DEPARTAMENTO DE QUÍMICA
FUNDAMENTO DE INGENIERIA AMBIENTAL I
GUÍA DE LABORATORIO 4
Código Fecha de revisión Número de revisión Páginas
CO199 16/03/2018 02 06
DETERMINACIÓN DE NITRATOS EN UNA MUESTRA DE AGUA POTABILIZADA
4.1 INTRODUCCIÓN
El nitrógeno atmosférico se deposita como nitrógeno inorgánico disuelto (NID) en la forma
de nitratos y amonio, y el nitrógeno orgánico disuelto (NOD) (Leng, 2006).
El nitrógeno se encuentra de diversas formas en sedimentos y agua, incluyendo su
presencia en forma de inorgánico, orgánico, disuelto y particulado (Mulligan et al., 2010).
Las concentraciones de nitrógeno en el agua natural son muy bajas, y por ello es un factor
limitante en el crecimiento de plantas acuáticas. Por ello, el nitrógeno es usualmente
considerado como responsable de la eutrofización de los cuerpos de agua (Chin, 2006).
Las formas combinadas del nitrógeno se ilustran en la Figura 1.
Residuos
Particulado
Nitrógeno Orgánico Disuelto Fitoplancton
Nitrógeno Nitrógeno Nitrógeno Inorgánico
Total Amoniacal
Nitratos y Nitritos
Figura 1. Formas combinadas del nitrógeno total.
Fuente: Chin, 2006.
El nitrógeno total disuelto consiste en la sumatoria del nitrógeno inorgánico y orgánico
disuelto.
Nitrógeno Orgánico Disuelto
Las sustancias húmicas y fúlvicas, urea, compuestos de aminoácidos disueltos,
aminoácidos libres disueltos, polipéptidos, pirimidinas, metilaminas, pteridinas, purinas,
amino azucares, y creatina contribuyen a crear nitrógeno orgánico disuelto (NOD). La
reacción entre aminoácidos y el cloro origina la formación de aminoácidos clorados:
1
R-NH2-COOH + HOCl ↔ RNHCl-COOH + H2O (1)
La reacción de los compuestos orgánicos nitrogenados es más compleja que la de los
aminoácidos, en orden decreciente de tamaño molecular y complejidad: proteínas,
proteosas, peptonas, polipéptidos, dipéptidos y alfa-aminoácidos. La molécula de cloro
(HOCl) reacciona con los grupos amino del nitrógeno orgánico, la mayoría de estas
reacciones son lentas (Wang et al., 2005).
La concentración de nitrógeno orgánico en los sistemas acuáticos varía en dependencia
de su estado trófico y de los influentes. Las aguas de ríos y estuarios tienen un contenido
de NOD usualmente en el rango de 5-60 μmol N/L, aunque se han encontrado
concentraciones de hasta 150 μmol N/L (Nollet, 2007).
Nitrógeno Inorgánico Disuelto
El nitrógeno inorgánico disuelto (NID) se encuentra como nitratos (NO3-), nitritos (NO2-) y
amonio (NH4+) (Mulligan et al., 2010).
Amonio/Amoníaco
El amoníaco puede existir en el agua como molécula o como el ion amonio. La reacción de
hidrólisis para el ion es:
NH4+ + H2O ↔ NH3 + H+ (2)
El ion amonio predomina a valores de pH comunes en el agua. El cloro reacciona con el
ion amonio o con el amoniaco paulatinamente; las reacciones entre moléculas son las
siguientes (Wang et al., 2005):
Monocloramina
NH3 + HOCl ↔ NH2Cl + H2O (3)
Dicloramina
NH2Cl + HOCl ↔ NHCl2 + H2O (4)
Tricloramina
NHCl2 + HOCl ↔ NCl3 + H2O (5)
Sin embargo la reacción del cloro con el amonio/ amoniaco también se da entre iones y
entre moléculas-iones, como se presenta a continuación:
NH4+ + OCl- ↔ NH2Cl + H2O (6)
2
NH3 + OCl- ↔ NH2Cl + OH- (7)
NH4+ + HOCl ↔ NH2Cl + H+ (8)
La distribución entre las monocloraminas y dicloraminas se presenta en la siguiente
reacción:
2 NH2Cl + H+ ↔ NH4 + NHCl2 (9)
Nitratos (NO3-)
La definición más generalizada de nitratos expresa: “El nitrato es la principal forma de
nitrógeno combinado que se encuentra en aguas naturales por ser resultado de la
oxidación completa de compuestos nitrogenados” (OPS/CEPIS/PUB, 2004). Las unidades
para este parámetro se dan en mg/L, la mayoría de las aguas superficiales tienen menos
de 0,3 mg/L de nitratos. En general, los nitratos son muy solubles en agua debido a la
polaridad del ion. En los sistemas acuáticos y terrestres, los materiales nitrogenados
tienden a transformarse en nitratos.
