FACULTAD: CIENCIAS VETERINARIAS Y BIOLÓGICAS
CURSO: BIOQUÍMICA
SECCIÓN: 2C1
PROFESOR: MELO CALERO,OMAR GREGORY
INFORME DE PRÁCTICAS
PRÁCTICA N° 4
TÍTULO: DETERMINACIÓN DE LA CONCENTRACIÓN SÉRICA DE PROTEÍNAS
TOTALES Y FRACCIONADAS
INTEGRANTES:
● AGUILAR QUISPE, NICOLÁS PATRICIO ([email protected])
● FANOLA PALOMINO, SAHAMIRA
● PRIETO PACHAS, ROMINA DEL PILAR ([email protected])
● TRUJILLO MARTÍNEZ, CELESTE YANELY ([email protected])
INTRODUCCIÓN
Las proteínas son compuestos orgánicos macromoleculares, ampliamente
distribuidos en el organismo, esenciales para la vida. Actúan como elementos
estructurales y de transporte y aparecen bajo la forma de enzimas, hormonas,
anticuerpos, factores de coagulación, etc.
En el plasma, las proteínas contribuyen a mantener el volumen del fluido circulante,
transportan sustancias relativamente insolubles y actúan en la inactivación de
compuestos tóxicos y en la defensa contra agentes invasores.
La determinación de proteínas totales es útil para el monitoreo de cambios
ocasionados por diversos estados de enfermedad. En condiciones patológicas como
pérdidas renales, desnutrición, infecciones prolongadas, etc., suelen presentarse
hipoproteinemias, mientras que en otras como mieloma múltiple, endocarditis
bacteriana y hemoconcentración de diversos orígenes, (ej.: deshidratación) se
observan hiperproteinemias.
OBJETIVOS ESPECÍFICOS
● Aplicar técnicas para determinar la concentración sérica de proteínas totales
● Aplicar técnicas para determinar la concentración sérica de albúmina
● Entender los fundamentos de las técnicas aplicadas y el significado de los
resultados.
MATERIALES
● 01 gradilla
● 04 tubos de ensayo 13 x 100mm
● 01 piseta de agua destilada
● 03 pipetas de 5mL
● 03 propipetas
● 01 suero sanguíneo tubo con tapa rosca 1 mL
● 01 estándar de ácido úrico frasco 1 mL
● 01 reactivo de trabajo de urea frasco 3mL
● 01 espectrofotómetro
● 01 baño maría 37°C
● 01 micropipeta 100-1000 µL y/o de 5-50µL
● 12 puntas descartables respectivas
● 12 cubetas para espectrofotometría
● 01 vórtex
RESULTADOS
- determinación de proteínas en una muestra: (Reactivo de biuret)
se agrega reactivo de biuret, Tras echar la cantidad de 1 ml de reactivo de biuret al
blanco y a la muestra estándar, Incubar 20 minutos a 37°C. Leer en
espectrofotómetros 540 nm
Determinar la concentración
FC= concentración del estándar
abs del estándar
FC= 6.0 g /dl / 0.203
FC= 29.5
[Proteína] =0.212 x 29.5
[Proteína]= 6.25
-Determinación de Albúmina: (Reactivo BCG)
para determinar el nivel de albúmina sérica, se sabe que reacciona con el bromo
cresol dulfo ftaleína a un pH de 3.8, de modo que forma un compuestocoloreado
que absorbe a 620 nm
FC = Concentración del estándar
Abs del estándar
FC x abs.
Lectura del estándar: 0,594 abs
Muestra X: 1,003 abs
FC x 2da absorbancia = muestra X
FC= 3.1g /dl / 0.594
FC=5.21
[Albúmina] = 1,003 x 5.21
[Albúmina] = 5.225
DISCUSIÓN
● Durante el desarrollo de la práctica realizada se procedió aplicar los
principales métodos que se usan en el laboratorio para precipitar y separar
proteínas, así como métodos especiales para cuantificarlas y de esa forma
saber en qué cantidades se encuentran presentes en una solución
determinada, en especial la solución usada en la experiencia de laboratorio,
el “plasma o suero humano” a través del cual se estudiaron sus proteínas
más importantes, la albúmina, las globulinas y la relación que existe entre
ellas.
● El plasma está constituido por una serie de proteínas, como la albúmina y la
globulina que desempeñan funciones vitales en el organismo.
● Biuret utilizado en la determinación de Albúmina, tiene que tornarse un color
violeta para que sea un resultado positivo pero en la práctica de laboratorio
se torno color celeste lo cual nos dio un resultado negativo.
CONCLUSIÓN
● La proteína es necesaria para la mayoría de las funciones corporales
normales, como el mantenimiento, el crecimiento, la reproducción, la
lactancia y el crecimiento del cabello. Una deficiencia de proteínas en la dieta
puede agotar las reservas de sangre, hígado y músculos y predisponer a los
animales a una variedad de enfermedades graves e incluso mortales.
● El plasma se compone de muchas proteínas, como la albúmina y la globulina,
que desempeñan funciones importantes en el organismo. La purificación de
estas sustancias se puede lograr mediante el uso de una variedad de
técnicas de separación, como la salinización, que es la técnica de
precipitación de proteínas más utilizada, y el método del colorímetro de luz
biuret, que permite la estimación cuantitativa de las proteínas. Albúmina total
presente en la muestra.
