ORALES: (GRUPO VIRIDANS)

S. salivarius No grupo ó K Hemólisis γ
S. mitis No grupo ó E Hemólisis α
S. sanguis Grupo ó H Hemólisis α (γ, β)
S. mutans No grupo ó E Hemólisis γ
S. anginosus Grupo A, C, G, F Hemólisis β, α, γ

ENTÉRICOS: ENTEROCOCCUS
E. faecalis Grupo D Hemólisis γ

ESTREPTOCOCOS DEL GRUPO A: STREPTOCOCCUS PYOGENES.

TEMA 8-PARTE I COCOS GRAM (+). 12

Cocos esféricos, forman cadenas cortas en las muestras clínicas y de mayor

longitud en medios de cultivo. Son β- hemolíticos (colonias blancas con hemólisis) y
relativamente sensibles a los agentes externos.

Están en la mucosa nasal o en la faringe de personas sanas (5-10%) intervienen en

el 90% de los procesos patógenos provocados por estreptococos.

Su acción patógena se debe a la presencia de Ags de superficie, toxinas y fermentos:

 AG DE SUPERFICIE: La proteína M y la cápsula están relacionados con la

virulencia del germen, ya que facilitan la invasión debido a sus propiedades
antifagocitarias.

 TOXINAS: Las más importantes son:

Hemolisina o estreptolisina: destruye los glóbulos rojos en diverso grado. Los

estreptococos producen dos estreptolisinas denominadas:

 Estreptolisina O: se inactiva en presencia de oxígeno e induce la aparición

de Ac específicos (antiestreptolisina O o ASLO) que, cuando tienen un título
superior a 250 unidades, sugiere una infección reciente por estreptococo del
grupo A.

 Hemolisina S: resiste la acción del oxígeno y no induce la aparición de [Link]

produce en presencia de suero y es la responsable de la β-hemólisis
característica del medio agar sangre.

Toxina Eritrogénica: Es termolábil y provoca la erupción o exantema propio de la

escarlatina y de la erisipela.
Es una sustancia antigénica que da lugar a la formación de una antitoxina (Ac)
neutralizante específica, de tal forma que aquellas personas que la posean no
desarrollarán el exantema, pero seguirán siendo sensibles a la infección
estreptocócica.

La sensibilidad a la toxina eritrogénica se puede poner de manifiesto mediante

la prueba de DICK: se inyecta 0'1 ml. de toxina eritrogénica por vía intradérmica;
si no hay antitoxina en sangre aparecerá un edema eritematoso en el punto de
inoculación de un diámetro de 10 mm en un plazo de 8-24 horas.

Para demostrar que un exantema cualquiera es de origen estreptocócico se

aplica la prueba de SCHULTZ-CHARLTON consistente en inyectar antitoxina
intradérmica en la zona enrojecida y comprobar si se produce un blanqueamiento de
la zona tratada, lo que demostraría que la antitoxina ha neutralizado la toxina
eritogénica.

 ENZIMAS: Las más importantes son:

TEMA 8-PARTE I COCOS GRAM (+). 13

Fibrinolisina o estreptocinasa: produce la transformación del plasminógeno en

plasmina, sustancia que digiere la fibrina y disuelve los coágulos (por ello, esta
sustancia ha sido utilizada como tratamiento para embolias y trombosis). Tiene
carácter antigénico. Favorece la diseminación del estreptococo por los tejidos.

Estreptodornasa: despolimeriza el ADN e induce la formación de Ac contra ella.

Hialuronidasa: desdobla el ácido hialurónico del tejido conectivo favoreciendo la

diseminación del germen (por ello se ha utilizado para favorecer la absorción de
determinados fármacos inyectados en los tejidos).

PATOLOGÍA PRODUCIDA POR S. PYOGENES.

El S. pyogenes puede encontrarse en el tracto respiratorio de algunas personas,

especialmente en niños, sin causar enfermedad (portadores asintomáticos) aunque
habitualmente se considera patógeno del hombre.
La infección se produce por transmisión persona-persona a través de secreciones
respiratorias, generalmente por contacto estrecho con portadores asintomáticos.

Enfermedades supurativas

Faringitis y amigdalitis son los cuadros más frecuentes producidos por

estreptococos, aparecen sobre todo en niños de 5-15 años y cursan con fiebre,
inflamación aguda de amígdalas y garganta con posible afectación, por extensión,
del oído medio, mastoides y meninges.
Si el estreptococo infectante produce toxina eritrogénica y el paciente no está
inmunizado, desarrollará la Escarlatina, caracterizada por fiebre, inflamación de
garganta, intenso enrojecimiento de la piel y la aparición de la lengua en
frambuesa, la antitoxina frente a la toxina eritrogénica evitará el desarrollo del
enrojecimiento pero no la enfermedad en sí.
Impétigo o pioderma: infección cutánea localizada se observa en niños pequeños
con malas condiciones de higiene.
Erisipela: Infección aguda de la piel, afecta a niños y ancianos.
Celulitis: Infección que afecta a piel y tejidos subcutáneos.
Fascitis necrosante: Infección profunda de la piel que provoca destrucción de
capas musculares y tejido adiposo.
Síndrome del shock tóxico estreptocócico.

