Ortega Ruiz Marco Uriel 3QV2 Problemas de Crecimiento Microbiano
1. Usted inoculó un volumen de una suspensión microbiana en crecimiento en un medio de
cultivo hasta contener 2X10^5 bacterias/ml, se observa que el cultivo creció sin tener fase
Lag hasta llegar a una población de 9 X 10^9 células/ml después de una incubación durante
6 horas sin entrar en fase estacionaria. Diga usted ¿cuál es el tiempo de generación del
microorganismo en este medio de cultivo? R: 23.28 min.
2. Una población bacteriana con una cantidad inicial de 4.5X10^5 bacterias/ml, se multiplicó
en un medio de cultivo sin tener una fase de adaptación, hasta alcanzar la cifra de 2.68 X
10^10 células/ml en 7 horas 30 minutos, sin haber alcanzado la fase estacionaria. ¿Cuál es
el tiempo medio de generación de los microorganismos en dicho cultivo?
3. Se inoculó 1 ml de un cultivo de Escherichia coli conteniendo 4 X 10^6 células en un
matraz conteniendo 25 ml de medio de cultivo peptonado, y se incubó a 37°C. A los 284
minutos de incubación se alcanzó la fase estacionaria de 3X10^9 células/ml sin que hubiese
fase de inducción.
¿Cuál es el tiempo medio de generación en el medio de cultivo peptonado?
4. Aerobacter aerogenes se sembró simultáneamente en tres medios diferentes: peptona y
dos medios químicamente definidos que contienen glucosa y ácido cítrico respectivamente,
como únicas fuentes de carbono. El inóculo contenía en cada uno de los casos 5 X 10 ^5
bacterias/ml. Transcurridas 5.5 h se hicieron los respectivos recuentos en cada cultivo,
obteniéndose para la peptona el valor de 8,934 X 10^6 , para la glucosa 51.2 X 10^6 y para
el citrato 1.728 X 10^6 bacterias/ml. El cultivo de citrato fue el único que manifestó fase de
inducción cuya duración fue de 85 minutos y los microorganismos de cada cultivo se
encontraban aún en fase LOG de crecimiento.
¿Cuál es el tiempo de generación medio para el microorganismo en cada medio de cultivo?
5. En un medio de cultivo conteniendo glucosa y una sal amónica se sembró un cultivo de
Salmonella entérica serotipo Typhi hasta obtener un número inicial de 5 X 10 ^5 células/mL.
Transcurridos 300 minutos de incubación, el cultivo todavía se encontraba en fase
logarítmica con una población de 35 X 10^6 células /ml. Si el tiempo medio de generación
de este microorganismo en el medio de cultivo es de 40 minutos, determinar si existe o no
fase de inducción y, en caso afirmativo, calcular su duración.
6. Usted tiene un matraz con 25 mL de medio de cultivo líquido adicionado de maltosa como
única fuente de carbono y lo inocula con 1 mL conteniendo 5 x 10^6 células de Escherichia
coli. Después de incubar durante 12 horas, alcanza una población de 6 x 10 ^9 células/mL
con un tiempo de generación de 32 minutos. Diga usted si el cultivo presenta fase LAG y si
existe ¿Cuál es su duración? INDIQUE LAS OPERACIONES COMPLETAS. R= Fase Lag:
242.24 min.
7. Usted tiene un matraz con 50 ml de medio de cultivo líquido adicionado de sacarosa
como única fuente de carbono y lo inocula con 50 X 10^6 células de Escherichia coli.
Después de incubar durante 5 horas, alcanza una población de 38 X 10^8 cels/ml con un
tiempo de generación de 25 min. Diga usted si el cultivo presenta fase LAG y si existe ¿Cuál
es su duración?
