Colegio de Estudios

14-12-2017
Científicos y Tecnoló gicos
del Estado de Chipas.
PREVALENCIA DE ROTAVIRUS EN EL
MUNICIPIO DE BOCHIL, CHIAPAS.

QUE PARA OBTENENER TITULO Y CEDULA

PROFESIONAL, PRESENTAN A:
LIZBETH JIMENEZ ARGUETA, PERLA BERENICE MORENO HERNANDEZ,
Y YARELI ALEJANDRA CARBALLO HERNANDEZ
PREVALENCIA DE ROTAVIRUS EN EL MUNICIPIO DE BOCHIL,
CHIAPAS.

AÑO 2016

INTRODUCCIÓN

Rotavirus

Morfología y estructura

Los rotavirus son partículas de doble cápside, con apariencia de rueda.

En muestras frescas, la mayoría de las partículas observadas por
microscopía electrónica corresponden a virus con doble cápside cuya
superficie es lisa y bien definida; estas partículas de doble cápside
representan virus completos con capacidad infecciosa. Con frecuencia la
cápside externa se desprende de manera que pueden ser observadas
una gran cantidad de partículas no cubiertas, de superficie rugosa. Al
parecer, estas partículas sin cubierta externa no son capaces de
establecer la infección. También se pueden observar pequeños orificios
en la cápside externa con una separación de 11 nm que al parecer
corresponden a los espacios entre los capsómeros internos. (Gómez L.E.,
1992)

El rotavirus presenta simetría icosaédrica, con un diámetro medio de 75

nm y no poseen envoltura lipídica. Su genoma está formado por 11
segmentos de RNA de doble cadena rodeado por 3 capas proteicas
concéntricas que se denominan cápside interna o core, cápside
intermedia y cápside externa. (Chanock y Kapikian, 2001)

El core o cápside interna está constituida por sesenta dímeros de

proteínas (102 kda) VP1 y VP3 unidas al RNA viral de doble cadena
(Chanock y Kapikian, 2001). La capa intermedia está costituida por 260
unidades de la proteína trimérica VP6 mientras que la capa externa
contiene 2 proteínas VP7 y VP4, (Desselberg y Gray, 2000)

Existen tres tipos de partículas virales con diferentes características

estructurales; la partícula completa, que contiene las 3 capas proteicas,
llamada TLP (Triple-Layered-Particle), la cual es infecciosa ya que la
presencia de la capa externa formada por las proteínas VP4 y VP7 le
permite unirse y penetrar a su célula huésped; la partícula que contiene
dos capas proteicas o DLP (Doble-Layered-Particle); no infecciosa pero
transcripcionalmente activa y las partículas que contienen una sola capa
de proteínas, o nucleocápsides, que tienen la actividad de replicar el
genoma viral. (Estes et al, 2001)

El genoma de los rotavirus está constituido por 11 segmentos de ARN de

doble cadena (ARNdc) cuyos tamaños varían de aproximadamente 3300
pb para el gen más grande. Esta diferencia de tamaños permite que estos
segmentos al ser separados electroforéticamente presenten un patrón
característico, típico u único para los rotavirus, lo que ha sido la base para
desarrollar un método diagnóstico para estos virus. (Macías y Delgado,
2005)
El genoma de rotavirus codifica para proteínas estructurales que se
encuentran en las partículas virales y proteínas no estructurales que se
encuentran en células infectadas pero no en partículas maduras. La
nomenclatura de las proteínas virales designa las proteínas estructurales
como VP seguido por un número; van de VP1 a VP8, siendo VP1 la
proteína de mayor peso molecular. Las proteínas no estructurales se
denominan NSP y van de 1-6.
 Taxonomía y clasificación

El género rotavirus hace parte de la familia viral Reoviridae, el nombre de

"Reoviridae" se deriva de "virus respiratorio entérico huérfano", en donde
el término "virus huérfano" hace referencia al desconocimiento de alguna
enfermedad a la que poder asociar al virus (Carter G.R., 2005). Esta familia
se divide en seis géneros Orthoreovirus, Colitivirus, Orbivirus, Fijivirus,
Cypovirus y Rotavirus. El nombre de rotavirus proviene de la raíz latina
que significa rueda, debida a la apariencia redonda de las partículas
virales al ser visualizadas por tinción negativa en un microscopio
electrónico. Este género está dividido en siete grupos serológicos (A a la
G). Los grupos A, B y C infectan a los humanos y los grupos restantes
infectan especies animales (Ramig, 2004). Hasta ahora, se han
clasificado en 14 serotipos-G con base a la glicoproteína VP7 y en 11
serotipos-P con base a la proteína VP4 (Chanock y Kapikian, 2001).

