Escuela de Medicina

Biología Celular

Guía de Práctica
de Laboratorio

Trujillo – Perú

2021
 FACULTAD DE CIENCIAS MÉDICAS
ESCUELA PROFESIONAL DE MEDICINA

PRÁCTICA N° 04

LABORATORIO DE BIOLOGÍA CELULAR FECHA:

TEMÁTICA: Difusión, diálisis y ósmosis.
SESION: 04 TIEMPO DE DESARROLLO DE LA GUÍA: 03 horas
ESTUDIANTE:
CAPACIDAD:
Analiza los mecanismos de difusión, osmosis y diálisis, ejerciendo un pensamiento crítico y
reflexivo.

I. INTRODUCCIÓN

Cada célula se encuentra rodeada por una membrana plasmática que la rodea, le da forma, es
específica de la función de esta y la relaciona con el medio extracelular. Debido a su interior
hidrofóbico, la bicapa lipídica de una célula constituye una barrera altamente impermeable a
la mayoría de moléculas polares que permite a la célula mantener una composición
citoplasmática distinta del medio extracelular. Sin embargo, para poder utilizar esta barrera
las células han tenido que desarrollar sistemas para transportar específicamente moléculas
hidrosolubles a través de la membrana y así poder ingerir los nutrientes esenciales, excretar
los productos residuales del metabolismo y regular las concentraciones intracelulares de
iones. Los mecanismos que permiten a las sustancias cruzar las membranas plasmáticas son
esenciales para la vida y la comunicación de las células. Para ello, la célula dispone de
diferentes procesos como, entre ellos tenemos:

Difusión: mecanismo pasivo a favor del gradiente de concentración que facilita el transporte
de determinadas sustancias que en general son insolubles en lípidos, monosacáridos, ácidos
grasos, aminoácidos. Requiere transportadores especiales. Diálisis: Separación de pequeñas
moléculas (cristaloides) de grandes moléculas (coloides) por medio de difusión a través de
una membrana selectivamente permeable.

Si se observan hematíes en soluciones de cloruro de sodio de diversas concentraciones se

evidencian que su volumen está en estrecha relación con el medio en que se encuentran. Así,
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se les puede ver aumentar su volumen progresivamente si se les diluye este medio por
adición de agua destilada. Más allá de una cierta dilución su distensión es tal que dejan
escapar la hemoglobina y las sales que contienen. Este proceso se llama hemólisis y tiene
lugar para concentraciones de NaCl inferiores al 0.5%. para soluciones de NaCl al 0.9%, por el
contrario, el volumen de las células es el mismo que se puede observar en la sangre.
Finalmente, si se utilizan soluciones más concentradas, las células disminuyen de volumen por
perdida de agua, y toman progresivamente un aspecto arrugado, fenómeno que recibe el
nombre de crenación.

II. CONOCIMIENTOS PREVIOS:

Medidas de bioseguridad.
Membrana celular. Características y estructura.
Mecanismos de transporte a través de la membrana celular (transporte activo y pasivo).

III. MATERIAL

Material biológico: Instrumental y equipos de laboratorio:

- 1 huevo - 5 Laminas porta objetos
- 3 buches secos de pollo - 5 Laminillas cubreobjetos
- 3 ml de sangre. - 2 Jeringas hipodérmica de 5ml
Reactivos: - Alcohol etílico de 96°
- Fenolftaleína - Torundas de Algodón
- NaOH 10%, - 3 vasos de precipitación de 250 ml
- Nitrato de plata 2% - 4 tubos de ensayo de 13x100mm
- Reactivo de Biuret - 2 Pipetas de 10 ml
- Lugol - Microscopio óptico.
- Solución de almidón al 30 %.
- Agua destilada.

IV. DESARROLLO DE LA PRÁCTICA

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4.1 Procedimiento:

A. Difusión:
- Preparar dos buches de pollo deshidratados, dejando un extremo cerrado y el otro
extremo abierto.
- Colocar dentro de los buches de pollo y de los vasos de precipitación, lo siguiente:
Buche 1 Buche 2 Vaso 1 Vaso 2
Agua destilada Solución de Agua de caño Agua de caño
(20 ml) almidón (150 ml) (150 ml)
+ (20 ml) + +
Fenolftaleína NaOH Lugol
(5 gotas) (10 ml) (20 gotas)
- Lavar con agua de caño el buche 1 y sumergirlo dentro del vaso 1. Dejar actuar por 15
minutos. Observar, esquematizar e interpretar.
- Lavar con agua de caño el buche 2 y sumergirlo dentro del vaso 2. Dejar actuar por 15
minutos. Observar, esquematizar e interpretar.

