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UNIVERSIDAD NACIONAL AUTÓNOMA DE
MÉXICO
Facultad de Estudios Superiores Zaragoza
Química Farmacéutica Biológica
Laboratorio de Bioquímica Celular y de los Tejidos II
Fertilidad masculina
Grupo: 1501
Equipo No. 2
Integrantes:
● Martínez Tinajero Marlene
● Murillo Hernández Yoselin Aile
● Sieber Mier Oliver Hansel
● Villalba Corral Chaac Alexis
Responsable de la práctica: Rosalba Barrera Martínez
Fecha de entrega: Lunes 19 de septiembre de 2022.
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Contenido.
Apartado Página
Resumen 3
Marco teórico 4
Objetivos 7
Materiales y método 8
Resultados 9
Discusión 11
Conclusiones 11
Referencias 12
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➢ Resumen:
La infertilidad es un problema que aqueja a más de 4 millones de parejas mexicanas,
por lo que es de suma importancia a nivel social su pronto diagnóstico y tratamiento.
Este padecimiento es definido como la imposibilidad de la pareja o de la mujer, para
lograr un embarazo clínico después de 12 meses o más de relaciones sexuales sin
protección.
En hombres puede ser causado por diversos factores, como lo es la producción o
funcionamiento anormal de los espermatozoides debido a la no descendencia de los
testículos, defectos genéticos, problemas de salud como la diabetes o infecciones
como clamidia, gonorrea, paperas o VIH.
Una de las pruebas más usadas para el pre-diagnóstico de la infertilidad masculina son
los espermiogramas, los cuales son estudios que consisten en el análisis del eyaculado
del paciente. Este es un examen para medir la cantidad y calidad del semen y de los
espermatozoides de un hombre, sin embargo este estudio es meramente un indicativo
de que deben realizarse pruebas de mayor precisión, ya que los espermiogramas
poseen poca especificidad y su sensibilidad es baja.
Bajo la premisa anterior se tiene que el 50% de los hombres con conteos entre 20 y 40
millones de espermatozoides/ mL, y principalmente conteos por debajo de 20 millones
de espermatozoides/ mL,
Durante esta sesión experimental se realizaron múltiples pruebas con la finalidad de
poder determinar la concentración y funcionalidad de los espermatozoides presentes
en una muestra clínica de eyaculado masculino, entre las cuales se encontraron
ensayos microscópicos y macroscópicos, como la medición de pH, de viscosidad, de
motilidad mediante una preparación en fresco, vitalidad, morfología mediante un
frotis con tinción de Wright, licuefacción, volumen, y conteo de espermatozoides
mediante una cámara de Neubauer. La muestra biológica fue obtenida posterior a 3
días de abstinencia, mediante masturbación en un cuarto privado cerca del laboratorio.
Se recolectó un volumen de 1.6 mL de semen y todas estas pruebas fueron realizadas
manteniendo una temperatura constante del eyaculado de aproximadamente 37 ºC.
La muestra analizada presentó color blanquecino-grisáceo, consistencia regular, pocas
anormalidades en la morfología de los espermatozoides (al contar 100, 88 de ellos no
presentaron ninguna anormalidad y únicamente 12 tenían irregularidades); así como
una viscosidad dentro del rango normal, un tiempo de licuefacción normal (<60
minutos), movimiento progresivo rápido, pH dentro del rango teórico
(aproximadamente 8.5), y una concentración de 81,600,000 espermatozoides por /mL,
lo que indica que el paciente estudiado no presenta problemas de infertilidad. Dado
que el paciente entra dentro de los parámetros referenciados en la bibliografía
consultada, se concluye que el paciente masculino tiene una fertilidad normal
aparente.
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➢ Marco teórico:
La fertilidad se define como la posibilidad fisiológica de procrear, así, la esterilidad e
infertilidad suponen una situación carencial que no compromete la integridad física
del individuo ni implica un riesgo vital, sin embargo, esta carencia puede incidir
negativamente en el desarrollo de la persona, produciendo frustración y
desmoralización. Por ello se consideran un problema de salud pública de
trascendencia.
1. Agirregoikoa JA, Sánchez EG, Gómez MB, Salvador Z. La fertilidad masculina: desarrollo del aparato reproductor [Internet].