Replicación viral

El rotavirus inicia su ciclo de infección uniéndose a un receptor localizado

en la superficie celular. Luego de la unión al receptor, el virus penetra al
interior de la célula y pierde la capa externa, con lo cual se activa la
transcripción. La replicación se lleva a cabo en el citoplasma de la célula
hospedera. La partícula completa, que contiene las 3 capas proteicas, es
también llamada TLP; esta es la partícula infecciosa ya que la presencia
de la capa externa formada por las proteínas VP4 y VP7 le permite unirse
y penetrar a su célula huésped; la partícula que contiene 2 capas
proteicas o DLP no es infecciosa, pero es transcripcionalmente activa.
Luego de la unión a un receptor celular ocurren los siguientes pasos en
un transcurso de tiempo de 14 horas aproximadamente:
1.- Adsorción de las proteínas externas del virión VP4 y VP7 a un receptor
celular.
2.- Penetración directa o por endocitosis.
3.- La capa externa es removida como parte del proceso de entrada y
permite activar la transcripción.
4.- Producción de mRNA en el citoplasma por DLPs.
5.- Una vez el mRNA emerge de las DLPs, el RNA de polaridad positiva
es sintetizado por la RNA polimerasa viral.
6.- Simultáneamente el mRNA es usado como molde para la traducción
de 6 proteínas virales estructurales y 5 proteínas no estructurales.
7.- Ensamblaje de la capa que contiene VP1, VP2, VP3 y 11 segmentos
de RNAss, formación de agregados de DLPs en una estructura
electrodensa llamada viroplasma.
8.- Maduración de los DLPs a TLPs:
a) Glicosilación de VP7 en el retículo endoplasmático rugoso (RER),
NSP4 actúa como un receptor intracelular para DLPs.
b) Envoltura transitoria de las partículas en el RER que contienen VP4 y
VP7.
c) Remoción de la envoltura.
9.- Liberación de partículas infecciosas por lisis celular. (Desselberg y
Gray, 2000)

In vivo, el rotavirus presenta un tropismo celular específico; la infección

viral solo se lleva a cabo en los enterocitos diferenciados de las
vellosidades del intestino delgado. In vitro, la infección por rotavirus está
restringida a líneas celulares epiteliales de origen renal como las MA104
de riñón de mono, e intestinal como las células de cáncer de colon, CaCo-
2. (Estes et al, 2001)
Epidemiología

En países de clima templado las infecciones predominan en invierno,

mientras que en los países tropicales los casos suelen ocurrir durante
todo el año, aunque pueden registrarse picos más altos en invierno. Por lo
tanto, un niño que nazca en un país de clima templado, después de la
estación de invierno, no estará expuesto al virus hasta el siguiente año,
en tanto que un niño que nazca en un país tropical estará expuesto al
virus durante todo el año. Es por esto que el promedio de edad de las
infecciones es más bajo en los países de clima tropical, donde los niños
se enferman en su primer año de vida, en comparación con el promedio
de aquellos que viven en países de clima templado, quienes suelen
infectarse entre los dos y tres años de edad.

Casi medio millón de niños que mueren anualmente por infección de

rotavirus se encuentran en países en desarrollo. La tasa de mortalidad es
muy alta en esos países, debido a una combinación de factores como
acceso limitado a servicios de salud (terapia de rehidratación) y un mayor
predominio de la desnutrición. Según Parashar et al, 2003, entre 1986 y
2000 el rotavirus causó anualmente en todo el mundo 111 millones de
episodios de diarrea infantil que requerían sólo cuidados en el hogar, 25
millones de consultas, dos millones de hospitalizaciones y un promedio de
440 mil muertes. Es decir que a los 5 años de edad, casi todos los niños
habían experimentado un episodio de diarrea por rotavirus: uno de cada
cinco niños necesitó una consulta médica; uno de cada 65 de ellos
requirió hospitalizarse y aproximadamente uno de cada 293 murió. Un
estudio más reciente del mismo autor estima que para el período de 2000
a 2004 hubo un incremento de las muertes de niños por rotavirus, que
ascendieron a más de 600 mil a nivel global. (Parashar et al, 2006)
En América Latina se estima que 10 millones de niños sufren esta
enfermedad todos los años, lo que resulta en dos millones de consultas.
De ellos, 75 mil son hospitalizados y 15 mil mueren. En la actualidad, el
agente viral más frecuentemente encontrado en niños menores de 5 años
con gastroenteritis aguda son los rotavirus grupo A, causantes del 25 al
65% de gastroenteritis graves infantiles. El segundo agente encontrado es
Calicivirus (7-22%) y el tercer lugar se lo disputan Astrovirus y
Adenovirus, con un 2-9% respectivamente. (Simpson et al., 2003)

En México se ha notificado que las enfermedades intestinales ocupan el

quinto lugar entre las veinte principales causas de mortalidad en los
menores de cinco años, cuarto lugar en menores de un año y segundo
lugar en los de uno a cuatro años. El 70% de las defunciones
ocasionadas por esta enfermedad se deben a deshidratación. Anualmente
en el país muere 1 de cada 1000 niños menores de cinco años y una de
cada seis defunciones en este grupo es debida a diarrea. El espectro de
la infección por rotavirus presenta límites amplios de la enfermedad desde
una diarrea acuosa con duración limitada hasta una diarrea severa con
vómito, fiebre y deshidratación; la cual puede conducir a la muerte. Los
rotavirus del grupo B y C son morfológicamente idénticos a los del grupo
A, pero genética y antigénicamente diferentes. (UNAM, Facultad de
Medicina, 2004)

