LABORATORIO DE BIOQUÍMICA

INFORME N° 02

TEMA: DETERMINACIÓN DE PROTEÍNAS PLASMÁTICAS

DOCENTE: SICCHA RAMIREZ, ZOILA RAQUEL

INTEGRANTES:

- TRILLO PERALTA, ALMENDRA BELISSA

- ROJAS REMUZGO, SILVANA ALEXANDRA
- SALAZAR RIVERA, EMORY BEBERLY
- PEREZ CASTILLO, YVETT DAYANA

MESA: 01
FECHA: 11/09/2022
l. INTRODUCCIÓN:

Las proteínas su unidad monomérica es el aminoácido formado por el

famoso C,H,O,N,S.

Son compuestos orgánicos macromoleculares distribuidos en el organismo a

través de elementos estructurales y transportados mediante la forma de
enzimas, hormonas, anticuerpos, factores de coagulación, etc. Las proteínas
contribuyen a mantener el volumen del fluido circulante, transportan
sustancias relativamente insolubles y actúan en la inactivación de
compuestos tóxicos y en la defensa contra agentes invasores, de ahí la
importancia de su estudio y determinación ya que son útiles en el monitoreo
no solo de los cambios ocasionados por diversos estados de enfermedad,
sino también para una evaluación sobre el estudio nutricional del paciente

Las proteínas plasmáticas se clasifican en: sintetizadas por el hígado

(albúmina) y las inmunoglobulinas (producidas por los linfocitos). La albúmina
puede juntarse a los cationes di y trivalentes (Cu+2, Fe+3) es la principal
proteína de transporte de ácidos grasos, hormonas, bilirrubina, fármaco,
funciona como reserva de proteínas en caso de desnutrición, transporte y
regulador osmótica.

ll. OBJETIVOS:

● Determinar el nivel de las proteínas plasmáticas totales en el suero

sanguíneo.
● Determinar el nivel de albúmina en el suero sanguíneo.

lll. MATERIALES Y MÉTODOS:

-Materiales que se necesita para realizar el procedimiento:

MATERIALES DE LOS ESTUDIANTES MATERIALES DE LA PROFESORA

-01 gradilla -01 suero sanguíneo tubo con tapa

 -01 piseta de agua destilada rosca 1 MI
-03 pipetas de 5 MI -01 estándar de proteínas frasco 1 MI
-03 propipetas -01 reactivo BCF frasco 11 MI
-04 tubos de ensayo 13 x 100mm -01 reactivo EDTA/Cu frasco 11 MI
-01 espectrofotómetro
-01 baño maría 37 C
-01 micropipeta 100-1000 y/o de 5-50
-12 puntas descartables respectivas
-12 cubetas para espectrofotometría
-01 vortex

-Métodos Realizados:

● La determinación de las proteínas totales se realiza utilizando iones cúpricos

que en medio alcalino reacciona con las proteínas formando compuestos de
coordinación de color violeta, cuyo pico de máxima absorción es de 540 nm y
su intensidad es proporcional a la concentración de proteínas.
Preparar los siguientes medios de reacción: práctica.

● La albúmina reacciona con el bromo cresoldulfonftaleína a Ph 3.8

formando un compuesto coloreado que absorbe a 625 nm. Preparar el
siguiente sistema:

La determinación de la concentración en suero de proteínas totales del

paciente:
METODO BIURET:

Se hace el uso del Reactivo biuret:

En el laboratorio el estándar de las proteínas y la muestra del paciente se
puede observar en nuestros tubos de ensayo en donde estábamos preparando los
tubos al usarse el reactivo al empezaron a teñirse de distintos colores.

DESPUÉS QUE EL ESPECTRÓMETRO se sigue en calcular el FC y determinar la

concentración en suero de proteínas totales del paciente.