Reproducción Asistida ORG. 2022 [citado el 18 de septiembre de 2022]. Disponible en:
https://www.reproduccionasistida.org/fertilidad-en-el-hombre/
Fisiología del semen
El semen es una mezcla de espermatozoides y líquido seminal, el líquido formado a
partir de las secreciones de los túbulos seminíferos, las vesículas seminales, la próstata
y las glándulas bulbouretrales. El volumen del semen en una eyaculación normal es de
2,5-5 mL, con 50-150 millones de espermatozoides/mL. Cuando este valor cae por
debajo de 20 millones/mL, se considera que el varón es infértil. Es necesario que haya
un número muy grande de espermatozoides para que la fecundación sea exitosa, ya
que sólo una pequeña fracción logra alcanzar el ovocito secundario.
A pesar de la leve acidez del líquido prostático, el semen tiene un pH ligeramente
alcalino de 7,2-7,7 debido al pH elevado y el gran volumen de líquido aportado por las
vesículas seminales. Las secreciones prostáticas le dan al semen una apariencia
lechosa, y las glándulas bulbouretrales le dan su consistencia pegajosa. El líquido
seminal provee a los espermatozoides de un medio de transporte, nutrientes y
protección del medio ácido hostil que representan la uretra masculina y la vagina
femenina.
2. Harvey RA, Ferrier DR. Bioquimica. 5a ed. Lippincott Williams & Wilkins; 2013.
Anatomía del sistema reproductor masculino
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● Testículos: Albergan aproximadamente 250 lóbulos, los cuales contienen a su
vez los túbulos seminíferos y es ahí en donde se forman los espermatozoides a
través del proceso conocido como espermatogénesis.
● Epidídimo: Cámara de maduración de los espermatozoides y donde adquieren
motilidad.
● Conducto deferente: Sirve como transporte de los espermatozoides.
● Vesículas seminales: Son glándulas que producen una secreción que sirve como
vehículo para los espermatozoides.
● Conducto eyaculatorio: Almacena parcialmente líquido seminal.
● Próstata: Produce secreciones que salen por la orina y el líquido de las
eyaculaciones, el cual es de consistencia lechosa y está compuesto por
sustancias que incluyen calcio, proteínas, ácido cítrico, colesterol, y un número
determinado de enzimas y ácido.
● Glándulas bulbouretrales: Su secreción neutraliza la orina de la uretra y la
vagina, además lubrica previo a la eyaculación.
3. Sistema reproductor masculino - Unidad de Apoyo Para el Aprendizaje [Internet]. Unam.mx. [citado el 18 de
septiembre de 2022]. Disponible en: http://uapas2.bunam.unam.mx/ciencias/sistema_reproductor_masculino/
Características morfológicas del semen
La morfología de los espermatozoides, es decir el tamaño y la forma de los
espermatozoides, es un factor que se examina como parte de un análisis de semen para
evaluar la infertilidad masculina. Los resultados de la morfología de los
espermatozoides se informan como porcentaje de espermatozoides que tienen un
aspecto normal cuando el semen se ve con el microscopio.
Los espermatozoides normales tienen la cabeza ovalada y la cola larga. Los
espermatozoides anormales tienen defectos en la cabeza o la cola, como una cabeza
grande o deformada o una cola doble o torcida. Estos defectos pueden afectar la
capacidad del esperma de llegar al óvulo y penetrarlo. Sin embargo, tener un
porcentaje alto de espermatozoides deformes no es poco frecuente. En general, sólo
alrededor del 4 % al 10 % de los espermatozoides de una muestra de semen son
normales, lo que significa que la gran mayoría no se ven perfectos con el microscopio.
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3. Morfología espermática anormal: ¿Qué significa? [Internet]. Mayo Clinic. 2022 [citado el 18 de septiembre de 2022].
Disponible en:
https://www.mayoclinic.org/es-es/diseases-conditions/male-infertility/expert-answers/sperm-morphology/faq-2005776
Se pueden presentar alteraciones en el semen, como por ejemplo:
● Aspermia: Ausencia de flujo seminal
● Azoospermia: Ausencia de espermatozoides en el flujo seminal
● Hematospermia: Sangre en el semen
● Leucospermia: Presencia de más de un millón de leucocitos en el fluido
seminal
● Necrospermia: Cuando más del 42% de los espermatozoides han muerto
● Oligozoospermia: bajo nivel de espermatozoides en el fluido seminal
● Teratozoospermia: Aumento de espermatozoides con morfología anómala
● Astenozoospermia: Disminución de la movilidad de los espermatozoides en
una muestra de fluido seminal.