Transmisión del rotavirus

La principal ruta de transmisión de los rotavirus es la vía fecal-oral,

aunque también se ha especulado que el contacto persona a persona, el
contacto con secreciones respiratorias, y/o el contacto con superficies
contaminadas pudieran ser fuentes de transmisión, ya que los altos
índices de infección por este virus en los primeros tres años de vida en
todo el mundo son independientes de las condiciones higiénicas y
sanitarias. También se han descrito brotes en guarderías y residencias de
ancianos. (Gaggero, et al. 2000)
La infección es especie-específica (RV-humano); ya que la transmisión de
rotavirus entre el hombre y animales no ha sido documentada, en
investigaciones aleatorias realizadas en epidemias de diarrea por RV que
se presentaron en Australia, EE.UU., Israel, Japón, Tailandia y Brasil
entre 1974 y 1993, caracterizadas por manifestaciones clínicas severas,
en niños menores de 5 años de edad; se encontró que algunas de las
cepas infectantes tuvieron una marcada homología genética mayor del
90% con cepas provenientes de gatos, perros, cerdos, vacas y caballos.

La presencia de rotavirus de animales en estas epidemias presupone que

la transmisión interespecies de este agente puede estar ocurriendo de
manera natural y pudiera estar participando en forma importante en la
evolución de los rotavirus. Sin embargo, a pesar de la alta homología
genética con las cepas aisladas en animales, la transmisión de una
especie a otra no se ha podido comprobar en la naturaleza. (Simpson et
al., 2003)

Inmunidad

Los estudios sobre inmunidad protectora a raíz de la infección por

rotavirus o de las vacunas contra el rotavirus ayudan a los científicos a
comprender la gama completa de respuestas biológicas de la protección
contra la infección. Ruiz-Palacios describió las respuestas inmunitarias
asociadas más estrechamente con la protección contra las infecciones
subsiguientes. Señaló que, de manera contraria a la mayoría de las
infecciones víricas sistémicas como el sarampión, en la cual una infección
única protege plenamente contra la reinfección futura, son necesarios
varios episodios de rotavirus antes de que un niño esté protegido
completamente. Con cada infección adicional por rotavirus disminuye la
gravedad de los síntomas y aumenta la inmunidad.

Una primera infección induce una respuesta inmune local y sistémica al

serotipo causal (inmunidad homotípica) y a un alto porcentaje de otros
serotipos (inmunidad heterotípica). Por eso, después de la primera
infección, 88% de los niños están protegidos contra una infección grave.
Tras la segunda infección, 100% han desarrollado inmunidad contra
infecciones graves y la mayoría de ellos contra cualquier enfermedad por
rotavirus.

En los países en desarrollo, 65% a 80% de los niños tienen anticuerpos

contra el rotavirus a la edad de 12 meses y 95% a la edad de 24 meses.
Por este motivo, la incidencia de la enfermedad sintomática disminuye
rápidamente después de los 24 meses de edad, y las infecciones
repetidas pueden ser asintomáticas o acompañarse de sintomatología
leve. En general, los niños infectados por rotavirus durante los tres
primeros meses de edad son asintomáticos, mientras que los que se
infectan por primera vez después de esa edad en su mayoría presentan
síntomas. La explicación de este hallazgo no está del todo clara, pero
parece estar vinculada a la presencia de anticuerpos maternos.

También se ha determinado que ciertas secciones del sistema inmunitario

intervienen en la lucha contra el rotavirus. Si bien las células T
contribuyen a la eliminación de una infección, las células humanas B son
fundamentales para superar el rotavirus. Pero a fin de atacar el virus, las
células B primero deben llegar al sitio de la infección en el intestino.
Greenberg describió en un trabajo reciente como ha identificado algunas
de las moléculas y los receptores que ayudan a las células B a localizar
su blanco: la integrina ±4<7 y al menos dos receptores de quimioquinas,
CCR9 y CCR10.
Estudios epidemiológicos sugieren que la inmunidad natural es adquirida
después de una primoinfección (sintomática o asintomática) y que esta
protección se incrementa con cada nueva infección, reduciendo la
gravedad de los episodios diarreicos subsecuentes. (O” RYAN, 2000)

Lactancia materna: protección contra rotavirus

La lactancia materna ayuda a proteger contra la infección por el rotavirus,

según un nuevo análisis de un estudio presentado por el Dr. Ruiz Palacios
durante el último simposio internacional sobre rotavirus, determinó en una
población de 400 bebés, amamantados o alimentados con biberón, que
los beneficios de la lactancia materna cambian con la edad del niño. De
los bebés amamantados menores de 6 meses de edad, la mitad estuvo
completamente protegida contra la infección por rotavirus. En total, los
estudios de cohortes han revelado una protección del 40% obtenida con
la lactancia materna durante el primer año de vida de un bebé. Una
proteína en la leche materna, la lactaderina, parece proteger contra la
infección sintomática por rotavirus.

Patogenia

Este virus infecta y destruye en forma selectiva a las vellosidades del

intestino delgado con aplanamiento de las vellosidades y un infiltrado por
las células redondas en la lámina propia en el intestino delgado, a nivel de
los enterocitos de la parte superior de las vellosidades con células
diferenciadas que tiene funciones digestivas como de hidrólisis de los
disacáridos y de absorción como el transporte de agua, electrolitos
mediante las contransportadores glucosa y aminoácidos; por lo tanto la
infección por rotavirus conduce a desequilibrio, de absorción/secreción de
líquidos intestinal y una mala absorción de carbohidratos, sobre todo de la
lactosa.
Recientemente se ha propuesto que, al menos en parte, la diarrea es
causada por la proteína no estructural NSP4 que estimula la secreción
trans-epitelial de cloro, por una vía dependiente de calcio, lo que
desequilibra el balance iónico de la célula y provoca la salida de agua.
Aparentemente, todo esto sucede previo a la destrucción del epitelio
intestinal por la replicación viral. De hecho, se ha propuesto que la
proteína NSP4 pudiese representar la primera enterotoxina viral descrita.

