DECLARACIÓN LEGAL

EDITORES:

Cristina E. Solano Sosa

María Eugenia Sánchez Morales
Gloria Verónica Vázquez García
Amalia Martínez García
Eva Liliana Ramos Guerrero

Publicación electrónica
ISBN GENERAL 978-607-8358-86-1
Tomo II: Biotecnología y Ciencias Agropecuarias
ISBN 978-607-8358-88-5

El contenido de los artículos es responsabilidad de los autores.

Temacilli EDITORIAL
Lagos de Moreno, Jalisco
http:/[Link]

D. R. Centro de Investigaciones en Óptica, A.C.

Loma del Bosque 115, Col. Lomas del Campestre
C. P. 37150 León, Guanajuato
México
Hecho en México
Octubre de 2020
Miscelánea Científica en México

Tomo II:

Biotecnología y Ciencias
Agropecuarias
 PREFACIO

El presente compendio reúne trabajos de investigación realizados en diversas

áreas de la ciencia, cuyo objetivo principal es contribuir a la difusión del trabajo científico
que se realiza en México. Con este compendio también se pretende promover el trabajo
interdisciplinario entre miembros de diferentes disciplinas científicas.

Este trabajo está organizado en siete tomos los cuales corresponden a las
siguientes áreas científicas: I) Biología y química, II) Biotecnología y ciencias
agropecuarias, III) Ciencias sociales, IV) Físico matemáticas y ciencias de la tierra, V)
Humanidades, ciencias de la conducta y divulgación científica, VI) Ingeniería, así como
VII) Medicina y ciencias de la salud.

Octubre de 2020
León, Gto., México

Cristina E. Solano Sosa

María Eugenia Sánchez Morales
Gloria Verónica Vázquez García
Amalia Martínez García
Eva Liliana Ramos Guerrero
MISCELÁNEA CIENTÍFICA EN MÉXICO CENTRO DE INVESTIGACIONES EN ÓPTICA, A.C.

Contenido

GRANA COCHINILLA: COLOR Y SU RELACIÓN ENTRE EL MANEJO POSCOSECHA Y

PORCENTAJE DE ÁCIDO CARMÍNICO ............................................................................................ 5
EFECTO DE LA APLICACIÓN DE LOMBRICOMPOSTA EN LA CALIDAD DEL CULTIVO DE
RÁBANO (RAPHANUS SATIVUS L.) ............................................................................................... 10
CARACTERIZACIÓN BACTERIOLÓGICA DE MUESTRAS DE SUELO CONTAMINADO CON HTP
Y EVALUACIÓN DEL CRECIMIENTO EN PRESENCIA DE CONTAMINANTES ........................... 21
OPTIMIZACIÓN DE UN PROCESO DE EXTRACCIÓN DE MUCÍLAGO DE SEMILLAS DE SALVIA
HISPANICA L. ................................................................................................................................... 32
INFLUENCIA DE FERTILIZACIÓN ORGÁNICA Y QUÍMICA SOBRE LA GERMINACIÓN Y
DESARROLLO FOLIAR DE FRIJOL COMÚN (PHASEOLUS VULGARIS L.) ................................. 39
EFECTO DEL TE DE COMPOST EN TOMATE (Lycopersicum esculentum Mill.) BAJO
CONDICIONES DE INVERNADERO. .............................................................................................. 46
SILICIO EN EL CRECIMIENTO VEGETATIVO DE PLANTAS DE ARROZ MORELOS-A98 .......... 56
REDUCIENDO LA DOSIS EFECTIVA DEL CISPLATINO USANDO NANOPARTÍCULAS DE ORO
COMO VEHÍCULO. ........................................................................................................................... 61
CONCENTRACIÓN DE AZÚCARES Y CLOROFILAS EN LA INDUCCIÓN FLORAL DE Laelia
anceps POR EFECTO DE ÁCIDO GIBERÉLICO EXÓGENO ......................................................... 69
EFECTO DEL LANTANO EN EL ÁREA FOLIAR DE PLÁNTULAS DE TOMATE CON NUTRICIÓN
DIFERENCIAL DE CALCIO .............................................................................................................. 74
EL VERDADERO AMOR TÓXICO: EL TOLOACHE ....................................................................... 79
EFECTO DE LA APLICACIÓN DE LOMBRICOMPOSTA EN LA CALIDAD Y COMPUESTOS CON
ACTIVIDAD ANTIOXIDANTES EN LECHUGA (Lactuca sativa L.). ................................................. 90
ADN EXTRACELULAR ACTÚA COMO PATRÓN MOLECULAR ASOCIADO A DAÑO EN LA
MICROALGA NEOCHLORIS OLEOABUNDANS. .......................................................................... 102
EFECTO DE EXTRACTOS DE PIEL DEL HUESO Y CASCARA DE AGUACATE CRIOLLO SOBRE
EL OSCURECIMIENTO DE LA PULPA DEL MISMO FRUTO. ...................................................... 106
AISLAMIENTO E IDENTIFICACIÓN DE MICROORGANISMOS PRESENTES EN SEMILLAS DE
FRIJOL DEL ESTADO DE GUERRERO ........................................................................................ 114
ESTABLECIMIENTO DE UN SISTEMA DE MICROPROPAGACIÓN PARA UNA PLANTA
MEDICINAL DEL GÉNERO Lobelia ORIGINARIA DE LA MESETA PURÉPECHA ...................... 123
USO DE INOCULANTES BACTERIANOS NATIVOS EN LA PRODUCCIÓN DE FRIJOL COMÚN EN
LA REGIÓN DEL VALLE DEL GUADIANA ..................................................................................... 129
EFECTO SINÉRGICO DE CERIO Y SACAROSA EN LA CALIDAD DE VIDA DE FLORERO DE
Eustoma grandiflorum ..................................................................................................................... 135
CERIO MEJORA EL CRECIMIENTO RELATIVO DE MACOLLOS Y EL PESO DE BIOMASA
FRESCA DE PLANTAS DE ARROZ ............................................................................................... 140

TOMO II BIOTECNOLOGÍA Y CIENCIAS AGROPECUARIAS - PÁGINA 1

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COMPARACIÓN DE CARACTERÍSTICAS DE CONFORMACIÓN LINEAL EN SIETE RAZAS DE

CABRAS DE ESTADOS UNIDOS DE AMÉRICA ........................................................................... 145
IDENTIFICACIÓN DE HIDROLASAS PEPTIDOGLUCANO PRODUCIDAS POR BACTERIAS
ÁCIDO LÁCTICAS. ......................................................................................................................... 158
OPERACIÓN PILOTO DE LA PARED VERDE EN UPIIG ............................................................. 172
ANÁLISIS ESTADÍSTICOS PARA LA ELABORACIÓN DE UNA ALTERNATIVA DE ALIMENTO
SALUDABLE A BASE DE NOPAL NATURAL COSECHADO EN LA REGIÓN CARBONÍFERA .. 187
USO DE MICROORGANISMOS NATIVOS COMO PROBIÓTICOS DURANTE LA ENGORDA DE
LOS CONEJOS ............................................................................................................................... 198
LA ADICION DE AMARANTO, QUINUA Y HUAUZONTLE MEJORAN LA CALIDAD NUTRIMENTAL
Y FUNIONAL DE UNA SOPA TIPO MINESTRONE....................................................................... 202
EFECTO DEL SELENIO EN EL CRECIMIENTO INICIAL Y EL CONTENIDO DE COMPUESTOS
FENÓLICOS EN PLANTAS DE FRIJOL (Phaseolus vulgaris L.) ................................................... 210
CERIO EN EL ESTATUS DE LOS MICRONUTRIMENTOS B, Mn Y Zn EN DIFERENTES ÓRGANOS
DE TULIPÁN ................................................................................................................................... 218
EVALUACIÓN DE LA BIODEGRADACIÓN DEL HIDROGEL DE ACRILAMIDA/ACIDO ACRÍLICO
ENTRECRUZADO CON LIGNINA MODIFICADA UTILIZANDO Pseudomonas putida Y Bacillus sp.
......................................................................................................................................................... 223
EVALUACIÓN DEL DISEÑO HIDROLOGICO Y VERIFICACIÓN ACTUAL DE
ALMACENAMIENTOS DE AGUA DE LLUVIA PARA USOS AGROPECUARIOS EN EL ESTADO DE
COLIMA ........................................................................................................................................... 229
OBTENCIÓN DE LOS COMPONENTES BIOACTIVOS DE LA PULPA RESIDUAL DEL BENEFICIO
HÚMEDO DEL CAFÉ ...................................................................................................................... 233
CARACTERIZACIÓN BIOQUÍMICA DE CEPAS DE Azospirillum sp. AISLADAS DE
LOMBRICOMPOSTA ...................................................................................................................... 240
DESARROLLO Y FORMULACIÓN DE UNA POMADA CON POLVO, TIZANA Y ACEITE DE
AZADIRACHTA INDICA (NEEM) .................................................................................................... 244
COMPOSICIÓN PROXIMAL Y FITOQUÍMICA DE Stenocactus multicostatus SUBSP.
zacatecasensis (CACTACEAE) ...................................................................................................... 252
CARACTERIZACIÓN MORFOLÓGICA DE MEZQUITE PROSOPIS LAEVIGATA DE CINCO
LOCALIDADES DEL ESTADO DE GUANAJUATO........................................................................ 262
ANÁLISIS PARAMÉTRICO DE MELANINA DERIVADA DE CÁSCARA DE NUEZ ...................... 267
RENDIMIENTO DE FRIJOL (Phaseolus vulgaris L.) EN SUELOS BIORREMEDIADOS DEL VALLE
DEL GUADIANA, DURANGO ......................................................................................................... 280
FOSFITO Y ESTRÉS ABIÓTICO EN PIGMENTOS FOTOSINTÉTICOS EN CAÑA DE AZÚCAR
César Antonio Casasola-Elizondo; Fernando Carlos Gómez-Merino; Gabriel Alcántar-González;
Yolanda Leticia Fernández-Pavía; Libia Iris Trejo-Téllez. .............................................................. 285
DIVULGACIÓN DEL ESTUDIO CIENTÍFICO EN GENÉTICA DE LAS LEVADURAS
INVOLUCRADAS EN LA ELABORACIÓN DEL MEZCAL .............................................................. 290

TOMO II BIOTECNOLOGÍA Y CIENCIAS AGROPECUARIAS - PÁGINA 2

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PESO FRESCO DE PLÁNTULAS DE CHILE POBLANO EXPUESTAS A METALES DE

TRANSICIÓN .................................................................................................................................. 298
EVALUACION DE EXTRACTO DE OREGANO EN CULTIVO DE FRIJOL PINTO SALTILLO
CONTRA TIZON DE HALO ............................................................................................................. 303
CONCENTRACIÓN DE AZÚCARES TOTALES EN CEMPASÚCHIL (Tagetes erecta) VAR. INCA
EN RESPUESTA A DIFERENTES PORCENTAJES DE SOMBREADO ....................................... 309
EVALUACIÓN DEL PORCENTAJE DE GERMINACIÓN Y CONTAMINACIÓN EN MEDIO DE
CULTIVO QUÍMICO Y ORGÁNICO EN LA PROPAGACIÓN in vitro DE DOS ESPECIES DE AGAVE
......................................................................................................................................................... 313
INMUNODETECCIÓN DE HONGOS FITOPATÓGENOS CON NANOPARTÍCULAS DE ORO ... 323
EL ALMACÉN MODIFICA EL CONTENIDO DE COMPUESTOS FENÓLICOS Y LA CAPACIDAD
ANTIOXIDANTE DE PRODUCTOS DERIVADOS DE LA FRUTA DEL GARAMBULLO (Myrtillocactus
geometrizans) .................................................................................................................................. 330
DESCRIPCIÓN MORFOLÓGICA DE DIATOMEAS TERMÓFILAS AISLADAS DE TAPETES
MICROBIANOS FORMADOS EN AGUAS TERMALES Y SU APLICACIÓN BIOTECNOLÓGICA336
INCIDENCIA DE MICROORGANISMOS BENÉFICOS DEL SUELO EN EL RENDIMIENTO DE
FRIJOL PINTO SALTILLO .............................................................................................................. 345
GENERACIÓN DE MICROGREENS COMO PROPUESTA PARA DIVERSIFICAR EL CONSUMO
DE CHÍA (Salvia hispanica L.) ........................................................................................................ 351
CALIDAD NUTRICIONAL DEL FRIJOL PINTO SALTILLO EN CONDICIONES DE FERTILIZACIÓN
QUÍMICA Y ORGÁNICA ................................................................................................................. 357
CONCENTRACIÓN FOLIAR DE Ca, Mg Y S EN PLANTAS DE CHILE JALAPEÑO TRATADAS CON
TALIO .............................................................................................................................................. 362
EXTRACCIÓN Y CARACTERIZACIÓN DE ALMIDONES DE TRES VARIEDADES DE CAMOTE
(Ipomoea spp.) PARA SU UTILIZACIÓN EN LA ELABORACIÓN DE BIOPLÁSTICOS................ 366
MORFOMETRÍA DE FRUTOS Y SEMILLAS DE PACHIRA AQUATICA EN LA COMUNIDAD DE EL
CAMARÓN, (VERACRUZ) .............................................................................................................. 379
EFECTO DEL SUMINISTRO DE MAGNESIO Y DE LA APLICACIÓN DE LANTANO EN ÁREA
FOLIAR Y LECTURAS SPAD DE PLÁNTULAS DE TOMATE ....................................................... 383
PRODUCCIÓN DE METARHIZIUM ANISOPLIAE EN RESIDUOS DE POLIETILENO DE ALTA
DENSIDAD ...................................................................................................................................... 388
USO DE CALOSTRO INOCUO COMO MEDIDA DE BIOSEGURIDAD APLICADA PARA LA
CRIANZA EFICIENTE DE BECERRAS DE RAZAS LECHERAS .................................................. 393
CARACTERIZACIÖN DE LODOS RESULTANTES DEL PROCESO DE LODOS ACTIVADOS DE
LA PTAR NUMERO UNO TLALNEPANTLA, EN EL ESTADO DE MËXICO, PARA UN POSTERIOR
USO EN LA AGRICULTURA .......................................................................................................... 398
VIABILIDAD DE POLEN, DENSIDAD Y TAMAÑO DE ESTOMAS EN AUTOTETRAPLOIDES Y
DIPLOIDES DE Physalis ixocarpa .................................................................................................. 408
DEGRADACIÓN FISICOQUÍMICA Y MICROBIOLÓGICA DE PLÁSTICOS PARA SU REUSO EN EL
MEJORAMIENTO DE SUELOS ...................................................................................................... 419

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APLICACIÓN ESPECIALIZADA EN EL CUIDADO DE ÁRBOLES FRUTALES CRECE CONMIGO

......................................................................................................................................................... 431
BIOFUNCIONALIZACIÓN DE NANOPARTÍCULAS DE ORO PARA SU APLICACIÓN EN
BIODETECCIÓN ............................................................................................................................. 440
NUTRICIÓN NITROGENADA EN LA CONCENTRACIÓN DE FLAVONOIDES TOTALES EN HOJAS
E INFLORESCENCIAS DE CEMPASÚCHIL .................................................................................. 447
CONCENTRACIÓN DE AZÚCARES TOTALES CEMPASÚCHIL (Tagetes erecta) VAR. INCA EN
RESPUESTA A DIFERENTES PORCENTAJES DE SOMBREADO ............................................. 452
PROPIEDADES MECÁNICAS Y DEGRADACIÓN QUIMICA DE PELICULAS ELABORADAS CON
ALMIDÓN DE S. edule Y POLIVINIL ALCOHOL ............................................................................ 463
FERTILIZACIÓN Y DESARROLLO IN VITRO DE EMBRIONES DE OVINO OBTENIDOS POR OPU
Y TRANSPORTADOS DURANTE 7 HORAS. ................................................................................ 470
ACTIVIDAD ANTIFUNGICA DE EXTRACTOS ETANOLICOS Y ACEITES ESENCIALES EN
HONGOS PATOGENOS. ................................................................................................................ 479
EVALUACION DE EXTRACTO DE OREGANO EN CULTIVO DE FRIJOL PINTO SALTILLO
CONTRA TIZON DE HALO ............................................................................................................. 487
INDICE DE AUTORES .................................................................................................................... 493

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GRANA COCHINILLA: COLOR Y SU RELACIÓN ENTRE EL MANEJO POSCOSECHA Y

PORCENTAJE DE ÁCIDO CARMÍNICO
Gabriela Arroyo Figueroa, Tarsicio Medina Saavedra, Ángel Alexis Cabrera Álvarez y Carlos
Hernán Herrera Méndez

Universidad de Guanajuato.
gabiaf@[Link].

RESUMEN
El método de sacrifico usado en el manejo poscosecha del insecto grana cochinilla (Dactylopius
coccus Costa) podría afectar las características de este, como son su color y el porcentaje de ácido
carmínico. La calidad de la grana cochinilla se mide tomando en cuenta diversos elementos de entre
ellos, el tamaño, humedad, color, porcentaje de ácido carmínico, etc. Por lo que el objetivo de este
trabajo fue analizar el color del insecto seco entero y molido en relación con las técnicas de sacrificio
dentro del manejo poscosecha y el porcentaje de ácido carmínico. La metodología consistió en llevar
a cabo cuatro métodos de sacrifico (cernido, asfixia, agua caliente y congelación), llevándolo
posteriormente a un secador solar. Esto dentro de un invernadero de producción intensiva del insecto
en Nopaltepec, México, durante el verano del 2019. Se tomaron muestras del insecto para cada
técnica de sacrificio después del secado, se determinó el porcentaje de ácido carmínico, con el
método espectrofotométrico. Se midió el color del insecto seco entero y molido, mediante un
colorímetro marca Minolta CR 400 en la escala CIELab*. Como resultado se obtuvo que existen
diferencias significativas en el porcentaje de ácido carmínico con respecto a la técnica de sacrificio
(P 0.05), b e d e a ce a e de c d ca c e e d de c ge ac . Y
otro lado cada método de sacrificio arrojo un color diferente para la grana seca entera y molida.
Observando que entre mayor es el porcentaje de ácido carmínico el color de la grana seca entera es
más obscuro y el de la molida es más rojizo. Por lo que se concluyó que existe una relación entre el
color de la grana cochinilla seca y molida con el método de sacrificio y el Porcentaje de ácido
carmínico.

INTRODUCCIÓN
Color en la grana cochinilla: Se cree que la calidad del insecto depende del color y a su vez al precio
de ésta, va relacionada con la calidad, por lo que es importante la medición del color, generalmente
solo se valora mediante la vista (parte de pruebas organolépticas). Sin embargo, se requiere realizar
una medición más precisa que de como resultado un valor determinado, ya que este pudiera ser un
método para determinar la calidad del insecto sin necesidad de analizar el contenido de ácido
carmínico. Actualmente los compradores y productores de la grana cochinilla se basan en el
porcentaje de ácido carmínico que contienen el insecto para determinar la calidad de éste (Marrone.
2015).
Producción de la grana cochinilla. Por otro lado, se considera que el proceso de producción del
insecto tiene influencia en la calidad del producto final (Casilla, 2012). Algunos autores consideran
que tiene mucho que ver desde el hospedero para infestación (variedad, características de la penca,
edad de la misma, etc); el tipo de pie de cría para la infestación; los métodos o técnicas de
infestación; los diferentes tipos de producción del insecto, por ejemplo como lo es el uso de
nopalotecas con pencas cortadas y colgadas; y las condiciones en el desarrollo del insecto tales
como factores bióticos y abióticos, y finalmente la cosecha y el manejo poscosecha (como se
recolecta, los métodos de sacrificio y los métodos de secado). Sin embargo, son pocos los trabajos
referidos a estos temas, donde se pueda observar si existe o no influencia de cada uno de los puntos
anteriores sobre la calidad y características de la grana cochinilla.
Por lo que el objetivo de este trabajo fue analizar el color del insecto seco entero y molido en relación
con las técnicas de sacrificio dentro del manejo poscosecha y el porcentaje de ácido carmínico.

TEORÍA
Se considera importante hacer una medición técnica del color, mediante un colorímetro y a su vez
analizar a que se debe el cambio de coloraciones y por lo tanto el cambio de calidad de la grana

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cochinilla, esto para tener un mejor manejo de la producción que lleve a la obtención de un producto
de calidad. en la Figura 1, se muestra una fotografía de la grana entera seca, para tres diferentes
calidades (Baja, mediana y alta), con sus relativos porcentajes de ácido carmínico y en la Figura 2,
una fotografía de la grana molida, de igual manera para las tres diferentes calidades (Baja, mediana
y alta), con sus relativos porcentajes de ácido carmínico (Molero y Herrera, 2013). A simple vista se
puede observar que el insecto seco de calidad más baja (18-20% de ácido carmínico), es más rojiza,
y conforme va aumentado la calidad se va haciendo más grisácea como es el caso de la calidad
mediana (20-21% de ácido carmínico). Finalmente, para una calidad más alta el color se la grana
seca es más plateada obscura a simple vista (21-23% de ácido carmínico) (Molero y Herrera, 2013).
Desde nuestros antepasados se consideraba que la grana entera seca entre más color plateado
tenia, era de una mejor calidad, es decir un mayor porcentaje de ácido carmínico (Dahlgren, 1990).
Para la grana molida en la figura 2, se observa que el color rojizo va aumentando conforme aumenta
la calidad de la grana cochinilla. Sin embargo, generalmente solo se realiza la valoración del color
por medio visual, por lo que se precisa utilizar un aparato que pueda dar un valor determinado, esto
quizás podría apoyar para medir la calidad de la grana cochinilla entera o molida sin necesidad de
determinar el porcentaje de ácido carmínico.

Figura no. 1. Se muestra la grana cochinilla entera con sus tres calidades con su respectivo
porcentaje de ácido carmínico (Molero y Herrera, 2013).

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Figura no.2. Se muestra la grana cochinilla molida con las tres calidades con su respectivo
porcentaje de ácido carmínico (Molero y Herrera, 2013).

PARTE EXPERIMENTAL
La metodología consistió en medir el color de cada una de las muestras obtenidas después del
manejo poscosecha con los cuatro métodos de sacrifico (cernido, asfixia, agua caliente y
congelación), llevándolo posteriormente a un secador solar. Esto dentro de un invernadero de
producción intensiva del insecto en Nopaltepec, México, durante el verano del 2019. Se tomaron
muestras del insecto por triplicado, para cada técnica de sacrificio después del secado, se determinó
el porcentaje de ácido carmínico también por triplicado, con el método espectrofotométrico (Marmión,
1984). Se midió el color del insecto seco entero y molido, con el promedio de tres lecturas, mediante
un colorímetro marca Minolta CR 400 en la escala CIELab*. Es un sistema coordenado cartesiano
definido por tres coordenadas colorimétricas L*, a* y b*, de magnitudes adimensionales (Michael et
al., 2003; Shanker y Vankar, 2007).

RESULTADOS
En la tabla no. 1, se observa el color obtenido en la grana cochinilla entera para los diferentes
métodos de sacrifico. Dado que la coordenada L* nos muestra el nivel de claridad o luminosidad del
color en la grana cochinilla entera, en un rango de 0-100, se puede decir que mientras más próxima
a cero la coordenada L*, más oscuro es el tono del color del insecto. En cuanto a la coordenada a*,
muestra la tendencia del color al rojo siendo números mayores a cero o hacia el verde siendo
números menores a cero. Por tanto, mientras más positivo sea la coordenada en a* el color de la
grana cochinilla estará más cercano al color rojo (Shanker y Vankar, 2007; Michael et al., 2003).
Como la coordenada L* representa la luminosidad, si el color es más claro u obscuro. Se observa el
valor más obscuro para el método de Congelación (L*=55.07). con una coloración menos rojiza
(a*=0.54) y un color menos azul (b*=0.34). Lo que sugiere una coloración más plateada. Esto a
comparación de los otros métodos de sacrificio, para el caso de la grana cochinilla entera. Por otro
lado, al observar la tabla no. 3, se pude ver que el método de sacrificio de congelación presento el
mayor valor del porcentaje de ácido carmínico (23.5±0.36%), lo que sugiere que efectivamente como

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planteaban nuestros antepasados de que entre más plateada es la grana cochinilla entera el
porcentaje de ácido carmínico es mayor (Dahlgren, 1990).

Tabla no.1. Coordenadas del color de la grana cochinilla entera

Grana Entera
Secador Solar
Métodos de Sacrificio L* a* b*
Asfixia 52.72 3.05 -0.58
Congelación 55.07 0.54 0.32
Cernidor 48.32 0.82 0.34
Agua Caliente 41.01 2.16 0.59

En la tabla no.2, se observa las coordenadas de color obtenidas para la grana cochinilla molida.
Recordando que la coordenada a*, entre más alta sea tiene una tendencia hacia el color rojo, por lo
que se observa que los métodos de congelación y cernido presentan los valores más altos en la
coordenada a*, es decir una coloración más rojiza. Es decir, para la grana cochinilla molida, entre
más rojo es el color la cantidad de ácido carmínico es mayor (Tabla 3). Por lo que la calidad de la
grana cochinilla puede ser evaluado por medio de un colorímetro, solo que es preciso determinar si
se analiza la grana cochinilla entera o molida, ya que los resultados del color son diferentes.

Tabla no.2. Coordenadas de color para la grana cochinilla molida.

Grana Molida
Secador Solar
Métodos de Sacrificio L* a* b*
Asfixia 6.19 19.99 5.84
Congelación 7.79 21.68 7.6
Cernido 5.72 22.05 6.53
Agua Caliente 4.81 12.95 3.26

En la tabla no. 3, se muestra el porcentaje de ácido carmínico obtenido para cada una de las
muestras con los respectivos métodos de sacrificio y su desviación estándar. Se puede observar que
el valor más alto lo presenta el método de congelación. Por lo tanto, se confirma que tiene que ver
el manejo poscosecha con la calidad del insecto grana cochinilla, tal como es afirmado por algunos
productores (Casilla, 2012).

Tabla no.3. Valores obtenidos del análisis del porcentaje de ácido carmínico para cada muestra de
cada método de sacrificio.
Método de Sacrificio % de ácido Carmínico
Cernidor 21.8±0.18
Asfixia 21.2±0.74
Agua Caliente 21.0±0.12
Congelación 23.5±0.36

CONCLUSIONES
De acuerdo con los resultados obtenidos se considera importante para la grana cochinilla determinar
el color, siendo fundamental ya que se pudo observar que existe una relación de este con el
porcentaje de ácido carmínico. Por otro lado, se observó que también tiene relevancia el proceso de
producción en este caso el manejo poscosecha, aunque se tendrían que realizar más pruebas para

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las diferentes etapas del proceso para determinar cuál de las etapas del proceso tiene más
relevancia.

BIBLIOGRAFÍA
1. Casilla García Martín Eloy. 2012. Asistencia técnica dirigida en manejo post cosecha de
cochinilla. Ed. UNALM y Agrobanco servicios financieros para el Perú rural. Perú. Pp. 26
29.
2. Dahlgren B. 1990. La grana cochinilla. Editado por Instituto de Investigaciones
Antropológicas de la Universidad Nacional Autónoma de México. Pp. 341.
3. Manrrone Luciana. 2015. Tintes Naturales. Técnicas ancestrales en un mundo moderno. Ed.
Dunken. Argentina. Pp. 89 90.
4. Marmion M. 1985. Handbook of U.S. colorants for foods, drugs, and cosmetic. Wiley
interscience publication. Pp. 443.
5. Michael M. N., Tera F. M., Aboelanwar S. A. 2003. Colour measurements and colourant
estimation of natural red dyes on natural fabrics using diferentes mordants. Focus on natural
dyes. Colourage. Colour Publications (P) Ltd, Pp. 31-42.
6. Shanker R., Vankar P. S. 2007. Dyeing cotton, wool and silk with Hibiscus mutabilis
(Gulzaba). Dyes and Pigments; 74: 464-469.

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EFECTO DE LA APLICACIÓN DE LOMBRICOMPOSTA EN LA CALIDAD DEL CULTIVO DE

RÁBANO (RAPHANUS SATIVUS L.)
Jimena Esther Alba Jiménez1*, Idalia Berenice Galán Gal n2, Asalia Yucaidy Lima Silva3, Armando
J. Martínez Chacón4, Miriam Rodriguez Olivarez2, Irma Patricia Polanco Medina3, José Luis Chávez
Servia5 y Elia Nora Aquino Bolaños6

1CONACyT-Universidad Veracruzana, 2Instituto Tecnológico Superior de Xalapa, 3Universidad

Veracruzana, 4Instituto de Neuroetología, Universidad Veracruzana, 5CIIDIR-Oaxaca, Instituto
Politécnico Nacional, 6Centro de investigación y desarrollo de alimentos, Universidad Veracruzana
*jimena_tete@[Link]

RESUMEN
La agricultura es un sistema de manejo basado en el uso de insumos, maquinaria y energía fósil.
Pero en el último siglo se ha modificado debido al crecimiento de la población y la demanda implícita
que implica. Por ello, se han introducido tecnologías para aumentar el uso de los recursos naturales
y aumentar la producción, utilizando fertilizantes químicos, los cuales se acumulan en el suelo, agua
y atmósfera a pesar de su alto grado de toxicidad. En consecuencia, los suelos son más compactos,
las raíces de las plantas son superficiales y hay menor desarrollo y crecimiento de biomasa. Una
alternativa para evitar estos efectos es a partir de utilizar fertilizantes orgánicos como la
lombricomposta para aumentar la eficiencia productiva y así aprovechar los residuos orgánicos. Por
lo que el objetivo de este estudio fue evaluar el efecto de la aplicación de lombricomposta como
sustrato orgánico en el cultivo de rábano (Raphanus sativus L.). Se sembraron semillas de rábano
en un substrato conformado por 50% suelo y 50% de lombricomposta y como control las plantas
crecieron en suelo. Se evaluó el rendimiento y las características morfológicas, parámetros
fisicoquímicos, antioxidantes, actividad antioxidante, contenido de proteína, ácido ascórbico y
determinación de la actividad enzimática de peroxidasa (POD). Uno de los resultados más relevantes
fue el mayor rendimiento, en el tratamiento con lombricomposta. Además, los rábanos cosechados
en el tratamiento con lombricomposta tuvieron mejores características de crecimiento en cuanto a la
altura de la planta, número de hojas (8.6), diámetro del bulbo y el valor promedio de biomasa. Sin
embargo, no hubo diferencias en los parámetros de color: luminosidad (L*), cromaticidad (C*) y
ángulo de matiz (hº); pH, °Brix, SST, porcentaje de humedad y sólidos totales entre tratamientos en
los rábanos procedentes de los dos grupos de plantas. El contenido de compuestos antioxidantes si
varió, ya que los rábanos de las plantas con lombricomposta en contraste al grupo control fue mayor
en contenido de polifenoles (2.19 y 0.28 mg EAG g-1 tf), flavonoides (2.19 y 0.28 mg EAG g-1 tf), en
cáscara y bulbo respectivamente, y antocianinas (2.46 mg Eq. Cianidina-3-Glucósido g-1 tf).
F a e e, a ca ac dad a da e de e ada e c ca a b b (6.82 1.12 E .T
g-1 f), a ac dad a da e (16.2104 2.7215 E . T g -1 tf), contenido de proteína
(0.0034g Eq. Albúmina g-1 tf) y actividad enzimática de peroxidasa (60.99 UA POD g-1 proteína min-
1), fueron mayor en promedio en las plantas control, pero el contenido de ácido ascórbico (0.88 mg

Eq. Ácido ascórbico g-1) fue mayor en el tratamiento de lombricomposta. En conclusión, el contraste
en la concentración de compuestos fenólicos, capacidad y actividad antioxidante en plantas sin
tratamiento de lombricomposta (control) podría atribuirse al estrés causado por carencia de humedad
y nutrientes edáficos. Por lo tanto, el uso de lombricomposta es una alternativa para mejorar el
crecimiento, desarrollo, calidad y parámetros físico-químicos en los frutos de rábano.

INTRODUCCIÓN
La agricultura es considerada como una de las actividades económicas, sociales y ambientales
esenciales para el ser humano; provee de bienes naturales en forma de alimento, o de materias
primas para otras industrias; además, forma parte del paisaje y aporta ventajas medioambientales
en la conservación del suelo, preservando la biodiversidad y procurando una gestión sostenible de
recursos naturales. Asimismo, supone unas de las actividades esenciales para el desarrollo
económico y social de numerosas zonas rurales (OCDE, 2019).
Con el creciente aumento de la población, la agricultura se ha visto afectada drásticamente por la
alta demanda de alimentos para atender las necesidades humanas. Debido a ello se han buscado

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alternativas para incrementar la producción reduciendo tiempos de cosecha sin afectar la calidad de
los alimentos, además de cuidar los suelos (Alonso, 2004).
La agricultura orgánica surge como una solución para proteger el medio ambiente y las diferentes
especies de plantas y animales de los peligros de la agricultura convencional o moderna. Las formas
de producir hortalizas de manera intensiva sobre sustratos orgánicos, favorece la obtención de altos
rendimientos en los cultivos, que permitirá a los productores conservar los suelos, obtener ingresos
adicionales y además constituir una fuente de empleo segura (Gómez et al., 1999).
La lombricomposta es una fuente rica en nutrientes que aporta al cultivo los requerimientos
necesarios para su desarrollo y crecimiento; es una estrategia de desarrollo sustentable que se
fundamenta, no solo en un mejor manejo del suelo, sino también en un mayor valor comercial basado
en principios ecológicos (Mazariegoz, 2018).
El rábano es una hortaliza de gran importancia, debido a que está compuesta principalmente de
ácido fólico, vitamina C y antocianinas; sin embargo, es un alimento perecedero, lo cual lo hace
susceptible a plagas, enfermedades y pardeamientos, los cuales ocasionan daños en la calidad del
cultivo que afectan directamente la producción y comercialización (Patil et al., 2009).

TEORÍA
En los últimos años se ha incrementado el uso la agricultura ecológica, con el objetivo de producir
alimentos libres de contaminantes químicos, con un alto valor nutricional y organoléptico. Estos
sistemas contribuyen a la protección del medio ambiente, la reducción de los costos de producción
y permiten obtener una renta digna a los agricultores (Reglamento CEE, 1991). El abono orgánico
es un producto natural que tiene la capacidad de mejorar la fertilidad del suelo y por ende la
producción y productividad de los cultivos.
Al respecto, Alonso (2004), reporta que el uso de fertilizantes orgánicos (composta, lombricomposta
y biodigesados líquidos) mejoran el crecimiento, rendimiento y calidad de follaje del cultivo de cilantro
(Coriandum sativum, L.). Por su parte, Rizo (2011) reportó en cultivos de zanahoria, lechuga, rábano
y cilantro, que los abonos orgánicos (Lombricomposta y Bocashi) presentan mayor número de
plantas germinadas y mayor rendimiento.
Así mismo, Sol et al. (2016) reportan que la aplicación de lombricomposta a base de café y bagazo
de caña en Moringa oleifera L., mejora su crecimiento vegetativo, incrementa el contenido de clorofila
y aporta una mejor nutrición a la planta.
Es por ello, que el objetivo del presente trabajo fue evaluar el efecto de la aplicación de
lombricomposta como sustrato orgánico en la calidad del cultivo de rábano (Raphanus sativus L.).

DISEÑO EXPERIMENTAL
Se e ea e a de ba cha (Raphanus sativus L.) de la marca comercial Hortaflor
(México), las cuales se utilizaron para realizar un diseño experimental en el invernadero del Instituto
Tecnológico Superior de Xalapa Unidad Xico, ubicado en el municipio de Xico, Veracruz (latitud de
19°25'77''N, longitud 97°00'26''O, y altitud de 1600 msnm), donde se realizó la siembra y cultivó la
hortaliza. Para lo cual se prepararon dos zanjas (1 m de ancho x 1.5 m de largo x 0.40 m de altura),
colocando en una de las zanjas el tratamiento con lombricomposta, el cual consistió de 50% suelo y
50% de humus de lombriz, y en la otra zanja se colocó el tratamiento control, el cual fue 100% suelo.
A ambos sustratos se les realizó un análisis de suelo para poder tener referencia de sus
componentes, los resultados se muestran en la Tabla 1.

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Tabla 1. Análisis de suelo de los tratamientos en suelo y con lombricomposta.

Suelo Lombricomposta
pH 4.95 8.30
Materia orgánica (%) 18.5 23.0
Acidez (cmol/Kg) 0.21 0.16
K (cmol/ Kg) 0.43 38.72
P (mg/kg) 0.44 176.10
Ca (cmol/ Kg) 2.56 9.77
N (%) 0.99 1.41
C (%) 14.89 17.28
C/N 15.0 12.0

La siembra se realizó colocando las semillas a una distancia de 5 x 20 cm entre cada hilera. La
cosecha se llevó a los 38 días después de la siembra y fueron utilizados 10 rábanos por tratamiento
para la determinación de los parámetros desarrollo, humedad, pH, sólidos solubles totales (SST),
proteína, vitamina C, fenoles totales, flavonoides totales, antocianinas monoméricas, actividad
antioxidante, capacidad antioxidante y la actividad de la enzima peroxidasa (POD).

MÉTODOS
Obtención de extractos
Extracto acuoso
Para determinar los ºBrix y pH, se obtuvo un extracto de 10 g de rábano finamente picado, el cual se
homogeneizó (DAIHA-Brand HG-IS-A, Gangwan, Korean) a 50 rpm por 1 min en 10 mL de agua
destilada, fue filtrado y el filtrado fue utilizado para el análisis.

Extracto para proteína

Se pesó 1 g de rábano finamente picado con 6 mg de PVPP y se añadieron 25 mL de buffer KCL a
pH 13. La muestra fue homogeneizada (DAIHA-Brand HG-IS-A, Gangwan, Korean) y posteriormente
fue centrifugada a 4000 rpm durante 20 min a 10 ºC (Hettich Zentrifuge Universal 32R Tuttlingen,
Alemania). El sobrenadante fue utilizado para realizar el análisis.

Extracto para Vitamina C

Del bulbo del rábano sin cáscara, se obtuvo una muestra de 2 g de rábano y se añadieron 10 mL de
ácido oxálico 25 mM, se homogeneizó (DAIHA-Brand HG-IS-A, Gangwan, Korean), y filtró para su
posterior análisis.

Extracto etanólico
Para la determinación de polifenoles, flavonoides, antocianinas, capacidad y actividad antioxidante,
se realizaron dos extractos: el primer extracto fue obtenido de 2 g de bulbo de rábano sin cáscara y
el segundo extracto se obtuvo únicamente de la cáscara. Cada extracto fue homogeneizado (DAIHA-
Brand HG-IS-A, Gangwan, Korean.) a 50 rpm durante 1 min con 10 ml de metanol al 80% (v/v),
posteriormente, fueron centrifugados a 4000 rpm durante 20 min a 10 ºC (Hettich Zentrifuge
Universal 32R Tuttlingen, Alemania), se filtraron, y el sobrenadante fue analizado.

Extracto enzimático
Para el extracto enzimático se obtuvo una muestra de 1 g de rábano finamente picado con 0.1 g de
PVPP y se añadieron 20 mL de amortiguador de fosfato de sodio 50 mM (pH 7) a 4 °C, se
homogeneizó (DAIHA-Brand HG-IS-A, Gangwan, Korean.) a 50 rpm durante 1 min. Posteriormente,
se centrifug a 4000 rpm durante 20 min a 10 ºC (Hettich Zentrifuge Universal 32R Tuttlingen,
Alemania), se filtr , y el sobrenadante fue utilizado para realizar el análisis.

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Parámetros
Desarrollo
Se seleccionaron 10 rábanos de cada tratamiento y se realizó un conteo del número de hojas;
mediante un vernier digital, se tomaron medidas de altura (cm), longitud del bulbo (cm) y diámetro
del bulbo (mm), y con la ayuda de una balanza digital (Ohaus Adventurer Pro AV212) se realizó el
peso (g) por planta.

Color
Se determinó mediante un espectrofotómetro para sólidos (Konica Minolta CM-2600d, Osaka,
Japón). Los parámetros evaluados fueron L*, a*, b* C* y hº, donde L* corresponde al valor de
luminosidad en una escala del 0 al 100 que corresponde a negro y blanco, respectivamente. A su
vez, a* y b* son coordenadas cromáticas, valores de a* negativo a positivo indica verde a rojo; b*
negativo a positivo indica azul al amarillo. Mientras que C* indica la cromaticidad, es decir, la pureza
del color y hº o ángulo de matiz se refiere al tono.

Humedad y pH
El contenido de humedad se determinó mediante el uso de una termobalanza (VELAB VE-50-5
Illinois, USA) tomando 1 g de tejido de la muestra previamente cortada a una temperatura constante
de 145 ºC. El pH de los extractos del bulbo de los rábanos cosechados en los tratamientos fue
medido mediante un potenciómetro digital (Hanna Instruments, modelo HI 8424) como lo indica la
A.O.A.C. (1995).

Sólidos solubles totales (SST)

Se determinaron los sólidos solubles por medio de un refractómetro digital (ATAGO Palette digital
refractometer, USA) y se report como ºBrix. Las lecturas se realizaron por cuadruplicado para cada
extracto de los tratamientos.

Determinación de proteína
El contenido de proteína fue medida por el método de Bradford (Bradford, 1976) para el cual se utilizó
0.5 mL del extracto obtenido con la solución amortiguadora pH 13 y se adicionó 0.5 mL de la solución
de Bradford (azul de comassie). Se registró la absorbancia a una longitud de onda de 595 nm
(JENWAY 6305, Sttafordshire, United Kingdom). Los resultados fueron expresados con las unidades
de mg proteína g-1 bs.

Determinación de vitamina C
El contenido de vitamina C se cuantificó por el método de titulación descrito por Carvalho et al., 1990,
a partir de 2 mL de la muestra filtrada del bulbo del rábano sin cáscara y se adicionaron 9 mL de
ácido oxálico y 1 mL de HCl 1 N. Posteriormente, se tituló con sal sódica (2,6-dicloroindofenol) hasta
obtener un vire de incoloro a rosa, y se registró el volumen gastado. La cuantificación se realizó con
una curva estándar de ácido ascórbico de 0.005 a 0.02 mg mL -1. El resultado se expresó como mg
de ácido ascórbico g-1 tf.

Fenoles totales
Los compuestos fenólicos se determinaron de acuerdo al método de Singleton y Rossi (1965).
Agregando 0.4 L de e ac e a c , 1 L de ag a de ada 200 L de eac de F -
Ciocalteu, dejándolo reposar 8 min. Posteriormente, se adicionó 2 mL de Na 2CO3 al 7% (p/v) y 1.4
mL de agua destilada, se agitó en vortex y se reposó durante 1 hora. La absorbancia se midió a 750
nm en un espectrofotómetro marca JENWAY 6305, y la unidad de registro fue mg EAG g-1 tf.

Flavonoides totales
Para la determinación de flavonoides se utilizó la metodología descrita por Zhishen et al. (1999). Se
e ca 250 L de e ac de a e a c 75 L de NaNO 2 al 5% (p/v), se agitó
g a e e, e a ad e 150 L de A C 3 al 10% y se incubó durante 5 min. Posteriormente,
e ad c a 500 L de NaOH 1 M e ad c ag a de ada ha a a ca a e de 3

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mL. La absorbancia se leyó a 510 nm en un espectrofotómetro de la marca JENWAY- 6305. Para la

cuantificación se utilizó una curva estándar de (+) catequina (0.01 - 0.5 g L-1), y la unidad se
expresó en mg EC g-1 tf.

Antocianinas monoméricas
La determinación de antocianinas monoméricas en la muestra obtenida de la cáscara de rábano se
realizó por el método de pH diferencial descrito por Giusti y Wrolstad (2001). Se utilizaron soluciones
amortiguadoras de cloruro de potasio ajustado a pH 1 y acetato de sodio a pH 4.5, los cuales fueron
adicionados a 600 l de la muestra, llevándolos a un volumen final de 3 ml. La absorbancia se midi
a una longitud de onda de 510 nm como absorbancia m xima en el intervalo visible de 420-700 nm
con un blanco de metanol al 80% en un espectrofotómetro (Shimadzu UV-1800, Kyoto, Japan). El
contenido de antocianinas monom ricas se reportó como mg de Cianidina-3-O-gluc sido g-1 tf.

Actividad antioxidante
La determinación de actividad antioxidante, se realizó por el método 2,2-difenil-1-picrilhidracil o
DPPH descrito por Brand-Williams et al. (1995). A 100 L de cada extracto se adicionaron 2.9 mL
del reactivo de DPPH, se incub durante 30 minutos a temperatura ambiente. Después del tiempo
de incubación se midió la absorbancia a una longitud de onda de 750 nm. Para la cuantificación se
ea ac ae da de T (0.13 a 0.79 ET L -1), los resultados se expresaron
e E T g tf.
-1

Capacidad antioxidante
La determinación de capacidad antioxidante se realizó por el método descrito por Benzie y Strain
(1999). El reactivo de FRAP mediante la mezcla amortiguadora de acetato (0.3 M pH 3.6), con una
solución 10 mM de TPTZ a 10 mM (2, 4, 6 tripyridyl-s- triazine) en HCl 40 mM y una solución 20
mM de FeCl3-6 H2O, en una proporción [Link]. Para realizar la reacción, a 100 L de e ac e
adiconaron 3 mL del reactivo de FRAP, posteriormente se incubó a 37° C en baño maría por 30 min.
Después del tiempo de incubación se leyó en un espectrofotómetro (JENWAY 6305, Sttafordshire,
United Kingdom) a 593 nm. La cuantificación de la actividad antioxidante se realizó mediante una
curva estándar de Trolox (0.1 a 1 µmol Eq. Trolox mL-1) y la unidad de ed c f e E T
g -1 tf.

Peroxidasa (POD)
La actividad enzimática se determinó por el método descrito por Zhou et al. (2015), con algunas
modificaciones. La mezcla de reacción fue medida con 100µl de la solución de enzima cruda, 500 µl
de guayacol 50 mM, 500µl de peróxido de hidrógeno 0.1 M, 500µl de agua destilada y 1.5 mL de
amortiguador de fosfato de sodio 50 mM (pH 7.0). La mezcla fue mantenida a 25 ºC y el cambio en
la absorbancia fue medido durante 3 min a 470 nm. La actividad fue expresada como unidades de
actividad (UA) en la cual una unidad de POD fue definida como el cambio en una unidad de
absorbancia por minuto.

Análisis estadístico
Las variables de respuesta fueron analizadas utilizando Modelos Lineales Generalizados (GLM), con
un diseño bifactorial. Donde los factores analizados fueron el tratamiento con dos niveles: la
composición del sustrato (tratamiento 50% lombricomposta y 50% suelo fértil), y el grupo control
(100% suelo fértil); y el extracto con dos niveles (Cáscara y Bulbo). La medición de las variables de
respuesta fue sobre unidades experimentales independientes con 2 réplicas por tratamiento por
c ad cad ( =16). La a ab e e e af e a f ada a e a a e (C e
e Iman 1981), para cumplir con los supuestos de distribución de error normal y homogeneidad de
varianzas. Posterior al análisis, se realizó la conversión de los valores promedio e intervalos de
confianza a su escala original. Los análisis fueron procesados en el software estadístico JMP 6 (SAS
Institute Inc., Cary NC 1989-2007).

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RESULTADOS
Desarrollo
En el rendimiento del cultivo, se obtuvo un mayor número de rábanos en lombricomposta (107) en
comparación con el control (suelo) (27), presentando sólo un 33.5 % de defectos los rábanos de
lombricomposta, mientras que los rábanos del grupo control un 77.3% (Figura 1). Estos resultados
nos indican que el uso de lombricomposta ayudaría a incrementar la producción de rábano,
disminuyendo pérdidas, e incrementando su comercialización.

A B

Figura 1. Defectos de rábanos cultivados en suelo (A) y defectos de rábanos cultivados en

Lombricomposta (B).

En cuanto a la altura de la planta, no hubo diferencia entre tratamientos (Tabla 2). Khede et al. (2019)
reportaron un comportamiento diferente en rábano (Raphanus sativus L.) cv. Japanese White, donde
la altura de la planta fue mayor en los rábanos de lombricomposta en comparación con el control;
mismo comportamiento fue reportado por Kumar y Gupta (2018), en rábano (Raphanus sativus). Por
su parte, Moreno et al. (2005) reportaron en plantas de tomate un comportamiento similar a lo
observado en este estudio, ya que la altura de planta no fue afectada por la aplicación de
lombricomposta en combinación con arena.

Tabla 2. Variables del desarrollo vegetativo de rábanos cultivados en suelo y lombricomposta.

Parámetros Control Lombricomposta

Peso (g) 24.38±3.03b 51.70±3.03a
No. Hojas (Unidad) 7.2±0.33b 8.6±0.33a
Altura (cm) 24.13±0.89 a 25.94±0.89a
Diámetro (mm) 30.99±1.26 b 41.53±1.26a
Longitud (cm) 11.3±0.48a 7.43±0.48b
Valores promedio (± error estándar) con la misma letra no son
g f ca a e e d fe e e (P 0.001)

El número de hojas, diámetro del bulbo y peso de los rábanos con lombricomposta fue mayor en
comparación con el control, mientras que la longitud del bulbo fue mayor en el grupo control (Tabla
2) (Figura 2). Kovshov y Iconnicov (2017) reportaron una similar tendencia en la variedad de rábano
Raphanus sativus L. c . S f , d de e a d e e e b e e c c b h ,
con un incremento de 43.55% y 17.7% con respecto al control. Así mismo, se ha reportado en otras
variedades de rábano (Raphanus sativus L. c . G a , Ja a e e Wh e ) e e de d fe e e
tipos y proporciones de lombricomposta incrementa el diámetro y peso (Khede et al., 2019; Kov ik
et al., 2018; Kumar y Gupta, 2018). Por su parte, Gómez et al. (2008) reportan una mayor longitud
del bulbo (Rhabanus sativus L.) con un fertilizante orgánico de composta en relación con los rábanos
sin abono orgánico, lo cual difiere a lo reportado en este estudio.

A B

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Figura 2. Rábano cultivado en Lombricomposta (A) y suelo (B).

El mayor número de hojas, diámetro del bulbo y peso observado en rábanos cultivados en
lombricomposta, puede ser atribuido a la capacidad de retención de agua y nutrientes de los
fertilizantes orgánicos (Jeavons, 2002). Además, uno de los componentes más importantes en la
lombicomposta es el nitrógeno, que participa en el crecimiento y desarrollo de la planta, así como
también favorece el incremento de la producción y ayuda a mejorar la repuesta ante diferentes tipos
de estrés (Kishorekumar et al., 2020).

Color, Humedad, pH y SST

En los parámetros de color, la luminosidad (L*), cromaticidad (C*) y ángulo de matiz (hº), así como
el porcentaje de humedad y pH, no difirieron entre los tratamientos, mientras que los SST en rábanos
del grupo control fue mayor en relación con los rábanos en lombricomposta (Tabla 3). Mientras que
Khede et al. (2019) reportaron un mayor contenido de SST en rábano (Raphanus sativus L.) cv.
Japanese White con lombricomposta en comparación con el grupo control. El mayor contenido de
SST en rábano cultivado en suelo, podría ser atribuido a una acumulación de sustancias de reserva
por una disminución en el porcentaje de humedad y tamaño de los bulbos (Khede et al., 2019).

Tabla 3. Parámetros de color y fisicoquímicos de rábanos cultivados en suelo y lombricomposta.

