INSTITUTO TECNOLÓGICO DE MÈRIDA

INGENIERÍA QUÍMICA

MATERIA:
ANÀLISIS INSTRUMENTAL

DOCENTE:
MARÌA DE LOURDES VARGAS Y VARGAS
ALUMNA:
GONZÁLEZ FLORES ANDREA CAROLINA

ACTIVIDAD:
UNIDAD 2 ESPECTROSCOPIA DE ABSORCIÓN EN EL UV-VISIBLE

FECHA DE ENTREGA:
10 DE OCTUBRE DE 2022
Objetivo La técnica de UV/Vis permite la identificación molecular de compuestos
orgánicos e inorgánicos cuando presentan dobles ligaduras conjugadas y/o grupos
cromóforos. La espectroscopia UV-visible se utiliza para identificar algunos grupos
funcionales de moléculas y, además, para determinar el contenido y fuerza de una
sustancia. Se utiliza de manera general en la determinación cuantitativa de los
componentes de soluciones de iones de metales de transición y compuestos orgánicos
altamente conjugados.
Se utiliza extensivamente en laboratorios de química y bioquímica para determinar
pequeñas cantidades de cierta sustancia, como las trazas de metales en aleaciones o la
concentración de cierto medicamento que puede llegar a ciertas partes del cuerpo.
1. De que tratan las leyes fundamentales de la espectroquímica y como se
relacionan con el análisis cualitativo y cuantitativo.
Las leyes de la espectroquímica están basadas en medir cuanta luz absorbe una sustancia
y la interpretación de la radiación electromagnética se dice y está relacionado con que la
sustancia al absorber luz hace que los electrones “salten” o pasan a diferentes niveles de
energía mayores con esto también se puede explicar por qué algunas sustancias son
coloreadas
Para el análisis cuantitativo consiste en tener una concentración para la medición con
menor error, seguidamente tener una longitud de onda correspondiente a un pico
máximo
Verificar la ley de Lambert beer donde tenemos transmitancia que se define como la
fracción de luz o de radiación independiente que no es absorbida por una solución
La fórmula es T= i/ i0 o bien T= 10 ^A
Donde i= haz de luz transmitido
i0= haz de luz independiente
T= transmitancia
También tenemos la absorbancia que es la cantidad de luz absorbida por una solución de
concentración C está dada por:
A= -log T A=abc A=Ebc
Donde A=abc este definido como a: coeficiente de extinción (ppm ^-1 cm^-1)
b: paso óptico (cm)
c: concentración (ppm, g/L, mg/L)
Cuando la concentración está dada en Mol/L se usa A= Ebc
Donde E: coeficiente de extinción molar (mol)
b: Paso óptico (cm)
c: concentración (mol/L)
En análisis cualitativo se tiene que existe espectroscopia molecular y atómica, donde la
atómica se refiere a energía electrónica que es el cambio de nivel de energía y se
representa por los números cuánticos La molecular es energía vibracional y rotacional y la
suma de la E. electrónica +E. vibracional+ E. rotacional será la energía total y es la banda
ancha de absorción Así mismo, Identificación de cromóforos por el espectro
A vs Longitud de onda
Como dato se dice que cuando la frecuencia es mayor se tendrá mayor poder energético y
cuando se tiene menor longitud de onda el poder energético será menor
2. Que rango de longitudes de ondas abarca el UV-Vis, y que tipo de transiciones
ocurren cuando se trata de analitos en forma atómica. Explique, porque los
espectros moleculares son más complejos que los espectros atómicos.

La radiación de la región del ultravioleta (10-400 nm) y la visible (400-750 nm) tienen en
común el hecho de que la absorción de ambas regiones por moléculas, provoca la
excitación de e-de enlace a niveles de E superiores. Nos permite obtener información de
las transiciones electrónicas de las molécula, como ya sabemos este rango es donde se
encuentran los electrones externos y por ende son los que pueden pasar de un nivel de
energía menor a uno de mayor energía Cuando hablamos de analitos atómicos suceden
transiciones electrónicas en este caso entendemos que las moléculas exhiben espectros
electrónicos por lo cual se dan transiciones de energía entre niveles de los electrones el
cual hace que sea más complejo que los espectros atómicos
3. Defina los siguientes términos: Espectro de absorción molecular, absorbancia,
transmitancia, coeficiente de extinción molar, cromóforo, auxocromo, transición
electrónica, orbital molecular enlazante
Espectro de absorción molecular : Es la medición de la absorción de radiación UV o visible
por determinadas moléculas, está en función de la frecuencia o de la longitud de onda La
radiación correspondiente a estas regiones del espectro electromagnético provoca
transiciones electrónicas a longitudes de ondas características de la estructura molecular
de un compuesto.
Absorbancia: es la cantidad de luz absorbida por una solución de concentración C, La
absorbancia se define como el logaritmo negativo de la transmitancia, y se observa que la
absorbancia y la transmitancia tienen una relación inversa