También recientemente, se ha involucrado al sistema nervioso entérico

como responsable de inducir una salida aumentada de fluido y electrolitos
de las células de las criptas intestinales. Estos mecanismos de inducción
de la diarrea podrían sugerir nuevas estrategias para prevenir o controlar
la enfermedad causada por los rotavirus.

Además del papel que las proteínas de superficie juegan en la primera

fase de la infección viral, éstas contienen determinantes antigénicos que
representan blancos importantes del sistema inmune. Anticuerpos
dirigidos contra cualquiera de las dos proteínas de superficie neutralizan
al virus in vitro y son capaces de proteger pasivamente a ratones contra la
infección por rotavirus. La infección oral con rotavirus estimula una
inmunidad protectora que puede estar mediada por VP7 y/o VP4. (Willian,
et al., 2000)

El Dr. Richard Ward, Director del Centro Médico del Hospital Infantil de
Cincinnati - EEUU, describió durante el VI simposio Internacional sobre
rotavirus, el espectro pleno de la enfermedad asociada con este agente
biótico. Afirmó que si bien habitualmente produce gastroenteritis, en
ocasiones inusuales el rotavirus es causa de infecciones de las vías
respiratorias superiores e inferiores, abscesos hepáticos, pancreatitis,
diabetes, invaginación intestinal y atresia biliar.
 Fisiopatología

La diarrea osmótica que ocasionan los rotavirus se debe a que lesionan

en forma focal las células de las vellosidades del intestino delgado,
disminuyendo la producción de la lactasa (disacaridasa responsable de la
digestión de la lactosa) lo que provoca aumento de la osmolalidad en la
luz intestinal y condiciona mayor secreción de agua, que se pierde a
través de las heces. (Pérez Morgan, 2000).

Entre los mecanismos potenciales por que los rotavirus podrían inducir la
diarrea tenemos:

 La superficie absorbente reducida.

 Denudación de la micro-vellosidad, acortando, allanando, y atrofiando las
vellosidades intestinales.
 La invasión de las vellosidades por el rotavirus causando
secundariamente isquemia y acortando la absorción funcionalmente
dañada.
 Las concentraciones de disacaridasas deprimidas.
 Lesión del co-transporte de glucosa y sodio.
 La bomba de sodio-potasio se encuentra funcionalmente disminuida a su
vez que la actividad de la ATPasa daña la pendiente electroquímica.
 El Daño celular que afecta la absorción: Hinchazón de la Mitocondrias,
dilatación del retículo endoplasmático e infiltración mononuclear de las
células del epitelio intestinal.
 La proteína NSP4 que actúa como enterotoxina del virus realiza a su vez
los siguientes mecanismos de lesión:

 Induce a que las concentraciones de calcio a nivel intracelular

se vean aumentadas; en modelos experimentales actúa como
una toxina para inducir la diarrea.
  Estimula el sistema nervioso entérico
 Estimula la secreción intestinal de fluido y electrólitos;
 Esto a su vez genera mayor estímulo de la motilidad intestinal
produciendo que el tiempo del tránsito intestinal normal se vea
disminuido
 La permeabilidad epitelial alterada
 La permeabilidad del espacio para-celular esta aumentada
debilitando las uniones firmes entre células.

Las células de las criptas, encargadas de reparar las vellosidades

lesionadas, migran para sustituirlas en un periodo de 24 a 72 horas, con
lo que desaparece la diarrea. Es reconocido que los rotavirus infectan el
intestino delgado a través de la vía oral, aunque también se ha probado
su transmisión a través de la vía aérea, dado que incluso prácticas de
higiene apropiadas no parecen ser del todo capaces de controlar las
infecciones por estos virus. (Pérez Morgan, 2000)

Según otros autores, el sistema nervioso entérico modula la secreción de

líquidos y electrolitos inducida por las toxinas del rotavirus. Una de las
proteínas, denominada NSP4, genera aumento en los niveles de calcio
intracelular, lo cual estimula las terminaciones nerviosas localizadas en la
submucosa. Lo anterior plantea entonces la posibilidad de combinar
soluciones de rehidratación oral con medicamentos que disminuyan la
secreción intestinal, con lo cual se dispondría de efectivas herramientas
en el control de la infección por rotavirus.