Parámetros Control Lombricomposta

Luminosidad (L*) 38.63±0.87a 37.86±0.87a
Cromaticidad (C*) 28.97±1.36 a 29.58±1.36a
Ángulo de matiz (h°) 22.64±1.46 a 22.38±1.46a
Humedad (%) 97.75±2.20 a 97.25±2.20a
SST (ºBrix) 1.83±0.03 a 1.63±0.03a
pH 6.1±0.05a 6.24±0.05a
Valores promedio (± error estándar) con la misma letra no son
g f ca a e e d fe e e (P 0.001)

Proteína
El contenido de proteína no difirió entre los tratamientos (Figura 3A), presentando un valor promedio
de 3.39 mg Eq. Albúmina g-1 tf el grupo control y 2.99 mg Eq. Albúmina g-1 tf los rábanos en
lombricomposta. Estos valores son menores a lo reportado en Raphanus sativus L. a . P a
che a c a ed de 7.97 g-1 tf (Kapoor et al., 2014).

Ácido ascórbico
El valor promedio del contenido de ácido ascórbico fue mayor en el grupo de rábanos que crecieron
en lombricomposta (88.2486 mg Ác. Ascórbico 100 g-1 tf) respecto al grupo control (60.7541 mg Ác.
Ascórbico 100 g-1 tf) (Figura 3B). Lo cual difiere a lo reportado por Kov ik et al. (2018) en rábano
(Raphanus sativus L.) c . G a e d fe e e c b ac e de lombricomposta, puesto que el
contenido de ácido ascórbico fue mayor en el grupo control, además reportaron un valor promedio
de 10.27-16.19 mg g-1, lo cual es inferior a los reportado en este estudio. Liao et al. (2009) indicaron
que aplicaciones de dosis pequeñas de nitrógeno pueden dar como resultado un aumento en el

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contenido de vitamina C en las raíces y hojas de rábano, lo cual explicaría los resultados de este
estudio.

Fenoles totales, flavonoides totales, antocininas monoméricas y actividad antioxidante

El mayor contenido de fenoles totales, flavonoides totales, antocianinas monoméricas y actividad
antioxidante se observó en el grupo control respecto al grupo de rábanos en lombricomposta (Figura
3C, D, E, F y G, respectivamente). Al respecto Kapoor et al. (2014) reportaron en rábano Raphanus
sativus L. var. Pusa chetaki un intervalo de flavonoides totales de 10.29 a 17.61 mg 100 g -1 tf y de
antocianinas de 0.72 a 1.61 mg g-1 tf, valores menores a los obtenidos en este estudio. Además,
estos mismos autores reportaron que el incremento en el contenido de antocianinas es debido al
estrés provocado por un incremento en las concentraciones de mercurio.
El menor contenido de fenoles, flavonoides, antocianinas y actividad antioxidante, registrado en los
rábanos cultivados en lombricomposta, puede ser explicado por la menor actividad de la enzima
fenilalanina amonio liasa (PAL), polifenol oxidasa (PPO) y algunas isoformas de peroxidasa (POD);
las cuales son enzimas reguladoras clave para la biosíntesis de compuestos fenólicos de plantas y
de la transcripción de muchos genes que codifican a PAL; dichas enzimas incrementan su actividad
por efecto de condiciones ambientales adversas, como bajos niveles de nutrientes, particularmente
N y microelementos metálicos (Ruiz et al., 2003; Velickovic et al., 2014; Wada et al., 2014).

Peroxidasa (POD)
La actividad de POD fue 1.5 veces mayor en los rábanos del grupo control, respecto a los rábanos
en lombricomposta (Figura 3H). Estos resultados indican un mayor estrés en los rábanos cultivos en
suelo sin lombricomposta por una menor retención de agua y menor contenido de nutrientes, lo cual
generó un incremento en las concentraciones de peróxido de hidrógeno (H 2O2), principal sustrato de
la enzima, provocando su mayor actividad (Levine et al., 1994). Un comportamiento similar fue
observado en rábano Raphanus sativus, Ea Me e e a e , d de
incremento en los niveles de plomo generó mayor concentración de H2O2 y una mayor actividad de
la enzima POD (Biteur et al., 2011).

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Figura 3. Contenido de proteína (A), Ácido ascórbico (B), Fenoles totales (C), Flavanoides totales
(D), Antocianinas monoméricas (E), Actividad antioxidante (F), Capacidad antioxidante (G) y
actividad de enzima POD (H) en rábanos cultivados en suelo y lombricomposta.

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CONCLUSIONES
Los rábanos cultivados con lombricomposta presentaron mayor rendimiento, crecimiento y
desarrollo; así como mejores características de calidad externa como longitud, altura, peso y número
de hojas; además una menor actividad de POD. Por lo tanto, el uso de lombricomposta es una
alternativa para mejorar significativamente el crecimiento, desarrollo y calidad del cultivo de rábano.

BIBLIOGRAFÍA
1. AOAC, Off c a e h d f a a f AOAC I e a a , Ga he b g , MD. 1995.
2. A. K a , R. K. G a, The effec f e c g h a d ed a a ee f
vegetable crop radish (Raphanus sativus) , J a f Pharmacognosy and Phytochemistry,
Vol. 7, 2, 2018, pp. 589-592.
3. A. Le e, R. Te ha e , R. D , C. La b, H 2O2 from the oxidative burst orchestrates the
a h e e e d ea e e a ce e e , Ce , V . 79, 4, 1994, . 583-593.
4. D. Kapoor, A. Ra a , V. Ga a , N. Ka a d R. Bha d a , 24-Epibrassinolide Mediated
Changes in Photosynthetic pigments and Antioxidative Defence System of Radish Seedlings
de Cad a d Me c S e ,J a f S e Ph g & B che ., V . 10,
3, 2014, pp. 110-121.
5. D. Zh , L. L , Y. W , J. Fa & J. O a g, Sa c c ac d h b e a cb g f f e h-
c Ch e e che (Ca a ea a) b c e e hb g he da e ,
Food Chemistry, Vol. 171, 2015, pp. 19-25.
6. F. Be e & J.J. S a , Fe c ed c g/a da e a a : d ec ea e f a
antioxidant activity of biological fluids and modified version for simultaneous measurement of
a a da e a d a c b c ac d c ce a , Me h d e logy, Vol. 299,
1999, pp. 15-27.
7. F. P a e, F c de ee e e e cae e c , 2010.
8. G. Pa , M. C. Madh dha , B. Ra d a, K. Ragha a a , E ac , dea c h a and
c ce a fa h c a f ed ad h , Che ca E g ee g a d P ce g-Process
Intensification, Vol.48, 1, 2009, pp. 364-369.
9. G. S , O. A. Va d , A. P e , Efec de a da fe ac g ca e M ga e fe a
La . e a eg ce de Ve ac , M c ,Re a C e c a Ad a a, V . 1, 2016,
pp. 101-121.
10. H. E. R , C a ac N c a de C a C U a d D ab Og c ,
Universidad de Guadalajara, Centro Universitario de Ciencia Biológicas y Ambientales, 2011.
11. J. Jea , C B e de A e . Ec g Ac f he M d e a,W ,
CA. E.E.U.U, 2002.
12. J.M. Ruiz, R.M. R e , I. L e , L. R e , R e f Ca2+ in metabolism of phenolic
c d abacc ea e (N c a a abac L.) , P a G h Reg , V . 41, 2003,
pp. 173-177.
13. J. M. Ve c c , D. S. D e c, S. S. M c, M. N. M c, D. A. K c, The determination
of the phenolic. Composition, antioxidantive activity and heavy metals in the extracts of
Clendula officinalis L. Adv. Technol, Vol.3, 2014, pp. 46-51.
14. J. Zh he , T. Me gche g, W. J a g, The de e a ffa dc e berry
a d he ca e g g effec e de ad ca , F d Che , V . 64, 4, 1999, .
555-559.
15. K.C. Wada, K. M ch , A. K h , K. Ka e , T. M , T. Ka e , S e e ha ce he
gene expression and enzyme activity of phenylalanineammonia-lyase and the endogenous
c e f a c c ac d d ce f e g ha b , J. P a Ph , 2014, . 895-902.
16. K. Khede, A. K a a , D. Te ba e, Effec f O ga c Ma e , Fe e a d he
Combinations on Growth, Yield and Quality of Radish (Raphanus sativus L.) cv. Japanese
Wh e , I e a a J a f C e Mc b g a dA ed Sc e ce , V . 8,3, 2019,
pp. 400-405.
17. L. G e , M. G e , R. Sch e e , P d cc c e c a ac de a h a a
orgánicas en México. En: Horticultura de exportación en tiempos de Globalización (El caso

TOMO II BIOTECNOLOGÍA Y CIENCIAS AGROPECUARIAS - PÁGINA 19

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de a h a a , f a f e ) , U e dad Nac a A a de M c , CIESTAAM,

1999.
18. M. A e, C a e ag c de c c h a a de a c e ab
g c e e ce e e e a a a a , U e dad T c ca de C a , Ec ad ,
2013.
19. M. D , O ga g af a ege a , U e dad A a de E ad de H da g , Hidalgo
2012.
20. M.M. B adf d, A a d a d e e eh d f a f ca f c ga a e f
protein utilizing the principles of protein-d e b d g. A a ca B che , V . 72, 1976,
pp. 248-25.
21. M. M. G , R. E. W ad, Cha ac e ization and measurement of anthocyanins by UV‐
b e ec c ,C e c f d a a ca che , F1.2,1-F1.2.13, 2001.
22. N. A , Efecto de la aplicación de composta, lombricomposta y biodigestados líquidos
en el crecimiento, rendimiento y calidad de follaje en el cultivo de cilantro (Coriandum sativum
L.) , U e dad A a Ag a a A Na , Sa , C ah a, 2004.
23. N. B e , A. A e , O. Kha b , M. S a , O da e S e I d c by Lead in Leaves
f Rad h (Ra ha a ) Seed g , N ae Sc e a B g cae., V . 3,4, 2011, .
93-99.
24. O ga ac aa aC e ac e De a Ec c , Ag c a , 2019.
25. P. Kov ik P. alam n, S. Smole , M. Ren , I ac of vermicompost as component of
g g ed h a f a f ad h (Ra ha Sa L.) , Ag c e
(Po nohospod rstvo), Vol. 64, 3, 2018, pp. 106-115.
26. R. A. M e , P. M. Va d , L. T. Za a e, De a de ae e a de
vermic /a e a ba c d c e de e ade , Ag c. T c., V . 65, 1, 2005, . 26-
34.
27. Reg a e (CEE) 2092/91 de C e , S be a d cc ag c a ec g ca
d cac e d c ag a a e c , D a Of c a L 198, 1991.
28. R. G e , J. L a , P d cc de f (Phaseolus vulgaris L.) y rábano (Rhabanus
sativus L.) e h e b e e e c h ed de Taba c , U e dad c e c a,
Vol. 24, 1, 2008.
29. R. Kishorekumar, M. Bulle, A. Wa , a d K. Jagad G a. A O e e f I a
E e I ed N ge A a f Pa , E : N ge Me ab Pa :
Methods and Protocols, Kapuganti Jagadis Gupta, Methods in Molecular Biology, 2020, pp.
1.
30. S. Ma a eg , Lombricultura rústica como alternativa para el aprovechamiento de los
desechos agropecuarios en los Ejidos Boquillas del Refugio y La Constancia, del municipio
de Parras de la Fuente, Coahuila, Universidad Autónoma Agraria Antonio Narro, Coahuila,
2018, pp. 3-28.
31. S. V. K h D. A. Ic c , G g f g a , ad h, a d a g d
e c ade f g a e a d hea a , I da J a f Ag c a
Research, Vol. 51, 4, 2017, pp. 327-332.
32. V. S g e , J. R , C e f al phenolics with phosphomolybdle phosphotungstic
ac d eage , A e ca J a fE g a dV c e, V . 16, 1965, . 144-158.
33. W. Brand-W a , M. E. C e e , C. Be e , U e f a f ee ad ca e h d e a ae
a da ac , LWT- Food Science and Technology, Vol. 28, 1, 1995: 25-30.
34. W.J. C e , & R.L. I a , Ra a f a a a b dge be ee aa e c a d
aa e c a c , The American Statistician, Vol. 35(3), 1981, pp. 124-129.
35. Y. L a , X. R g, S. Zhe g, Q. L , M. Fa , J. Pe g, G. X e, I f e ce f ge fe e
a ca ae ad h e d, a a d ge ec e eff c e c , F .
Agric. China, Vol. 3, 2009, pp. 122-129.

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CARACTERIZACIÓN BACTERIOLÓGICA DE MUESTRAS DE SUELO CONTAMINADO CON

HTP Y EVALUACIÓN DEL CRECIMIENTO EN PRESENCIA DE CONTAMINANTES
Karina Huerta-Santos1, Eire Reynaga-Delgado1, Gilberto Velázquez-Juárez2

1Departamento de Farmacobiología, 2Departamento de Química. Centro Universitario de Ciencias

Exactas e Ingenierías, CUCEI. Universidad de Guadalajara.
[Link]@[Link]

RESUMEN
La contaminación de suelos causada por derrames de Hidrocarburos Totales de Petróleo (HTP)
representa un serio problema ambiental. Las consecuencias de la contaminación con HTP son la
afectación a la flora, fauna y los microorganismos del suelo; así como daños a los sistemas de
producción, salud, economía de las poblaciones afectadas. Para la recuperación de suelos
contaminados con HTP, la biorremediación se ha establecido como un tratamiento eficiente,
económico, sustentable. El éxito de la biorremediación depende de la caracterización de los
microorganismos del propio sitio contaminado, para posteriormente establecer las condiciones bajo
las cuales estos organismos puedan utilizar la mayor cantidad de HTP como fuente de carbono. En
este trabajo se recuperaron microorganismos de suelos contaminados con HTP proveniente la
colonia Santa Margarita de la Zona Metropolitana de Guadalajara con el objetivo de caracterizar a
aquellos capaces de degradar residuos de hidrocarburos y determinar si eventualmente esos suelos
podrían recuperarse mediante atenuación natural. Las muestras de suelo fueron recolectadas con
tubos de plástico rígido (a manera de mini-nucleador). Para la recuperación de microorganismos, las
muestras de tierra fueron sometidas a procesos de enriquecimiento, enriquecimiento selectivo,
cultivo selectivo y pruebas bioquímicas y enzimáticas. Posteriormente se realizaron cinéticas de
crecimiento en medios libres de carbono que contenían residuos de HTP, hexano y catecol, donde
se evaluó la capacidad de adaptación a ambientes contaminados y metabolitos de HTP. Se
recuperaron bacterias Gram negativas, predominantemente del género Psudomonas así como
hongos y levaduras. Se realizaron tres cinéticas de crecimiento bacteriano, una solo con las
Pseudomonas recuperadas, otra de las bacterias Gram negativas en consorcio y por último una con
todos los microorganismos recuperados, incluyendo las Pseudomonas. En cada cinética y por
separado, la fuente de carbono consistió en residuos de HTP. Se realizaron además dos pruebas de
viabilidad de crecimiento en hexano y catecol. Pseudomonas fue el microorganismo que presentó el
mejor crecimiento y se mantuvo con la mayor carga microbiológica en todas las etapas de las
cinéticas con HTP, además de mantenerse viable cuando estuvo en contacto con hexano y catecol.
Las otras cepas recuperadas mostraron una buena adaptación a medios con HTP como fuente de
carbono, además de degradar otros hidrocarburos como el catecol y hexano. Estos resultados son
comparables a otros estudios realizados en espacios geográficos y climatológicos diferentes al
seleccionado. Es necesario profundizar el estudio del metabolismo de las cepas en diferentes
condiciones y concentraciones de HTP, ya sea como residuos, o como fracciones simples, para
conocer más la capacidad biodegradadora de los entornos naturales que han sido afectados por la
presión antropogénica.

INTRODUCCIÓN
De acuerdo con estadísticas de PEMEX[1], durante el año 2017 se registraron 223 eventos
relacionados a contaminación por hidrocarburos totales de petróleo (HTP) en el ambiente, de los
cuales 47 se trataron de fugas y 176 derrames, siendo de estos últimos 163 en suelos y 13 en agua
accidentales en el ambiente ocasionados por HTP (Figura 1) sin tomar en cuenta los derrames de
tomas clandestinas. Por otro lado, la PROFEPA (Procuraduría Federal de Protección al Ambiente)
durante el 2017 recibió 665 notificaciones de emergencias ambientales de las cuales 259 fueron
provocadas por derrames en los suelos de hidrocarburos y otras sustancias químicas relacionadas
en suelos.[2]

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Figura 1. Estadísticas porcentuales de fugas Imagen tomada de[1]

Las características fisicoquímicas en los hidrocarburos nos ayudan a conocer cómo afectan dichos
componentes en el ambiente y de esta forma, decidir cómo gestionar algún método para remediar el
medio contaminado. Para fines ambientales, la propiedad más importante a considerar es la
solubilidad en agua. Una alta solubilidad promueve una mayor movilidad, y es menor la probabilidad
de ser acumulativo, bioacumulativo, volátil y persistente.[3]
La biorremediación se define como un proceso que se basa en mecanismos biológicos para reducir
la concentración de contaminantes a un estado inocuo. [4] El recurso indispensable en la
biorremediación son los microorganismos ya que tienen la facultad de cambiar la naturaleza de los
contaminantes ya que poseen enzimas con la capacidad de utilizar ese tipo de compuestos como
fuente de energía.[5] La Bioaumentación, es una técnica de biorremediación de suelos contaminados
con HTP que consiste en la introducción de microorganismos específicos cuando los
microorganismos nativos no cuentan con la capacidad suficiente para biodegradar los compuestos.
Estos deben de tener una capacidad superior de biodegradar los contaminantes además de ser
fáciles de cultivar, tengan un crecimiento rápido, tolerantes a concentraciones elevadas de
contaminantes y tener una capacidad amplia de sobrevivir en diferentes condiciones ambientales. [4]
Las fracciones de HTP se biodegradan dependiendo de la afinidad de las bacterias hacia los
compuestos disponibles, así como de la estructura y del peso molecular de los componentes. El
orden de degradación de las diferentes fracciones de HTP sería entonces: Alcanos lineales >
Alcanos ramificados >Aromáticos de bajo peso molecular >Ciclo alcanos. [6]
Por lo expuesto anteriormente, es importante identificar y caracterizar la flora presente en sitios
contaminados con HTP, dado que los tipos de microorganismos encontrados allí dependerán de las
condiciones ambientales y geográficas; debido a esto, son capaces de crecer en este tipo de
ambientes lo que los asocia a poseer una capacidad biorremediadora. A partir de lo anterior, esta
flora puede ser caracterizada y utilizada para pruebas de degradación in vitro y posteriormente en
ensayos más elaborados in situ, para recuperar suelos contaminados con HTP mediante
mecanismos de bioaumentación.
Este trabajo tuvo como propósito identificar y caracterizar la flora bacteriana proveniente de suelos
contaminados por HTP proveniente la colonia Santa Margarita de la Zona Metropolitana de
Guadalajara con el objetivo de encontrar microorganismos con la capacidad de degradar
hidrocarburos que puedan contribuir a la biorremediación de suelos contaminados.

TEORÍA
Se entiende por hidrocarburo a un grupo amplio de compuestos químicos que provienen del petróleo
crudo, consisten en una mezcla de productos químicos que en su mayor parte contiene hidrogeno y
carbono. [7] Cuando los HTP son liberados al medio ambiente pueden causar diversos estragos en
el ecosistema, por ejemplo algunas fracciones de HTP flotan en el agua desarrollando una película

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superficial delgada y la parte pesada del HTP se sedimentara en el fondo del agua afectando al
ecosistema que se encuentre en dicha agua como peces y los organismos que se encuentren en el
fondo, sin embargo, algunos de esos organismos con bacterias y hongos tienen la capacidad de
descomponer algunas fracciones de HTP. [8]
En el ser humano, la exposición continua o frecuente a los HTP puede traer problemas en la salud
del individuo expuesto; en la cual influyen muchos factores como dosis, duración y la forma de
contacto con el HTP. No se tiene la certeza los efectos de HTP en general, si no de fracciones
pequeñas de HTP como el benceno, tolueno y xileno. Estas fracciones pueden el sistema nervioso
central (SNC).[8]
La diversidad bacteriana que se encuentra en suelos contaminados por HTP son en su mayoría de
tipo Gram negativas debido a que son más resistentes que las Gram positivas.[9] Siendo
Pseudomonas, Acinetobacter y Serratia algunos de los géneros de mayor importancia en la
degradación de hidrocarburos. Existen diversos microorganismos dentro del hábitat natural del
medio que poseen la capacidad de biodegradar compuestos como el HTP de manera natural; para
que esta se puede llevar a cabo es necesario que existan las condiciones ambientales adecuadas
en el medio como temperatura, fuentes de carbono, concentración del contaminante, entre otros. En
el medio ambiente, los HTP son biodegradados por bacterias, levaduras y hongos o un consorcio de
los mismos.[10]
Las bacterias que tienen la capacidad de adaptarse y crecer en medios sólidos y líquidos con
petróleo son consideradas como posibles oxidadores de hidrocarburos. De acuerdo a un estudio
realizado en el 2002 por María Rivera se cree que poseen en su membrana un grupo específico de
oxigenasa que este asociado con la producción de agentes de superficie; estos son compuestos que
tienen una fracción hidrofílica y una hidrofóbica reduciendo la tensión superficial del medio acuoso
aumentando así la solubilidad,[11] de los HTP y por consecuencia la disponibilidad para la bacteria. [12]
Particularmente, el género Pseudomonas consume todo tipo de sustratos siendo capaz de degradar
muchos tipos de compuestos orgánicos como azúcares y aminoácidos, alcoholes, hidrocarburos
(alcanos de cadena ramificada), ácidos húmicos e inclusive algunos plaguicidas sintéticos;[13]
produce biosurfactantes que se utilizan para la limpieza de suelos contaminados con HTP o metales
pesados y elabora enzimas. Las Pseudomonas son ecológicamente significativas en el suelo y agua
y son los responsables de la degradación de muchos compuestos solubles que se derivan de la
ruptura monomérica de materiales de plantas y animales en habitad oxigenados. [13]
La biorremediación de suelos contaminados con HTP, se basa en que la cadena respiratoria o
transportadora de electrones de las células de los microorganismos, producirá una serie de
reacciones óxido-reducción con la finalidad de obtener energía. La cadena comienza con un sustrato
orgánico (en este caso HTP) que actúa como dador de electrones de modo que la actividad
metabólica de la célula consume dicho compuesto.[14] Los aceptores más utilizados con el oxígeno,
nitratos, hierro (III), sulfatos y dióxido de Carbono. Si el oxígeno es utilizado como aceptor de
electrones la respiración ocurrirá en condiciones aerobias y todos los procesos de biodegradación
serán de tipo aerobio.[14] Si utiliza Sulfatos o Dióxido de Carbono se produce en condiciones
reductoras o anaerobias, y los procesos de biodegradación serán de tipo anaerobio.
La identificación y caracterización bacteriana con capacidad degradadora de HTP nos sirve para
poder establecer las condiciones bajo las cuales se puede someter el tratamiento de biorremediación
para poder obtener el mayor rendimiento posible.[15]

PARTE EXPERIMENTAL
La hipótesis bajo la que se trabajo fue la siguiente: La recuperación de microorganismos bacterianos
y fúngicos de suelos contaminados con HTP provenientes de Santa Margarita tienen la capacidad
de crecer y adaptarse a medios adicionados con restos de diésel como fuente de Carbono.
Se recolectaron muestras de suelo de la calle Santa Mercedes, entre Avenida de Jesús y Avenida
Acueducto, Santa Margarita, Zapopan, Jalisco, México. La recolección de muestra de suelo se
realizó en lugares donde había restos de hidrocarburos en la superficie del empedrado y se
encontrarán libres de humedad. Dichos sitios de muestreo fueron identificados desde la A hasta la
G y un blanco de campo (Figura 2).

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Figura 2. Sitios de recolección de la muestra. Imagen tomada desde Google Maps

Para la recolección de las muestras se emplearon tubos de plástico rígido (a manera de mini-
nucleador), dicho tubo se enterró aproximadamente 5 cm de profundidad en cada uno de los sitios
seleccionados para la recolección de la muestra. La tierra extraída se depositó en su respectiva bolsa
de cierre rotulada. Este procedimiento se realizó por triplicado en cada sitio depositándose cada uno
en una bolsa diferente (denominadas A, B y C). Cada muestra fue procesada por triplicado.

Enriquecimiento microbiano en las muestras de suelo

Por cada 10 g de muestra de suelo de cada bolsa se añadieron 90 mL de Agua Peptonada (AP) y
se homogenizaron. Se filtró la solución obtenida y se transfirieron 10 mL a un matraz Erlenmeyer de
250 mL de capacidad conteniendo 200 mL de Caldo Soya Tripticaseína (CST) y otros 10 de la
solución se transfirieron a otro matraz con 200 mL de Caldo Lactosado (CL). A partir del matraz con
CST se realizaron diluciones seriadas 1:10 hasta llegar a una concentración cercana al patrón 0.5
de la escala de McFarland por turbidimetría. Se tomaron 0.1 mL de las últimas dos diluciones (5 y 6)
para la inoculación en una caja Petri con medio Mueller-Hinton (AMH).
La técnica de siembra empleada fue Extensión en Superficie (ES) utilizando un asa de Digralsky
metálica. Las cajas Petri inoculadas se incubaron 24 h a 30ºC para realizar posteriormente el conteo
de las células viables. Se inocularon además alícuotas de todos los matraces procesados en medios
selectivos (Agar MacConkey, AMC; Agar Cetrimida, AC y Agar Dextrosa Papa, ADP), con la finalidad
de identificarla microbiota genérica (Figura 3).
Las condiciones de incubación fueron de 24h con una temperatura de 30ºC para los medios AMC y
AC y de 4 a 5 días a 25ºC el medio ADP. Una vez que concluyó el tiempo de incubación se realizó
una descripción morfológica macroscópica de las colonias aisladas y tinción de Gram o de cinta
adhesiva con azul de metileno para la identificación microscópica. Se continuó con pruebas
enzimáticas de diferenciación (Oxidasa).

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Figura 3. Diagrama general de recolección y tratamiento de muestra. Elaboración propia

Cinéticas de crecimiento microbiano

Se realizaron cinéticas de crecimiento microbiano utilizando las cepas aisladas con la finalidad de
verificar si era posible el crecimiento de estos microorganismos en un medio de cultivo teniendo
únicamente residuos de TPH como fuente de carbono. En total, se realizaron cuatro cinéticas: una
de prueba con glucosa con una concentración del 2 % W/V, y tres con residuos de TPH al 2 % V/V
(provenientes de un taller mecánico) en medio mínimo (MM, Robledo-Ortiz et al., 2010). Las cinéticas
con residuos de TPH se realizaron de manera individual con: consorcio de bacterias Gram negativas,
consorcio de Pseudomonas sp. y, por último; un consorcio de Gram negativas, Pseudomonas sp. y
h g e ec a e e (de ad ).
Las cepas fueron previamente pre-adaptadas con la finalidad de acortar la fase de adaptación. Las
lecturas de la DO de cada matraz cultivado se realizaron en un espectrofotómetro Jenway (Geneva)
a una longitud de onda de 600 nm, usando como blanco agua destilada (Figura 4). Para obtener la
concentración en UFC/mL a partir de la densidad óptica utilizó el estándar de turbidez 0.5 de la
escala de MacFarland a 600 nm obteniéndose 0.72 como absorbancia, lo cual equivale a 1.5 x 10 8
UFC/mL; de ahí se hicieron las relaciones a las concentraciones obtenidas en cada uno de los
tiempos de las cinéticas de crecimiento. Las lecturas de absorbancia obtenidas se utilizaron para la
elaboración de gráficas de DO contra tiempo (en horas). Esta técnica se realizó para la cuantificación
indirecta del crecimiento microbiano.

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Figura 4. Diagrama Cinética del crecimiento bacteriano. Elaboración propia

Prueba rápida de crecimiento en catecol y hexano

Se llevaron a cabo pruebas de viabilidad y cultivabilidad en catecol y hexano de las bacterias Gram
Nega a e MM ag ega d c f e e de ca b ca ec he a . E T b Fa c c
capacidad de 3 mL se agregaron 2 mL de MM y después se procedió a añadir diferentes
concentraciones de Catecol y Hexano a cada tubo de acuerdo con la Tabla 1. Se tomó a partir de
una UFC aislada de cada uno de los cultivos refrescados del grupo de bacterias Gram negativas y
se inocularon en los tubos. Esta prueba se realizó de manera individual para cada cepa. Los tubos
Falcon inoculados se colocaron en un Shaker a 100 rpm y 30 °C durante 72 h aproximadamente o
hasta observar turbidez del cultivo en el tubo. Para corroborar que los microorganismos tuvieron la
capacidad de crecer con esa fuente de C se realizó un cultivo, tomando una alícuota y depositándola
en 3 mL de CST, posteriormente incubado de 24 h a 30 °C. Una vez transcurrida la incubación se
observaron los tubos para ver si presentaban crecimiento (turbidez) indicando que las cepas eran
viables.

Tabla 1. Concentración de solventes utilizada para prueba rápida de crecimiento en catecol y

hexano
Concentración Volumen Concentración
Solvente
(mg/mL) a adid ( L) final (mg/mL)
Hexano 1 65.5 500 16.375
Hexano 2 6.55 10 0.3275
Catecol 1 100 5 0.25
Catecol 2 10 5 0.025
Concentraciones tomadas de experimentos de Ayala (2019).
Tabla, elaboración propia

Las concentraciones de hexano y catecol utilizadas en esta investigación fueron las propuestas por
Ayala, 2019.[16] Estas concentraciones se basaron en el mínimo metabolizable reportado por otras
bibliografías.

RESULTADOS
Recuperación, aislamiento e identificación microbiana
En los cultivos en los medios de enriquecimiento, se observó un incremento considerable en la carga
microbiana después de la incubación, cultivadas en un medio que proporcionó los nutrientes

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necesarios (Tabla 2). A tiempo cero la mayor carga microbiana fue de 1.9 x 10 7UFC/g mientras que
a las 18 h fue de 8 x 109UFC/g. De acuerdo con las características de crecimiento en los medios de
cultivo selectivos, se aislaron los microorganismos: Proteus sp., E. coli, Pseudomonas sp., Serratia
sp. y P. aeruginosa. Fue aislada además una cepa de Pseudomonas con un comportamiento
particular en AC. Esta cepa fue caracterizada molecularmente por Ayala (2019) como Pseudomonas
plecoglossicida. Respecto al cultivo selectivo para hongos y levaduras en ADP, se aislaron las cepas
de Rhodotorula sp., Candida sp., Cladosporium sp., y Acremonium sp.

Tabla 2. Conteo de UFC viables

T0 por muestra recolectada T18 por muestra recolectada
Bolsa Dilución 5 Dilución 6 Dilución 8 Dilución 9
9 9
A 6.5 x 106 UFC/g 1.9 x 107 UFC/g 3.3 x 10 UFC/g 5x10 UFC/g
9 9
B 5.8 x 106 UFC/g 5 x 106UFC/g 3.7 x 10 UFC/g 8 x 10 UFC/g
9 9
C 4.7 x 106 UFC/g 8 x 106 UFC/g 8 x 10 UFC/g 8 x 10 UFC/g
9 9
Promedio 5.6 x 106 UFC/g 1.06 x 107 UFC/g 2.6 x 10 UFC/g 7 x 10 UFC/g

Cinéticas de crecimiento en HTP

Las cinéticas se realizaron con la finalidad de ver si los microorganismos aislados de las muestras
de suelo eran viables cuando se cultivan con residuos de HTP. Pero comparando previamente como
crecen de forma normal cuando tienen glucosa como fuente de carbono. En la cinética con glucosa,
en el tiempo cero se observó una diferencia de dos logaritmos entre cada de las metodologías de
conteo (DO vs. UFC) y en los siguientes monitoreos se observan concentraciones entre 8 y 9
logaritmos. En la Figura 5, la línea verde que corresponde a la evaluación de la biomasa por medio
de la DO se observó un ligero descenso en la absorbancia del tiempo 0 a las 96 h, pero se mantuvo
prácticamente constante. Por otro lado, la cinética con cuenta directa de microorganismos (como
UFC) el pico de mayor crecimiento microbiano se observó a las 24 h, con mantenimiento hasta las
48 h siendo este rango de mayor actividad metabólica de los microorganismos.

10
9
8
7
Log10 (UFC/mL)

6
5
4
3
2
1
0
0 20 40 60 80 100
Tiempo: T (h)

Figura 5. Cinética prueba con glucosa al 2%. Verde: Densidad óptica. Rojo: crecimiento
bacteriano

Las cinéticas con residuos de HTP, realizada con bacterias del género Pseudomonas, fueron
expresadas en términos de Log10UFC/mL. En la Figura 6, se muestra la similitud de las tendencias
en los conteos de los microorganismos (tanto con la DO como cuenta viable), arrojando como

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resultado que las Pseudomonas rescatadas tienen potencial para crecer en un medio con residuos
de HTP siendo a las 24 h el pico máximo de crecimiento. Transcurridas las 96 h se observó un
aumento en la población indicando que las bacterias se adaptaron a las condiciones que se
desarrollaron pudiendo ser este el comienzo de la fase estacionaria.

9
8
7
Log10 (UFC/mL)

6
5
4
3
2
1
0
0 20 40 60 80 100
Tiempo: T (h)
Figura 6. Cinética de crecimiento Pseudomonas. Verde: Densidad óptica. Rojo: Crecimiento
bacteriano

En la cinética de consorcio (usando todos los microorganismos obtenidos del AMC y añadiendo a
las Pseudomonas sp.), la DO del consorcio se mantuvo hasta las 96 h con una carga de células
viables alta (DO min: 7.71; DO max: 8.0). Por otro lado, la cinética por cuenta viable muestra un
crecimiento exponencial desde las 0 hasta las 48 h, manteniéndose sin incrementos después de las
72 h (Figura 7).

9
8
7
Log10 (UFC/mL)

6
5
4
3
2
1
0
0 20 40 60 80 100
Tiempo: T (h)

Figura 7. Cinética de crecimiento de hongos y bacterias en consorcio. Verde: Densidad óptica. Rojo:
Crecimiento bacteriano

Narváez en el 2008 realizó un cultivo mixto bacteriano con cepas aisladas que se encontraron
presentes en derramamientos de petróleo; dicha cinética mostró un crecimiento exponencial entre

TOMO II BIOTECNOLOGÍA Y CIENCIAS AGROPECUARIAS - PÁGINA 28

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los días cero y cinco que perduró hasta el séptimo día y a lo cual vino un descenso en la población
celular luego hasta el día 9 el cual nuevamente incremento hasta el día 12; seguido de esto la
población mixta entró en fase de declive hasta el día 21, la concentración siempre perduró entre los
6 y 9 logaritmos de concentración.[17] Los resultados de este trabajo son muy similares a los obtenidos
por este autor. En esta investigación se utilizaron no únicamente bacterias, fueron incluidos los
hongos y levaduras aislados. Se sabe que los hongos no poseen la misma capacidad de degradar
HTP como con otros residuos; sin embargo, si llegan a poder degradar este tipo de compuestos. A
pesar de ello y debido a que se encuentran de manera natural en el medio ambiente del que fueron
extraídos pueden tener una actividad importante con el metabolismo o degradación de los residuos
que dejan las bacterias creando un ambiente de Comensalismo.

Viabilidad y cultivabilidad en catecol y hexano como fuentes de carbono

Se realizaron pruebas de viabilidad de las bacterias Gram Negativas en medio mineral (Composición
tomada de Robledo Ortíz et al., 2010[18]),agregando como fuente de Carbono catecol y hexano con
la finalidad de observar cuales de estas bacterias poseen la capacidad de mantenerse viables en
este tipo de compuesto. En la Tabla 3 se muestran las cepas que mostraron un resultado positivo al
colocarlas en hexano o catecol como única fuente de carbono. Las concentraciones usadas fueron
Hexano 16.375 mg/mL (1) y 0.3275 mg/mL (2) y de Catecol 0.25 mg/dL (1) y 0.025 mg/dL (2). De las
cepas que crecieron en catecol se repitió la prueba para confirmar su capacidad para utilizar el
catecol como fuente de carbono. A dichas cepas se le realizaron ensayos de PCR para analizar la
presencia de los genes en las diferentes cepas bacterianas, siendo de interés el gen catA (Catecol
1,2-dioxigenasa) que fue encontrado en A1, B2, G1, G5 y P4. Así como el gen xylE (Catecol 2,3-
dioxigenasa) que se encontró en B2 y el gen alkB (Alcano 1-monooxigenasa) en A1.

Tabla 3. Resultados prueba rápida de crecimiento en catecol y hexano

Bacteria Sustancia Crecimiento Bacteria Solvente Crecimiento
G1 Hexano 1 Positivo P1 Catecol 1 Positivo
G1 Hexano 2 Positivo P1 Catecol 2 Positivo
G1 Catecol 1 Positivo P3/A1 Catecol 1 Positivo
G1 Catecol 2 Positivo P3/A1 Catecol 2 Positivo
G4 Hexano 1 Positivo P4 Hexano 1 Positivo
G4 Hexano 2 Positivo P4 Hexano 2 Positivo
G4 Catecol 1 Positivo P4 Catecol 1 Positivo
G4 Catecol 2 Positivo P4 Catecol 2 Positivo
G5 Hexano 1 Positivo P5/B2 Hexano 1 Positivo
G5 Catecol 1 Positivo P5/B2 Hexano 2 Positivo
P1 Hexano 1 Positivo P5/B2 Catecol 1 Positivo
P1 Hexano 2 Positivo P5/B2 Catecol 2 Positivo

Por último; en el caso de las cepas P3 y P5 se enviaron los amplificados de 16Spara su

secuenciación al Laboratorio Nacional de Genómica para la Biodiversidad (LANGEBIO), las
secuencias de estos fragmentos se compararon contra la base de datos del NCBI (16S ribosomal
RNA sequences), con lo cual se determinó el organismo filogenéticamente más cercano. La cepa
P3, tiene un porcentaje de similitud de 96.66% con Pseudomonas plecoglossicida, mientras que P5
presenta un 93.73% de similitud con la misma especie (Ayala, 2019).

CONCLUSIONES
Las cepas recuperadas mostraron una buena adaptación a desarrollarse en un medio con HTP como
fuente de carbono, además de degradar otros hidrocarburos como el catecol y hexano. El género
Pseudomona debido a su gran capacidad para degradar gran cantidad de sustratos de diferente

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naturaleza puede jugar un papel muy importante en la biorremediación de suelos contaminados con
HTP, se puede concluir que:
La carga microbiana que se encuentra en su entorno natural después de una incubación con los
nutrientes y condiciones adecuadas se puede cultivar selectivamente y así asegurar una mayor
recuperación de microorganismos.
El aislamiento e identificación de microorganismos nos sirve para encontrar cepas con capacidad
potencialmente biorremediadora y conocer la microbiota de los suelos contaminados.
De las tres cinéticas realizadas con los microorganismos identificados presuntivamente, la de
Pseudomonas fue la que más estable y que con mayor carga microbiológica se mantuvo, resultados
comparables en similitud con otros estudios expuestos.
Aunque todas las cepas se recuperaron de un suelo contaminado con HTP no todas poseen la
capacidad de metabolizar dichos compuestos.
Es necesario profundizar el estudio del metabolismo de las cepas a diferentes condiciones y
concentraciones para conocer más su capacidad de degradación de HTP.

BIBLIOGRAFÍA
1. PEMEX, informe de sustentabilidad 2017, C dad de M c , 2017.
2. PROFEPA, Atiende PROFEPA emergencias ambientales y restauración de sitios
contaminados hasta su total remediación | Procuraduria Federal de Proteccion al Ambiente
G be g b. , 2018. [O e]. A a ab e: h :// .g b. / fe a/ e a/a e de-
profepa-emergencias-ambientales-y-restauracion-de-sitios-contaminados-hasta-su-total-
remediacion. [Accessed: 22-Oct-2018].
3. O. O e , I. I e, a d A. Ga , La e a ac de e c a ad c
h d ca b e M c , Gac. Ecòlogica ISSN 1405-2849, vol. 69, no. Saval 1995, pp. 83
92, 2003.
4. M. Megha a a d R. Na d , S a d b f e d b e ed a , Microb. Biotechnol., vol. 10,
no. 5, pp. 1244 1249, 2017.
5. National Research Council, In Situ Bioremediation: When Does it Work? Washington, D.C.:
National Academies Press, 1993.
6. N. U. Ga c a C a d M. L. Ag e Maced , B deg adac de e e bac e a :
ag ca de e d e e G f de Me c , Golf. México Contam. e impacto Ambient.
diagnóstico y tendencias, no. November, pp. 641 652, 2014.
7. ATSDR, Re e de Sa d P b ca: H d ca b a e de e e , Agency Toxic
Subst. Dis. Regist. U.S. Dep. Heal. Hum. Serv., p. 6, 1999.
8. ATSDR, T FAQ TM - H d ca b a e de e e (T a Pe e H d ca b ),
Agency Toxic Subst. Dis. Regist. U.S. Dep. Heal. Hum. Serv., 2016.
9. M. Vázquez-Luna, A. Montiel-Flores, D. Vázquez-Luna, and M. F. Herrera-Te , impacto
del petróleo crudo en suelo sobre la microbiota de vida libre fijadora de nitrógeno, Trop.
Subtrop. Agroecosystems, vol. 13, pp. 511 523, 2013.
10. C. G a , V. S ada, a d R. Sc a , A e e f h ee a ache f b e ed a
(Natural Attenuation, Landfarming and Bioagumentation Assistited Landfarming) for a
e e h d ca b c a a ed , Chemosphere, vol. 170, pp. 10 16, 2017.
11. M. . Madigan, J. M. Martinko, D. Stahl, and D. . Clark, Brock Biología de los Microorganismos,
10o. Prentice Hall-Pearson Education., 2004.
12. M. del C. Rivera-Cruz, R. Ferrera-Cerrato, V. Volke Haller, R. Rodríguez Vázquez, and L.
Fe de L a e , Ada ac e ecc de c ga a c e ed de
c e ec d c e e c d , Terra Latinoam., vol. 20, no. 4, 2002.
13. C. Wa e , E d de e c a de deg adac de h d ca b Acinetobacter
sp. y Pseudomonas putida para su aplicación en la biorremediación de suelos contaminados
Ca e, 2004.
14. M. E. Ma A a d J. M. R ge Q e ada, Ag a C a ada P H d ca b ,
GEOCIISA. Div. Protección Ambient. Suelos, pp. 297 305, 2008.
15. A. H. A. Kha , M. A ee , M. A had, Y. S. M ha ad, M. I ba , a d S. Y af, Effec f

TOMO II BIOTECNOLOGÍA Y CIENCIAS AGROPECUARIAS - PÁGINA 30

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illuminance and nutrients on bacterial photo- h g f h d ca b deg ada , Sci.

Total Environ., vol. 557 558, pp. 705 711, 2016.
16. C. A a a, C ación de genes codificantes de catecol dioxigenasas y alcano
ge a a a ad de bac e a deg adad a de h d ca b , U e dad de
Guadalajra, 2019.
17. S. Na e , M. G e , a d M. Ma e , Se ecc de bac e a c ca ac dad deg adad a
de hid ca b a ada a a de ed e de ca be c b a , Boletín Investig.
Mar. y Costeras, vol. 37, no. 1006, pp. 61 75, 2008.
18. J. R. Robledo-Ortíz, D. E. Ramírez-Arreola, C. Gomez, O. González-Reynoso, and R.
González-N e , Bac e a b ation by adhesion onto agave-fiber/polymer foamed
c e , Bioresour. Technol., vol. 101, no. 4, pp. 1293 1299, 2010.

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OPTIMIZACIÓN DE UN PROCESO DE EXTRACCIÓN DE MUCÍLAGO DE SEMILLAS DE

SALVIA HISPANICA L.
Juan Carlos Ramírez Granados, Blanca E. Gómez Luna, Adán Topiltzin Morales Vargas, José
Ramón Gasca Tirado, Francisco de G. Cervantes Silva y Cristina A. Cornejo Pérez

Universidad de Guanajuato, Departamento de Ingeniería Agroindustrial de la División de Ciencias

de la Salud e Ingenierías, Campus Celaya-Salvatierra.
jcramirez@[Link]

RESUMEN
La Salvia hispanica L. (chía) es una planta de la familia Lamiaceae originaria de México y
Centroamérica que ahora se encuentra ampliamente distribuida por el mundo. Existen cerca de 7900
especies, de las cuales alrededor de 700 crecen en México. La chía es una planta de ciclo anual que
puede alcanzar un metro de altura y típicamente posee hojas de 6 cm de largo por 4 cm de ancho.
Estas plantas florecen en el verano y posteriormente desarrollan un fruto con semillas ovaladas de
aproximadamente 1.7 mm de largo que contienen significativas cantidades de aceite, fécula y
mucílago. Comúnmente, las semillas de chía son usadas como alimento o suplemento alimenticio
para las personas. Por ejemplo, la harina de las semillas de chía es abundante en proteínas y se
utiliza en la elaboración de panes y galletas. Además, de estas semillas se extrae un aceite rico en
omega 3 que se consume como suplemento alimenticio. Las semillas de chía también se consumen
enteras en bebidas refrescantes como el agua de limón. Si bien, los beneficios nutricionales y
digestivos de las semillas de chía son reconocidos, nuestro interés se centra en darle valor agregado
a su mucílago a través de un uso no-alimentario en el área de fotoprotección ya que es un
polisacárido soluble en agua que retiene la humedad, lo cual puede ser útil en la fabricación de
cosméticos tópicos. Más aún, en estudios previos se analizó la factibilidad de elaborar protectores
solares para la piel con mucílago de chía como ingrediente activo y se demostró que este material
de origen vegetal tiene capacidad para absorber radiación ultravioleta potencialmente dañina para
la piel. Una de las principales ventajas del mucílago de chía usado como ingrediente activo en
protectores solares es su inocuidad, lo cual lo hace más seguro para las personas, a diferencia de
los fotoprotectores químicos que contienen ingredientes ligeramente tóxicos. El mucílago de las
semillas de chía puede ser extraído mediante maceración química con agitación mecánica o con
ultrasonido. En este trabajo se optimizó el rendimiento del proceso de extracción del mucílago de
chía mediante maceración química con agitación mecánica. Para lo anterior, se determinó el
rendimiento del mucílago de chía extraído a diferentes temperaturas de maceración y distintos
volúmenes de solvente. Por una parte, se extrajo el mucílago a temperaturas de maceración que
variaron de 30 a 55 °C con incrementos de 5 °C, obteniéndose el mayor rendimiento a 30 °C. Con
respecto a la cantidad de solvente para la maceración, el máximo rendimiento de extracción se
obtuvo para volúmenes iguales o superiores a 60 ml de agua por cada gramo de semillas de chía.
La optimización del proceso de extracción permite obtener la mayor cantidad posible de mucílago de
las semillas de chía, reduciendo su costo y haciendo más factible su uso en aplicaciones no-
convencionales tales como la elaboración de protectores solares orgánicos de uso diario para la piel.

INTRODUCCIÓN
La chía (Salvia hispanica L.) es una especie anual que pertenece a la familia de las Lamiaceae que
está constituida por 300 géneros y 7 subgéneros, con alrededor de 7900 especies. 1 Se ha cultivado
en regiones tropicales y subtropicales, y ha sido conocida y utilizada como alimento, medicina y para
la manufactura de pinturas por indios americanos y mexicanos rurales. 2-5
Esta planta tiene una altura aproximada de 1.0 metros y sus tallos son ramificados, de sección
cuadrangular con pubescencias cortas y blancas. Las hojas opuestas con bordes aserrados miden
típicamente 6.0 cm de longitud y 4.0 cm de ancho. Las semillas son ovales, suaves, brillantes y
miden entre 1.5 y 2.0 mm de longitud. Según la variedad, su color puede ser blanco o negro grisáceo
con manchas irregulares que tienden a un color rojo oscuro.6 Estas semillas contienen cantidades
importantes de aceite, fécula y mucílago. El mucílago consiste en células que se hinchan o se
desintegran en fibrillas espirales delgadas cuando entran en contacto con agua. 7-10 Este mucílago

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es un polisacárido de alto peso molecular que contiene grupos hidroxilo y ácido carboxílico. El
c ag de ch a e e a ac d c a cade a c a c e a (1 4)- -D-
a , (1 4)- -D-g c a , (1 4)- -D-xilopiranosil con ramificaciones de 4-O-metil- -D-
cd g c c e a c 2 de -D-xilopiranosil de la cadena principal.11
El protocolo general de extracción del mucílago de chía consiste en sumergir las semillas en un
solvente (i.e. agua) por un tiempo determinado.12 Este procedimiento ha sido modificado por
diferentes autores con el propósito de aumentar el rendimiento de la extracción sin alterar la
composición química del extracto.
La maceración es un proceso de extracción sólido-líquido donde la materia prima posee una serie
de compuestos solubles en el líquido de extracción que son los que se pretende extraer. El proceso
de maceración genera dos productos que pueden ser empleados dependiendo de las necesidades
de uso, el sólido ausente de esencias o el propio extracto. La naturaleza de los compuestos extraídos
depende de la materia prima empleada, así como del líquido de extracción. 13
A pesar de que existen estudios sobre la extracción del mucílago de chía, hacen falta más estudios
que optimicen su rendimiento y simplifiquen la extracción. Por esto, el objetivo de este estudio es
optimizar el proceso de extracción de polisacáridos en chía mediante maceración química con
agitación mecánica. Este método consiste en etapas simplificadas para reducir los costos.

PARTE EXPERIMENTAL
En este trabajo se determinaron las condiciones a las que se obtiene más mucílago de chía durante
su proceso de extracción mediante maceración química con agitación mecánica para optimizar su
rendimiento de extracción, y al mismo tiempo sea económico y sustentable. Para esto, aquí se extrajo
el mucílago a diferentes temperaturas de maceración y empleando distintos volúmenes de agua
como solvente. Para las series de extracciones de mucílago se utilizaron porciones de 5 g de semillas
de chía, agua destilada y agitación mecánica a 600 rpm.
En cada extracción de la primera serie de experimentos se empleó una temperatura de maceración
distinta, comenzando en 30 °C y aumentándola en intervalos de 5 °C hasta terminar en 55 °C, por
debajo de la temperatura a la cual el mucílago comienza a degradarse. El volumen de solvente fue
de 300 ml para todos estos ensayos. Esta parte del proceso de optimización se esquematiza en la
Figura 1.

Figura 1. Optimización de la temperatura de maceración con volumen de solvente constante en el

proceso de extracción de mucílago de chía.

En la segunda serie de extracciones se fue variando el volumen del solvente, comenzando con un
volumen de 200 ml y aumentándolo en intervalos de 50 ml hasta 350 ml. La temperatura de
maceración se fijó en 30 °C y permaneció constante en estos ensayos. Esta otra parte del proceso
de optimización se esquematiza en la Figura 2.

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Figura 2. Optimización del volumen de solvente a temperatura de maceración constante en el

proceso de extracción del mucílago de chía.

Para la maceración química se pesaron 5 gramos de semillas de chía secas y se colocaron en un

vaso de precipitados. Después se añadió agua destilada en el volumen previamente definido en el
diseño experimental. Luego, el vaso de precipitados se colocó en una placa con temperatura
constante y se mantuvo a esa temperatura durante 45 minutos con agitación mecánica empleando
un agitador magnético. En la Figura 3 se esquematiza la maceración química de las semillas de chía.

Figura 3. Maceración química con agitación mecánica de las semillas de chía.

Para separar el mucílago de la materia insoluble se empleó un sistema de filtración al vacío. Para
esto, el agua y las semillas hidratadas se vertieron en un embudo de Buchner con gasas esterilizadas
como filtro. Debido a la alta viscosidad de la alícuota fue necesario emplear una bomba de vacío
para acelerar la filtración de las semillas y el mucílago.
Después del proceso de filtración se obtuvo una alícuota compuesta por mucílago disuelto en agua
destilada. Mediante un proceso de evaporación fue posible eliminar el solvente y retener solamente
el mucílago. Para implementar esta etapa se colocó la alícuota en la placa de calentamiento a 70 °C
hasta evaporar toda el agua destilada.
Posteriormente, con una espátula se retiró el mucílago seco del vaso de precipitados. Luego se
pulverizó el mucílago en un mortero hasta obtener una consistencia similar a una harina. Finalmente,
el mucílago se pesó para determinar el rendimiento en cada ocasión. El proceso de extracción del
mucílago de las semillas de chía se esquematiza en la Figura 4.

