Gluconeogenesis

Docente : Juan Ignacio De Palo

Aulas Medicas Curso Virtual de Bioquímica e
Inmunologia 2020.
 Gluconeogenesis

Importancia de la gluconeogenesis

Precursores gluconeogenicos

Fuentes de precursores gluconeogenicos

Ciclo de Cori y Ciclo de la Alanina-Glucosa

Características de la via metabólica

Cuatro reacciones rodeo (by pass)

Regulaciones enzimáticas

Integración esquemática
 Gluconeogenesis
¿Porque es importante la gluconeogenesis?


Para el sistema nervioso, eritrocito, testículo, médula > 120 gr de glucosa
renal y los tejidos embrionarios la glucosa plasmática es la
única o principal fuente de energía.

Solo el tejido nervioso consume mas de 120 g de glucosa
al día, cantidad que supera a toda la glucosa almacenada en
forma de glucógeno hepático

El glucógeno hepático es insuficiente para estos
requerimientos entre comidas, ayunos prolongados o
después del ejercicio vigoroso.

Por lo tanto el organismo humano sintetiza glucosa a partir
de precursores no glucidicos a través de una ruta
denominada gluconeogenesis.
 Gluconeogenesis
Precursores no glucidicos

Lactato

Piruvato

Glicerol

Oxalacetato

Aminoácidos no ramificados (aminoacidos glucogenicos)
 Gluconeogenesis
Lactato


Ácido Láctico (ácido
orgánico) y el Lactato (base
conjugada)

Su formación fisiológica es
constante en el eritrocito
(glucolisis anaerobica)

El musculo genera ácido
láctico a partir de la
glucolisis anaerobica en Acido Láctico Lactato
ejercicio intenso con
contracción vigorosa (ej :
sprinting, velocistas).
 Gluconeogenesis

Musculo Esqueletico


El combustible principal del musculo esquelético en ejercicio es el glucógeno
almacenado, aunque al agotarse el musculo utiliza ácidos grasos como fuente de
energía.


El inicio de la contracción muscular vigorosa siempre es anaerobico ya que el
oxigeno disponible se consume en menos de un 1 minuto, por lo tanto el ATP
celular proviene de la glucolisis anaerobica y la fosfocreatina como fuentes
inmediatas de combustible.
 Gluconeogenesis

Cuando acaba la fase intensa del
ejercicio se debe restablecer el
aporte de oxigeno Hígado Glucógeno

En el ejercicio sostenido aumenta
también la irrigacion muscular la
cual provee de nutrientes y Glucosa
oxigeno a las fibras musculares,
principalmente a las fibras rojas.

En ejercicio sostenido el Piruvato
metabolismo cambia de
anaerobico inicial a aerobico
restableciendo el oxigeno celular. Acetil-CoA

La deuda de oxigeno representa
Lactato
la reposición del oxigeno
consumido rápidamente durante el
primer minuto del ejercicio
intenso.
 Gluconeogenesis

La reacción de la LDH Glucolisis
(Lactato Deshidrogenasa) en
dirección del Lactato permite
regenerar lo niveles de NAD

La regeneración de los
niveles de NAD son necesario
para que continúe oxidación
incompleta de la glucosa
Lactato Deshidrogenasa

La reacción de la LDH tiende
a formar Lactato en presencia Piruvato Lactato
de un aumento de piruvato y
NADH.
 Gluconeogenesis

Ciclo de Cori


Es el intercambio cíclico de la glucosa y el lactato entre el musculo
esquelético y el hígado

Permite que el musculo evite la acidosis láctica al enviarle el lactato al
hepatocito para que este lo convierta en glucosa necesaria para
satisfacer al tejido nervioso, musculo esquelético en ejercicio, eritrocito.