Transmitancia: se define como la fracción de luz o de radiación independiente que no es

absorbida por una solución, la relación de la cantidad de luz transmitida a la cantidad de luz
que cayó inicialmente en la superficie.

Coeficiente de extinción molar Es la cantidad de luz que absorbe una sustancia por mol
depende de la longitud de onda y del solvente
Cromóforos: Es la parte de una molécula orgánica responsable de su color. Esa parte de la
molécula puede ser un átomo o un grupo de átomos dentro de la molécula y por eso
también es frecuente de hablar de grupos cromóforos.
En química, el concepto de cromóforo es más amplio y se refiere a la parte de una molécula que es
responsable de la absorción de radiación electromagnética mediante transición electrónica
extendiéndose tanto a la luz visible como a radiación ultravioleta y a radiación infrarroja que no
son visibles por el ojo humano. En otras palabras, el cromóforo es la parte de la molécula en la
cual se produce la transición electrónica responsable de una determinada banda del espectro de
absorción de una sustancia.

El color percibido por el ojo humano es aquel correspondiente con las longitudes de onda
no absorbidas por un objeto al ser iluminado, es decir, el color se debe a la radiación
electromagnética reflejada o transmitida. El cromóforo es, en este contexto, la parte de la
molécula responsable de la absorción de longitudes de onda dentro del rango visible, lo
que determinará las longitudes de onda reflejadas y así el color del objeto.
Por ejemplo, si un objeto opaco se ve de color verde es porque refleja las longitudes de
onda del color verde y absorbe las demás. Esto es lo que ocurre en la clorofila, la cual
presenta un patrón de absorción mínimo en las longitudes de onda del verde y máximo en
la región del azul y el rojo
Auxocromo: Son grupos positivos de átomos, que intensifican la acción de un grupo de
átomos no saturados que, estando presentes en una molécula de una sustancia química,
hacen que esta sea coloreada. Es decir, son grupos cargados positivamente que
intensifican una sustancia o cromóforo en la síntesis de colorantes.
Los sustituyentes típicos son los grupos: metilo, hidroxilo, alcoxilo, amino y halógenos.
Transición electrónica: es el cambio en el estado cuántico de un electrón, es decir se produce
una transición electrónica cuando se produce un cambio en alguno de los cuatro números
cuánticos que definen a un electrón.

Orbital molecular enlazante: es aquel orbital molecular caracterizado porque hay una
densidad electrónica importante entre los núcleos atómicos, esto es, no hay nodos
perpendiculares al eje Inter nuclear.

4. Explique en qué consisten los siguientes procesos de interacción de la radiación

electromagnética con la materia: - Emisión - Absorción - Luminiscencia
(fosforescencia, fluorescencia y quimioluminiscencia)
Emisión: cuando los átomos, iones, moléculas se relajan a niveles de menor contenido
energético, cediendo el exceso de energía en forma de fotones. El tiempo de vida de un
átomo excitado es breve, y su vuelta al estado fundamental va acompañada de la emisión
de un fotón de radiación.
Absorción: La absorción es la radiación que se debe a que los electrones de las moléculas
pasan a un estado electrónico superior por la acción de un "quanto" de radiación. En
moléculas con varios dobles enlaces conjugados las diferencias entre niveles de energía se
acortan, y la energía correspondiente a la luz visible es suficiente para promover
transiciones electrónicas permitidas entre orbitales
Luminiscencia: es todo proceso de emisión de luz cuyo origen no radica exclusivamente
en las altas temperaturas, sino que, por el contrario, es una forma de "luz fría" en la que la
emisión de radiación lumínica es provocada en condiciones de temperatura ambiente o
baja.
Fosforescencia: Es una luminiscencia que perdura una vez cortada la excitación. Se
considera fosforescencia si τ > 0,00000001 segundos (10-8 segundos).
Fluorescencia: Se restringe a la luminiscencia causada por rayos ultravioleta y se
caracteriza por tener un tiempo característico τ < 0,00000001 segundos (10-8 segundos).
La quimioluminiscencia: es un fenómeno que acompaña a algunas reacciones químicas y
bioquímicas que sucede porque un electrón que estaba en un nivel superior baja a un
nivel inferior; al bajar necesita menos energía para poder dar una vuelta alrededor del
núcleo por lo que libera la energía sobrante en forma de fotones que al ser libres
producen luz.
5. Sí, la transmitancia de una solución de una muestra que contiene especies
absorbentes es de 0,24, en un espectrómetro cuyas celdas tienen un camino
óptico (b) de 5 cm, determine el % de transmisión de la misma solución en celdas
con las siguientes longitudes de camino óptico: a) 1,00 cm b) 10,00 cm c) 1,00 nm
6. A partir de un diagrama de bloques, esquematice los componentes necesarios
para un instrumento utilizado para la región UV y en la Visible

