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CARBOHIDRATOS
Integrantes:
Corpas Bedoya Viviana Lucia
De Ávila Fuentes Melanie Cristina
Ferreira Bustamante Gislaine Marina
Galindo Ramos Valentina María
Presentado A:
Álvaro Guevara
Universidad Simón Bolívar
25 de marzo de 2022
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Determinación de Carbohidratos
Introducción:
Los carbohidratos son moléculas de azúcar. Junto a las proteínas y grasas, los
carbohidratos son uno de los tres principales nutrientes de los alimentos y las
bebidas.
El cuerpo descompone los carbohidratos en glucosa. La glucosa o azúcar en la
sangre es la principal fuente de energía para las células, tejidos y órganos del
cuerpo. La glucosa puede usarse inmediatamente o almacenarse en el hígado y
los músculos para su uso posterior.
Estos se pueden dividir en: monosacáridos, disacáridos, oligosacáridos y
polisacáridos.
La fórmula química de los carbohidratos es, Cn(H2O)n. Siendo n el número de
carbonos en la molécula. Contienen hidrogeno, oxígeno y carbono.
Estructuralmente, los carbohidratos consisten en repeticiones de cierto tipo de
subgrupo estructural llamada monosacárido. La combinación de muchas unidades
de monosacáridos forma estructuras lineales o ramificadas llamadas polisacáridos.
OBJETIVO
- Determinar cualitativamente la presencia de carbohidratos en muestras
biológicas.
- Diferenciar azucares reductores de no reductores
MARCO TEORICO
CARBOHIDRATOS
Son macromoléculas de azúcar que, junto con las proteínas y las grasas,
constituye uno de los principales nutrientes presente en alimentos y bebidas.
Dentro del cuerpo, los carbohidratos son descompuestos en glucosa, la principal
fuente de energía para las células, los tejidos y los órganos del cuerpo.
Estas macromoléculas contienen carbono, hidrogeno y oxígeno, en la relación:
Cn(H2O)n donde n es el número de carbonos de la molécula.
Y químicamente se definen como aldehídos (aldosas) o cetonas (cetosas)
dependiendo de la posición de los grupos carbonilos.
Anómeros.
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En una solución acuosa los carbohidratos forman anillos llamados anómeros
(representación de Haworth), formados por la reacción entre el grupo carbonilo y
el penúltimo de los OH.
En esa solución, la forma de anillo (anomérica) y la forma abierta (lineal) de los
carbohidratos son interconvertibles.
En los anómeros, el carbono derivado del grupo carbonilo (cetona o aldehído) y
que contiene el enlace con el O y con el OH es conocido como carbono
anomérico.
Subunidades
Estructuralmente, los carbohidratos están constituidos por la repetición de algún
tipo de subunidad estructural, (similares a las piezas de un juego LEGO)
denominadas monosacáridos. La unión de numerosas unidades de
monosacáridos forma estructuras lineales o ramificadas llamadas polisacáridos.
Los monosacáridos o azucares simples son glucosa, galactosa y fructosa.
La glucosa es un monosacárido con fórmula molecular C6H12O6. Es una hexosa,
es decir, contiene 6 átomos de carbonos y es una aldosa.
La galactosa es un azúcar encontrado principalmente en la leche y demás
productos lácteos. También es una aldosa.
La fructosa es un azúcar presente en todas las frutas, la mayoría de los vegetales
y en sustancias como la miel. Es una cetosa.
Disacáridos
Los monosacáridos, en especial la glucosa y sus derivados, tienen un lapso de
vida muy corto dentro de la célula ya que la mayoría de ellos se degradan para
liberar su energía en las diferentes reacciones celulares. El almacenamiento de
carbohidratos ocurre entonces mediante la unión de los monosacáridos y la
formación de disacáridos y polisacáridos a través de enlaces O-glucosídicos, con
pérdida de una molécula de H2O.
Algunos de los disacáridos más importantes incluyen:
Maltosa: están presente en las semillas germinadas de la cebada. Por la
fermentación de estas semillas se obtiene la cerveza. Si se tuestan las semillas se
obtiene malta sucedánea del café.
Celobiosa: no se encuentra libre en la naturaleza. Puede considerarse la unidad
estructural de la celulosa.
