INFORME 5.
MANEJO DE MICROPIPETAS
Dina Luz Montejo Rincón 1611571, Bryan Camilo Rincón Flórez 1611587, Britney
Yurainy Madariaga Lázaro 1611664, Emerson Denilson Arismendi 1611619 Comentado [lsc1]: NOTA 4.3
INTRODUCCION
Las micropipetas son instrumentos de laboratorios diseñados para conseguir una alta precisión y
exactitud en la medida y dosificación de líquidos. Para garantizar mediciones precisas y exactas es
necesario evitar errores asociados a un manejo inadecuado y a un funcionamiento deficiente de estos
instrumentos. En este artículo vamos a presentar cuáles son los errores más habituales que se cometen
durante el pipeteo y cómo evitarlos, cómo comprobar el correcto funcionamiento de las micropipetas
y, finalmente, veremos una serie de aspectos clave para mantener nuestras micropipetas en perfectas
condiciones. (Fuentes López et al., 2020).
La micropipeta es un instrumento de laboratorio empleado para absorber y transferir pequeños
volúmenes de líquidos y permitir su manejo en las distintas técnicas científicas.
Los volúmenes captables por estos instrumentos varían según el modelo: los más habituales,
denominados p20, p200 y p1000, admiten un máximo de 20, 200 y 1000 μl, respectivamente.
Es de destacar que el uso de micropipetas permite emplear distintos líquidos sin tener que lavar el
aparato: para ello, se emplean puntas desechables, de plástico, que habitualmente son estériles.
Existen varios tipos de puntas: por ejemplo, las amarillas para pipetear volúmenes pequeños (por
ejemplo, 10 μl), y las azules para pipetear volúmenes grandes (por ejemplo, 800 μl).
Existen micropipetas manuales, en las que el volumen a aspirar se fija girando un botón en su parte
superior que está conectado a un sistema analógico de confirmación de volumen, y automáticas, en
las cuales dicho sistema es digital.
Hay micropipetas simples, que sólo acogen una punta cada vez, y multicanales, que permiten
incorporar múltiples puntas (por ejemplo, ocho), absorbiendo el mismo volumen en todas ellas.
Actualmente, se reconocen fácilmente en el mercado dos de las mejores marcas que existen:
Eppendorf y Nichiryo. (Artedinamico. (s/f)). El objetivo de esta práctica es conocer el adecuado
manejo y funcionamiento de las micropipetas, así como identificar sus diferentes partes, y tener en
cuenta los rangos adecuados dependiendo de la practicas que se esté realizando para manipularlas
correctamente en las prácticas de laboratorio de biología molecular.
Materiales Comentado [lsc2]: SE INCLUYE EN METODOLOGÍA
REDACTADO.
✓ Micropipeta de 1 µL a 10 µL ✓ Sustancias jabonosas
✓ Micropipeta de 10 µL a 100 µL ✓ Puntas de micropipetas (amarillas, blancas
✓ Micropipeta de 100 µL a 1000 y azules) y tubos capilares de pasta.
µL ✓ Gradilla
METODOLOGÍA
Operación del Equipo
Técnica de pipeteo para líquidos claros:
a. Se presiona el botón superior suavemente hasta el primer tope.
b. Se sumerge la punta, en la solución que se necesita pipetear estando seguros que la punta este
bien colocada y que no haya ningún tipo de residuos entre la punta y el cuerpo de la pipeta.
c. Mantenga la pipeta verticalmente mientras toma la solución.
d. Para descartar la solución de la punta presione el botón hasta el segundo tope.
e. Descarte las puntas utilizando el eyector que traen las pipetas.
Técnica de pipeteo para líquidos con alta viscosidad:
a. Presione el botón superior hasta el segundo tope.
b. Sumerja la punta en la solución (2-3 mm) y suelte el botón despacio. La punta tiene que estar
bien llena.
c. Descarte el líquido de la punta presionando suavemente el botón superior hasta el primer tope.
Cuidados y Mantenimiento del Equipo
a. Iniciar el día limpiando la parte externa de las pipetas de polvo o suciedad.
b. Use solamente etanol al 70% para la limpieza de la pipeta. Otro tipo de solvente no es
aconsejable.
c. Utilizar las puntas adecuadas a las pipetas y a la cantidad de solución que se va a medir.
d. El pistón y el cilindro pueden ser chequeados dos veces al año si la pipeta es usada diariamente.
El mantenimiento preventivo de la pipeta tiene que ser realizado por personal especializado de
mantenimiento. (Artedinamico. (s/f)).
Las micropipetas se venden con un certificado individual de calibración. La calibración
garantiza la exactitud de la pipeta, ya que permite establecer la relación entre el volumen
dispensado y el volumen nominal o seleccionado correspondiente del instrumento. La calibración
de las micropipetas debe ser realizada por personal cualificado y formado para ello. Es un proceso
complejo que puede verse afectado por diversos factores como el equipo utilizado, la cualificación
del personal o el entorno del laboratorio. (Fuentes López et al., 2020).
