TRIGLICÉRIDOS (GPO – PAP)

Reactivo líquido para la determinación fotométrica de

Triglicéridos en suero o plasma.

Para uso en el diagnóstico in Vitro. Apto para usar en autoanalizador.

SIGNIFICANCIA CLINICA MUESTRA

Los triglicéridos son lípidos que en parte se absorben de la dieta y que Utilizar de preferencia suero o plasma (Heparina o EDTA) libre de
también son producidos por el organismo a partir de carbohidratos. Su hemólisis. La muestra debe tomarse con el paciente en ayunas. Los
evaluación es importante para el diagnóstico y seguimiento de las tubos y material de vidrio deben estar limpios y libres de residuos de
hiperlipidemias ya sean de origen genético o secundario a otras detergentes. Los triglicéridos son estables algunos días entre 2° y 8°C.
enfermedades. Valores elevados aumentan el riesgo de arteriosclerosis
y de enfermedad coronaria. MATERIAL NECESARIO NO INCLUIDO

FUNDAMENTOS DEL METODO Espectrofotómetro manual o automático o fotocolorímetro de filtros

con cubeta termoestable, capaz de medir absorbancia a 510 nm (rango
Los triglicéridos son hidrolizados por una lipasa específica liberando 505 a 530 nm), baño termoregulado, cronómetro, pipetas, calibrador y
ácidos grasos y glicerol. El glicerol es fosforilado por la enzima sueros controles.
gliceroquinasa y posteriormente, el glicerol-1-fosfato es oxidado a
dihidroxiacetona fosfato por la enzima glicerol-fosfato oxidasa, TECNICA
generándose peróxido de hidrógeno. Posteriormente, en una reacción
del tipo Trinder, el peróxido de hidrógeno reacciona con 4- Llevar el reactivo a la temperatura que se realizará el ensayo. Las
Aminoantipirina y el ácido 3,5-Dicloro-2-Hidroxi-bencensulfónico para pipetas a utilizar deben estar limpias y libres de residuos para no
producir por medio de la enzima peroxidasa un compuesto coloreado contaminar el reactivo.
en cantidad proporcional a la concentración de triglicéridos presente
en la muestra, midiéndose la absorbancia a 520 nm. Blanco Calibrador Muestra
Lipasa Muestra (mL) -- -- 0.01
Triglicéridos Glicerol + ácidos grasos
Calibrador (mL) -- 0.01 --
GK
Glicerol + ATP Glicerol-3-fosfato + ADP Reactivo (mL) 1.00 1.00 1.00
Mezclar e incubar 5 minutos a 37°C. o temperatura ambiente (20° a
GPO
Glicerol-3-fosfato+O2 Dihidroxiacetonafosfato+H2O2 25°C.). Leer las absorbancias llevando a cero el espectrofotómetro con
el blanco de reactivo. El color resultante es estable por a lo menos
PAP
2H2O2+4-AAP+DCBS Comp. Coloreado + 4H2O treinta minutos.

REACTIVOS Adaptaciones para la aplicación de este reactivo en autoanalizadores

están disponibles a solicitud. Es responsabilidad del laboratorio validar
Conservados entre 2° y 8°C. y protegidos de la luz, estables hasta la esta aplicación.
fecha de caducidad indicada en la etiqueta.
CALIBRACION
Composición del Reactivo Enzimático:

Buffer Pipes pH 7,2 50 mM  En la calibración se recomienda utilizar calibrador sérico VALTROL-

Lipasa (microbial) >1000 U/l C (código 210-130), proceder de igual forma que con las muestras.
Glicerokinasa >500 U/l  Se recomienda recalibrar en cualquier momento que se evidencie
Glicerol-3-fosfato oxidasa >2000 U/l alguno de estos acontecimientos:
Peroxidasa >1000 U/l  El lote de reactivo cambia
4-Amino antipirina 1 mM  Se realiza un mantenimiento preventivo del equipo
Acido 3,5-Dicloro-2-Hidroxibencensulfónico 1.5 mM  Los valores de control han cambiado o se encuentran fuera
Adenosín trifosfato (ATP) 0.50 mM de escala.
Mg2+ 5 mM
Estabilizantes y preservantes no reactivos c.s. CALCULOS

Preparación del Reactivo de Trabajo: El reactivo se provee listo para su Factor = Concentración Calibrador
uso. El reactivo con el tiempo puede tomar un leve color rosado que no Abs. Calibrador
afecta los resultados. Descartar el reactivo si su absorbancia contra Triglicéridos (mg/dL)= Factor x Abs. Muestra
blanco de agua es superior a 0.4 D.O. a 510 nm.