7. Especifique las funciones de un selector de longitud de onda y un detector como

componentes de un instrumento de espectroscopia.
 Selector de longitud: Una porción de la radiación emitida por la fuente es colectada y
dirigida al selector de longitud o a la muestra con algunos lentes o espejos. En
instrumentos con un solo detector, el selector de longitud es normalmente puesto
antes del compartimento en donde se encuentra la muestra para minimizar el
calentamiento o foto descomposición de la muestra por radiación a longitudes no
monitoreadas. Si este efecto no es significante, el selector de longitud puede ser
pasado después de la celda del compartimento de la muestra. Con
espectrofotómetros multicanales, el detector multicanal debe ser colocado en el plano
focal del espectrógrafo; la celda con la muestra tiene que ser puesta antes que el
selector de longitud e iluminado con radiación blanca. Los fotómetros emplean la
interferencia con filtros para seleccionar la longitud deseada, únicamente se necesita
tener los filtros correspondientes.
Detector: Recibe la señal de radiación electromagnética y la convierte en una señal
eléctrica de magnitud proporcional a la intensidad de la radiación recibida.
8. La adenina es una de las cinco bases nitrogenadas que forman parte de los ácidos
nucleicos (ADN y ARN) y tiene una absortividad molar de 13.100 L/cm*mol, a una
longitud de onda de 263 nm. Calcule la concentración molar de una solución de
adenina, que presenta un porcentaje de transmitancia del 75% cuando 2 mL de la
solución, son colocados en una celda de 1 cm.
9. Define las diferentes transiciones electrónicas
usadas en espectroscopia UV- visible
 Transiciones σ—>σ*: Estas transiciones entre
orbitales molecular sigma enlazantes y
antienlazantes implican energías relativamente
grandes, de forma que las bandas de absorción se
observan en el ultravioleta lejano, a longitudes de
onda inferiores a 200 nm.
1) Transiciones б б * λ < 185 nm
Absorben compuestos saturados: C H, C C
UV vacío. Condiciones de trabajo difíciles.
 Transiciones n—>σ*: Las especies químicas
saturadas que contengan átomos con pares
electrónicos en orbitales no enlazante pueden dar
lugar a que se produzcan transiciones n—>σ*.
2) Transiciones nб * λ 150 200 nm
Heteroátomos con pares de e
Limitadas aplicaciones.
Absortividades molares: 100 300 M 1cm 1.
 Transiciones n—>π* y π—>π*: Muchos grupos químicos contienen electrones en
orbitales π y no enlazantes.
3) Transiciones nπ * y π π * λ 200 700 nm
Región más utilizada.
Requiere grupos que aportan π * : cromóforos.
Compuestos insaturados
Las Transiciones π—>π*: requieren la absorción de una cantidad de energía relativamente
grande, por lo que suelen aparecer en el ultravioleta lejano, mientras que las n—>π*
necesitan menor cantidad de energía, como consecuencia de lo cual se originan bandas en
las zonas ultravioleta próximo y visible.
10. Menciona los parámetros que deben de cumplirse para que se pueda aplicar la ley
de Beer
1.-Las probabilidades que hay de que el fotón de esa amplitud particular de onda pueda
absorberse por el material. La absorción debe ser independiente entre varias especies.
2.-La luz que incide sobre la especie sea monocromática.
3.-La absorción debe ocurrir dentro de un volumen de sección transversal uniforme
11. ¿Qué son y cuáles son las desviaciones de la Ley de Beer?
Las desviaciones de Lambert beer son instrumental, química y reales
Las reales dice que la concentración debe de ser 10^-3 o menor en tanto cuando hay
mayores de 10^-3 el índice de refracción cambia y varia el proceso también
Las instrumentales se debe a efectos del monocromador que su función es separar la
longitud de onda de interés
Químicas: Se debe cuando por efecto del pH de una dilusión por asociación, disociación o
interacción con el analito cambia el solvente cambia el analito
12. Se pueden determinar las concentraciones de una mezcla de Fe+3 y Cu +2
formando el complejo con hexacianorutenato (II) , Ru(CN)6 -4 , que forma un
complejo de color azul- violáceo con el Fe+3 ( λmax = 550 nm) y un complejo gris
pálido con el Cobre (λmax = 396 nm)
 Cuando una muestra que contiene Fe+3 y Cu+2 se analiza en una cubeta de 1 cm
de paso óptico la absorbancia a 550 nm fue de 0,183 y la absorbancia a 396 nm
fue de 0,109. ¿Cuál es la concentración molar de Fe +3 y Cu+2 en la muestra?