Enfermedades no supurativas

Tras una infección aguda por estreptococos puede tener lugar una reacción especial
y desarrollarse las enfermedades conocidas como fiebre reumática y glomérulonefritis
post-estreptocócica.

La fiebre reumática cursa con fiebre, poliartritis, eritemas subcutáneos, corea

(llamado mal de SanVito, que son movimientos involuntarios incontrolados) e incluso
valvulopatías.
La glomerulonefritis post-estreptocócica cursa con formación de edema,
hipertensión, proteinuria y hematuria.

Ambas enfermedades son consecuencia de una reacción autoinmune.

TEMA 8-PARTE I COCOS GRAM (+). 14

Ambas son patologías más frecuentes en niños, son infecciones no supuradas,

llamadas también de tipo inmunológico.

Ocurre que los Ac dirigidos contra los estreptococos responsables de la enfermedad

inicial forman complejos Ag–Ac (inmunocomplejos) que se depositan en las
articulaciones, válvulas cardiacas y glomérulo renal. Estos complejos son los que atraen a
las células defensivas del huésped que son las responsables del daño final.

La fiebre reumática suele desarrollarse tras amigdalitis o faringitis de repetición y

supone la afectación de articulaciones y válvulas del corazón.

La glomerulonefritis es más frecuente tras infecciones de la piel y no suelen existir

recurrencias al contrario que en las fiebres reumáticas.

DIAGNÓSTICO DE INFECCIONES PRODUCIDAS POR S. PYOGENES.

CULTIVOS
Partiendo de la muestra, se sembrará por agotamiento en placa de agar-sangre o
chocolate con el fin de estudiar su posible hemólisis. En los casos positivos el crecimiento
de sus colonias (estreptococos) tiene un aspecto grisáceo, redondas, de bordes lisos y
pequeñas, donde las zonas de hemólisis se ven con claridad si las hay (α ó β - hemólisis).

PRUEBAS BIOQUÍMICAS

Se realizarán al menos las siguientes pruebas:

• Catalasa (-)
• Hemólisis en agar-sangre: para ver si es α, β ó γ hemolítico.
• Prueba de sensibilidad a la optoquina  Resistente
• Solubilidad en bilis (-)
• Bilis esculina  (-)
• Prueba de sensibilidad a la bacitracina  S. pyogenes (grupo A).
Identificamos los distintos grupos antigénicos según el tipo de sustancia “C” por
métodos serológicos (clasificación de Lancefield).
TEMA 8-PARTE I COCOS GRAM (+). 15

ESTREPTOCOCOS DEL GRUPO B: S. AGALACTIAE.

Es β-hemolítico. Cuando crece en medios de cultivo especiales como el medio

GRANADA, forma un pigmento rojo específico de esta especie que permite su
identificación.

Forma parte de la flora normal del tracto digestivo, coloniza el área perineal y el
tracto genital femenino sin producir enfermedad.
Los recién nacidos, de madres portadoras vaginales, se pueden infectar en el
momento del parto, o incluso antes, en el útero por vía ascendente.
Las infecciones neonatales más frecuentes producidas por estreptococos del grupo
B son: Sepsis neonatal precoz, meningitis y neumonías, con alta mortalidad.

-Se diferencia de otros Estreptococos porque hidroliza el hipurato

sódico.
-Prueba de CAMP ((factor monofosfato adenina cíclica) positiva. En
una placa de agar sangre se hace una estría con un estafilococo productor de ß-lisina
y a continuación se hace una estría perpendicular a la anterior, con un estreptococo ß-
hemolítico. Se incuba 18-24 horas a 37ºC.

-Resistente a la Bacitracina lo diferencia del S.

Pyogénes.

El tratamiento suele ser con ampicilina a las madres portadoras en el momento

del parto.
TEMA 8-PARTE I COCOS GRAM (+). 16

STREPTOCOCCUS PNEUMONIAE. NEUMOCOCO.

Es un diplococo Gram (+). Posee una cápsula de

naturaleza lipopolisacárida que rodea a los dos miembros de
la pareja (si la cápsula no existe, entonces el neumococo será avirulento).

Es α-hemolítico, catalasa (-), se diferencia de los

otros estreptococos por ser soluble en bilis y ser sensible a
la optoquina.