Valtek S.A. Av. Marathon 1943, Ñuñoa, Santiago de Chile / Tel. + (562) 654 1100
Fax + (562) 654 1199 / [Link] / info@[Link]
CONTROL DE CALIDAD

 Es conveniente analizar junto con las muestras sueros controles -Repetibilidad intraserie: n=20
valorados para Triglicéridos por este método. Se recomienda la
utilización de los sueros controles VALTROL-N (código 210-100) y Nivel Media (mg/dL) C.V.
VALTROL-P (código 210-110). Normal 117 0,87%
 Si los valores obtenidos para los controles se encuentran fuera del Patológico 205 1,09%
rango de tolerancia, revisar el instrumento, el reactivo y el
-Reproducibilidad interserie: n=20
calibrador.
 Cada laboratorio debe disponer de su propio Control de Calidad y Nivel Media (mg/dL) C.V.
establecer las correcciones necesarias en caso de que no se Normal 113,1 1,71%
cumpla con las tolerancias permitidas para los controles. Patológico 178,9 1,82%

ADVERTENCIAS Y MEDIDAS DE PRECAUCION: Estos datos han sido obtenidos utilizando un autoanalizador. Los
resultados pueden variar al cambiar de instrumento o al realizar el
 Los volúmenes indicados pueden ser alterados proporcionalmente procedimiento manualmente.
sin alterar los resultados.
- Certificado de Conformidad y Trazabilidad disponible a solicitud
 En el caso de sueros hiperlipémicos, deberá hacerse un blanco
muestra con suero fisiológico para eliminar la posible RANGOS DE REFERENCIA
interferencia por la turbidez del suero.
 Consultar en nuestra página WEB la ficha de seguridad de este Cada laboratorio debe establecer sus propios rangos de referencia en
reactivo y observar todas las medidas de precaución necesarias función de la población de pacientes. Los rangos de referencia que se
para la manipulación y eliminación de residuos. enumeran a continuación están tomados de la bibliografía existente.
 Contiene Azida de Sodio 0.05% (Nº CAS 26628-22-8) No peligroso
a esta concentración. No ingerir. En contacto con metales 25 a 160 mg/dL
pesados, como tuberías de cobre o plomo, podría formar azida
metal que es explosiva, elimine los residuos con grandes PRESENTACIONES DISPONIBLES
volúmenes de agua y/o de conformidad con las regulaciones
CODIGO CONTENIDO
locales.
180-135 Reactivo Enzimático 10 x 12 mL
 En autoanalizadores debe utilizarse contenedores de reactivos
180-137 Reactivo Enzimático 2 x 50 mL
nuevos.
180-140 Reactivo Enzimático 4 x 50 mL
 En autoanalizadores se recomienda adicionar en el contenedor de
agua CLEAN AGENT (código 318-820) en proporción de 0.5 180-150 Reactivo Enzimático 10 x 25 mL
mL/litro de agua para evitar interferencias por carry over. 180-160 Reactivo Enzimático 1 x 250 mL
180-170 Reactivo Enzimático 2 x 250 mL
ESPECIFICACIONES DE DESEMPEÑO: 300220 Reactivo Enzimático 5 x 40 mL
200220 Reactivo Enzimático 5 x 40 mL
-Linealidad: hasta 700 mg/dL.
Para valores superiores a 700 mg/dL, diluir la muestra con suero BIBLIOGRAFIA
fisiológico y el resultado obtenido se multiplica por el factor de dilución.
1. Tietz N. (ed), Fundamentals of Clinical Chemistry, W.B. Sauders Co.
-Límite de detección: 4,0 mg/dL. Philadelphia, 1976.
2. Fossati P., et al., Clin. Chem. 28 (2078), 1982.
- Sensibilidad analítica: 1 mg/dL = 0.0021 A 3. Trinder, P., Ann Clin. Biochem. 6 (24), 1969.
4. Young D.S., effects of drugs on clinical laboratory tests,
-Interferencias: Hemólisis y bilirrubina sobre 2,5 mg/dL podrían 4th ed. AACC Press,1995.
interferir en la técnica. Otros medicamentos y sustancias podrían
interferir (4). REV Nº 2

-Exactitud: Los reactivos VALTEK no muestran diferencias sistemáticas

significativas cuando se comparan con otros reactivos comerciales. Los
detalles del estudio comparativo están disponibles bajo solicitud.