4. Biología de la gameta masculina [Internet]. Edu.ar. [citado el 18 de septiembre de 2022]. Disponible en:
http://www2.mdp.edu.ar/images/eudem/pdf/biologia%20de%20la%20gameta%20masculina.pd
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Para una correcta evaluación de los parámetros de un espermiograma se necesitan
valores de referencia bibliográfica, que nos indicarán los aspectos más generales
relacionados a las pruebas macroscópicas y microscópicas.
MANUAL DE LABORATORIO DE BIOQUÍMICA CELULAR Y DE LOS TEJIDOS II [Internet]. Unam.mx. [citado el 18 de septembre
de 2022]. Disponible en:
https://www.zaragoza.unam.mx/wp-content/Portal2015/Licenciaturas/qfb/manuales/6_MANUAL_BIOQUIMICA_CELULAR_TEJIDOS_2
_2020.pdf
➢ Objetivos
1. Analizar una muestra de fluido seminal con pruebas físicas a simple vista y
pruebas microscópicas.
2. Describir la morfología correcta e incorrecta de los espermatozoides.
3. Identificar las características anómalas de los espermatozoides.
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4. Clasificar los espermatozoides de acuerdo al tipo de movimiento que realizan.
5. Analizar e interpretar los resultados obtenidos obteniendo conclusiones debido
a la comparación con valores de referencia.
➢ Materiales y método
Materiales
➔ Portaobjetos
➔ Cubreobjetos
➔ Tiras de pH
➔ Guantes
➔ Cubrehematocímetro
➔ Pipeta de Thoma
➔ Camara de Neubauer
➔ Material biológico: Semen humano
➔ Pipetas Pasteur
➔ Termometro de inmersion parcial
Equipo
➔ Microscopio óptico
➔ Parrilla de agitación y calentamiento
Reactivos
➔ Muestra biológica de eyaculado
➔ Agua destilada
➔ Colorante de Wright o Giemsa
➔ Diluyente de Weigman
Método:
Una vez obtenida la muestra biológica mediante masturbación, se trasladó al
laboratorio en un tiempo aproximado de 5 minutos. Posteriormente se colocó en un
baño de agua donde se mantuvo a una temperatura constante de --ºC.
La primera prueba realizada consistió en medir el pH de la muestra: se colocó una
porción del eyaculado encima de una tira de pH con ayuda de una pipeta Pasteur.
Para la prueba de viscosidad se tomó una porción del eyaculado con una pipeta
Pasteur y se dejó caer hasta observar un alargamiento del goteo de aproximadamente 2
cm.
Para la prueba de motilidad se realizó una preparación en fresco colocando una gota
del eyaculado con ayuda de una pipeta Pasteur en un portaobjetos, se colocó un
cubreobjetos y se observó con los objetivos 10X y 40X del microscopio. Se realizó el
conteo de 100 espermatozoides.
Para la prueba de morfología se realizó un frotis del eyaculado y se tiñó con la técnica
de Wright. Se observó con los objetivos 10X y 40X del microscopio y se
contabilizaron 100 espermatozoides, clasificándolos como normales y anormales.
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Para el conteo en la cámara de Neubauer se llenó la pipeta Toma hasta 0.5 con
eyaculado y posteriormente se llenó hasta la marca con formalina (formol al 35% y
bicarbonato de sodio); posteriormente se agitó durante 10 minutos de forma
horizontal. Después se preparó la cámara de Neubauer humedeciendo los soportes
exteriores con agua destilada y colocando el cubreobjetos en el borde de la cámara
sobre los extremos, deslizándola hacia el otro extremo. Se desecharon las primeras 3
gotas de líquido en la pipeta Toma, y se procedió al llenado uniforme de la cámara
colocando la boquilla de la pipeta en el borde de la misma.
Resultados:
Prueba Resultado
Duración de la abstinencia 3 días
Intervalo desde el eyaculado hasta 5 minutos
el comienzo del análisis
Aspecto 1 (normal)
Licuefacción 1 (normal)
Consistencia 1 (normal)
Volumen 1.6 mL
pH 8-9
Motilidad Progresivos rápidos
Aglutinación SI
Viabilidad No concluyente
Concentración 81,600,000 x mL
Morfología:
● Normal 88
● Anormal
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Leucocitos NO
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Prueba de pH ➡️ Valor: 8.5 Aglutinación
Morfología:
Cálculos del total de espermas por mL.
