Irene Pulido Serrano Biología celular
1- INTRODUCCIÓN
1.1 Función
1.2 Ventajas
1.3 Procesos asociados
1.4 Componentes
1.5 Curiosidades
2- ENVOLTURA NUCLEAR
2.1 Poros nucleares
2.1.1 Transporte regulado
3- LÁMINA NUCLEAR
4- CROMATINA
5.1 Plegamiento
5.2 Eucromatina y Heterocromatina
5.3 Territorio cromosómico
5- NUCLEOLO
6.1 Maduración del pre-ARN
6- MADURACIÓN Y EXPORTACIÓN DEL ARNm
7- Ribozimas
1)INTRODUCCIÓN
1 El núcleo fue el primer orgánulo en ser descubierto. Los primeros dibujos que se conservan
de este orgánulo se remontan a uno de los primeros microscopistas, Anton van
Leewenhoek (1632-1723). El núcleo es una estructura característica de las células
eucarióticas.
1.1 FUNCIONES
- Mantener la integridad del material genético celular
- Controlar las actividades celulares permitiendo el ambiente propicio
para que se de la expresión génica y su regulación.
1.2 VENTAJAS
Las reacciones son más rápidas (orgánulo con membranas)
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Permite que exista la maduración del ARN
Existe un punto de control para controlar la transcripción (mediante mecanismos genéticos)
1.3 PROCESOS ASOCIADOS
Los procesos asociados con la expresión génica que tiene lugar en el
núcleo son:
- Transcripción: del DNA al RNA
- Maduración: Corte y empalme del RNA
- Transporte: del RNA fuera del núcleo para su traducción
El interior del núcleo no contiene ningún subcompartimento membranoso.
Sin embargo, su contenido si está parcialmente compartimentado.
Existen un número de cuerpos subnucleares compuestos por tipos exclusivos de proteínas,
distintos tipos de moléculas de ARN y segmentos particulares de los cromosomas. La
traducción tiene lugar en el citosol.
1.4 COMPONENTES
Los componentes que nos encontramos en el núcleo son:
•Envoltura nuclear - Poros nucleares
•Lámina nuclear
•Cromatina
•Nucléolo
•Estructuras Menores:
I. Cuerpos de Cajal y GEMs
II. Dominios PIKA y PTF
III. Cuerpos PML
IV. Paraspeckles
V. Speckles
VI. Cuerpos de escisión
VII. Cuerpos DDX1
La cromatina es la identidad importante de la célula, es igual en células vegetales que en
animales.
* Una célula con poco citoplasma quiere decir que tiene pocos orgánulos y estará poco
diferenciada.
* Algunos núcleos tienen escotadura (especie de entrante) para un intercambio específico.
La pared de un vaso sanguíneo se denomina endotelio. La diapédesis es el paso de elementos
de la sangre a través de fenestraciones en los capilares para dirigirse al foco de infección sin
que se produzca lesión capilar.
La cromatina es la identidad importante de la célula, es igual en células vegetales que en
animales.
* Una célula con poco citoplasma quiere decir que tiene pocos orgánulos y estará poco
diferenciada.
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* Algunos núcleos tienen escotadura (especie de entrante) para un intercambio específico.
La pared de un vaso sanguíneo se denomina endotelio.
La diapédesis es el paso de elementos de la sangre a través de fenestraciones en
los capilares para dirigirse al foco de infección sin que se produzca lesión capilar.
1.5 CURIOSIDADES
-Órgano sensor: cuando pasa por un vaso sanguíneo se aprieta y hace que el citoesqueleto se
active para que la célula lo atraviese rápidamente.
- Un escaso citoplasma (o un núcleo muy desarrollado) nos indica que la célula o es inmadura o
está inactiva.
- Los neutrófilos pueden tener desde 2 lóbulos (cuando son jóvenes) hasta 5 (viejos)
- Las células gliales se localIzan en el tejido nervioso uniendo neuronas (función estructural)
- El núcleo aporta informa acerca del tipo celular ante que nos encontramos
- Las zonas más oscuras representan la heterocromatina (que “guardan los genes” para que no
se transcriban) mientras que la región clara corresponde a la eucromatina (transcribe muchas
proteínas). La primera es poco abundante en las neuronas.