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Figura 4. Proceso de extracción del mucílago de semillas de chía.

La secuencia general del proceso de extracción del mucílago de chía se describe en el diagrama de
flujo de la Figura 5.

Separar las semillas y el

Pesar 5 g de semillas de Evaporar el solvente de
mucílago mediante
chía la alícuota a 70 C
filtración al vacío

Colocar las semillas en Al mismo tiempo, agitar Pulverizar y pesar el

un vaso de precipitados por 45 min a 600 rpm mucílago

Añadir el volumen de Calentar las semillas Calcular el rendimiento

agua destilada hidratadas a e identificar los
correspondiente temperatura constante parámetros óptimos

Figura 5. Diagrama de flujo del proceso de extracción de mucílago de chía.

RESULTADOS
En la Tabla 1 se muestran los resultados de las extracciones de mucílago de chía variando la
temperatura de maceración y manteniendo constante el volumen del solvente.

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Tabla 1. Rendimiento del proceso de extracción de mucílago de chía a diferentes temperaturas de

maceración y manteniendo constante el volumen del solvente.
Peso de Volumen del Velocidad de Temperatura Mucílago Rendimiento
las solvente agitación de maceración extraído (%)
semillas (ml) (rpm) (°C) (g)
(g)
5.03 300 600 30 0.16 3.18
5.00 300 600 35 0.14 2.80
5.02 300 600 40 0.15 2.99
5.01 300 600 45 0.14 2.79
5.01 300 600 50 0.13 2.59
5.00 300 600 55 0.13 2.60

En la Figura 6 se observa que el rendimiento de la extracción disminuye ligeramente a medida que

se incrementa la temperatura de maceración, obteniéndose un rendimiento máximo de 3.18% a 30
°C.

3.5

3.0
Rendimiento (%)

2.5

2.0

1.5

1.0

0.5

0.0
30 35 40 45 50 55
Temperatura de maceración ( C)

Figura 6. Variación del rendimiento del mucílago de chía extraído a diferentes temperaturas de
maceración.

En la Tabla 2 se muestra los resultados de las extracciones de mucílago de chía utilizando diferentes
volúmenes de agua destilada como solvente y manteniendo la temperatura de maceración
constante.

Tabla 2. Rendimiento del proceso de extracción del mucílago de chía para distintos volúmenes de
solvente y temperatura de maceración constante.
Peso de Volumen del Velocidad de Temperatura Mucílago Rendimiento
las solvente agitación de maceración extraído (%)
semillas (ml) (rpm) (°C) (g)
(g)
5.00 200 600 30 0.12 2.40
5.00 250 600 30 0.14 2.80
5.03 300 600 30 0.16 3.18
5.00 350 600 30 0.15 3.00

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Aquí se observa que el rendimiento de la extracción se incrementa a medida que el volumen del
solvente va de 200 a 300 ml. En este caso, volúmenes de solvente mayores a 300 ml no aumentaron
significativamente la cantidad de mucílago extraído.

3.5

3.0

2.5
Rendimiento (%)

2.0

1.5

1.0

0.5

0.0
200 250 300 350
Volumen de hidratación (ml)

Figura 7. Variación del rendimiento del mucílago de chía extraído con diferentes volúmenes de
solvente y temperatura de maceración constante.

De acuerdo con la Figura 7, el rendimiento óptimo se obtuvo utilizando 300 ml de agua destilada
para hidratar 5 gramos de semillas de chía. Es decir, el volumen de solvente óptimo es de 60 ml por
cada gramo de semillas de chía.

CONCLUSIONES
Para maximizar el rendimiento del proceso de extracción del mucílago de chía es fundamental
controlar la temperatura de maceración y el volumen de solvente utilizado para hidratar las semillas.
De acuerdo con los resultados obtenidos, se encontró que la temperatura de maceración óptima es
de 30 °C; mientras que el volumen de solvente óptimo es de 60 ml por cada gramo de semillas de
chía secas. La optimización de este proceso de extracción hace que el mucílago de chía sea
económicamente más accesible e incrementa la posibilidad de emplearlo en aplicaciones no-
convencionales tales como la fotoprotección de la piel. Además, se daría valor agregado a este
material de origen vegetal y a los productos que lo contengan.

BIBLIOGRAFÍA
1. O. A. Di Sapio, M. Bueno, H. B acch , M. Q ga & C. Se e , Ca ac e ac
Morfoanatómica de Hoja, Tallo, Fruto y Semilla de Salvia hispanica L. (Lamiaceae) , B e
Latinoamericano y del Caribe de Plantas Medicinales y Aromáticas, Vol. 11, 3, 2012, pp. 249-
268.
2. H. G. Rodrígue Va e , M c ag de e a de ch a c de g a a
c e c a e e ga e a , Te de ae a, U e a P c ca de Va c a,
Valencia, 2019.
3. C. A. S a S che , E a ac c ca c e c a de a echa e de a e a de
chía (Salvia hispanica) a a a e ab ac de d c a e , Te de ce c a a,
Universidad de las Américas, Quito, 2015.
4. E. N. G , A cac de b d c de ch a (Salvia hispanica L.) y girasol (Helianthus
annuss L.) e a e , Te is doctoral, Universidad Nacional de la Plata, Buenos Aires,
2014.

TOMO II BIOTECNOLOGÍA Y CIENCIAS AGROPECUARIAS - PÁGINA 37

MISCELÁNEA CIENTÍFICA EN MÉXICO CENTRO DE INVESTIGACIONES EN ÓPTICA, A.C.

5. M. L. Ma e , M. A. Ma , C. M. Sa gad , J. Re , M. C. Pe c , & P. D. R b a, Chia

(Salvia hispanica L.) e ac : S d f ce g a a e e , F d Sc e ce a d
Technology, Vol. 47, 2012, pp. 78-82.
6. R. A e a & W. C a e , P e a d c e , e de de a d fa ac d c
of chia (Salvia hispanica L.) grown in six tropical and sub-tropical ecosystems of South
A e ca , T ca Sc e ce, V . 3, 44, 2004, . 131-135.
7. S. C. O f c , M. I. Ca a , M. C. T & S. M. N a c , Efec de d de ecad de
mucílago de chía (Salvia hispanica L.) s b e edade f c ca f c ae ,
En VI Congreso Internacional de Ciencia y Tecnología de los Alimentos, Córdoba, 2016.
8. L. M & M. C. Z ga, P edade f c -químicas y funcionales del mucílago de semilla
de ch a , Investigación, Ciencia y Universidad, Vol. 2, 2, 2018.
9. A. E. A a Ja a , & D. C. De gad M e a, Efec de e c d c e de e acc e
las propiedades físico-químico del mucílago de chía (Salvia hispánica L.) , Te de
licenciatura, Universidad de las Américas, Quito, 2016.
10. A. J. P. Maurtua, H. H. A. Luis, P. R. J. Carlos, J. E. H. Mavila, W. H. Quispe, A. T. Espinoza
& F. R. P. E ca a e, De e ac de a ec g a de e acc de c ag de a
semilla de chía (Salvia hispanica L.) y evaluación de sus propiedades
funcionales/Determination of the extraction technology of the chia seed mucilage (Salvia
h ca L.) a d e a a f f c a e e ,Ba a J a f De e e ,
Vol. 6, 2, 2020, pp. 7894-7910.
11. K. Y. Lin, J. R. Daniel, & R. L. Wh e , S c e f ch a eed accha de e da e ,
Carbohydrate Polymers, Vol. 23, 1, 1994, pp. 13-18.
12. A. Z a, La f f a eed c age e ac ,F dH d c d , V . 26, 1, 2012,
pp. 197-204.
13. G. Fe a , Ha db ffa g ed e , V . I, CRC P e , Ne Y , 1975.

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INFLUENCIA DE FERTILIZACIÓN ORGÁNICA Y QUÍMICA SOBRE LA GERMINACIÓN Y

DESARROLLO FOLIAR DE FRIJOL COMÚN (PHASEOLUS VULGARIS L.)
Erika Cecilia Gamero Posada, Sonia Valdez Ortega, Ixchel Abby Ortiz Sánchez*, Oscar Gilberto
Alaniz Villanueva, Javier Saucedo Rodríguez y Marín Bonilla Murillo

Tecnológico Nacional de México campus Valle del Guadiana

*[Link]@[Link]

RESUMEN
El Estado de Durango sobresale en la generación de variedades de frijol común con alto impacto
productivo y comercial en México. La Biotecnología ha abierto posibilidades en lo concerniente a la
aplicación de microorganismos benéficos para la promoción del crecimiento de los cultivos, aspecto
que cobra cada día mayor auge debido al incremento en la demanda de alimentos y a la búsqueda
de alternativas agrícolas sustentables. El presente proyecto tuvo como objetivo evaluar la influencia
de un biofertilizante hecho a base la bacteria promotora de crecimiento vegetal (BPCV) Azospirillum
spp., nativa de la región del Valle del Guadiana, sobre la germinación y el desarrollo foliar de un
cultivo de frijol común de temporal a cielo abierto, en comparación con el uso de fertilización química
convencional. En Julio-Noviembre de 2019 se estableció una parcela experimental de Frijol Pinto
Saltillo en la región del Valle del Guadiana, Durango, en la que se dispuso un diseño en bloques al
azar y se evaluaron cuatro tratamientos: el primero (AZ) fue una suspensión de Azospirillum spp.
(4.3x1011 UFC/mL); el segundo (AZ-FQ50%) se trató de la misma suspensión bacteriana combinada
con una dosis de fertilizante químico al 50%; el tercero (FQ100%) fue un fertilizante químico con
dosis al 100%; en el cuarto tratamiento (TA) no se llevó a cabo la fertilización. Se evaluó la influencia
de cada tratamiento sobre la germinación a los 7-13 días después de la siembra (DDS), y
posteriormente sobre el desarrollo foliar, a través de la medición de la altura de tallo y follaje, a los
14, 21, 28, 35, 41 y 49 DDS. En lo que se refiere a la germinación, el análisis de los datos mostró
que no existe diferencia significativa (p>0.05) entre aquellos tratamientos en los que se inoculó la
semilla al momento de la siembra (AZ y AZ-FQ50%) y los tratamientos en los que no se inoculó la
semilla (FQ100% y TA). En lo que respecta a la altura de tallo y follaje, se observó diferencia
g f ca a e e aa e ( 0.05), e d e c b ado (AZ-FQ50%) y el químico
(FQ100%) los que fomentan el desarrollo de los tallos y follajes más altos a los 49 DDS, sin haber
diferencia estadística entre ellos; las plantas tratadas únicamente con fertilizante orgánico (AZ) se
ubican en segundo lugar, y las que no fueron fertilizadas mostraron los tallos y follajes más cortos.
Los resultados indican que la aplicación de biofertilizantes con base en cepas nativas de Azospirillum
spp. incrementan el desarrollo foliar de frijol común, aunque no influyen en el tiempo de su
germinación, experimentos que se sugiere repetir debido a que las lluvias durante el ciclo evaluado
fueron escasas. La utilización de BPCV representa una alternativa sustentable y económica para los
agricultores y ganaderos de la región, debido a que se puede reducir hasta en un 50% la aplicación
de fertilizantes nitrogenados de síntesis química.

INTRODUCCIÓN
En Durango la producción de frijol (Phaseolus vulgaris L.) es una de las actividades económicas de
mayor importancia alimenticia, social y ecológica. A pesar de lo anterior, la producción de grano de
frijol se realiza en zonas áridas y semiáridas, donde la disponibilidad de agua es limitada y las
pérdidas de rendimiento son comunes (INIFAP, 2017).
En esta región se siembra 1 millón de hectáreas (ha) y se obtienen 491,000 ton de grano de frijol, lo
cual representa 50 % de la producción nacional (INIFAP, 2017). En el estado de Durango se siembra
14 % de la superficie nacional cultivada con frijol y se obtiene 11 % del grano producido en México
(INIFAP, 2017). En 2015, en Durango se sembraron 253,000 ha con frijol y se produjeron 111,000
ton de grano (SIAP-SAGARPA, 2017). En el estado, el cultivo de frijol es considerado como una de
las actividades de mayor importancia alimenticia, social y económica. Además, el cultivo del frijol
cumple con una importante función ecológica debido a su capacidad para fijar nitrógeno atmosférico
y con ello mejorar la fertilidad del suelo. Por su importancia, el frijol es considerado por los

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productores como un cultivo que proporciona los alimentos y beneficios económicos que contribuyen
a mejorar el nivel de vida de la población duranguense.
El suelo es un elemento clave para el mantenimiento de la vida sobre la Tierra. Además de ser el
principal soporte de la vegetación, la infraestructura y el hábitat de la biodiversidad, participa de
manera esencial en el funcionamiento de cualquier ecosistema. Sin embargo la degradación de éste,
es un fenómeno presente en todo el mundo, teniendo diferentes niveles e impactos en la sociedad.
Uno de los principales efectos negativos de la degradación del suelo es la reducción de la capacidad
de producir alimentos para toda la población, problema que está dado por la contaminación de los
suelos con químicos como insecticidas, herbicidas y fertilizantes (Acuña et al., 2001).
El uso de biofertilizantes a base de bacterias como las del género Azospirillum spp., que son
consideradas como fijadoras de nitrógeno, y al ser aisladas de la rizósfera, sirven como inoculantes
para las semillas, además estas bacterias devuelven gran cantidad del nitrógeno inorgánico del suelo
a la atmósfera. Según Okon y Vanderleyden (1997), dentro de los mecanismos de acción directos
de estas bacterias promotoras del crecimiento vegetal (BPCV) sobre las plantas, se encuentran el
mejoramiento de la germinación, el desarrollo del sistema radical, la nutrición mineral y la
fitoestimulación (utilización del agua), parámetros observados en varias especies de los géneros
Azospirillum, Azotobacter, Bacillus, entre otros.
El objetivo de este trabajo fue evaluar la influencia de un biofertilizante hecho a base la bacteria
promotora de crecimiento vegetal (BPCV) Azospirillum spp., nativa de la región del Valle del
Guadiana, sobre la germinación y el desarrollo foliar de un cultivo de frijol común de temporal a cielo
abierto en el ciclo de siembra 2019, en comparación con el uso de fertilización química convencional.

TEORÍA
El frijol (Phaseolus vulgaris L.), es un cultivo que se ha extendido prácticamente en todo el mundo y
es considerado como parte de la dieta básica debido a su aporte nutricional (24.7% de proteína,
69.4% de carbohidratos y 1.7% de lípidos) de una gran parte de la población (SAGARPA-CONACyT,
2018). En México, el frijol es la cuarta especie más importante, con base en la superficie utilizada
para su cultivo y se sitúa únicamente después del maíz, pastos y sorgo (SAGARPA-CONACyT,
2018).
En el estado de Durango la producción de frijol es una de las actividades económicas y sociales más
importantes (Estrada, 2018). En el ciclo Primavera-verano 2019, se sembraron con frijol 172, 414
hectáreas y se obtuvo una producción de 13,201 toneladas; se obtuvo un rendimiento promedio de
313 kg ha (INFOSIAP-SAGARPA, 2019). Las áreas más importantes para la producción de frijol de
temporal en Durango se encuentran en los municipios de Cuencamé, Guadalupe Victoria, Pánuco
de Coronado, Peñón Blanco, Poanas, Vicente Guerrero, Canatlán e Indé. El clima predominante de
las áreas productoras de frijol es el templado, con régimen de lluvias en verano (350 a 535 mm), la
temperatura media anual es de 15.8 a 17.7°C y la altitud oscila entre 1,700 y 2,100 metros. Los
suelos de las áreas productoras de frijol en Durango se clasifican como Regosoles, Xerosoles
Redzina y Feozem. Las áreas con alto potencial de rendimiento se ubican en los municipios de
Canatlán, Vicente Guerrero, Guadalupe Victoria y sur de Cuencamé, donde en años con suficiente
precipitación bien distribuida se puede obtener hasta 1,800 kilogramos por hectáreas. Las áreas de
mediano y bajo potencial están distribuidas en todos los municipios donde se cultiva frijol. Cuando la
precipitación es abundante (más de 450 mm) y con buena distribución durante el ciclo biológico del
cultivo, se incrementa el rendimiento en todas las áreas productoras (SAGARPA, 2015).
Durante el periodo de cultivo, el frijol puede ser afectado por múltiples factores adversos que reducen
el rendimiento, como la sequía y las enfermedades causadas por patógenos de la raíz y foliares que
disminuyen hasta 50% los rendimientos, lo que ha obligado a investigadores a desarrollar nuevas
estrategias que permitan estabilizar la producción y contribuir a la competitividad del frijol (Van
Bruggen et al., 1986).
Para mejorar la productividad del cultivo se requiere la aplicación de una estrategia de producción
integral en la que se incorporen los diferentes componentes tecnológicos y métodos generados por
la investigación agrícola relacionados a la reducción de los riesgos climáticos, la estabilidad
productiva y el aprovechamiento sustentable de los recursos dentro de un ambiente desfavorable.

TOMO II BIOTECNOLOGÍA Y CIENCIAS AGROPECUARIAS - PÁGINA 40

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La FAO (1995) ha señalado que la solución del problema de la producción de alimentos dependerá
del aumento de la productividad de las tierras y considera que los fertilizantes juegan un importante
papel dentro de la producción de insumos. Por tal motivo, la producción mundial de fertilizantes
minerales se incrementó sostenidamente entre los años 1985-1989 (de 139,6 a 158,3 millones de
toneladas) y se observó cierta disminución entre los años 1990-1994 (de 152,9 a 131,5 millones de
toneladas), debido al elevado consumo de energía fósil para su producción, el aumento de los
precios y la toma de conciencia a nivel mundial sobre la necesidad de proteger el medio ambiente;
no obstante, existió una recuperación de la producción de estos insumos a partir de 1995, motivado
ello fundamentalmente por la reducción de los precios de los fertilizantes.
Lo anterior ha traído consigo un deterioro notable en la calidad del medio ambiente, incluyendo el
agua, el suelo y el aire, comprometiendo la salud de las poblaciones considerablemente.
Una alternativa es el uso de productos biológicos que permitan producir alimentos inocuos para la
salud humana y amigables con el medio ambiente, lo que se traduce en sistemas agrícolas
sustentables, esto es, sistemas que permitan mantener los recursos necesarios para sostener la
creciente población mundial a largo plazo, sin poner en peligro los recursos naturales para las futuras
generaciones.
Un gran número de artículos científicos se describen los efectos que provoca la bacterización con
diferentes cepas de Azospirillum, medido en el aumento de peso seco total, contenido de nitrógeno
de hojas, granos y brotes, floración y aparición temprana de la espiga, número de espigas y granos
en estas, peso y tamaño del grano, altura de la planta y tamaño de la hoja, índice de área foliar y
tasa de germinación. Además, se han observado efectos marcados sobre el sistema radical, que
incluyen incrementos en el número de raíces por planta, en el número y la longitud de las raíces
laterales, las cuales incrementan el volumen radical (Parra y Cuevas, 2001) y aumento en el peso
seco de la raíz, número, densidad y aparición temprana de los pelos radicales.
Específicamente en Cuba, durante los últimos años ha sido investigado el efecto de Azospirillum
sobre varios cultivos. La aplicación al arroz de esta bacteria a razón de 20 L/ha (10 8 ufc/mL) con
nitrógeno inorgánico muestra que es posible ahorrar el 25 % del fertilizante nitrogenado y obtener
rendimientos agrícolas similares a los obtenidos con la aplicación de la dosis completa de nitrógeno
(Parra y Cuevas, 2001).
En experimentos realizados en macetas utilizando la bacterización con Azospirillum brasilense se
demostró el efecto beneficioso que tuvo la bacteria sobre el cultivo del arroz, ya que se pudo ahorrar
el 33 % del fertilizante nitrogenado y un momento de su aplicación (Parra y Cuevas, 2001).
A pesar de los resultados positivos obtenidos a nivel mundial en varios cultivos utilizando la
bacterización con Azospirillum, la incidencia de estos no ha sido lo suficientemente frecuente. El
principal problema de la mayoría de los experimentos de campo e invernadero realizados hasta el
momento es la respuesta inconsistente de la planta a la inoculación prescindiendo de las especies
de plantas.
Graham (1990) en su revisión de problemas en la nodulación y fijación de nitrógeno en frijol, consigna
lo siguiente: a) existe una amplia variación entre genotipos en fijación simbiótica de N2 (de tres a 125
kg ha-1), donde los cultivares de hábito indeterminado trepador son más eficientes; b) hay un
progreso en el desarrollo de variedades con alta capacidad en fijación biológica del nitrógeno, a
través del mejoramiento genético utilizando métodos de selección recurrente; c) se han identificado
cepas de bacterias fijadoras de nitrógeno, altamente efectivas a través de un rango variable de
condiciones de suelo y clima; d) los factores ambientales, como acidez (menor de 4.5), toxicidad de
aluminio y manganeso y disponibilidad de fósforo en el suelo, temperatura ambiente y competencia
con cepas nativas, afectan significativamente la capacidad de nodulación y fijación biológica del
nitrógeno por el frijol.
En el desarrollo de esta biotecnología, es importante entender los factores ambientales y biológicos
que afectan la simbiosis. Un conocimiento integral de la triada bacteria-planta-ambiente permitiría
definir estrategias que conduzcan a la selección de variedades y cepas de Azospirillum con alta
fijación de nitrógeno y tolerantes a diferentes factores del ambiente.
Es deseable realizar estudios previos de las poblaciones de microorganismos y fertilidad del suelo,
todo esto con la finalidad de elaborar biopreparados eficientes y con grandes probabilidades de éxito

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para probar su efectividad como biofertilizante sobre cultivo de frijol de la variedad Pinto Saltillo, una
de las consumidas en el Estado de Durango.

PARTE EXPERIMENTAL
Los trabajos fueron llevados a cabo en Julio-Noviembre 2019 en una parcela a campo abierto del
Tecnológico Nacional de México campus Valle del Guadiana, para evaluar estadísticamente la
germinación y el desarrollo foliar y del tallo en la planta de frijol común, bajo tratamiento de
fertilización química y orgánica (Cuadro 1). El primer tratamiento (AZ) fue una suspensión de la cepa
A8 de Azospirillum spp. (4.3x1011 UFC/mL); el segundo (AZ-FQ50%) se trató de la misma
suspensión bacteriana combinada con una dosis intermedia de fertilizante (20N-30P-00K); el tercero
(FQ100%) fue una dosis completa de fertilizante químico (40N-60P-00K); en el cuarto tratamiento
(TA) no se llevó a cabo ningún tipo de fertilización.

Cuadro 1. Diseño Experimental

Tratamiento Descripción Dosis
AZ Cepa A8 de Azospirillum (4.3x1011 UFC/mL)
spp.
AZ-FQ50% A8 + Fertilización química A8 4.3x1011 UFC/mL
+ 20N-30P-00K
FQ100% Fertilización química 40 N-60 P-00 K
TA Testigo absoluto 0

Como todo el trabajo se realizó a campo abierto se decidió hacer el diseño experimental en bloques
al azar, debido a las pendientes y gradientes de composición química, principalmente. Se
establecieron cuatro bloques con la disposición mostrada en el Cuadro 2. Cada bloque se dividió en
parcelas de 4 m x 4 m separadas entre sí por pasillos de 1 m. Los bloques y los tratamientos dentro
de ellos fueron aleatorizados.
El cepa A8 de Azospirillum spp. se aisló y se reprodujo en el Laboratorio de Biotecnología Vegetal
del mismo Instituto Tecnológico, a partir de raíz de Amaranthus hypocondriacus e a e a a de g a
ech . Los inoculantes crecidos en caldo nutritivo por 60 h a 28 °C y luego separados y lavados
por centrifugación, se diluyeron en 20 L de agua corriente, alcanzando una concentración de
4.3x1011 UFC/mL, medida por espectrofotometría de luz UV a 660 nm.

Cuadro 2. Disposición espacial del Diseño Experimental

FQ100% TA
AZ-FQ50% AZ
TA AZ-FQ50%
AZ FQ100%
Bloque 4 Bloque 1
AZ-FQ50% AZ
TA FQ100%
AZ AZ-FQ50%
FQ100% TA
Bloque 2 Bloque 3

La siembra se realizó el día 26 de julio de 2019 de manera manual, y en los tratamientos AZ y AZ-
FQ50% se realizó la inoculación de la semilla, embebiéndola en suspensión de Azospirillum spp.
durante 10 minutos con agitación constante, tiempo después del cual se sembraron 2 semillas por
pocillo, a 5 cm de profundidad y a una distancia de 10 cm entre planta para garantizar la germinación,
es decir 80 semillas por surco, esperando obtener al menos 40 plantas por surco y 200 plantas por
tratamiento. La semilla para los tratamientos FQ100% y TA no fue inoculada. Posteriormente, la
aplicación de los tratamientos se realizó con mochila de aspersión, directamente en el suelo, justo

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sobre la siembra o sobre el tallo de las plantas, procurando dejar perfectamente empapado. Se
realizaron dos aplicaciones posteriores a la siembra, una a los 15 DDS (días después de la siembra)
y otra a los 35 DDS.
Las evaluaciones tanto de germinación como de desarrollo foliar y de tallo, se realizaron en el
cuadrante central de cada a a e (1 1 ), a a e a e efec a , aba c d e e a
20 plantas que fueron seguidas a lo largo de todo el experimento, etiquetándolas individualmente. A
los 7-13 DDS se observó la emergencia de cada planta para evaluar la germinación, y a los 14, 21,
28, 35, 42 y 49 DDS se realizó la medición de la altura de tallo y de la planta completa (tallo y follaje),
utilizando regla Vernier o cinta métrica metálica. Los datos fueron procesados en el paquete
computacional InfoStat, y se les realizó un análisis no paramétrico de Friedman con un grado de
significancia de 0.05.

RESULTADOS
En el Cuadro 3 se puede observar que la inoculación de la semilla previa a la siembra, no influyó en
el tiempo de germinación, ya que los tratamientos no muestran diferencia significativa (p>0.05) en el
número de plantas emergidas entre los 7 y 13 DDS. Este resultado coincide con los de Roldan et al.
(2003), quienes reportan que a pesar de observar un aumento en el número de semillas que
germinan al ser inoculadas con BPCV, este no fue estadísticamente significativo con respecto a
semillas no inoculadas. Sin embargo, se ha reportado que las rizobacterias tienen la capacidad de
producir sustancias fisiológicamente activas que estimulan el crecimiento vegetal, tales como ácido
indolacético, giberelinas y citoquininas, que juegan un importante rol en la interrupción del letargo
seminal, lo cual trae consigo una predisposición prematura de la germinación (Vázquez y Torres,
1995). Por tal motivo, es recomendable la repetición de los experimentos para la corroboración de
los resultados. Cabe hacer mención que el cultivo de frijol en el Estado de Durango durante el ciclo
2019, se vio seriamente afectado por la baja precipitación acumulada (428.8 mm) en el municipio de
Durango (CONAGUA, 2020).

Cuadro 3. Germinación y altura de plantas de Frijol Pinto Saltillo sometido a tratamientos de

fertilización en condiciones de temporal durante el ciclo 2019, en el Valle del Guadiana, Durango.
Variable Tratamiento
AZ AZ-FQ50% FQ100% TA
(4.3x1011 UFC/mL)
Germinación 2.63A 2.00A 2.75A 2.63A
(7-13 DDS)
Altura foliar (49 1.95C,D 3.37A 2.90B 1.78D
DDS)
Altura de tallo 1.88B,C 3.37A 3.03A 1.73C
(49 DDS)
Se muestran medias de rangos. Medias con una letra común no son significativamente
diferentes (p>0.05).

Por otra parte, en lo que respecta a la altura de tallo y follaje, se observó diferencia significativa entre
aa e ( 0.05), e d e c b ad (AZ-FQ50%) y el químico (FQ100%) los que
fomentan el desarrollo de los tallos y follajes más altos a los 49 DDS, sin haber diferencia estadística
entre ellos; las plantas tratadas únicamente con fertilizante orgánico (AZ) se ubican en segundo
lugar, y las que no fueron fertilizadas mostraron los tallos y follajes más cortos (Cuadro 3). Chacón
et al. (2004) determinaron la influencia de la inoculación con BPCV (entre las que se encontraban
Azospirillum spp.) sobre parámetros morfológicos, fisiológicos y de fijación de nitrógeno en diferentes
condiciones del cultivo del frijol común (Phaseolus vulgaris L.); sus resultados mostraron la
superioridad de los tratamiento de inoculación, difiriendo significativamente con el tratamiento
testigo, al evaluar la altura y peso fresco del área foliar incluido el tallo de las plantas, en los diferentes
estadios.

TOMO II BIOTECNOLOGÍA Y CIENCIAS AGROPECUARIAS - PÁGINA 43

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Se puede observar (Figuras 1 y 2) que al principio todos los tratamientos presentaron un crecimiento
similar, sin embargo al paso de los días y de las aplicaciones de los tratamientos, a partir de los 28
DDS el FQ100% Y AZ-FQ50% se disparan en crecimiento tanto de tallo (Figura 1), como de follaje
(Figura 2); mientras AZ y TA se mantienen constantes y con poco crecimiento, pero al final, como ya
se esperaba, el TA es el que menor crecimiento obtuvo en cuanto a crecimiento de tallo y foliar
(Figuras 1 y 2), lo cual muy probablemente se puede ver afectado en el rendimiento ya que la planta
al tener menos hojas y masa foliar realiza menos fotosíntesis y tiene escases de nutrimientos.
Las gráficas de las Figura 1 y 2 muestran como las plantas reaccionaron a cada tipo de tratamiento,
lo que era evidente es que la aplicación química sería la mejor, sin embargo se notó en campo y se
corroboró luego del análisis de los datos, que la mezcla AZ-FQ 50% es más eficiente en cuanto a
crecimiento foliar y crecimiento de tallo, además de ser un tratamiento que permite la reducción a la
mitad las dosis de agroquímicos y se beneficia el suelo al agregar microorganismos fijadores de
nitrógeno y potenciadores del crecimiento vegetal, como lo es Azospirillum spp .
Acuña et al. (2001) obtuvieron resultados similares, al validar la técnica de inoculantes en frijol con
cepas nativas de Rhizobium spp. eficientes en fijación de nitrógeno en Centroamérica, concluyendo
que la respuesta del frijol a la inoculación es variable de sitio a sitio, pero que en el 80% de ellos, el
rendimiento se vio aumentado con el uso de inoculantes o inoculantes + dosis intermedias de
fertilización química, aumentando con ello también las ganancias económicas.

Figura 1. Cinética de crecimiento de tallo (cm) Figura.2 Cinética de desarrollo foliar (cm)

CONCLUSIONES
Los resultados indican que la aplicación de biofertilizantes con base en cepas nativas de Azospirillum
spp. incrementan el desarrollo de tallo y foliar de frijol común, aunque no influyen en el tiempo de su
germinación. La utilización de BPCV representa una alternativa sustentable y económica para los
agricultores y ganaderos de la región, debido a que se puede reducir hasta en un 50% la aplicación
de fertilizantes nitrogenados de síntesis química. La aplicación de Azospirillum spp. sobre el cultivo
de frijol común ayudó a que la planta fijara nitrógeno y se mantuviera nutrida para su desarrollo, sin
embargo al mezclarse con fertilización química el beneficio fue mayor, ya que la planta crece más
en menor tiempo y logra desarrollar masa foliar, lo cual es de suma importancia ya que entre más
hojas existe mayor actividad fotosintética tendrán las plantas. El aplicar este biofertilizante nos
garantiza una planta sana y además se reduce la contaminación y se mejora el suelo, que es lo que

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en la actualidad se está buscando producir de manera sustentable y amigable para el medio

ambiente.

BIBLIOGRAFÍA
1. Acuña, O., Rodríguez, E., Llano, A., Calderón, V.R., Flores, G., Viana, A., Lépiz, R. (2001).
Validación técnica de inoculantes en frijol con cepas de Rhizobium eficiente en fijación de
nitrógeno en Centroamérica. Agronomía mesoamericana 12(I). P.p. 25 31.
2. Chacón R. D., Torres G. R., Pérez N. C. (2004) Influencia de rizobacterias diazotróficas sobre
el cultivo del frijol común (Phaseolus vulgaris L.). U e dad Ce a Ma ha Ab e de a
Villas. Trabajo de Tesis. P.p. 27-38
3. Comisión Nacional del Agua (CONAGUA). Consultado en mayo 2020. Históricos 2019.
([Link]
m%C3%A1tico/Temperatura%20y%20Lluvia/PREC/[Link])
4. Estrada F., A. C. (2018). Rendimiento y calidad de grano en líneas mejoradas de frijol
cultivadas en Durango. Tesis de Licenciatura. Instituto Tecnológico del Valle del Guadiana
(ITVG). Villa Montemorelos, Dgo, Méx. P.p. 50
5. Graham P., Apolitano C., Ferrera R., Halliday J., Lépiz R., Menéndez O., Rios R., Saito S.,
Viteri S., (1981). The international bean inoculation trials (IBIT). In: Graham P., Harris S.,
eds. Biological Nitrogen Fixation. Tecnology for Tropical Agriculture. CIAT, Cali, Colombia.
6. Graham P. (1990). Problemas de la nodulación y la fijación de nitrógeno en Phaseolus
vulgaris L. Una reevaluación. Terra, Vol. 8, Número Especial. p. 71-82.
7. Instituto Nacional De Investigaciones Forestales, Agrícolas y Pecuarias (INIFAP). (2017).
Agenda Tecnica Agricola Durango y la Laguna. Ciudad De Mexico: Publicaciones INIFAP.
8. Okon, Y. y J. Vanderleyden. (1997). Root associated Azospirillum species can stimulate
plants. ASM News 63 (7): P.p. 366 370
9. Organización de las Naciones Unidas para la Agricultura y la Alimentación (FAO). (1995).
Manual técnico de la fijación del nitrógeno. Roma. pp: 10-35.
10. Parra, Y., Cuevas, F. (2001). Potencialidades de Azospirillum como inoculante para la
Agricultura. Cultivos Tropicales, 2001, vol. 23, no. 3, p. 31-41
11. SAGARPA-CONACyT. (2018). Fondo Sectorial de Investigación en Materias, Agrícola,
Pecuaria, Acuacultura, Agrobiotecnología y Recursos Fitogenéticos. P. p. 72-73.
12. Servicio de Información Agroalimentaria y Pesquera (INFOSIAP). Secretaría de Agricultura,
Ganadería, Desarrollo Rural, Pesca y Alimentación. (SAGARPA). (2017). Anuario estadístico
de la producción agrícola. Documento consultado en línea Mayo de 2020.
[Link]
13. Servicio de Información Agroalimentaria y Pesquera (INFOSIAP). Secretaría de Agricultura,
Ganadería, Desarrollo Rural, Pesca y Alimentación. (SAGARPA). (2019). Anuario estadístico
de la producción agrícola. Documento consultado en línea. 14 de enero de 2020.
[Link]
14. Torres G. R., Pérez N. C., Suárez C. N. (2003). Influencia de la inoculación de rizobacterias
sobre la germinación de semillas de frijol común (Phaseolus vulgaris L.) Centro Agrícola, año
30, no.2, abril-junio. P.p. 53-60
15. Van Bruggen A. H. C., Whalen C. H., Arneson P.A. (1986). Emergence, growth, and
development of dry bean seedlings in response to temperature, soil moisture, and
Rhizoctonia solani. Phytopathology 76:568-572.
16. Vázquez E. y Torres S. (1995): Fisiología Vegetal. Ed. Pueblo y Educación, La Habana Cuba,
pp. 278-455.

TOMO II BIOTECNOLOGÍA Y CIENCIAS AGROPECUARIAS - PÁGINA 45

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EFECTO DEL TE DE COMPOST EN TOMATE (LYCOPERSICUM ESCULENTUM MILL.) BAJO

CONDICIONES DE INVERNADERO.
Oscar Gilberto Villanueva1, Beatriz Betancourt Chaidez2 y José Natividad Uribe Soto3

1Instituto Tecnológico del Valle del Guadiana, 2 Instituto Tecnológico del Valle del Guadiana,
3Instituto Politécnico Nacional-CIIDIR Durango.

ita1_72@[Link]

RESUMEN
En México, el tomate es la principal hortaliza, genera cuantiosos ingresos, empleos y un alto valor
nutritivo para la dieta. El uso indiscriminado de fertilizantes convencionales afectaal suelo en el que
se cultiva, parte de los nutrimentos son lixiviados con la lluvia y/o sistemas de riego, contaminando
cuerpos de agua superficiales así como los mantos freáticos. Esto obliga a buscar alternativas de
nutrición vegetal, que no generen un impacto ambiental, como lo son los biofertilizantes que
contribuyen a mejorar las características físicas, químicas y biológicas del suelo. Ante este escenario,
el propósito del presente trabajo fue evaluar el efecto de tres dosis de té de compost y un fertilizante
convencional en tomate (Lycopersicum esculentum Mill.). El trabajo se realizó en el área de
invernaderos del CIIDIR-IPN Unidad Durango. Estableciéndose bajo un diseño experimental
completamente al azar con doce repeticiones. Donde las variables evaluadas fueron: desarrollo de
planta, rendimiento y calidad de fruto, pruebas bromatológicas de fruto, al igual que pruebas
microbiológicas para cuantificar UFC/g-suelo de microorganismos presentes en el suelo. Los datos
se evaluaron con un ANOVA, y se aplicaron pruebas de medias Tukey. Los resultados obtenidos
muestran diferencias significativas, las plantas más desarrolladas se obtuvieron con el tratamiento 4
con 2.95 m. de altura. El rendimiento mayor con 432.06 g. se muestra en el tratamiento testigo con
fertilización convencional. Los valores promedio de UFC/g-suelo se observó un aumento de
bacterias, hongos y actinomicetos, conforme se aplicó él te de compost. Si bien en los casos de
mayor desarrollo y rendimiento se obtuvieron con el tratamiento de fertilización convencional, los
tratamientos con té de compost muestran rendimientos y tamaños de fruto atractivos comercialmente
y promovió el aumento de los microorganismos en el suelo, lo que permite recomendar el uso el té
de compost ya que con el tiempo enriquecer los procesos biogeoquímicos del suelo mejorando sus
condiciones en beneficio de la fertilidad del mismo.

INTRODUCCION
El Solanum lycopersicum, es el nombre científico de la hortaliza mundialmente conocida como
a e, e ef de e a e, d ca e e g a h a .E e a g a a edad de
especies como: bola, cherry o cereza, guaje o saladette, jitomatillo (SACSA, 2017).
El tomate es una de las especies hortícolas más importantes, genera divisas, fuentes de empleo y
un alto valor nutritivo para la dieta. Es la hortaliza que ocupa la mayor superficie sembrada en todo
el mundo. De las diversas hortalizas que se explotan a nivel nacional, el tomate es la más importante,
tanto por su superficie de siembra, como por el valor de su producto; además es una planta que
tiene un rango de adaptabilidad muy amplio ya que se cultiva en clima templado y tropical de casi
toda la república Mexicana (López, 2003).
La producción de tomate bajo condiciones de invernadero va en aumento, y con ello el uso de
pesticidas químicos, fungicidas, herbicida y fertilizantes que proporcionan la nutrición necesaria para
obtener grandes volúmenes de producto final. Lo anterior implica, acumulación de residuos
contaminantes en frutos, elevados costos de producción y daño ambiental potencial. La fertilización
orgánica se distingue como una alternativa a la producción más limpia de cultivos. Así mismo, al
utilizar insumos de bajo costo, se reducen los costos de producción (Tobar, 2016).
Una de las deficiencias en la aplicación de la tecnología de fertilizantes orgánicos, es la falta de
evidencias demostrables al agricultor, de los efectos benéficos de estos insumos en la agricultura.
Por lo cual, en el presente trabajo se propuso la evaluación de diferentes dosis de Té de composta
para la producción de tomate, comparado con un testigo fertilizado de forma convencional, lo anterior
como una alternativa que implica menor impacto en los recursos de producción, suelo-agua-

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medioambiente, desde la perspectiva de las ventajas del uso de materiales orgánicos que ofrecen
evitar la contaminación de los medio de producción, así como promover la actividad microbiana.

PARTE EXPERIMENTAL
El presente proyecto de investigación se llevó a cabo en el área de invernaderos del Centro
Interdisciplinario de Investigación para el Desarrollo Integral Regional, Unidad Durango, ubicado en
a g e e c de ada : N24 06 03 , W 103 56 10 . C a d de 1870 .E c ae
clasificado como (Bs1k), semiseco templado con lluvias en verano, temperatura media anual 17.7°
y precipitación media anual de 480 mm. Temperaturas máxima y mínima de 38°C y -5°
respectivamente. Con domicilio en calle Sigma #109, fraccionamiento 20 de noviembre II.
El estudio se estableció bajo un diseño experimental completamente al azar con cuatro tratamientos
y doce repeticiones. En el Cuadro número uno, se describen los tratamientos. 1, 2 y 3 corresponden
al preparado de Té de composta con: composta, roca fosfórica, harina de roca, melaza y agua
mezclados en un bio-reactor con capacidad de 200 litros, de los cuales el tratamiento 1 corresponde
a la dosis de 200L/ha; el tratamiento 2 son 400 L/ha; el tratamiento 3, 600 L/ha y el tratamiento 4,
fungiendo como testigo, corresponde a la fertilización tradicional.

Cuadro 1 Tratamientos establecidos

Tratamiento Dosis
T1 200L/ha
T2 400L/ha
T3 600L/ha
Testigo Fertilización Inorgánica

Se estableció en una superficie de 250 m², en el cual previamente se habían realizado algunas
labores culturales, que fueron barbecho, rastreo, nivelación y se establecieron 4 camas, a doble
hilera con una separación entre cama y cama de 1.7 m (de centro a centro de cada cama), las líneas
con una separación de 40 cm y la distancia entre planta y planta de 40 cm.
Una vez que la plántula presento tres pares de hojas verdaderas y una altura de 12 a15 cm. se
trasplanto manualmente.
Antes de realizar el trasplante primero se sumergió la charola que contenía la plántula en un
recipiente con agua limpia para humedad el cepellón y facilitar la extracción de la plántula contenida
en la charola. En seguida, en la cama de trasplante, se realizaron orificios con una profundidad de
10 cm aproximadamente, después se prosiguió con la colocación de la plántula en los orificios
previamente preparados dándole un pequeño apretón para que quede firme la plántula para evitar
burbujas con aire y sin llegar a compactar demasiado el suelo y la raíz de la misma.
El tutorado se llevó a cabo después del trasplante cuando la planta presento alrededor de 25 a 30
cm de altura; para dar soporte a la planta durante su ciclo productivo.
La poda fue esencial a lo largo de todo el ciclo, consistió en la eliminación de los brotes o chupones
que salieron de las axilas de las hojas del tallo. Durante esta actividad se cuidó no cortar el brote
apical que contiene el punto de crecimiento.
La fertilización para el testigo se realizó de acuerdo a los requerimientos del cultivo de tomate de
crecimiento indeterminado, utilizando 2.1 0.7 4.4 2.3 0.4 Kg de N,P2O5, K2O, Ca y Mg
respectivamente , para la elaboración de la solución nutritiva se utilizaron: ácido nítrico, ácido
fosfórico, cloruro de potasio, nitrato de calcio, fosfato mono amónico, sulfato de magnesio y
micronutrimentos, grado fertilizante, aplicados en disoluciones a través de un inyector tipo Ventury
de 3 4 de pulgada.
El Té de composta es el extracto liquido de composta que contiene microorganismos benéficos y
nutrientes que le aportan a los cultivos vitalidad y fuerza para poder hacer frente a enfermedades y
plagas, fortalece el sistema inmunológico de las plantas.

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Para la elaboración del Té de composta, se utilizó un biorreactor, el cual cuenta con bomba de aire,
que se encarga de inyectar oxígeno para la facilitación de la reproducción de bacterias aerobias, así
como un termostato que mantiene una temperatura entre 22°-32°.
La implementación de un catalizador, en este caso se usó melaza, permite la proliferación de
microorganismos benéficos que descomponen la composta así como de los minerales que se
suministran, dejándolos de manera asimilable para las plantas.
Una vez que está en funcionamiento el biorreactor, es importante prestar atención al tamaño
adecuado de la burbuja con el fin de proporcionar una alta concentración de oxígeno en el agua.
El proceso de fermentación dura entre de 4 a 7 días, esto depende del momento que desaparezcan
las burbujas lo cual nos indicó la maduración del material.
Se aplicó el Té de composta de lunes a viernes, en el sistema de riego por goteo.
Las aplicaciones foliares fueron de coadyuvantes ABIOCRE-C® y [Link]® los miércoles
y viernes.
El invernadero en donde se realizó el presente estudio es de tipo pasivo, por ello las condiciones de
temperatura y humedad relativa se controlaron de forma mecánica durante todo el ciclo del cultivo,
con la apertura y cierre de ventilas para proteger el cultivo. Esto con la finalidad de mantener dentro
del invernadero condiciones de clima cercana a la óptima.
Se realizaron análisis bromatológicos para la obtención de materia seca, humedad, proteína, grasa,
ceniza y fibra cruda por la técnica de Tejada (1983).
Los análisis microbiológicos se realizaron de acuerdo al Manual de laboratorio de ecología
microbiana (Soto, 1996) haciendo una comparación cuantitativa de poblaciones microbianas a través
de disoluciones seriadas.
Los datos obtenidos de las diferentes variables de respuesta se procesaron mediante el análisis de
varianza (ANOVA) con el 95% de probab dad e a ca eba de ed a T e ( 0.05)
utilizando el Software SPSS versión 22.

RESULTADOS
A continuación se muestran los resultados del análisis bromatológico.
Cuadro 2. Resultados del análisis bromatológico

Tratamiento % Humedad % MS % Proteína % Grasa % Ceniza % F.C

1 90.25 9.07 0.98 0.25 0.35 0.98
1.07
2 90.92 9.08 0.88 0.25 0.35 1.38
0.98
3 91.63 8.36 0.98 0.17 0.39 1.04
1.07
Testigo 91.03 8.96 0.088 0.25 0.38 2.51
0.088

En donde MS= materia seca F.C= Fibra cruda.

En relación al análisis bromatológico, el Cuadro 2, nos muestra que el tratamiento 3 contiene mayor
humedad, seguido del tratamiento testigo, las menores humedades se encuentra en los tratamientos
1 y 2 los resultados están de acuerdo a Sánchez (2012), el cual menciona que los productos
orgánicos tienen más consistencia debido a una menos cantidad de agua y una mayor cantidad de
nutrientes. El mayor porcentaje de materia seca se observa en los tratamientos 1 y 2 con 9.07 y 9.08,
respectivamente, mientras que el menor porcentaje se obtiene en el tratamiento 3. Los tratamientos
1, 2 y 3, correspondientes a té de composta, aparecen con mayor porcentaje de proteína que el
tratamiento químico con 0.98, 0.98, 1.07, respectivamente y el menor porcentaje se muestra en el
tratamiento 4, con un 0.088 %. En la grasa los tratamientos 1, 2 y testigo mantienen los mismos
porcentajes mientras que en el tratamiento 3 se obtiene el más bajo. La ceniza se muestra en mayor
porcentaje en el tratamiento 3, seguido del tratamiento 4 y es igual en los tratamientos 1 y 2. La fibra
cruda se observa en mayor porcentaje en el tratamiento testigo, seguido del tratamiento 2, 3 y 1,

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respectivamente. Bajo condiciones normales de cultivo, los frutos de tomate contienen en promedio
94% de agua, 1%de proteína cruda y 0,6% de minerales, expresados como cenizas (Casierra et al,
2007).
A continuación, se muestran los valores promedio de UFC/g suelo de las mediciones, donde se
observó un aumento de microorganismos conforme se aplicó el té de composta.
Los microorganismos del suelo liberan compuestos promotores del crecimiento vegetal (Fracchia,
2002). Forman parte de la materia orgánica e intervienen en los procesos de mineralización de
nutrientes (Acuña et al. 2006). Fijan nitrógeno atmosférico, descomponen residuos orgánicos y
aportan nutrientes al suelo (Hernandez et al. 2005).

Figura 4 Hongos y levaduras

De acuerdo a la prueba de rango múltiple de Duncan (p<0.05) en la variable hongos y levaduras, al

inicio del experimento sin la presencia del té de composta en el suelo se cuantificaron 82.8 UFG/g
suelo, en la primera aplicación del biofertilizante se observó un incrementó con 89.6 UFG/g suelo y
en la aplicación final incrementó con 126.3 UFC/g suelo. Autores como Fracchia-Sebastian, (2002)
reportan que los hongos aportan la mayor biomasa microbiana al suelo. Otros autores como
Sevillano et al. (2006) mencionan que la posibilidad de que predominen los hongos o el grupo
bacterias actinomicetos depende de las condiciones del suelo, especialmente del pH y del contenido
de humedad. Autores como Fracchia -Sebastian, (2002), señalan que algunos hongos pueden
asimilar entre el 30 y 50% del carbono presente en la materia orgánica que descomponen, sintetizan
compuestos polifenólicos, contribuyendo a la formación de la materia orgánica. Promueven la
agregación de partículas, mejorando la estructura del suelo, lo que favorece una mejor aireación del
mismo que beneficia el crecimiento vegetal.

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Figura 5 Bacterias

De acuerdo a la prueba de rango múltiple de Duncan (p<0.05) en la variable bacterias totales, al

inicio del experimento sin la presencia del té de composta en el suelo se cuantificaron 83.8 UFC/g
suelo, en la primera aplicación se observó un incrementó con 119.9 UFC/g suelo y en la aplicación
final hubo un incremento considerable con 178.5 UFC/g suelo. Autores como Aguilar et al. (2003),
señalan que las ventajas de incrementar bacterias en el suelo, son que al asociarse con las plantas
aumentan su crecimiento y desarrollo, también las protegen contra microorganismos patógenos.
Otros autores como Julca et al. (2006), mencionan que las bacterias son las encargadas de la
oxidación del amoniaco a nitratos y descomponen la materia orgánica. Autores como Acuña, (2006)
reporta que las bacterias descomponen y mineralizan los residuos orgánicos. Mediante su
metabolismo liberan sustancias como enzimas, proteínas, reguladores de crecimiento, metabolitos
secundarios y algunos nutrientes. Los beneficios en los cultivos son el incremento de raíces y una
contribución de elementos para el desarrollo y producción.

Figura 6 Actinomicetos

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De acuerdo a la prueba de rango múltiple de Duncan (p<0.05) en la variable actinomicetos totales al

inicio del experimento sin la presencia del té de composta en el suelo se cuantificaron 57.4 UFG/g
suelo, en la primera aplicación intermedia se observó un incremento con 90.0 UFG/g suelo y en la
aplicación final hubo un incremento considerable con 323.9 UFC/g suelo. Autores como Loaiza et al.
(2013) menciona que los actinomicetos son fijadores de nitrógeno, producen metabolitos
secundarios, degradan la materia orgánica y promueven el crecimiento vegetal. Otros autores como
Jimenez, (2010) señala que controlan patógenos, producen sideróforos, ácido indol acético,
giberelinas y solubilizan fosfatos.
A continuación se muestran los resultados del análisis de varianza en cuanto a las variables de
crecimiento y desarrollo de la planta.
Dentro de los estudios estadísticos realizados a las variables de respuesta, en todos los casos se
observan diferencias, en el caso de Altura de planta, longitud de hoja, y frutos por racimo con
diferencias altamente significativas y es significativa en el caso del diámetro de tallo. El uso de
bacterias fijadoras de nitrógeno ayudan a la planta a llevar a cabo los procesos metabólicos y
fisiológicos de tal forma que pueden expresar su máximo potencial genotípico y fenotípico que se ve
reflejado en un mejor desarrollo de la planta, mayor cantidad de raíces, tallos y ramas más gruesas,
hojas más turgentes, mayor cantidad y tamaño de frutos (Rosas, 2015).