13. Explica ¿Por qué algunas sustancias se ven coloreadas y otras se ven blancas?
Todas las sustancias coloreadas tienen un sistema de enlaces pis conjugados. La sustancia
representa el color que absorbe. Sustancias blancas: no absorben luz visible.
Las sustancias no coloradas: sus mediciones están en la región ultravioleta del espectro
entre los 200 a 380 nm. Si la banda de absorción es aguda el color es brillante, mientras
que una banda ancha y difusa da lugar a un color opaco
14. Completa la siguiente tabla
Å nm μm cm Hz cm-1

5890 589 .589 5.89x10^-5 5.0933x10^-15 16977.9286

4400 440 0.44 4.4x10^-5 6.8181x10^14 22727.27273
65400 6540 6.54 0.000654 4.5871x10^-13 1529.051988
3 3 0.0003 3x10-8 1x10^-18 3x10^-8

400,000,000 40,000,000 40,000 4 7.50x10^9 0.25

20000 2000 2 2x10^-4 1.5x10^14 5.00x10^3
15. ¿Cuál es la concentración de una solución de NADH (coeficiente de absorción
molar a 340 nm igual a 6220 M-1 cm-1), 1 mL de la cual tiene una absorbancia de
0,16 en una cubeta de 1 cm de paso óptico?

16. Una solución de NADH tiene una absorbancia a 340 nm de 1,24. ¿Cuántos mL de
esta solución se deberán tomar para preparar 10 ml de una solución 1 M?

17. ¿Cuántos μmoles de NADH hay en 10 mL de una solución que tiene una
absorbancia de 0,31 a 340 nm?
 18. La citosina posee un coeficiente de absorción molar de 6 103 M-1 cm-1 a 270 nm a
pH 7. Calcule la absorbancia y el porcentaje de transmitancia de soluciones 10 nM
y 1 mM en cubetas de 1 cm y 1 mm