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Lactosa: se encuentra libre en la leche de los mamíferos, en porcentajes distintos
(4 – 5 %) según la especie. Es el principal azúcar animal. No forma polímeros.
Sacarosa:
Es el azúcar de mesa. Se extrae del azúcar y de la remolacha. Constituyente de la
savia elaborada de los vegetales. Se encuentra en los órganos de reserva, raíces,
frutos y semillas.
Producto de la unión de una gran cantidad de monosacáridos surgen los
polisacáridos.
Los más conocidos incluyen:
Almidón: abundante en semillas y tubérculos. Formados por enlaces glicosídicos
tipo C 1-4 y C 1-6
Glucógeno: Polisacárido de reserva en animales. Se acumula en células
musculares y células hepáticas.
Azúcares reductores
Un azúcar reductor es un compuesto (mono o disacárido) con un grupo aldehído
libre (que no participa en el enlace glicosídico) en su carbono anomérico, capaz de
reducir agentes oxidantes.
Maltosa: componente de los granos de cebada (el carbono anomérico C1 queda
libre como reductor.)
Sacarosa: componente del azúcar de mesa (ambos carbonos anoméricos forman
el enlace glicosídico)
Pruebas colorimétricas: Carbohidratos
Para la determinación de la presencia de carbohidratos en muestras biológicas
existen diferentes tipos de prueba. En este laboratorio evaluaremos la presencia
de azucares reductores (Benedict) y almidones (Lugol)
Reacción de Benedict
Es una prueba semi-cuantitativa. El color que se obtiene da una idea de cuanta
azúcar reductora está presente en la solución.
Solución azul: ninguna
Solución de verde a amarilla: trazas de azucares reductores
Solución naranja rojiza: concentración moderada
Solución rojo ladrillo: gran concentración de azucares reductores
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Esto ocurre porque los azucares reductores en condiciones alcalinas forman
enodioles. Los enodioles son poderosos agentes reductores. Pueden reducir los
iones cúpricos a iones cuprosos, que es la base de la reacción de Benedict. El
hidróxido cuproso durante el proceso de calentamiento se convierte en óxido
cuproso rojo.
Reacción Lugol.
La base de la reacción es la formación de cadenas de poliyoduro a partir de la
reacción del almidón con el yodo presente en la solución del Lugol. La amilosa, el
componente del almidón de cadena lineal, forma hélices donde se juntan las
moléculas de yodo, formando un color azul oscuro a negro, dependiendo de la
concentración de almidón.
METODOLOGIA:
Experimentos:
Etiquetado de material
Se marcan los tubos de ensayo y los frascos con las muestras (jugo de
naranja, leche, glucosa y sacarosa).
Sacarosa.
Se toma una cucharada de azúcar y se deposita en el recipiente plástico,
se adiciona agua y se remueve con la cuchara.
Deposita 1ml de la solución que acabas de hacer en un tubo de ensayo
que marcamos con el nombre de sacarosa en el que realizaras la prueba
usando la pipeta de Pasteur.
Reacción de Benedict
Con una jeringa agregamos 1ml de cada muestra en los tubos destinados
para la reacción.
Se adiciona 1ml de REACTUVO DE BENEDICT a cada muestra.
Mueva la muestra suavemente sin tocarla y sin introducir elementos para
mezclar.
Pasamos la muestra con BENEDICT a baño maría por 10 minutos.
Pasado los 10 minutos retiramos los tubos las muestras del baño maría con
cuidado de no quemarnos y con ayuda de una pinza para retirarlos.
Se puede observar que al sacar los tubos de ensayo cada uno tiene un
color diferente, la leche tiene un color amarrilla, la glucosa un color café, la
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sacarosa tiene un color verde y la muestra del jugo de naranja un color casi
negro.
Hidrólisis de la sacarosa
Se usará ácido acético (vinagre) y calentamiento
Agregue 1ml de muestra a un tubo de ensayo que este marcado como
hidrolisis, y adicione 20 gotas de ácido acético (vinagre), para después
llevarlo al baño maría.
Introduzca el tubo de hidrolisis de sacarosa a baño maría por 10 minutos.