No es una fuente eficiente de precursores no glucidicos gluconeogenicos
ya que requiere de un estado muscular de anaerobiosis

El musculo esquelético en ejercicio intenso produce lactato que es
volcando al torrente sanguíneo, este lactato es captado por la circulación
portal y aprovechado por el hepatocito para la gluconeogenesis.
Ciclo de Cori
Musculo esquelético en
Hígado ejercicio intenso

Glucógeno
Glucosa Glucosa Glucogenolisis
ATP ATP
NADH+ NADH+

Piruvato Piruvato Glucolisis

anaerobica
LDH LDH

Lactato Lactato

Gluconeogenesis
 Gluconeogenesis
Piruvato


Alfacetoacido de tres carbonos que tiene dos orígenes principales en el
hepatocito

El piruvato proviene de compuestos derivados de la glucosa (lactato) y de
la proteolisis endogena (muscular)

1) Lactato
2) Aminoácidos glucogenicos (Alanina, Cisteina, Glicina, Serina, Treonina,
Triptofano)
 Alanina Musc.esq
Lactato GPT/ALAT

LDH
Piruvato Oxalacetato
Musc.esq
Eritrocito Piruvato
Fosfoenolpiruvato
Enzima Serina
Malica Glicina
Serina
Malato Glucosa

Fumarato
Succinato

Glutamato Glutamato
Glutaminasa
Enterocito Glutamina Musc.esq
 Gluconeogenesis
Glicerol


Alcohol de tres carbonos y
tres grupos OH que junto a los
ácidos grasos conforma los
gliceridos
Triacilglicerido

Forma parte de los
triacigliceridos, glicerido
formado por la combinación
de tres ácidos grasos
esterificados unidos mediante
enlaces ester a una molécula
de glicerol Glicerol (3) Acidos grasos

Molécula de almacenamiento
del tejido adiposo.
 Gluconeogenesis

El glicerol proviene del tejido Hígado
adiposo como producto de la
lipolisis (movilizacion de A/NA
acidos grasos y glicerol) Glucagon
estimulada por el glucagon, (3) Acidos grasos
adrenalina, cortisol y Glicerol
AC
catalizado por la enzima
Lipasa Hormonosensible

El glicerol es liberado al AQP-7
torrente circulatorio desde el
adiposo hacia el hígado, AMPc Glicerol
siendo captado por la
circulación portal. PKA
(3) Acidos grasos

Por las reacciones catalizadas
por glicerol quinasa y glicerol LHS LHS
3-fosfato deshidrogenasa se TAG
integra a la gluconeogenesis en
forma de dihidroxiacetona. La LHS cataliza la ruptura hidrolitica
de los enlaces ester del TAG
 Gluconeogenesis
Aminoácidos


Conocidos como aminoácidos glucogenicos, estos aminoácidos pueden
interconvertirse en piruvato e intermediarios del Ciclo de Krebs.

Provienen principalmente del tejido muscular o síntesis extra-muscular

En una situación de ayuno temprano (8 hs) se produce una elevación de
estos aminoácidos en el torrente sanguíneo (30-50% alanina y glutamina).
 Gluconeogenesis
Alanina


La alanina proviene principalmente de la síntesis periférica muscular a partir de piruvato
y la transamnacion con otros aminoácidos musculares que derivan de la proteolisis.

El aminoácido alanina se dirige al hígado mediante vía hematica y allí es
reconvertido en piruvato.

La alanina tiene doble acción en el metabolismo hepático en ayuno :

1) Inhibición de la Piruvato Kinasa restringiendo la producción de piruvato mediante

glucolisis

2) Proporciona piruvato mediante transaminacion

 Gluconeogenesis
Ciclo de la Alanina Glucosa

Intercambio cíclico entre el musculo esquelético y el hígado con dos

objetivos :

1) Aportar alanina como precursor de piruvato hepático necesario para

la gluconeogenesis.

2) Transporte eficiente y no toxico de nitrógeno desde el musculo para

su eliminación hepática en forma de urea.
Ciclo de la Alanina-Glucosa
Musculo esquelético en
Hígado ayuno mayor a 8hs

Glucógeno
Glucogenolisis
Glucosa Glucosa
ATP ATP
NADH+ NADH+
Glucolisis
Piruvato Piruvato Glutamato
GPT/ALAT
GPT/ALAT Transaminacion
Alanina Alanina

Gluconeogenesis Aminoácidos
Proteínas musculares
 Gluconeogenesis
Glutamina

Glutaminolisis


Gran parte de la glutamina muscular es
liberada al torrente sanguíneo y convertida
en alanina por los enterocitos.