19. Explica que es un colorante

Se llama colorante a la sustancia capaz de absorber determinadas longitudes, son
sustancias que se fijan en otras sustancias y las dotan de color de manera estable ante
factores físicos o químicos como la luz y agentes oxidantes. Un colorante se aplica en
disolución o emulsión y el sustrato debe tener cierta afinidad para absorberlo.
20. Explicar la diferencia entre a y ε
Absortividad molar (E): es la absortividad definida en términos de concentraciones
expresadas en moles por litro. Antes conocida como coeficiente molar de extinción.
La absortividad específica (a): es la absortividad definida en términos de concentraciones
expresadas en gramos por litro. Antes conocida como coeficiente másico de extinción.
21. REALIZAR UN GLOSARIO CON LOS SIGUIENTES TÉRMINOS:
ABSORCIÓN: es un término que se vincula a absorber. Este verbo puede hacer referencia
a distintas cuestiones: al amortiguamiento ejercido por un cuerpo ante una radiación que
lo traspasa
REM: Es energía que viaja a través del espacio en una velocidad constante puede adoptar
muchas formas ya sea visible para el ojo humano o no visibles.
ELECTRONES DE VALENCIA: Son los electrones que se encuentran en la última capa
electrónica (denominada orbitales de valencia) y tienen muchas posibilidades de
participar en una reacción química. Estos electrones poseen el número cuántico principal
n más alto. Tienen vital importancia en la formación de moléculas y compuestos ya que
determinan la capacidad del átomo para formar enlaces. Cuando un elemento se une a
otro lo hace a través de sus electrones de valencia.
ENLACE COVALENTE: Un enlace covalente es una fuerza que une a dos átomos de
elementos no metálicos para formar una molécula. Lo fundamental en esa unión es el
hecho de que los átomos comparten pares de electrones de su capa más superficial
(llamada capa de valencia) para lograr la estabilidad de la molécula que se ha formado con
el enlace.
ENLACE SIGMA: El enlace sigma (representado como σ) es una unión de tipo covalente, el
cual se caracteriza por la compartición de dos electrones que se da entre un par de
átomos para formar dicho vínculo. Además, esta es una clase de enlace simple, en el que
ambos átomos se encuentran adheridos mediante dos electrones formando una única
unión.
ENLACE PI: Un enlace pi (π) es un tipo de enlace covalente caracterizado por impedir el
movimiento de rotación libre de los átomos y por originarse entre un par de orbitales
atómicos de tipo puro, entre otras peculiaridades. Hay enlaces que pueden formarse entre
átomos por sus electrones, que les permiten armar estructuras más grandes y complejas:
moléculas.
TRANSICIÓN ELECTRÓNICA: Llamada en forma menos precisa salto cuántico, es el cambio
en el estado cuántico de un electrón, es decir se produce una transición electrónica
cuando se produce un cambio en alguno de los cuatro números cuánticos que definen a
un electrón.
Las transiciones electrónicas pueden producirse entre los diferentes niveles electrónicos
de un átomo, en cuyo caso se denomina transición electrónica atómica; o entre diferentes
niveles electrónicos de una molécula. En este último caso se denomina transición
electrónica molecular.
CROMÓFORO: Es la parte de una molécula orgánica responsable de su color. Esa parte de
la molécula puede ser un átomo o un grupo de átomos dentro de la molécula y por eso
también es frecuente de hablar de grupos cromóforos.
EFECTO BATOCRÓMICO: fenómeno que se verifica cuando la longitud de onda de
absorción de una sustancia se desplaza hacia longitudes de onda más grandes o de menor
energía por efecto del solvente o por sustituyentes; también se conoce como corrimiento
hacia el rojo.
EFECTO HIPERCRÓMICO: El incremento en la intensidad de la absorción es decir un
aumento en la magnitud del coeficiente de absortividad molar para una longitud de onda
dada, por efecto del solvente o de sustituyentes.
CROMÓFOROS CONJUGADOS: En los cromóforos conjugados, los electrones saltan entre
niveles de energía que son orbitales pi extendidos, creados por una serie de enlaces
simples y dobles alternados, a menudo en sistemas aromáticos. Los ejemplos comunes
incluyen la retina (utilizada en el ojo para detectar la luz), diversos colorantes
alimentarios, tintes para telas (compuestos azoicos), indicadores de pH, licopeno, β-
caroteno y antocianinas. Varios factores en la estructura de un cromóforo van a
determinar a qué región de longitud de onda en un espectro absorberá el cromóforo.
Alargar o extender un sistema conjugado con más enlaces insaturados (múltiples) en una
molécula tenderá a desplazar la absorción a longitudes de onda más largas. Las reglas de
Woodward-Fieser se pueden usar para aproximar la longitud de onda de absorción
máxima ultravioleta-visible en compuestos orgánicos con sistemas de enlaces pi
conjugados.
LEY DE LAMBERT: Establece que la absorbancia está directamente relacionada con las
propiedades intrínsecas del analito, con su concentración y con la longitud de la
trayectoria del haz de radiación al atravesar la muestra
SISTEMA MULTICOMPONENTE: Es la suma de Componente I y Componente II y son de
tipo aditivos ( absorbancia) en el cual podemos conocer su concentración de cada uno de
los componentes en la mezcla y para que sea cuantificado cada una presenta un máximo
de absorción a diferente longitudes de ondas.
ABSORTIVIDAD MOLAR: Es la cantidad de luz que absorbe una sustancia por mol y que
depende de la longitud de onda y del solvente.
TRANSMITANCIA: tenemos transmitancia que se define como la fracción de luz o de
radiación independiente que no es absorbida por una solución
La fórmula es T= i/ i0 o bien T= 10 ^A
REFERENCIAS

A partir de un diagrama de bloques, esquematice los componentes necesarios

para un instrumento utilizado para la región UV y en la Visible - Google

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