UNIVERSIDAD SIMON BOLIVAR
PROGRAMA MEDICINA
LABORATORIO BIOLOGÍA
PRÁCTICA No.4 IDENTIFICACIÓN DE BIOMOLÉCULAS
1. INTRODUCCIÓN
El término biomolécula se entiende como las moléculas que integran a los seres
vivos. Las biomoléculas pueden clasificarse como orgánicas e inorgánicas. En el
desarrollo de la práctica nos enfocaremos en las moléculas orgánicas.
Una célula viva está constituida básicamente por cuatro elementos (C, H, O y N)
los cuales, combinados entre sí, dan origen a un gran número de compuestos. La
sustancia más abundante en la célula viva es el agua y llega a representar más
del 70% de su peso. Esta molécula es de gran importancia pues la mayor parte de
las reacciones intracelulares se llevan a cabo en ambiente acuoso.
En la célula se encuentran gran variedad de biomoléculas. Se pueden distinguir
las de naturaleza inorgánica y las de naturaleza orgánica. En las primeras, se
pueden citar el oxígeno, el dióxido de carbono, el agua, entre otras; en las
segundas, los compuestos del carbono fabricados por los organismos vivos están
divididos en cuatro grandes grupos: carbohidratos, lípidos, proteínas y ácidos
nucleicos. Estos son distintos en sus propiedades físicas y químicas, pero los tres
primeros son similares metabólicamente, al menos, en el hecho de que son
fuentes de energía para los organismos. El rompimiento de las moléculas
orgánicas complejas da como resultado la liberación de energía. Por ejemplo, una
cadena de seis átomos de carbono puede originar residuos de tres átomos de
carbono, los cuales a su vez se pueden utilizar en la síntesis de nuevas moléculas
de seis átomos de carbono o aún en moléculas más largas. De esta manera los
componentes de las moléculas orgánicas se pueden usar en una gran variedad de
combinaciones en los organismos vivos.
La química de la célula está basada en los compuestos de carbono, elemento que
ocupa una posición especial entre los demás. En la naturaleza, el carbono forma
cerca de medio millón de compuestos orgánicos, los cuales se han analizado y
caracterizado y algunos de ellos se han sintetizado de manera exclusiva por los
organismos vivos. La mayoría de los compuestos orgánicos contribuye a la
estructura de las plantas y de los animales, o se usan en su metabolismo ya que
todos ellos contienen una reserva de energía potencial la cual pueden poner a
disposición en sus reacciones exergónicas y usarlas para perpetuar el trabajo en
los diferentes sistemas biológicos.
Los carbohidratos, lípidos y proteínas se encuentran en las membranas celulares;
los ácidos nucleicos sólo hacen parte del núcleo de la célula. Estas moléculas
orgánicas realizan gran cantidad de funciones necesarias para las actividades
celulares.
Los carbohidratos de importancia biológica son: glucógeno, almidón, quitina,
inulina, celulosa, lignina, heparina, ácido hialurónico queratán y dermatán sulfato,
entro otros.
Los lípidos de importancia biológica: ácidos grasos, colesterol, fosfolípidos,
triglicéridos y esfingolípidos.
Las proteínas de importancia biológicas: proteínas simples y proteínas conjugadas
(glucoproteínas, nucleoproteínas, fosfoproteínas, entre otras)
El propósito del ejercicio de esta práctica es familiarizarse con algunas de las
pruebas que se utilizan para detectar moléculas orgánicas según las propiedades
únicas que les proveen sus grupos funcionales. Por lo general, se puede identificar
la clase de molécula orgánica añadiéndole un reactivo que reacciona con un grupo
funcional particular. Si el grupo funcional está presente, el reactivo formará un
color específico. De lo contrario, no habrá cambio en el color. Esto es un ejemplo
de una prueba colorimétrica.
En el laboratorio se identificarán las biomoléculas orgánicas de manera cualitativa
mediante el empleo de unos reactivos químicos específicos para cada una de
ellas. Se identificarán azúcares reductores, proteínas, lípidos y almidones.
