UNIVERSIDAD NACIONAL JORGE BASADRE DE
GROHOMANN
DIGESTIÓN DEL ALMIDÓN
Práctica N° 07
FACULTAD:
CIENCIAS AGROPECUARIAS
ESCUELA:
INGENIERÍA EN INDUSTRIAS ALIMENTARIAS
CURSO:
BIOQUÍMICA
DOCENTE:
BLGA. TERESA LANCHIPA ALE
ALUMNA:
BRISA LOURDES VILLALOVOS TAPIA
CÓDIGO:
2019-111060
TACNA- PERÚ
2021
UNIVERSIDAD NACIONAL JORGE BASADRE DE GROHOMANN – FACULTAD
DE CIENCIAS AGROPECUARIAS – ESCUELA PROFESIONAL INGENIERÍA EN
INDUSTRIAS ALIMENTARIAS
I. INTRODUCCIÓN
Para el proceso de digestión, las biomoléculas ingeridas en la dieta deben ser degradadas
a sus componentes más sencillos para ser absorbidos en el tubo digestivo y así llegar al
lugar correspondiente a nivel celular donde participarán en diversos procesos metabólicos
indispensables para el mantenimiento homeostático del organismo. La digestión de los
carbohidratos comienza en la boca, se mezclan con la amilasa salival que degrada los
enlaces principalmente del almidón liberándose glucosa, maltosa y dextrinas (porciones
más pequeñas del almidón) que poseen todos los enlaces. La acción de las enzimas por
sus características fisicoquímicas puede afectarse por las condiciones presentes en el
lugar de acción de estas. Estas condiciones son el pH y temperatura. La amilasa puede
dividirse en Alfa-amilasa, Beta-amilasa y Delta-amilasa, todas ellas actúan en diferentes
niveles del tracto digestivo.
La Alfa-amilasa es dependiente de cloruro, actúa en cualquier punto de la cadena del
almidón, descomponiendo la estructura en dextrinas a partir de amilopectinas, es más
rápida que la Beta-amilasa. En animales es una enzima mayor y su pH optimo esta entre
5,7 y 7,2.
La beta-amilasa es también sintetizada por bacterias, hongos y plantas. Actúa desde el
extremo no reductor de la cadena, catalizando la hidrólisis del segundo enlace alfa-1,4,
rompiendo la maltosa en dos unidades de glucosa a la vez. Durante el proceso de
maduración de la fruta, la Beta-amilasa rompe el almidón directamente en azúcar dando
lugar al sabor dulce de la fruta. La amilasa presente en el grano del cereal es la responsable
de la producción de malta. Muchos microorganismos producen amilasa para degradar el
almidón extracecular. Los tejidos animales no contienen beta-amilasa, aunque algunos
microorganismos saprofitos pueden estar presentes en el tracto gastrointestinal. Tiene un
pH óptimo de 4-5.
La Delta-amilasa además de romper el último enlace glucosidico alfa-1,4 en el extremo
no reductor de la cadena de la amilosa y amilopectina liberando glucosa, también puede
romper el enlace alfa-1,6. A diferencia de las otras amilasas esta es más eficaz en medios
ácidos y su pH optimo es de 3.
II. OBJETIVOS
Demostrar la hidrólisis del almidón por acción de la amilasa salival.
Demostrar la influencia del pH y temperatura en la actividad enzimática.
III. MATERIAL Y MÉTODOS
[Link]
3.1.1. Materiales biológicos
Amilasa salival
3.1.2. Materiales de vidrio
Tubos de ensayo
Pipetas
Vaso de precipitación
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Cubetas de espectrofotómetro
3.1.3. Reactivos
Almidón 1%
NaCl 0,9%
HCl 0,3N
HCl 0,05N
Buffer fosfato pH 6,8
Lugol
Reactivo de Benedict
Agua destilada
3.1.4. Equipos y otros
[Link]
Mediante la observación y exploración se aplicará el método de espectrofotometría y
reacciones químicas para evaluar la digestión del almidón por acción de la amilasa
salival.
IV. PROCEDIMIENTO
[Link]ón del almidón por acción de la amilasa salival
En 4 tubos de ensayo agregar lo siguiente:
1 2 3 4
Almidos 1% 2ml 2ml 2ml 2ml
Buffer fosfato ph 6,8 1ml 1ml 1ml
HCI 0,3N 3,4ml
NaCI 0,9% 3ml 2,4ml
Agua destilada 2,4ml
Amilasa salival 0,6ml 0,6ml 0,6ml
Incubar a baño maria a 37°C por 5minutos
[Link]ón del sustrato
En otros 4 tubos de ensayo agregar lo siguiente:
1s 2s 3s 4s
Sol. digerida del tubo 1 0,5ml
Sol. digerida del tubo 2 0,5ml
Sol. digerida del tubo 3 0,5ml
Sol. digerida del tubo 4 0,5ml
HCI 0,05N 5ml 5ml 5ml 5ml
Lugol 0,5ml 0,5ml 0,5ml 0,5ml
Dejar en reposo por 15 minutos. Luego proceder a leer la absorbancia en el
espectrofotómetro a 660nm de longitud de onda. Como Blanco agua destilada.