Cuadro Clínico

La infección en adultos es por lo regular asintomática, aunque

ocasionalmente se presentan los síntomas en los padres de niños
infectados, en pacientes inmunocomprometidos, y en adultos de la tercera
edad. La diarrea por rotavirus ocurre principalmente durante los meses de
otoño e invierno en los países de climas emperados; esta estacionalidad
es menos marcada en los países con clima tropical. Generalmente
después de un periodo de incubación inferior a 3 días la sintomatología
típica que se presenta en la infección por rotavirus lo constituyen la fiebre
que puede estar presente o no entre el 45 al 84% (temperaturas entre
37.8C-39C), vómitos de carácter alimenticio-postpandrial o mucosos,
seguido de evacuaciones acuosas, amarillentas o verdosas fétidas o no;
generalmente la fiebre y el vómito ceden al 2° día de enfermedad
cediendo el paso a la diarrea de carácter acuosa intensa que suele
mantenerse durante 5 a 7 días con frecuencia de hasta 10 evacuaciones
en 24horas con presencia de moco en un porcentaje variable, aunque la y
leucocitos es raro no debe descartarse y deben ser analizadas durante el
diferencial con otras enfermedades; la infección por esta enfermedad es
autolimitada, es decir con una duración entre 7 y 10 días con un promedio
de aproximadamente cinco días.

La gran mortalidad asociada a esta enfermedad es debida a la severa

deshidratación que provoca la infección, por lo que la recomendación
principal en este padecimiento es la de rehidratar y mantener el balance
electrolítico del paciente; probablemente el 50% o más de las infecciones
son subclínicas. Las manifestaciones clínicas de la infección por rotavirus
no son lo suficientemente características para permitir un diagnóstico
inequívoco basándose en éstas, por los que se requiere de la detección
directa del virus, o del antígeno viral para tener el diagnostico preciso.

Diagnóstico viral

El diagnóstico virológico comprende la detección e identificación del

agente etiológico de una infección viral, clínica o inaparente, y /o de la
respuesta inmune específica del huésped. La primera etapa la constituye
el diagnóstico viral clínico, que generalmente tiene un carácter de
orientación. Se basa principalmente en el cuadro clínico y considera los
antecedentes personales y familiares, además de la situación
epidemiológica; en muchas circunstancias este diagnóstico clínico puede
ser suficiente, sin embargo cada día se observa con mayor frecuencia la
asociación de los virus entéricos con diversos cuadros clínicos, incluso
muy severos, en los que el estudio específico de laboratorio virológico se
hace indispensable como medio diagnóstico, de control evolutivo, con
fines epidemiológicos, etc. (Willian, et al., 2000)

Existen diversos métodos que se pueden emplear para realizar el

diagnóstico de rotavirus y, como en otros procedimientos de laboratorio, la
técnica de elección dependerá del equipo y reactivos de que se disponga
en el mismo. Las características clínicas de la diarrea por rotavirus son
inespecíficas, por lo tanto la confirmación de la infección en niños con
diarrea es mediante el diagnóstico etiológico en el laboratorio a partir de
muestras fecales, las cuales son requeridas para realizar la vigilancia
epidemiológica de rotavirus. Uno de los métodos disponibles en el
mercado para el diagnóstico de rotavirus es la detección de antígeno viral
específico común a todos los rotavirus del grupo A por inmunoensayo
(ELISA). Comercialmente hay disponibles diferentes equipos para ELISA,
fáciles y rápidos de usar y con una alta sensibilidad (aproximadamente
90% comparada con la detección por microscopia electrónica). Sin
embargo, su alto costo es una limitante para ser utilizados como técnicas
de diagnóstico. Otras técnicas, incluyen microscopia electrónica,
retotranscripción acoplada a la reacción en cadena de la polimerasa (RT-
PCR), hibridación de ácidos nucléicos y cultivo celular; las cuales sólo son
utilizadas en el campo de la investigación.

Existe un ensayo desarrollado en México por Espejo y colaboradores que

permite realizar el diagnóstico de rotavirus en el laboratorio con un
mínimo de equipo especial, la técnica de rotaforesis.
Rotaforesis (electroforesis de rotavirus).

Se basa en la identificación directa del genoma viral a partir de heces. La

técnica consiste en la extracción del RNA viral, su corrimiento
electroforético en geles de poliacrilamida y tinción con nitrato de plata
para observar 11 segmentos del RNA característicos del genoma de los
rotavirus, algunos con perfiles de corrimiento largo y otros corto (Figura
5). La rotaforesis es una técnica alternativa para la identificación de
electroferotipos y rearreglos genéticos de las cepas de campo en estudios
epidemiológicos y ofrece una buena alternativa para identificar rotavirus
en heces; su alta sensibilidad (94%) y especificidad (98%), además de su
sencillez, rapidez y bajo costo, son cualidades que permiten utilizarla para
el diagnóstico de la diarrea por rotavirus. Por su parte la RT-PCR permite
identificar los genotipos de rotavirus (UNAM, 2004)

Aglutinación de Látex.

Esta técnica se usa comúnmente para la demostración de antígenos de

rotavirus en materias fecales. Las partículas de látex son esferas de
poliestireno que se unen fácilmente al fragmento cristalizable (Fc) de
moléculas de inmunoglobulina G (IgG) o inmunoglobulina M (IgM), esta
última es mucho más eficiente en aglutinar partículas naturales. Los
fragmentos de unión del anticuerpo (FAb) quedan expuestos y son
capaces de unirse al antígeno que se encuentra en la muestra. Cuando
los antígenos tienen varios epítopes (o estructuras antigénicas
repetitivas), los anticuerpos multivalentes acoplados a múltiples partículas
de látex se unen al antígeno y se produce un entramado de las partículas
de látex que dan como resultado una aglutinación visible.
Esta técnica es fácil de realizar, requiere sólo unos minutos y no necesita
equipo, pues se lee a simple vista. Sin embargo, ofrece como desventaja
la presencia de reacciones cruzadas sobre todo con otros antígenos en la
muestra y también ocurren interferencias por el fenómeno de prozona, en
el que un exceso de anticuerpos no permite la formación del entramado.
Esta técnica ha demostrado tener una alta especificidad, pero menor
sensibilidad que la Elisa. (Willian, et al., 2000)