La glutamina es degradada a glutamato y
este se transamina a alfa-cetoglutarato y
mediante el Ciclo de Krebs produce malato.

El malato por acción de la enzima malica
produce piruvato el cual es transaminado
junto a aminoácidos para la producción
alanina.
 Gluconeogenesis
Glutamato


La oxidación y degradación de divesos aminoácidos
muscular producen glutamato.

El glutamato se transamina junto al piruvato para formar
alanina el cual es liberado al torrente sanguíneo y captado por
el hígado para gluconeogenesis.
 Gluconeogenesis

Se denominan aminoácidos glucogenicos a los aminoácidos que se

interconvierten en precursores de la gluconeogenesis, principalmente
intermediarios del ciclo de krebs, piruvato, pero fundamentalmente
oxalacetato.


Alfa-cetoglutarato ; Alanina, Glutamato, Glutamina, Histidina,
Prolina

Fumarato ; Fenilalanina, Tirosina

Succinil-CoA ; Isoleucina, Metionina, Treonina, Valina
 Alanina Musc.esq
Lactato GPT/ALAT

LDH
Piruvato Oxalacetato
Musc.esq
Eritrocito Piruvato
Fosfoenolpiruvato
Enzima Serina
Malica Glicina
Serina
Malato Glucosa

alfa-
Fumarato
cetoglutarato
Prolina
Succinato
Fenilalanina Histidina
Tirosina Glutamato Glutamato
Glutaminasa
Enterocito Glutamina Musc.esq
 Gluconeogenesis
Gluconeogenesis (características)


Ruta metabólica anabolica (Piruvato → Glucosa)

Síntesis de glucosa a partir de precursores no glucidicos de 3 y 4 carbonos.

Tiene lugar en el hígado principalmente y en menor medida en la corteza renal y
células epiteliales intestinales.

Ocurre parte en la matriz mitocondrial y parte en el citosol/luz del REL.

Comparte reacciones e intermediarios con la Glucolisis (reacciones reversibles) pero
NO es la glucolisis invertida, ya que la via glucolitica es exergonica e irreversible
 Gluconeogenesis
Posee reaciones rodeo (by pass) las cuales estan catalizadas por enzimas unicas que logran
rodear las reacciones irreversibles y altamente exergonicas de la Glucolisis.

Enzimas únicas de la gluconeogenesis :


Piruvato Carboxilasa

Fosfoenolpiruvatocarboxikinasa

Fructosa 1,6 Bifosfatasa

Glucosa 6 Fosfatasa

Producir glucosa endogena que es liberada al torrente sanguíneo para abastecer el

metabolismo de tejidos como el sistema nervioso y eritrocito principalmente.
 Gluconeogenesis

Primero son utilizados compuestos intermedios relacionados con la glucosa
como el piruvato, glicerol y el lactato.

Segundo son interconvertidos aminoácidos glucogenicos.

La gluconeogenesis mantiene una glucemia optima para el metabolismo
neuronal y del eritrocito cuando se agota el glucógeno hepático (70 gr aprox)
en la primera fase del ayuno temprano (a partir de las 8 hs aprox)

El hígado puede producir entre 150 a 170 gr de glucosa por día mediante la
gluconeogenesis

El 80% de la glucosa es consumida por el tejido nervioso y el resto por
eritrocitos, músculos esquelético y miocardio.

La gluconeogenesis es estimulada principalmente por el glucagon, aunque
también por el cortisol, ácido retinoico, adrenalina.
 Gluconeogenesis
1°) Conversion de piruvato en fosfoenolpiruvato

Esta conversión o proceso esta formada por una serie de

reacciones.

a) Carboxilacion del piruvato en oxalacetato

b) Transporte del oxalacetato al citosol
c) Conversión del oxalacetato en fosfoenolpiruvato (reacción
rodeo)
 Gluconeogenesis
Piruvato carboxilasa
Alanina
Lactato
Cataliza la carboxilacion de piruvato a
oxalacetato HCO3- Piruvato


Utiliza como cofactor la biotina,
vitamina B7 hidrosoluble, cofactor
orgánico unido covalenemente (biotinil- Piruvato Carboxilasa
enzima) utilizado como transportador de
carbonos en reaccione de carboxilacion.