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[Link]ón del producto
En otros 4 tubos de ensayo agregar lo siguiente:
1p 2p 3p 4p
Sol. digerida del tubo 1 0,5ml
Sol. digerida del tubo 2 0,5ml
Sol. digerida del tubo 3 0,5ml
Sol. digerida del tubo 4 0,5ml
Reactivo de Benedict 2ml 2ml 2ml 2ml
Incubar en baño María a 100°C por 5 minutos y enfriar en agua helada.
V. RESULTADOS
Esquematizar el procedimiento de los experimentos, según como corresponda.
[Link] 1 Digestión del almidón por acción de la amilasa salival
Adicionar en cuatro
tubos de ensayo
amilasa salival 0,6 ml
Adicionar en cuatro
tubos de ensayo 2ml
de almidón
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Experimento 2. Determinación del sustrato
Dejar en reposo por 15
minutos. Luego proceder a
leer la absorbancia en el
espectrofotómetro a 660nm
de longitud de onda. Como
Blanco agua destilada.
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Experimento 3 Determinación del producto
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En el experimento 4.2. Con las lecturas de absorbancia determinar la actividad
enzimática de cada sistema y luego hacer un gráfico con esos valores.
Figura 1
Absorbancia vs. Sistema
1.2 1.125
1 0.987
0.8
Absorbancia
0.6
0.4
0.261
0.2
0.016
0
1 2 3 4
Sistema
Fuente: elaboración propia
Interpretar los resultados de cada experimento.
Determinación de sustrato
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En el tubo 1 se observó que no hay digestión porque no esta presenta la amilasa,
también se observó que hay presencia de almidón ya que se coloreó en azul
violeta.
En el tubo 2 se observó que si hay digestión ya que no actúa el almidón por lo
tanto la reacción será negativa.
En el tubo 3 se observó hay una degradación parcial llamado eritocina.
En el tubo 4 se observó que no hay digestión por eso la reacción es positiva
además de observó que la enzima no cumple su función ya no tiene un ph óptimo.
Determinación de producto
En el tubo 1 se observó que no hay producto por la presencia de almidón ya que
no ocurre el cambio de coloración.
En el tubo 2 se observó que si hay producto porque si hay amilasa salival por
eso se observa un cambio de coloración y la reacción sería positiva.
En el tubo 3 se observa que si hay producto ya que se porque se observa la
presencia de azucares reductores
En el tubo 4 se observa que no ay producto ya que se observa la presencia de
acido clorhídrico por lo tanto la reacciones es positiva.
VI. CONCLUSIONES
En conclusión se logro demostrar la hidrólisis del almidón por acción de la amilasa
salival.
También se logro demostrar la influencia del pH y temperatura en la actividad
enzimática ya que si es a una temperatura apropiada o ph adecuado podría alterar la
actividad enzimática.
VII. CUESTIONARIO
7.1.¿Explique cuáles son las condiciones óptimas para que el almidón en
solución sea hidrolizado por la amilasa?
Las condiciones óptimas es que el almidón en solución debe tener un Ph 6,8 también
la velocidad de la reacción aumenta si la mezcla de enzima y sustrato se lleva a la
temperatura corporal (37 ° C) en comparación con la temperatura ambiente.
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7.2.¿Cómo actúa el lugol sobre las moléculas de almidón?
El almidón se colorea en azul violeta en presencia de iodo.
7.3.¿Qué carbohidratos son azúcares reductores y por qué?
Los azucares reductores son la glucosa y la maltosa porque Pueden hidrolizarse y ser
reductores cuando el carbono anomérico de alguno de sus componentes no está implicado
en el enlace entre los dos monosacáridos.
[Link] la acción del reactivo de Bénedict.
El reactivo de Benedict detecta la presencia de azúcares reductores que poseen un grupo
funcional libre o un grupo funcional cetona libre, como parte de su estructura molecular.
Este es el caso de glucosa, galactosa, manosa y fructosa (monosacáridos), así como la
lactosa y la maltosa (disacáridos).
7.5.¿Qué otras enzimas degradan a los carbohidratos?
La amilasa descompone a los carbohidratos (almidón) en azúcares simples,
las cuales son más fáciles de absorber. Esta enzima también se encuentra presente en la
saliva.
VIII. BIBLIOGRAFIA
[Link]
n/Pancreatic_enzymes.php#:~:text=Amilasa,encuentra%20presente%20en%20la%20sal
iva.
[Link]
benedict/#:~:text=El%20reactivo%20de%20Benedict%20detecta,y%20la%20maltosa%
20(disac%C3%A1ridos).
[Link]
Gabriel Bolívar. (28 de enero de 2020). Reactivo de Benedict: para qué sirve,
componentes, preparación. Lifeder.