Tratamiento

El tratamiento de la diarrea se basa en rehidratación oral y control de

síntomas, no siendo necesario el uso de antibióticos una vez confirmado
el origen viral de la diarrea. Es aconsejable el uso de electrolitos, si bien
es conveniente consultar previamente al médico. (Wuethrich, 2004)

La mejor manera de prevenirla es utilizar utensilios limpios, y lavarse las

manos después de salir del baño. También hay que tener cuidado al
manejar pañales para no propiciar un contagio posterior.

Vacunas

En el 2006, dos vacunas contra el rotavirus mostraron ser seguras y

efectivas en los niños: Rotarix desarrollada por los laboratorios
GlaxoSmithKline y RotaTeq desarrollada por los laboratorios Merck.
Ambas se administran vía oral y contienen virus desactivados vivos. En
2006, la FDA aprobó RotaTeq para su uso en los Estados Unidos y
anunció un precio de 187.50 para el régimen estándar de tres dosis. Por
tanto, es una de las inmunizaciones infantiles más costosas, a pesar de
los descuentos viene a ser una opción inalcanzable para los infantes del
tercer mundo.
Una vacuna anterior, Rotashield desarrollada por Wyeth-Ayerst, fue
retirada del mercado a finales de los 90 cuando se descubrió en casos
muy raros estar vinculada a complicaciones severas de tipo oclusivo-
 intestinales. En México se encuentran disponibles las vacunas RotaTeq
pentavalente y Rorarix (Nathalie Parez, 2008).

OBJETIVOS

GENERAL:

Determinar la prevalencia de Rotavirus en el municipio de Bochil,

Chiapas durante el año 2016.

ESPECÍFICOS:

 Determinar la prevalencia de rotavirus en el municipio de Bochil, Chiapas

durante el periodo de estudio.

 Identificar los meses con mayor número de casos de infecciones por

rotavirus.

 Determinar la prevalencia de rotavirus en el estado de Chiapas de

acuerdo a la edad y sexo.
JUSTIFICACIÓ N

La morbi-mortalidad por enfermedades diarreicas en la población infantil

en los países en desarrollo continúa ocupando un lugar muy importante.
Aunque la etiología es diversa y puede deberse a bacterias, protozoarios
o virus, la ocasionada por estos últimos microorganismos es la que ha
centrado la atención de los infectólogos en los últimos años debido a su
incidencia. (PAHO, 2003)

Por dificultades técnicas, los estudios han ido mostrando lentamente la

evidencia de la etiología viral de la mayor parte de los cuadros de diarrea
aguda en la infancia, donde cobra especial relevancia el recordar que el
transmisor es el adulto que convive con el niño. La vía principal de
trasmisión del rotavirus es la fecal-oral, pero algunos estudios insinúan
como válidos, el contacto persona a persona, y/o el contacto con
superficies contaminadas e incluso la inhalación de secreciones
respiratorias. La infección es especie específica (la trasmisión de rotavirus
entre el hombre y animales no ha sido documentada) pero las cepas
aisladas de humanos tienen una alta homología genética con las cepas
aisladas de animales. Por tales motivos, el rotavirus ha llegado a
considerarse como un problema de salud pública y como tal debe ser
manejado ya que al momento, se considera que son el agente etiológico
que de manera aislada ocupa la mayor frecuencia como causal de diarrea
en menores de 2 años de edad, y además, al afectar a ese grupo de edad
provoca alteraciones importantes en el estado de hidratación y nutrición,
así como en el crecimiento y desarrollo del niño. De ahí que el
padecimiento sea considerado un verdadero problema de salud. (Mattion
et al, 1992)

Una infección por rotavirus puede provocar un cuadro asintomático hasta

una diarrea grave con deshidratación, que puede ocasionar la muerte. Las
reinfecciones son comunes durante el resto de la vida, pero van a cursar
de manera subclínica o con un cuadro diarreico de menor intensidad. La
infección por Rotavirus se presenta en cualquier época del año, sin
embargo, su incidencia se incrementa durante la temporada invernal.
(Chimura et al, 2002)

Cabe mencionar que, aunque la mortalidad causada por las infecciones

de rotavirus es mucho mayor en países en desarrollo, que en países
desarrollados, la frecuencia de infección es muy similar en ambos tipos de
países, por lo cual, habría que buscar factores (nivel socioeconómico,
deficiencia en educación sanitaria, malos hábitos higiénico–alimenticios,
etc.) que expliquen la similitud de la frecuencia de infecciones en ambos
lugares. (Midthun y Kapikian, 1996; Bass, 2004)

Debido al papel tan importante que tiene el rotavirus en las enfermedades

diarreicas infantiles, y al hecho de que aún existen lugares que carecen
de adecuada infraestructura sanitaria y hábitos de higiene, surge el
interés considerable en proponer medidas profilácticas sanitarias y
desarrollar estrategias de inmunización que sean eficaces para controlar y
disminuir la prevalencia de rotavirus, así como la severidad de la diarrea,
y por consiguiente, las complicaciones (deshidratación y desnutrición)
causadas por ésta.