Altura de Planta
4
a
3 b
c c
Metros

0
1 2 3 4
Tratamientos

Gráfica 1 Altura de planta

Se observa en la Gráfica 1, que el tratamiento cuatro, correspondiente al testigo, promovió las plantas
más altas, con una media de (2.95 m), en seguida el tratamiento tres, que corresponde a la dosis
alta de té de composta, mostró una altura 9.8% menor que el tratamiento cuatro con una media de
(2.66 m), y los tratamientos uno (2.11 m) y dos (2.13 m), sin diferencias estadísticas presentaron las
altura menores con la media más baja en el tratamiento uno.

Diámetro de Tallo
15 a
14.5
Milimetros

ab ab
14
13.5 b
13
12.5
1 2 3 4
Tratamientos

Gráfica 2 Diámetro de Tallo

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La comparación de medias de la Gráfica 2, permite observar que el tratamiento cuatro (14.52 mm)
es el que mostró plantas más gruesas. Los tratamientos dos (13.77 mm) y tres (13.84 mm) no
presentan diferencia estadísticas, mientras que el tratamiento uno (13.19 mm) tuvo la media más
baja.

Longitud de Hoja

50
a
b b
40 c
Centimetros

30
20
10
0
1 2Tratamientos3 4

Grafica 2 Longitud de Hoja

La Grafica 3, muestra los resultados del estudio de comparación de medias de la longitud de hoja,
en la cual se puede observar que el tratamiento que presentó las hojas más largas es el cuatro (40.54
cm) 12% mayor que el tratamiento tres que es el que le sigue. Los tratamientos tres y dos no son
diferentes estadísticamente quedando con (37.24 cm) y (35.63 cm) respectivamente. En el
tratamiento uno se registran las hojas de menor longitud con valores medios de (32.73 cm).

Frutos por Racimo

40
ab a
No. de Frutos

30 b
c
20
10
0
1 2 3 4
Tratamientos

Grafica 3 Frutos por racimo

Como se mencionó anteriormente, para el presente estudio se tomaron en cuenta para su análisis
cinco racimos, de manera tal que para la variable frutos por racimo se encontró que el tratamiento
cuatro con (30.40) frutos, promovió el mayor número de frutos por racimo presentando la media más
alta con 6.08 frutos y el tratamiento tres, el cual es estadísticamente igual al testigo, con 5.67 frutos
por racimo, los tratamientos con los valores medios más bajos fueron el uno (19.06) 3.8 y dos (24.58)
con 4.9 frutos, como se muestra en la gráfica 4.
A continuación se muestran los resultados del análisis de varianza y las pruebas de medias para las
variables diámetro polar, diámetro ecuatorial, rendimiento y grados brix.
Con base en los resultados del análisis de varianza, se observa que existe diferencia altamente
significativa en las variables de diámetro polar, diámetro ecuatorial y rendimiento, en el caso de la

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variable grados brix no se observan diferencias estadísticas. Para diferenciar las medias de las
variables de respuesta entre los tratamientos, se realizaron análisis de comparación de medias
Tukey con el 95% de confianza.
De los resultados obtenidos de las variables anteriormente mencionadas se muestra, que el
tratamiento inorgánico obtuvo los valores más altos con respecto a las dosis de té de composta.
Rangel et al. (2011), obtuvo mayores rendimientos con la solución inorgánica con respecto a las
fuentes orgánicas, pero estas últimas se mostraron como una buena alternativa económica para la
obtención de resultados muy aceptados de cosecha. En el mismo sentido Rodríguez et al. (2009) en
su trabajo obtuvo que no se presentaron diferencias significativas entre los tratamientos para las
variables de rendimiento y calidad, recomendando al final del estudio que los tratamientos orgánicos
son una alternativa económica para el agricultor.

Diámetro Polar
100 a
b
c
Milimetros

d
50

0
1 2 3 4
Tratamientos

Grafica 4 Diámetro Polar

Para la variable diámetro polar se puede observar en la Gráfica 5, que el tratamiento que muestra
los frutos más grandes con una media de (90.13 mm) es el cuatro, seguido del tratamiento tres (79.04
mm), en el tratamiento dos se registró con (69.27 mm), y por último se observan los frutos más
pequeños en el tratamiento uno con (55.76 mm).

Diámetro Ecuatorial
80 a
b
c
Milimetros

60 c
40
20
0
1 2 3 4
Tratamientos

Grafica 5 Diámetro ecuatorial

En la Gráfica 6, se muestra los valores medios de la variable diámetro ecuatorial, esta prueba de
medias muestra una vez más que la media más alta se presentó en el tratamiento cuatro con (68.21),
seguido del tratamiento tres con (60.94), en el caso de los tratamientos uno y dos no se observan
diferencia estadísticas quedando con valores de (48.66) y (52.34), respectivamente.

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Rendimiento
500 a
400 b

Gramos
300 c
c
200
100
0
1 2 3 4
Tratamientos

Grafica 6 Rendimiento

La Grafica 7, muestra los valores medios de la variable rendimiento, y en ella se observa, en cuanto
a esta variable, que el tratamiento con la media más alta fue el cuatro con (432.92 gr.), tomando en
cuenta que el ciclo completo se cosecharon 12 racimos el rendimiento es de 14.0 kg m 2-1. En seguida
se observa el tratamiento tres con (333.46gr.) 10.8 kg m2-1 y para los tratamientos dos (251.25gr.) y
el tratamiento uno con (208.20 gr.), en estos últimos no se observan diferencias estadísticas con
rendimientos de 8.14 kg m2-1 y 6.75 kg m2-1, respectivamente.

Grados Brix
5.2 a a
Grados Brix

5.1

5 a
a
4.9

4.8
1 2 3 4
Tratamientos

Grafica 7 Grados Brix

Como se observa en la Grafica 8, no se muestran diferencias significativas en cuanto a la variable

de Grados Brix, que es la cantidad de azúcar presente en el fruto. Sin embargo cabe mencionar que
todos los tratamientos, se encuentran dentro de los requerimientos tanto para la industria como su
consumo en fresco para este parámetro.

CONCLUSIONES
De acuerdo a los resultados obtenidos de las pruebas implementadas, se puede concluir que el uso
del té de composta promovió:
Incremento en la microbita microbiana
Promovió plantas vigorosas
Reducir el uso de fertilizantes químicos
El tratamiento químico obtuvo los rendimientos más altos, sin embargo en los tratamientos con té de
composta se tienen tamaños de fruto aceptables en el mercado.
El uso del té de composta, a pesar de no tener en este estudio los elementos de un análisis beneficio-
costo, sentimos que representa una alternativa de nutrición más económica y con criterios de
producción sustentables, permitiendo disminuir los costos de producción pues ya que es muy
conocido que en los últimos años se ha reducido la rentabilidad de los productores debido, entre

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otras cosas, a los precios de los fertilizantes que han ido a la alza al cotizarse en dólares. Así mismo
se sabe que el uso indiscriminado de fertilizantes químicos disminuye la respiración, transpiración,
fotosíntesis de la planta y, en suelos con poca materia orgánica, promueven la destrucción de los
microorganismos benéficos del suelo, contrario a los resultados obtenidos en el presente estudio.

BIBLIOGRAFIA
1. Acuña, O., Peña, W., Serrano, E., Pocasangre, L., Rosales, F., Delgado, E., . . . Perez
Moreno, J. (2006). La importancia de los microorganismos en la calidad y salud de suelos. .
ACROBAT.
2. Casierra Posada, F., Pachon, C., & Medina, R. (2007). Analisis bromatlogico en frutos de
tomate (Lycopersicum esculentum Mill) afectados por salinidad. U.D.C.A Actualidad &
Divulgacion Cientifica, 95-104.
3. Fracchia, S. (2002). Hongos saprotrofos del suelo como. Buenos Aires: Facultad de Ciencias
Exactas y Naturales.
4. Hernandez, I. T. (1983). Manual de laboratorio para analisis de ingredientes utilizados en la
alimentacion animal. Instituto Nacional de Investigaciones Pecuarias.
5. Julca Otiniano, A., Meneses Florian, L., Blas Sevillano, R., & Bello Amez, S. (2006). La
materia organica, importancia y experiencia en su uso en la agricultura. Idesia(Arica).
6. López, R. R. (2003). Universidad Autonoma Agraria Antonio Narro. Obtenido de
[Link]
7. Rosas, D. R. (2015). Biofertilizantes: La solucion a la productividad en el campo. Texcoco.
8. SACSA. (17 de Octubre de 2017). Obtenido de [Link]
jitomate/
9. Tobar, V. (2016). Determinacion del efecto de un fertilizante organico liquido para el cultivo
de tomate Solanum Lycopersicum como alternativa ecologica de fertilizacion, en el municipio
de Chachagui. San Juan de Pasto: Universidad Nacional Abierta y a Distancia "UNAD".

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SILICIO EN EL CRECIMIENTO VEGETATIVO DE PLANTAS DE ARROZ MORELOS-A98

Sara Monzerrat Ramírez-Olvera1, Fernando Carlos Gómez-Merino1, Libia Iris Trejo-Téllez1, Lucero
del Mar Ruíz-Posadas1, Gabriel Alcántar-González1, Crescenciano Saucedo-Veloz1, Leonardo
Hernández-Aragón2, Leticia Tavitas-Fuentes2.

1Colegio de Postgraduados Campus Montecillo. Km 36.5 Carretera México-Texcoco. 56230

Montecillo, Texcoco, Estado de México. 2Instituto Nacional de Investigaciones Forestales, Agrícolas

y Pecuarias, Campo Experimental Zacatepec. E-mail: [Link]@[Link]

RESUMEN
El silicio (Si) es un metaloide, y es el segundo elemento más abundante en la corteza terrestre,
después del oxígeno. Su aplicación a plantas ha mostrado efectos benéficos en diversas especies
tanto monocotiledóneas como dicotiledóneas, en condiciones normales y bajo estrés biótico o
abiótico. En este contexto, el objetivo de esta investigación fue evaluar el efecto de la aplicación de
0, 1 y 2 mM Si en el crecimiento de plantas de arroz (Oryza sativa) cv. Morelos A-98. Las semillas
utilizadas en esta investigación se obtuvieron del banco de germoplasma del Instituto Nacional de
Investigaciones Forestales, Agrícolas y Pecuarias. Las cuales germinaron en oscuridad por 3 d, y se
colocaron en luz natural por 11 d. Posteriormente se trasfirieron a un sistema hidropónico en solución
Magnavaca (1 mM KCl, 1.5 mM NH4NO3, 1 mM CaCl2 2H2O, 45 µM KH2PO4, 200 µM MgSO4 7H2O,
500 µM Mg(NO3)2 6H2O, 155 µM MgCl2 6H2O, 11.8 µM MnCl2 4H2O, 33 µM H3BO3, 3 µM ZnSO4
7H2O, 0.8 µM CuSO4 5H2O, 1 µM NaMoO4 2H2O y 77 µM Fe-EDTA) por 7 d. Después, se reemplazó
por solución Yoshida (1.43 mM NH4NO3, 1.00 mM CaCl2 2H2O, 1.64 mM MgSO4 7H2O, 1.32 mM
K2SO4, 320 µM NaH2PO4, 100 µM Fe-EDTA, 7.99 µM MnCl2 4H2O, 0.15 µM ZnSO4 7H2O, 0.15 µM
CuSO4 5H2O, 0.08 µM (NH4)6Mo7O24 4H2O y 1.39 µM H3BO3). A los 14 después del trasplante (ddt),
se adicionaron los tratamientos junto a la solución nutritiva, los que consistieron en 0, 1, 2 mM Si a
partir de SiO2. A los 35 ddt las plantas se retiraron se la solución nutritiva y se registró la altura de
vástago longitud de raíz, número de macollos y peso de biomasa fresca. Después las plantas se
colocaron en una estufa de aire forzado por 72 °C por 72 h, y se registró el peso de biomasa seca.
Finalmente, se calculó la altura, longitud de raíz y biomasa relativa, así como el crecimiento relativo
de macollos, tomando como 100% el crecimiento obtenido en el tratamiento testigo (sin aplicación
de Si). Con los datos se realizó un análisis de varianza y prueba de comparación de medias (Duncan,
0.05). La altura de vástago y longitud relativa de raíz, así como el crecimiento relativo de macollos y
peso de biomasa seca de plantas no se modificó bajo los tratamientos 1 y 2 mM Si, en relación con
el tratamiento testigo. Mientras que la adición de 1 mM Si mejoró significativamente el peso relativo
de biomasa fresca, sin observar efectos significativos con la concentración 2 mM. La aplicación de
Si a plantas de arroz Morelos A-98, no modifica la altura de vástago, la longitud de raíz, el número
de macollos y el peso de biomasa seca, e incrementa el peso de biomasa fresca.

INTRODUCCIÓN
El arroz (Oryza sativa) es un cultivo de suma importancia para la población mundial (Seck et al.,
2012). Actualmente es el tercer cereal más producido en el mundo, precedido por el maíz y el trigo
(FAOSTAT, 2020). Además, el arroz es fuente de carbohidratos, proteínas, aminoácidos, hierro y
vitaminas de importancia en la dieta humana (Seck et al., 2012). Por tanto, es un cultivo estratégico
en la seguridad alimentaria, y contra la desnutrición (Beyer, 2010).
México se ubica en el número 20 en el consumo de arroz en el mundo (AMIS, 2020). Actualmente
se produce en los estados de Campeche, Nayarit, Michoacán, Veracruz, Colima, Jalisco,
Tamaulipas, Tabasco, Morelos, Chiapas, Guerrero y el Estado de México (SIAP, 2020). Sin embargo,
la producción nacional no abastece la alta demanda del grano, por tanto, México se encuentra en la
posición número diez, de los países como mayor importación de arroz, cuyas importaciones para el
año 2017, superaron en 4.45 veces la producción nacional (AMIS, 2020).
Por lo que es necesario buscar alternativas que mejoren las características de la planta para
incrementar el rendimiento (Fageria, 2007), donde la nutrición vegetal es de suma importancia. En
particular los elementos beneficos, los cuales, a pesar de no ser considerados esenciales,

TOMO II BIOTECNOLOGÍA Y CIENCIAS AGROPECUARIAS - PÁGINA 56

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promueven el crecimiento y mejoran las características de las plantas, dentro de este grupo se
encuentra el silicio (Si) (Trejo-Téllez et al., 2016).
El Si es metaloide sólido de color gris oscuro, brillante de apariencia metálica, y compone el 25.7%
de la corteza terrestre, siendo el segundo elemento más abundante después del oxígeno (Daub y
Seese, 1996). Su aplicación ha mejorado la altura de trigo (Triticum aestivum) (Abro et al., 2009); la
longitud de raíz de arroz (Oryza sativa) (Chen et al., 2011), y borraja (Borago officinalis) (Torabi et
al., 2012); el peso de biomasa fresca y seca de plantas canola (Brassica napus), algodón (Gossypium
hirsutum), trigo (Mehrabanjoubani et al., 2015), y tomate (Solanum lycopersicum) (Zhang et al.,
2018). Sin embargo, son pocos los estudios de su efecto en cultivares mexicanos de arroz. Por tal
motivo el objetivo de esta investigación fue evaluar el efecto de la aplicación de 0, 1 y 2 mM Si en el
crecimiento de plantas de arroz cv. Morelos A-98

PARTE EXPERIMENTAL
Material vegetal
Semillas de arroz cv. Morelos A-98 se utilizaron en esta investigación, las cuales se obtuvieron del
banco de germoplasma del Instituto de Nacional de Investigaciones Forestales, Agrícolas y
Pecuarias (INIFAP), unidad Zacatepec, Morelos, México.

Método de cultivo y tratamientos

Las semillas se germinaron en medio Murashige & Skoog suplementado con agarosa al 3%, y se
colocaron en oscuridad por 3 d, posteriormente a luz natural por 11 d. A los 14 d de edad las plantas
se trasfirieron a un sistema hidropónico con solución nutritiva Magnavaca (1 mM KCl, 1.5 mM
NH4NO3, 1 mM CaCl2 2H2O, 45 µM KH2PO4, 200 µM MgSO4 7H2O, 500 µM Mg (NO3)2 6H2O, 155
µM MgCl2 6H2O, 11.8 µM MnCl2 4H2O, 33 µM H3BO3, 3 µM ZnSO4 7H2O, 0.8 µM CuSO4 5H2O, 1 µM
NaMoO4 2H2O y 77 µM Fe-EDTA) por 7 d. Después, se reemplazó por solución Yoshida (1.43 mM
NH4NO3, 1.00 mM CaCl2 2H2O, 1.64 mM MgSO4 7H2O, 1.32 mM K2SO4, 320 µM NaH2PO4, 100 µM
Fe-EDTA, 7.99 µM MnCl2 4H2O, 0.15 µM ZnSO4 7H2O, 0.15 µM CuSO4 5H2O, 0.08 µM (NH4)6Mo7O24
4H2O y 1.39 µM H3BO3). A los 14 después del trasplante (ddt), se adicionaron los tratamientos junto
a la solución nutritiva, los que consistieron en 0, 1, 2 mM Si a partir de SiO 2.

Determinación de variables de crecimiento

A los 35 ddt las plantas se retiraron de la solución nutritiva y se registró la altura de vástago, longitud
de raíz, número de macollos y peso de biomasa fresca. Después las plantas se colocaron en una
estufa de aire forzado (HCF-125, Riossa, México) por 72 °C por 72 h, y se registró el peso de biomasa
eca e a ba a a a a ca (Oha , Ad e e P , USA). F a e e, e de e a a
altura, longitud de raíz y biomasas fresca y seca de planta; asimismo, se estimó la biomasa relativa,
así como el crecimiento relativo de macollos, tomando como 100% el crecimiento obtenido en el
tratamiento testigo (sin aplicación de Si).

Análisis estadístico
Con los datos obtenidos se realizó un análisis de varianza y prueba de comparación de medias
(Duncan, 0.05), con el paquete estadístico SAS 9.3 (SAS Institute, 2011).

RESULTADOS
La aplicación de Si a plantas ha mostrado promover la elongación celular, lo que se refleja en un
aumento de tamaño (Hossain et al., 2002). Se ha reportado que el tratamiento con ácido silícico a
plantas en semillero de arroz cv. Koshihikari, promueve la elongación celular, estimulando el
crecimiento (Mohammad et al., 2002). Sin embargo, los resultados de esta investigación no
mostraron efectos significativos en la altura relativa de plantas (Figura 1a).

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Altura relativa de vástago (%)

120
(a) 120 (b)

Longitud relativa de raíz (%)

a a a a a a
100 100

80 80

60 60

40 40

20 20

0 0
1 0 2 0 1 2
Si (mM) Si (mM)
Figura 1. Altura relativa de vástago (a) y longitud relativa de raíz (b) de plantas de arroz tratadas
con 1 y 2 mM Si. Medias ± DE con letras distintas en cada subfigura indican diferencias
estadísticas entre tratamientos (Duncan, P 0.05).

La longitud relativa de raíz, no se modificó significativamente bajo ningún tratamiento evaluado

(Figura 1b). En contraparte, se ha reportado que la aplicación de 1.5 mM Na2SiO3 a plantas de borraja
incrementó significativamente la longitud de raíz (Torabi et al., 2012). Así también, el tratamiento con
2.5 mM K2SiO3 a plantas de tomate aumentó la longitud y volumen de raíz (Zhang et al., 2018).
El número de macollos es uno de los factores clave en el rendimiento de arroz (Wang y Li, 2011).
Sin embargo, la aplicación de 1 y 2 mM Si, no modificó significativamente el crecimiento relativo de
macollos (Figura 2).

120 a
a a
Crecimiento relativo de

100
macollos (%)

80

60

40

20

0
0 1 2
Si (mM)
Figura 2. Crecimiento relativo de macollos de plantas de arroz tratadas con 1 y 2 mM Si. Medias ±
DE con letras distintas indican diferencias estadísticas entre tratamientos (Duncan, P 0.05).

El peso de biomasa fresca es un indicador indirecto del contenido de agua presente en el tejido, en
esta investigación el peso relativo de biomasa fresca aumentó en 11.64% con el tratamiento 1 mM
Si (Figura 3a). De manera coincidente se ha informado que la aplicación de Si mejora el contenido
de agua, al incrementar la expresión de proteínas acuaporinas, así como la conductancia hidráulica
de la raíz (Chen et al., 2018).

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140 140
(a) (b)
Biomasa fresca relativa

a a a
120 120

Biomasa seca relativa

b a
de planta (%)

b
100 100

de planta (%)
80 80

60 60
40 40
20 20
0 0
1 0 2 0 1 2
Si (mM) Si (mM)
Figura 3. Biomasa fresca relativa (a) y biomas seca relativa (b) de plantas arroz tratadas con 1 y 2
mM Si. Medias ± DE con letras distintas en cada figura indican diferencias estadísticas entre
tratamientos (Duncan, P 0.05).

El Si mejora la trasmisión de luz en las hojas, lo que indirectamente se relaciona con la fotosíntesis
y se refleja en un aumento de la biomasa seca (Detmann et al., 2012). En contraparte, los resultados
de esta investigación no mostraron efectos significativos en el peso relativo de biomasa seca de
planta, después de la aplicación de 1 y 2 mM Si (Figura 3b).

CONCLUSIONES
El tratamiento con 1 y 2 mM Si a plantas de arroz Morelos A-98, durante el crecimiento vegetativo,
no modifica la altura relativa de planta, la longitud relativa de raíz, el crecimiento relativo de macollos,
así como el peso relativo de biomasa seca de planta. En tanto, que la concentración 1 mM Si, mejora
el peso de biomasa fresca de planta.

BIBLIOGRAFÍA
1. AMIS, 2020, The Ag c a Ma e I f a S e (AMIS) , Disponible en
[Link] Consultado mayo 2020.
2. D. Che , S. Wa g, L. Y , X. De g, H d e silicon mediate plant water uptake and loss
de a e def c e c ? , F P a Sc . V . 9, 2018, . 281.
3. F. T ab , A. Ma d, S. E e ha , Effec f e ge c ge a a d eed g
establishment in Borago officinalis L. , J. Med. P a Res. Vol. 10, 2012, pp. 1896-1901.
4. FAOSTAT, 2020, F d a d ag c e ga a c ae a ca da aba e .
Disponible en [Link] Consultado mayo 2020.
5. K. C. Detmann, W. L. Araújo, S. C. Martins, L. M. Sanglard, J. V. Reis, E. Detmann, F. M.
DaMa a, S c c ea e g a e d, h ch, , e e a feed‐forward
stimulation of photosynthetic rates via enhanced mesophyll conductance and alters primary
e ab ce , Ne Ph . V . 196, 3, 2012, pp. 752-762.
6. L. I. Trejo-Téllez, F. C. Gómez-Merino, G. Alcántar-G e , Ee e be f c :
e c a dade ac e , In: Nutrición de Cultivos. Segunda Edición. Alcántar-
González G., Trejo-Téllez L. I., Gómez-Merino F. C. (eds.), Montecillo: Ed. Colegio de
Postgraduados, 2016, pp. 59-101.
7. M. T. H a , R. M , K. S ga, K. Wa aba a h , S. Ka a a, S. F , T. H , G h
promotion and an increase in cell wall extensibility by silicon in rice and some other Poaceae
eed g , J. P a Re . Vol. 65, 1, 2002, pp. 23-27.
8. N. K. Fage a, Y e d h g f ce , J. P a N . V . 30, 6, 2007, . 843-879.

TOMO II BIOTECNOLOGÍA Y CIENCIAS AGROPECUARIAS - PÁGINA 59

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9. P. A. Sec , A. D ag e, S. M ha , M. C. W e e , C ha feed he d 7: R ce , F d
Secur. Vol. 4, 1, 2012, pp. 7-24.
10. P. Beyer, G de R ce a d G de c f h a , Ne B ech . V . 27, 5,
2010, pp. 478-481.
11. P. Meh aba ba , A. Abd adeh, H. R. Sadegh , M. Aghda , S c affec
a ce a a d a a c a e f e e a , Ped sphere Vol. 25, 2, 2015,
pp. 192-201.
12. S. A. Ab , R. Q e h , F. M. S , A. A. M baha , G. S. Ja ha , Effec f c e e
g h a d e d f hea a , Pa . J. B . V . 41, 3, 2009, . 1385-1390.
13. SAS I e, S a ca A a S e e 9.3, U e G de , Ca , NC. 2011.
14. SIAP, 2020. Se c de I f ac Ag a e a a Pe ea, D be e
[Link] Consultado enero 2020.
15. T. H. Mohammad, M. Ryuji, S. Kouichi, W. Kazuyuki, K. Seiichiro, F. Shuhei, Y. Ryoichi, H.
Ta a , G h a da c ea e ce a e e b b c ce a d
e he P aceae eed g , J. P a Re . V . 115, 2002. . 23-27.
16. W. Che , X. Ya , K. Ca , J. Che , S c a e a e d gh ess of rice plants by improving
a ae a , h he a d ea e ab , B . T ace E e . Re .
Vol. 142, 1, 2011, pp. 67-76.
17. W. G. Da b, W. S. See e, Q ca , Ed a Pea Ed cac , S a ed c .
Naucalpan de Juárez, Estado de México, México. 1996, p. 560.
18. Y. Wa g, J. L , B a ch g ce , C . O . P a B . V . 14, 1, 2011, . 94-99.
19. Y. Zha g, S. H. I. Y , H. J. G g, H. L. Zha , H. L. L , Y. H. H , Y. C. Wa g, Be ef c a
effects of silicon on photosynthe f a eed g de a e e , J. I eg . Ag c.
Vol. 17, 10, 2018, pp. 2151-2159.

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REDUCIENDO LA DOSIS EFECTIVA DEL CISPLATINO USANDO NANOPARTÍCULAS DE ORO

COMO VEHÍCULO.
Marco Antonio González-López1, Elena Marcia Gutiérrez-Cardenas2, Cristhían Sánchez-Cruz3 y
José de Jesús Olivares-Trejo3

1Cátedra-CONACYT. Unidad de Oncología Torácica. Instituto Nacional de Cancerología

2Departamento Atención a la Salud. Universidad Autónoma Metropolita. Unidad Xochimilco.
2Posgrado en Ciencias Genómicas, Universidad Autónoma de la Ciudad de México.

marconyqfb@[Link]

RESUMEN
El cáncer es la segunda causa de muerte mundial con 8.8 millones de muertos en 2019. El
diagnóstico temprano, tamizaje, tratamiento y cuidados paliativos son necesarios. Sin embargo los
tratamientos actuales, como la quimioterapia, radioterapia y cirugía, son muy agresivos. Se continúa
administrando cisplatino a pacientes con tumores sólidos. El cisplatino actúa como un agente
alquilante con afinidad al DNA. Al unirse a los residuos de guanina y citosina impide los procesos de
replicación y transcripción del material genético teniendo como resultado la muerte celular por
apoptosis. Lamentablemente el cisplatino es incapaz de diferenciar entre células normales y
cancerosas por lo que elimina a ambas. Además se ha documentado que las células cancerosas
pueden desarrollar resistencia a este fármaco. Por otro lado, este anticancerígeno tiene serios
efectos secundarios sobre el paciente como nauseas, vómito y nefrotoxicidad. Ante esta situación
es necesario buscar nuevas alternativas de tratamiento que permitan reducir o eliminar los efectos
secundarios y así mejorar la calidad de vida de los pacientes y sus familias. La nanotecnología
ofrece soluciones al diseñar, construir, funcionalizar estructuras del tamaño de entre 1 y 100
nanómetros. Tiene diversas aplicaciones en la nanomedicina, bioseñalización, separación biológica,
imagenologia molecular y en terapia de cáncer. Sin embargo tiene limitaciones, en algunos casos
las nanopartículas pueden llegar a ser, por sus componentes, tóxicas, no selectivas e inestables.
Las nanopartículas de oro son importantes debido a la facilidad de su síntesis y su estabilidad
química. Así, se han utilizado en señalamiento, en imagenología y como acarreador de fármacos por
su baja toxicidad. El objetivo de esta investigación fue sintetizar una nanopartícula de oro que tenga
la capacidad de transportar el cisplatino y liberarlo en las células cancerosas. Material y métodos,
las nanopartículas (Np) fueron sinterizadas por reducción química, Se sintetizó una Np de oro
(AuNp), otra cubierta de polietilen glicol (AuNpPEG) y una más con CisPt (AuNpPEGCisPt), fueron
caracterizadas por UV/VIS, FTIR, TEM, DLS, SEM y EDS, posteriormente se determinó el efecto
citotóxico (IC50) sobre líneas celulares cancerosas a través de ensayos de MTT, se determinaron las
diferencias entre las diferentes Np administradas mediante un análisis ANOVA. Resultados,
encontramos que la IC50 del CisPt para las células de cáncer cervicouterino (HeLa) fue de
a ada e e 69.2 3.2 g/ L a IC50 de las NpAuPEGCisPt f e de 104.5 7.0 g/ L, e e
ca de c a de c ce g c (AGS) e a 286.5 2.5 g/ L de C P 97.2 5.4 g/ L
de NpAuPEGCisPt para obtener la misma IC50. Conclusiones, la cantidad de AuNpPEGCisPt
administrada es menor si se compara con el CisPt porque la Np contiene solamente un 7% de CisPt
lo que disminuye hasta 10 veces la cantidad administrada de este anticancerígeno.

INTRODUCCIÓN
A nivel mundial el aumento de los casos de cáncer es alarmante, datos de las Organización mundial
de la Salud (OMS 2020) indican que en el año de 2018 hubo aproximadamente 9.6 millones de
muertes debidas a esta enfermedad8. El tipo de cáncer que causa más muertes a nivel mundial es
de pulmón, seguido por el de hígado y estómago. En cuanto a México, según datos del INCan, la
principal causa de muerte a nivel general es el cáncer de pulmón, en el caso de las mujeres la
principal causa de muerte es el cáncer de seno y el cervicouterino, en el hombre es el de próstata
seguida por el de pulmón8.

TOMO II BIOTECNOLOGÍA Y CIENCIAS AGROPECUARIAS - PÁGINA 61

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TEORIA
El cáncer se considera como una enfermedad multifactorial por lo que puede desencadenarse por
factores ambientales como la exposición a ciertos compuestos y biológicos como la carga genética 8.
Desde este punto de vista se ha documentado que el cáncer es un cumulo de mutaciones que le
confieran a la célula la capacidad de crecer de manera descontrolada y no responder a los puntos
de control que se realizan en el ciclo celular, además adquiere la habilidad de auto regularse
mediante la expresión de receptores capaces de actuar sin la necesidad de recibir un estímulo por
parte de algún factor de crecimiento, de igual manera estas células escapan de la respuesta inmune
y de las señales de muerte celular programada 4. Su constante crecimiento les obliga a desarrollar
vasos sanguíneos con la finalidad de abastecerse de los nutrientes necesarios para su alta tasa de
metabolismo. En última instancia su desmedido crecimiento provoca que las células puedan
desprenderse de su nicho primario y viajar a través del torrente sanguíneo e invadir otras zonas
donde desarrollaran cáncer metastásico8.
El cáncer es una enfermada para la cual hay diferentes tratamientos, este se basa en el tipo de
cáncer y el estadio en el cual se encuentra, en términos generales los tratamientos son la cirugía, la
radioterapia y la quimioterapia2. Se pueden realizar combinación de los tratamientos. En cuanto a la
quimioterapia esta se basa en la administración de fármacos y compuestos que tienen la finalidad
de limitar el crecimiento de las células cancerosas1. Sin embargo al tratarse de células, estas cuentan
con la habilidad de resistir el tratamiento lo que provoca que el paciente recaiga y la enfermedad se
torne más seria. Además existen los efectos secundarios no deseados lo que conllevan a una mala
calidad de vida para el paciente. Se puede observar que a pesar de que se cuenta con el tratamiento
para el cáncer, los casos no disminuyen, por el contrario se pronostica que para el año 2040 se
tengan aproximadamente 16.3 millones de muertes por esta enfermedad8.
Ante esta situación es necesario buscar nuevas formas de administrar los fármacos ya existentes,
porque se ha visto que estos tienen el efecto que se desea pero pueden llegar a generare
resistencia6,7 y efectos secundarios3,5. Es por ello que nos hemos enfocado a disminuir la dosis
efectiva del compuesto cisplatino, con la finalidad de que ante una dosis disminuida las células
cancerosas no desarrollen resistencia y además evitar los efectos secundarios que conllevan las
dosis que actualmente se administran pero sin perder su efecto terapéutico.
Para lograr este fin nos hemos enfocado en la nanotecnología, la nanotecnología se dedica al diseño
y manipulación de la materia a nivel de átomos o moléculas, con fines industriales o médicos.
PARTE EXPERIMENTAL
Síntesis de nanopartículas.
El método que se empleó para la síntesis de nanopartículas de oro (AuNp) fue por reducción química.
En primer lugar se puso a calentar, en una relación 1:10 una solución 0.01 M de ácido
tetracloroaurico con agua miliQ, se dejó calentando hasta hervir, en este momento se adicionaran
18 mL de citrato de sodio 38.88 mM y se dejó hirviendo durante 15 minutos, al término de este tiempo
se puso a enfriar a temperatura ambiente y se conserva a 4°C hasta su uso. Posteriormente se
obtuvieron las AuNp cubiertas de poli etilen glicol (AuNpPEG), una tercer nanopartícula fue obtenida
al mezclar AuNp mas PEG y cisplatino (AuNpPEGCisPt).

Cultivo celular.
Las líneas celulares cancerosas que se trabajaron fueron HeLa, AGS y C6. Las células obtenidas se
emplearon para interaccionar con las nanopartículas y determinar la IC50.
Se partió de muestras congeladas. En una caja de cultivo de 25 cm 2 se adicionarán 5 mL de medio
de cultivo (DMEM Medio Eagle modificado de Dulbecco) suplementado con suero fetal bovino al 10%
y se depositaron 1x106 células, se incubarán a 37°C y CO2 al 5%.

Determinación de la IC50.
Esta metodología nos permitió conocer la dosis a la cual las nanopartículas eliminan a las células
cancerosas. En cajas de ELISA de 96 pozos se depositaron 4X10 4 células, se dejaron adaptar toda
la noche. Posteriormente se agregaron cantidades crecientes de las nanopartículas sintetizadas
AuNps, AuNpPEG y AuNpPEGCisPt (62.5, 125, 250, 500 and 1000) mg/mL. El control negativo

TOMO II BIOTECNOLOGÍA Y CIENCIAS AGROPECUARIAS - PÁGINA 62

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consistió en solamente crecer las células de cada tipo de cáncer en el medio de cultivo, el control
positivo se realizó con CisPt el cual se administró a dosis crecientes (62.5, 125, 250, 500 and 1000)
mg/mL. Al cabo de un día de interacción se determinó el efecto citotóxico mediante un ensayo de
reducción metabólica del MTT (bromuro de 3-(4,5-dimetiltiazol-2-ilo)-2,5-difeniltetrazol.

Caracterización de las nanopartículas sintetizadas

Las diferentes nanopartículas fueron caracterizadas por espectrometría de UV/VIS, espectrometría
de infrarrojo con transformada de Fourier (FTIR), Microscopia Electrónica de Transmisión (TEM),
Microscopia de barrido con espectroscopía de dispersión de energía de rayos X (SEM/EDS) y
Dispersión Dinámica de Luz (DLS).

Espectroscopia de luz ultravioleta/luz visible (UV/VIS)

El análisis se realizó en el equipo SPECTROstar nano BMG labtech, en una cubeta de cuarso se
depositaron 50 mL de cada nanopartícula y se analizó a una longitud de onda de entre 200 y 800
nm.

Espectroscopia Infrarroja con transformada de Fourier (FTIR)

50 mL de cada nanopartícula fueron analizadas en el equipo Two Perkin Elmer, los intervalos de
longitud de onda empleados fueron 4000cm-1 a 400 cm-1 con una resolución de 1.0 cm-1.

Microscopia Electrónica de Transmisión (TEM)

Se emplearon placas de cobre cubiertas de formvar, el equipo empleado fue el Transmission Electron
Microscope Philips Tecnai-10. Con una aceleración de 100 kV, el tamaño de nanopartícula se
determinó con el programa Soft Imaging System analySIS 3.0.

Microscopia Electrónica de barrido con Espectro de Energía Dispersiva (SEM/EDS)

Para determinar la microestructura y la composición atómica y química de las nanopartículas
sintetizadas. Las muestras se depositaron en una placa de aluminio de 7 X 12 mm y se depositaron
en la cámara de vacío del equipo Hitachi SU5000 SEM. La distancia entre la muestra y la fuente de
electrones fue de 10 cm. La energía utilizada fue de 20keV. Se determinó el tamaño de las
nanopartículas con el programa Image J versión 1.52ª.

Tamaño hidrodinámico y Potencial Z.

La técnica de Dispersión Dinámica de la Luz (DLS) se empleó para determinar el tamaño de partcula
y los valores del índice de polidispersión(PDI), se obtuvo el potencial Z de las diferentes
nanopartículas. Las muestras fueron resuspendidas en H 2O, medio de cultivo DMEM con suero al
10% y medio de cultivo DMEM sin suero. Los análisis se realizaron en el equipo Malvern Instrument
ZS90.

Análisis estadístico.
Los datos presentados fueron obtenidos por triplicado y se determinó la desviación estándar. Se
realizó un análisis de varianza (ANOVA) y un análisis comparativo por medio de la prueba Tukey.
Los valores menores a 0.05 se consideraron significantes. El análisis estadístico se realizó con el
programa GraphPad Prism versión 6.00 para Windows, GraphPad Software, La Jolla California USA,
[Link].

RESULTADOS
Las AuNp tienen un espectro UV/VIS a 519 nm, las AuNpPEG de 523 nm y las AuNpPEGCisPt de
525 nm (figura 1).
Se determinó el tamaño hidrodinámico, potencial Z e índice de polidispersividad de las
nanopartículas. Las nanopartículas tienden a formar aglomerados cuando se encuentran disueltas
en H2O y en medio DMEM din suero fetal bovino al 10%, el potencial Z es de aproximadamente de
1mV. Por el otro lado las diferentes nanopartículas que se encontraban en medio DMEM con suero

TOMO II BIOTECNOLOGÍA Y CIENCIAS AGROPECUARIAS - PÁGINA 63

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fetal bovino al 10% también tendieron a formar aglomerados pero de menor tamaño y el potencial
también fue cercano a 1 mV (tabla 1).

Figura 1. Espectroscopia UV/VIS de las diferentes nanopartículas sintetizadas.

Table 1. Características hidrodinámicas de las diferentes nanopartículas sintetizadas.

Nanopartículas Tamaño (nm) DS PDI DS Potencial Zeta (mV) DS
AuNps (H2O) 371.3 144.6 0.566 0.290 0.826 0.641
AuNpPEG (H2O) 149.5 16.61 0.219 0.008 -1.23 0.218
AuNpPEGCisPt (H2O) 594.1 323.8 0.623 0.326 0.738 0.803
AuNps (sin suero) 1942 402.9 0.992 0.014 0.172 0.606
AuNpPEG 101.6 40.97 0.197 0.042 -0.007 0.012
(sin suero)
AuNpPEGCisPt 147.7 114.1 0.447 0.201 -0.0097 0.008
(sin suero)
AuNps (con suero) 55.12 5.023 O.650 0.11 0.044 0.099
AuNpPEG (con suero) 49.08 0.51 0.531 0.006 -0.014 0.017
AuNpPEGCisPt (con suero) 67.52 31.78 0.344 0.131 -0.078 0.06

Las nanopartículas sintetizadas fueron analizadas por espectrometría infrarroja para determinar si
existía una unión entre AuNp, AuNpPEG y el CisPt y de esta manera formar la AuNPPEGCisPt. A
través del FTIR. Las muestras se encontraron disueltas en H2O por lo que se observa una gran señal
entre 3300 y 3500 cm-1. La unión entre AuNp y PEG se observa a través de las uniones C=O del
PEG a 1634 y 1633 cm-1, así como los grupos CH a 2152 cm-1. Los puentes de H se observan a
3570 y 3200 cm-1. El CisPt se observa por la uniones Pt-N dentro de la AuNpPEGCisPt a 3945,
3458, 3418, 615, 599, 560 y 518 cm-1 (figura 2)

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Figura 2. Espectroscopia Infrarroja con transformada de Fourier (FTIR) de las diferentes

nanopartículas sintetizadas (AuNp, AuNpPEG y AuNpPEGCisPt) y el cisplatino (CisPt).

Las nanopartículas sintetizadas tienen forma esférica. AuNp tiene un diámetro de 8.6 ± 1.97 nm,
AuNpPEG de 9.5 ± 1.24 nm y AuNpPEGCisPt of 10 ± 1.76 nm (figura 3).

Figura 3. Microscopia Electrónica de Transmisión. a y d AuNp, b y c AuNpPEG, c y f

AuNpPEGCisPt. a c X65000, d f X210000.

A través de la SEM/EDS determinamos la concentración y contenido de cada nanopartícula

sintetizada (figura 4).

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Figura 4. Microscopia Electrónica de barrido con Espectro de Energía Dispersiva (SEM/EDS). a

AuNP, b AuNpPEG y c AuNpPEGCisPt.

Finalmente se determinó el efecto citotóxico de AuNP, AuNpPEG y AuNpPEGCisPt sobre las líneas
celulares de cáncer cervicouterino (HeLa), cáncer gástrico (AGS) y glioblastoma (C6). El CisPt se
utilizó como control positivo. A través de los ensayos de MTT determinamos que tanto AuNP como
AuNpPEG no tienen un efecto citotóxico sobre las diferentes líneas celulares analizadas (figura 5 a,
b y c). En cuanto a AuNpPEGCisPt se determinó que tuvo un efecto citotóxico a diferentes dosis,
esto dependiendo de la célula cancerosa probada. En el caso de las células HeLa la IC 50 encontrada
fue de 104.5±7.0 µg/mL, para las células C6 fue de 76.5±5.0 µg/mL y para las células AGS fue de
97.2±5.4 µg/mL. Mientras tanto el control (CisPt) se encontraron los siguientes valores, para las
células HeLa la IC50 f e de 69.2 3.2 g/ L, a a a c a AGS de 286.5 2.5 g/ L aa a
células C6 fue de 379.3±3.0 µg/mL (figura 5 y tabla 2).

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Figura 5. Viabilidad celular. a, células HeLa, b, células C6 y c, células AGS.

Tabla 2. IC50 del CisPt y de la AuNpPEGCisPt sobre las líneas celulares cancerosas.

Linea CisPt AuNpPEGCisPt CisPt inside the

celular AuNpPEGCisPt
IC50 mg/mL mg/mL

HeLa 69.2±3.2 104.5±7.0 7.31

C6 379.3±3.0 76.5±5.0 5.35

AGS 286.5±2.5 97.2±5.4 6.80

CONCLUSIONES
Desarrollamos una técnica para la elaboración de AuNp tipo core-shell la cual fue funcionalizada con
PEG y CisPt, determinamos que la NpAuPEGCisPt contiene una baja concentración de CisPt sin
embargo esta cantidad es suficiente para conseguir una IC 50 por debajo de la cantidad necesaria sí
se emplea al CisPt por sí solo. Creemos que esta diferencia se debe a que el CisPt se encuentra
dentro de la AuNpPEG lo que le permite atravesar de manera libre por la célula cancerosa y evitar
los mecanismos de defensa de la célula como es la unión del CisPt al glutatión, es decir la AuNpPEG
le sirve para enmascarar su paso por el citoplasma lo que le permite llegar de manera activa al núcleo
de la célula y llevar a cabo su efecto citotóxico a nivel del núcleo sobre el material genético y
desencadenar su muerte celular por apoptosis. Esta investigación nos muestra como la
nanotecnología es una herramienta valiosa al momento de administrar al CisPt en menores dosis

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pero sin perder su efecto terapéutico, lo que podría traducirse en un mejor tratamiento para los
pacientes y de esta manera evitar los efectos secundarios no deseados. Nuestro siguiente objetivo
es darle a nuestra AuNpPEGCisPt el carácter de teranóstica para así aumentar su especificidad.

BIBLIOGRAFÍA
1. Ahmad S (2017) Kinetic aspects of platinum anticancer agents. Polyhedron 138(14):109-124.
[Link]
2. Alcantar NA, Aydil ES, Israelachvili JN (2000) Polyethylene glycol-coated biocompatible
surfaces. J Biomed Mater Res 51(3):343-351.
[Link]
3. Alkilany AM, Murphy CJ (2010) Toxicity and cellular uptake of gold nanoparticles: what we
have learned so far?. J Nanopart Res 12(7):2313-2333.
[Link]
4. Astolfi L, Ghiselli S, Guaran V, Chicca M, Simoni E, Olivetto E, Lelli G, Martini A (2013)
Correlation of adverse effects of cisplatin administration in patients affected by solid tumours:
a retrospective evaluation. Oncol Rep 29(4):1285-1292.
[Link]
5. Brown SD, Nativo P, Smith JA, Stirling D, Edwards PR, Venugopal B, Flint DJ, Plumb JA,
Graham D, Wheate NJ (2010) Gold nanoparticles for the improved anticancer drug delivery
of the active component of oxaliplatin. J Am Chem Soc 7;132(13):4678-84.
[Link]
6. Lin J, Zhang H, Chen Z, Zheng Y (2010) Penetration of lipid membranes by gold
nanoparticles: insights into cellular uptake, cytotoxicity, and their relationship. ACS Nano
28(9):5421-9. [Link]
7. Lowry GV., Hill RJ., Stacey H, Rawle AF., Hendren Ch, Klaessig F, Nobbmann U, Sayre P,
Rumble J (2016) Guidance to improve the scientific value of zeta-potential measurements in
nanoEHS.: Environ. Sci.: Nano.3, 953 965. [Link]
8. World Health Organization (WHO). [Link]
sheets/detail/cancer. Accessed 29 Enero 2020.

TOMO II BIOTECNOLOGÍA Y CIENCIAS AGROPECUARIAS - PÁGINA 68

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CONCENTRACIÓN DE AZÚCARES Y CLOROFILAS EN LA INDUCCIÓN FLORAL DE LAELIA

ANCEPS POR EFECTO DE ÁCIDO GIBERÉLICO EXÓGENO
Olga Tejeda-Sartorius1, Yasbet Ríos-Barreto1, César A. Casasola-Elizondo1, Libia Iris Trejo-Téllez1

Colegio de Postgraduados Campus Montecillo. Texcoco, Estado de México, México.

Correo-e: olgats@[Link]

RESUMEN
La aplicación exógena de ácido giberélico puede tener efectos en la inducción floral de orquídeas, a
través de diferentes rutas y fenómenos fisiológicos, pero existe poca investigación al respecto. Se
analizó el efecto de ácido giberélico exógeno en la concentración de azúcares y clorofilas en hoja de
Laelia anceps, y su posible participación en la inducción floral, analizando para ello, el estado
reproductivo (ER) y la estructura de crecimiento (EC), potencialmente inductiva a floración. Se
aplicaron diferentes dosis de ácido giberélico (AG) a la planta vía foliar en horarios vespertinos: 0.0,
0.4, 0.6, 0.8 y 1 g L-1. Se realizó un experimento factorial considerando las cinco concentraciones de
ácido giberélico; así como dos estados reproductivos: con y sin floración previa; además de dos
estructuras de crecimiento: hoja actual (HAact, que proviene del brote de crecimiento anual) y la
anterior (HAnt, el que dio origen al crecimiento actual). El tratamiento que mostró la mayor
concentración de azúcares fue con 0.8 g L-1 (19.7 mg g-1) en relación con el tratamiento donde no se
aplicó AG (8.212 mg g-1). Asimismo, la concentración estadísticamente mayor de clorofilas a y b se
presentó con la dosis de 0.6 g L-1 (1.34 y 0.60 mg mL-1) de AG en relación con el tratamiento sin AG
(0.74 y 0.22 mg mL-1). El análisis de factores mostró que las diferentes dosis de AG3 tuvieron efecto
significativo en las concentraciones de azúcares y clorofilas. Asimismo, la EC fue estadísticamente
diferente para la concentración de azúcares y clorofila b, en donde la HAnt tuvo mayores
concentraciones (17.07 mg g-1 y 0.49 mg mL-1) en comparación con la HAct (10.26 mg g-1 y 0.38 mg
mL-1). El ER no afectó significativamente ninguna de las variables evaluadas. Se concluye las
diferentes dosis de AG3 influyen en la concentración de azúcares y clorofilas a y b en hoja. Asimismo,
la hoja de crecimiento anterior aporta mayores concentraciones de azúcares y clorofilas a la hoja de
crecimiento actual. Se infiere que estos resultados pueden tener influencia en la inducción a floración
de Laelia anceps.

INTRODUCCIÓN
Los reguladores de crecimiento de las plantas (PGRs, por sus siglas en inglés) reciben atención
desde hace décadas, y han sido usados exitosamente para modificar la floración de muchas
especies de orquídeas: giberelinas (GAs), auxinas, citoquininas, ácido abscísico, entre otros (Hew y
Clifford, 1993; Matsumoto, 2006).
Las giberelinas son responsables de la regulación de muchos procesos de desarrollo de las plantas,
c e d c a e e ad de f ac (K a et al., 2007). En algunos casos, la
aplicación de GAs puede ser inefectiva para inducir floración, pero en plantas de día largo, el ácido
giberélico (GA3) ede e e d fe e e efec , eg a e ec e (K a et al., 2007). Así,
algunos reportes indican que el GA3 está asociado con la inducción a floración de varias especies
de orquídeas (Cardoso et al., 2010); entre éstas Miltoniopsis (Matsumoto, 2006), Brassocattleya
(Cardoso et al., 2010) y Phalaenopsis (Cardoso et al., 2012).
La floración es un proceso que consume mucha energía, por lo que lograr que el tiempo correcto de
la emisión de yemas para inducción floral coincida con la mejor situación fisiológica, es crucial para
el mantenimiento de las especies a través de la propagación sexual (Wang et al., 2019).
Los carbohidratos son importantes biomoléculas que son fuentes de energía en organismos vivos.
Los componentes estructurales de las células están hechos en buena parte de carbohidratos.
Durante el crecimiento y desarrollo de plantas, los fotoasimilados producidos por las hojas fuente,
son traslocados hacia diferentes demandas para su utilización y acumulación (Wang et al., 2008).
En dicho proceso, la fotosíntesis y los pigmentos implicados en ella, como las clorofilas, juegan un
a e c c a (K a et al., 2007; Li y Xu, 2014).
En una población de orquídeas de crecimiento simpodial en etapa reproductiva, destinada a cultivo
ornamental, y donde la forma de multiplicación vegetativa del material es por división de plantas, el

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estrés que padece el material trasplantado puede afectar negativamente la floración subsecuente,
aun cuando la planta madre que le dio origen haya estado en etapa reproductiva. Por lo anterior, se
investigó el efecto de la aplicación de ácido giberélico exógeno en Laelia anceps y su efecto en la
concentración de azúcares y clorofilas en hoja, y su posible participación en la inducción floral,
analizando para ello, el estado reproductivo (ER) y la estructura de crecimiento (EC), potencialmente
inductiva a floración.

MATERIALES Y MÉTODOS
Se utilizaron plantas de Laelia anceps adultas. El material se colocó en macetas de 1 L de capacidad.
Como sustrato se empleó una mezcla con: 60% corteza de pino (Vigoro ®), 20% zeolita; 20% turba
(CP:Z:T; v:v:v).
Para estimulación de brotes vegetativos, las plantas se mantuvieron en condiciones de invernadero
y con fertilización quincenal con NPK ([Link], Foresta®) y Pack Hard®, a dosis de 2 g L-1 y 2 mL L-
1, respectivamente.