LA ALBÚMINA: Su determinación
Determinación de la concentración sérica de

albúmina: procedimiento experimental

Fundamento del enlace con tintes (BCG):

La albúmina reacciona con el bromo cresol dulfo ftaleína (verde bromocresol) a pH 3.8 formando u
compuesto coloreado que absorbe a 625 nm. Preparar el siguiente sistema

FC: 6.0 g/ ml
0,174

FC: 34.48

C; 34.48 x 0.324 —------------------ C: 11.17

ALBÚMINA:

-HIPOALBUMINEMIA: Deshidratación aguda

-HIPOALBUMINEMIA:Reducción en producción
(afección hepática) Incremento de la pérdida (Glomerulonefritis o nefrosis,quemaduras)
Malabsorción(infecciones gastrointestinales)
Disminución en síntesis (analbuminemia, procesos inflamatorios)

DETERMINACIÓN: Se llego a observar como se tiñe de color en los tubos de

ensayos al contacto del reactivo así en cada tubo estaban en distintos colores en
casa tubo de ensayo.

INTERVALOS DE REFERENCIA:

INTERVALOS DE REFERENCIA(IR): 6,0 -8.3 /DL

POR ARRIBA DE LOS IR
HIPOPROTEINEMIA: Es deshidratación: disminución del consumo o por
pérdida(acidosis diabética, mal de [Link] grave).

POR DEBAJO DE LOS IR

HIPOPROTEINEMIA:
Es la pérdida proteica, bajo consumo, inanición o malabsorción, síndrome nefrótico
etc.
 lV. RESULTADOS:

1. Determinación del nivel de las proteínas plasmáticas total en el suero sanguíneo

(PROCEDIMIENTO) Incubar durante 15 minutos a 37 C
Muestr AGUA SUERO O ESTÁNDAR REACTIVO
a DESTILAD PLASMA DE EDTA/Cu ABSORBA
A PROTEÍNAS (MI) NCIA

1 (B) 50 — — 3.5 —-

2 (x) — 50 — 3.5 0.325

3 (ST) — — 50 3.5 0.235

RESULTADOS:

RESOLUCIÓN RESULTADO FINAL

6.0/ 0.325 = 18.46 4.3

18.46 x 0.235 = 4.3

2. Determinación del nivel de albúmina en el suero sanguíneo

(PROCEDIMIENTO) Temperatura ambiente 10 mnst

MUESTRA SUERO O ESTÁNDAR REACTIVO ABSORB

PLASMA DE (BCF) ANCIA
ALBÚMINA

1 (B) — — 3.5 —-

2 (x) 10 — 3.5 0.067

3 (ST) — 10 3.5 0.376

RESULTADOS:
RESOLUCIÓN RESULTADO
FINAL

3/0.067= 44.77 16.83

44.77 x 0.376=
16.83

V. DISCUSIÓN:
● La determinación de proteínas plasmáticas nos ayuda a diagnosticar algunas
enfermedades,sabemos que las proteínas se sintetizan en el hígado. En estos
procesos determinamos la reacción entre la albúmina y la globulina dónde cambian y
 alteran las funciones del suero de plasma, la albúmina es la más abundante de las
proteínas y las globulinas tienen proteínas conjugadas de dos tipos ( glicoproteínas-
lipoproteínas) la concentración de proteínas en el suero es de 6.6 a 8.7 g/dl, cuando
se detecta enfermedad la concentración total puede verse alterada.

VI. CONCLUSIONES:

● Durante el desarrollo de la práctica realizada se procedió aplicar los

principales métodos que se usan en el laboratorio para precipitar y separar
proteínas, de esa forma saber en qué cantidades se encuentran presentes
en una solución determinada, en especial la solución usada en la experiencia
de laboratorio, el suero humano a través del cual se estudiaron sus proteínas
más importantes, la albúmina, las globulinas y la relación que existe entre
ellas.
● A través de la separación de las proteínas, por medio de la curva de
calibración se pudo observar que durante el experimento realizado.

Vll. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS:

Krames Stay Well. (2020). ALBÚMINA (EN SANGRE). Obtenido de ALBÚMINA (EN
SANGRE): [Link]

Nordeste, U. N. (2008). Proteínas Plasmáticas. Obtenido de Proteínas Plasmáticas:

[Link]
na/BIOQUIMICA/[Link]

Proteína Plasmática . (Dakota del Norte). Hospiten. Recuperado el 28 de septiembre

de 2022, de [Link]
[Link]

[Link]

ANEXOS: