Análisis Clínicos IV

 Sistema Endócrino:
 Sistema de regulación y comunicación entre células y tejidos que permite
la adaptación de los organismos multicelulares a cambios en el medio
ambiente interno y externo.
 Deriva de las palabras griegas "endo" que significa dentro, y "Crinis" para
segregar.
 Hormonas:
 Deriva del griego: “activar”, “poner en movimiento”
 Mensajeros químicos del Sistema Endócrino. Son moléculas endógenas
involucradas en la comunicación intra y extracelular.
 Concepto actual de HORMONA:

Es una sustancia capaz de transferir una

información de una célula a otra y aún
en la misma célula

Evolución del concepto de “HORMONA” (H)

•Antes: Sustancia segregada por una glándula que a través de la

sangre hace efecto en otra célula.

•Ahora: Sustancia capaz de transferir información de una célula a

otra por cualquier vía, aún dentro de una misma célula.
 Glándula Endócrina:
 Tejido especializado para la síntesis de Hormonas.
 Célula Endócrina:
 Célula especializada para la síntesis de Hormonas.
 Endocrinología:
 Rama de las Ciencias Biológicas que estudia las funciones y alteraciones
del sistema endócrino.
Endócrino: secreción vertida al torrente sanguíneo que hace efecto en otro sitio
del organismo.
•Parácrino: secreción vertida al espacio intersticial que hace efecto en una célula
vecina.
•Autócrino: secreción de una célula que hace efecto en si misma.

Exocrino: Sustancia producidas por glándulas de secreción externa (Ej.: enzimas digestivas.
Proteína celular que se une a una hormona de forma
específica.
El receptor hormonal puede estar en la superficie de la
célula o dentro de la célula. En una célula hay muchos
cambios después que una hormona se une a su
receptor.
Hormona

Receptor de Membrana

Receptor Citoplasmático

Receptor Nuclear
 Glicoproteínas TSH – FSH – LH - HCG

Proteínas GH – PRL - Lactógeno Placentario

Proteicas o Peptídicas
Péptidos ACTH – Insulina – Glucagón - Factores de
Medianos Crecimiento – Gastrina - Secretina

Péptidos
GnRH – TRH – Ocitocina – Vasopresina
Pequeños

Catecolaminas

Tirosina

Hormonas Tiroideas (T3 – T4)

Serotonina
Derivadas de
Aminoácidos Triptofano

Melatonina

Histadina Histamina

Núcleo Cerrado Esteroides adrenales y gonadales

Del Colesterol

Núcleo Abierto Derivados de la Vitamina D

Derivadas de Lípidos

Del Ácido
Prostaglandinas, leucotrienos
Araquidónico
Hipotálamo Ovario
TRH EP
GnRH Relaxina
LHRH Inhibina
CRH Testículo
GHRH T
SS Inhibina
PRF Placenta
PIF EP
Hipófisis anterior Relaxina
TSH hCG
FSH hCS
LH hPL
PRL Páncreas
GH Insulina
ß-LPH Glucagón
ACTH PP
ß-END Tracto gastrointestinal
α-MSH Gastrina
LEK/MEK Secretina
Hipófisis posterior CCK-PZM
ADH Motilina
Oxitocina VIP
Gl. Pineal GIP
Serotonina Bombesina
Melatonina Neurotensina
Tiroides SP
Tiroxina (T4) Riñón
Triiodotironina (T3) 1,25-(OH)2 Vit D
Calcitonina Eritropoyetina
Paratiroides Hígado
PTH IGF-I
Corteza adrenal IGF-II
Cortisol Timo
Aldosterona Timosina
Médula Adrenal Timopoyetina
NA Corazón
A ANP
Reactivos
Diseño Marca Anticuerpo
básicos