Una vez transcurrido el tiempo puede retirar el tubo del baño maría.
Para comprobar la hidrolisis, repita la prueba de Benedict sobre la muestra
que recién se extrajo de baño maría.
Adicione 1ml del reactivo de Benedict a la muestra, mueva sin tocar y sin
introducir elementos para mezclar.
La muestra con Benedict introdúzcala nuevamente en baño maría por 10
minutos
Retire la muestra con cuidado del baño maría.
- Responde:
¿comparado con el primer ensayo de la sacarosa, qué diferencias ves con
el ensayo de la hidrolisis?
¿por qué crees que ocurrió este cambio? Usa el principio de la reacción.
¿Cuál de los dos ensayos tiene mayor concentración de azúcares
reductores? ¿por qué?
Reacción de Lugol (preparación de almidón)
Prepare una solución de almidón usando fécula de maíz y agua.
Para aquello mida la fécula de maíz con una tapa de gaseosa y el agua
con una jeringa desechable de 10ml
Coloque en un recipiente de plástico la cantidad de fécula contenida en
una tapa de gaseosa. Adicione 30ml de agua, llenando la jeringa hasta los
10ml y adicione esta cantidad 3 veces.
Agite la solución con una cuchara.
Reacción de Lugol - Fécula
Tome la solución de almidón que se preparó anteriormente y deposite 1ml
en el recipiente el cual vaya a realizar la prueba (frasco de vidrio). Mida este
volumen (1ml) con la ayuda de una pipeta Pasteur o una jeringa
desechable.
Con ayuda de una pipeta Pasteur o jeringa adicione 4 gotas de reactivo de
Lugol, removiendo el contenido.
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- Para observar una reacción negativa, use un control negativo, en este caso
glucosa. Un control negativo se lleva a cabo con una muestra cuando se
sabe que dará negativo en una prueba negativa.
- Espere que la prueba dé negativa. use el resultado de la glucosa y
compáralo con el de la fécula.
- Responde:
¿Comparado con el control negativo, qué diferencias ves en el ensayo de
fécula de maíz?
¿por qué crees que ocurre esta diferencia? Usa el principio de la reacción.
Reacción de Lugol – Papa
Corte en cuadros una papa cruda.
En un recipiente deposite los cuadros de papa y adicione 20 gotas de Lugol
a lo largo de la muestra. Observe los resultados
- Responde:
¿comparado con el ensayo de fécula de maíz, el ensayo de la papa
presenta alguna diferencia?
Si existe, ¿por qué crees que ocurre esta diferencia? Usa el principio de la
reacción
Reacción de Yoduro con Isodine
Usaremos isodine solución en lugar de lugol para experimentar la reacción de
Yoduro en la detección de almidones Nota: No use isodine espuma o bucofaríngeo
¡no darán resultados!
Preparamos una solución de almidón usando fécula de maíz y agua como
lo vimos en el video
Adiciona 4 gotas de isodine solución a la mezcla y registra los resultados
Como control negativo usaremos una solución de sacarosa
Para prepararla, mide el azúcar de mesa con una tapa de gaseosa y el
agua con ayuda de la jeringa, llenándola hasta los 10 mL
Adiciona esta cantidad 5 veces (50mL). Agita la solución con una cuchara
Al control negativo adiciona 4 gotas de isodine solución y registra los
resultados
-Responde:
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¿existe diferencia entre la reacción de FECULA DE MAÍZ con ISODINE y
la reacción de Lugol?
¿Por qué crees que existen estas diferencias?
¿Cuál es la principal diferencia entre el ISODINE y LUGOL en relación a su
concentración de yodo?
Isodine y papa
Corta cuadros pequeños de papa, esa será tu muestra 1
Licua o macera otra parte de la papa con un poco de agua, esa será tu
muestra 2
Pasa 1mL de cada una de las muestras a un recipiente de vidrio y adiciona
a cada una 4 gotas de isodine solución
-Responde
¿Existen diferencias entre los resultados obtenidos para la muestra 1 y la
muestra 2?
Si existen diferencias ¿Por qué crees que ocurren?
¿Para la reacción de la papa, existen diferencias entre la reacción con
Isodine y la reacción de Lugol?