Nitritos (NO2-)
Se puede definir el término nitrito como una medida de una forma de nitrógeno que se
produce como producto intermedio en el ciclo del nitrógeno. Es una forma inestable que se
oxida rápidamente a nitrato (nitrificación) o se reduce a gas nitrógeno (desnitrificación).
Esta forma de nitrógeno también se puede utilizar como una fuente de nutrientes para las
plantas. Se presenta en aguas superficiales en niveles menores a 0,001 mg/L
(OPS/CEPIS/PUB, 2004).
Los nitritos son solubles en agua. Se transforman naturalmente a partir de los nitratos, ya
sea por oxidación bacteriana incompleta del nitrógeno en los sistemas acuáticos y
terrestres o por reducción bacteriana (OPS/CEPIS/PUB, 2004). La reacción del ion nitrito
con el cloro libre es:
NO2- + HOCl ↔ NO3- + H+ + Cl- (10)
Después de la absorción, tanto nitratos como nitritos se distribuyen con rapidez a todos los
tejidos. Una vez en la sangre, el nitrito reacciona con el ion ferroso (Fe2+) de la
desoxihemoglobina y forma metahemoglobina, en la cual el hierro se encuentra en estado
férrico (Fe3+), por lo que es incapaz de transportar el oxígeno. Por ello se relaciona al nitrito
con una anomalía en la sangre (OPS/CEPIS/PUB, 2004).
En esta práctica de laboratorio realizaremos la determinación del nitrato (NO3-) que es la
forma más abundante de nitrógeno en las aguas, su determinación puede ser compleja,
debido a:
La alta probabilidad de que se hallen sustancias interferentes
3
Los rangos limitados de concentración de las diferentes técnicas
Los procedimientos relativamente complejos que se precisan
Existen básicamente tres métodos para analizar nitratos:
Método espectrométrico ultravioleta selectivo
Método del electrodo de nitrato
Método cromatográfico de iones
El primer método es con el que trabajaremos y solamente se utiliza para seleccionar
muestras con bajo contenido en materia orgánica (aguas naturales incontaminadas y
suministros de agua potable).
Las medidas de absorbancia UV a 220 nm permiten la determinación de nitratos que son
absorbentes a esta longitud de onda. Debido a que las materias orgánicas también pueden
absorber a esta longitud de onda se debe de hacer una segunda lectura a 275 nm para
obtener la medida relativa sólo a nitratos.
4.2 OBJETIVO
Determinar las concentraciones de nitratos en una muestra de agua para saber si
cumple con las normas de calidad para agua de consumo humano.
4.3 RECURSOS: MATERIALES, EQUIPOS Y REACTIVOS
Materiales Equipos Reactivos
2 Matraces de 1 000 mL Espectrofotómetro 0,7218 g de KNO3
1 Matraz de 100 mL HACH Uv-Vis, DR 2 mL de CH3Cl
7 Matraces de 50 mL 5000 8,3 mL de HCl
1 Probeta graduada de 100 mL Balanza analítica concentrado
1 Pipeta volumétrica de 20 mL Horno Agua desionizada
1 Pipeta volumétrica de 10 mL
1 Pipeta volumétrica de 5 mL
1 Pipeta volumétrica de 2 mL
1 Pipeta volumétrica de 1 mL
1 Pipeta seriada de 10 mL
1 Pesa sustancia
1 Espátula
1 Pera de succión
2 Celdas de cuarzo de1 cm de
paso Uv-Vis
1 Desecador
1 Pizeta
Papel toalla
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4.4 METODOLOGÍA
Preparación de Reactivos
Solución madre de nitrato: para la cual se deberá secar nitrato potásico KNO3 en
un horno a 105ºC por 24 horas, pesar 0,7218 gramos en una balanza analítica y
diluir a 1 000 mL (1 mL = 100 µg N-NO3-). Preservar con 2 mL/L de CH3Cl. Esta
solucion es estable por seis meses.
