UNIVERSIDAD ESTATAL DEL SUR DE MANABÍ
FACULTAD DE CIENCIAS DE SALUD. CARRERA DE
LABORATORIO CLÍNICO.
TEMA:
[Link]ÉTICA CONVENCIONAL Y MOLECULAR
ELEMENTOS GENÉTICOS TRANSPONIBLES
NOMBRE:
LUIS ARMANDO JIMENEZ PONCE
CURSO:
“C”
ASIGNATURA:
GENÉTICA
DOCENTE:
Lcdo. Jose Manuel Piguave Reyes
PERIODO ACADÉMICO ORDINADIO PI 2022
JIPIJAPA – MANABÍ – ECUADOR
INTRODUCCIÓN
La citogenética es la disciplina que estudia las implicaciones genéticas de la estructura y el
comportamiento de los cromosomas. Durante las últimas dos décadas los estudios
citogenéticos avanzaron gracias a la información generada por métodos clásicos, los cuales
permitieron establecer los primeros modelos citogenéticos en especies como tomate, trigo y
arroz. Al final del siglo pasado los estudios citogenéticos mostraron un avance significativo
gracias a la implementación de nuevas técnicas destinadas al análisis de cromosomas, tanto
mitóticos como meióticos, entre las cuales se destacan el bandeo de cromosomas y la
hibridación in situ sobre cromosomas. Esta tecnología abrió la posibilidad de estudiar
regiones específicas de la cromatina directamente sobre los cromosomas, gracias a la
información derivada de la secuencia misma del ADN, y no solamente por simples
características morfológicas. Como consecuencia, la citogenética molecular ha adquirido una
importancia cada vez mayor en los diferentes proyectos de mapeo genético que se adelantan
actualmente. En la presente revisión se hace una descripción breve de la progresión que han
tenido las técnicas de citogenética, desde la llamada ‘citogenética clásica' hasta las técnicas
actuales de alta resolución. Esta descripción histórica es seguida de varios ejemplos
concretos que ilustran la utilización de la FISH, no sólo en el mejoramiento genético de los
cultivos, sino también en el estudio estructural y funcional de los genomas vegetales. (1)
DESARROLLO
La citogenética es el campo de la genética que comprende el estudio de los cromosomas. El
análisis cromosómico se puede realizar por técnicas de citogenética convencional como lo
son el cariotipo de rutina y el cariotipo de alta resolución; mientras que también se puede
realizar por medio de técnicas de citogenética molecular como la hibridación in situ
fluorescente (más conocida por sus siglas en inglés, FISH) y la hibridación genómica
comparada (aCGH).
El análisis cromosómico puede efectuarse en cualquier célula viable que se divida
espontáneamente en cultivo, o cuya división pueda ser inducida por un agente mitogénico
agregado al cultivo celular. Una vez obtenida la muestra se realiza un cultivo celular en el
medio adecuado. Los preparados cromosómicos se analizan en un microscopio de óptica
plana a 1000 aumentos. (2)
En el análisis convencional, donde se determina el número y la morfología de los
cromosomas, el extendido se colorea homogéneamente con el colorante Giemsa. Para
identificar cada cromosoma se realizan técnicas de bandeo, llamadas técnicas de
diferenciación cromosómica. El análisis estructural con la técnica de bandeo G es el más
usado. El bandeo G es un procedimiento mediante el cual los cromosomas son expuestos a
la acción enzimática controlada (los preparados se tratan con tripsina), y al ser posteriormente
teñidos, los cromosomas presentan un patrón de bandas oscuras y claras característicos que
permite su identificación. Un ideograma, de aplicación internacional, es la representación
esquemática del tamaño, forma y patrón de bandas de todo el complemento cromosómico.
Con un nivel de resolución de 550 bandas es posible analizar la mayoría de las alteraciones
cromosómicas. El límite de detección de una anomalía estructural para ser identificada al
microscopio debe ser de 3 a 5 Mb. Se usan otras técnicas para bandas R, C y Nor, según la
región cromosómica a evaluar. En casos de anomalías cromosómicas muy pequeñas o
crípticas, es conveniente trabajar con cromosomas prometafásicos, lo que se
denomina técnica de alta resolución, ya que el número de bandas es mayor pudiendo alcanzar
un nivel de resolución de 850 bandas.