Identificación de almidones
Se emplea el reactivo de Lugol. El reactivo está formado por yodo y yoduro de
potasio. La solución yodada entra en contacto con la amilosa, cadena lineal y
soluble de los almidones, fijándose el yodo en ésta formando un precipitado de
color azul-violeta llamado yoduro de amilosa, que permite identificar
cualitativamente los almidones (Fig 4)
Figura 1. Reacción del Lugol con los almidones
Identificación de azúcares reductores
Se emplea el reactivo de Benedict. El reactivo está formado por sulfato cúprico,
carbonato de sodio y citrato de sodio. Los tres componentes se mezclan y forman
el complejo cúprico oxidante, el cual va a reaccionar con el grupo funcional de los
aldehídos hasta formar un precipitado de color naranja llamado oxido cuproso, que
identifica cualitativamente los azúcares reductores más la sal del ácido y agua (Fig
5)
Figura 2. Reacción de Benedict con los azúcares reductores
Identificación de proteínas
Se emplea el reactivo de Biuret. El reactivo está formado por sulfato cúprico y
tartrato de sodio y potasio. Estos componentes forman un complejo oxidante que
interactúa con los aminoácidos fijando el cobre en los enlaces peptídicos dando
una coloración azul-violácea (Fig 6)
Figura 3. Reacción de Biuret con las proteínas
Identificación de la caseína
La caseína es una proteína presente en la leche. La caseína se logra precipitar a
un pH ácido por debajo de su punto isoeléctrico (4.55). Cuando se adicionan gotas
de ácido a la leche, la caseína llega a su punto isoeléctrico perdiendo su equilibrio
haciéndose insoluble, por lo que precipita formando un coagulo
Identificación del colesterol
Se emplea la prueba de Liebermann-Burchard. La reacción se fundamenta en que
la solución clorofórmica del colesterol reacciona con el anhídrido acético y el ácido
sulfúrico para formar un compuesto de color verde característico, que varía de
intensidad con la cantidad del colesterol (Fig 7)
El color verde se debe a la formación del ácido bis-colestadienil monosulfónico.
Figura 4. Reacción de Liebermann-Burchard con el colesterol
3. MATERIALES Y REACTIVOS
Reactivos: Biuret, Benedict, Lugol, ácido acético, cloroformo, ácido sulfúrico
concentrado, anhídrido acético.
Materiales: gradilla, tubos de ensayo, baño de maría, pinzas de madera, huevo,
solución de almidón, solución de glucosa y leche.
4. PROCEDIMIENTO
a) Identificación de los azúcares reductores
En un tubo de ensayo depositar 1 ml de solución de glucosa y añadir 1 ml del
reactivo de Benedict. Llevar al baño de maría durante 15 minutos. Observar los
cambios en la coloración.
b) Identificación de almidones
En un tubo de ensayo depositar 1 ml de solución de almidón y adicionar 1 gota
del reactivo de Lugol. Observar cambios en la coloración.
c) Identificación de proteínas (Ovoalbúmina)
En un tubo de ensayo depositar 1 ml de clara de huevo y 1 ml del reactivo de
Biuret. Observar cambios en la coloración.
d) Identificación de proteínas (Caseína)
En un tubo de ensayo adicionar 2 ml de leche más suficiente ácido acético hasta
formar un coagulo. Luego se retira el líquido sobrenadante y se adiciona 1 ml del
reactivo de Biuret hasta observar cambios en la coloración.
e) Identificación del colesterol
En un tubo de ensayo adicionar 1 ml de anhídrido acético, 1 ml de cloroformo y 2
gotas de ácido sulfúrico concentrado. Mezclar suavemente. Luego agregar 1 ml
de la yema de huevo. Observe los cambios en la coloración.
INFORME DE LABORATORIO No. 4
IDENTIFICACIÓN DE BIOMOLECULAS
NOMBRE________________FECHA_________GRUPO______
CONSULTA
1. Completa el siguiente cuadro con los resultados obtenidos de la práctica de
laboratorio.
Color Nombre del Color del
Biomolécula Reactivo Del precipitado precipitado
reactivo
Azúcares
Proteínas
Almidón
Colesterol
2. Completa el siguiente cuadro indicando tres funciones biológicas para las
biomoléculas citadas.
Biomoléculas Importancia Biológica
Carbohidratos
Lípidos
Proteínas
3. ¿Cuál es el porcentaje lípidos, proteínas y azúcares en las membranas
celulares?
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4. Cita 3 ejemplos de lípidos, proteínas y azúcares presentes en las membranas
celulares.
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