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COLEGIO
Código: GAC004 Versión 1
Revisó:
LA NUEVA ESTANCIA LTDA. Aprobó:
PEI “Proceso Constructivo y Valores En Familia”
GUÍA DE EXTRACCIÓN DE ADN DE CÉLULAS DE FRESA Fecha de aprobación:
Área: Ciencias Naturales Asignatura: Biología Periodo: primero Grado: Ciclo IV
Saberes: Extracción de Ácidos Nucléicos (ADN) en fresa y frutas problema.
LABORATORIO DE EXTRACCIÓN DE ADN DE CÉLULAS DE FRESA Y MUESTRAS PROBLEMA
1. OBJETIVOS
OBJETIVO GENERAL
Extraer el ácido desoxirribonucleico ADN de células de fresa por medio de un método casero y de una
muestra problema.
OBJETIVOS ESPECÍFICOS
• Conocer la metodología para lograr la extracción del ADN de las células de las fresas.
• Llevar a cabo el rompimiento de la membrana de las células de la fresa para así poder acceder a su
núcleo donde está ubicado el AND.
• Utilizar alcohol para la separación del AND de los otros componentes celulares.
2. FUNDAMENTACIÓN TEÓRICA
El ADN o ácido desoxirribonucleico, es un ácido nucleico complejo cuyos
elementos fundamentales (nucleótidos) se organizan de manera lineal
generando enormes secuencias de información. La información que define y
codifica un carácter determinado se le denomina gen. Este contiene las
instrucciones genéticas usadas en el desarrollo y funcionamiento de todos los
organismos vivos.
El ADN podría describirse como una compleja cadena de polímeros (o macro
células), polímeros que están entretejidos de manera doble a través de puentes
de hidrógeno. La estructura del ADN se complejiza desde los pares de
nucleótidos, pasando a formar histonas, nucleosomas y las cromátidas que
forman los famosos cromosomas.
Las fresas tienen enormes genomas y hasta ocho copias de cada cromosoma
(genoma octoploide). La extracción consiste en el aislamiento y purificación de
moléculas de ADN y se basa en las características fisicoquímicas de la
molécula.
El producto filamentoso obtenido de la extracción no es ADN puro ya que,
entremezclado con él, hay fragmentos de ARN. Una extracción "profesional" se
realiza añadiendo enzimas que fragmentan las moléculas de ARN e impiden que
se unan al ADN.
PEI “Proceso constructivo y valores en familia”
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Para realizar una extracción pura el detergente contiene lauril sulfato de sodio, el cual limpia los residuos
removiendo grasas y proteínas, es decir, separa las grasas (lípidos) y las proteínas que constituyen las
membranas que rodean la célula y el núcleo. Una vez que estas membranas se han roto, el ADN es liberado
de la célula
En una extracción profesional el calor suaviza los fosfolípidos (grasas) en las membranas que rodean la
célula y el núcleo. También desactiva (desnaturaliza) a las enzimas desoxirribonucleicas (ADNasas) las
cuales, si están presentes, pueden cortar el ADN en pedazos tan pequeños que lo haría imposible de ver. Si
las enzimas se desnaturalizan y el ADN se desenrolla, éste pierde su forma y se vuelve inactivo. Las
enzimas se desnaturalizan a 60° Celsius y el ADN se desnaturaliza a 80° Celsius.
El ADN se precipita en el alcohol fuera de la solución, donde puede ser visto. Además de
permitir ver el ADN, el alcohol separa el ADN de otros componentes celulares, los cuales
son dejados en la solución acuosa.
El proceso de extracción de ADN desde una célula es el primer paso para
muchos procedimientos (protocolos) de los laboratorios de biotecnología.
Consultar: métodos de laboratorio que se emplean para la extracción profesional de AND y
de que materiales biológicos es extraído.
3. MATERIALES Y REACTIVOS
- Mortero - Probeta de 50 ml - Tubos de Ensayo
- Filtro de Tela - Gotero - Agitador
- Alcohol Antiséptico - 4 Fresas - Jabón líquido lava loza
- Sal de cocina (NaCl) - Muestra Problema (Fruta elegida por estudiantes para extracción)
4. PROCEDIMIENTO O DISEÑO EXPERIMENTAL
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MORTERO
4 fresas 40ml de Agua
MACERAR
20 ml Jabón Líquido
5 g de Sal
MEZCLAR
FILTRAR EN ERLENMEYER
TRANSFERIR FILTRADO A TUBO DE ENSAYO
8ml de Alcohol #1
OBSERVAR EL AND EXTRAIDO
EN LA PARTE SUPERIOR DEL ALCOHOL #2
SEPARAR ADN CON UN GOTERO
O HILARLO CON UN AZA O AGITADOR
# 1. Agregar con cuidado por la pared del tubo de ensayo.
# 2. La textura del ADN se evidenciará como una maraña de fibras blancas gelatinosas.
5. CUESTIONARIO
1. ¿Cuál es la función del jabón, el cloruro de sodio y el alcohol en el método de extracción de ADN de las
células de fresa?
2. ¿Cómo se puede comparar este método casero con una extracción de ADN de nivel profesional?
3. ¿Qué tipo de interferencias se presentan en la extracción del ADN?
4. ¿Por qué son importantes los métodos de extracción de ADN?
5. ¿En qué situaciones es imprescindible la aplicación del método de extracción y secuenciación del ADN?
PEI “Proceso constructivo y valores en familia”