Para tratamiento inductivo a floración, cuando los brotes vegetativos tuvieron un tamaño de 15 cm
de longitud promedio, y cuya diferenciación de hoja y pseudobulbo era apenas visible (para disminuir
riesgo de inducción floral), se introdujeron en una cámara de crecimiento controlado (lámparas luz
LED roja y azul, proporción 90:10%), con un flujo de fotones fotosintéticos (FFF) de 120 µmol m -2 s-
1, con fotoperiodo 12/12 h, y temperatura 28/12 ± 1 °C.

Las plantas se dejaron dos días en adaptación en la cámara de crecimiento, para distribuir,
posteriormente, tratamientos con diferentes dosis de ácido giberélico (AG 3), (Gibiotin®): 0.0, 0.4, 0.6,
0.8 y 1 g L-1). Las diferentes dosis se aplicaron mediante aspersiones foliares de 30 mL por planta,
en horarios vespertinos. La aplicación sin AG 3 fue con agua destilada únicamente. En este periodo,
todas las plantas recibieron fertilización con Phytophos-K® (10-21-36) a dosis de 1 g L-1.
Se realizó un experimento factorial donde los factores de estudio fueron el AG 3 (con cinco niveles
previamente descritos), el estado reproductivo de las estructuras bajo análisis [inducidas (I X I) y no
inducidas (NI X NI)], y estructura de crecimiento [hoja anterior (HAnt) que dio origen a la hoja actual)
y la hoja actual (HAact)].
Con los datos obtenidos se realizó análisis de varianza y prueba de comparación de medias por
Tukey (P 0.05).

RESULTADOS Y DISCUSIÓN
En el análisis de los factores de estudio se obtuvo que las diferentes dosis de AG3 tuvieron efectos
significativos en las concentraciones de azúcares y clorofilas; asimismo, la hoja, como parte de la
estructura de crecimiento (EC), tienen un efecto significativo en la concentración de azúcares y de
clorofila b (Cuadro 1).

Cuadro 1. Nivel de significancia de los factores de estudio: dosis de AG 3, estado reproductivo y

estructura de crecimiento, así como su interacción, en la concentración de azúcares y de clorofilas
en hoja de Laelia anceps.

Factores de estudio Azúcares Clorofila a Clorofila b

AG3 (AG) 0.0229 * 0.0286 * 0.0010 *

Estado reproductivo (ER) 0.1122 ns 0.6318 ns 0.4411 ns
Estructura de crecimiento (EC) 0.0019 * 0.0759 ns 0.0485 *
AG × ER 0.0560 ns 0.0562 ns 0.1485 ns
AG × EC 0.7824 ns 0.2669 ns 0.4320 ns
ER × EC 0.3978 ns 0.2486 ns 0.3185 ns
AG × ER × EC 0.3863 ns 0.1048 ns 0.3120 ns
* = significativo (P 0.05); = g f ca (P > 0.05).

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Se obtuvo una concentración significativamente mayor de azúcares con la dosis de aplicación

exógena de 0.8 g AG3 L-1, en relación con el tratamiento sin el regulador de crecimiento (19.7 vs 8.21
mg g-1) (Figura 1). En general se observa que todas las concentraciones del AG3 tienden a promover
mayor concentración de azúcares (13 mg g-1, concentración promedio), aunque no todas mostraron
diferencias estadísticas.

Figura 1. Concentración de azúcares (mg g-1) en hoja de Laelia anceps por efecto de diferentes
concentraciones de ácido giberélico (AG3). Barras ± DE con letras diferentes indican diferencias
estadísticas entre tratamientos (Tukey, P 0.05). S/AG3= sin ácido giberélico.

También se observó significancia estadística por mayor concentración de clorofila a (1.34 µg mL-1)
por efecto de AG3 con la dosis de 0.6 g L-1, así como de clorofila b, por acción de las dosis de 0.4
(0.55 µg mL-1) y 0.6 g L-1 (0.60 µg mL-1), en comparación con el tratamiento sin AG3 (0.75 y 0.23 mg
mL-1, de clorofilas a y b, respectivamente) (Figura 2).

Figura 2. Concentración de clorofilas a y b (mg mL-1) en hoja de Laelia anceps por efecto de
diferentes concentraciones de ácido giberélico (AG3). Barras ± DE con letras diferentes indican
diferencias estadísticas entre tratamientos (Tukey, P 0.05). S/AG3= sin ácido giberélico.

La hoja de crecimiento anterior (HAnt), tiene mayor concentración de azúcares que la hoja actual
(HAct) (Cuadro 2). Es probable que la HAct presenta menor concentración de azúcares, por: i) su
probable utilización en la inducción de la floración (plantas I X I), ya que éste es un fenómeno
demandante de mucha energía (Wang et al., 2019); y ii) falta de niveles de estos carbohidratos en
las plantas NI X NI. Se observó entonces que las plantas I X I tienen menor concentración de
azúcares que las no inducidas (NI X NI), si bien la diferencia estadística no es significativa (datos no
mostrados). De la misma manera, en azúcares, la HAnt tuvo mayor concentración de clorofila b,
respecto a la de la HAct (Cuadro 2).

TOMO II BIOTECNOLOGÍA Y CIENCIAS AGROPECUARIAS - PÁGINA 71

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Cuadro 2. Concentración de azúcares y de clorofilas en hoja de Laelia anceps, por efecto de la

estructura de crecimiento: anterior y actual (HAnt y HAct).

Azúcares Clorofila a Clorofila b

Niveles de
estudio (mg g-1) (mg mL-1)
HAnt 17.07 a 1.20 a 0.49 a
HAct 10.26 b 0.98 a 0.38 b
Medias con letras distintas en cada columna y factor de estudio indican diferencias estadísticas
(Tukey, P 0.05).

Los azúcares juegan un papel muy importante en la vida de las plantas, las cuales han desarrollado
un eficiente sistema de percepción y transmisión de señales inducidas por baja o alta disponibilidad
de azúcares. Cambios en la concentración de azúcares afectan, entre otras cosas, el crecimiento
vegetativo y la floración (Ciereszko, 2018).
Las giberelinas (GAs) estimulan respuestas fisiológicas en las plantas y alteran el metabolismo de la
fuente-demanda a través de su efecto en la fotosíntesis y formación de la demanda (Iqbal et al.,
2011). A ,K a et al. (2007) señalaron que las giberelinas pueden tener una fuerte
influencia en la carga del floema y la regulación de la síntesis de sacarosa, y consecuentemente, en
la actividad fotosintética. Los resultados obtenidos en el presente trabajo concuerdan con los autores,
al observarse un incremento en la concentración de azúcares y clorofilas (como medida indirecta de
la fotosíntesis) por acción de diferentes dosis de AG3.

CONCLUSIONES
Diferentes dosis de ácido giberélico, en el rango de 400 a 800 mg L -1, principalmente, incrementan
la concentración de azúcares totales y clorofilas a y b en hoja. Asimismo, la hoja de crecimiento
anterior aporta mayores concentraciones de azúcares y clorofilas a la hoja de crecimiento actual.
Estos resultados pueden tener implicaciones en la inducción a floración de Laelia anceps.

BIBLIOGRAFÍA
1. C. S. He a d P.E. C ff d. P a g h eg a a d he ch d c -f e d . Plant
Growth Regulation. 1993. 13:231-239.
2. C-Y. Wang, C-Y. Chiou, H-L. Wang, R. Krishnamurthy, S. Venkatagiri, J. Tan and K-W. Yeh.
Ca b h d a e b a a d ge e eg a We he e d b b f Oncidium
ch d d g he f e g ce . 2008. Planta. 227:1063-1077.
3. Ciereszko. Reg a e f ga a g h a d de e e . Acta Soc. Bot. Pol.
2018. 87 (2):1-13.
4. J. C. Cardoso, E. O. Ono and J. D. Rodrigues. G bbe e c ac d a d a e eg e he
flowering induction of Brassocattleya and Cattleya hybrid orchid . 2010. Horticultura
Brasileira. 28: 395-398.
5. J. C. Cardoso, E. O. Ono and J. D. Rodrigues. G bbe e c ac d ege a e a d e d c e
development of Phalaenopsis ch d h b d ge . Horticultura Brasileira. 2012. 30: 71-74.
6. M. K a, M. Rybus-Zaj c, J. S ach a a d B. Ja a. Cha ge ca b h d a e
contents of Zantedeschia leaves under gibberellin- a ed f e g . Acta Physiol. Plant.
2007. 29:27-32.
7. N. Iqbal, R. Nazar, M. I ba , R. Kha , A. Ma d a d N. A. Kha . R e f g bbe e
regulation of source- ea de a a d g e e a c d .
2011. Curr. Sci. 100(7):998-1007.
8. S-L. Wang, K. K. Viswanath, C-G. Tong, H. R. An, S. Jang and F-C. Che . F a d c
a df e de e e f ch d . F . P a Sc . 2019. 10:1258.

TOMO II BIOTECNOLOGÍA Y CIENCIAS AGROPECUARIAS - PÁGINA 72

MISCELÁNEA CIENTÍFICA EN MÉXICO CENTRO DE INVESTIGACIONES EN ÓPTICA, A.C.

9. T. K. Ma , G bbe e c ac d a d be ade e e ea f e g a d ege a e

g h fM ch d h b d . H Sc e ce. 2006. 41(1): 131-135.
10. X. L a d K. X . Effects of exogenous hormones on leaf photosynthesis of Panax ginseng .
Photosynthetica. 2014. 52 (1): 152-156.

TOMO II BIOTECNOLOGÍA Y CIENCIAS AGROPECUARIAS - PÁGINA 73

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EFECTO DEL LANTANO EN EL ÁREA FOLIAR DE PLÁNTULAS DE TOMATE CON

NUTRICIÓN DIFERENCIAL DE CALCIO
Beatriz Adriana Jiménez-González1, Regina Ortega-Martínez1, Libia Fernanda Gómez-Trejo2,
Fernando C. Gómez-Merino3, Sara Monzerrat Ramírez Olvera3, Olga Tejeda-Sartorius3, Libia I.
Trejo-Téllez3
1Universidad Autónoma Chapingo, Depto. de Suelos
1universidad Autónoma Chapingo, Depto. de Parasitología Agrícola
2Colegio de Postgraduados, Campus Montecillo

[Link]@[Link]

RESUMEN
El lantano (La) es un elemento perteneciente al grupo de las tierras raras que ha mostrado tener
efectos benéficos en plantas superiores cuando es suministrado en bajas concentraciones.
Asimismo, se ha reportado que este elemento benéfico puede mitigar efectos negativos de factores
de estrés. En esta investigación se evaluó el efecto que tienen tres niveles de La (0, 15 y 30 mM)
con dos estatus de nutrición cálcica (suficiente y deficiente) en plantas de tomate (Solanum
lycopersicum) var. El Cid. Para lo anterior se condujo experimento factorial 3 x 2 (seis tratamientos),
donde cada tratamiento tuvo seis repeticiones. Una plántula constituyó cada unidad experimental.
Las plántulas fueron establecidas en un sistema hidropónico de raíz flotante con solución nutritiva
de Steiner. En el caso de plantas deficientes en Ca solo se suministró el 50% de la concentración de
este elemento, mientras que para la suficiencia de Ca se abasteció al 100% de la concentración de
Steiner. Las plántulas fueron tratadas durante 20 días. Posteriormente, se evaluó el área foliar por
plántula y las lecturas SPAD. Con los resultados obtenidos se hizo análisis de varianza y prueba de
comparación de medias (Tukey, 0.05). El área foliar fue afectada en forma significativa por el estatus
de Ca y la concentración de La. Plantas deficientes en Ca tuvieron menor área foliar que aquellas
suficientes en Ca en 22.19%. Por otra parte, se observó que, el efecto principal de La fue negativo,
aunque no significativo, dado que, su concentración en la solución nutritiva se relacionó de manera
inversa con el área foliar. El efecto negativo del La en el área foliar se observó tanto en plantas
suficientes como en deficientes en Ca. Sin embargo, al analizar el efecto de interacción de los
factores de estudio se observa que la magnitud en la reducción del área foliar por efecto del La fue
menor en plantas deficientes en Ca que en las suficientes en Ca, particularmente con la dosis 30
mM La, con reducciones del orden de 20.58% y 24%, respectivamente, en comparación con el
tratamiento correspondiente sin La en cada nivel de Ca. Se concluye que el efecto del La en las dosis
evaluadas, si bien es negativo en el área foliar de plántulas de tomate, la magnitud de la reducción
es menor cuando la planta se encuentra sometida a estrés por deficiencia de Ca.

INTRODUCCIÓN
El grupo de los elementos de las tierras raras está constituido por 17 elementos; de éstos 15 son
lantánidos [desde el lantano (La) hasta el lutecio (Lu)], además del escandio (Sc) y el itrio (Y). A
pesar de su nombre, realmente estos elementos no son raros en la composición de la corteza
terrestre; si bien difieren en abundancia, el encontrado en mayor concentración es del cerio (Ce);
asimismo, se ha estimado que el 80% de los depósitos de éstos están formados por La, Ce,
praseodimio (Pr) y neodimio (Nd) (Handoko y Sanjaya, 2018).
Como ya se indicó, el La es un elemento de tierras raras (REE), éste ha sido considerablemente
estudiado debido a su amplia aplicación en numerosos campos con una posible acumulación en el
medio ambiente. En particular, este elemento es conocido por su potencial para estimular el
crecimiento de las plantas dentro de un marco de respuesta hormética bifásica (Agathokleous et al.,
2018). La hormesis es un proceso mediante el cual el tratamiento con una dosis baja de un agente
químico o de un factor ambiental, dañino a dosis altas, induce efectos benéficos y/o adaptativos a
nivel celular o en un organismo (López-Diazguerrero et al., 2013). Por tanto, los elementos benéficos
como el La no son esenciales para completar el ciclo de vida exitoso de la planta (Alcántar et al.,
2016). Asimismo, además de considerarse la dosis de elementos benéficos como el La, sus efectos
son dependientes de condiciones específicas como las causadas por factores de estrés abiótico y

TOMO II BIOTECNOLOGÍA Y CIENCIAS AGROPECUARIAS - PÁGINA 74

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biótico, donde puede estimular mecanismos de resistencia o promover una mayor eficiencia en la
absorción y uso de nutrimentos (Gómez-Merino y Trejo-Téllez, 2018).
Por otro lado, el calcio (Ca) es un elemento esencial en plantas superiores. Entre sus funciones, su
rol como segundo mensajero es de gran interés dado que definen las respuestas de las plantas en
respuesta a factores de estrés (Alcántar et al., 2016).
Por lo anterior, este estudio evaluó el efecto del suministro de La en plantas de tomate var. Cid con
dos estatus de nutrición cálcica; al ser el Ca un elemento esencial para plantas superiores, el nivel
deficiente de este macronutrimento representa una condición de estrés. Las variables respuesta
evaluadas fueron el área foliar y las lecturas SPAD.

MATERIALES Y MÉTODOS
En este estudio se trabajó con plántulas de tomate (Solanum lycopersicum) var. El Cid de 60 días
de edad que fueron obtenidas de la siembra directa de semillas en un almácigo conteniendo turba
como sustrato. Las plántulas fueron trasplantadas a un sistema hidropónico de raíz flotante donde
fueron tratadas por 20 días con los tratamientos que a continuación se describen.
Se condujo un experimento factorial 3 x 2, donde los factores de estudio y los niveles de éstos fueron:
1) concentración La en la solución nutritiva en tres niveles: 0, 15 y 30 mM y 2) estatus de nutrición
cálcica en dos niveles: suficiente y deficiente, que consistió en incluir en la solución nutritiva de
Steiner (Steiner, 1984), la concentración de Ca al 100% y 50%, respectivamente. La fuente de La
utilizada fue LaCl3 7H2O (Sigma Aldrich). La concentración del resto de los nutrimentos permaneció
sin cambio. El arreglo factorial indicado dio, por tanto, origen a seis tratamientos. Cada uno tuvo seis
repeticiones y una plántula constituyó cada unidad experimental. Posterior a los 20 días de
tratamiento, se evaluó el área foliar por plántula utilizando un integrador de área foliar (LI-COR, LI
3000A, EEUU) así como las lecturas SPAD en hojas recientemente maduras (Minolta SPAD-502,
Japón). Con los resultados obtenidos se hizo análisis de varianza y prueba de comparación de
medias (Tukey, 0.05) usando el software SAS (SAS, 2011).

RESULTADOS Y DISCUSIÓN
Área foliar
En este estudio, el área foliar de las plántulas de tomate solo fue influenciada de manera significativa
por el estatus de Ca como se observa en el Cuadro 1. La deficiencia de Ca en tomate reduce el área
foliar; asimismo, causa necrosis en hojas jóvenes; además, en casos extremos, en la etapa
productiva la pérdida del rendimiento es significativa (Adams y Holder, 1992).

Cuadro 1. Significancia estadística de los factores de estudio y su interacción en el área foliar de

plántulas de tomate var. Cid.
Fuentes de variación
Parámetro estadístico Concentración de La Estatus de Ca
CLa x La
(CLa) (ECa)
Pr > F 0.1010 * 0.0119 * 0.8912 ns
Coeficiente de variación 27.95
*=Significativo al 5%; ns=no significativo al 5%.

Si bien el factor de estudio La no tuvo influencia en el área foliar, se observa una relación negativa
entre esta variable y la concentración de La en la solución nutritiva; dosis de 15 y 30 mM La tuvieron
menor área foliar que el testigo en 11.9 y 22.5%, respectivamente (Cuadro 2). Probablemente en
fase de plántula en tomate, las dosis de La evaluadas son altas y por tanto causan efectos negativos.

TOMO II BIOTECNOLOGÍA Y CIENCIAS AGROPECUARIAS - PÁGINA 75

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Cuadro 2. Área foliar de plántulas de tomate var. Cid en función de la concentración de La (CLa) en
la solución nutritiva y de la interacción de la CLa y el estatus de nutrición Ca (ECa).
Concentración de La en la solución nutritiva (mM)
Varia-ble
0 15 30
Área foliar
331.7±45.4a 292.3±43.1a 257.1±42.6a
(cm2)
Interacción de los factores de estudio ECa x CLa
Deficiencia de calcio Suficiencia de Ca
Varia-ble
0 mM
15 mM La 30 mM La 0 mM La 15 mM La 30 mM La
La
Área foliar 289.2
(cm2) ±46.7 252.4±50.6a 229.7±42.5a 374.2±35.5a 332.3±23.6a 284.6±41.7a
a
Medias ± DE con la misma letra por fila indican que no hay diferencias estadísticas significativas
(Tukey, 0.05).

Por otra parte, al analizar los resultados de área foliar en función de la interacción de los factores de
estudio (Cuadro 2), se observa que tanto con deficiencia como con suficiencia de Ca el La reduce
esta variable. Sin embargo, la magnitud en la reducción del área foliar por efecto del La fue menor
en plantas deficientes en Ca que en las suficientes en Ca, particularmente con la dosis 30 mM La,
con decrementos del orden de 20.58% y 24%, respectivamente, en comparación con el tratamiento
correspondiente sin La en cada nivel de Ca. Lo anterior podría indicar que, si bien las dosis de La
resultaron altas bajo las condiciones de estudio, su efecto es modificado cuando se tiene un factor
de estrés como es el caso de la deficiencia de Ca (Gómez-Merino y Trejo-Téllez, 2018).

En lo que respecta al estatus de Ca, se tuvo que plantas suficientes en este macronutrimento
incrementó el área foliar por plántula en 28.5%, respecto a plantas Ca deficientes (Figura 1).

Figura 1. Área foliar de plántulas de tomate var. Cid con dos estatus de calcio. Medias ± DE con
letras distintas indican diferencias estadísticas (Tukey, 0.05).

Lecturas SPAD
Los factores de estudio y su interacción no tuvieron efectos significativos en los valores de lecturas
SPAD medidas en hojas de plántulas de tomate (Cuadro 3).

TOMO II BIOTECNOLOGÍA Y CIENCIAS AGROPECUARIAS - PÁGINA 76

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Cuadro 3. Significancia estadística de los factores de estudio y su interacción en las lecturas SPAD
de plántulas de tomate var. Cid.
Fuentes de variación
Parámetro estadístico Concentración de La Estatus de Ca
CLa x La
(CLa) (ECa)
Pr > F 0.6883 ns 0.4130 ns 0.7530 ns
Coeficiente de variación 10.98
ns=no significativo al 5%.

Tendencia creciente, pero no significativa en las lecturas SPAD se observó con el aumento de la
concentración de La en la solución nutritiva; asimismo, plantas deficientes en Ca mostraron un ligero
incremento en esta variable (Cuadro 4). Los incrementos en valores de lecturas SPAD pueden
interpretarse como aumentos en la concentración foliar de clorofila. Incrementos en clorofila en
plantas cultivadas bajo estrés abiótico han sido previamente reportados (Alaei, 2011; Khayatnezhad
et al., 2011), y se ha concluido que representa una estrategia de tolerancia la planta. En maíz bajo
sequía, más de la mitad de los genotipos resistentes al estrés tuvieron mayor contenido de clorofila
(Khayatnezhad et al., 2011).
En lo que respecta a la interacción no existen tendencias que puedan relacionarse con las
concentraciones de La en combinación con los estatus de nutrición cálcica (Cuadro 4).

Cuadro 4. Área foliar de plántulas de tomate var. Cid en función de la concentración de La en la

solución nutritiva y de la interacción de la concentración de La (CLa) y el estatus de nutrición Ca
(ECa).
Concentración de La en la solución nutritiva (mM)
Variable
0 15 30
Lecturas
49.5±4.1a 50.0±1.5a 51.4±1.6a
SPAD
Parámetro Estatus de nutrición cálcica
Suficiente Deficiente
Lecturas
49.5±3.2a 51.0±2.0a
SPAD
Interacción de los factores de estudio ECa x CLa
Variable Deficiencia de calcio Suficiencia de Ca
0 mM La 15 mM La 30 mM La 0 mM La 15 mM La 30 mM La
Área foliar
50.4±2.9a 49.9±1.6a 52.9±0.9a 48.5±5.3a 50.2±1.5a 49.9±1.8a
(cm2)
Medias ± DE con la misma letra por fila indican que no hay diferencias estadísticas significativas
(Tukey, 0.05).

CONCLUSIONES
Se concluye que el efecto del La en las dosis evaluadas, si bien es negativo en el área foliar de
plántulas de tomate, la magnitud de la reducción es menor cuando la planta se encuentra sometida
a estrés por deficiencia de Ca. Asimismo, al representar un factor de estrés, se incrementan
ligeramente los valores de las lecturas SPAD, sin ser estos aumentos significativos, como una
respuesta fisiológica a esta condición.

BIBLIOGRAFÍA
1. S e e . The e a e , : ISOSC Proceedings 6th International Congress
on Soilless Culture, The Netherlands. 1984. pp. 633-649.
2. D. Ha d , a d E. Sa a a. Cha ac e c a d ge e a e ea h e e e (REE)
e e I d e a . 2017. IOP C f. Se e : Ea h a d E e tal Science. 2018. 118:
012077.

TOMO II BIOTECNOLOGÍA Y CIENCIAS AGROPECUARIAS - PÁGINA 77

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3. E. Agathokleous, M. K a , a d E. J. Ca ab e e. The a e ea h e e e (REE) a ha

(La) d ce h e a .E .P . 2018. 238: 1044-1047.
4. F. C. Gómez-Merino, and L. I. Trejo-Téllez. The R e f Be e cial Elements in Triggering
Adaptive Responses t E e a S e a dI g P a Pe f a ce , : S.
Vats (ed.). Biotic and Abiotic Stress Tolerance in Plants. Springer Nature. Singapore Pte. Ltd.
2018. pp. 167-172.
5. G. Alcántar-González, L. I. Trejo-Téllez, y F. C. Gómez-Me . N c de C .
Segunda Edición. Editorial Colegio de Postgraduados. 2016.
6. M. Khayatnezhad, R. S. Gholamin, H. Jamaatie-Somarin, and R. Zabihie-Mahmoodabad.
The eaf ch h c e a d e e a ce e a h c de g C c a
(Zea mays L.) . Ad . E . B . 2011. 5(1): 118-122.
7. N. E. López-Diazguerrero, V. Y. González-Puertos, R. J. Hernández-Bautista, A. Alarcón-
Aguilar, A. Luna-López, y M. Königsberg-Fa e . H e : e a a, f a ece .
Gac. Méd. Mé. 2013. 149: 438-447.
8. P. Ada , a d R. H de . Effec fh d , Ca a d a he acc a fd
matter and Ca by the leaves and fruit of tomato (Lycopersicon esculentum) . J. H c. Sc .
1992. 67: 137 142.
9. SAS. SAS I e I c., SAS/STAT U e G de . Version 9.3. SAS Institute Inc., Cary, N.
C., USA. 2011.
10. Y. A ae . The Effec f A Ac d Leaf Ch h C e B ead Whea Ge e
de D gh S e C d . M dd e-East J. Sci. Res. 2011. 10(1): 99-101.

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EL VERDADERO AMOR TÓXICO: EL TOLOACHE

Abril Alondra Barrientos-Bonilla*, Susana Bautista-Hernández, Jorge Alberto Domínguez-Guillén,
María Fernanda Hernández-Hernández, Eder Yaveth Reyes-Cruz, Óscar Antonio Sánchez-Aguirre.

Centro de Investigaciones Biomédicas, Universidad Veracruzana

Av. Luis Castelazo Ayala s/n, Col. Industrial Ánimas, Xalapa, Veracruz., C.P. 91190, México.
Autor de correspondencia* abilondra@[Link]

RESUMEN
La Datura stramonium c c da de de e M c eh c c T ache e de a b
originario de América y Asia, que crece en zonas templadas y subtropicales hasta un metro de altura,
posee hojas ovaladas dentadas, así como flores blancas acampanadas. Esta especie es capaz de
adaptarse a todo tipo de suelos, principalmente en suelos húmedos y ricos en nitratos. Se le atribuye
la cualidad de generar enamoramiento, sin embargo, es una planta muy peligrosa, que tiene
propiedades medicinales (de alto riesgo) y no es ca a de d c a e dade . S e e e
confundida con Datura innoxia la cual se creía que era inofensiva, sin embargo, posee efectos
similares a la D. stramonium. Otra especie con la que es confundida es con floripondio (Brugmansia
arborea) la cual es altamente tóxica. Con el objetivo de identificar las bases científicas que le
atribuyen su supuesta capacidad de enamoramiento y otras propiedades hemos realizado una
revisión bibliográfica en bases indexadas. La costumbre dicta que el toloache logra un
e a a e e ed ab e e e c e. E e achad e e e d c e a da
e a e a, e e ea dad f e cac , a d e c f ,e a a ab a a
c . E ache ad c a e e e a a a a el asma, bronquitis, artritis, picaduras de
serpiente, hinchazón, dolor de muelas, y desparasitante al usar sus hojas, flores y semillas en
infusiones, pomadas o compresas. No obstante, administrado crónicamente, como cuando se usa
para en enamoramiento, genera daño neurológico e incluso la muerte. Aun así, preparados o la
hierba como tal se venden en los mercados, pero realmente ¿qué es lo que ocasiona el toloache?
E a e d ce a a a e a b e a d a ca de e ab e de ca c e d cil: la
escopolamina y la hiosciamina. Ambas se absorben rápidamente en el organismo y actúan casi de
manera inmediata, produciendo dilatación de las pupilas, taquicardia, dificultad para respirar,
síntomas que a veces se atribuyen al enamoramiento, pero además también generan relajación
muscular, alucinaciones, delirio, vómitos, defectos en la memoria y aprendizaje, así como la muerte.
Por lo que el toloache es incapaz de generar amor, por el contrario, tiene efectos perjudiciales si se
toma con la finalidad de ge e a e a a e , ge e a a c .C a e Q
tan bueno o malo puede ser el utilizar esta planta? ¿Hasta dónde llega el deseo de estar con una
persona sin respetar su autonomía? en faltar al respeto de su dignidad como ser humano y a su
derecho de elegir. Hemos de hacer hincapié en que al proporcionar esta planta a una persona se
atenta contra su integridad, puesto que distorsiona su capacidad de juicio, de inteligencia, anula su
libertad de elección y minimiza la voluntad, es un acto inmoral, que se contrapone contra la esencia
de libertad del ser humano.

INTRODUCCIÓN
Datura stramonium mejor conocida como toloache es un tipo de arbusto originario de América y Asia,
que crece en zonas templadas y subtropicales. Contiene una gran cantidad de metabolitos entre los
cuales destacan la presencia de los alcaloides Escopolamina y Hiosciamina. El toloache ha sido
utilizado en diversos grupos nativos en la zona del norte en México, así como en el sur de Estados
Unidos de América, sus principales usos son como planta medicinal, y como planta mística en
diversos ritos, con la finalidad de adquirir visiones y lograr un estado de trance (Carod, 2015) esto
último han hecho que el toloache juegue un papel muy importante en el misticismo y en las creencias
ae edade g ca , e c ee e d a e a edad ed a a b a aba
en sus para "volar" que en realidad era un viaje psicodélico (Saracco, 2015).
Dentro de estas propiedades mágicas también se encuentra su supuesta capacidad de generar
enamoramiento o amor cuando uno de los enamorados lo consume en forma de té; en esta revisión
abarcamos aspectos como su botánica, propiedades fitoquímicas y biológicas, toxicología y

TOMO II BIOTECNOLOGÍA Y CIENCIAS AGROPECUARIAS - PÁGINA 79

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hacemos una reflexión de cómo han contribuido en la creencia sobre su capacidad de generar
e a a e a c .

METODOLOGÍA
Con el objetivo de identificar las bases científicas que le atribuyen su supuesta capacidad de
enamoramiento y otras propiedades, hemos realizado una revisión bibliográfica en las bases
indexadas de Pubmed, Google académico, EBSCOhost, CONABIO y en libros de acceso online
utilizando como tópicos los términos Datura stramonium, toloache, efectos de los extractos del
toloache. La inclusión de los textos se basó en temas del toloache, sus características biológicas
farmacognósticas y usos tradicionales.

RESULTADOS
Datura stramonium e c c da c T ache e a a a de a e c ece e d de
suelos, principalmente arenosos húmedos y ricos en nitratos (Villaseñor y Espinosa, 1998). Como
se observa en la figura 1 a nivel nacional su mayor producción es en el centro del país, pero se
puede encontrar en casi toda la República Mexicana (Miranda et al., 2016).

Figura 1. Poblaciones de Datura stramonium en México. Obtenido de la base de datos Naturalista

(2020), CONABIO.

Además de toloache dentro del país también se conoce como chayotillo, frizillo, tapete, tlapa,
tlaquoal, estramonio y hierba del diablo. El toloache pertenece obviamente al reino de las plantas,
en la tabla 1 podemos observar su clasificación taxonómica con mayor detalle. Se trata de una planta
que puede medir hasta 1 m de alto, posee un solo tallo y pocas ramas. La figura 2 nos muestra que
sus hojas son ovadas dentadas de 5 a 15 cm de largo y de 4 a 10 cm de ancho. Sus flores son
solitarias en las bifurcaciones del tallo y crecen erectas con pedicelos de 5 a 7 mm de largo; posee
un cáliz tubular de 2.5 a 3.5 cm de largo con 5 lóbulos triangular acuminados de 5 a 7 mm de largo,
el tubo circunciso se encuentra cerca de la base, deciduo y dejando un cuello acrescente de 5 a 7

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mm de ancho; tiene una corola blanca o púrpura-azul pálida, infundibuliforme, de 6 a 9 cm de largo

con lóbulos extendidos de 8 a 10 mm de largo. El fruto de esta especie es una cápsula erecta, ovoide
de 2.5 a 3.5 cm de diámetro, glabra, seca y subleñosa en estado maduro con numerosas espinas
fuertes, agudas de hasta de 1 cm de largo, la cual posee semillas negras/café de 3 a 3.5 mm de
largo (Rzedowski y Rzedowski, 2010; Espinosa y Sarukhán, 1997).

Tabla 1. Clasificación taxonómica de Datura stramonium

Reino Plantae
Subreino Traqueobionta
Superdivisión Spermatophyta (Plantas con semillas)
División Magnoliophyta (Plantas con flor)
Clase Magnoliopsida (Dicotiledóneas)
Subclase Asteridae
Orden Solanales
Familia Solanaceae
Género Datura
Especie D. Stramonium

Figura 2. Planta de Toloache. A) Tallo, B) Arbusto, C) Flor, D) Hojas ovaladas dentadas, D)

Fruto de D. stramonium (exterior), E) Fruto de D. stramonium (interior). Modificado de Gaire y
Subedi (2013) y Soni, et at., (2012).

Fitoquímica y actividad biológica

La composición química del toloache se ha estudiado desde 1930 y se ha comprobado la presencia
de al menos 60 compuestos químicos, destacando los alcaloides (Bazaoui et al., 2011; Lousnasmaa
and Tamminem, 1993) y otros metabolitos como saponinas, taninos, esteroides, flavonoides, fenoles
y glucósidos (Shagal et al., 2012). Dentro de los alcaloides que produce, los principales son la
hiosciamina y la escopolamina, además de alcaloides menores como tigloidina, aposcopolamina y
atropina (Soni, et at., 2012).

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A B

Figura 3. Principales alcaloides aislados en las hojas de D. stramonium. A) Escopolamina y B)

Hiosciamina. Elaboración propia en el software ChemBioDraw Versión 12.0.

La síntesis de alcaloides en la planta comienza desde las primeras dos semanas después de la
germinación, la concentración en las semillas varía según las condiciones ambientales y estación
del año, siendo mayor en Verano (Bazaoni, et al., 2011). De manera general las raíces contienen
Escopolamina, Hiosciamina y Ésteres diglósicos. En las hojas predominan la Escopolamina, así
como trazas de Hiosciamina y Atropina. Toda la planta contiene hasta 0.25% de alcaloides derivados
de Tropano (Huerta, 2000). El principal componente es la Escopolamina, las hojas contienen 0.25%,
las semillas 0.12%, los tallos 0.05% y las raíces 0.1%. La hiosciamina se encuentra 0.4% en hojas,
0.2% en tallos y en raíces un 0.1%. La Hiosciamina predomina en las hojas adultas, mientras la
Escopolamina en las hojas tiernas (Farm, 2006). La tabla 2 muestra de manera más detallada
algunos de los metabolitos que se han encontrado en el toloache.

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Tabla 2. Metabolitos identificados en D. stramonium

Parte Extracto o Método de
Metabolito(s) identificados Referencia
usada compuesto identificación
Semillas Ácido sulfúrico GC/ MS 3 -Tigloiloxitropano, 3- Berkov et al.,
al 3% Apotropoiloxitropano, 2006
Aposcopolamina, Hiosciamina,
Escopolamina, Tropinona, Tropina,
Pseudotropina
Semillas Metanol- Espectrometri Apoatropina, hidroxiapoatropina, Elbazaoui et
acetonitrilo a de masas Atropina, Escopolamina, al., 2009
80:20 Hidroxiatropina
Raíz Ácido sulfúrico Cromatografía Hiosciramina, Higrina, Tropinona, Berkov et al.,
al 3% de gases / Tropina, Pseudotropina, 3,6- 2006
espectros de ditigloiloxitropano, 7-Hidroxi-3,6-
masas (GC/ ditigloiloxitropano,
MS) 7-Hidroxiditigloiloxitropano, 6-
Hidroxi-3- g a , 3 -
Hidroxi-6-tigloiloxitropano,7-Hidroxi-
6-propioniloxi-3-tigloiloxitropano.
Hojas Ácido sulfúrico GC/ MS Hiosciramina, Escopolamine, Berkov et al.,
al 3% Tropinona, Tropina, Pseudotropina, 2006
7-Hidroxi-3,6-ditigloiloxitropano,
3-Apotropoiloxitropano,
7-Hidroxi-6-propioniloxi-3-
tigloiloxitropano.
Hojas Extracciones Cromatografía Atropina y escopolamina. Castillo et al.,
por reacciones líquida de alta 2019
ácido-base resolución
(HPLC)
Hojas Etanol Ensayos Trazas de saponinas, taninos, Banso y
cualitativos trazas de glucósidos. Adeyemo,
2006
Hojas Acuoso Ensayos Carbohidratos, taninos, fenoles, Shobha, et
cualitativos saponinas, glucósidos esteroidales al., 2014
Flores Metanol- GC/MS Tropina, Escopina, Apoatropina, Bazaoui et
acetonitrilo Escopolina, escopolamina, al., 2011
80:20 Aposcopolamina, Atropina, 3-
Fenilacetoxitropano, 3-(2 -
Fenilpropioniloxi)tropano,

El toloache ha sido conocido como una planta medicinal y como planta alucinógena en todo el mundo
debido a la riqueza de los metabolitos que posee (Das et al., 2012). Se ha definido su uso terapéutico
usando una dosis de 60 a 185 mg del polvo proveniente de las hojas y 60 a 120 mg del polvo de las
semillas (Gaire y Subedi, 2013). De manera general se ha usado tradicionalmente para tratar
problemas gastrointestinales, artritis, mordeduras de serpientes, picaduras de insectos, asma,
hematomas, hemorroides, dolores en la ciática, reumatismo, enfermedad de Parkinson, bronquitis,
dolor de muelas, alopecia, descongestión nasal y como desparasitante (Al-Snafi., 2017; Babaali, et
al., 2017; Gaire y Subedi, 2013; Das et al., 2012), además, toda la planta posee propiedades
antiinflamatorias y estimulantes del sistema nervioso central (Das et al., 2012). La tabla 3 muestra a
detalle la actividad biológica que se han obtenido de D. stramonium.

TOMO II BIOTECNOLOGÍA Y CIENCIAS AGROPECUARIAS - PÁGINA 83

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Tabla 3. Reportes de actividad biológicas de D. stramonium

Actividad antioxidante
Parte Extracto o Modelo
Dosis Resultado Referencia
usada compuesto experimental
Raíz Metanol DPPH 12.5, 25, 50, Se encontró que la IC50 del Belayneh et
100, 200 y 400 extracto de raíz l era de al., 2019
µg / ml 13,47 y µg / ml
Actividad antiinflamatoria
Parte Extracto o Modelo
Dosis Resultado Referencia
usada compuesto experimental
Hojas Etanol Rata Wistar 200 mg/kg Inhibición del edema en un Gupta el at.,
45% en comparación con 2010
el grupo control.
Actividad antimicrobiana
Parte Extracto o Modelo
Dosis Resultado Referencia
usada compuesto experimental
Hojas Etanol Difusión en agar y Diluciones del Actividad antibacterial Banso y
determinación de 5, 10, 15, 20, contra P. aeruginosa, K. Adeyemo,
la concentración 25 y 30% pneumonia y E. coli. 2006
mínima inhibitoria peso/volumen
del extracto.
Hojas Acuoso Método de N.D. Actividad antibacterial E. Shobha, et al.,
difusión en disco coli, S. aureus, 2014
Pseudomonas, Klebsiella.
Mezcla Acetona Ensayo de 1.25 a 2.5 Actividad antimicótica Mdee et al.,
de hojas, microdilución para mg/mL contra Penicillium 2009
flores y la determinación expansum, Aspergillus
fruto de la niger, Aspergillus
concentración parasiticus, Colletotrichum
mínima inhibitoria gloeosporioides, Fusarium
oxysporum, Trichoderma
harzianum, Phytophthora
nicotiana,
Pythium ultimum y
Rhizoctonia solani
Actividad anti proliferativa
Parte Extracto o Modelo
Dosis Resultado Referencia
usada compuesto experimental
Semilla Metanol Células de 113.05 g/ Actividad citotóxica Iqbal et al.,
adenocarcinoma detectada por el ensayo de 2017
(MCF-7) MMT.
Actividad antidiabética
Parte Extracto o Modelo
Dosis Resultado Referencia
usada compuesto experimental
Raíz Metanol Ratones albinos 100, 200 y 400 Disminución de los niveles Belayneh et
suizos mg / kg de glucosa en sangre. al., 2019
Otras actividades
Parte Extracto o Modelo
Dosis Resultado Referencia
usada compuesto experimental
Semilla y Etanol Larvas y huevos 86.25 mg/L Función de plagicidad y Gaire y
hojas de ácaros acaricida. Subedi, 2013
Hojas Etanol Larvas y 86,25, 16,07 y Repelente hasta por 2 h y Swathi et al.,
mosquitos 6,25 mg actividad larvicida 2012
N.D.= No descrito

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Seguridad al usar toloache y su toxicidad

La Escopolamina, la Hioscina y sus derivados son altamente usados en la práctica clínica, ejemplo
de ello son medicamentos como el Bromhidrato de escopolamina que se utiliza en la anestesia para
reducir la salivación excesiva, las secreciones del tracto respiratorio y prevención de náuseas y
vómitos post operatorios (Comité de Medicamentos de la Asociación Española de Pediatría, 2015);
y el Butilbromuro de hioscina mejor conocido como buscapina que es usado como tratamiento de
espasmos gastrointestinales, genitourinario y de las vías biliares (Tytgat, 2007).
Sin embargo, la planta y sus derivados están contraindicados en personas con glaucoma o sospecha
de glaucoma, íleo paralítico, estenosis pilórica, próstata inflamada, arritmias taquicárdicas y edema
pulmonar agudo de igual manera no se recomienda durante el embarazo ya que podría provocar
daños permanentes al feto (Al-Snafi, 2017). De acuerdo con la literatura, los casos que presentan
intoxicación por reacciones medicamentosas pocas veces inducen a la muerte pues se administra
vía intravenosa fisostigmina, un inhibidor de acetilcolinesterasa que funciona como antídoto (Le Garff
et al., 2016). Cuando se trata de intoxicación por ingesta de semillas o partes de la planta, el
tratamiento son medidas de descontaminación gastrointestinal, a través del lavado gástrico dentro
de las primeras 4 horas post ingesta, seguido de la administración de carbón activado (Saracco,
2015).
Los síntomas por intoxicación incluyen estado de alteración mental, enrojecimiento, retención
urinaria, sacudidas mioclónicas, ataxia, alteración de la memoria a corto plazo, desorientación,
confusión, alucinaciones, psicosis, agitación, convulsiones, dilatación anormal de la pupila con
inmovilidad del iris, visión borrosa, intolerancia a la luz, sequedad de boca y mucosas, sed extrema,
taquicardia, náuseas, vómitos, disminución de los ruidos intestinales, dificultad para tragar, dificultad
para hablar, aumento de la temperatura, hipertensión, pérdida de conciencia, coma y en última
estancia la muerte (Al-Snafi, 2017; Gaire y Subedi, 2013).
El uso del toloache y sus derivados a llevado a la necesidad de estudios sobre su toxicidad en
modelos in vivo e in vitro, donde se han realizado tratamientos agudos, subagudos y crónicos del
toloache o sus metabolitos y han permitido establecer que las dosis letales para un adulto van de 15
a 100 g de la hoja y 15 a 25 g de la semilla (Al-Snafi, 2017). La tabla 4 indica algunos hallazgos en
un modelo murino y uno in vitro

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Tabla 4. Toxicidad del toloache y sus derivados

Modelo Parte del toloache o Dosis
Tratamiento Resultados Referencia
experimental metabolito estudiado empleada
Disminución de la
función hepática y
renal,
alteraciones
bioquímicas,
Agudo
Alcaloides totales de 100 aumento en el Bouzidi, et
(menos de Rata Wistar
las semillas mg/kg conteo de al., 2011
3 semanas)
eritrocitos,
leucocitos,
hemoglobina y
hematocrito a las
24 h.
Subagudo No mortalidad ni
Alcaloides totales de 100 Bouzidi, et
(4 Rata Wistar signos de
las semillas mg/kg al., 2011
semanas) toxicidad.
No hay
mortalidad, pero
Crónico Atropina 4.2 mg/kg Bouzidi, et
Rata Wistar si disminución del
(120 días) Escopolamina 1.6 mg/kg al., 2011
peso del hígado y
función hepática.
Alteración de los
niveles séricos de
creatinina, y de
Crónico (5 Extracto etanoico de 50 y 200 Bouzidi, et
Rata Wistar parámetros
semanas) las hojas mg/kg al., 2011
hematológicos
con la dosis de
200 mh/kg.
Bioensayo
20 ml de Potencial
de Extracto acuoso de
cada alelopático en la
Agudo germinación h a f e (6,3 g Butnariu,
extracto germinación y
(7días) de semillas y de atropina + 6,3 g 2012
por caja crecimiento de
crecimiento de escopolamina)
Petri. plantas.
vegetal

El amor y el toloache
Muchos piensan que el amor viene del corazón, pero lo cierto es que se origina en el cerebro
mediante un desarreglo de neurotransmisores ocasionado por nuestro afecto hacia un ser que
termina por embarcarnos en una aventura llena de felicidad y problemas, pero este desarreglo
también puede ser producido por factores externos a otro ser, como es el caso del toloache. En
México, a esta planta se le ha atribuido el supuesto poder de enamorar a la pareja, tras administrarlo
en forma de un té, elaborado con las hojas, se cree lograr un enamoramiento irremediable. El
e achad (quién consume o ingiere el té) se vuelve más dócil en la vida de pareja, pero en
ea dad f e cac , a d e c f ,e a a ab a , c a a a
a c .P a e e ad ad ada, e eg ada r un experto de la salud,
es suficiente para generar daño neurológico e incluso la muerte (Juárez, 2019). Aun así,
comercialmente se encuentra en los mercados locales como hierba o en forma de preparado, pero
realmente ¿qué es lo que ocasiona el toloache?

TOMO II BIOTECNOLOGÍA Y CIENCIAS AGROPECUARIAS - PÁGINA 86

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E a e d ce a a a e a b e a c a e a ca de : a E c a a a
Hiosciamina. Ambas se absorben rápidamente en el organismo y actúan casi de manera inmediata,
produciendo dilatación de las pupilas, taquicardia y dificultad para respirar, síntomas que a veces
suceden cuando se ve al ser amado, pero además también generan relajación muscular,
alucinaciones, delirio, vómitos, defectos en la memoria y aprendizaje, y en casos severos, la muerte
(CITVER, 2017; Huerta, 1998). Por lo que el toloache es incapaz de generar cariño, por el contrario,
e e efec e dcae e ge e a a c .
C a d a e ae e a ada e dec e Te d e T ache , Le de a e dad, e
toloache es una de las plantas más ada a a a ae e a , ade e a de a a a
peligrosas como hemos mencionado. Sus efectos sobre el sistema nervioso emulan los efectos de
los neurotransmisores del amor como son: dopamina, norepinefrina y serotonina. Sin embargo, la
sobredosis puede comenzar con excitación y terminar en muerte. Lo que se sabe hasta ahora, es
que el Toloache ha sido una planta satanizada por los efectos que genera, y ha sido vinculada con
magia y hechicerías para atraer el amor, desde la época prehispánica, como un filtro de amor
tentador, pero que elimina la liberta de elección, pues el amor es un sentimiento que se debe
desarrollar por voluntad, libre de coacción para tener verdadera certeza de los afectos que recibimos
y damos (Revista de Divulgación Instituto de Biotecnología, 2019).
Las plantas no pueden crear ni inducir ni perpetuar un amor, aparentemente sólo confunden al
cerebro. Por lo tanto, se puede decir que lo popularmente aceptado no siempre es correcto y que
tomar Toloache es más un acto malvado y egoísta que de amor.

CONCLUSIONES
El toloache (Datura stramonium), si bien es una planta con alto potencial para su uso médico, es
ca a de g a efec a e ec c d , ge e a a (a ad e d , ade , e
tiene efectos perjudic a e e ac a f a dad de e a a , d ce d , e d ca ,
a c ). P a e , d e e a ea e a eg a b g e e : Q a b e
o malo puede ser el utilizar esta Solanaceae? ¿Hasta dónde puede llegar el de e de e a c
una persona sin respetar su autonomía y libre decisión? Esta última cuestión no es válida, puesto
que se ha de hacer hincapié en que, al proporcionar esta planta a una persona, se atenta contra su
integridad al faltar al respeto a su dignidad como ser humano y al derecho de elegir, puesto que
distorsiona su capacidad de juicio y de inteligencia, anula su libertad de elección y minimiza la
voluntad. Es, por tanto, un acto inmoral, que se contrapone a la esencia del libre albedrío del ser
humano, además de ser también antiético en el aspecto biomédico.

AGRADECIMIENTOS
Nos gustaría expresar nuestro sincero agradecimiento a CONACYT por el otorgamiento de las becas
de estudio de posgrado para Abril Alondra Barrientos Bonilla (1000344), Susana Bautista Hernández
(824169), Jorge Alberto Domínguez Guillén (1009452), María Fernanda Hernández Hernández
(824246), Eder Yaveth Reyes Cruz (824260) y Óscar Antonio Sánchez Aguirre (784066).

CONFLICTO DE INTERÉS
Los autores declaramos que no existe conflicto de interés.

BIBLIOGRAFÍA
1. Banso a d S. Ade e . Ph che ca c ee g a d a c ba a e e f Ab
a a , Bac a fe a a d Da a a . Biokemistri, 18(1) 2006.
2. Ba a , M.A. Be a , A. S a a . N e e a e a a d f Da a
stramonium L. ide f ed b GC/MS . Fitoterapia 82 (2), 2011, pp.193 197.
3. B d , N. Mahdeb, N. Ka a. T c d e f a a d f eed f Da a a
a d he a a d a e a . J Med Plants Res, 5(15), 2011, pp. 3421-3431
4. Elbazaoui, H. Stambouli, M.A. Be a , a d A. S a a . De e a f a e
a a d eed f Da a a L. b GC/MS a d LC/MS . Ann. Toxicol. Anal, 21(4),
2009, pp.183-188.

TOMO II BIOTECNOLOGÍA Y CIENCIAS AGROPECUARIAS - PÁGINA 87

MISCELÁNEA CIENTÍFICA EN MÉXICO CENTRO DE INVESTIGACIONES EN ÓPTICA, A.C.