En el municipio de Bochil, Chiapas es importante determinar la

prevalencia del rotavirus e identificar las zonas jurídicas con mayor
número de casos de este virus, realizando una investigación mediante
métodos y técnicas de laboratorio clínico, tanto cualitativas y cuantitativas,
proporcionando los resultados de este estudio, que servirán para que las
autoridades sanitarias tengan un conocimiento significativo y real sobre la
prevalencia de infecciones por rotavirus en nuestra población infantil, para
que por medio de ello, se puedan generar en el futuro medidas
 preventivas congruentes con la realidad local que beneficien tanto a los
niños como a sus familias.

ANTECEDENTES

El Rotavirus en humanos fue inicialmente descrito en 1973 por Ruth

Bishop en Australia quién describió “partículas virales” al observar al
microscopio electrónico biopsias de intestino delgado de niños con diarrea
severa de origen no bacteriano. En base a la morfología de estos virus,
cuya apariencia al microscopio electrónico era la de una rueda de carreta
antigua, estos virus fueron bautizados con el nombre de rotavirus, del latín
rota, que quiere decir rueda. (Bishop et al, 1973)

En la década de 1980 se identificó por primera vez el grupo C de rotavirus

(GCRVs) en los cerdos. (Saif et al, 1980)

Posteriormente en 1982 se aisló el grupo C en humanos. (Rodger et al,

1982)

En 1983 fue detectado por primera vez el serotipo G9 de rotavirus en los

Estados Unidos, aunque también en Japón, Tailandia, Yugoslavia pero
pocos casos fueron identificados. (Clark et al, 1987)

La enfermedad de Rotavirus una enfermedad Estacionaria que se

presenta a finales y a principio de cada año coincidiendo con los climas
fríos, mundialmente se ha reportado que el rotavirus causa 111 millones
de casos de gastroenteritis siendo causa de 352,000 muertes al año a
nivel mundial afectando exclusivamente a niños menores de 5 años.
(Estes y Cohen, 1989)
En 1990 el serotipo G5 de rotavirus, que es común en los cerdos, se
detectó en caballos y ganado, pero también fueron identificados en niños
de Brasil que tenían diarrea. (Gouvea et al, 1994)

Velázquez et al. Informó en 1996 que después de una infección natural

única, el 40% de los niños están protegidos contra cualquier infección
posterior con rotavirus, el 75% están protegidos contra la diarrea por
infección posterior, y el 88% están protegidos contra la diarrea severa. La
segunda, tercera y cuarta infección confiere progresivamente protección
cada vez mayor. (Velázquez et al, 1996)

Datos de 1994 a 2003 indican que los 4 genotipos de rotavirus humanos

más prevalentes en todo el mundo fueron P G1 (52%), P G2 (11%), P G4
(8%), y P G3(3%), que en conjunto representaban ≈ 74% de las cepas
mundiales. (Gentsch et al, 2005)

En América Latina durante el mismo período, la prevalencia de estos 4

tipos virales fue similar. (Santos y Hoshino, 2005)

La Administración de Alimentos y Drogas de los Estados Unidos aprobó

en 1998 el uso de una vacuna de virus vivo (Rotashield) para niños. Sin
embargo, el Comité Consejero en Prácticas de Inmunizaciones
recomendó que el Rotashield no siguiera siendo recomendado para niños
en los Estados Unidos porque algunos datos indicaron una fuerte
asociación entre Rotashield y la obstrucción intestinal en algunos niños
durante la primera o segunda semana después de la vacunación. (CDC,
2005)
DESCRIPCIÓN DEL PROYECTO

METODOLOGÍA

TIPOS DE ESTUDIO:

Se trató de un estudio retrospectivo, transversal, descriptivo y

observacional.

POBLACIÓN DE ESTUDIO:

Este estudio se realizó en habitantes del municipio de Bochil, Chiapas,

que acudieron a recibir atención médica en la clínica del IMSS de la
localidad.
.
LUGAR DE ESTUDIO:

El estudio se llevó a cabo en el IMSS, ubicado en el municipio de Bochil,

Chiapas.

TAMAÑO DE LA MUESTRA:

Se analizaron todas las muestras obtenidas durante el año 2016.

TIPO DE MUESTREO:
Aleatorio estratificado

CRITERIOS DE INCLUSIÓN:

 Pacientes con presencia de gastroenteritis a causa de

rotavirus.
 Pacientes de ambos sexos
 Pacientes de todas las edades

CRITERIOS DE EXCLUSIÓN:
  Pacientes que no presentaron gastroenteritis a causa de
rotavirus.

CRITERIOS DE ELIMINACIÓN:

 Toda muestra obtenida fuera del periodo de estudio (Año 2016)

TÉCNICAS UTILIZADAS:

Toma de muestra:

Es necesario obtener una muestra de heces de todos los casos

sospechosos al primer contacto con el paciente. Esta muestra debe ser
tomada dentro de las 48 horas posteriores al ingreso hospitalario. Para
esto se debe:

1. Recolectar de 5 a 10 ml de heces fecales (aproximadamente un pulgar)

e introducirlas en el frasco con la ayuda de una espátula o bajalengua
desechable. Se puede estimular el esfínter anal de los menores de un año
con un hisopo estéril y esperar a que se produzca la deposición en un
pañal descartable puesto al revés para que no se absorba.