Solución intermedia de nitratos: diluir 100 mL de solución madre de nitrato a 1 000
mL con agua desionizada (1,00 mL= 10,0 µg N-NO3-). Preservar con 2 mL/L de
CH3Cl. Esta solucion es estable por seis meses.
Solución de ácido clorhídrico HCl 1 N: tomar 8,3 mL del HCl concentrado y diluir a
100 mL
Curva de Patrones, Tratamiento y Determinación de Muestra
Tratamiento de la muestra: sobre 50 mL de muestra transparente, filtrada si fuera
preciso, añadir 1 mL de solución de HCl y homogenizar.
Preparación de la curva de patrones: se han de preparar estándares de calibrado
de nitrato en el rango de 0 a 7 mL N-NO3- /L por dilución a 50 mL de los siguiente
volúmenes de solución intermedia de nitrato (0,0, 7,5, 15,0, 22,5, 30,0 35,0). Se han
de tratar los patrones de NO3- del mismo modo que las muestras.
Volumen de Solución Intermedia Concentración Correspondiente de
de Nitratos (mL) N-NO3- (mg/L)
0,0 0,0
7,5 1,5
15,0 3,0
22,5 4,5
30,0 6,0
35,0 7,0
Ejemplo:
7,5 mL (10,0 µg N-NO3-) = 75,0 µg N-NO3- (1 000 mL) (1 mg) = 1,5 mg/L N-NO3-
1 mL 50 mL 1L 1 000 µg
Medida espectrofotométrica: leer la absorbancia frente al agua desionizada, con la
que previamente se ha ajustado la absorbancia a cero. Para esta determinación se
utilizará la longitud de onda de 220 nm para obtener la lectura de NO 3- y 275 nm
para determinar la interferencia.
Expresión de resultados: para muestras y patrones se debe de restar dos veces la
absorbancia leída a 275 nm de la lectura a 220 nm para obtener la absorbancia
debida a los NO3- y construir la curva de calibrado de la cual se obtiene la
5
concentración de la muestra. Detergentes, nitritos y Cr6+ pueden provocar
distorsiones en las medidas.
1.6
1.4 y = 0.2368x
R² = 0.9938
1.2
Absorbancia 1
0.8
Series1
0.6
0.4 Lineal (Series1)
0.2
0
0 2 4 6 8
Concentración (mg/L N-NO3-)
4.5 CUESTIONARIO
Para reforzar sus conocimientos conteste las siguientes preguntas, las cuales deben ser
referenciadas usando las normas APA.
Porqué en el método que se utilizó para la determinación de nitratos, las muestras
y los estándares de la curva debían de leerse en la región ultravioleta.
Porqué se hace necesario leer las muestras y los estándares de la curva a dos
longitudes de onda diferente
Porqué se le adiciona HCl 1 N a las muestras y estándares?
Cuál es la afectación en la salud humana debido a la presencia de nitratos?
Cuál es el valor limite de los nitratos en agua de consumo humano?
Como se convierte de N-NO3- a NO3-?
4.6 BIBLIOGRAFÍA
Chin, D. (2006). Water quality engineering in natural systems. Editorial Wiley Interscience
John Wiley & Sons, Inc. p. 201-202.
Leng, M. (2006). Isotopes in paleoenviromental research. Vol. 10. Editorial Springer. p. 169.
Mulligan, C., Fukue, M., y Sato, Y. (2010). Sediments contamination and sustainable
remediation. Editorial IWA Publishing. p. 84.
Nollet, L. (2007). Handbook of water analysis. Editorial CRC PRESS Taylor & Francis
Group. 2nd Edition. p. 368.
OPS/CEPIS/PUB. (2004). Tratamiento de agua para consumo humano. Plantas de
filtración rápida. Manual I: Teoría. Tomo I. Editorial Centro Panamericano de
Ingeniería Sanitaria y Ciencias del Ambiente CEPIS/OPS. Lima, Perú. Cap. 1 y 3.
p. 4-53; 105-147.
Wang, L., Hung, Y., y Shammas, N. (2005). Physicochemical treatment processes. Vol. 3.
Editorial Humana Press. p. 275-277.