5. K. G a, N.K. Ah ae, N. Sh de, M. Ch dha , Y.S. Ra , a d A. S gh, Ph chemical

Screening and Antimicrobial Assessment of Leaves of Adhatoda vasica, Azadirachta indica
a d Da a a . UK Journal of Pharmaceutical and Biosciences 1(1), 2013, pp.42-
47.
6. Miranda-Pérez, G. Castillo, J. Hernández-Cumplido, P. L Valverde, M. Borbolla, L. Cruz, y J.
Núñez-Fa f , Na a e ec d e che ca e a ce f Da a
a , PeerJ, 4, 2016, e1898.
7. S. Sa acc . I cac Da a a : e e de e ca , Ac a c g ca
argentina, 23(2), 2015, pp. 83.88.
8. B.P. Gaire and L. Subedi, "A review on the pharmacological and toxicological aspects of
Da a a L. , J eg ed. 11(2), 2013, . 73-79.
9. H e a, E ache: ag a, c e c a e che a? , CONABIO. B d e a , 19, 1998,
pp. 11-14.
10. J e , L e ab a de ache , UNAM ada a a c e c a, 2019,
[Link]
11. Centro de Información To c g ca de Ve ac , G a de d ag c aa e de
cac B g a a Da a (E c a a) CITVER, 2017,
[Link]
tratamiento-de-intoxicaci%C3%[Link]
12. Comité de Medicamentos de la Asociación Española de Pediatría. Ped a c Ed c
2015. ISSN 2531-2464. Disponible en: [Link]
medicamentos/pediamecum/escopolamina. Consultado el 11/05/2020.
13. CONABIO, Na a a (Ba e de da ) Ob e d de:
[Link]
14. Babaa , J. R eb, M. Ha ache J. Ha a , Ne a c da e al of aqueous and
ethanol extracts gained from Datura stramonium, D. innoxia and D. tatula on Meloidogyne
c g a , Journal of Plant Diseases and Protection, 124(4), 2017, pp. 339-348.
15. Le Garff, et al., "Forensic features of a fatal Datura poisoning case during a robbery", Forensic
science international 261, 2016, pp. e17-e21.
16. E. . Ba a , A., Be a , M.A., S a a , N e e a e a a d f Da a
a L. de f ed b GC/MS , F e a a 82 (2), 2011, . 193 197.
17. Espinosa, J. Sarukhá , Ma a de Ma e a de Va e de M c , U e dad Nac a
Autónoma de México, Fondo de la Cultura Económica, 1997, pp. 407.
18. J. Carod-Artal, "Hallucinogenic drugs in pre-Columbian Mesoamerican cultures", Neurología
(English Edition) 30 (1), 2015, pp. 42-49.
19. Castillo, A. Calahorra-Oliart, J. Núñez-Farfán, P.L. Valverde, J. Arroyo, L.L. Cruz, and R.
Tapia-López. Se ec a ea a d a ea d -native populations of Datura
stram . Ecology and evolution, 9(18), 2019, pp. 10176 10184.
20. G. R ed , J. R ed , F a fa e g ca de Va e de M c , I de Ec g a
y Comisión Nacional para el Conocimiento y Uso de la Biodiversidad. 2010, pp. 654-655.
21. G. Sh bha, C. S a, K.S. Sha h dha a, a d M V ha, Ph che ca P f e,
A bac e a a d A d abe c Effec f C de A e Leaf E ac f Da a a ,
Pharmacophore, Vol. 5 (2), 2012, pp. 273-278.
22. G.N. T ga , H c e b b de: a review of its use in the treatment of abdominal
ca g a d a D g ,67(9), 2007, . 1343-57
23. J.D. K a , B.D. Ba , P a a ed c a e d a . Allahabad: Lalit Mohan Basu, 1994.
pp. 1229-1231.
24. L.K. Mdee, P. Ma , a d J.N. E ff, The ac of extracts of seven common invasive
a ec e f ga h a h ge . South African Journal of Botany, 75(2), 2009, pp.
375-379.
25. M. B a . A a a f S gh ha e e e' beha e e ce f a ea a d
from Datura stramonium extrac . Chemistry Central journal, 6(1), 2012, pp. 75.
26. M. L a aa T. Ta e , The T a e A a d The A a d : Che a d
Pharmacology (Ed. Prefacio, Edited by Geoffrey A. Cordell1993), Chapter 1 pp. 1 114.

TOMO II BIOTECNOLOGÍA Y CIENCIAS AGROPECUARIAS - PÁGINA 88

MISCELÁNEA CIENTÍFICA EN MÉXICO CENTRO DE INVESTIGACIONES EN ÓPTICA, A.C.

27. M.H. Shagal, U.U. Modibbo, A.B. L a , J f cac fa ac g ca a a e e dc

del extracto de corteza de tallo de estramonio Datura en el tratamiento de enfermedades
ca ada a g a bac e a a ge a , Int Res Pharm Pharmaco 2 (1), 2012, pp.16-
19.
28. P. D. A. E. Al-Snaf , Med ca a ce f Da a fa a( : Da a e e ) a d Da a
stramonium - A e e IOSR J a f Pha ac (IOSRPHR), 7(2), 2017, PP. 43-58.
29. P. L e , J. Lade , J. Le a, I. L a a , D g de e de c a : Fa ac g a, Pa g a,
Psicología, Legislación. 3a Ed. Madrid: Médica Panamericana; 2009.
30. P. S , A. A S dd , J. D ed V. S , Pha ac g ca e e f Da a
a L. a a e a ed c a ee: a e e , Asian Pacific journal of tropical
biomedicine, 2(12), 2012, pp.1002 1008.
31. Re a de D gac I de B ec g a. B ec gae e .I
de Biotecnología UNAM. 20, 2019
32. R. V a e , G. E a, Ca a g de a e a de M c , U e dad Nac a
Autónoma de México, Consejo Nacional Consultivo Fitosanitario, Fondo de la Cultura
económica, 1998, 449 p.
33. S. Be , R. Za ed, a d T. D che a, A a d a e e a e e f Da a
a . Fitoterapia, 77(3), 2006, pp. 179-182.
34. S. Chollet, Y. Papet, P. Mura, and B. Brune , D e a de e e e a e e
c a e de d ff e e e ce a age e e e a e d ge e Da a , A
Toxicol Anal. 22(4), 2010, pp. 173-179.
35. S. Das, P. Kumar, S.P. Basu, A c de e be f c e e e c a es
terapéuticos de Datura stramonium , J Drug Del Therap. 2 (3), 2012, pp.24 27.
36. S. G a, M. Ragh a h , D. Ja . C aa e de a -inflammatory activity of
C a d Sa , Da a a a d A ad ach a I d ca . Asian J Exp Biol Sci. 1(1),
2010, pp. 151 154.
37. S. Iqbal, C. Sivaraj y K. Gunasekaran. A da a d A ca ce Ac e f Me ha
E ac f Seed f Da a a . Free Radicals & Antioxidants, 7(2) 2017.
38. S. Khanra, C. R. J. Khess, and N. Srivastava, "Chronic non-fatal Datura abuse in a patient of
paranoid schizophrenia: a case report", Addictive behaviors 43, 2015, pp.39-41.
39. S. M. Fa , S a acea , T de de , Re a de A c ac C d be a de
Farmacéuticos homeopáticos, 2006.
40. S. Swathi, G. Murugana ha , SK Gh h, AS P adee . La c da a d e e e ac e f
e ha c e ac f Da a a ea e aga e . Int J Pharm Phytochem
Res. 4(1), 2012, pp. 25 27.
41. Y. M Be a eh, Z. B ha , E.M. B G. Ge e e . E a a f vivo antidiabetic,
antidyslipidemic, and in vitro antioxidant activities of hydromethanolic root extract of Datura
stramonium L. (Solanaceae)". Journal of experimental pharmacology, 11, 2019, pp. 29 38.

TOMO II BIOTECNOLOGÍA Y CIENCIAS AGROPECUARIAS - PÁGINA 89

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EFECTO DE LA APLICACIÓN DE LOMBRICOMPOSTA EN LA CALIDAD Y COMPUESTOS

CON ACTIVIDAD ANTIOXIDANTES EN LECHUGA (LACTUCA SATIVA L.).
Jimena Esther Alba Jiménez1*, Flor Nataly Lozano Villalba2, Evelin Lizbeth Armenta Romero3,
Armando J. Martínez Chacón4, Miriam Rodríguez Olivarez5, Irma Patricia Polanco Medina3, José
Cruz Carrillo Rodríguez6 y Elia Nora Aquino Bolaños7.

1CONACyT-Universidad Veracruzana; 2Instituto Tecnológico Superior de Xalapa; 3Universidad

Veracruzana; 4Instituto de Neuroetología, Universidad Veracruzana; 5Instituto Tecnológico Superior

de Xalapa; 6Instituto Tecnológico del Valle de Oaxaca; 7Centro de investigación y desarrollo de
alimentos, Universidad Veracruzana.
*jimena_tete@[Link]

RESUMEN
México tiene amplia variedad de climas y suelos que lo sitúa un país con mayor producción de
hortalizas aunque estas requieren de condiciones específicas de temperatura, humedad y nutrientes.
Pero el uso de diversos agroquímicos para mejorar la producción y rendimiento degradan y
contaminan del suelo y agua subterránea. De ahí la importante de aplicar de técnicas de cultivo que
contribuyan a mejorar la calidad de las hortalizas y reducir los efectos nocivos al ambiente. El
fertilizante orgánico como la lombricomposta, aporta mayor contenido de macro y micronutrientes
que contribuyen al mejor crecimiento y desarrollo de la planta. El objetivo de este estudio fue evaluar
el efecto de la aplicación de lombricomposta sobre la calidad del cultivo de lechuga (Lactuca sativa
L.). Semillas de lechuga fueron sembradas en suelo con y sin lombricomposta y se midieron
características morfológicas, parámetros fisicoquímicos, contenido de ácido ascórbico,
antioxidantes, actividad antioxidante, proteína y la actividad de la enzima polifenol oxidasa (PPO).
Los resultados muestran que la lombricomposta reduce el tiempo de cosecha de 103 a 73 días, y el
rendimiento y desarrollo mejora al crecer en lombricomposta, además de que los parámetros de color
luminosidad, cromaticidad y ángulo de matiz también mejoran. Pero la humedad y contenido de
sólidos solubles totales fue mayor en las lechugas cultivadas sin lombricomposta y el pH no difirió
entre los tratamientos. El contenido de proteína (0.0108 g Eq. Albúmina bovina g -1 tejido fresco (tf)),
ácido ascórbico (3.74 mg ác. Ascórbico g-1 tf), polifenoles (2.28 mg EAG g-1 tf), flavonoides (2.14 mg
ECat g-1 tf), capacidad antioxidante (10.5 µmol Eq. Trolox g-1 tf), actividad antioxidante (15.6 µmol
Eq. Trolox g-1 tf) y actividad enzimática de la PPO (50.57 PPO g -1proteína min-1) fue mayor en las
plantas de lechuga que no crecieron en lombricomposta. Esto podría deberse a que las lechugas no
alcanzaron su crecimiento óptimo, además al presentar mayor actividad en PPO, podría ser
indicativo de que las plantas estuvieron sometidas a un estrés por falta de agua y nutrientes
necesarios para su crecimiento y desarrollo. Por lo tanto, el tratamiento con lombricomposta podría
ser una alternativa para producir lechugas en un menor tiempo y con mejores características de
calidad.

INTRODUCCIÓN
La agricultura es una de las actividades económicas más importantes y destacadas en México. La
diversidad de climas y suelos le han permitido el cultivo de diferentes especies de plantas
consumibles, como las hortalizas, las cuales requieren de condiciones específicas de temperatura,
humedad y nutrientes para lograr un adecuado desarrollo. La lechuga L. sativa es especie que se
usan como hortaliza de mayor producción en México y ocupa el noveno lugar a nivel mundial,
además se produce en 22 estados de la República Mexicana, siendo los principales productores
Guanajuato, Zacatecas y Puebla (SADER, 2017). Es importante indicar que se conocen
aproximadamente 800 géneros y 20000 especies de lechuga (Rubatzky & Yamaguchi, 1997), de los
cuales la baby leaf, escarola, orejona y romana son las más producidas (SIAP, 2018). Además, es
una herbácea anual, cuyo ciclo de cultivo es de aproximadamente 100 días dependiendo la variedad
y época de año (Luna, 2012). También se puede destacar que la lechuga contiene un alto porcentaje
de agua y es rica en minerales como potasio, fosforo, hierro y calcio, además de ser rica en vitamina
A y C, los cuales se concentran principalmente en las hojas (Rubatzky & Yamaguchi, 1997),

TOMO II BIOTECNOLOGÍA Y CIENCIAS AGROPECUARIAS - PÁGINA 90

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asimismo contiene compuestos fenólicos, que en conjunto con la vitamina C, proporcionan actividad
antioxidante a diferentes tipos de estrés (Barberán & Espín, 2001; Smirnoff et al., 2000).
Por otro lado, las técnicas convencionales para el cultivo de lechuga requieren el uso de diversos
agroquímicos que contribuyen a mejorarlo, además de protegerlo contra plagas y enfermedades. Sin
embargo, provocan degradación de los suelos y contaminación del agua subterranea, debido a que
inducen a la salinización, concentración excesiva de minerales y compuestos carcinógenos (FAO,
2002).
Una alternativa para evitar que los suelos pierdan materia orgánica es la utilización de fertilizantes
orgánicos, como la lombricomposta, la cual aporta un mayor contenido de macronutrientes,
micronutrientes y humedad contribuyendo al crecimiento y desarrollo de la planta (Prado, 2013). Es
importante indicar que la lombricomposta, consiste en la digestión de la materia de origen vegetal,
animal o mixto por lombrices, a lo que se le denomina humus (Román et al., 2013). Esté abono tiene
la propiedad de mejorar el enriquecimiento del suelo, la asimilación de nutrientes, la retención de
humedad, además de proporcionar mayor resistencia a patógenos y enfermedades que puedan
afectar los cultivos (Félix, 2008).

TEORÍA
La lombricomposta es una de las técnicas más antiguas de cultivo, que contribuye de manera
importante en la nutrición de los suelos, mejorando el rendimiento y calidad de los alimentos, sin la
necesidad de agroquímicos (Félix, 2008). Al respecto Rizo (2011), reportó en cultivos de zanahoria,
lechuga, rábano y cilantro, que los abonos orgánicos (lombricomposta y Bocashi), presentan mayor
germinación y rendimiento. Por su parte Olivares (2012), reportó para el cultivo de lechuga (Lactuca
sativa L.), en condiciones en las que la aplicación de composta y lombricomposta a partir de estiércol
de ganado vacuno lechero, contiene una cantidad de nitrógeno similar a lo que aporta un fertilizante
nitrogenado inorgánico, y además indican la mejora en el contenido de calcio y magnesio, y mantiene
las mejores condiciones de los microorganismos en el suelo. Asimismo, Sofo et al. (2016) reportaron
que la aplicación de una fertilización orgánica a partir de diferentes tipos de estiércol de animal en
Lactuca sativa L., a . Ma a a de Ve a , c e e a e c e d de ac e e c
nitrógeno, magnesio, azufre, sodio y aluminio, así aumenta el rendimiento y un balance mineral de
la planta. Mientras que el contenido de compuestos fenólicos y flavonoides en la fertilización
convencional incrementa; estos autores lo atribuyeron a condiciones de estrés, en las plantas, por
déficit de minerales en el suelo. Por lo anterior, el objetivo del estudio fue evaluar la aplicación de
lombricomposta sobre la calidad y compuestos con actividad antioxidante del cultivo de lechuga L.
sativa.

MÉTODO
Diseño experimental
Con semillas de lechuga orejona L. sativa a ca c e c a H af (F a c a), e ea d e
experimental en el invernadero del Instituto Tecnológico Superior de Xalapa Unidad Xico, ubicado
en el municipio de Xico, Veracruz (latitud de 19°25'77''N, longitud 97°00'26''O, y altitud de 1600
msnm), donde se germinó y cultivo la hortaliza. Para lo cual se prepararon dos zanjas (1 m de ancho
x 1.5 m de largo x 0.40 m de altura), colocando en una de las zanjas el tratamiento con
lombricomposta, el cual consistió de 50% de suelo y 50% de humus de lombriz (Olivares-Campos et
al., 2012), y en la otra zanja se colocó el tratamiento el control, el cual fue 100% suelo. A ambos
substratos se les realizó un análisis de suelo para tener referencia de sus componentes, los
resultados se muestran en la Tabla 1.

TOMO II BIOTECNOLOGÍA Y CIENCIAS AGROPECUARIAS - PÁGINA 91

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Tabla 1. Análisis de suelo de los tratamientos en suelo y con lombricomposta.

Suelo Lombricomposta
pH 4.95 8.30
Materia orgánica (%) 18.5 23.0
Acidez (cmol/Kg) 0.21 0.16
K (cmol/ Kg) 0.43 38.72
P (mg/kg) 0.44 176.10
Ca (cmol/ Kg) 2.56 9.77
N (%) 0.99 1.41
C (%) 14.89 17.28
C/N 15.0 12.0

Para la germinación de las semillas L. sativa, se colocaron en una charola de germinación de 200
cavidades, la cual se dividió 50/50 con relación a los tratamientos con y sin lombricomposta. Después
del brote de la semilla, cuando la planta tuvo de 3 a 4 hojas, después de la fase de hojas cotiledóneas,
y una longitud de 3 a 4 cm, se realizó el trasplante. En esta fase, las plantas se ubicaron a una
distancia de 20 x 20 cm entre cada una de ellas. A partir de cosecha de las plantas, que crecieron
con y sin lombricomposta, se obtuvieron las hojas para la determinación de los parámetros:
desarrollo, humedad, pH, sólidos solubles totales (SST), proteína, vitamina C, fenoles totales,
flavonoides totales, actividad antioxidante, capacidad antioxidante y la actividad de la enzima
polifenol oxidasa (PPO).

MÉTODOS
Extracto acuoso
Para determinar los ºBrix y pH, se obtuvo un extracto de 2 g de las hojas de lechuga finamente
picada, la cual se homogenizó (DAIHA-Brand HG-IS-A, Gangwan, Korean) a 50 rpm por 1 min en 8
mL de agua destilada, después se filtró y el filtrado fue utilizado para el análisis.

Extracto para proteína

Se pesó 1 g de lechuga con 6 mg de PVPP y se le añadieron 25 mL de buffer KCL a pH 13, la
muestra fue homogeneizada (DAIHA-Brand HG-IS-A, Gangwan, Korean) y posteriormente fue
centrifugado a 4000 rpm durante 20 min a 10 ºC (Hettich Zentrifuge Universal 32R Tuttlingen,
Alemania). El sobrenadante fue utilizado para realizar el análisis.

Extracto para Vitamina C

De las hojas de lechuga se obtuvo una muestra de 2 g y se le añadieron 10 mL de ácido oxálico 25
mM, se homogeneizó (DAIHA-Brand HG-IS-A, Gangwan, Korean), y se filtró para su posterior
análisis.

Extracto etanólico
Para la determinación de polifenoles, flavonoides, capacidad y actividad antioxidante, el extracto fue
preparado con 2 g de lechuga finamente picada, el cual fue homogeneizado (DAIHA-Brand HG-IS-
A, Gangwan, Korean.) a 50 rpm durante 1 min con 10 mL de etanol al 80% (v/v). Posteriormente, se
centrifug a 4000 rpm durante 20 min a 10 ºC (Hettich Zentrifuge Universal 32R Tuttlingen,
Alemania), se filtr , y el sobrenadante fue analizado.

Extracto enzimático
Con otro grupo de hojas de lechuga se obtuvo una muestra de 2 g finamente picada con 0.2 g de
PVPP y se le añadieron 20 mL de amortiguador de fosfato de sodio 50 mM (pH 7) a 4 °C, se
homogeneizó (DAIHA-Brand HG-IS-A, Gangwan, Korean) a 50 rpm durante 1 min. Posteriormente,
se centrifug a 4000 rpm durante 20 min a 10 ºC (Hettich Zentrifuge Universal 32R Tuttlingen,
Alemania), se filtr y se le realizó el análisis.

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Desarrollo vegetativo
Se seleccionaron 10 lechugas de cada tratamiento, y se realizó un conteo del número de hojas, y
mediante un vernier digital se tomaron medidas de ancho (cm), longitud (cm), y con una balanza
digital (Ohaus Adventurer Pro AV212) se realizó el peso (g) por planta.

Color
Se determinó mediante un espectrofotómetro para solidos (Konica Minolta CM-2600d, Osaka,
Japón). Los parámetros evaluados fueron L*, a*, b* C* y h o, donde L* corresponde al valor de
luminosidad en una escala del 0 al 100 que corresponde a negro y blanco, respectivamente. A su
vez, a* y b* son coordenadas cromáticas, valores de a* negativo a positivo, indica verde a rojo; b*
negativo a positivo, indica azul a amarillo. Mientras que C* indica la cromaticidad, es decir, la pureza
del color y ho o ángulo de matiz se refiere al tono.

Humedad y pH
El contenido de humedad se determinó mediante el uso de una termobalanza (VELAB VE-50-5
Illinois, USA), tomando 1 g de tejido de la muestra previamente cortada a una temperatura constante
de 145 ºC. El pH de los extractos de las hojas de lechugas cosechadas en los tratamientos fue
medido mediante un potenciómetro digital (Hanna Instruments, modelo HI 8424) como lo indica la
A.O.A.C. (1995).

Sólidos solubles totales (SST)

Se determinaron los sólidos solubles con un refractómetro digital (ATAGO Palette digital
refractometer, USA) y se reportó como ºBrix. Las lecturas se realizaron por cuadruplicado para cada
extracto de los tratamientos.

Determinación de proteína
El contenido de proteína fue medida por el método de Bradford (Bradford, 1976), para el cual se
utilizó 0.5 mL del extracto obtenido con la solución amortiguadora pH 13 y se adicionó 0.5 mL de la
solución de Bradford (azul de comassie). Se registró la absorbancia a una longitud de onda de 595
nm (JENWAY 6305, Sttafordshire, United Kingdom), y los resultados fueron expresados en unidades
de mg proteína g-1 tf.

Determinación de vitamina C
El contenido de vitamina C se cuantificó por el método de titulación descrito por A amovi -Djokovi
(2011), con algunas modificaciones. A partir de 2 mL de la muestra filtrada de lechuga y se
adicionaron 9 mL de ácido oxálico y 1 mL de HCl 1 N. Posteriormente, se tituló con sal sódica (2,6-
dicloroindofenol) hasta obtener un vire de incoloro a rosa, y se registró el volumen gastado. La
cuantificación de ácido ascórbico se realizó con una curva de calibración de 0.005 a 0.02 mg mL -1, y
se expresó en mg de ácido ascórbico g-1 tf.

Fenoles totales
Los compuestos fenólicos se determinaron de acuerdo al método de Singleton y Rossi (1965).
Ag ega d 0.4 L de e ac e a c , 1 L de ag a de ada 200 L de eac de F -
Ciocalteu, dejándolo reposar 8 min. Posteriormente, se adicionó 2 mL de Na 2CO3 al 7% (p/v) y 1.4
mL de agua destilada, se agitó en vortex y se reposó durante 1 hora. La absorbancia se midió a 750
nm en un espectrofotómetro marca JENWAY-6305. La unidad de registro fue mg EAG g-1 tf.

Flavonoides totales
Para la determinación de flavonoides se utilizó la metodología descrita por Zhishen et al. (1999). Se
e ca 250 L de e ac de a e a c 75 L de NaNO 2 al 5% (p/v), se agitó
g a e e, e a ad e 150 L de A C 3 al 10% y se incubó durante 5 min. Posteriormente,
e ad c a 500 L de NaOH 1 M y se adicionó agua destilada hasta alcanzar un volumen de 3
mL. La absorbancia se leyó a 510 nm en un espectrofotómetro de la marca JENWAY- 6305. Para la

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cuantificación se utilizó una curva estándar de (+) catequina (0.01 - 0.5 g L-1), y la unidad se
expresó en mg EC g-1 tf.

Actividad antioxidante
La determinación de la actividad antioxidante, se realizó por el método 2,2-difenil-1-picrilhidracil o
DPPH descrito por Brand-Williams et al. (1995). A 100 L de cada extracto se adicionaron 2.9 mL
del reactivo de DPPH, se incub durante 30 minutos a temperatura ambiente. Después del tiempo
de incubación se midió la absorbancia a una longitud de onda de 750 nm. Para la cuantificación se
ea ac ae da de T (0.13 a 0.79 ET L -1), y los resultados se expresaron
e E Trolox g tf.
-1

Capacidad antioxidante
La determinación de capacidad antioxidante se realizó por el método descrito por Benzie y Strain
(1999). El reactivo de FRAP se preparó mediante la mezcla amortiguadora de acetato (0.3 M pH
3.6), con una solución 10 mM de TPTZ a 10 mM (2, 4, 6 tripyridyl-s- triazine) en HCl 40 mM y una
solución 20 mM de FeCl3-6 H2O, e a c [Link]. Pa a a eacc , a 100 L de e ac
se adicionaron 3 mL del reactivo de FRAP, posteriormente se incubó a 37 °C en baño maría por 30
min, después se registró con en un espectrofotómetro (JENWAY 6305, Sttafordshire, United
Kingdom) a 593 nm. La cuantificación de la actividad antioxidante se realizó mediante una curva
estándar de Trolox (0.1 a 1 µmol Eq. Trolox mL-1), y la unidad de ed c f e E T g -1 tf.

Polifenol oxidasa (PPO)

La actividad enzimática se determinó por el método descrito por Zhou et al. (2015), con algunas
modificaciones. La actividad fue medida con 2 mL de amoritiguador de fosfato 0.01 M (pH 6.5), 900
L de ca ec (1%) c a 100 L de e ac e c . La e c a f e a e da a 25
ºC y el cambio en la absorbancia fue medido durante 3 min a 420 nm. La actividad fue expresada
como unidades de actividad (UA) en la cual una unidad de PPO fue definida como el cambio en una
unidad de absorbancia por minuto.

Análisis estadístico
Las variables de respuesta fueron analizadas utilizando Modelos Lineales Generalizados (GLM), con
un diseño unifactorial. Donde el factor analizado fue el tratamiento con dos niveles: la composición
del sustrato (tratamiento 50% lombricomposta y 50% tierra, y el grupo control 100% suelo). La
medición de las variables de respuesta fue sobre unidades experimentales independientes con 2
réplicas por tratamiento por cuadruplicado (n=16). Las variables respuesta fueron transformadas a
e a a e (C e e I a , 1981), a a c c e de d b c de e
normal y homogeneidad de varianzas. Los análisis fueron procesados en el software estadístico JMP
6 (SAS Institute Inc., Cary NC 1989-2007).

RESULTADOS
Desarrollo
Las lechugas cultivadas en lombricomposta completaron su ciclo de cultivo en 73 días, mientras que
las lechugas cultivadas en sólo suelo fueron cosechadas a los 103 días, éstas no alcanzaron las
características de una lechuga bien desarrollada (Figura 1). En otros cultivos, como el tomate, se ha
reportado que los factores determinantes en el tamaño del fruto son el efecto del sustrato, la luz y el
agua, lo cual afectan al rendimiento y producción de la plantación (Ávila & Ruales, 2016).

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A) B)

Figura 7. A) Lechuga cultivada en lombricomposta, B) Lechuga cultivada en suelo.

La altura, ancho y peso de las lechugas con lombricomposta fue mayor en comparación con el grupo
control, mientras que el número de hojas no difirió entre los tratamientos (Tabla 2). Puebla (2012),
reportó una altura promedio óptima menor de lechuga Lactuca sativa (25 a 28.8 cm), en contraste a
lo reportado en este estudio. Por su parte Polat et al. (2008), reportan un peso similar (248.4 g) en
lechuga tipo iceberg, fertilizada bajo un sistema orgánico. Mientras que el número de hojas es similar
a e d ca V e (2015) a a a a edade de ech ga Be ga S G ee , Sa ga L c
Brown con valores de entre 13 a 19 hojas por planta, respectivamente.

Tabla 2. Variables del desarrollo vegetativo de plantas de lechuga cultivadas en suelo y

lombricomposta.
Parámetros Control Lombricomposta
Peso (g) 8 ± 8.10b 234 ± 8.10a
No. Hojas (Unidad) 14 ± 0.68a 18 ± 0.68a
Altura (cm) 10 ± 0.48b 33 ± 0.48a
Ancho de hoja (cm) 4 ± 4.78b 16 ± 4.78a
Valores promedio (± error estándar) con la misma letra no son
g f ca a e e d fe e e (P 0.001)

Los valores promedio más altos para el peso, altura y ancho observados fueron en plantas expuestas
a lombricomposta, esto se atribuye al mayor contenido de materia orgánica, que mejora la capacidad
de retención de agua y nutrientes (Jeavons, 1991). Además, del mayor contenido de nitrógeno
observado, el cual es un importante compuesto que participa en el crecimiento y desarrollo de la
planta, ayudó a incrementar su producción y mejorar la repuesta ante diferentes tipos de estrés
(Kishorekumar et al., 2020).

Color
Los parámetros de color fueron diferentes entre los tratamientos, ya que el valor de L* fue menor en
la lechuga cultivada en suelo sin lombricomposta, lo que indica hojas más oscuras. Además, el
parámetro C*, registró, en las plantas que crecieron en lombricomposta, un valor de 25.7, más alto
al de las plantas del grupo control (19.31). El mismo patrón de respuesta se registró en el índice de
matiz h°, ya que se observó una tonalidad más verde en el grupo tratado que con respecto a las
plantas sin lombricomposta (Tabla 3). En este sentido, Analuisa (2019) evaluó el color en lechuga
crespa (Lactuca sativa L.) e indicó valores menores de L*= 41.01 y C*=14.92, y un valor más alto de
hº (127.94), a lo reportado en este estudio.

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Tabla 3. Parámetros de color en hojas de lechuga cultivadas en suelo y lombricomposta.

Parámetros Control Lombricomposta

Luminosidad (L*) 43.06 ± 0.56b 45.06 ± 0.56a
Cromaticidad (C*) 19.31 ± 0.58 b 25.7 ± 0.58a
Ángulo de matiz (h°) 108 ± 0.24 b 112 ± 0.24a
Valores promedio (± error estándar) con la misma letra no son
g f ca a e e d fe e e (P 0.001)

Humedad, sólidos solubles totales y pH

El porcentaje de humedad fue mayor en lechugas cultivadas en lombricomposta (98%) en contrataste
con las plantas sin tratamiento (94%) (Tabla 4). Estos valores coinciden con lo reportado por Carrillo
(2016), para la lechuga de tipo repollo, con un intervalo de porcentaje de humedad de 94 a 98%. La
diferencia obervada en humedad podría deberse a la mejor retención de agua en el suelo con
lombricomposta (Félix, 2008) incrementando su disponibilidad para la planta. Para el contenido de
sólidos solubles totales (SST), se registró que las lechugas sin tratamiento tienen un mayor valor
(3.09 °Brix), en contraste a las plantas que crecieron en lombricomposta (1.4 °Brix) (Tabla 4). Estos
valores son similares a lo reportado por Carrillo (2016), ya que las lechugas de tipo repollo tuvieron
valores de 2.73 a 5.17 °Brix. Mientras el pH no difirió entre los tratamientos (Tabla 4). Por su parte,
Polat et al. (2008) reportó un valor similar de pH (6.08) en lechugas iceberg tratadas con fertilizantes
orgánicos.

Tabla 4. Parámetros fisicoquímicos en hojas de lechuga cultivada en suelo y lombricomposta.

Parámetros Control Lombricomposta

Humedad (%) 94 ± 0.93b 98 ± 0.93a
SST (°Brix) 3.09 ± 0.03 a 1.45 ± 0.03b
pH 5.9 ± 0.002 a 5.9 ± 0.002a
Valores promedio (± error estándar) con la misma letra no son
g f ca a e e d fe e e (P 0.001)

Proteína
El mayor contenido de proteína se registró en las plantas que crecieron en el suelo sin
lombricomposta (Figura 2A). Lo cual es similar a lo reportado por Raigón et al. (2019), para lechugas
Lactuca. Sativa L. que fueron desarrolladas en un cultivo ecológico, puesto que los valores que los
autores presentan, están dentro del intervalo de 0.0055 a 0.0098 g-1 tf.

Ácido Ascórbico
En el contenido de ácido ascórbico también fue mayor en promedio, en el grupo de lechugas que
crecieron en suelo sin lombricomposta (Figura 2B). Lo cual es diferente a lo observado por
Papathanasiou et al. (2012), en 5 varieades de lechuga (Lactuca sativa L.) ( B da e a a a e,
Ve de deg a , Sa a A a , Ge a B ac Seed S ), e e a c ce ac ón
de vitamnia C no fue afectada por la adición de vermicomposta al suelo durante primavera e invierno,
reportando un intervalo de 0.162 a 0.099 mg g-1, inferior a lo reportado en este estudio. Mientras que
Suyarno (2010), indicó que la concentración de vitamina C incrementa en lechuga (Lactuca sativa
L.) cultivada en vermicomposta. Por su parte, López (2014), reportó que la concentración de vitamina
C en lechuga (Lactuca sativa L.) tiene en promedio un valor de 0.078 mg g-1 tf, lo cual es inferior a lo
reportado en este estudio.

Fenoles totales, flavonoides totales y actividad antioxidante

El mayor contenido de fenoles y flavonoides totales se observó en el grupo de plantas que no tuvieron
lombricomposta con un promedio de 2.29 mg EAG g-1 tf y 2.1498 mg EC g-1 tf, respectivamente, en

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contraste con las plantas en lombricomposta (0.65 mg EAG g -1 tf y 1.06 mg EC g-1 tf,
respectivamente) (Figura 2C y D). Al respecto, Kapoulas et al. (2017), reportaron que cuando la
lechuga longifolia se cultiva con fertilizante orgánico, el contenido de fenoles totales disminuye,
reportando un valor de 0.20 mg EAG g-1 tf, menor a lo observado en este estudio en el tratamiento
en lombricomposta. Pero Llorach et al. (2008), reportaron en lechuga Lactuca sativa L., un intervalo
de 0.18 a 5.7 mg EAG g-1 tf y de flavonoides totales de 0.008 a 2.84 mg g-1 tf, valores parecidos a los
obtenidos en este estudio en condiciones de lombricomposta. En cuanto a la actividad y capacidad
antioxidante, el promedio fue mayor en las plantas del grupo control (10.5 y 15.6 µmol Eq. Trolox g -
1 tf, respectivamente), en contraste con las plantas que crecieron en lombricomposta (2.1 µmol y 5.1

µmol Eq. Trolox g-1 tf, respectivamente) (Figura 2E y F).

Figura 8. Cambios en el contenido promedio ( error estándar) de proteína (A), ácido ascórbico (B),
fenoles totales (C), flavonoides totales (D), actividad antioxidante (E) y capacidad antioxidante (F)
en hojas de lechuga cultivada en suelo y lombricomposta.

El comportamiento observado en el contenido de fenoles, flavonoides, actividad y capacidad

antioxidante, podrían indicar mayor actividad de las enzimas fenilalanina amonio liasa (PAL),
polifenol oxidasa (PPO) y algunas isoformas de peroxidasa, las cuales son reguladoras clave para
la biosíntesis de compuestos fenólicos de plantas y de la transcripción de muchos genes que
codifican a PAL, actividad que suele ocurrir por efecto de condiciones ambientales adversas, como

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bajos niveles de nutrientes, particularmente N y microelementos metálicos (Ruiz et al., 2003;

Velickovic et al., 2014; Wada et al., 2014). Además, Gershenzon (1984), indicó que el estrés por
bajo nivel de nitrógeno, así como puede provocar un menor crecimiento y rendimiento en las plantas,
podría conducir a la desaminación de fenilalanina por la actividad catalítica de PAL, y así producir
una mayor cantidad de compuestos fenólicos. Lo cual explicaría los resultados obtenidos en este
estudio.

Polifenol oxidasa (PPO)

Las plantas de lechuga que crecieron en el suelo sin lombricomposta obtuvieron mayor actividad
enzimática de PPO (Figura 3). Esta respuesta podría atribuirse a la deficiencia de nutrientes en
lechugas del grupo control, debido a un incremento en el contenido de compuestos fenólicos que
sirven como sustrato para activar la enzima PPO. Al respecto, Cakmak y Römheld (1997), reportaron
que una deficiencia de boro, en hojas de girasol (Helianthus annuus), incrementa la actividad de la
enzima polifenoloxidasa. Asimismo, Martins y Mourato (2006), indicaron que el estrés por bajas
concentraciones de cobre, en hojas de plantas de tomate (Lycopersicon esculentum Mill., cv.
Hynema) cultivadas en soluciones hidropónicas, genera una mayor actividad de PPO.

Figura 9. Actividad enzimática promedio ( error estándar) de PPO en hojas de lechuga cultivas en
suelo y lombricomposta.

CONCLUSIONES
Las plantas de lechuga cultivadas en lombricomposta tuvieron un mayor crecimiento y desarrollo,
menor tiempo para la cosecha, mejores parámetros de calidad externa como color, altura de la
planta, ancho de la hoja, número de hojas y peso de la lechuga. Así mismo una menor actividad de
la enzima PPO, por lo que se propone como una buena alternativa para usarse como sustrato en
lechuga orejona (Lactuca sativa L.).

BIBLIOGRAFÍA
1. AOAC, Off c a e h d f a a f AOAC I e a a , Ga he b g , MD. 1995.
2. Sofo, B. Lundeg rdh, A. M rtensson, M. Manfra, G. Pepe, E. Sommella, M. De Nisco, G.C.
Te e, P. Ca g a, A. Sc a, D ffe e ag c a d fe a n systems affect
he c f e, a da ca ac a d ea c f e ce , Sc e a
Horticulturae, Vol. 204, 2016, pp. 106-115.
3. L e , Reducción de la fertilización sintética con composta y optimización del riego sobre
la pudrición del tallo (Fusarium spp.) del maíz en Sinaloa , Scientia Agropecuaria, Vol. 5,3,
2014, pp. 121-133.

TOMO II BIOTECNOLOGÍA Y CIENCIAS AGROPECUARIAS - PÁGINA 98

MISCELÁNEA CIENTÍFICA EN MÉXICO CENTRO DE INVESTIGACIONES EN ÓPTICA, A.C.

4. O a e , L b c a c a de e c de ga ad ac eche c
fe a e e ad e de e , U e dad c e c a, V . 28,1, 2012, pp. 27-37.
5. Zh , L. L , Y. W , J. Fa & J. O a g, Salicylic acid inhibits enzymatic browning of fresh-
cut Chinese chestnut (Castanea mollissima) b c e e hb g he da e ,
Food Chemistry, Vol. 171, 2015, pp. 19-25.
6. Polat, H. De & A.N. O , Comparison of some yield and quality crtiteria in organically
and conventionally- g e ce , Af ca J a f B ech g , V . 7,9, 2008, pp.
1235- 1239.
7. FAO, Pe ec a a a e ed a b e e , Ag c a d a hac a años 2015-2030,
Informe resumido, 2002, pp. 75-77
8. F. Be e & J.J. S a , Ferric reducing/antioxidant power assay: direct measure of total
antioxidant activity of biological fluids and modified version for simultaneous measurement of
total antioxidant power and ascorbic acid concentration , Methods in enzymology, Vol. 299,
1999, pp. 15-27.
9. F. Pa a ha a , I. Pa ad , I. T a a d E. Ta d , Ve c a a
supplement to improve growth, yield and quality of lettuce (Lactuca sativa L.) , J a f
Food, Agriculture & Environment, 2012, Vol.10(2), pp. 677-682.
10. G. A amovi -Djokovi , R. Pavlovi , J. Mladenovi , M. Djuri , V a Cc e f d ffe e
e f e ce a e e , Ac a Ag c ae Se b ca, V . XVI, 32, 2011, pp. 83-89.
11. G.E. Ca , Determinación microbiológica y de metales pesados en lechuga de repollo
(Lactuca sativa), e e d d e d fe e e e cad de d e a de Q ,
Tesis, Universidad Polítecnica Salesiana Sede Quito. Ecuador. 2016.
12. H.E. R , C a ac N c a de C a C U a d D ab Og c ,
Tesis de Licenciatura, Universidad de Guadalajara, México, 2011.
13. Ca a , , a d V. R he d, B def c e c -induced impairments of cellular functions in
a , P a a d S , V . 193, 1997, . 71-83. [Link]
14. J.A. F , R.R. Sa d , G.E. R & R. Ma e , Importancia de los abonos orgánicos , Ra
Ximhai, Vol. 4, 1, 2008. Pp. 57-67.
15. J. Ávila & J. Ruales, I f e c a de e ehd c e a c echa, edade
físico-químicas y estimación de la capacidad antioxidante del tomate de árbol (Solanum
be ace Ca .) Ge g ga e a a , Re a Ibe a e ca a de Tec ga
Postcosecha, Vol. 17, 1, 2016, pp. 30-40.
16. J. Jea , C B e de A e . Ec g Ac f he M d e a,W ,
CA. E.E.U.U, 2002.
17. J.M. R , R.M. R e , I. L e , L. R e , Role of Ca2+ in metabolism of phenolic
compounds in tabacco leaves (N c a a abac L.) , Plant Growth Regul, Vol. 41, 2003,
pp. 173-177.
18. J.M. Ve c c , D.S. D e c , S.S. M c , M.N. M c , D.A. K c , The de e a f
the phenolic. Composition, antioxidantive activity and heavy metals in the extracts of
Clendula officinalis L. Adv. Technol, 3, 2014, pp. 46-51.
19. J. Gershe , Changes in the levels of plant secondary metabolites under water and
nutrient stress. In: Timmermann, B.N., Steelink, C., Loewus, F.A. (Eds.), Phytochemical
Adaptations to Stress , Springer, New York, 1984 pp. 273 320.
20. J.G. V e , E a ac ag nomica de cinco variedades de lechuga (Lectuca sativa L.)
en tres ciclos de siembra consecutivos, en San Miguel de la Tigra, San Carlos, Alajuela,
C.R. , I Tec g c de C a R ca, C a R ca, 2015.
21. J. Jea , La c a,E :C b e sivo de alimentos, ECOLOGY ACTION of de
MID-PENINSULA, 1991, pp. 39.
22. J. Prado García. 2013. Manual de lombricompostaje de pulpa del café para los cafeticulturos
de la región Otomí-Tepehua de Hidalgo. Innova y Renueva. pp. 10.
23. J. Zhishen, T. Mengcheng, W. J a g, The de e a ffa dc e be
a d he ca e g g effec e de ad ca , F d Che , V . 64, 1999, . 555-
559.

TOMO II BIOTECNOLOGÍA Y CIENCIAS AGROPECUARIAS - PÁGINA 99

MISCELÁNEA CIENTÍFICA EN MÉXICO CENTRO DE INVESTIGACIONES EN ÓPTICA, A.C.

24. L.L. Ma a d M.P. M a , Effec f E ce C e T a Pa : G h

Parameters, En e Ac e , Ch h ,a dM e a C e ,J a fPa N ,
Vol. 29, 2006, pp. 2179-2198.
25. K.C. Wada, K. Mizuuchi, A. Koshio, K. Ka e , T. M , T. Ka e , S e e ha ce he
gene expression and enzyme activity of phenylalanineammonia-lyase and the endogenous
c e f a c c ac d d ce f e g ha b , J. P a Ph , 2014, . 895-902.
26. M.A. A a a, Evaluación de técnicas de preservación de hortalizas de IV gama: lechuga
(Lactuca sativa L.), tomate cherry (Solanum lycopersicum) y zanahoria (Daucus carota) ,
Tesis de licenciatura. Universidad Técnica de Amabato, Ecuador, 2019.
27. M.A. Olivares-Campos, A. Hernández-Rodríguez, C. Vences-Contreras, J.L. Jáquez-
Balderrama, and D. Ojeda-Ba , L b c a c a de e c de ga ad
ac eche c fe a e e ad e de e , U e dad c e c a, V . 28,
2012, pp. 27-37.
28. M.D. Raigón, M. Figueroa, M.D. García,S. Soler, J. Prohens, Variación en la composición
química y características organolépticas de una colección de variedades tradicionales de
lechuga procedentes de cultivo ecológico , Actas de Horticultura. 62, 2019, pp. 155-156.
29. M. L a, Influencia de los factores pre y postcosecha en la calidad de la lechuga IV Gama ,
Tesis de doctorado, Universidad de Murcia, España, 2012.
30. M.M. B adf d, A a d a d e e eh d f a f ca f c ga a e f
protein utilizing the principles of protein-d e b d g. A a ca B che , V . 72, 1976,
pp. 248-25.
31. N. Ka a , A. K a a & Z. I c, Nutritional quiality of lettuce and onion as companion
plants from organic and conventionalproduction in north Greece , Scientia Horticulturea, Vol.
219, 2017, pp. 310-318.
32. N. S ff & G.L. Whee e , Ascorbid acid in plants: biosynthesis and function , Critical
Reviews in Plant Sciences, Vol. 19,4, 2000, pp. 267-290.
33. O. P eb a, A licación de composta, micorriza (Glomus intraradises) y ácidos húmicos en
la producción de lechuga (Lactuca sativa) , Te de g ad , U e dad A a de Sa
Luis Potosí, México, 2012.
34. P. Román, M.M. Martínez, & A. Pantoja, Manual de compostaje del agricultor: Experiencias
en América Latina, Organización de las Naciones Unidas para la Alimentación y la
Agricultura, 2013, pp. 11.
35. R. K h e a , M. B e, A. Wa , a d K. Jagad G a. A O e e f I a
Enzymes Involved in Nitrogen Assimilatio f Pa , E : N ge Me ab Pa :
Methods and Protocols, Kapuganti Jagadis Gupta, Methods in Molecular Biology, 2020, pp.
1.
36. R. L ach, Characterisation of polyphenols and antioxidant properties of five lettuce
varieties and e ca e , F d Che , V . 108, 3, 2007, pp. 1028-1038.
37. SADER, P d cc ag c a , Servicio de Información Agroalimentaria y Pesquera, 2017.
38. SIAP, Lactuca sativa L: a edade e e d ce e M c , Se c de
Información Agroalimentaria y Pesquera, 2018.
39. T. Ba be & J.C. E , Phenolic compounds and related enzymes as determinants of
quality in fruits and vegetables , Science of Food and Agriculture, Vol. 81, 2001, pp. 853-876.
40. V.E. R ba , & M. Ya ag ch , Le ce a d O he Composite Vegetables. In: World
ege ab e : c e , d c ,a d e a e Sec d ed ,S ge Sc e ce &
Business Media, 1997, pp. 333. DOI: 10.1007/978-1-4615-6015-9.
41. V.L. S g e , & J.A. R , C e f a he c c unds with
phosphomolybdic- h h g c ac d eage , A e ca J a f E g a d
Viticulture, Vol. 16, 1965, 144-158.
42. W. Brand-W a , M.E. C e e , C.L.W.T. Be e , U e f a f ee ad ca e h d e a a e
a da ac , LWT-Food Science and Technology, Vol. 28(1), 1995, pp. 25-30.
43. W.J. C e , & R.L. I a , Ra a f a a a b dge be ee aa e c a d
aa e c a c , The American Statistician, Vol. 35(3), 1981, pp. 124-129.

TOMO II BIOTECNOLOGÍA Y CIENCIAS AGROPECUARIAS - PÁGINA 100

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44. Yac b S a , Effec f vermicompost and bokashi on nutrient content of mustard green
a d e ce , I e a a Se a H c e F d Sec , 2010, . A136-
A140.

TOMO II BIOTECNOLOGÍA Y CIENCIAS AGROPECUARIAS - PÁGINA 101

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ADN EXTRACELULAR ACTÚA COMO PATRÓN MOLECULAR ASOCIADO A DAÑO EN LA

MICROALGA NEOCHLORIS OLEOABUNDANS.
Stephanie Maviael Rodríguez-Rodríguez1, Ivette Cornejo-Corona2, Varinia López-Ramírez3,
Domancar Orona-Tamayo1 y Elizabeth Quintana Rodríguez1

1Dirección de soluciones tecnológicas e investigación, CIATEC. León, Guanajuato.

2Department of Biochemistry & Biophysics Texas A&M University, College Station, TX, USA.
3Tecnológico Nacional de México/ITS de Irapuato, Irapuato, Guanajuato, México.

equintana@[Link]

RESUMEN
Los mamíferos, insectos, plantas y hongos poseen un mecanismo conservado para responder a
algún tipo de daño; sea biótico o abiótico. Los patrones moleculares asociados a daño (por sus siglas
en inglés, DAMPs) actúan como activadores generales del sistema inmune a través de redes de
señalización elaboradas, como flujos de calcio, cascadas de quinasas, especies reactivas de
oxígeno (ROS) y vías de señalización de oxilipina. Los DAMPs comunes que se han estudiado
incluyen ATP extracelular, sacarosa extracelular, proteínas, péptidos y ADN extracelular (eDNA). Sin
embargo, el conocimiento de la respuesta al daño en microalgas es escaso. A pesar de que las
microalgas han sido sometidas a diferentes tipos de estrés abiótico para inducir la producción de
metabolitos de interés, se conoce en menor medida la respuesta a DAMPs. El propósito de este
trabajo fue analizar el efecto del ADNe en la microalga Neochloris oleoabundans como un DAMP
reconocido en animales y plantas. N. oleoabundans es una microalga que en respuesta a estrés
acumula lípidos. Con el fin de dilucidar el efecto metabólico en respuesta al ADNe, evaluamos la
acumulación de especies reactivas de oxígeno (ROS), carbohidratos, proteínas y polifenoles totales.
Particularmente, evaluamos el efecto del ADNe en la producción de lípidos como marcador de estrés.
Los resultados mostraron que N. oleoabundans presenta capacidad de respuesta al ADNe con la
activación de ROS intracelular a los 30 minutos de tratamiento. Mientras, que los lípidos y polifenoles
se acumularon después de 24 horas y a las 48 h, los cultivos mostraron más del doble de lípidos en
comparación al control. Aunque se desconoce el mecanismo de defensa en las microalgas,
mostramos evidencia fisiológica de que N. oleoabundans es capaz de reconocer el ADNe como
DAMP de manera conservada; tal como, en otros organismos. Es así como este trabajo abre una
ventana para estudiar el potencial de los DAMPs en microalgas para ser evaluados como una
herramienta biotecnológica para la producción de metabolitos.

INTRODUCCIÓN
Las microalgas son organismos unicelulares microscópicos que miden desde 0.2 - 200 µm,
fotosintéticos lo que les permite captar nutrientes para su crecimiento mismos que pueden
transformar en productos como: lípidos, carbohidratos, proteínas, y metabolitos como polifenoles,
carotenoides, entre otros (1). Dichos productos han tenido interés para su aprovechamiento en la
industria de antibióticos, cosméticos, o como alimento para peces y producción de biodiesel. Existen
diversas especies de microalgas que en condiciones normales de crecimiento acumulan un alto
porcentaje de lípidos. Tal es el caso de la microalga Neochloris oleoabundans, la cual puede
acumular hasta un 80% de lípidos en relación a su peso en condiciones de estrés (2). La composición
bioquímica de las microalgas puede variar en función de las condiciones ambientales, entre las que
se incluyen condiciones de estrés; tal como, alteraciones en el déficit de nutrientes, salinidad, pH del
medio y factores abióticos como temperatura e intensidad luminosa (1). N. oleoabundans es una
especie de microalga verde de agua dulce, aislada de dunas de arena en Arabia Saudita se ha
evaluado su tolerancia al estrés por salinidad, sequía y altas temperaturas, además de presentar una
alta tasa de crecimiento. N. oleoabundans es un modelo ampliamente utilizado por su capacidad de
respuesta a condiciones de estrés y el almacenamiento de lípidos (2,3). Aunque las microalgas han
sido ampliamente utilizadas para la producción de metabolitos de interés poco se sabe acerca de la
percepción de estas al estrés.

TOMO II BIOTECNOLOGÍA Y CIENCIAS AGROPECUARIAS - PÁGINA 102

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TEORÍA
En plantas, mamíferos y otros organismos vivos, se conocen factores bióticos que desencadenan
una respuesta de estrés tales como herbívoros, patógenos e incluso ADN (4). Sin embargo, estos
organismos cuentan con elementos endógenos indicadores de daño (por sus siglas en inglés
Damage Asociated Molecular Pattern, DAMP), que ayudan a percibir moléculas propias
deslocalizadas y fragmentadas desencadenando el auto reconocimiento del daño ocasionando una
resistencia a patógenos y herbívoros con respuestas como acumulación de especies reactivas del
oxígeno (ROS, por sus siglas en inglés Reactive Oxygen signaling), flujos de Ca 2+ y la activación de
cascadas de señalización mediadas por proteínas cinasas, MAPKS (5,6). En plantas, se han
identificado diversos DAMPs; tal como, ATP extracelular (ATPE), DNA EXTRACELULAR (EDNA),
sacarosa, proteínas y sus fragmentos (4,5). El DNA es una molécula de importancia en los seres
vivos y su presencia en el espacio extracelular es una señal inequívoca de daño que activa diversas
rutas de defensa (7). La acumulación de ROS en cualquier organismo vivo deberá ser contrarrestada
por un mecanismo de defensa celular para eliminar el exceso de oxidantes, utilizando una variedad
de depuradores tanto enzimáticos como no enzimáticos tales como flavonoides, carotenoides y
polifenoles, siendo estos últimos metabolitos secundarios de gran relevancia en plantas, que
intervienen en su crecimiento, morfología y defensa contra plagas y depredadores (8). En microalgas,
las respuestas a DAMPs o a cualquier tipo de estrés biótico no ha sido completamente estudiado en
microalgas. Por tal razón, en este trabajo se examinó la respuesta de un cultivo de la microalga N.
oleoabundans a EDNA evaluándose respuestas tempranas como producción de ROS y tardías como
acumulación de lípidos y polifenoles. Las respuestas a DAMPs tienen un amplio potencial de
aplicación biotecnológico en las microalgas para ser utilizados como inductores de una variedad de
productos de alto valor agregado; tales como, antioxidantes, antibióticos, cosméticos,
biocombustibles, entre otros. Esta investigación, es un acercamiento para entender las respuestas
innatas de las microalgas y como estas son compartidas entre los organismos vivos. Además, de
abrir una ventana para el uso de DAMPs en microalgas en la producción de metabolitos de interés.