Es un muy sensible a los agentes externos y difíciles

de cultivar. Forma parte de la flora normal del aparato respiratorio superior y se comporta
como patógeno potencial, interviene en neumonías y afecciones inflamatorias de las
estructuras vecinas.

La mayoría de los neumococos presentan una cápsula

polisacarídica de gran tamaño, que le sirve de protección frente a
los mecanismos defensivos del huésped y por tanto le confiere
una mayor virulencia al neumococo.
Las diferencias en la cápsula permiten clasificar a los
neumococos en más 83 tipos.

MANIFESTACIONES CLÍNICAS.

El hombre es el único reservorio y aunque es uno de los patógenos más importantes

para el hombre, se encuentra como flora nasofaringea y orofaringea normal en el 20% de
los niños y en el 5% de los adultos.

La infección se disemina, a partir de los portadores sanos o de los enfermos, a otras

personas mediante las secreciones respiratorias (gotitas de saliva, etc.).
En algunas personas la infección no sobrepasa la mucosa orofaringea, mientras que
en otras invade tejidos más profundos y causa enfermedad. La enfermedad neumocócica es
una de las que más muertes causa en todo el mundo.

Las infecciones neumocócicas más frecuentes son las respiratorias: Neumonía

neumocócica (fiebre, dolor pleural y tos acompañada de esputo "herrumbroso"), otitis
media, sinusitis.
TEMA 8-PARTE I COCOS GRAM (+). 17

Otra infección grave es la meningitis neumocócica que se produce generalmente a

partir de una infección otica previa.

DIAGNÓSTICO.

El diagnóstico de las infecciones

neumocócicas se hace por cultivo de esputo, o
por cultivo de otras muestras respiratorias y
por hemocultivo.

Puesto que la virulencia depende de la

presencia de cápsula se utilizan métodos que
la pongan de manifiesto, para ello, haremos una tinción
negativa de tinta china o nigrosina.

Si a una preparación en porta con neumococos se le

añade antisuero específico de tipo (anticuerpo-anticápsula) se
produce una notable hinchazón de la cápsula que corresponde
a la reacción de Quellung.

Los neumococos son bacterias aeróbicas o anaeróbicas

facultativas. En Agar-Sangre, producen colonias pequeñas, lisas
con α–hemólisis. El crecimiento se intensifica en presencia de
CO2, y al contrario que el resto de los estreptococos no toleran
la bilis.

El diagnóstico indirecto se realiza por:

• Antígenos capsulares: los más importantes son de naturaleza polisacarídica y

reciben el nombre de sustancias específicas solubles (SES). Esta sustancia es
inmunológicamente diferente para los 85 o más tipos de neumococos existentes.
Inhibe la fagocitosis y produce la formación de anticuerpos responsables de la
reacción de Quellung.

• Antígenos somáticos: entre los que se destaca la proteína M y el carbohidrato C. El

polisacárido C se detecta en la orina por inmunoanálisis. No sensible en niños.
TEMA 8-PARTE I COCOS GRAM (+). 18

ESTREPTOCOCOS PIÓGENOS.

S. pyogenes S. agalactiae S. npeumoniae

Grupo A B -
Tipos Proteína M - Cápsula
Hemólisis β β Α

Morfología

Sensibilidad
-Bacitracina + - -
-Optoquina - - +
Habitat Humanos H/animal, vacas H y animal domes
Animales afectados Humanos Humanos y vacas Humanos
Patología por:
-Proliferación + + +
-Toxinas o enzimas + - -
-Sensibilización + - -

ESTREPTOCOCOS ENTÉRICOS. GRUPO D

ENTEROCOCOS.

Los enterococos («cocos entéricos») se clasificaron previamente como

estreptococos del grupo D debido a que poseen el antígeno de la pared celular del grupo D.
A pesar de este dato, se observó que estos microorganismos diferían de los restantes
estreptococos del grupo D.

En el año 1984, los enterococos se clasificaron en el nuevo género Enterococcus, el

cual consta actualmente de 38 especies. Las especies que se aislan con una mayor
frecuencia y que son clínicamente las más importantes son Enterococcus faecalis y
Enterococcus faecium

Por lo tanto, son un grupo que pertenece a un género propio, pero que tiene una
morfología similar a los estreptococos.
Forman parte de la flora normal del tracto gastrointestinal del hombre y los
animales, por lo que también se denominan estreptococos fecales.
Aunque no producen esporas, sobreviven bastante tiempo en aguas contaminadas
y por ello la determinación de Enterococos en aguas se utiliza como indicador de
contaminación fecal. Es el segundo patógeno hospitalario.