Fuente: (Cruz, K. C. M., et al.)
Metodología
Medición con micropipeta
(Micropipeta en
forma vertical
presionando
émbolo hasta
primer tope no
Selección de micropipeta (20, 200,100µL) exceder de 3mm
de superficie de
Fijar volumen respecto a la tabla
líquido)
Tomar muestra
(Jabón)
Presionar
émbolo hasta
Transferir líquido a tubo primer tope y
Eppendorf (colocar punta en seguidamente
pared de tubo) el segundo tope
para expulsar
totalidad del
líquido.
Expulsar punta en
recipiente indicado
FIN
RESULTADOS Comentado [lsc3]: ESTUDIANTES NO, EL APELLIDO
DELQUE TOMO LA FOTO POR FAVOR
MICROPIPETAS
TABLA 1. MUESTRAS MICROPIPETAS DE 1-10 µL
TUBOS REACTIVOS
SOLUCION SOLUCION SOLUCION C SOLUCION D
A B
1 4 5 1 -
2 4 5 - 1
3 4 4 1 1
TABLA 2. MUESTRAS MICROPIPETAS DE 100-1000 µL
TUBOS REACTIVOS
SOLUCION SOLUCION SOLUCION SOLUCION SOLUCION
A B C D E
1 100 50 150 180 520
2 150 150 150 - 550
3
50 - - 200 750
Figura 1. Micropipetas, Figura 2. Diferentes soluciones Figura 3. Proceso de aprendizaje de uso
puntas y tubos. jabonosas de micropipetas.
Fuente: Estudiantes Fuentes: Estudiantes Fuentes: estudiantes
Discusiones
Todos aquellos errores que cometemos durante el pipeteo, tanto de manera sistemática como
accidental, inciden directamente en la calidad de los resultados obtenidos durante el trabajo en el
laboratorio. Los errores sistemáticos y aleatorios que se cometen durante la medida y dosificación
de líquidos empleando una micropipeta están relacionados con el sistema de pipeteo y el
instrumental utilizado, pero también con el manejo que hagamos del material.
Para poder evitarlos, es necesario comprobar que el material empleado funciona conforme a las
especificaciones y también que nuestro manejo de las micropipetas no supone una fuente de error.
Los errores aleatorios están relacionados con la precisión de la medida y provocan variaciones
impredecibles de los valores obtenidos. Para mejorar la precisión de nuestras medidas es necesario
no solo que los equipos utilizados sean precisos, sino también que haya un procedimiento adecuado
de uso, limpieza y experiencia práctica. Los errores sistemáticos, en cambio, se pueden prever,
calcular y eliminar mediante calibraciones y compensaciones. (Fuentes López et al., 2020).
Conclusiones
Para el uso de las micropipetas hay que seguir las instrucciones del docente para su cuidado,
tener un manejo adecuado de las puntas de las micropipetas y eyectar las puntas en un frasco, los
rangos de las micropipetas van de 0 a 1000 µL, utilizar la más adecuada para determinado rango y
la punta que le corresponda y seguir las instrucciones del manejo de micropipetas para evitar el
daño al equipo o un posible derrame de reactivos.
En el laboratorio de biología molecular el correcto uso de las micropipetas es sumamente
obligatorio, debido a que los resultados de las medidas de los reactivos a utilizar para las diferentes
prácticas de extracción de ADN, electroforesis y otras más, su medida debe ser lo más exacta
posible para que logre dar un resultado favorable a la hora de las lecturas y observación de los
ácidos nucleicos en el identificador de geles.
Referencias Comentado [lsc4]: ORDEN ALFABÉTICO, Y FALTAN 2
REFERENCIAS
Fuentes López, A., Fernández Segovia, I., & Fuentes López, C. (2020). Consideraciones en el
uso y mantenimiento de micropipetas. Recuperado de:
https://riunet.upv.es/bitstream/handle/10251/145914/Fuentes%3bFern%c3%a1ndez%3b
Fuentes%20%20Consideraciones%20en%20el%20uso%20y%20mantenimiento%20de
%20micropipetas.pdf?sequence=1&isAllowed=y
Cruz, K. C. M., Cruces, E. G., Francisco, V. L. H., & Luna, R. M. Aspectos Básicos para su
Manejo y Parámetros de Calibración. Recuperado de:
https://d1wqtxts1xzle7.cloudfront.net/31764430/INF_BIOCON_PR1_EQ2-with-cover-
page-v2.pdf?Expires=1650251208&Signature=
Artedinamico. (s/f). MICROPIPETAS (OPERACION Y MANEJO). Recuperado el 11 de
abril de 2022, de https://www.equiposylaboratorio.com/portal/articulo-
ampliado/micropipetas-(operacion-y-manejo)