PARTE EXPERIMENTAL
Cultivos de la microalga N. oleoabundans se desarrollaron utilizando como medio de mantenimiento
el medio Bold bajo condiciones de laboratorio en fotobiorreactores de vidrio borosilicato de alta
transparencia, a una temperatura de 20 a 27°C, con un fotoperiodo de 12 horas luz/oscuridad. El
cultivo se recolectó por centrifugación, el precipitado se transfirió a un mortero con N 2 líquido para
triturar las células, posteriormente las células se conservaron a 20°C hasta su uso. La extracción
de DNA se llevó a cabo mediante el uso del reactivo DNAzol (9). Este DNA fue sometido a sonicación
para su ruptura en fragmentos de menor tamaño durante 20 minutos, a una potencia de 10 W
manteniendo las muestras en frío. Mediante electroforesis se verifico la integridad de las muestras
de DNA integro; así como, las muestras de DNA fragmentado. La concentración de DNA se cuantificó
mediante el uso de un espectrofotómetro QUAWELL (Q5000 UV-VIS). Para inducir los cultivos de la
microalga N. oleoabundans, se utilizó una concentración de 3.1 ng/ml. Se determinó el contenido de
carbohidratos, proteínas, lípidos, clorofila y polifenoles en muestras inducidas con eDNA a las 24 y
48 horas después de la aplicación. Para lípidos totales se utilizó el método de Bligh y Dyer (10). La
cuantificación de proteínas se realizó empleando el método de Lowry (Hidrólisis alcalina) y de
carbohidratos totales por el método Fenol-sulfúrico (Hidrólisis ácida) y para clorofila total se tomaron
2 ml del cultivo inducido (11,12). La determinación de polifenoles se realizó mediante el método
Folin Ciocalteu (13).

RESULTADOS
Se encontró que los carbohidratos y proteínas analizados en los cultivos inducidos no mostraron
cambios significativos con respecto a los cultivos no inducidos con DNA (Figura 1). Se ha descrito
que las condiciones adversas disminuyen la tasa de producción de biomasa y por ende los
carbohidratos, lípidos, proteínas y clorofila pueden verse afectados. Sin embargo, en este estudio no
se encontró tal efecto. Por otro lado, la concentración de clorofila tampoco se vio afectada por la
condición de estrés (Figura 1). La clorofila es un pigmento que cumple una función de suma
importancia para la absorción de luz que mediante una serie de reacciones permitirá la formación de

TOMO II BIOTECNOLOGÍA Y CIENCIAS AGROPECUARIAS - PÁGINA 103

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energía para la producción de biomasa y metabolitos. Al no haber ningún cambio, en la producción

de este pigmento, el crecimiento de la microalga no parece haber sido afectado, al igual que la
producción de carbohidratos y proteínas, los cuales son necesarios para el buen funcionamiento de
la célula. En el caso de los lípidos, se observó que los cultivos inducidos con eDNA aumentaron
significativamente la acumulación de estas biomoléculas encontrándose mayor acumulación a las
24 horas después de la inducción (Figura 2). En la microalga N. oleoabundas la acumulación de
lípidos es una señal de estrés. Mientras que, para los polifenoles, se encontró una tendencia en la
que las muestras inducidas con DNA extracelular presentaron mayor contenido de polifenoles
totales. Lo anterior sugiere que la respuesta de la microalga al daño parece ser similar a los reportes
de percepción de daño en plantas en cuanto a la acumulación de polifenoles como moléculas que
ayudan a contrarrestar el estrés oxidativo generado por el daño celular.

Figura 1. Respuesta a la inducción por eDNA en cultivos de N. oleobundans en el contenido de

carbohidratos, lípidos, proteínas y clorofila. Los datos muestran la media y la desviación estándar
(n=3), anova (*p<0.05).

Figura 2. Efecto de eDNA en el contenido de polifenoles totales. Los datos muestran la media y la
desviación estándar (n=3).

TOMO II BIOTECNOLOGÍA Y CIENCIAS AGROPECUARIAS - PÁGINA 104

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CONCLUSIONES
La microalga N. oleoabundans fue capaz de responder al ADN extracelular como una señal de daño
observada en la acumulación de lípidos intracelulares como un marcador de estrés en este género
de microalgas. Además, se encontró la acumulación de polifenoles como una respuesta a estrés.

BIBLIOGRAFÍA
1. Sigamani S, Natarajan H. A Review on Potential Biotechnological applications of Microalgae.
J Appl Pharm Sci. 2016 Aug 30;6:179 84.
2. Li Y, Horsman M, Wang B, Wu N, Lan C. Effects of Nitrogen Sources on Cell Growth and
Lipid Accumulation of Green Alga Neochloris oleoabundans. Appl Microbiol Biotechnol. 2008
Oct 1;81:629 36.
3. Carreres B, De Jaeger L, Springer J, Schaap P, Eggink G, Martins dos Santos V, et al.
Neochloris oleoabundans is worth its salt: Transcriptomic analysis under salt and nitrogen
stress. PLoS One. 2018 Apr 13;13:e0194834.
4. Quintana-Rodriguez E, Duran-Flores D, Camacho-Coronel X, Heil M. Damage-associated
molecular patterns (DAMPs) as future plant vaccines that protect crops from pests. Sci Hortic
(Amsterdam). 2018;
5. Gallucci S, Maffei ME. DNA Sensing across the Tree of Life. Trends Immunol [Internet].
2017;38(10):719 32.
6. Arimura G-I, Ozawa R, Maffei ME. Recent advances in plant early signaling in response to
herbivory. Int J Mol Sci. 2011;12(6):3723 39.
7. Heil M. Commentary on Grandellis et al. 2019: suggesting endogenous DNA as further player
in the plant immune response to DOTAP. Planta. 2019;250(1):391 3. 8.
8. Duran-Flores D, Heil M. Damaged-self recognition in common bean (Phaseolus vulgaris)
shows taxonomic specificity and triggers signaling via reactive oxygen species (ROS). Front
Plant Sci. 2014;5:585.
9. Chomczynski P, Mackey K, Drews R, Wilfinger W. DNAzol®: A reagent for the rapid isolation
of genomic DNA. Biotechniques. 1997 Apr 1;22:550 3.
10. Bligh ELG, Dyer WJA. A Rapid Method of Total Lipid Extraction And Purification. Can J
Biochem Physiol. 1959 Sep 1;37:911 7.
11. Aguilar-Rivera N, Canizales-Leal MJ. Cinética de la hidrólisis ácida de la cascarilla de
cebada. Rev Mex Ing Química. 2004;3(3):257 63.
12. Gaviria PAR, Cayón G. Efecto de Mycosphaerella fijiensis sobre la fisiología de la hoja de
banano. Agron Colomb. 2008;26(2):256 65.
13. Martínez-Cruz O, Paredes-Lopez O. Phytochemical profile and nutraceutical potential of chia
seeds (Salvia hispanica L.) by ultra high performance liquid chromatography. J Chromatogr
A. 2014;1346:43 8.

TOMO II BIOTECNOLOGÍA Y CIENCIAS AGROPECUARIAS - PÁGINA 105

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EFECTO DE EXTRACTOS DE PIEL DEL HUESO Y CASCARA DE AGUACATE CRIOLLO

SOBRE EL OSCURECIMIENTO DE LA PULPA DEL MISMO FRUTO.
Perla Esmeralda Escalona Rueda1, Heriberto Sánchez Martínez2 Guadalupe Herrara Hernández3
Gabriela Medina Ramos2 y Salvador Horacio Guzmán Maldonado3

1 Tecnológico Nacional de México en Celaya. Av. Tecnológico s/n. Celaya, Guanajuato.

2 Universidad Politécnica de Guanajuato. Av. Universidad Norte s/n Juan Alonso de Cortazar,
Guanajuato.
3 Laboratorio de Alimentos Funcionales. Campo Experimental Bajío del Centro de Investigación

Regional del Centro (INIFAP) Km 6.5, Carretera Celaya-San Miguel Allende, Celaya, Gto.
14030319@[Link]

RESUMEN
La raza Mexicana de aguacate dio origen al tipo criollo que presenta una gran variedad en tamaño,
color y sabor; por ejemplo, hay aguacates negros cuya cascara es tan delgada que se consume junto
con la pulpa. Comonfort, Gto., ha producido históricamente este tipo de aguacate; sin embargo, a
partir del 2017 se empezó a introducir aguacate Hass en este municipio que ha provocado el
desplazamiento y desaparición gradual del aguacate criollo. Para evitar esta pérdida, se planteó la
necesidad de proponer usos alternativos para promover y explotar dicho recurso. En este trabajo, se
usó pulpa, piel del hueso y piel del fruto de seis tipos de aguacate criollo, dos de color verde y cuatro
negros. Los materiales fueron seleccionados por su alto rendimiento y buena aceptación de sabor
de acuerdo a los productores de Comonfort. Se seleccionaron dos materiales sobresalientes por su
alto contenido de fenoles y alto nivel de capacidad antioxidante para preparar extractos etanólicos
de la piel del hueso y la piel del fruto para evaluar su efecto inhibitorio sobre el color obscuro de la
pulpa, que se desarrolla con el tiempo. La piel del hueso presentó un bajo contenido de fenoles
solubles y taninos condensados y no se detectaron antocianinas; sin embargo, su capacidad
antioxidante fue hasta 15 veces mayor que la de la fresa, fruta que presenta la mayor capacidad
antioxidante de una larga lista de frutas y verduras 1. La piel del hueso de los tipos Pata Pichón y
Landin-3, ambos de color negro, presentaron la mayor capacidad antioxidante. Con respecto al
contenido de compuestos fenólicos de la piel del aguacate, los tipos Landin-3 y NNN (negro, negro,
negro) presentaron hasta 61 veces más fenoles que la fresa 1, pero bajos contenidos de taninos y
flavonoides. Con respecto a la capacidad antioxidante TEAC, de los seis materiales bajo estudio, los
tipos Pata de pichón y NNN presentaron 91 y 38 veces, respectivamente, mayor nivel que la fresa. 1
Al probar el efecto inhibitorio de extractos de la piel de aguacate y piel del fruto de Pata de Pichón y
NNN en diferentes proporciones extracto:pulpa (v:p), se observó que después de 17 h, los extractos
de piel del hueso no inhibieron el obscurecimiento de la pulpa de aguacate. Sin embargo, en función
del volumen de extracto de la piel de NNN utilizado, se observó una disminución en el
obscurecimiento de la pulpa de aguacate. Los datos Hunter-Lab, corroboraron los resultados
visuales. Extractos de piel de aguacate negro NNN pueden evitar el obscurecimiento de la pulpa del
aguacate.
1. A.R. Proteggente, A. S. Pannala, G. Paganga, L van Buren, E. Wagner, S. Wiseman, F. van de
Put C. Dacombe, C. A. Rice-Evans, "The antioxidant activity of regularly consumed fruit and
vegetables re ects their phenolic and vitamin C Composition", Free Rad. Res., 36, 2, 2002, pp. 217
233.

INTRODUCCIÓN
TEORÍA
El aguacate
El subgénero Persea es originario de África y se cree que llegó a las Américas a través del mar y de
alguna manera. Los vestigios arqueológicos más antiguos del aguacate se localizaron en una cueva
de Coxcatlán, Puebla y datan de hace 10,000 a. C. Lo anterior llevó a la conclusión de que, al menos,
la especie Persea americana es originaria de México; por tal motivo se le denominó: raza Mexicana
(1). Hay dos especies más del género que son endémicas del caribe y centro américa: P. americana
var. Americana, denominada raza Antillana y P. americana var. Guatemalensis o raza Guatemalteca

TOMO II BIOTECNOLOGÍA Y CIENCIAS AGROPECUARIAS - PÁGINA 106

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(2). Estás razas se pueden diferenciar sobre la base de sus características morfológicas, fisiológicas
y de cultivo (3, 4). El aguacate es una planta dicotiledónea perteneciente al orden Ranales y a la
familia Lauracea (5). Esta familia agrupa a más de 52 géneros y cerca de 3,500 especies y se
considera una de las familias más primitivas de las dicotiledóneas (1).
La a ab a ag aca e e e de h a ag aca g f ca e c . E a a ab a f e ada
ea e F a c c Ce a e de Sa a a , e b a M c e 1554 (6). De de a
llegada de los españoles a México, la especie Persea americana se distribuyó por todo el mundo,
sobre todo en aquellos países con zonas tropicales y subtropicales. México es uno de los países con
la mayor diversidad de aguacate nativo silvestre, conocido comúnmente como aguacate criollo. El
aguacate criollo pertenece a la especie Persea americana y presenta una gran cantidad de tipos
diferentes. Esta diversidad en el aguacate criollo proviene de fuentes distintas de árboles nativos y
cultivares selectos reproducidos asexualmente, el los cuales, el sabor y los valores nutritivos varían
según el tipo ecológico (7). Además, algunos tipos de aguacate son una mezcla de las tres razas
existentes: Mexicana, Guatemalteca y Antillana, debido a la introducción en nuestro país de las dos
últimas.
Hoy en día, se denomina aguacate criollo aquel aguacate que se originó en la localidad y que ha
sido conservado y protegido por los pobladores. La producción de este aguacate en las comunidades
de destina principalmente para el autoconsumo y en menor cantidad, se comercializa en los
mercados de la localidad. Se puede encontrar aguacate criollo en Puebla, Michoacán, Nuevo León,
San Luis Potosí, Nayarit y Guanajuato. En Guanajuato existe la mayor variabilidad de aguacate
criollo ya que se han identificado al menos 300 tipos diferentes (8).
Se desconoce la superficie sembrada y la producción de aguacate criollo en México debido a que
este tipo de fruta dejo de ser de interés gubernamental hace muchos años. Sin embargo, se sabe
que, del total de superficie sembrada de aguacate en el Estado de México, el 3% está sembrada de
materiales criollos (9). En consecuencia, se calcula que en este estado existen cerca de 3,600 ha de
aguacate criollo. En el estado de Guanajuato no existe información sobre la superficie sembrada de
este tipo de aguacate; sin embargo, se ha encontrado que se conservan árboles de aguacate criollo
a nivel de traspatio (8).
En los últimos años, el gobierno del estado de Guanajuato introdujo un programa para introducir el
aguacate Hass. Esto provocó que áreas donde estaba sembrado el aguacate criollo fueran
sustituidas por aquel. Esta situación ha generado la pérdida paulatina de una gran riqueza genética
de la cual no se conocen las características químicas, de sabor, olor o propiedades industriales. Esta
situación pude provocar una situación irreparable.
En los tres últimos años, el INIFAP ha realizado una serie de trabajos para conocer la situación actual
del aguacate criollo en el estado de Guanajuato. Ha iniciado la integración de un padrón por
propietario, superficie sembrada y tipo de aguacate criollo establecido. También se han analizado
químicamente y se ha evaluado su calidad sensorial y potencial industrial de diferentes tipos de
aguacate criollo. El proyecto tiene como objetivo identificar materiales que puede ser destinado a la
producción de pulpa u otros usos industriales o de comercialización.
Obscurecimiento de la pulpa
Uno de los factores más importantes en la producción de pulpa de aguacate es prevenir el
oscurecimiento. La pasta de aguacate se oscurece en menos de una hora si se deja a temperatura
habiente y a la luz y en menos de seis horas si se refrigera. El oscurecimiento de la pasta del
aguacate es provocado por la enzima polifenol oxidasa (10). Se han intentado utilizar varios métodos
para evitar este problema como tratamientos con calor, modificar el pH con ácido cítrico, por ejemplo
(11). Sin embargo, estos métodos alteran el sabor y el color y disminuyen el contenido de vitaminas
(al aplicar calor), además de no ser totalmente efectivos (10, 11).
Por otro lado, es una costumbre popular dejar el hueso del aguacate en la pasta o añadir jugo de
limón para evitar el oscurecimiento; sin embargo, a estos fenómenos no se les ha dado la atención
debida y no se sabe si efectivamente tienen un efecto inhibidor sobre el oscurecimiento de la pulpa
de aguacate.
El objetivo de este trabajo fue caracterizar por el contenido de compuestos fenólicos y la capacidad
antioxidante de la piel y del hueso de seis variedades de aguacate criollo, dos verdes y cuatro negras.

TOMO II BIOTECNOLOGÍA Y CIENCIAS AGROPECUARIAS - PÁGINA 107

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Obtener extractos etanólicos de dos materiales con la mayor concentración de fenólicos y capacidad
antioxidante, para probar su efecto sobre el oscurecimiento de la pulpa de aguacate.

PARTE EXPERIMENTAL
Frutos de aguacate
Las variedades de aguacate criollo Verde Punteado, Verde Amarillo y de aguacate negro Pata de
Pichón, Melitón, Landín 3 y NNN, fueron colectadas en Comonfort Guanajuato en agosto de 2019.
Estos materiales fueron seleccionados por su alto rendimiento y aceptación sensorial.
Piel, hueso y extractos etanólicos
La cascara y el hueso con su piel fueron retirados del fruto, liofilizados y almacenados a 20 ºC
hasta su utilización. Después de liofilizar el hueso con piel, se le añadió cebolla liofilizada en
proporción 1:1 (p:p). Por otro lado, los extractos utilizados para evaluar la capacidad inhibitoria del
obscurecimiento de la pulpa se obtuvieron utilizando etanol grado alimenticio. Se mezcló una parte
de tejido liofilizado (cascara y piel más hueso por separado) en diez partes de etanol. Se agitaron
por 30 min, centrifugaron y se recuperó el sobrenadante (extracto).
Composición fenólica
Los compuestos fenólicos totales determinados fueron extraídos con metanol acuoso (80:20, v:v),
como se indica en los métodos utilizados ya que se ha demostrado que esta solución de extracción
es la más eficiente para extraer los fenoles de tejidos vegetales (12, 13, 14). Al respecto, los fenoles
solubles totales (FST) se determinaron con el método de Folin Ciocalteu que utiliza al ácido gálico
como agente a reducir (12).
Los taninos condensados (TC) fueron determinados utilizando la vainillina y se reportaron como
equivalentes de (+) catequina en mg/100g (mgEC/100 g) (13). La cuantificación de las antocianinas
totales (AT) se determinó espectrofotométricamente y estos compuestos se reportaron como
equivalentes de cianidina 3-glucosido, según la siguiente formula (14):
C= (A/ ) ( /1000) PM X (1/ e de a e a) 106
Do de: C=C ce ac de a c a a a e ( g/Kg), A=Ab ba c a a, =Ab dad
molar de cianidina 3-glucosido (25,965 cm-¹M-¹), Vol=Volumen total del extracto de antocianinas y
PM=Peso molecular de cianidina 3-glucosido (PM=449).
Capacidad antioxidante
TEAC. Para determinar la capacidad antioxidante expresada como equivalentes de Trolox (TEAC
por sus siglas en inglés) se utilizó el ácido 2,2-azinobis-3-etil-benzotiazolin-6-sulfónico (ABTS2+)
como radical anión. Este anión en presencia de peróxido de hidrógeno, dióxido de manganeso y
persulfato de potasio y el compuesto antioxidante desarrolla color que se detecta a 734 nm (15).
DPPH. La capacidad antioxidante DPPH que utiliza el catión (1-1-difenil-2pricildidrazilo) para evaluar
la transferencia de electrones de los compuestos antioxidantes (16).
Inhibición del obscurecimiento de la pulpa
Se seleccionó el material con el mayor nivel de capacidad antioxidante para la extracción con etanol
grado alimenticio; al que se le añadió cebolla liofilizada en la proporción ya explicada anteriormente.
Las pruebas se realizaron evaluando dos porciones de extracto etanoico y pulpa (v:p): 3:30 y 6:30
(mL:g pulpa).
Análisis estadístico
Los datos de todos los análisis se presentaron como la media ± desviación estándar (n=3) y se
sometieron a un análisis de varianza (ANDEVA) para detectar diferencias significativas entre las
medias. La comparación de medias se realizó con la prueba de Tukey con un nivel de significancia
de = 0.05 c e f a e SPSS e 17.0 C gh 1989 2009 y SAS versión 9.02 Copyright
© 1989 2008 Institute Inc.

TOMO II BIOTECNOLOGÍA Y CIENCIAS AGROPECUARIAS - PÁGINA 108

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RESULTADOS
El contenido de fenoles solubles totales en la cascara del aguacate presentó un amplio rango
(Cuadro 1). Por ejemplo, la variedad Verde Amarillo y el aguacate negro Meliton presentaron un poco
más de 1,400 mg EAG/100 g estos compuestos; mientras que, en el extremo opuesto, la variedad
verde punteado presentó 2.3 veces menos que las variedades Verde Amarillo y Meliton. Estos
valores fueron mucho menores si se comparan con el contenido de fenoles solubles totales de la
variedad comercial Hass (4,406.2 mg EAG/100 g) (17).
El contenido de taninos condensados en las seis muestras analizadas fue menor al rango reportado
para la cascara del aguacate Hass (188 - 479 mg EC/100g) (18), Por otro lado, con respecto al
contenido de antocianinas en las muestras analizadas, se observó una menor concentración en
comparación con el aguacate Hass (188 479 mg EC3G/100 g (19) con excepción de las variedades
Verde Punteado (537.8 mg EC3G/100 g), Pata de Pichón (764.4 mg EC3G/100 g) y NNN (799.8 mg
EC3G/100 g).
Se ha demostrado que los compuestos fenólicos tienen un efecto importante en el sabor de los
vegetales (20). En este sentido, la cascara de aguacate Hass y las variedades verdes de aguacate
criollo no son comestibles, si lo son la cascara de las variedades negras porque presentan grosor de
1 mm o menos. Es una costumbre popular consumir la pulpa este tipo de aguacates junto con la
cascara. Por lo tanto, conocer el contenido de estos compuestos, no solo es importante para los
fines de este trabajo, también aportan el valor funcional de esta estructura.

Cuadro 1. Contenido de fenoles solubles totales, taninos condensados y antocianinas en cascara

del fruto de aguacate criollo.
Variedad Fenoles solubles totales Taninos condensados Antocianinas
(mg EAG/100 g) (mg EC/100 g) (mg EC3G/100 g)
Verde Punteado 605.8 ± 19.2 d 114.1 ± 4.40 c 537.8 ± 19.56 b
Verde Amarillo 1,403.3 ± 31.5 a 160.3 ± 2.87 a 377.8 ± 25.68 d
Negros
Pata de pichón 1,130.7 ± 18.8 b 40.6 ± 3.61 e 764.4 ± 20.95 a
Melitón 1,410.1 ± 16.3 a 142.2 ± 8.03 b 447.0 ± 6.11 c
Landín 3 319.6 ± 23.6 e 149.6 ± 10.54 ab 189.9 ± 7.13 e
NNN 789.9 ± 17.4 c 99.2 ± 5.25 d 799.8 ± 15.90 a
EAG=equivalentes de ácido gálico; EC=equivalentes de catequina; EC3G = equivalentes de cianidin-
3 glucosido. Promedios con letras diferentes no son estadísticamente iguales (Tukey, 0.05, n=3).

Se encontró que el contenido de compuestos fenólicos en el hueso (con su piel) mezclado con
cebolla, es extraordinariamente alto. Al respecto, el 20% (base seca) de la variedad Landín 3
corresponde a fenoles solubles condensados (Cuadro 2), mientras que las otras variedades van del
12.9% (Pata de Pichón) a 8.6% (Verde Amarillo). Sin embargo, este nivel tan alto de fenólicos no
tiene ninguna relación con el contenido de taninos ni con las antocianinas; el nivel detaninos no fuer
mayor a 6.63 (mg EC/100 g) y no se detectaron antocianinas (Cuadro 2).
Bajo nuestro menor conocimiento, este es el primer reporte de compuestos fenólicos en hueso y piel
de aguacate; sin embargo, niveles tan altos en el contenido de compuestos fenólicos se han
reportado en otras especies vegetales como en la hoja de té negro (10.1%) o té verde, que llega a
contener hasta un 25.3% (21).

Capacidad antioxidante
La capacidad antioxidante tanto en la cascara como en el hueso con la piel y cebolla, fueron un
reflejo del contenido de compuestos fenólicos (ver Cuadros 1, 2 y 3). Es decir, a menor concentración
de compuestos fenólicos, menor nivel de capacidad antioxidante. Sin embargo, esta relación no se
observó en la cascara o el hueso más piel entre los materiales analizados. Por ejemplo, la variedad
negra, Pata de Pichón, que presentó el mayor nivel de TEAC (38,250 mmol Trolox/100g) pero no fue
la que presentó el mayor contenido de fenoles totales (Cuadro 2).

TOMO II BIOTECNOLOGÍA Y CIENCIAS AGROPECUARIAS - PÁGINA 109

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Cuadro 2. Contenido de fenoles solubles totales, taninos condensados y antocianinas en hueso

con su piel de aguacate criollo y cebolla.
Variedad Fenoles solubles totales Taninos condensados Antocianinas
(g EAG/100 g) (g EC/100 g)
Verde Punteado 10.1 ± 0.48 d 4.97 ± 0.43 b ND
Verde Amarillo 8.6 ± 0.18 e 4.30 ± 0.38 b ND
Negros
Pata de Pichón 12.9 ± 0.93 c 6.63 ± 0.57 a ND
Melitón 8.8 ± 0.61 e 1.55 ± 0.11 d ND
Landín 3 20.2 ± 0.31 a 4.39 ± 0.36 b ND
NNN 18.8 ± 0.23 b 1.80 ± 0.14 c ND
EAG=equivalentes de ácido gálico; EC=equivalentes de catequina; EC3G = equivalentes de cianidin-
3 glucosido. Promedios con letras diferentes no son estadísticamente iguales (Tukey, 0.05, n=3).

Cuadro 3. Capacidad antioxidante TEAC (mmol Trolox/100g) en cascara y hueso de aguacate.

Variedad
Cascara Hueso con piel y cebolla
Verde Punteado 13.8 ± 0.35 e 14,250 ± 353 d
Verde Amarillo 38.1 ± 1.41 d 12,201 ± 707 e
Negros
Pata de pichón 13.5 ± 0.51 e 38,250 ± 1060 a
Melitón 46.6 ± 0.71 c 21,500 ± 1414 c
Landín 3 56.8 ± 4.24 b 27,250 ± 1060 b
NNN 96.5 ± 1.77 a 20,327 ± 707 c
Promedios con letras diferentes no son estadísticamente iguales (Tukey, 0.05, n=3).

Con base en los resultados anteriores, se seleccionó el hueso de la variedad Pata de Pichón con su
piel más cebolla para obtener los extractos para las pruebas de inhibición en el oscurecimiento. Al
extracto etanólico se le determinó el contenido de fenoles solubles totales, taninos y la capacidad
antioxidante TEAC y DPPH. Se determinó esta última capacidad antioxidante con el fin de conocer
la capacidad del extracto de apagar cationes, además de aniones (TEAC) (15, 16). No se conoce
ningún antecedente sobre el contenido de compuestos fenolicos y la capacidad antioxidante de
extractos de cáscara o hueso y piel del aguacate; sin embargo, 100 mL de extracto contendrá una
importante cantidad de fenoles solubles totales, así como un alto nivel de capacidad antioxidante
(Cuadro 4).

Inhibición del oscurecimiento

Los parámetros a*, b* y L* de las pastas de aguacate con y sin el extracto etanólico se ubicaron en
el espacio Cie L*A*B como se indica en la Figura 1, después de 8 horas de reposo a temperatura
ambiente y a la luz (1) así como en refrigeración a 5 ºC (2).

Cuadro 4. Fenoles solubles totales y capacidad antioxidante del extracto etanólico del hueso y su
piel de aguacate criollo Pata de Pichón y cebolla.
Contenido
Fenoles solubles totales (mg EAG/mL) 53.7 ± 5.1
Taninos (mg EC/ mL ) 57.9 ± 4.5
TEAC (mmol Trolox/mL ) 75.5 ± 9.5
DPPH (mmol Trolox/mL ) 68.2 ± 6.1
EAG=equivalentes de ácido gálico; EC=equivalentes de catequina

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Blanco
(+L*)

Pasta con Amarill

extracto o
(+b*)
2 1
Verd - - - +1 +3 +5 Rojo
e 50 30 10 0 0 0 (+a*
(-a*) )
Azu
l
(-

Pasta sin
extracto

2
1
Negro

Figura 1. Ubicación de los parámetros Cie L*A*B en pasta de aguacate con extracto y sin extracto
de hueso, piel del hueso y cebolla 1) a temperatura ambiente y 2) bajo refrigeración 5 ºC.

La pasta de aguacate con extracto de hueso mantuvo un color muy cercano al color de la pasta
recién preparada que fue corroborado por los parámetros Hunter L*A*B. Por el contrario, después
de ocho horas de reposo, la pulpa de aguacate sin extracto presentó el color obscuro caracteristico
de este producto. La pasta que se colocó en el refrigerador, presentó tonos tenues de color verde y
amarillo, pero en general, la pasta presentaba un aspecto negruzco. Se ha reportado que las enzimas
del tipo oxidasas llevan a cabo reacciones de oxido/reducción y transferencia de átomos de H o
electrones de una substancia a otra (22). Se ha reportado que la polifenol oxidasa es inhibida por la
presencia de sustratos monofenólicos o difenólicos que inducen un periodo de retraso causando la
inactivación suicida de la enzima (23).

CONCLUSIONES
Existe una gran variabilidad entre las variedades de aguacate criollo analizadas en su contenido de
compuestos fenólicos tanto en la cascara del fruto como en el hueso más la piel. Por otro lado, los
compuestos fenólicos llegan a representar hasta el 20% del peso seco del hueso con su piel lo que
se refleja en una muy alta capacidad antioxidante TEAC. El extracto de hueso con su piel más cebolla
presenta un alto contenido de compuestos fenólicos y una alta capacidad antioxidante TEAC y
DPPH. El extracto de hueso con su piel más cebolla inhibe el oscurecimiento de la pasta de aguacate
después de ocho horas.

TOMO II BIOTECNOLOGÍA Y CIENCIAS AGROPECUARIAS - PÁGINA 111

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BIBLIOGRAFÍA
1. R. W. Sc a A. a d B. Be gh, The g a d a f a cado (Persea americana,
M ) La aceae, Ac a H c., V . 275, 1990, . 387-394.
2. P. J. S che de a L, Ide f cac de a cad e a c ad a a e e c a de ag aca e
raza mexicana (Persea amaericana Mill, var. Drymifolia) al oomiceto Phytophtota sinnamomi,
Tesis doctoral, 2007, UMSNH, Morelia, Michoacán, México, pp. 106.
3. B. O. Be gh, A cad , Evolution of crop plants (Logan Scientific and Technical, E.U. A.,
1995), pp. 240-245.
4. B. O. Be gh a d L. Laha , A cad , I Tree and tropical fruits (John Wiley and Sons, NJ,
1996), pp. 113-166.
5. A. M. Rh de , E. S. Ma , C. W. Ca be , a d S. G. Ca e , A e ca a c d
f he a cad (Pe ea a e c a a M .), J. A e . Hort. Sci., Vol 96, 3, 1971, pp. 391-395.
6. F. C. Sa a a , M c e 1554, P b cad e ea, 2001, h :// . e c -en-1554-de
francisco-cervantes, consultado en mayo del 2020.
7. E. Acosta-Díaz, I. Hernández-Torrres e I. H. Almeyda-Le , E a ac de aguacates
c e N e Le , M c : eg , Re a Me . C e . Ag c., V . 3, 2, 2012, .
245-257.
8. S. H. Guzmán-Maldonado, M. G. Herrera-Hernández y J. L. Pons-He de , O ge ,
be ca ca ac e ca de ag aca e c , De egable Técnico (INIFAP, Celaya,
México, 2020), pp. 2. En prensa.
9. M. Rubí-Arriaga, A. L. Franco-Malvaíz, S. Rebollar-Rebollar, E. E. Bobadilla-Soto, I.
Martínez-De la Cruz and Y. Siles-He de , S ac ac a de c de ag aca e (Pe ea
americana Mill) e e E ad de M c , M c , T . Subtrop. Agrosistems, Vol. 16, 2013,
pp. 93-101.
10. L. S. Va , A. K a a d E. C e e e, P he da e a d e da e
avocado pulp (Persea americana M .), C e . Tec . A e Ca a V . 30, 2, 2010,
pp. 525-531.
11. R. C. Soliva-F , K e c f he da e ac hb a d b g f
a cad ee e e ed b c b ed e h d , J. F d E g., V . 55, 2, 2002, . 131-
137.
12. B. D. Oomah, A. Cardador-Martínez and G. Loarca-P a, Phenolics and antioxidative
ac e c bea (Pha e ga L), J. Sc .F d Ag c., V . 85, 2005, .
935-942.
13. A. A. Feregrino-Pérez, L.C. Berumen, G. García-Alcocer, R. G. Guevara-Gonzalez, M.
Ramos-Gomez, R. Reynoso-Camacho, and G. Loarca-P a, C a d
chemopreventive effect of polysaccharides from common beans (Phaseolus vulgaris L.) on
Azoxymethane-I d ced C Ca ce , J. Ag c. F d Che ., V . 56, 18, 2008, . 8737-
8744.
14. E. S. M. Abdel-Aa P. H c , A a d e h d for quantifying total anthocyanins in blue
ae ea d e e ca hea , AACC, V . 76, 3, 1999, . 350-354.
15. R. Va de Be g, G. R. Hae e , H. Va de Be g, a d A. Ba , A ca fa ed
Trolox equivalent antioxidant capacity (TEAC) assay for evaluation of antioxidant capacity of
ea e e f e, F d Che . V . 66, 5, 1999, . 511-517.
16. L. M e , K, F h ch a d V B h , C aa e a da ac e f ca e d
measured by ferric reducing antioxidant power (FRAP), ABTS b each g a a ( TEAC),
DPPH a a a d e ad ca ca e g g a a , Food Chem. Vol. 129, 2011, pp. 139-
148.
17. A. M. Gomez-Caravaca, A. Lopez-Cobo, V. Verardo, F. Pasini, M. F. Caboni, a. Segura-
Carretero, and A. Fernandez-G e e , E a a f phenolic content in avocado fruit and
b d c , J. F d P c. Tech ., V 6, 2015, . 5.
18. H. A. S aff d a d H. H. Le e , P c a d (c de ed a ) g ee ce e
culturs of Douglas fit compared with those in strawberry and avocado by means of C18-
reversed- ha e, P a Ph . V . 66, 1980, . 1085-1090.

TOMO II BIOTECNOLOGÍA Y CIENCIAS AGROPECUARIAS - PÁGINA 112

MISCELÁNEA CIENTÍFICA EN MÉXICO CENTRO DE INVESTIGACIONES EN ÓPTICA, A.C.

19. M. D e , a d L. A. Te , I e ga f c cha ge a -destructive

aa ee ff e e f ed Ha a cad f , Ac a H c. 945, 2011, 1.
20. J. A. Maga a d I. Ka , S e he a d he cc d f d f a , CRC C .
Rev. Food Sci. Nutr. Vol 10, 4, 1978, pp. 323-372.
21. Z. Cai-Ning, T. Guo-Yi, C. Shi-Yu, X. Xiao-Yu, G. Ren-You, L. Qing, M. Qiag-Liu, M. Quian-
Quian, A. Shang and L. Hua-B , Phe c f e a d a da ac e f 30 ea
f f g ee , b ac , g, h e, e a d da ea , A da V . 8, 2015,
pp. 215-229.
22. CH. Queiroz, M. L. Mendes-Lopez, E. Fialho and V. L. Valnete-Me a, P he
da e: cha ac e c a d echa fb gc , F d Re . I e . V . 24, 4,
2008, pp. 361-375.
23. H. Prieto, D. Utz, A. Castro, C. Aguierre, M. González-agüero, H. Valdeés, N. Cifuentes, G.
G. Defilippe, P. Zamora, G. Zuñiga and R. Campos-Varga , B g a a che a
f : e f he da e a d cha ac e a f a c d g e e ce f he e e,
J. Agric. Food Chem., Vol 55, 22, 2007, 9208-9218.

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AISLAMIENTO E IDENTIFICACIÓN DE MICROORGANISMOS PRESENTES EN SEMILLAS DE

FRIJOL DEL ESTADO DE GUERRERO
Araceli Barrera-Martínez1, Soledad García-Morales2, Julio César López-Velázquez1 y María
Juventina Macías-García3

1Centrode Investigación y Asistencia en Tecnología y Diseño del Estado de Jalisco, 2CONACYT-

Centro de Investigación y Asistencia en Tecnología y Diseño del Estado de Jalisco, 3CUCEI-
Universidad de Guadalajara.
smorales@[Link]

RESUMEN
A nivel nacional, el frijol representa un alimento clave en la dieta de la población por su alto contenido
de proteínas y de minerales esenciales. El estado de Guerrero ocupa el sexto lugar en superficie
sembrada de frijol y cuenta con una gran diversidad de formas, colores y especies de esta
leguminosa. Los microorganismos como hongos y bacterias presentes en el grano de frijol pueden
causar problemas de salud en áreas donde las condiciones ambientales favorecen su supervivencia,
multiplicación y diseminación. Es por eso que la recolección de semillas de frijol se llevó a cabo en
7 de los municipios más marginados del estado. Esta investigación tuvo como objetivo aislar e
identificar los microorganismos presentes en 18 accesiones de frijol pertenecientes a tres especies
diferentes (Phaseolus vulgaris, P. lunatus y P. coccineus), los cuales fueron colectados en el estado
de Guerrero. Se aislaron hongos y bacterias de las semillas de frijol, para lo cual, primero se
seleccionaron semillas homogéneas. Luego, estas semillas se desinfestaron (etanol 70% durante 3
min e hipoclorito de sodio al 3% por 5 minutos) y se colocaron en cajas de Petri con medio PDA para
el crecimiento de los hongos y en agar nutritivo para bacterias. Las cajas con las semillas se
incubaron a temperatura ambiente durante 72 h. El crecimiento de los microorganismos se observó
a las 48 h. Después, se llevó a cabo un re-aislamiento para obtener cepas puras donde se observó
el crecimiento de bacterias a las 24 h y de hongos a las 48 h. Para la identificación de hongos y
bacterias se utilizó un MALDI-TOF, siguiendo las instrucciones del manual de uso del equipo. Se
observó una gran variabilidad en cuanto al número de bacterias y hongos presentes en las semillas
del frijol colectado. En general, se obtuvieron 28 aislamientos de hongos y 42 de bacterias. Las
semillas con mayor número de microorganismos fueron GR-06, GR12, GR-02, las cuales pertenecen
a la especie P. vulgaris. Las accesiones GR-14 y GR-17 de la especie P. vulgaris y GR-15 (P.
coccineus) no presentaron crecimiento de bacterias. Dos accesiones de P. lunatus (GR-01 y GR-
09), tres de P. vulgaris (GR-04, GR-07 y GR-10) y una de P. coccineus (GR-15) no presentó
crecimiento de hongos. El mayor número de microorganismo se obtuvieron de accesiones de P.
vulgaris, seguido de P. lunatus; mientras que P. cocconeus no presentó crecimiento de bacterias.
Después de la identificación, se encontraron bacterias del género Pseudomonas y Enterobacter,
reconocidas por ser patógenas de humanos y agentes causantes de enfermedades. La diversidad
de microorganismos (bacterias y hongos) presentes en las semillas de frijol del estado de Guerrero
indican la necesidad de proporcionar semillas libres de patógenos, así como alternativas de
desinfección del frijol para el consumo humano.

INTRODUCCIÓN
La sociedad desempeña un papel importante en la conservación y uso de los recursos fitogenéticos,
estableciendo lo indispensable que puede ser un recurso en diferentes ámbitos, ya sea en una región
determinada, en un país o a nivel mundial. Por lo tanto, la humanidad tiene la responsabilidad de
preservar y cuidar los recursos en el lugar donde convive con ellos. En la agricultura, las colecciones
de materiales locales muestran a la sociedad el valor que tiene la biodiversidad en sí misma, así
como su valor agrícola, lo cual se refleja a través del tiempo mediante el proceso interactivo entre el
hombre, las plantas, los animales y el ambiente. La gran diversidad de especies vegetales y animales
forma parte de la historia del hombre, y por ello, representa un patrimonio que debe ser mantenido
en forma activa para su propio bienestar (Cubero et al., 2006).
Entre las especies vegetales que México brindó al mundo se encuentran aquellas que forman parte
de la triada que se cultivaba en la milpa: el maíz (Zea mays L.), la calabaza (Cucurbita spp.) y el frijol

TOMO II BIOTECNOLOGÍA Y CIENCIAS AGROPECUARIAS - PÁGINA 114

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(Phaseolus vulgaris L.). De este último, se han domesticado cinco especies y es posible encontrarlas
en su forma silvestre y cultivada: P. vulgaris (frijol común), P. coccineus (frijol ayocote), P. lunatus
(frijol lima), P. acutifolius (frijol tepary) y [Link] (frijol acalete). Entre estas especies, el frijol
común, el frijol lima y el frijol ayocote son de gran relevancia para el consumo y la gastronomía del
pueblo mexicano (Linares y Bye, 2014).
En toda la república mexicana existen diversas variedades locales de frijol, esta leguminosa ha sido
consumida desde la época prehispánica hasta nuestros días y forma parte esencial de la
alimentación a nivel mundial, principalmente en el Continente Americano. En México, el frijol
representa una tradición desde antes de la conquista, lo que se manifiesta con la existencia de una
amplia diversidad de formas silvestres y cultivadas, así como en su uso culinario desde la época
prehispánica. En la actualidad, el frijol es considerado uno de los granos básicos más consumidos y
de mayor importancia para la población (Vargas-Vázquez et al., 2008).
Mesoamérica cuenta con la mayor variabilidad genética del género Phaseolus, siendo México uno
de los centros de origen y domesticación de la especie P. vulgaris. Esta amplia variabilidad genética
queda evidenciada con las 6,884 accesiones mexicanas resguardadas en el Banco de Germoplasma
de Frijol del Instituto Nacional de Investigaciones Forestales, Agrícolas y Pecuarias (INIFAP)
(Vargas-Vázquez et al., 2008). Una proporción importante de la diversidad vegetal del frijol, presente
en el país, se encuentra concentrada en estados como Oaxaca, Chiapas, Veracruz, Guerrero y
Michoacán. Cabe mencionar que estos estados también tienen la mayor presencia de pueblos
indígenas. Boege (2008) agrega que, en el caso de las especies cultivadas, los grupos indígenas
junto con poblaciones campesinas mestizas son quienes han generado tal variabilidad a través de
procesos de selección, diversificación, innovación, intercambio, adaptación, mejoramiento genético,
uso y manejo.
Particularmente, el estado de Guerrero ocupó el noveno lugar en producción de frijol durante el ciclo
primavera-verano 2018-2019, generando un total de 10,481 y 10,345 t de grano para los años 2018
y 2019, respectivamente; aportando el 1.8% de la producción nacional (SIAP, 2020). Al igual que en
otros estados, en Guerrero también existe una gran diversidad de especies, variedades y tipos de
frijol en cuanto a color, tamaño y hábito de crecimiento (Del Val et al., 2009). Las principales especies
de frijol que se pueden encontrar en este estado son: P. vulgaris, P. lunatus y P. coccineus.
El frijol común (P. vulgaris) es parte de la dieta de un gran número de personas y se cultiva en
prácticamente todos los lugares que permiten su desarrollo. La forma cultivada de esta especie se
siembra en todos los estados del país y representa más del 95% del frijol que se consume en México.
En la agricultura mundial, el frijol común ocupa un lugar importante en cuanto al área cultivada y al
consumo, constituyendo un complemento indispensable en la dieta alimenticia principalmente en
Centro y Sur América, el Lejano Oriente y África (Peña et al., 2015 ). América Latina es la zona de
mayor producción y consumo de frijol común, se estima que más del 45% de la producción mundial
proviene de esta región, específicamente del sur de México, Bolivia y Perú, donde se encuentran
incluso formas silvestres que se cruzan sin dificultad con especies cultivadas (Voysest, 2000). En la
región occidente de México se desarrolló la domesticación de P. vulgaris, de ahí, la importancia de
su cultivo y diversidad (Lépiz y Rodríguez, 2007). El uso del frijol en la gastronomía mexicana es
sumamente característico en sabor, variedad de platillos y como acompañante de cualquier
degustación típica. Además, el frijol tiene un aporte nutrimental importante en proteína,
carbohidratos, lípidos, hierro y calcio (Lépiz y Rodríguez, 2007).
P. lunatus, conocido como frijol lima, Ib, comba, pallar o haba pallar, es uno de los cinco taxa
domesticados del género Phaseolus y es la segunda especie de mayor distribución, superficie
cultivada y consumo en el mundo. Se encuentra en áreas tropicales y subtropicales y se cultiva en
varios países de América, así como en algunas regiones de Europa, Asia y África. Como todo frijol,
constituye una rica fuente de proteínas, carbohidratos, hierro, calcio, fibra, y se distingue por tener
bajo contenido de grasas. En México, el frijol lima se siembra en la Península de Yucatán, en donde
se le denomina Ib o Ibe en Maya y representa el cuarto cultivo más importante integrado dentro del
sistema de producción milpa. En esta región del país el Ib domesticado presenta gran variación en
la forma y color del grano. También se cultiva en la Depresión del Río Balsas, entre los estados de
México, Guerrero y Michoacán, donde se le conoce como frijol comba y es muy aceptado por la
población local (Martínez-Castillo, 2015).

TOMO II BIOTECNOLOGÍA Y CIENCIAS AGROPECUARIAS - PÁGINA 115

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El ayocote (P. coccineus) también conocido como patol, frijolon, pak y cimarrón se utiliza como
alimento humano en estado inmaduro y seco. Esta especie es originaria de las partes altas de
Mesoamérica, donde se ha cultivado desde tiempos precolombinos, estudios recientes señalan que
se domesticó hace 2,200 años en el Valle de Tehuacán, Puebla, México. Se cultiva en forma anual,
pero en su hábitat natural crece en forma perenne en regiones húmedas en altitudes de más de
1,800 msnm. Después del frijol común, el frijol ayocote es la segunda especie de mayor importancia
para la alimentación de los mexicanos, y el INIFAP resguarda 798 accesiones de variedades nativas
mexicanas bajo conservación ex situ (Vargas-Vázquez et al., 2008). Es una especie adaptada a
ambientes variados, muestra gran diversidad genética debido a su alto porcentaje de cruzamiento
natural (14.7%) y por ello requiere un manejo agronómico diferente al del frijol común lo que dificulta
la pureza de las variedades nativas. P. coccineus representa una opción productiva en diferentes
regiones de México (Mercati et al., 2015). Las clases comerciales de grano que más predominan son
las de grano grande y colores negros, morados y blancos, éstas son apreciadas y consumidas por
comunidades campesinas ubicadas en zonas de cultivo marginadas en tierras altas y
ocasionalmente se comercializan en mercados locales. Sin embargo, en algunas regiones de Europa
(Holanda y Reino Unido) se llega a consumir más el frijol ayocote que el frijol común en forma de
ejote, o mejor conocidas como judías verdes, también se consume en el sur de Italia y en España,
donde las semillas de color blanco tienen excelente calidad culinaria (Rodiño et al., 2007).
Los hongos causan el mayor número de enfermedades en las plantas y estos hongos se presentan
con mayor frecuencia en las semillas. Por lo tanto, las semillas de fríjol pueden ser un medio ideal
para el transporte de inóculo de patógenos de origen fungoso, viral, bacterial e inclusive de
nematodos. Las semillas que portan microorganismos patogénicos son significativas para la
agricultura debido a que: pierden viabilidad, lo que resulta en una disminución significativa en el
porcentaje de la germinación. Este inóculo que portan las semillas, bajo condiciones apropiadas,
puede ser el inicio de enfermedades devastadoras para el cultivo. De manera similar, la semilla
puede ser atacada por diversos microorganismos antes de la cosecha, lo cual causa una reducción
en la calidad y rendimiento del grano. De esta manera, la semilla se convierte en el principal medio
de dispersión de pátogenos a grandes distancias, incluyendo países y continentes (Montoya y
Castaño, 2011).
Algunos de los patógenos que atacan al frijol son las bacterias del genero Enterobacter, los cuales
son bacilos gram-negativos que pertenecen a la familia Enterobacteriaceae. Estas bacterias están
ampliamente distribuidas en la naturaleza y se pueden localizar en el suelo, el agua; además, se
pueden encontrar como parte de la microbiota de los animales, los insectos y el tracto gastrointestinal
humano. En las semillas de frijol, se pueden encontrar numerosas especies de microorganismos
simbiontes no perjudiciales. Sin embargo, también se pueden presentar muchas especies
patógenas, como aquellas del género Salmonella o la bacteria Escherichia coli. Estas especies
bacterianas, generalmente, se transmiten por alimentos o aguas contaminadas (Arias et al., 2007).
Varias especies de bacterias son causantes de enfermedades, por ejemplo la Salmonella causa
fiebre, diarrea y vómitos. E. coli provoca varios tipos de infecciones entéricas, también puede
producir infecciones extraintestinales en el aparato urinario, respiratorio, sistema nervioso central y
otros órganos. Las bacterias del género Klebsiella están asociadas con infecciones urinarias,
diarreas y abscesos y rinitis. Mientras que, el género Enterobacter se asocia con meningitis y sepsis.
En tanto que Serratia es causante de neumonía, endocarditis y sepsis. El género Citrobacter se
relaciona con diferentes infecciones en vías urinarias y respiratorias en pacientes enfermos (Bush y
Perez, 2020).
Otro género importante es Pseudomona syringae, es una bacteria gram-negativa, patógena de
plantas, que se clasifica en patovares según la especificidad de su hospedero. P. syringae está
asociada al ciclo del agua, esta bacteria puede alcanzar la superficie de las hojas durante las
precipitaciones. Ya ubicada en la superficie de la hoja, este patógeno puede sobrevivir o ingresar al
interior usando las aperturas naturales como los estomas o las heridas, después crece en el
apoplasto, causando la enfermedad. Este patógeno origina pérdidas económicas importantes,
afectando arduamente tanto a la producción neta como a la calidad (Ortiz-Martín, 2010).

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Entre los hongos que afectan al frijol se destaca Fusarium oxysporum, el cual ingresa a la planta por
las raíces, invadiendo el xilema y extendiéndose a través de la planta. Los síntomas se inician con
un amarillamiento de las hojas basales, que posteriormente se marchitan y mueren (Montoya y
Castaño, 2011).
El objetivo de este trabajo fue aislar e identificar los microorganismos presentes en 18 accesiones
de frijol colectados en el estado de Guerrero, estas accesiones pertenecen a tres especies diferentes
del género Phaseolus (P. vulgaris, P. lunatus y P. coccineus).

PARTE EXPERIMENTAL
Material vegetal
En agosto de 2019 se realizó la colecta de 18 accesiones de frijol en el estado de Guerrero. De cada
accesión se seleccionaron las semillas de forma homogénea de acuerdo con su tamaño, color y
forma para posteriormente realizar el aislamiento de los hongos y las bacterias.