• Crecen en medios ricos en ClNa y hidrolizan la esculina en presencia

de sales biliares, lo distinguen de otros cocos gran (+). Hidrolizan L-
pyrrolidonyl-β-naftilamida (PYR).
TEMA 8-PARTE I COCOS GRAM (+). 19

PYR

ESTREPTOCOCOS ORALES

GRUPO VIRIDANS

Forman parte de la flora normal de la mucosa oral, respiratoria y gastrointestinal, y

son patógenos oportunistas de poca virulencia.
Dentro de este grupo el S. mutans es el agente causal, en gran medida, de las caries
dentales.
Producen α y γ- hemólisis
TEMA 8-PARTE I COCOS GRAM (+). 20

DIFERENCIAS ENTRE ESTREPTOCOCOS VIRIDANS Y ENTERICOS

DIAGNÓSTICO BACTERIOLÓGICO DE INFECCIONES ESTREPTOCOCOS.

TOMA DE MUESTRA:

Debe ser selectiva ya que los microorganismos son comensales habituales de las
zonas donde se van a producir las infecciones.

• Se utiliza un hisopo estéril para realizar un frotis faríngeo en las anginas

exudativas, mientras que en los procesos supurativos se obtendrá una muestra de
pus.
• Otras muestras: Esputo, sangre, y LCR (si hay sospecha de meningitis).
• El transporte y cultivo se debe hacer lo antes posible, ya que la supervivencia del
estreptococo en la muestra es corta (1-3 horas) si no se acondiciona debidamente la
muestra.

CULTIVO.

Las muestras cuando llegan al laboratorio son procesadas inmediatamente,

sembrándolas según su procedencia:

• Muestras del tracto respiratorio: Se hace una tinción de Gram, ya que es una
zona con gran cantidad de flora saprofita. El cultivo se hace en Agar sangre que se
incuba a 35ºC /24 h. en atmósfera (5-10%) de CO2.

• Líquidos estériles: LCR, Sangre, etc., se siembran en agar sangre o se hace un

hemocultivo.

• Orina: Se siembra en Cled con asa calibrada.

TEMA 8-PARTE I COCOS GRAM (+). 21

Streptococcu
3.- CULTIVO EN AGAR SANGRE:
Agar sangre en 10% Co2:

ALFA GAMMA BETA

S. pneumoniae Enterococcus sp S. pyogenes

Sensible a Optoquina (Grupo-D) (Grupo-A)
Crece en NaCl 6,5% Sensible a Bacitracina
Grupo Viridans
Reacciones bioquímicas Grupo-D S. agalactiae
No Enterococcus (Grupo-B)
Enterococcus sp No crece en NaCl 6,5% Prueba Camp positiva
(Grupo-D)
Crece en NaCl 6,5% Grupo Viridans
Enterococcus sp
Reacciones bioquímicas
(Grupo-D)
Crece en NaCl 6,5%

IDENTIFICACIÓN:

• Observación directa de la muestra patológica y los cultivos para orientarnos.

• Tinción con tinta china para detectar la presencia de cápsula .Si a una
preparación en porta con neumococos se le añade el antisuero específico de tipo
(Ac dirigidos frente a la cápsula) se produce una notable hinchazón de la cápsula
denominada REACCIÓN DE QUELLUNG .

• Tinción de Gram para observar morfología, agrupaciones, etc.

• Identificación y reconocimiento de colonias: En Agar sangre las colonias pueden

ser transparentes o translúcidas lisas. El aspecto de las colonias varía según la
especie y el tipo de medio empleado.

• Tipo de hemólisis: Permite diferenciar unas especies de otras.

• Pruebas bioquímicas: Son catalasa (-), fermentan los hidratos de carbono con
producción de ácido láctico y pirúvico, no son lisados por la bilis (excepto el
neumococo), se hace la prueba de la bilis esculina (para diferenciar al Enterococo
de otras especies), crecimiento en ClNa al 6’5%, sensibilidad a la optoquina y a la
bacitracina,etc.

• Identificación serológica: Se hace a partir de los productos patológicos o de las

colonias y se utilizan dos técnicas:
TEMA 8-PARTE I COCOS GRAM (+). 22

- Aglutinación en partículas de látex (grupos A, B, C, D, F, y G): Los Ac

específicos para cada grupo se fijan por el extremo Fc a las partículas de látex y
si está presente la cepa problema da lugar a reacciones de aglutinación.

- Inmunofluorescencia: Para identificar a los estreptococos del grupo A y B. Se

hacen pruebas de precipitación, RIA, ELISA, PCR para S. pneumoniae en LCR,
pero no resultan rentables.

DIAGNÓSTICO INDIRECTO

Se realizan determinaciones de antiestreptolisina (ASLO) y de proteína C

reactiva que pueden aportar información interesante.