- Un linfocito B activo en la membrana plasmática se caracteriza por tener a la eucromatina
formando una estructura de “rueda de carro”
2) ENVOLTURA NUCLEAR
El núcleo se encuentra rodeado por la envoltura nuclear, que es parte del RE,que envuelve al
núcleo
En esta envoltura, formada por una doble membrana, se llama membrana externa a la que se
encuentra en contacto con el citosol, y membrana interna a la que lo hace con el
nucleoplasma. Entre ambas existe un espacio perinuclear, que comunica con las cavidades del
RE, incluyendo por ello en su actividad metabólica, funciones como la biosíntesis de colesterol,
fosfolípidos, destoxificación, etc. En lamembrana externa se encuentran además ribosomas
adosados que fabrican proteínas, que pueden pasar al espacio perinuclear.
Sobre la membrana nuclear externa hay ribosomas, mientras que sobre la membrana nuclear
interna se localiza la lámina nuclear, formada por proteínas de aspecto fibroso. Esta lámina
interviene en la reorganización de la membrana nuclear durante la división celular y en la
organización de los cromosomas dentro del núcleo.
2.1 POROS NUCLEARES
Forman una estructura octamérica (repetición de estructura ocho veces)a partir de las
proteínas llamadas nucleoporinas, tiene una masa 120.000 Da (gran tamaño); de una esquina a
otra son un total de 120 nm.
Llaman la atención las proteínas que se disponen en forma de columna, que están pegadas a la
membrana y forman en poro, proteínas anulares y luminares (en el
lumen). Las subunidades del anillo están tanto dentro como fuera (en la cara citosólica emiten
unas proteínas filamentosas) hacia el interior forman la “canasta nuclear”
A través de los poros se realiza el intercambio de materiales del núcleo al hialoplasma, y
viceversa.
o hay heterocromatina, ya que, es una “condensación”, por lo cual, resulta un obstáculo.
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El número de poros varían según la actividad de la célula Las nucleoporinas son el conjunto de
proteínas que, junto con otras estructuras, conforman el poro nuclear. Hay aproximadamente
30 distintas y tienen un diámetro de 125 nm (1,2·105 Da, es decir, tiene 1,2·105 veces el
tamaño de la doceava parte del átomo del carbono 12). Su función es definir la estructura de
octámero y la simetría bilateral. Algunas nucleoporinas son proteínas transmembranales.
La estructura secundaria de poros nucleares es indefinida (son filamentos que rellenan el
interior). La proteína con su señal nuclear, unida al receptor de transporte, es transportada de
forma activa al interior del núcleo donde se libera la proteína.
2.1.1 TRANSPORTE REGULADO A TRAVÉS DE LOS POROS NUCLEARES
Los complejos de poro en su interior (50 nm) pueden encontrase con ciertas sustancias, tiene
una especie de laberinto formado por proteínas (no está libre) muy pequeñas (20 KDa) por lo
cual las partículas muy pequeñas pasan por una difusión simple/pasiva (atraviesan fácilmente
las proteínas), por ejemplo, una de 5000 Da. Las moléculas más grandes necesitan un
transporte activo (tamaño superior a 60000 Da), por ejemplo, los ribosomas
SISTEMA DE IMPORTACIÓN DEL NÚCLEO
Las enzimas GTPasas monoméricas se pueden encontrar en estado activo (unido a GTP) o
puede activar la hidrólisis de GTP, convirtiéndola en GDP (+Pi) y convertirse en inactiva
(cuando está unida al GDP). Por lo tanto, si está unida a GDP la GTPasa monomérica estará
inactiva y si, por el contrario, está unida a GTP, dicha enzima será activa.
Las GTPasas monoméricas pueden ser de tres tipos:
- Proteínas Ras: son las encargadas de la señalización del cáncer.
Ras: sarcoma de rata. Es una proteína que cuando muta produce un tumor en ratas.
