Coeficiente volumétrico de

transferencia de O2 (KLa)
 Transporte de Oxígeno en un cultivo microbiano

Baja solubilidad del O2 en agua (7 mg/l a 35°C)

+
Los microorganismos usan solamente el O2 disuelto
+
-10 g/L levaduras
El O2 es un macronutriente (10-4 M)
-1000 mg O2/Lh
-Si hay 8 mg disueltos
en 25 segundos los
consume

El O2 debe ser suministrado permanentemente tratando que

las burbujas queden temporalmente retenidas en el seno
del líquido para que el O2 se transfiera a la fase líquida.

MAYOR TIEMPO DE MAYOR

RETENCIÓN DE LAS TRANSFERENCIA
BURBUJAS DE O2
 Formas de suministrar O2 en un cultivo

Sistemas aireados con agitación mecánica

sin agitación mecánica

-tanque agitado

-air lift

-erlenmeyer
Transferencia de oxígeno - Modelo de la película o del film estanco
Transporte de los compuestos en un cultivo ocurre por el movimiento del fluido
y por difusión (∆ gradiente de concentración)

G-L Líquido
Gas L-S
4 5 Célula S
Burbuja
1 2
6 7
de aire

1- Difusión del seno del gas a la interfase gas-líquido.

2- Movimiento a través de la interfase G-L
3- Transporte convectivo en el seno del líquido
4- Difusión a través del film líquido estanco (interfase L-S)
5- Transporte a través de la membrana
6- Difusión intracelular hacia el sitio de la reacción química
7- Transporte y reacción química
 Transferencia G-L . Modelo de la película
PO2
La resistencia más importante
C* es atravesar la interfase G-L
Fase gaseosa
Seno de la fase líquida

CL
Película líquida estanca

L X
dC
PO2 = H . C* NO 2   D
dx
Ley de Henry Ley de Fick
(solubilidad de un gas) Flujo por difusión
No2: moles O2/área / tiempo
D: coeficiente de difusión del O2
dCO2/dx: gradiente de concentración que impulsa la transferencia
 Transferencia G-L . Modelo de la película

Si CL < C* moles O2/área / tiempo

(C * CL ) NO2  K L  (C * CL )
N O2  DO2 KL=DO2/L
L
KL=coeficiente de transferencia de materia
A
a Área
interfacial por a
A
RO2=NO2 . a RO 2  KL .a( C * CL )
V
unidad de V
volumen
RO 2  KLa  (C * CL )
RO2 velocidad de transferencia de O2 [moles O2/L/h]

KLa coeficiente volumétrico de transferencia de O2

depende de la difusividad (D) del oxígeno en el medio
y la turbulencia del líquido (L)
 Transferencia G-L . Modelo de la película

Resumiendo

RO 2  KLa  (C * CL )
- La concentración de oxígeno CL en el seno del líquido aumenta
hasta alcanzar el valor de C*, de modo que la transferencia de O2
hacia el seno del líquido (NO2) se anula cuando C*=CL,cuando se
anula el gradiente.

- Para que la transferencia de oxígeno no se anule, el O2 debe ser

permanentemente consumido ya sea por un microorganismo o una
reacción química.

KLa se determina globalmente

Unidades: [h-1]
El valor de KLa está directamente relacionado con la
eficiencia de un biorreactor para transferir oxígeno.
 Determinación de KLa en el cultivo

100

80

60
%OD

40

20

0
0 200 400 600 800 1000

TIEMPO (s) 8
 Determinación de KLa

0.8

0.6
Ln(1/(1-OD/100))

0.4

0.2

0.0
0 100 200 300 400 500 600

Tiempo (s)
9
 Variación del KLa durante el cultivo

12

Tiempo (h) kLa (h-1)

10
Medio cultivo
10.8
sin inocular
8 24 4.68
kLa (h-1)

48 6.12
6
72 6.84

96 7.38
4
120 6.3

0 kLa promedio del

cultivo(h-1)
0 20 40 60 80 100 120 140 160

TIEMPO (h) 6.3

kLa

10
 ¿Cuál es el criterio de escalamiento?

30
Productividad de actividad quitinolítica (U/mg proteína *h)

25

20

Región de
escalamiento efectiva
15

10
1 2 3 4 5
KLA

• Quintero (1993)
11 • San Juan-Rodríguez y col., 2003
 FACTORES QUE AFECTAN LA TRANSFERENCIA DE O2

RO2=KLa (C*-CL)

KLa
(C*-C)
KLa=D.a
L
Estado de agitación
Presión
(agitación –aireación) C*=HPO2
>P >C*
Re=(nD2 ρ)/η
n=rpm
D=diámetro de las paletas
Temperatura
ρ=densidad >T < C*
η=viscosidad >T >D
A > agitación <L>KLa
10°C-40°C: predomina >D, aum. RO2
Antiespumantes > L <Kla
>40°C: predomina < C*, dismin. RO2

Detergentes >L<KLa, pero >a>Kla

Sustancias orgánicas
 FACTORES QUE AFECTAN EL KL Y EL KLa
 AGITACION:
1- aumenta el área de intercambio por ruptura de las burbujas aumenta área
por unidad de volumen
2- Disminuye el espesor de la películas (L) por lo que aumenta el KL.
 AIREACION: aumenta el numero de burbujas  aumenta el a y disminuye el L.
 TEMPERATURA: afecta el coeficiente de difusión y la solubilidad (cte de
Henry).
 VISCOSIDAD: a mayor viscosidad, mayor resistencia a la transferencia (ver
número de Reynolds)
 TENSOACTIVOS: afectan el área de trasferencia y el KL y el efecto global
depende de la concentración
burbujas mas pequeñas aumento del área y del KLa.
aumento de la resistencia de la película  disminuye el KL
 SUSTANCIAS ORGANICAS : antiespumantes: disminuyen el KLa
peptonas , micelio, biomasa : disminuyen el KLa
alcoholes, cetonas y esteres: aumentan el KLa
 Cómo seleccionar el KLa apropiado?

-El tipo de célula: las bacterias, hongos, cél. animales crecen a distinta
μ, por lo tanto tendrán distintas qO2.

-La concentración de biomasa final alcanzada.

-La susceptibilidad de las células a las fuerzas de corte.

Tipo celular Xf (g/l) μ (h-1) KLa (h-1) Tipo de

reactor
Animal 0.5 0.01-0.04 1-25 Tubo ensayo
inmóvil
Vegetal 10-15 0.007-0.03 20-30 Tubo-erlen

Levadura 10-30 0.2-0.6 100-1000 Erlen-reactor

Hongo
bacteria 10-20 0.6-1.4 100-1000 Erlen-reactor
 Cómo seleccionar el sistema de cultivo apropiado?

Sistema volumen medio condiciones transferencia O2

operación RO2 (mmol/lh)
Tubo 10 ml agitación rotatoria 27

Erlenmeyer 500 ml 50 ml 200 rpm 40

50 ml 300 rpm 48

100 ml 200 rpm 33

100 ml 300 rpm 42

Erlenmeyer 1000 ml 100 ml 200 rpm 40.8

Tanque agitado 12 l 500 rpm 432

caudal aire 2 vvm
 Que ocurre en cultivos con agregados celulares ?

Si la unidad catalítica es una célula:

Vp Volumen celular
Cultivos líquidos con bacterias no agregadas

No existe restricción en la transferencia L-S

Líquido
Gas G-L

Célula
La principal resistencia a la transferencia de Burbuja
1 2
de aire
oxígeno es la película estanca G-L 3

TRANSFERENCIA ES PROPORCIONAL AL KLa

La unidad catalítica es un pellet o biofilm Vp > Volumen celular

El oxígeno detectado en la interfase S-L

dependerá del TAMAÑO del partícula

El oxígeno disuelto en el INTERIOR

dependerá de la resistencia interna de la
partícula
 Flóculos, agregados celulares, cultivos en biofilm

Vp variable
 Características de los fenómenos de transporte en cultivos

Los metabolitos y sustratos poliméricos y la formación de micelio

pueden producir medios muy viscosos, generalmente no newtonianos,
que limitan la transferencia de materia

La formación de aglomerados celulares (flocs, pellets) y biofilms

determina la existencia de restricciones difusionales externas e
internas. Las últimas dan lugar a condiciones de anoxia, restricción
severa de nutrientes, intoxicación por productos y lisis celular

Las concentraciones de nutrientes y productos en los medios son

normalmente bajos, por lo tanto los gradientes de concentración para
la transferencia es limitada