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𝐶𝑒𝑙 1632(20)
𝑚𝑚 𝑐𝑢𝑏𝑖𝑐𝑜𝑠
= 4(1 𝑎𝑙 𝑐𝑢𝑎𝑑𝑟𝑎𝑑𝑜)(0.1𝑚𝑚)
= 81600 𝑚𝑚 𝑐ú𝑏𝑖𝑐𝑜𝑠 × 1000 =
81, 600, 000 𝑚𝑖𝑙𝑙𝑜𝑛𝑒𝑠 𝑥 𝑚𝐿
➢ Discusión:
El paciente se mantuvo durante 3 días en abstinencia, se obtuvo una muestra de 1.6
mL mediante masturbación, el cual comentó que no fue la cantidad total del eyaculado
pero hubieron remanencias que no cayeron en el recipiente esterilizado, posterior a
ello pasaron aproximadamente entre 5 y 6 min para llevar la muestra al laboratorio y
poder realizar las pruebas correspondientes, donde por observación se pudo notar
aspecto normal ( homogéneo y gris opalescente) y esperado, así como licuefacción de
aproximadamente 8 minutos; de igual forma se procedió a realizar la prueba de
viscosidad donde se formaban hilos de semen de aproximadamente 2 cm de longitud,
que están dentro del rango normal. Se realizó la prueba de pH que también mostró un
valor dentro del rango esperado que era mayor o igual a 7.2, ya que de ser menor el
pH nos indicará un valor ácido, por lo que los espermatozoides podrían morir y por lo
tanto el individuo presentaría necrozoospermia.
Para la prueba de motilidad se observaron espermatozoides progresivos rápidos,
progresivos lentos, y móviles no progresivos. La mayoría de los espermatozoides
fueron progresivos y rápidos, por lo que nuestro individuo presentó una motilidad
adecuada y dentro de los parámetros esperados.
Para el conteo de espermatozoides se tomó en cuenta la dilución 1:20, y se contaron
en 4 cuadrantes 1632 espermatozoides de los cuales, posterior al tratamiento
matemático, se obtuvo un valor final del conteo de 81,600,000 espermatozoides por
mililitro, que se encuentra en el valor normal de los espermatozoides por eyaculación
en el individuo.
En el apartado de morfología, se observaron los espermatozoides gracias a la tinción
de Wright, de los cuales se realizó un conteo y se tiene un promedio de por cada 100
espermatozoides el individuo presentó 88 normales y 12 anormales, lo cual no es
común, ya que deberían ser anormales solamente 4 en un aproximado, no presenta
oligozoospermia o teratozoospermia. Presentó aglutinación.
➢ Conclusiones:
De acuerdo de los resultados obtenidos es posible concluir que los objetivos fueron
alcanzados de forma satisfactoria, ya que se analizó una muestra de fluido seminal con
pruebas físicas a simple vista y pruebas microscópicas, se describió la morfología
correcta e incorrecta de los espermatozoides, se identificaron las características
anómalas de los espermatozoides, se clasificó a los espermatozoides de acuerdo al tipo
12
de movimiento que realizan, y se analizó e interpretó los resultados obtenidos,
teniendo que el paciente analizado presenta una concentración de espermatozoides y
características del eyaculado normales y dentro de los valores de referencia y
obteniéndose una concentración de 81,600,000 de espermatozoides por mL.
➢ Referencias:
❖ Documento: Manual de laboratorio de bioquímica celular y de los tejidos
ll, [internet] unam.mx [citado el 7 de septiembre de 2022]
❖ Documento: Manual para el proceso y examen de semen humano de la OMS
5ta ed (ingles) http://goo.gl//wp0296
❖ Montalvo Arenas CE. APARATO REP RODUCTOR MASCULINO
[Internet]. Unam.mx. [citado el 5 de septiembre de 2022]. Disponible en:
http://www.facmed.unam.mx/deptos/biocetis/Doc/Mas.pdf
❖ Molto Ripoll JP. Anatomia Humana. Independently Published; 2021.
❖ Busca M, Gonzalez del Cerro C. Mas allá del sistema reproductor: Aportes
para la enseñanza de la biología. Independently Published; 2020.
❖ Biología de la gameta masculina [Internet]. Edu.ar. [citado el 18 de septiembre
de 2022]. Disponible en:
http://www2.mdp.edu.ar/images/eudem/pdf/biologia%20de%20la%20gameta
%20masculina.pd
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