- Proteína Rho: son un método de terminación de transcripción alternativo.
- Proteínas Ran: son las GTPasas monoméricas principales. N (nuclear), RA (relacionado con
una proteína que se llama Ras*). Esta proteína se puede encontrar como Ran-GTP o Ran-GDP.
[Link]-GTP: se llaman proteínas G (son grandes) y proteínas pequeñas monoméricas. Estas
son interruptores moleculares; en un estado neutro se encargan de activar o desactivar un
proceso.
- Proteína GAP: proteína activadora de la actividad GTPásica. Cuando GAP se encuentra a Ran-
GTP esta se transforma en Ran-GDP. GTP -> GDP.
En el núcleo encontramos otra proteína; GEF (guanina, exchage, factor). Esta proteína se
encarga de pasar el GDP a GTP. Justo al contrario que la GAP. En el citosol abunda Ran-GDP y
en el núcleo nos encontramos Ran-GTP por que en el núcleo hay GEF. GDP -> GTP.
Existen dos tipos de proteínas encargadas del transporte regulado a través de poros nucleares.
En este caso hablamos de la importina y la exportina. Cada una se encarga del transporte de
proteínas en una única dirección, ya sea desde el citosol hacia el núcleo (importación nuclear),
o desde el núcleo hacia el citosol (exportación nuclear). De esta forma, un poro nuclear
transporta 1000 moléculas por segundo en ambas direcciones (mediante la importación y la
exportación).
Las importinas y las exportinas tienen afinidad por unas secuencias determinadas y así son
capaces de transportar, por ejemplo, lisina y arginina, que son aminoácidos que pueden
plegarse. Por lo tanto, para que las importinas y exportinas puedan transportar proteínas estas
deben estar cargadas y contener una secuencia determinada que pueda ser reconocida por su
importina o exportina correspondiente.
En general, las importinas y exportinas pertenecen a una familia de moléculas llamadas
carioferinas, que se encargan del transporte a través del núcleo.
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En el caso del ARN maduro sale por el poro nuclear por unos mecanismos especiales que
selecciona el poro para que salga (no depende de las ran ni de las importinas)
IMPORTACIÓN NUCLEAR
Es llevada a cabo por la importina la cual tiene afinidad por Ran-GDP y únicamente se hace en
una dirección, desde el citosol hacia el núcleo, ya que en el núcleo hay más Ran-GTP y en el
citosol más Ran- GDP. El proceso de importación de proteínas es el siguiente:
El transportador nuclear (formado por la importina + Ran-GDP) se une a la
proteína,conformando una molécula cargada que va a ser transportada. Como se trata de
importación, será la importina, quien se encarga de unirse a dicha molécula y neutralizarla.
Para que la importina transporte una proteína cargada, dicha proteína debe tener una
secuencia que pueda ser reconocida por la importina (ya que tanto las importinas como las
exportinas tienen afinidad por unas secuencias determinadas). El transportador nuclear, ya
unido a la molécula cargada, entra al núcleo a través del poro nuclear complejo. En
dicho núcleo hay gran concentración de GTP. Por la acción de la Ran GEF (factor
intercambiador de guanina), un Ran-GTP se une al complejo formado por la importina y la
molécula transportada, lo que hace que la molécula cargada quede en el núcleo. Por lo tanto,
queda la molécula cargada libre en el núcleo y, por otro lado, el complejo Ran-GTP-importina.
El complejo Ran-GTP-importina sale al citosol a través del poro complejo, donde la
concentración de GDP es alta. Allí, por la acción de la Ran-GAP, se produce la hidrólisis del GTP,
y queda la importina, un Ran-GDP y un fosfato por separado. La importina queda libre para
volver a ser reutilizada y finaliza el proceso de importación. La proteína con secuencia de
importación va a ser reconocida por la importina. Se introduce a través del complejo del poro.
Una vez en el núcleo la Ran-GTP activa la liberación de la proteína y el GTP se une a la
importina quedando la proteína liberada en el núcleo. La importina con GTP vuelve al citosol.