8. Se realiza una cinética de crecimiento de Klebsiella pneumoniae inoculando 5 ml de la
suspensión bacteriana, conteniendo 2X10^7 cels/ml, en un matraz con 45 ml de medio de
cultivo sintético conteniendo glucosa y citrato de sodio como única fuente de carbono y
teniendo un tiempo medio de generación de 30 min. Después de incubar el matraz durante
11 h a 37°C/250 r.p.m. se tomó una muestra del cultivo y se realizó una cuenta viable por
triplicado con una alícuota de 0.1 ml, obteniéndose los siguientes resultados:
Dilución Primera placa (colonias) Segunda placa (colonias) Tercera placa (colonias)
10^-7 Incontables Incontables Incontables
10^-8 Incontables Incontables Incontables
10^-9 293 309 290
10^-10 31 28 33
Conteste las siguientes preguntas:
¿Cuál es la cantidad de bacterias/ml que hay al inicio de la cinética de crecimiento (N0)?
R= 2x10^6 cel./ml
¿Cuántas bacterias había en el inóculo?
R= 1X10^8 cels. /5 mL
¿Cuál es la cantidad de bacterias que hay en la suspensión bacteriana a las 11 h de
incubación (Nf)?
R= Nf = 3.066 X10^12 cel./ml
¿Cuántas generaciones bacterianas ocurrieron durante este período de tiempo?
R= 20.563 generaciones
Determine si hubo fase Lag y si la hubo ¿cuál es su duración? R= Fase Lag y dura 43.11min.
Si se hubiera incubado por más tiempo la suspensión bacteriana ¿qué tipo de curva se
habría obtenido en la cinética de crecimiento? Y ¿por qué? Haga la gráfica correspondiente,
indicando las fases que componen a ésta.
9. Se realiza una cinética de crecimiento de Klebsiella pneumoniae inoculando 5 ml de la
suspensión bacteriana (conteniendo 3 X 10^7 cel/ml) en un matraz conteniendo 45 ml de
medio de cultivo sintético conteniendo glucosa y citrato de sodio como única fuente de
carbono con un tiempo de generación de 25 min. Después de incubar el matraz durante 8
h a 37°C/250 rpm se tomó una muestra del cultivo, se realiza una cuenta viable por triplicado
con una alícuota de 0.1 ml y se obtienen los siguientes resultados:
Dilución Primera placa (UFC) Segunda placa (UFC) Tercera placa (UFC)
10^-7 Incontables Incontables Incontables
10^-8 524 492 507
10^-9 58 51 59
10^-10 6 4 7
Conteste las siguientes preguntas:
A. ¿Cuál es la cantidad de bacterias/ml que hay en la suspensión bacteriana a las 8 h (Nf)
de incubación?
B. ¿Cuál fue el número de bacterias/ml al inicio (No) de la cinética de crecimiento?
C. ¿Cuántas generaciones bacterianas ocurrieron en este periodo de tiempo?
D. Determine si hubo fase LAG y si la hubo ¿cuál es su duración?
E. Si se hubiera incubado por más tiempo la suspensión bacteriana ¿qué tipo de curva se
habría obtenido en la cinética
de crecimiento? y ¿por qué?
10. Se sembró Klebsiella pneumoniae a una concentración de 5X 10^5 cels. /ml en un medio
que contenía 0.25 g de glucosa/L y una cantidad desconocida de rafinosa. No hubo fase de
inducción y las bacterias crecieron con un tiempo de generación de 40 min. consumiendo
la glucosa. Cuando la glucosa se agotó, las bacterias se adaptaron a la rafinosa creciendo
con un tiempo medio de generación de 45 min. Hasta alcanzar una población estacionaria
de 3.08X10^8 cels/ml, transcurridas 6 horas y 30 minutos de la inoculación.
Determine la duración de la fase de adaptación entre los dos ciclos de crecimiento (R= Tlag
= 11.4 min), así como la cantidad de la rafinosa presente en el medio (R=0.499 g/L), habida
cuenta que la relación entre la población estacionaria y la concentración de azúcar es una
función lineal hasta 0.9 g/L de cualquier azúcar a cuya concentración la población
estacionaria alcanzada es de 3.7X10^8 bacterias/ml