Anticuerpos Competitivo Radiactiva Monoclonal

Quimioluminisce
Trazadores No Competitivo Policlonal
nte

Estándares Homogéneo Fluorescente

No Homogéneo Cromógenica

Enzimática

Electroquimioluminiscente
 La técnica se basan en la gran
especificidad y afinidad de los
anticuerpos por sus antígenos
específicos y se usan los anticuerpos
monoclonales (obtenidos en el
laboratorio) o de sueros policlonales
(obtenidos de animales), siendo
más específicos los monoclonales.
Su gran sensibilidad y especificidad
permite la cuantificación de
compuestos presentes en líquidos
orgánicos en concentración
reducida.
Por la técnica de medición
 Competitivo: el Antígeno (Ag) objeto de la medición compite con un antígeno marcado por un anticuerpo
(Ac). Se mide por la cantidad del antígeno marcado sin conjugar que se considera es inversamente
proporcional al analito. graficos
 No competitivo (llamado también tipo sándwich): el Ag de la muestra reacciona con dos Ac diferentes que se
fijan a distintas partes del Ag . Uno de los Ac generalmente está en soporte sólido para facilitar la separación
de la fracción ligada, y el otro Ac lleva la marca. Se mide por la cantidad del marcador considerando que es
directamente proporcional a la cantidad del analito. graficos
Por el medio donde se realiza la medición
 Homogéneo: En este tipo de ensayo la señal generada por la unión del antígeno y el anticuerpo se mide
directamente en el mismo medio que se utiliza para favorecer la formación del complejo inmune. graficos
 Heterogéneo: En este tipo de ensayo la señal generada por la unión del antígeno y el anticuerpo se mide en
un medio diferente que el utilizado para la unión del complejo inmune, generalmente implican una etapa
intermedia de lavado para eliminar interferencias. graficos
Se considera que los inmunoensayo con formato homogéneo no competitivo son los más sensibles y específicos.
Por el marcador
 Radioinmunoensayo (RIA) : el marcador es un isótopo radioactivo.
 Enzimoinmunoanálsis (EIA): el marcador es una enzima como por ejemplo la técnica de
enzimoinmunoensayo conocido por su abreviatura ELISA.
 Fluoroinmunoanálisis: el marcador es una molécula fluorescente, por ejemplo FPIA.
 Ensayo Inmunoquimioluminiscente: la marca es en general una enzima capaz de catalizar una reacción
quimioluminiscente. Son tanto o más sensibles que los radioinmunoensayos, y no presentan riesgos de
manipulación de sustancias radioactivas. En contraposición están poco desarrollados y no siempre es posible
aplicarlos.
 Medición de niveles de hormonas: por ejemplo la medición de niveles de
hormonas tiroideas o de estrógenos
 Medición de metabolitos en suero cuya cantidad o presencia son indicios
de daño celular: Por ejemplo la medición de marcadores biológicos
miocárdicos como las troponinas.
 Detección de virus: por ejemplo de los causantes de hepatitis y su
individualización
 Detección del cáncer o de células tumorales: a través de sus proteínas o
marcadores tumorales, liberados en el suero de los pacientes.
 Detectar exposición a agentes infecciosos: por ejemplo de rubéola o
toxoplasmosis en mujeres embarazadas o en personas inmunosuprimidas.
 Detección de metabolitos indicadores de problemas fisiológicos, por su
presencia o cantidad excesiva, en la sangre : por ejemplo en caso de
anemia se mide niveles de ferritina.
 Medir niveles de medicamentos, drogas objeto de abuso y toxinas en
sangre.
T

Ag Ac
T

Ag: Antígeno
Ac: Anticuerpo
T: Trazador
 M
Ac

Ac

Ag
 Basal

Retroalimentación • Hormonas
(feedback) • Metabólicos

• Ritmo Circadiano
Neural • Asociado al Sueño
• Otros

• Estrés
• Frío
Estímulos Externos • Succión
• Otros
Las hormonas responden a diferentes
mecanismos regulatorios. Esto hace que se
deba tener especial atención a los requisitos
pre-analíticos.
Datos:
•Sexo
•Edad
•Talla
•Medicación
•Antihipertensivos
•Corticoides
•Tratamientos
•Corticoides
•Levotiroxina
•Anticonceptivos
•Otros
•FUM (Fecha Última Menstruación)
TSH: 8 hs de ayuno
T4: 8 hs de ayuno Conservar Muestra
de 2 a 8 ºC
T3: 8 hs de ayuno

Insulina: 8 hs de ayuno Conservar Muestra

a -20 ºC
HOMA
EDTA - Fluor
Adrenalina Plasmática: Realizarla
luego de media hora que el paciente
estuvo con una buterfly colocada.

Plasma con Heparina

Conservar Muestra
de 2 a 8 ºC
Adrenalina Urinaria: Orina de 24hs.
recolectada sobre 10 ml de ácido
clorhídrico 6N.