La GAP se encarga de transformar el Ran-GTP en Ran-GDP que no es afin por lo que la
importina queda liberada en el citosol preparada para poder importar otra proteína al núcleo.
Solo puede realizarse en una dirección porque en el citosol no hay Ran-GTP que actúe de
interruptor. Es decir, la importina tiene más afinidad por el Ran-GTP que por la secuencia de aa
transportada, por eso al llegar al núcleo se asocia al Ran y libera a la proteína.
EXPORTACIÓN NUCLEAR
La exportación únicamente se realiza en una dirección: desde el núcleo hacia el citosol.
La proteína cargada que se va a exportar debe tener una secuencia que pueda ser reconocidas
por las exportinas, ya que dicha proteína saldrá del núcleo unida a la exportina (transportador
nuclear) y a la Ran-GTP.
El complejo exportina-(Ran-GTP)-proteína sale a través del poro complejo al citosol, donde
donde la concentración de GDP es mayor.
Al ser mayor la concentración de GDP en el citosol, el Ran-GTP pierde afinidad por la exportina,
por lo que se libera la proteína y queda libre en el citosol, y la Ran- GTP da lugar a Ran-GDP
(inactiva) y a un grupo fosfato. Después de que la Ran- GTP pierda la afinidad por la exportina
quedarán, por tanto, la proteína, la Ran- GDP, un grupo fosfato y la exportina, la cual ya estará
libre y podrá volver a ser utilizada.
La exportina vuelve a entrar en el núcleo para volver a ser utilizada. Por tanto, la exportina
tiene mayor afinidad cuando hay Ran-GTP y poca cuando hay Ran-GDP; la importina, en
cambio, tiene mayor afinidad con la Ran-GDP y es muy poco dependiente de Ran-GTP. La
exportación y la importación nuclear son dependientes de Ran (GTPasa monomérica principal).
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Mediante la importación y exportación nuclear se transportan proteínas, ARNt, ribosomas...
por lo que todos ellos son dependientes de Ran. A pesar de que el ARNt sea dependiente de
Ran, el ARNm no es dependiente de Ran por lo que tendrá que pasar junta a otras proteínas
capaces de pasar por el poro nuclear. Hay un mecanismo de importación de Ran.
Esto se consigue gracias a la proteína nuclear RanGEF que fosforila a los RanGDP del interior
nuclear; de esta manera la Ran-GDP entrará de nuevo al núcleo por difusión simple
(ya que es de bajo peso molecular) y será fosforilada, activándose y dando lugar a Ran-
GTP para volver a empezar el ciclo. Para exportar ARNm, este se une a proteínas capaces de
pasar por el poro. De esta forma el ciclo de importación y exportación se podrá realizar de
forma ilimitada. Los ribosomas y los RNAm y RNAt usan otro mecanismo distinto.
En el poro nuclear existen unos filamentos que probablemente sirvan para ayudar en los
procesos de exportación e importación de moléculas a través de dicho poro.
3) LÁMINA NUCLEAR
Está compuesto por filamentos intermedios (los únicos que están en el núcleo
Las láminas que lo forman reciben el nombre de láminas nucleares. La cromatina que se une a
la envoltura nuclear es heterocromatina.
Podemos definirla como una red fibrosa intranuclear, unida a la cara interna de la membrana
nuclear interna, y formada por filamentos intermedios constituidos por las proteínas
denominadas laminas nucleares. Si no hay red, es señal de que se localizan los poros.
Las proteínas laminares son: A, B1, B2 y C
Son responsables de:
1. unir la heterocromatina a la envoltura nuclear
2. forma del núcleo
3. la rigidez (tipo A); los vasos sanguíneos, por ejemplo, necesitan ser poco rígidos (células
endoteliales), o el caso de los neutrófilos al realizar la diapédisis. Estos dos casos carecen de
láminas A.
4. Reparación del ADN y organización del genoma: los cromosomas no se disponen en el
núcleo aleatoriamente
5. Conexión citoesqueleto (tipo B): la lamina B receptor es la responsable de esto: sirve para
anclar la cromatina, unen la lámina a los tres componentes del citoesqueleto (movimiento del
núcleo).
6. Desintegración de la envoltura nuclear en prometafase por fosforilación de las proteínas de
la lámina nuclear y reconstrucción en telofase por desfosforilación de las misma. Las proteínas
cdk fosforilan las proteínas de la lámina (quedan como cisternas sueltas). Las láminas se
vuelven a unir al rededor de los cromosomas (se forman núcleos pequeños que se unen
posteriormente), se excluyen orgánulos del citoplasma.
Laminopatías: enfermedades que afectan a estas proteínas (pueden afectar al tejido
muscular u otras células). Destacan las progerias, caracterizadas por un envejecimiento
prematuro (debido a su relación con la expresión de genes, mutación en las proteínas de
las láminas nucleares
4) CROMATINA
4.1 Plegamiento
La cromatina es la forma en la que se presenta el ADN en el núcleo celular. Por lo tanto, está
compuesta por ADN y está asociado principalmente a un tipo de proteínas básicas llamadas
histonas, aunque también está asociado a otras proteínas no histónicas.
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La unidad básica de la fibra de cromatina, llamada fibra elemental (10 nm de grosor), son los
nucleosomas. La fibra elemental se observa al microscopio electrónico de transmisión como
una fibra con aspecto de “collar de perlas”. Cada una de dichas “perlas” es un complejo
nucleosomal, integrado por un octámero de histonas (complejo octomérico)
alrededor del cual se enrolla el ADN, dando dos vueltas de doble hélice (de ADN) por
octámero, lo que equivale a 146 pares de bases. Los complejos nucleosomales están unidos
por ADN internucleosomal o espaciador formado por 54 pares de bases.
El nucleosoma (unidad básica de la fibra de cromatina) está compuesto, por tanto, por el
complejo nucleosomal y por el ADN espaciador situado a ambos lados de cada octámero de
histonas.
En total, el nucleosoma tiene 200 pares de bases nitrogenadas (146 bases del ADN que da dos
vueltas de dos vueltas alrededor del octámero de histonas y 54 bases del ADN espaciador).
Las histonas son proteínas de bajo peso molecular, que contienen una elevada proporción de
aminoácidos básicos (lisina y arginina).
Se han descrito cinco tipos de histonas: H1, H2A, H2B, H3 y H4.
Todos los tipos de histonas forman el complejo nucleosomal, excepto la H1, la cual está
implicada en el superenrollamiento de la fibra elemental.
La histona H1, que no se encuentra en el complejo nucleosomal, se une por una parte a los
nucleosomas y por la otra a la fibra de ADN espaciador, provocando un acercamiento de los
complejos nucleosomales y un enrollamiento de la fibra de ADN. Por lo tanto, la histona H1, es
la responsable del plegamiento helicoidal de la fibra elemental de cromatina para formar fibras
complejas superenrolladas.
La cadena de nucleosomas se enrolla helicoidalmente formando un solenoide o fibra de 30nm,
que contendría sus nucleosomas por cada vuelta de hélice. Esta estructura quedaría
estabilizada por la interacción con las histonas H1.
A su vez, estas fibras complejas de 30nm se hallan plegadas en el núcleo interfásico en forma
de bucles radiales que se enrollaran helicoidalmente y experimentan sucesivos grados de
compactación en el núcleo en división hasta dar lugar a las cromátidas del cromosoma
metafásico:
- 2nm, fragmento corto
de una doble hélice
- 10nm, “collar de perlas”
- 30nm solenoide
- 300nm dominio bucle
- 700nm con la cromatina
aún más condensada
- 400nm formando el
cromosoma metafásico,
con 2 cromátidas.
Resultado neto: cada molécula de ADN ha sido empaquetada en un cromosoma mitótico, que
es 10000 veces más corto que su forma extendida.
Asociadas a la cromatina se encuentran también proteínas con actividad enzimática
relacionadas con el procesamiento del ADN.
Las proteínas que forman el esqueleto del cromosoma se conocen como condensina. Cuando
veamos la mitosis también se estudiará la cohesina. Esta última lo que hace es unir las
cromátidas hermanas.