B. Diálisis:
- Dentro de un buche de pollo deshidratado, colocar solución de albúmina disuelta en
cloruro de sodio.
- Sumergirlo en un vaso con 150 ml de agua destilada. Dejar actuar por 30 minutos.
- Pasado este tiempo, colocar dentro de 2 tubos de ensayo de 15x150mm, lo siguiente:
Tubo 1 Tubo 2
Líquido del vaso
Líquido del vaso
(5 ml)
(5 ml)
+
+
BIURET
Nitrato de Plata
(1ml NaOH +
(3 gotas)
5 gotas de CuSO4)
- Observar, esquematizar e interpretar.
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C. Ósmosis (hemólisis y crenación)

- Coloque 3 tubos de ensayo de 13x100 mm, en una gradilla, y agregue lo siguiente:
Tubo 1 Tubo 2 Tubo 3
NaCl al 0,5% NaCl al 0,9% NaCl al 2,5%
(4 ml) (4 ml) (4 ml)
+ + +
Sangre Sangre Sangre
(5 gotas) (5 gotas) (5 gotas)
- Cada uno de los tubos, tapar con parafilm y mezclar la solución invirtiendo suavemente
el tubo dos veces.
- Inmediatamente, con una pipeta Pasteur, transferir 1 gota de la mezcla a una lámina
portaobjetos limpia y desengrasada con alcohol.
- Colocar una laminilla cubreobjetos limpia y desengrasada con alcohol.
- Proceder para los 3 tubos de forma similar.
- Observar al microscopio a 40X, esquematizar e interpretar

4.2 Resultados: análisis e interpretación

Difusión:

Interpretación: 1
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El lugol no ha difundido porque no hubo cambio de color, por lo tanto, es negativo. Las
partículas de los carbohidratos como el almidón son muy grandes para pasar por la
membrana celular con facilidad. No hubo reacción química entre el lugol y el almidón.

Interpretación: 2

Se muestra un cambio de color después de 15, el pH neutro pasa por un cambio en su nivel de pH,
la reacción de la Fenolftaleína se tornó dentro del

buche de un color rosado. El hidróxido de sodio es

alcalino y ha ingresado al interior del buche, ha difundido, de ser neutro ha incrementado su pH.
Por lo tanto, es una difusión positiva.

Diálisis:
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Interpretación:
A través de la prueba de Biuret se demostró que las proteínas no han salido hacia el exterior (es
negativo, la albúmina no difunde). La prueba de cloruros ha demostrado que, si hubo un cambio,
los cristaloides salen a través de la membrana, el resultado positivo, el cloruro de sodio si difunde.
Ósmosis (hemólisis y crenación):

Interpretación:
Al preparar las soluciones 1 (se agregó un soluto de NaCl a un 0.9%, 2 (se agregó un soluto de
NaCl al 2.25%) y 3 (se agregó un soluto de NaCl al 0.2%). La concentración de NaCl en nuestra
célula es de 0.9 %. En el primer vaso se muestra un medio isotónico, lo que muestra una
concentración igual tanto en el Medio Extracelular y el Medio Intracelular. En el segundo vaso
la concentración de soluto es mayor en el Medio Extracelular y en el Medio Intracelular hay
menos, por lo tanto, el agua sale de la célula y se produce una crenación (es un medio
1 2 3
hipertónico). En el tercer vaso se muestra un medio hipotónico, hay una mayor concentración
de soluto en el Medio Intracelular y menor concentración en el Medio Extracelular, por lo
tanto, las moléculas de agua ingresan a la célula y se expande (hemólisis).

V. CONCLUSIONES
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VI. a velocidad de difusión

depende del tamaño de las
moléculas del azul
VII. de metileno y de la
temperatura de las
moléculas del agua, que
VIII. determinan la
velocidad de las moléculas
del agua que se dispersan y
IX. chocan. El crecimiento
de la temperatura de la
solución, la velocidad de
X.difusión, por lo tanto es
mayor.
XI. a velocidad de difusión
depende del tamaño de las
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moléculas del azul