Orina
Conservar Muestra
de 2 a 8 ºC
ACTH (Adrenocorticotrofina): 8 hs de ayuno.
Realizarla entre las 8 y las 9 a.m.

Plasma
Recolectar en tubos enfriados,
centrifugar, separar el plasma y
congelar inmediatamente. Utilizar
únicamente tubos plásticos. Evitar
congelar y descongelar.
Testosterona Total: 8 hs de ayuno.
Testosterona Libre: 8 hs de ayuno.
Testosterona Biodisponible: 8 hs de ayuno.

Conservar Muestra
de 2 a 8 ºC
Estradiol: Pacientes sexo femenino, salvo
indicación médica, realizar la extracción
entre los días 3 y 5 del ciclo.
Consignar FUM y fecha de extracción de la
muestra.

Conservar Muestra
de 2 a 8 ºC
Estradiol Biodisponible: Consignar FUM y
fecha de extracción de la muestra.
Estradiol Libre: Consignar FUM y fecha de
extracción de la muestra.

Conservar Muestra
de 2 a 8 ºC
FSH: 8 horas de ayuno.
En pacientes del sexo femenino realizar la
extracción entre los días 3 y 5 del ciclo,
salvo otra indicación médica.

Conservar Muestra
de 2 a 8 ºC
LH: 8 horas de ayuno.
En pacientes del sexo femenino realizar la
extracción entre los días 3 y 5 del ciclo,
salvo otra indicación médica.

Conservar Muestra
de 2 a 8 ºC
Prolactina: 8 horas de ayuno. Evitar el estrés.
Realizar la extracción entre las 8 y las 9 a.m.
Pacientes sexo femenino, salvo indicación médica,
realizar la extracción entre los días 3 y 5 del ciclo.
Extraer muestra entre la 1ra. Y la 2da. hora después
del despertar. El paciente debe permanecer en
reposo durante los 20 minutos previos a la toma de
muestra.
Consignar FUM y fecha de extracción de la
muestra. Anotar toda medicación que ingiera el
paciente. Conservar Muestra
de 2 a 8 ºC
Gonadotrofina Corionica Humana: 8
horas de ayuno.

Conservar Muestra
de 2 a 8 ºC
Parathormona: 8 horas de ayuno.
No testear muestras muy hemolizadas o
ictéricas.

Plasma con EDTA

Separar y congelar lo antes posible.
La PTH es estable en plasma con
EDTA 72 horas, a 2-8°C.
Luego conservar congelado a
–20°C.
Cortisol en Suero: 8 horas de ayuno.
Con dieta previa moderada.
Cortisol matutino: entre las 8 y las 9 a.m
Cortisol Vespertino: entre las 16 y 17hs.

Conservar a 2-8°C.
Indicar si el paciente está medicado
con hidrotisona, prednisolona,
metilprednisolona, prednisona
Cortisol en Saliva: 8 horas de ayuno.
Evitar lavado bucal con dentífrico (buches
con agua)
Saliva: en tubos provistos por el
Laboratorio.

Saliva
Conservar a 2-8°C.
Cortisol en Orina 1 hora:
Cenar a las 20 hs. Vaciar la vejiga a las 22
hs./7hs. Tomar dos vasos de agua (200-300
ml). Orinar nuevamente a las 23 hs. /8hs. Y
recolectar todo el volumen emitido.
Mantener la muestra refrigerada durante
la recolección.
Orina de 1 hora (22 a 23hs) (7 a 8 hs)
Orina
Conservar a 2-8°C.
Cortisol Urinario:
Durante la recolección de orina disminuir la
ingesta de líquidos y evitar situaciones de
estrés.
Mantener refrigerada durante la
recolección.

Orina de 24 hs.
Medir Diuresis
Conservar a 2-8°C.
Aldosterol Séricos: 8 horas de ayuno.
Evitar la ingesta de diuréticos,
antihipertensivos y anticonceptivos orales
durante 2 a 4 semanas previas a la toma de
muestra, si el médico lo permite..

Conservar a 2-8°C.
Aldosterol Urinario:
Se debe evitar la ingesta de diuréticos,
antihipertensivos y anticonceptivos
durante 2 a 4 semanas previas a la toma de
muestra, si el médico lo permite.
Mantener refrigerada durante la
recolección.
Orina de 24 hs.
Medir Diuresis
Conservar a 2-8°C.