De utilidad para detectar alteraciones crípticas puede aplicarse la técnica de FISH, una
técnica de citogenética molecular que utiliza sondas fluorescentes de ácidos nucleicos que se
unen sólo a aquellas partes del genoma de la muestra que tengan un alto grado de
complementariedad en la secuencia. Existen distintos tipos de sondas, dependiendo de la
región cromosómica que se requiere analizar. Actualmente el FISH se utiliza como técnica
molecular con valor diagnóstico y/o pronóstico para diferentes patologías. La hibridación de
las preparaciones cromosómicas o núcleos en interfase con sondas cromosómicas específicas
de determinados segmentos marcados con fluorocromos y, la posterior observación al
microscopio de fluorescencia permite evidenciar los segmentos cromosómicos hibridados
por la señal fluorescente emitida. El límite de detección depende del tamaño de la sonda
siendo de 100-800kb. (3)
En la actualidad, la hibridación genómica comparativa empleando arrays o microarrays,
conocida como aCGH o cariotipo molecular, ha revolucionado la citogenética clínica. Su
ventaja diagnóstica sobre pérdidas y ganancias de material genómico es 15-20% más
resolutiva que el bandeo G, ya que permite detectar desbalances genómicos como deleciones
y /o duplicaciones tan pequeñas como de 50 pb. El inconveniente es que por su alto costo y
limitaciones que presenta la propia técnica, su aplicación es por el momento un poco limitada
en un laboratorio de citogenética de rutina.
¿Qué son los elementos transponibles?
Los elementos transponibles, también conocidos como “genes saltarines” son secuencias de
ADN muy especiales, capaces de cambiar de posición en el genoma por sí mismos. La
científica estadounidense Barbara McClintock propuso su existencia en sus estudios en maíz
a mediados del siglo XX y, desde entonces, todavía se está debatiendo su impacto en la
evolución de muchos organismos eucariotas. Esto es porque, precisamente por su capacidad
de “saltar” a otras zonas del genoma, los transposones son capaces de alterar de muchas
formas la expresión de nuestros genes o generar mutaciones y, por tanto, son potenciales
elementos evolutivos.
Existen dos tipos principales de elementos transponibles, los retrotransposones y
los transposones de ADN. El primer tipo de elementos transponibles, los retrotransposones,
son secuencias de ADN capaces de “copiar y pegar” su información en otro sitio del genoma.
¿Cómo lo hacen? Pues utilizan un mecanismo similar al de los virus de ADN bicatenario
retrotranscrito (grupo VII en la clasificación de Baltimore). En este caso, el transposón se
transcribe a ARN y, con ayuda de una transcriptasa reversa, este ARN pasa a ser ADN, capaz
de situarse en una nueva región del genoma. El segundo gran grupo de elementos
transponibles son los transposones de ADN. Estos “saltimbanquis” del genoma pueden
utilizar varios mecanismos de transposición. Uno de ellos es el de “cortar y pegar”, en el que
el transposón se separa de un lugar del genoma y se inserta en otro.
¿Dónde se localizan?
Los elementos transponibles no se encuentran dispersos aleatoriamente en los organismos.
Al contrario, estos pequeños “culos inquietos” se encuentran localizados en zonas específicas
del genoma. ¿Por qué? Pues porque, como pasa en las interacciones parásito-hospedador
entre organismos, los elementos transponibles están sujetos a una gran fuerza selectiva, que
les “obliga” a insertarse en zonas del genoma que propicien su propagación, pero sin llegar
a generar efectos devastadores en la célula. Esto limita bastante las zonas donde pueden
situarse. (4)
Hasta conseguir insertarse en zonas óptimas, los elementos transponibles se ven sometidos a
una gran presión selectiva. Los retrotransposones LINE1, por ejemplo, son capaces de
insertarse en zonas codificantes del genoma, pero raras veces se encuentran en dichas
secuencias. De insertarse en ellas, pueden interferir en la función celular y desencadenar, por
ejemplo, mecanismos de senescencia celular. Y eso no es óptimo ni para el hospedador ni
para el transposón. (5)
Equilibrio Expresión/Represión
Como os comentaba, para optimizar su actividad, los transposones buscan insertarse en
nuevas localizaciones sin molestar demasiado a la actividad celular. Sin embargo, situarse en
sitios poco importantes no es suficiente. Los transposones tienen que disponer de
mecanismos para regular su expresión, ya que, si se expresan demasiado, pueden afectar a la
función celular. Por ello, han desarrollado diferentes modos de regular su actividad en el
genoma, como codificar enzimas subóptimas para la transposición.
Los transposones: fuente de polimorfismos, reordenamientos y mutaciones
Los transposones son una gran parte de nuestro genoma. La misma Barbara McClintock ya
describió en plantas de maíz que el 60-70% del genoma de esta especie estaba compuesta por
elementos transponibles. El caso del genoma humano no es tan diferente. En cada una de las
copias de nuestro genoma, tenemos 500 000 copias de un solo tipo de transposón, el LINE1.
¡Pero no os preocupéis! Vuestro genoma no se va a mover a ningún sitio. Se ha comprobado
que, de todas estas copias, menos de un 0,01% son activas. (6)
Generadores de genes
Aunque, a efectos prácticos, los transposones son “parásitos” de nuestro genoma, hay
evidencias de que estos pequeños saltimbanquis no solo son un dolor de cabeza para sus
huéspedes. Hay evidencias de que los transposones pueden contribuir en la aparición de
nuevos genes. De hecho, algunos genes derivados de ellos son específicos de algunas
especies. (7)
Para que un transposón haga aparecer un nuevo gen, es necesario que sucedan una serie de
cosas. En primer lugar, tiene que “mutar”, es decir, ir acumulando cambios en su secuencia
durante las sucesivas generaciones. Para ello, esto tiene que suceder en la línea germinal del
hospedador. Si no, el cambio no se transmitirá a la descendencia. ¡Un pequeño paso para los
transposones, pero un gran paso para la Evolución! (8)
Algunos ejemplos de la aparición de nuevos genes a partir de transposones
son RAG1 y RAG2, genes esenciales para la recombinación en el sistema inmune de
vertebrados. También se ha comprobado que algunos genes relacionados con el desarrollo de
la placenta provienen de la “domesticación” de genes presentes en algunos retrotransposones
ERV. Estos genes se han encontrado en prácticamente todos los mamíferos placentarios,
sugiriendo que los retrotransposones ERV tuvieron un papel fundamental en la evolución de
los placentarios. (9)
Por si fuera poco, los transposones no solo intervienen en la aparición de nuevos genes
codificantes, sino que también lo hacen en la aparición de ADN no codificante. De hecho,
son los componentes mayoritarios de muchos de los ARN largos no codificantes del genoma
humano, algunos de ellos, con funciones realmente imprescindibles. También se ha
comprobado que algunos micro ARNs derivados de transposones pueden adoptar roles
reguladores en el hospedador. (10)
ANÁLISIS.
Se basa en la visualización de los cromosomas para la realización del cariotipo. Es
necesario un cultivo celular y la obtención de células en división.
CONCLUSIÓN
Gracias al avance vertiginoso de la citogenética molecular de alta resolución, hoy se dispone
de un gran arsenal de herramientas destinadas al estudio estructural y funcional de los
genomas. Es una herramienta de gran importancia que permite realizar el diagnóstico
cromosómico de pacientes con indicación clínica de cromosomopatía, lo cual les va a
permitir asesorar a las familias respecto de dicha enfermedad, su pronóstico y riesgo de
recurrencia.
Referencias
1. . Carlos Herrera. MedlinePlus. [Online].; 2020 [cited 2022 Agosto 4. Available from:
[Link]
2. Josep M. CONOGASI. [Online].; 2019 [cited 2022 Agosto 04. Available from:
h[Link]
3. Pilar Corral.. Alsevier. [Online].; 2018 [cited 2022 Agosto 04. Available from:
[Link]
4. Natalya. [Online].; 2017 [cited 2022 Agosto 04. Available from:
h[Link]
5. Martin. Scielo. [Online].; 2020 [cited 2022 Agosto 04. Available from:
[Link]
6. Claudia Tama..Scielo . [Online].; 2014 [cited 2022 Agosto 04. Available from:
[Link]
7. Dora Janeth i. Scielo. [Online].; 2021 [cited 2022 Agosto 04. Available from:
[Link]
8. Graciela. AnFaMed. [Online].; 2019 [cited 2022 04 Agosto. Available from:
[Link]
9. Valdespino. Anmsm. [Online].; 2020 [cited 2022 Agosto 04. Available from:
h[Link]
10. Lewin.. Dels. [Online].; 2021 [cited 2022 Agosto 04. Available from:
[Link]
11. Williams.. Elsevier. [Online].; 2021 [cited 2022 Agosto 04. Available from:
[Link]
12. RUBÉN MEGÍA ..Genetica . [Online].; 2019 [cited 2022 Agosto 04. Available from:
[Link]
13. Nora Constanza .. Redaly. [Online].; 2020 [cited 2022 Agosto 4. Available from:
h[Link]
14. Hernández Aguirre.. Alsevier. [Online].; 2018 [cited 2022 Agosto 04. Available from:
[Link]
Fonseca.. Scielo. [Online].; 2014 [cited 2022 Agosto 04. Available from:
15. [Link]