Desinfestación de las semillas

Las semillas, homogéneas y sin daño aparente, se colocaron en vasos precipitados donde se
desinfestaron con etanol al 70% durante 3 min, al término de ese tiempo, las semillas, se lavaron
con agua destilada estéril. Después, se agregó hipoclorito de sodio al 3% durante 5 min, al finalizar
ese lapso de tiempo se realizó un último lavado de agua destilada estéril.

Aislamiento de hongos
Se preparó medio PDA, una vez esterilizado, se colocó en cajas Petri y se dejó solidificar. Con una
pinza estéril, se colocaron 4 semillas de cada accesión en cada caja Petri y luego se dejaron a
temperatura ambiente. Cada accesión se sembró por triplicado. Después de 48 h, se observó el
crecimiento de los hongos. Posterior a ese tiempo, se realizó un re-aislamiento para la obtención de
cepas puras.

Aislamiento de bacterias
Se preparó agar nutritivo, una vez autoclaveado, el medio se colocó en cajas Petri y se dejó
solidificar. Por triplicado, con una pinza estéril, en cada caja Petri se colocaron 4 semillas de cada
accesión y se dejaron a temperatura ambiente. Después de 24 h, se observó el crecimiento de las
bacterias. Posteriormente, se realizó un re-aislamiento para la obtención de cepas puras.

Identificación de hongos y bacterias

Para la identificación de hongos y bacterias se usó el sistema de identificación de microorganismos
que utiliza la espectrometría de masas MALDI-TOF (MALDI Biotyper, Bruker, USA). Se siguieron los
protocolos recomendados por el fabricante.

RESULTADOS
Se obtuvieron 18 accesiones de frijol que se recolectaron en diferentes municipios del estado de
Guerrero, entre los que destacan: Iguala de la Independencia, Xochistlahuaca, Tepecoacuilco de
Trujano, Mexcaltepec, Acatepc, Tecoanapa y Pilcaya (Tabla 1). Estos siete municipios se
caracterizan por su alta marginación, donde los microorganismos como los hongos y las bacterias
presentes en las semillas de frijol pueden causar problemas de salud, principalmente, en áreas
donde las condiciones ambientales favorecen su supervivencia, multiplicación y diseminación.

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Tabla 1. Número de accesiones, especie de frijol y municipio de colecta en el estado de Guerrero.

Nomenclatura Nombre común Especie Municipio de colecta

GR-01 Comba negro Phaseolus lunatus Iguala de la Independencia

GR-02 Chino Phaseolus vulgaris Iguala de la Independencia

GR-03 Chino blanco (pedorro) Phaseolus vulgaris Iguala de la Independencia

GR-04 Negro de mata Phaseolus vulgaris Xochistlahuaca
GR-05 Negro de vara (Tiachi) Phaseolus vulgaris Xochistlahuaca
GR-06 Blanco Phaseolus vulgaris Xochistlahuaca
GR-07 Coconita Phaseolus vulgaris Tepecoacuilco de Trujano
GR-08 Comba pinto Phaseolus lunatus Iguala de la Independencia
GR-09 Comba blanco Phaseolus lunatus Iguala de la Independencia
GR-10 Negro de Riego Phaseolus vulgaris Mexcaltepec, Acatepc
GR-11 Rojo Phaseolus vulgaris Mexcaltepec, Acatepc

GR-12 Blanco Mexcaltepec Phaseolus vulgaris Mexcaltepec, Acatepc

GR-13 Colorado Teconapan Phaseolus vulgaris Tecoanapa
GR-14 Negro de mata Phaseolus vulgaris Tecoanapa

GR-15 Ayocote Phaseolus coccineus Mexcaltepec, Acatepc

GR-16 Yochichilse Phaseolus vulgaris Mexcaltepec, Acatepc
GR-17 Rojillo Phaseolus vulgaris Pilcaya
GR-18 Cacahuate Phaseolus vulgaris Pilcaya

De las accesiones obtenidas, 14 pertenecen al frijol común (P. vulgaris), una accesión de P.
coccineus (comúnmente conocido como ayocote) y tres son de la especie P. lunatus, popularmente
denominado comba (Tabla 1). Las tres especies de frijol son de gran importancia para el consumo
humano y presentan una gran diversidad en forma, color y tamaños (Figura 1). Aunque la mayor
variedad se obtuvo en el frijol común; mientras que en el frijol comba se obtuvo semilla con testa de
color negro (GR-1), pinto (GR-8) y blanco (GR-9). El frijol ayocote (GR-15) se consiguió en una
combinación de colores, predominando el color morado.
El número total de cepas bacterianas que se aislaron de las semillas de frijol fue de 42, el número
total aislados de hongos fue menor (28 aislados). La accesión GR-12, frijol con testa blanca de la
especie P. vulgaris, tuvo el mayor número de bacterias; esta accesión fue colectada en el municipio
de Mexcaltepec, Acatepc. El mayor número de hongos se presentó en la accesión GR-06 (testa
clara), la cual corresponde al municipio de Xochistlahuaca y pertenecen a la especie de P. vulgaris.
De las accesiones GR-14 y GR-17 (ambas P. vulgaris) no se obtuvieron bacterias; mientras que las
accesiones GR-01 (P. lunatus), GR-04, GR-07, GR-09 (P. lunatus), GR-10 y GR-15 (P. coccineus)
no presentaron crecimiento de hongos. Destacan las semillas de las accesiones GR-04 (testa negra)
y GR-07 (testa clara) ya que solo tuvieron un aislado bacteriano y ningún hongo.

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Figura 1. Accesiones de frijol colectado en el estado de Guerrero.

Tabla 2. Número de hongos y bacterias aisladas de semillas de frijol colectadas en el estado de

Guerrero.
Núm. de bacterias Núm. de hongos
Nomenclatura Especie
aisladas aislados
GR-01 P. lunatus 4 0
GR-02 P. vulgaris 3 3
GR-03 P. vulgaris 2 2
GR-04 P. vulgaris 1 0
GR-05 P. vulgaris 3 1
GR-06 P. vulgaris 3 8
GR-07 P. vulgaris 1 0
GR-08 P. lunatus 3 1
GR-09 P. lunatus 2 0
GR-10 P. vulgaris 2 0
GR-11 P. vulgaris 2 2
GR-12 P. vulgaris 6 2
GR-13 P. vulgaris 2 2
GR-14 P. vulgaris 0 2
GR-15 P. coccineus 3 0
GR-16 P. vulgaris 3 1
GR-17 P. vulgaris 0 2
GR-18 P. vulgaris 2 2

En la figura 2 se muestran las cepas bacterianas representativas, que fueron aisladas de las semillas
de diferentes accesiones de frijol colectado en el estado de Guerrero, destacando por su morfología
y pigmentación. Se identificaron bacterias del género Pseusomonas, Bacillus, Enterobacter,

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Staphylococcus y Pandoraea. Varias especies de estos géneros bacterianos son causantes de

enfermedades para los humanos.

Figura 2. Imagen representativa de las bacterias aisladas de semillas de frijol.

En la figura 3 se presenta algunos hongos representativos que fueron aislados de las accesiones de
frijol obtenido de diferentes regiones del estado de Guerrero. Se obtuvieron aislados puros con una
gran diversidad de características morfológicas, así como con una amplia gama de pigmentaciones.
A diferencia de las bacterias, mediante la técnica de MALDI-TOF, no se pudieron identificar muchos
de los aislado fúngicos, aunque se determinaron géneros como: Fusarium, Aspergillus y Alternaria.
Debido a la importancia que tiene la semilla de frijol tanto para la parte agrícola como para consumo
humano, es necesario contar con tecnología de producción que incluya el desarrollo de variedades
mejoradas y su manejo agronómico para diferentes condiciones ambientales, así como también se
requiere de esquemas para la preservación de la biodiversidad, en el cual se implemente programas,
técnicas y procesos que garanticen a la población la conservación y el manejo libre de patógenos,
ya que el uso de semillas de calidad, puede conducir a la ausencia de enfermedades, aun cuando
las variedades sea susceptibles a estos patógenos.

Figura 3. Imagen representativa de los hongos aislados de semillas de frijol.

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CONCLUSIONES
Se colectaron 18 accesiones en el estado de Guerrero, de las cuales 14 son de la especie P. vulgaris
(frijol común), una accesión de P. coccineus (ayocote) y tres son de P. lunatus (comba). En las 18
accesiones se observó la presencia de microorganismos, ya sea hongos o bacterias. La especie que
presentó mayor número de bacterias y hongos fue P. vulgaris, seguido de P. lunatus; mientras que
P. cocconeus no presentó crecimiento de bacterias, pero sí de hongos. El color de testa donde hubo
mayor crecimiento de hongos y bacterias fue el blanco. Se identificaron bacterias del género
Pseudomonas y Enterobacter y hongos de los géneros Fusarium, Aspergillus y Alternaria. Algunas
de las bacterias encontradas en las semillas también son reconocidas como patógenas de humanos
y agentes causantes de enfermedades La diversidad de microorganismos (bacterias y hongos)
presentes en las semillas de frijol del estado de Guerrero indican la necesidad de proporcionar
semillas libres de patógenos, así como alternativas de desinfección del grano para el consumo
humano.

AGRADECIMIENTOS
Los autores agradecen al CONACYT por el financiamiento otorgado a través del Proyecto
FORDECYT N . 292474 E a eg a multidisciplinarias para incrementar el valor agregado de las
cadenas productivas del café, frijol, mango, agave mezcalero y productos acuícolas (tilapia) en la
eg ac f c a a de a c e c a, a ec ga a ac .

BIBLIOGRAFÍA
1. A. P. Rodiño, M. Lema, M. Pérez-Ba be , M. Sa a a, A. M. De R , A e e f e
bean (Phaseolus coccineus L.) germplasm for tolerante to low temperatura during early
eed g g h , E h ca, V . 155, 2007, . 63-70.
2. C. N. M a, J. Ca a , Ef cac a de a a e de e a de f (Phaseolus vulgaris
L.) sobre la erradicación de Microorganismos , F a .C b., V . 35, 1, 2011, . 7-10.
3. E. B ege, E a b c a de eb d ge a de M c , e Hacia la
conservación in situ de la biodiversidad y agrodiversidad en los territorios indígenas (Instituto
Nacional de Antropología e Historia y Comisión Nacional para el Desarrollo de los Pueblos
Indígenas, México, Méx, 2008), Capítulo 1, pp. 1-31,
4. E. L a e , R. B e, F a e ha a ad M c a d , A e . Me ., V . 22, 130,
2014, pp. 52-59.
5. F. Mercati, G. Catarcione, A. R. Pa acc , M. R. Abe a , F. S e , M. C aff , Ge e c
diversity and population structure of an Italian landrace of runner bean (Phaseolus coccineus
L.): inferences for its safeguard and on-fa c e a , Ge e ca, V . 143, 4, 2015, .
473-485.
6. I. Ortiz-Ma , R. Th a e , J. W. Ma f e d, C. R. Be , Nega e Reg a f he H
Type III secretion system in Pseudomonas syringae pv. Phaseolicola , M . P a M c be
Interact., Vol. 23, 5, 2010, pp. 682-701.
7. J. Del Val, C. Sánchez, C. Z a, Estado del Desarrollo Económico y Social de los Pueblos
I d ge a de G e e , (PUMC/UNAM, M c , M , 2009), 821 .
8. J. H. A a , M. Ja a , T. Re g f , Manual: Buenas Prácticas Agricolas en la producción
de f b e (Ce e I e gagc La Se a , FAO, A a, 2007), 170 .
9. J. L. C be , S. Nada , M.T. M e , Rec f ge c (Agricola Española S.A.,
Madrid, 2006), 192 p.
10. J. Martínez-Ca , C de ac e be a a c a de e e e e d de
la domesticación de plantas: el caso del frijol Lima (Phaseolus lunatus) e M c , De de
el Herbario CICY, Vol. 7, 2015, pp.17-22.
11. K. Pe a, J.C. R d g e , M. Sa a a, C a e d c de f (Phaseolus
vulgaris L.) a e a a cac de de c ec e ac ad ec a e e ,
Avances, Vol. 17, 4, 2015, pp. 327-337.

TOMO II BIOTECNOLOGÍA Y CIENCIAS AGROPECUARIAS - PÁGINA 121

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12. L. M. B h, M. T. Pe e , I fecc e K eb e a , E e bac e Se a a ,

[Link]
gramnegativas/infecciones-por-klebsiella-,-enterobacter-y-serratia (Visitado: 30 abril 2020).
13. M. L. P. Vargas-Vázquez, J. S. Muruaga-Martínez, P. Pérez-Herrera, H. R. Gill-Langarica,
G. Esquivel-Esquivel, M. A. Martínez-Damián, R. Rosales-Serna, N. Mayek-Pérez,
Caracterización morfoagronómica de la colección núcleo de la forma cultivada de frijol
c de INIFAP , Ag c e c a, V . 42, . 787-797.
14. O. V e , Mejoramiento genético del fríjol (Phaseolus vulgaris L.): legado de variedades
de América Latina 1930-1999 , (Centro Americano de Agricultura Tropical, CIAT, Cali,
Colombia, 2000), 195 p.
15. R. L , E. R d g e , L Rec f ge c de M c , e Recursos Fitogenéticos
de México para la Alimentación y la Agricultura: Informe Nacional 2006 (Secretaría de
Agricultura, Ganadería, Desarrollo Rural, Pesca y Alimentación y Sociedad Mexicana de
Fitogenética, A.C. Chapingo, Méx, 2006), Capítulo 1, pp. 13-28.
16. SIAP, Se c de I f ac Ag a e a a Pe e a, B letín mensual de producción
F ,
[Link]
n_frijol_enero_2020.pdf (Visistado: 05 Marzo 2020).

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ESTABLECIMIENTO DE UN SISTEMA DE MICROPROPAGACIÓN PARA UNA PLANTA

MEDICINAL DEL GÉNERO LOBELIA ORIGINARIA DE LA MESETA PURÉPECHA
Jorge Humberto Mondragón Chávez, Rafael Salgado Garciglia, Ana Edith Higareda Mendoza,
Marco Aurelio Pardo Galván

Universidad Michoacana de San Nicolás de Hidalgo

mapardo@[Link]

RESUMEN
En el mundo, las plantas medicinales empleadas en la medicina tradicional son ampliamente
utilizadas en muchos países. México es un país megadiverso en cuanto a biodiversidad y cuenta con
una amplia gama de especies vegetales útiles, dentro de las cuales se encuentra las plantas
medicinales. En el estado de Michoacán, la cultura purépecha muestra una vasta variedad de plantas
medicinales, entre la que se encuentra Lobelia laxiflora var. patzquarencis (contrabembéricua),
utilizada contra la fitodermatitis por contacto causada por la hiedra venenosa o bembéricua
(Toxidendron radicans). Una limitante para el uso de L. laxiflora var. patzquarencis es su poca
abundancia y el problema de su identificación para su colecta, ya que sólo es posible identificarla sin
ambigüedad a través de su flor, y la floración es anual. Por su importancia medicinal, su propagación
se vuelve un punto clave a destacar; sin embargo, los métodos de propagación tradicional de plantas
medicinales son lentos e ineficientes por lo que se buscan alternativas más rápidas y eficaces para
su propagación, siendo la micropropagación una de ellas. El presente trabajo tiene como objetivo
establecer un sistema de micropropagación rápido y eficiente para esta planta medicinal. Se llevó a
cabo con éxito el cultivo inicial in vitro de explantes de L. laxiflora var. patzquarencis, así como la
multiplicación de material inicial obtenido, el enraizamiento del mismo y, por último, el transplante y
aclimatación de las plantas completas obtenidas. En particular se lograron establecer las condiciones
iniciales de cultivo in vitro de explantes, las concentraciones óptimas de reguladores de crecimiento
para la mayor multiplicación de material inicial, la concentraciones óptimas de reguladores de
crecimiento para el mayor enraizamiento y las condiciones ideales para el mejor porcentaje de
supervivencia al momento de realizar el transplante y aclimatación de plantas enteras. Así, con este
trabajo se lograron estandarizar las etapas de micropropagación de la contrabembéricua, las cuales
serán utilizadas para obtener en abundancia, plantas capaces de cultivarse en invernadero tanto
para emplearse en la medicina tradicional como para su estudio.

INTRODUCCIÓN
A nivel mundial, la medicina tradicional es una de las expresiones más importantes en la memoria
ancestral de los pueblos, según la OMS el 80% de la población en el mundo emplea la medicina
tradicional en los servicios de atención primaria de la salud para tratar diversos padecimientos; esto
implica un importante uso de plantas con fines medicinales en muchos países.1
México es un país con una gran diversidad de especies vegetales, cuenta con alrededor de 7 000
especies útiles para el hombre, entre las cuales destacan muchas plantas medicinales utilizadas
principalmente por las poblaciones de escasos recursos. Debido a lo anterior, el uso de plantas
medicinales en distintos estados el país es bastante amplio. Michoacán es un estado rico en cuanto
a plantas con este uso; la mayor parte de su población utiliza plantas medicinales para tratar distintos
padecimientos como malestares estomacales, dolores de cabeza, inflamaciones en la piel, entre
otros.2,3
Por esta razón, la abundancia de las plantas con uso medicinal han disminuido considerablemente,
factores como la colecta desmedida y el deterioro medioambiental en el mundo, provocan de manera
rápida la pérdida de la diversidad vegetal en distintos lugares del país. Por esta situación, diversas
organizaciones relacionadas a este tema plantearon algunas estrategias para su conservación,
dentro de las cuales su propagación es una estrategia importante a destacar. 4
La propagación vegetal es un punto importante para la conservación de especies medicinales. Esta
se realiza de distintos métodos, muchas de estas plantas se obtienen a partir de la propagación por
semilla (propagación sexual); o por propagación vegetativa (asexual) mediante partes de la planta.
Por este último método es posible obtener un gran número de plantas medicinales idénticas entre sí.

TOMO II BIOTECNOLOGÍA Y CIENCIAS AGROPECUARIAS - PÁGINA 123

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Sin embargo, cuando se desea propagar plantas medicinales donde estos sistemas son poco
eficientes por distintas razones, surge la necesidad de recurrir a alternativas más eficaces. 5,6
Las herramientas biotecnológicas son una alternativa para la propagación masiva de muchas
especies vegetales, y las medicinales no son la excepción. El cultivo de tejidos vegetales in vitro es
una técnica que permite realizar la propagación a gran escala de plantas, y su aplicación más
conocida es la micropropagación, la cual produce un gran número de plantas idénticas entre sí.7,8
La micropropagación se realiza en distintas etapas, comenzando con la siembra inicial in vitro de
explantes como yemas, tallos, hojas o raíces, en medio de cultivo (medio MS) adicionado con
reguladores de crecimiento, generalmente citocininas (BA), donde la asepsia juega un papel
importante para evitar la contaminación durante el cultivo. El desarrollo y multiplicación de brotes
aéreos es promovido por la combinación de auxinas (ANA) y citocininas (BA) en el medio de cultivo;
la combinación y concentración óptima de estas depende de cada especie. El enraizado de los brotes
obtenidos se realiza cultivando los mismos en medio MS adicionado únicamente con auxinas (AIB).
Terminado el cultivo in vitro, se realiza el transplante y aclimatación de plántulas enteras en diversos
sustratos (turba y perlita), para después ser cultivadas en invernadero. 9-11
Existen diversos trabajos referentes a la micropropagación de muchas plantas medicinales
reportados en la literatura, utilizadas en la medicina tradicional en distintas partes del mundo. Sin
embargo, en nuestro país se desconocen los métodos de micropropagación para muchas plantas
medicinales, incluyendo algunas pertenecientes a la cultura purépecha. 12
La c abe b c a , c b e c e f c e Lobelia laxiflora var. patzquarencis, es una especie
vegetal perteneciente a la vasta variedad de plantas medicinales de la cultura purépecha del estado
de Michoacán, utilizada por los nativos de esa zona de manera empírica contra la inflamación
cada e c ac c a h ed a e e a ( be b c a ), a d aga a ca
como planta medicinal en dicha área. Algunas limitantes para el uso de esta planta contra la
fitodermatitis provocada por la hiedra venenosa es su colecta en la época que la planta no florece
(es de floración anual) y sin las flores su recolección es bastante complicada; así como la disminución
de sus poblaciones vegetales por la sobrecolecta13. Debido a lo anterior, su estudio y propagación
por cultivo de tejidos vegetales in vitro se vuelven relevantes. Aún se desconocen los métodos de
micropropagación de muchas plantas y son muy pocos los estudios de micropropagación que se ha
realizado en plantas del género Lobelia, entre ellas Lobelia laxiflora var. patzquarencis.

TEORÍA
A través de la utilización de yemas vegetativas de plantas de L. laxiflora var. patzquarencis, las
técnicas de cultivo de tejidos vegetales in vitro, y la acción de los reguladores de crecimiento tipo
auxinas (ANA y AIB) y citocininas (BA), se establece un sistema de micropropagación para esta
especie.

PARTE EXPERIMENTAL
Se utilizaron yemas vegetativas de Lobelia laxiflora var. patzquarencis de entre 1 y 2 cm de longitud
para la etapa de establecimiento inicial del cultivo. Se les aplicó un método de asepsia y, con pinzas
y bisturí estériles se sembraron en medio MS de adicionado con 0.05 mg/L de BA, obteniéndose un
brote inicial a los 30 días de cultivo. Con el material de este experimento se realizó un segundo
experimento de multiplicación para aumentar y mantener el número de brotes. El sembrado fue en
medio MS suplementado con ANA y BA en las combinaciones mostradas en la tabla 1.

TOMO II BIOTECNOLOGÍA Y CIENCIAS AGROPECUARIAS - PÁGINA 124

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Tabla 1: Tratamientos utilizados para la brotación de Lobelia laxiflora

var. patzquarencis
Tratamiento ANA (mg/L) BA (mg/L)
T1 0 0
T2 0.1 0.1
T3 0.5 0.1
T4 0.1 0.5
T5 0.5 0.5
T6 0.1 0.1
T7 0.5 0.1

Con el material vegetal obtenido de esta etapa se realizó un tercer experimento de enraizado para
inducir la formación de raíces en los brotes multiplicados obtenidos, los cuales se cultivaron en medio
MS 50% adicionado con AIB en concentraciones mostradas en la tabla 2.

Tabla 2: Tratamientos utilizados para el enraizado de brotes

de Lobelia laxiflora var. patzquarencis
Tratamiento AIB (mg/L)
E1 0
E2 0.25
E3 0.50
E4 0.75
E5 1.00

Una vez obtenidas plántulas completas, el último paso fue realizar su transplante y aclimatación, los
sustratos utilizados fueron Turba (peat moss) y Perlita en tres distintas proporciones, la cuales se
muestran en la tabla 3.

Tabla 3: sustratos utilizados para el transplante y aclimatación

de plántulas de Lobelia laxiflora var. patzquarencis
Turba:Perlita
1:0 1.1 1:2

RESULTADOS
Se realizaron cortes en los entrenudos de la planta original para obtener las yemas las cuales se
emplearon en la primera etapa, con el fin de establecer las condiciones iniciales del cultivo in vitro
de explantes de dicha planta. A los 30 días se obtuvo una supervivencia del 50% y una contaminación
del 12.5% de los brotes cultivados in vitro. Se obtuvo un buen desarrollo del brote inicial al día 30.
(Fig. 1)

TOMO II BIOTECNOLOGÍA Y CIENCIAS AGROPECUARIAS - PÁGINA 125

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Figura 1. Brote inicial a los 30 días.

Con el material obtenido de este paso se realizó un segundo experimento de multiplicación, esto
para establecer las condiciones de brotación óptimas en esta etapa. Después de otros 30 días, el
mejor tratamiento para el aumento de brotes fue T2 (0.1 ml/L ANA y 0.1 mg/L BA) con hasta 8.3
brotes/explante y una longitud de 4.2 cm (Fig. 2), en comparación con el tratamiento control T1.

Figura 2. Mejor tratamiento T2 para brotación.

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Utilizando los brotes multiplicados, se realizó un tercer experimento de enraizado, cuyo objetivo fue
establecer las condiciones de enraizamiento óptimas para esta etapa. El mejor resultado en este
paso fue E5 (1.0 mg/L AIB) con hasta 8.2 raíces/brote (Fig. 3), siendo el resultado más alto en
comparación con el tratamiento control E1.

Figura 3. Mejor tratamiento E5 para enraizado.

Como último paso, se realizó el transplante y aclimatación de plántulas enteras obtenidas a lo largo
del proceso, obteniendo las condiciones óptimas para que las plantas sobrevivan fuera del ambiente
in vitro. Se obtuvieron resultados del 80% de supervivencia a los 60 días en combinación de sustratos
Turba:Perlita (1:2), siendo este el más alto en comparación con los demás tratamientos. Obtuvimos
así una eficiencia estupenda de plantas adaptadas a las condiciones ambientales (Fig. 4).

Figura 4. Planta de Lobelia laxiflora var. patzquarencis a los 60 días, sobreviviente al proceso de
aclimatación.

Así, se lograron establecer las condiciones óptimas para el cultivo in vitro de yemas de L. laxiflora
var. patzquarencis y que fueron:
a) Para el mayor desarrollo y multiplicación de brotes aéreos (7.1 brotes/explante): medio
MS con 0.05 mg/L;
b) Para el mejor enraizado de brotes multiplicados (8.2 raíces/brote): medio MS con 0.1
mg/L de ANA 7 y 0.1 mg/L de BA;
c) Para el transplante y aclimatación de esta planta con un 80% de supervivencia: en
sustrato Turba:Perlita (1:2), medio MS 50% con 1.0 mg/L de AIB.
CONCLUSIONES
Se logró un sistema de micropropagación para plantas de L. laxiflora var. patzquarencis tanto para
su estudio como para su uso en la medicina tradicional purépecha. Este es el primer reporte de un

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método rápido y eficiente de micropropagación para esta especie, establecido mediante el cultivo in
vitro de yemas vegetativas.

BIBLIOGRAFÍA
1. Q. R. A. Becerra, "Elementos teóricos que fundamentan la conformación de un centro
educativo ambiental para la propagación de plantas medicinales", Revista Ambientellanía,
Vol. 1, 1, 2017, pp. 20-27.
2. J. Rzedowski, "De México al Mundo", Ed. Azabache, México, 1992.
3. Caballero, L. Cortes, "Percepción, uso y manejo tradicional de los vegetales, México" in
Estudio de la relación entre los seres humanos y las plantas en los albores del siglo XXI (A.
B. Rendón, S. R. Domínguez, eds., Plantas, Cultura y Sociedad, 2001), pp. 1-100.
4. Martínez-Pérez, A. López, A. Gil-Muñoz, A. Cuevas-Sánchez, "Plantas silvestres útiles y
prioritarias identificadas en la mixteca poblana, México", Acta Botánica Mexicana, Vol. 98, 1,
2012, pp. 73-98.
5. M. P. Dirchwolf, A. M. SchroederII, "Establecimiento de un método de propagación
vegetativa para Catharanthus roseus (L.)", Revista Cubana de Plantas Medicinales,Vol. 19,
2, 2015, pp. 200-211.
6. V. E. Miller, "Fisiología Vegetal", Traducida por Francisco de la Torre. México. 1967, pp. 388.
7. H. J. Valdés, R. M. N. Nerdo, Medina, L. González, P. B. J. Velázquez, R. D. Domingo
Rivero, M. G. D. Sourd, G. F. Martínez, R. A. J. Rodriguez, "La biotecnología como
herramienta para la propagación, conservación y el mejoramiento genético del guayabo",
Rev. Colomb. Biotecnol. Vol. 14, 2, 2012, pp- 7-19.
8. O. Monteuuis, "Micropropagation and production of forest trees" in Vegetative propagation of
forest trees (National Institute of forest science, 2016), pp. 33-55.
9. B. Briones, "Micropropagación: la técnica de f c ad de a a " Plantas de probeta:
manual para la propagación de plantas por cultivo de tejidos in vitro (S. Sharry, M. Adema,
W. Abedini, eds., EDULP, Buenos Aires, AR. 2015), pp. 102-112.
10. S. Olmos, G. Luciani, E. Galdeano, "Micropropagación" in Biotecnología y Mejoramiento
Vegetal II (G. Levitus, V. Echenique, C. Rubinstein, E. Hopp, L. Mroginski, eds.,2010), pp.
353-362.
11. L. Barrueto, "El cultivo de tejidos" in Biotecnología vegetal (H. Prieto, M. Jordan, L. Barrueto,
M. Cordeiro, D. Durzan, eds., INIA, Santiago, CL, 2005), pp. 31-54.
12. L. Domínguez, "La biotecnología y las plantas medicinales", Ciencia, Vol. 66, 3, 2015, pp.
76-83.
13. J. Rzedowski, G.C. Rzedowski, "Flora del bajío y de regiones adyacentes", Instituto de
Ecología, A.C., Centro Regional del Bajío Pátzcuaro, Michoacán, 1997, pp. 1-64.

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USO DE INOCULANTES BACTERIANOS NATIVOS EN LA PRODUCCIÓN DE FRIJOL COMÚN

EN LA REGIÓN DEL VALLE DEL GUADIANA
Erika Cecilia Gamero Posada, Ixchel Abby Ortiz Sánchez, Sonia Valdez Ortega*, Cynthia Adriana
Nava Berumen, José Carlos Jaramillo Graciano y José Francisco Ávila Ibarra

Tecnológico Nacional de México campus Valle del Guadiana.

*[Link]@[Link]

RESUMEN
El uso de inoculantes a base de bacterias promotoras de crecimiento vegetal (BPCV) como las del
género Azospirillum, que son consideradas como fijadoras de nitrógeno, y al ser aisladas de la
rizosfera, han mostrado efectos positivos sobre la producción de diversos cultivos, al aumentar el
peso seco total, contenido de nitrógeno de hojas y granos, floración y aparición temprana de la vaina,
número de vainas y granos en estas, peso y tamaño del grano, altura de la planta y tamaño de la
hoja, índice de área foliar y tasa de germinación. Además, se han observado efectos marcados sobre
el sistema radical como el aumento en el peso seco, número, densidad y aparición temprana de los
pelos radicales. El presente trabajo tuvo como objetivo evaluar el efecto del uso de inoculantes
nativos a base de Azospirillum spp. sobre las variables de producción de frijol común, en la región
del Valle del Guadiana, Durango, durante el ciclo de temporal 2019. Se estableció una parcela
experimental de 492 m2 de Frijol Pinto, que se dividió en cuatro bloques al azar y dentro de cada uno
se evaluaron cuatro tratamientos: 1. Testigo Absoluto (sin fertilizante, sin inoculante), 2. Inoculado
(Azospirillum spp. 4.3x1011 UFC/mL) 3. Fertilización química intermedia/inoculación y 4. Fertilización
química completa. Las variables evaluadas fueron: vainas por planta, granos por vaina, granos por
planta, peso seco foliar, peso seco radicular y el peso de 100 granos. Los datos se procesaron
utilizando la prueba no paramétrica de Friedman (alfa=0.05). Los resultados mostraron que los tres
tratamientos con fertilización tienen el mismo efecto sobre el número de vainas por planta, con
d fe e c a g f ca a ( 0.05) c e e g ab .E aa e 3 e e efec be
el número de granos por vaina, y el segundo mejor tratamiento fue en el que solo se utilizaron
inoculantes, que tuvo el mismo efecto que la fertilización química completa. Los tratamientos en los
que se utilizaron inoculantes tienen el mismo efecto que el fertilizante químico sobre el número de
granos por planta. Las plantas con mayor peso seco foliar fueron las que se trataron con fertilización
química intermedia/inoculante; y las plantas con mayor peso radicular fueron las tratadas únicamente
con inoculantes, sin mostrar diferencia significativa con la fertilización química, pero sí con el testigo
absoluto. Los granos fertilizados con inoculantes fueron los más pesados, enseguida los tratados
con fertilización química completa e intermedia, y los 100 granos con menos peso fueron los del
testigo absoluto. Se puede concluir que el cultivo de frijol muestra respuesta en rendimientos de
grano a la inoculación con Azospirillum spp. y/o aplicación de fertilizantes químicos en dosis
intermedias complementadas con la inoculación de BPCV. Bajo una perspectiva de baja inversión,
el uso de inoculantes a base de cepas eficientes en fijación biológica de nitrógeno es la mejor opción
para agricultores de bajos recursos y para la reducción de los impactos negativos derivados del uso
de agroquímicos.

INTRODUCCIÓN
El frijol es una especie de cosecha anual, originaria de Mesoamérica y Sudamérica, sus numerosas
variedades se cultivan en todo el mundo para el consumo, tanto de sus vainas verdes como de sus
semillas frescas o secas, por su alto contenido en proteínas y minerales, es básico para la
alimentación de la población; ocupa el segundo lugar en importancia después del maíz (FIRCO,
2017). Es muy saludable porque es una de las legumbres con menos contenido de grasa, tiene un
bajo contenido de azúcar y destaca por su alto contenido de fibra; además, es rico en calcio y potasio,
as como en antioxidantes que ayudan a reducir los problemas del corazón (FIRCO, 2017).
México ocupa el 4to lugar en producción de frijol a nivel mundial, con un total de 1 millón 294 mil 634
toneladas anuales (FIRCO, 2017). Durango estuvo en el tercer lugar en la producción de frijol en el
ciclo Primavera Verano 2018- 2019, después de Zacatecas y Chihuahua, con 58,962 toneladas esto
es un 9.2% de la producción total del cultivo del país (SIAP, 2020).

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Entre las soluciones para el control de nutrición vegetal, plagas y enfermedades, se encuentra la
aplicación de fertilizantes y pesticidas químicos, sin embargo han tenido efectos negativos sobre el
ambiente, incluso sobre aspectos relacionados con la calidad de vida de las poblaciones humanas.
Asimismo, se ha demostrado que su eficacia puede ser de corta duración y que algunas plagas y
patógenos pueden presentar resistencia a los ingredientes activos de los productos (López et al.,
2005). Como alternativa de reducir los efectos negativos de la utilización de agroquímicos, en las
últimas décadas se ha llevado un manejo integral apoyado con la biotecnología que ha impulsado
fuertemente el uso de productos de origen biológico, tal es el caso de ciertos microorganismos del
suelo como son las bacterias Azospirillum spp., las cuales son bacterias promotoras de crecimiento
vegetal (BPCV) y mejoradoras de suelo.
El género Azospirillum son rizobacterias de vida libre que pueden promover el crecimiento de las
plantas y aumentar los rendimientos en muchos cultivos de importancia agronómica. Se supone que
las bacterias afectan el crecimiento de las plantas principalmente por la producción de sustancias
que promueven el crecimiento de las plantas, lo que conduce a una mejora en el desarrollo de las
raíces y un aumento en la tasa de absorción de agua y minerales (Dobbelaere, 2001). Azospirillum
spp. contribuyen a aumentar los rendimientos de cereales y forrajes mejorando el desarrollo de las
raíces, aumentando la tasa de absorción de agua y minerales del suelo, y mediante la fijación
biológica de nitrógeno.
Este trabajo tuvo como objetivo evaluar el efecto del uso de inoculantes nativos a base
de Azospirillum spp. sobre las variables de producción de frijol común, en la región del Valle del
Guadiana, Durango, durante el ciclo de temporal 2019.

TEORÍA
Las biotecnologías han abierto nuevas posibilidades en lo concerniente a la aplicación de
microorganismos benéficos del suelo, en la promoción del crecimiento de las plantas y el control
biológico de patógenos. El trabajo con bacterias rizosféricas se ha desarrollado de forma gradual y
ascendente, teniendo como finalidad aumentar el rendimiento de los cultivos, disminuir el uso
desmedido de fertilizantes minerales y productos químicos y, consecuentemente, reducir la
contaminación ambiental. La utilización de rizobacterias promotoras del crecimiento vegetal en la
agricultura es una práctica que internacionalmente ha tomado auge en las últimas décadas; en Cuba
se ha favorecido el desarrollo de diferentes investigaciones relacionadas con el aislamiento, la
selección y aplicación de microorganismos rizosféricos, con vistas a desarrollar biopreparados
efectivos para cultivos de interés económico (Parra y Cuevas, 2001).
Dentro de las bacterias asociativas más estudiadas, se encuentran las pertenecientes al género
Azospirillum, el cual ha sido objeto de estudio desde la década del setenta, pues su inoculación en
las plantas conlleva a un aumento significativo del sistema radical, además de inducir resistencia a
agentes patógenos y proveer de elementos tan necesarios como el nitrógeno, inhibe la proliferación
de plantas parásitas y produce hormonas que estimulan el crecimiento vegetal, lo que permite un
desarrollo más económico y saludable de los cultivos. La habilidad que tiene esta bacteria de
colonizar el interior de las plantas y ocupar nichos protegidos contra el oxígeno y otros factores, lo
convierten en el grupo más promisorio de diazótrofos asociados con gramíneas y otras plantas no
leguminosas.
Las bacterias pertenecientes a este género son organismos fijadores de N2 que poseen una amplia
distribución ecológica, ya que ha sido posible detectar su presencia en zonas templadas, tropicales
y subtropicales. Se describen en la literatura como Gram negativas aunque la gran variabilidad ha
sido observada en varias cepas de Azospirillum brasilense. La morfología de las células depende de
las condiciones nutricionales y edad del cultivo. Se observan formas eses y vibroides de 0.8 a 1 x 2
a 5 micrómetros de tamaño; se asocia además la aparición de formas quísticas o en C, como vía de
resistencia a las condiciones de estrés y del mismo modo como mecanismo de supervivencia en la
rizosfera. Contienen gránulos de polihidroxibutirato (PHB) como material de reserva y un sistema
muy eficiente de adquisición de hierro a través de sideróforos, que le permite secuestrarlo en la
rizosfera, haciéndolo no utilizable por otros microorganismos.
Las células son mótiles tanto in vitro como en el suelo y son capaces de adaptar su flagelación a
diferentes ambientes. Aunque pueden desarrollarse tanto en condiciones aeróbicas como

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anaeróbicas, son preferentemente microaerofílicas en presencia o ausencia de fuentes combinadas

de nitrógeno. La presencia de una respuesta quimiotáctica a diferentes compuestos, asociada a la
existencia de vías metabólicas alternativas, convierten a Azospirillum en un organismo
nutricionalmente versátil, pues le permiten consumir una amplia variedad de ácidos orgánicos,
azúcares, aminoácidos y compuestos aromáticos que se encuentran disponibles en la rizosfera.
Un análisis de estas propiedades fisiológicas y bioquímicas demuestran que este género posee
características, que lo convierten en un organismo capaz de competir en la rizosfera de varias
especies de plantas, a pesar de la presencia de la población rizosférica indígena y que le
proporcionan mayores posibilidades de subsistencia que otros diazótrofos en el nicho ecológico.
La inoculación de plantas con Azospirillum puede provocar cambios significativos en varios
parámetros de su crecimiento, los cuales pueden afectar o no el rendimiento del cultivo. Esta bacteria
benéfica, general y no específica es notoria por sus efectos sobre plantas comerciales, pastos y
plantas de cereales cultivadas como trigo, maíz, sorgo y arroz, además de producir asociaciones con
varias plantas suculentas desérticas (Parra y Cuevas, 2001).
El principal mecanismo por el cual Azospirillum influye en el desarrollo y la productividad de las
plantas es especulativo y aún motivo de debate. Algunas explicaciones incluyen: fijación de nitrógeno
atmosférico, que contribuye al nitrógeno de la planta, efectos hormonales que alteran el crecimiento
y metabolismo de la planta, incrementos del desarrollo, en general, del sistema radical que provoca
un aumento en la toma de minerales y agua, actividad nitrato reductasa bacteriana en la raíz, que
incrementa la acumulación de nitrato en plantas inoculadas y la teoría aditiva que plantea la sucesión
de cada uno de estos mecanismos.
Todas las cepas salvajes de Azospirillum son capaces de fijar nitrógeno atmosférico eficientemente,
ya sea como bacteria de vida libre o en asociación con plantas, además de participar en varias
transformaciones en el ciclo del nitrógeno. Unido a esto, seguido de la inoculación, se observa un
incremento en el contenido total de nitrógeno en retoños y granos de plantas inoculadas. Por estas
razones, la fijación de nitrógeno atmosférico fue propuesta como el primer mecanismo que podía
explicar el incremento en el desarrollo de las plantas por Azospirillum (Parra y Cuevas, 2001).
La observación común de un incremento en la actividad nitrogenasa de raíces inoculadas constituyó
otra evidencia de que este mecanismo podía contribuir al balance de nitrógeno de las plantas, pues
se ha reflejado que la actividad de esta enzima, bien documentada, es de magnitud suficiente para
explicar este incremento si todo el nitrógeno fijado es incorporado a la planta (Parra y Cuevas, 2001).
Así tenemos que, por un lado, en inoculaciones de maíz y trigo se demostró que del 5-10 % y hasta
el 18 % del nitrógeno de la planta era derivado de la fijación de N2 y que las plantas inoculadas eran
capaces de crecer normalmente con solo una cantidad parcial del fertilizante nitrogenado requerido
para un normal desarrollo. Sin embargo, se observó que plantas que incrementaron el rendimiento
con la inoculación, mostraban una baja o ninguna actividad nitrogenasa y que de todo el nitrógeno
fijado por la bacteria, menos del 5 % era incorporado en el interior de la planta hospedera y estas
cantidades incorporadas eran insuficientes para explicar el incremento total en el contenido de
nitrógeno observado. A esto se adicionó el hecho de que altos niveles de fertilización nitrogenada,
los cuales inhiben la fijación de N2, no eliminaban la respuesta de la planta a la inoculación. Ante
estos resultados contradictorios, la posibilidad de que la fijación de N 2 fuera el principal mecanismo
de acción de Azospirillum comenzó a cuestionarse.
El uso de mutantes Nif-, incapaces de fijar N2 pero que, por otra parte, son isogénicos con respecto
a las cepas parentales, fue la vía fundamental para distinguir la contribución a través de la fijación
de N2 de otros efectos de la inoculación bacteriana. La inoculación de cereales con este tipo de
mutantes causó los mismos efectos que las cepas parentales, lo que demostró que en la respuesta
de la planta intervinieron otros factores además de la fijación de N 2 (Parra y Cuevas, 2001).
A pesar de estos resultados, este mecanismo continúa siendo una posibilidad que se pone de
manifiesto en muchas asociaciones de Azospirillum; la pregunta básica en cada sistema de
inoculación se encuentra relacionada con la cantidad de nitrógeno que es aportado por la bacteria a
la planta y en qué condiciones de crecimiento, un factor que es altamente variable y errático (Parra
y Cuevas, 2001).

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PARTE EXPERIMENTAL
El trabajo se llevó a cabo en los campos de cultivo del Tecnológico Nacional de México campus Valle
del Guadiana ubicado en Carretera Durango - México km. 22.5, Ejido Villa Montemorelos, Durango;
en una parcela experimental de 492 m2, con la variedad de frijol Pinto un diseño de cuatro bloques
al azar y en cada uno de ellos se evaluaron cuatro tratamientos: 1. Testigo Absoluto (sin fertilizante
químico ni inoculante), 2. Inoculado (Azospirillum spp. 4.3x1011 UFC/mL) 3. Fertilización química
intermedia/inoculación y 4. Fertilización química completa. La siembra se realizó a mano depositando
dos semillas por orificio a 5 cm de profundidad con una distancia entre plantas de 10 cm y de 80 cm
entre surcos. De delimitaron parcelas de 4x4 metros y separadas entre si por pasillos de 1 metro de
ancho.
Los tratamientos 2 y 3 se realizaron con mochila directamente en el suelo sobre la siembra o sobre
el tallo de las plantas. La cepa bacteriana para estos dos tratamientos se aisló y se reprodujo en el
Laboratorio de Biotecnología Vegetal del Instituto Tecnológico, a partir de raíz de Amaranthus
hypocondriacus. Se empleó la reproducción masiva en caldo nutritivo por 5 días a 28 °C en agitación
constante a 100 rpm y luego la biomasa se separó y lavó por centrifugación. La densidad microbiana
fue determinada por espectrofotometría de luz UV a 660 nm. Posteriormente los inoculantes se
diluyeron en 32 L de agua corriente, alcanzando una concentración de 4.3x10 11 UFC/mL. Se
realizaron 3 aplicaciones de estos tratamientos de inoculación, una al momento de la siembra y dos
más a los 15 y 35 DDS (días después de la siembra).
El tratamiento agronómico integral del cultivo, así como la aplicación del tratamiento 4, se realizó
conformé a la agenda agrícola Durango y La Laguna (INIFAP, SAGARPA y COFUPRO, 2017). El
periodo de siembra fue del 16 de Julio al 3 de Diciembre de 2018, con una precipitación media anual
de 428.8 mm (CONAGUA, 2020).

Cuadro 1. Diseño experimental

No. Tratamiento Tipo de fertilización Dosis
1 Testigo Absoluto (sin 0
fertilizante químico ni
inoculante)
2 Inoculado (Azospirillum 4.3x1011 UFC/mL
spp.)
3 Fertilización química 4.3x1011 UFC/mL
intermedia/inoculación +
20N-30P-00K
4 Fertilización química 40N - 60P - 00 K
completa

AL final del ciclo fenológico se contabilizaron las vainas por planta; y luego de la cosecha fueron
analizadas las siguientes variables: granos por vaina, granos por planta, peso seco foliar, peso seco
radicular y el peso de 100 granos. Para el monitoreo de las variables en mención se tomaron
muestras de 20 plantas por tratamiento de cada bloque, para posteriormente evaluarlos con un
a aa c (F ed a =0.05).

RESULTADOS
En el Cuadro 2 se puede observar los resultados de la prueba de comparación de medias de
Friedman, de las distintas fertilizaciones que se llevaron a cabo.
Se obtuvo mayor producción de vainas por planta en los tratamientos de inoculado, fertilización
química intermedia/inoculación y fertilización química completa, los cuales fueron estadísticamente
iguales; esto indica que sí puede competir el inoculado con la fertilización química. En el análisis de
granos por vaina se observó una mejor respuesta en los tratamientos de inoculado y fertilización
química intermedia/inoculación, sin diferencia significativa entre ellos, pero sí con el testigo sin
fertilizar.

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En un experimento similar (Martínez et al., 2017) probaron la inoculación con Rhizobium de dos
cultivares de Frijol, y observaron que en uno de los cultivares no hay diferencia significativa con el
testigo fertilizado químicamente, pero otro de los cultivares disminuye significativamente el número
de vainas por planta, llamativamente incrementando el número de granos por vaina, recuperándose
gracias a ello, el rendimiento de dicho cultivar.
En el caso de granos por planta, los tres tratamientos que llevaron algún tipo de fertilización se
comportaron estadísticamente igual, con diferencia significativa con el testigo no fertilizado.
Para el peso seco foliar los mejores resultados los dieron el tratamiento de fertilización química
completa y el de fertilización química intermedia/inoculado, dichos resultados eran de esperarse
debido a que el fertilizante químico estimula a las plantas para el desarrollo foliar y esos dos
tratamientos lo contenían.
En el peso seco radicular muestra que los tratamientos de inoculado, fertilización química
intermedia/inoculados y fertilización química completa son estadísticamente iguales, pero si se
observa la tabla la fertilización con solo el inoculado con Azospirillum spp. se obtuvo una mayor
respuesta al desarrollo de las raíces, esto tiene un gran beneficio dado a que entre más sistema
radicular tenga una planta, mayor será la absorción de nutrientes y como consecuencia nos traerá
una mayor producción.
Por último, en el peso por 100 granos el tratamiento de mayor respuesta fue el de solo la inoculación,
seguido por la fertilización química completa, esto nos quiere decir que las plantas a las que se les
aplico Azospirillum spp. se enfocaron mas en el llenado del fruto lo que conllevo a un mayor peso
del grano y con ello un mayor rendimiento del cultivo. En este sentido el grupo de Martínez et al.
(2017) reportan que la masa seca de los granos de dos cultivares de frijol estudiados, que recibieron
la inoculación bacteriana con Rhizobium spp. con la adición del 30 % de la fertilización nitrogenada,
no difirieron significativamente de aquellas que recibieron el 100 % de la fertilización en ninguno de
los dos cultivares en estudio, lo que significa que la inoculación pudiera estar ejerciendo un efecto
similar al 70 % del N restante.

Cuadro 2. Variables de producción de Frijol Pinto Saltillo sometido a cuatro tratamientos de

fertilización en condiciones de temporal durante el ciclo 2019, en el Valle del Guadiana,
Durango.
Tratamiento Vainas Granos Granos Peso Peso Peso de
por por vaina por seco seco 100
planta planta foliar radicular granos
1 1.92 b 1.89 c 1.87 b 1.48 c 1.85 b 1.00 c
2 2.81 a 2.64 a,b 2.65 a 2.40 b 2.91 a 3.50 a
3 2.48 a 2.91 a 2.71 a 3.18 a 2.56 a 2.25 b
4 2.80 a 2.56 b 2.77 a 2.93 a 2.68 a 3.25 a,b

L e a e d fe e e e a a c a e e a d fe e c a g f ca a ( 0.05); 1. Testigo
Absoluto (sin fertilizante químico ni inoculante), 2. Inoculado (Azospirillum spp. 4.3x1011 UFC/mL)
3. Fertilización química intermedia/inoculación y 4. Fertilización química completa.

El tratamiento con la fertilización química completa, generalmente se mantuvo a la cabeza en los

resultados favorables ante los otros tratamientos, seguido por el tratamiento de solo el inoculado,
después el de la fertilización química intermedia/inoculado y por ultimo el testigo absoluto. Era de
esperarse la respuesta favorable de la fertilización química completa, debido a que es un estimulante
potente para las plantas, sin embargo, con el tratamiento de Azospirillum spp. también se obtuvieron
resultados muy buenos a pesar de ir solo sin la combinación con otro tipo de fertilizante.
Una investigación realizada en tres genotipos de frijol común (BAT-304, Velasco Largo y BAT-93),
se estudió el efecto de la fertilización mineral y la biofertilización en el rendimiento de las plantas. Se
encontró que la fertilización biológica superó a la mineral en 10,4 y 6,0 %, en los genotipos BAT-304
y Velasco, respectivamente. Sin embargo, en el genotipo BAT-93, la fertilización mineral incrementó
el rendimiento en 18,45 %, con relación a la biofertilización (Esquivel et al., 2014). Esto quiere decir

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que la respuesta no sólo depende del microorganismo, sino también del cultivar y su capacidad para
asociarse en simbiosis. Por tal motivo resultaría de especial interés evaluar la respuesta de otras
variedades de frijol común cultivadas en la región a la inoculación con BPCV, como el frijol Negro,
Pinto Villa, entre otros.

CONCLUSIONES
El uso de inoculante a base de bacterias promotoras de crecimiento vegetal en el cultivo de frijol,
mostraron un desarrollo muy favorable en las plantas, las características que más le interesan al
productor y en la que se observaron muy buenos resultados fueron en el número de granos por
planta y el peso de 100 granos, esto hace que se genere un aumento en rendimiento al momento la
cosecha, de igual manera el uso de la fertilización química intermedia/inoculado, muestra resultados
efectivos, esto ayuda para empezar a mostrarle a los productores de la región que se pueden llegar
a tener los mismos rendimientos con el uso de BPCV que con una fertilización totalmente química.
Cuando se llegue a establecer sistemas de producción agrícolas sustentables, se tendrán mayores
y mejores resultados, esto debido a que, aparte de estar reduciendo los costos de producción con la
implementación de fertilizantes orgánicas, se contribuye a el mejoramiento de las características
fisicoquímicas y biológicas de los suelos.

BIBLIOGRAFÍA
1. Comisión Nacional del Agua (CONAGUA). Consultado en mayo 2020. Históricos 2019.
([Link]
m%C3%A1tico/Temperatura%20y%20Lluvia/PREC/[Link])
2. Dobbelaere S., Croonenborghs A., Thys A., Ptacek D., Vanderleyden J., Dutto P., Brener S.
(2001). Respuestas de cultivos agronómicamente impor