La reacción consume ATP y produce
oxalacetato que continuara dentro de la
gluconeogenesis o podrá también ser Oxalacetato
integrado al Ciclo de Krebs.
 Gluconeogenesis
Regulación de la Piruvato Carboxilasa (parte 1)

Alosterica


Moduladores alostericos positivos principalmente el Acetil-CoA que proviene de la oxidación de
ácidos grasos, otros ATP, NADH+

Moduladores alostericos negativos AMP/ADP, NAD.

(IMPORTANTE : No olvidar que ATP, NADH+ y Acetil-CoA son los moduladores alostericos
negativos del complejo piruvato deshidrogenasa)

Covalente

El glucagon mediante la vía del AMPc/PKA fosforila y activa a la enzima, el caso opuesto es el de la
insulina que la mantiene desfosforilad e inhibida.
 Gluconeogenesis
Regulación de la Piruvato Carboxilasa (parte 2)

Génica

La insulina mediante la vía de la PI3K-PKB fosforila el factor de

transcripción FOXO-1 logrando su degradación fuera del núcleo
FOXO-1 en ausencia de insulina estimula la expresión de los genes
de las enzimas de la gluconeogenesis.
 TAG
Acetil-CoA
ATP Lipolisis
NADH+

(-) Acidos Grasos Aminoácidos

Alanina cetogenicos
Lactato betaoxidacion
CPDH

HCO3- Piruvato ↑Acetil-CoA

(+)

Piruvato Carboxilasa

Gluconeogenesis
Oxalacetato (-)
Piruvato Alanina
Kinasa
PEP Piruvato
 Gluconeogenesis
b) Transporte del oxalacetato al citosol


Debido a que la mitocondria no posee transportadores de
oxalacetato, este debe ser reducido a malato por acción de la
malato deshidrogenasa.

El malato abandona la mitocondria mediante un
transportador de membrana y sale al citosol donde sera
oxidado por la malato deshidrogenasa citosolica a oxalacetato
 3) Transporte del malato al citosol 4) Oxidación del malato en
mediante lanzadera oxalacetato (citosol)
Matriz mitocondrial
Citosol

NAD+
Malato Deshidrogenasa
NADH Malato Deshidrogenasa (citosolica)
(mitocondrial)
2) Reducción del
oxalacetato en
malato
(mitocondria) PEPCK

GPT Alanina
Piruvato Cisteina Fosfoenolpiruvato
LDH
Glicina 5) Conversión de
1) Conversión de lactato y Oxalacetato y
Lactato aminoácidos en piruvato Fosfoenolpiruvato
 Gluconeogenesis
c) Conversion del oxalacetato en fosfoenolpiruvato

Oxalacetato

El oxalacetato sufre fosforilación y descarboxilacion
por acción de la enzima
Fosfoenolpiruvatocarboxikinasa (PEPCK)

Hay dos isoformas de la PEPCK, citosolica y
mitocondrial.
Regulación :
Génica
Fosfoenolpiruvato

Inducción génica por Glucagon mediante la vía del carboxikinasa
AMPc/PKA y el factor de transcripción CREB y por
esteroides como el cortisol y el acido retinoico.