XII. de metileno y de la
temperatura de las
moléculas del agua, que
XIII. determinan la
velocidad de las moléculas
del agua que se dispersan y
XIV. chocan. El crecimiento
de la temperatura de la
solución, la velocidad de
XV. difusión, por lo tanto es
mayor.
 La velocidad de difusión depende del tamaño de las moléculas. Moléculas que tienen alto
peso molecular tales como el almidón no pueden pasar por la bicapa siendo impermeables
a esta. En la difusión no requiere de ningún gasto de energía por lo que se concluye que es
un transporte pasivo.
 En el experimento se comprobó de los coloides no atraviesan la membrana celular (la
proteína de albúmina es una molécula grande). Por otro lado, los cristaloides si atraviesan
la membrana celular, el cloruro de sodio al ser una molécula más pequeña si atraviesa la
membrana celular.
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 En la ósmosis se produce el movimiento del agua, se pueden dar en 3 medios (isotónico,

hipertónico, hipotónico). El agua se mueve a través de la membrana celular, a través, de la
concentración de soluto tanto en el Medio Intracelular como en el Medio Extracelular.
XVI. BIBLIOGRAFÍA
ANEXOS:

PREGUNTAS DE APLICACIÓN
1) Investigue sobre la importancia biomédica de la difusión, diálisis y ósmosis en el ser
humano.
a. Difusión
Una sustancia difunde desde una región de mayor concentración hacia una región
donde está menos concentrada. La difusión bajo el gradiente de concentración lleva a
un equilibrio dinámico, las moléculas de soluto continúan atravesando la membrana,
pero a una tasa igual en ambas direcciones. Las moléculas deben ser pequeñas y no
polares para que se muevan a través de la membrana Ej. Difusión de gases (O2 y CO2)
en los eritrocitos.
b. Diálisis
La diálisis es el proceso de separación de las partículas coloidales, en función de su
tamaño, a través de una membrana dializadora. Esta membrana permite el paso de
moléculas de pequeño tamaño (sales minerales, iones) y de agua e impide el de las
macromoléculas o partículas coloidales.
La hemodiálisis: es el tratamiento que se emplea para limpiar la sangre en casos de
insuficiencia renal crónica mediante el uso de un filtro o hemodializador y un líquido
de diálisis generado por un riñón artificial. A través de las membranas utilizadas pasan
las moléculas pequeñas de la sangre al líquido de diálisis. Así, se elimina el agua, urea,
sales minerales, ... que no pueden ser filtrados por el riñón de un modo natural.

c. Ósmosis
Es importante porque produce la ENTRADA o SALIDA de sustancias a través de una
membrana semipermeable, debido a la presencia de poros diminutos. Esto lo realiza
la Célula a través de la ÓSMOSIS, en donde no gasta energía, ya que es un Transporte
Pasivo. Las SUSTANCIAS que entran o salen son NECESARIAS para el buen
funcionamiento y metabolismo celular. 
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2) La piel es una membrana histológica, que recubre nuestro cuerpo cuya epidermis no es
vascularizada ¿Cómo crees que este tejido obtiene sus nutrientes para poder realizar sus
funciones vitales? Fundamenta.
La epidermis no tiene vasos sanguíneos porque es un epitelio, de modo que se nutre por difusión a
partir de los capilares existentes en el tejido conjuntivo de la dermis subyacente.
 Queratinocitos, que constituyen alrededor del 90% de las células epidérmicas y son
capaces de producir una proteína fibrosa llamada queratina que tiene efecto protector
sobre la piel.
 Melanocitos, comprenden el 8% de las células epidérmicas y producen la melanina
que es un pigmento marrón-negro que contribuye al color de la piel y absorbe la luz
ultravioleta.
 Células de Langerhans, derivan de la médula ósea y emigran a la epidermis en donde
intervienen en las respuestas inmunes de la piel ya que son macrófagos. Son dañadas
fácilmente por la luz ultravioleta.
 Células de Merkel, se encuentran en la capa más profunda, o estrato basal, de la
epidermis de la piel sin pelo, donde están ligadas a los queratinocitos por
desmosomas. Estas células hacen contacto con la terminal de una neurona sensitiva e
intervienen en la sensación de tacto.
3) Que funciones cumplen las proteínas ABC membranal, y que enfermedades se presentan
por alteración de dichas proteínas.
Están presentes en las membranas plasmáticas de las bacterias (transporta aminoácidos,
azúcares y péptidos), en la membrana plasmática de mamíferos (transporta fosfolípidos,
pequeñas drogas lipofílicas, colesterol y moléculas pequeñas).
 Los trasportadores ABC tienen una gran importancia en medicina.
• En primer lugar, existen mutaciones congénitas en algunos de estos transportadores que
provocan enfermedades genéticas importantes, como la fibrosis quística o la
adrenoleucodistrofia, inmunodeficiencias y trastornos metabólicos.
• Además, algunos transportadores ABC humanos son responsables de diferentes
multirresistencias a fármacos, ya que, al ser capaces de transportar un gran número de
sustancias diferentes, pueden transportar también el fármaco fuera de la célula, haciendo
que su función se vea reducida o eliminada.