2. Una vez recolectada la muestra de heces, colocarla en un frasco limpio

de tapa rosca debidamente identificado con el nombre del caso, fecha de
la toma de la muestra y nombre del hospital. Introducir el frasco en una
bolsita plástica individual, para evitar el derrame accidental del material.

3. Enviar de inmediato la muestra al laboratorio, adjuntando el formulario

propio según las normas del hospital.

Almacenamiento y transporte de muestras

 La muestra debe ser almacenada, por un máximo de siete días, en una
refrigeradora entre +2º C y +8º C, hasta su envío al laboratorio de
referencia.

En el laboratorio de referencia, se recomienda separar de inmediato las

muestras en tres viales (cada uno con un tercio de la muestra) y
almacenar uno de ellos entre +2 y +8 oC y los otros dos viales en un
congelador a -20 oC, hasta el momento de realizar las pruebas de
confirmación y tipificación. Es necesario añadir tres gotas de glicerol en
cada vial y mezclar suavemente antes de poner en el congelador.

Se deben evitar ciclos de congelación y descongelación para garantizar la

viabilidad del virus en el material congelado.

Solamente en aquellos casos en que el almacenamiento dura más de

cuatro meses, se recomienda una temperatura de -10 oC.

Métodos para la detección del rotavirus

 Rotaforesis

La técnica consiste en la extracción del RNA viral, su corrimiento

electroforético en geles de poliacrilamida y tinción con nitrato de plata
para observar 11 segmentos del RNA característicos del genoma de los
rotavirus, algunos con perfiles de corrimiento largo y otros corto.

 Aglutinación en látex
 El reactivo látex está compuesto por partículas de látex sensibilizadas con
inmunoglobulinas de conejo (anticuerpos) lo que permite la detección del
antígeno por aglutinación.

VARIABLES:

 Rotavirus

 Meses

 Edad

 Sexo

ANÁLISIS ESTADÍSTICO:

 Para determinar los factores biológicos del paciente se recogió datos de

edad, sexo. Con respecto a la variable edad, se estableció sus
frecuencias de acuerdo a cada mes, luego se estimó sus totales para
determinar su valor porcentual, lo mismo con la variable sexo se
determinó sus totales y sus valores porcentuales.

 Solo los casos positivos fueron seleccionados para estimar frecuencias y

porcentajes y relacionarlas con las demás variables.
APORTACIONES REALIZADAS

Como estudiantes del nivel medio superior es importante la preparación recibida

en el bachillerato, para poder desarrollar las competencias genéricas que como
estudiantes ponen en práctica, es indispensable en esta formación el prestar el
servicio social y las prácticas profesionales en una institución de salud
dependiente del gobierno del estado, ya que ahí se cuenta con la infraestructura,
materiales, personal, equipos, materiales pero sobre todo las muestras biológicas
de los pacientes que acuden a solicitar una consulta médica y estudios de
laboratorio, nosotros como Técnicos en laboratorio clínico, es de suma importancia
prepararnos para la continuidad de nuestros estudios en el nivel superior y por
supuesto para el ámbito laboral.
EVALUACIÓN O IMPACTO ECONÓMICO SOCIAL

RESULTADOS Y DISCUSIÓN

Para la presentación de los resultados en este trabajo se usaron tablas y

gráficas en base a los datos obtenidos de las variables de estudio.

Se obtuvieron 83 muestras de las cuales se rechazaron 10 por varias

causas. En total se analizaron 73 de las cuales 21 muestras fueron
positivas a rotavirus y 52 resultaron negativas.

Tabla 1.- Total de muestras obtenidas

MUESTRAS TOTAL %
POSITIVAS 21 12.04
NEGATIVAS 52 62.65
RECHAZADAS 10 12.04
TOTAL 83 100

POSITIVAS
TOTAL DE MUESTRAS NEGA-
TIVAS

12.04% 25.3%

62.65%
Gráfica 1.- Porcentaje de muestras positivas, negativas y rechazadas del
número total de muestras recibidas.

Tabla 2.- Determinación de rotavirus en el año 2008

AÑO POSITIVAS % NEGATIVAS % TOTAL

2016 21 25.3 52 62.65 83

NEGA-
AÑO 2016 TIVAS

62.65%

25.30%
 Tabla 3.- Determinación de rotavirus por sexo

FEMENINO MASCULINO TOTAL

45 38 83

SEXO

FEMENINO
54.21%

MAS-
CULINO
45.78%

Gráfica 3.- Prevalencia de rotavirus de acuerdo al sexo.

CONCLUSIONES

 Se determinó una prevalencia de rotavirus del 25.30 % en el municipio

de Bochil, Chiapas durante el año 2016.

 Del año de estudio en el 2016 se obtuvo la prevalencia más alta de

rotavirus con 25.38%, de acuerdo con estadísticas corroboradas en el
historial clínico del laboratorio con respecto con años anteriores.

 Se determinó una prevalencia de rotavirus del 45.78 % en el sexo

masculino, mientras que el sexo femenino mostró una prevalencia de
54.21 %.
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