La insulina degrada al factor de transcripción FOXO1
y hay menor expresion de los genes de PEPCK. Fosfoenolpiruvato
 Fructosa 1,6 bifosfato
Dihidroxiacetona Gliceraldehido 3-
fosfato fosfato
2) Conversion de
(2) Gliceraldehido 3-fosfato
fosfoenolpiruvato en
fructosa 1,6 bifosfato
(2) 1,3-Bifosfoglicerato
Conjunto de reacciones
secuenciales desde el (2) 3-Bifosfoglicerato
fosfoenolpiruvato hacia
la fructosa 1,6 bifosfato (2) 2-Bifosfoglicerato
mediante las reacciones
(2)Fosfoenol-
reversibles citosolicas (2) Lactato piruvato
compartidas con la (2) Oxalacetato
glucolisis (2) Piruvato
(2) Alanina
 Gluconeogenesis
3) Conversion de la fructosa 1,6 bifosfato en fructosa 6 fosfato


Reacción rodeo de la Fosfofructokinasa-1

La enzima fructosa 1,6 bifosfatasa utiliza Mg++ y cataliza la hidrólisis irreversible del fosfato del C-1 de la
fructosa 1,6 bifosfato dando como producto la fructosa 6-fosfato.

Fructosa 1,6 bifosfatasa

Fructosa 1,6 bifosfato Fructosa 6 fosfato
 Gluconeogenesis
Alosterica


Los moduladores alostericos positivos son el ATP y el Citrato, y los moduladores alostericos
negativos el ADP, AMP y la Fructosa 2,6 bifosfato.

(IMPORTANTE : Recordar que el ATP, Citrato son moduladores alostericos negativos de la FFK1 y la
Fructosa 2,6 bifosfato el positivo) (Ver regulación coordinada FFK-1/FFK-2)

Covalente
Fosforilación y activacion por el Glucagon mediante via AMPc/PKA, desfosforilacion y e inhibición por
la Insulina mediante las fosfatasas activadas por la Insulina.

Génica
Represión génica por degradación del factor de transcripción FOXO-1 gracias a la acción de la insulina.
 ↓ADP
↓NAD
(+)
(-)
↓Fructosa 2,6 bifosfato

Fosfofructokinasa 1
↑ATP
↑NADH
↑Citrato
Fructosa 1,6 bifosfatasa
Fructosa 6 fosfato Fructosa 1,6 bifosfato

PKA - P-FFK-2
(-) (+)
AMPc
↑ Oxidación de
AC ↓Glucolisis ácidos grasos
↑Gluconeogenesis
Glucagon Regulación coordinada
Ayuno / Fructosa 2,6 bifosfato FFK-1/FFK-2/Fructosa
Hipoglucemia 1,6 BPasa
 Gluconeogenesis
4) Conversion de glucosa 6-fosfato en glucosa


La fructosa 6-fosfato por isomerizacion reversible
se transforma el glucosa 6-fosfato.

La glucosa 6-fosfato se desfosforila en glucosa por
acción de la glucosa-6-fosfatasa

La enzima se ubica en la luz del retículo
endoplasmatico de hepatocitos, células renales y
células epiteliales intestinales y es activada por Mg+
+

Regulación

Génica
↑Glucosa 6-fosfatasa

Aumenta la síntesis en higado en ayuno mediante
la induccion de CREB que es activado por la accion
Ayuno
del glucagon. CREB

Disminuye su síntesis en presencia de Insulina por
degradación del factor de transcripción FOXO-1. ↑Glucagon AMPc/PKA
 Gluconeogenesis
Balance global

2 Piruvato + 4 ATP + 2 GTP + 2 NADH+ + 2 H+ + 4 H2O

(SUSTRATOS) →
Glucosa + 4 ADP + 2 GDP + 6 Pi + 2 NAD (PRODUCTOS)
 GLUT-2
Torrente sanguíneo

Glucosa
4) Desfosforilacion irreversible
Glucosa
Glucosa
6-fosfato
6-fosfato

Fructosa Adiposo (Lipolisis)

3) Desfosfrilacion 6-fosfato
Glicerol
irreversible

Dihidroxiacetona Dihidroxiacetona Glicerol-3-fosfato

fosfato fosfato

(2) Gliceraldehido 3-fosfato

Musc.Esq y GR
(2) 3-Fosfoglicerato (Glucolisis anaerobica)
Lactato
2) Fosforilación del Oxalacetato

(2) 2-Fosfoglicerato (2) PEP (2) Oxalacetato (2) Piruvato

1) Carboxilacion del piruvato
Alanina
Aminoácidos