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Las condensinas actúan como pinzas dando forma al esqueleto del cromosoma. Ambas enlazan
cromatina.
4.2 EUCROMATINA Y HETEROCROMATINA
I. Eucromatina: De aspecto laxo o difuso, corresponde a zonas de cromatina activas
(aproximadamente un 10% de la cromatina celular) donde se produce la transcripción. La
eucromatina también se conoce como la “cromatina verdadera”, ya que es la cromatina que se
transcribe (cromatina activa).
II. Heterocromatina: corresponde a la cromatina que no se transcribe (está inactiva). Está
altamente condensada (el 90% del total). La heterocromatina se une a la lámina nuclear ya que
no se transcribe. A su vez, se pueden distinguir dos tipos de heterocromatina:
•Constitutiva: contiene los genes comunes a todas las células que NO sirven para
transcribir; se encuentra en un cromosoma metafásico. Ejemplos: cromosomas tienen
un centrómero (parte central), implicado en el movimiento del cromosoma, y un
telómero (extremo) que señala las veces que se pueden dividir las células e impiden el
acortamiento. El hecho de que sea común a todas las células implica que se dé
exactamente la misma heterocromatina constitutiva en todos los cromosomas.
•Facultativa: corresponde a la heterocromatina que no se está transcribiendo pero se
transcribió. Su condensación depende del estado de desarrollo del organismo y del tipo
celular, y está compuesta por el conjunto de genes que, de manera específica, se
inactivan a lo largo de la diferenciación celular. La cromatina es facultativa porque se
puede dar en un cromosoma o en otro (no va a ser común en diferentes cromosomas).
Un ejemplo son los genes sexuales: XX para mujer y XY para hombre. En los genes sexuales es
muy relevante el Corpúsculo de Barr (o cromatina sexual X de hembras), que son la parte que
no se transcribe presente en células somáticas de hembras y que forma parte de la
heterocromatina sexual. Tras la fecundación, se debe dar la inactivación de todos los
Corpúsculos de Barr excepto uno de ellos (proceso llamado lionización) para evitar que la
hembra transmita los dos
cromosomas X que tiene, por lo que para esto debe ocurrir la metilación del ADN (silenciación
de genes). Gracias a esto, se compensa la dosis génica y la hembra únicamente expresará un
cromosoma X (de los dos que tiene), mientras que el macho expresará un cromosoma Y (por lo
que el desdenciente tendrá cromosomas XY, por lo que será otro macho) o un cromosoma X
(por lo que el descendiente tendrá cromosomas XX, por lo que será una hembra).
5.3 Territorio cromosómico
Las cromátidas de un determinado cromosoma se queda siempre en una región del núcleo.
El nucleo interfásico es como un amasijo de cromatina. Los territorios cromosómicos existen
para manejar esta cromatina, condensarla, descondensarla, regularla y expresarla en el núcleo.
Estos territorios son casi esféricos, de unos 2 a 4 μm de diámetro.
Los territorios de diferentes cromosomas sólo se mezclan un poco en sus bordes (en levaduras,
sin embargo, los límites entre territorios no están tan bien definidos).
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Los territorios que ocupan los cromosomas dentro del núcleo no es aleatoria.
Puede diferir entre tipos celulares, estados de diferenciación y a lo largo del ciclo celular, pero
la ordenación territorial es bastante estable en el tiempo para una misma célula.
Los territorios más activos suelen localizarse en el centro del núcleo (dan lugar a la
eucromatina).
Los menos activos lo hacen cerca de la envuelta nuclear (dan lugar a la heterocromatina).
Dentro de cada territorio las regiones que se replican durante la primera mitad de la fase S
(regiones de replicación temprana) se encuentran separadas de las que se replican en la
segunda mitad de la fase S (regiones de replicación tardía).
Las interacciones con la lámina nuclear y con las membranas de la envuelta ayudan en esta
segregación por territorios. Es interesante reseñar que también los cromosomas homólogos se
despliegan en regiones diferentes del núcleo.
