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Fermentación en Estado Sólido: Ventajas y Desafíos

Este documento describe los diferentes tipos de fermentación en estado sólido, incluyendo las ventajas e inconvenientes. También cubre temas como la selección de microorganismos, características de los sustratos y variables que afectan el proceso.

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Fermentación en Estado Sólido: Ventajas y Desafíos

Este documento describe los diferentes tipos de fermentación en estado sólido, incluyendo las ventajas e inconvenientes. También cubre temas como la selección de microorganismos, características de los sustratos y variables que afectan el proceso.

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FERMENTACION EN ESTADO SÓLIDO

A diferencia de los cultivos sumergidos en los que los nutrientes se encuentran en forma soluble
en un medio liquido, en los cultivos en estado sólido el sustrato está transformado por el
microorganismo es un sólido.

En general, se distinguen dos clases de cultivos en estado sólido:


 La primera se refiere a aquellos cultivos en los que el material sólido, insoluble en
agua y humedecido actúa al tiempo como principal fuente de nutrientes y como
soporte físico para un microorganismo. En ocasiones además el sustrato se
enriquece con nutrientes adicionales a fin de mejorar la producción.
 En la segunda clase se consideran los cultivos en los que el soporte es un sólido
nutricionalmente inerte que actúa únicamente como lugar de anclaje del
microorganismo, y que, para el cultivo, se embebe en una solución nutritiva.

VENTAJAS E INCONVENIENTES DE LA FERMENTACIÓN EN ESTADO SÓLIDO

VENTAJAS

o Simplicidad en los medios de cultivo, ya que generalmente un único sustrato proporciona


casi todos los nutrientes necesarios.
o Fermentadores con menores requerimientos espaciales, ya que los sustratos se utilizan
más concentrados y no utilizan grandes volúmenes de agua.
o Mayor simplicidad en el diseño de los fermentadores y de los sistemas de control.
o Mayores facilidades para la obtención y aplicación del inoculo.
o Facilidad para el escalado de los procesos.
o Necesidades reducidas de disolventes para la extracción de los productos.
o Rendimientos comparables, e incluso superiores, a los correspondientes procesos en
cultivo sumergido.
o Reducido el riesgo de contaminantes bacterianas, menos aptas para soportar la baja
actividad de agua que caracteriza a estos sistemas. Posibilidad, enocasiones, de trabajar
incluso en condiciones no asépticas.
o Elevada aireación del sistema, lo que hace a esta modalidad de cultivo especialmente
adecuada a aquellos procesos que impliquen un metabolismo oxidativo intenso.
o Bajos requerimientos energéticos. A menudo no es preciso autoclavar, aireae, ni agitar.
o Ambiente similar al de los hábitats naturales de los microorganismos utilizados.
o Reducido volumen de efluentes.

INCONVENIENTES:

o Frecuente necesidad de pretratamiento de los sustratos (molienda, prehidrolisis


parciales).
o Dificultad para mantener los niveles óptimos de humedad durante la fermentación.
o Ausencia de métodos analíticos simples para determinar el crecimiento microbiano.
o Dificultad de control y regulación de variables del cultivo como temperatura, humedad, pH
y oxigeno libre durante el proceso.
o Dificultad para la agitación en aquellos procesos que así los requieran.
o Frecuente necesidad de inoculo voluminoso.
o Escasez de diseños y desarrollos de ingeniería para la construcción de los fermentadores,
así como para ciertas operaciones (inoculación, extracción de los productos).

SELECCIÓN DE MICROORGANISMO

No todos los microorganismos se encuentran capacitados para desarrollarse sobre un sustrato


sólido.

Las principales limitaciones son consecuencias de los requerimientos de actividad de agua de los
diversos tipos de microorganismos y de su capacidad de anclaje y/o la penetración en matrices
más o menos porosas.

En efecto, de modo general las elevadas exigencias en cuanto a la actividad de agua de las
bacterias hace prácticamente sólo puedan crecer en una fase liquida. Las levaduras por el
contrario, algo menos estrictas, pueden ser utilizadas en fermentación en estado solido. Si bien
diversas especies de levaduras se encuentran en forma natural creciendo sobre frutas o granos
vegetales, existen pocas referencias sobre su utilización dirigida en cultivos en estado solido.

Pese a que los microorganismos utilizados tradicionalmente en la industria alimentaria son las
bacterias y levaduras, desde el punto de vista de la fermentación en estado sólido son sin duda los
microhongos son los microorganismo de elección, y ello, al margen de que forma natural que
crecen sobre los materiales sólidos, por dos motivos principales:

o Facultad para utilizar mezcla de varios polisacáridos. De modo general los microhongos
poseen sistemas enzimáticos completos que les permiten utilizar indistintivamente varias
fuentes de carbono.
o Capacidad de adherencia y penetración del sustrato. Es claro que la estructura miceliar de
los hongos filamentosos les confiere en este sentido ventaja frente a otros
microorganismos.

Adicionalmente, el microorganismo debe ser capaz de crecer en presencia de elevadas


concentraciones de nutriente, al tiempo que poseer una baja tendencia a la esporulación y alta
hacia el crecimiento vegetativo rápido.

CARACTERISTICAS DEL SUSTRATO

En la mayor parte de las fermentaciones en estado solido el soporte y el sustrato coinciden. Por
ello es frecuente la formulación de los medios de cultivo se tase en materiales tales como granos
de cereales, semillas oleaginosas y residuos agrícolas o forestales.
Con todo, y dependiendo del producto de fermentación que se desee obtener, los sustratos deben
poseer preferentemente las siguientes características:

o Insoluble en agua o en solución de humectación, con el fin de garantizar durante la


incubación las condiciones de un cultivo en estado sólido.
o Elevado contenido en carbohidratos y/o proteínas ya que la modalidad de cultivo, permite
la utilización de elevadas concentraciones de sustrato.
o Estructura granular que posibilite la adhesión y penetración del microorganismo, o, en
caso contrario, facilidad de rotura para conseguir granulometrías adecuadas. Sin duda este
aspecto, que puede representar un costo elevado, condiciona en gran medida el proceso.
Asi , mientras cereales como el arroz pueden utilizarse sin ningún pretramiento, el trigo o
el maíz necesitan de una fragmentación previa para proporcionar al microorganismo
superficies adecuadas para el crecimiento.
o Fermentable por un solo microorganismo. En el caso de los materiales lignocelulosicos , a
excepción de folipurusversicolor y algún otro microhongo no existen microorganismos que
tengan sistemas enzimáticos completos para utilizar estos sustratos, de ahí que las
estrategias aplicables a estas situaciones se basan en la utilización conjunta o secuencial
de distintos microorganismos que permitan la máxima conversión o tienen en el
pretratamiento de los materiales (vapor, álcalis, agentes oxidantes).
o Baja tendencia a la aglomeración con el micelio y a la formación de masas compactas
durante la incubación, a fin de evitar restricciones difusionales de los gases.

Otra estrategia, y ésta es la mayor interés en el tratamiento de efluentes, consiste en la utilización


de materiales de soporte nutricionalmente inertes impregnados con una solución de sustrato que
a su vez actúa como un agente humectante. En estos casos, la composición de la solución nutritiva
presenta menos problemas que en el caso anterior ya que se dispone de una libertad casi total en
el diseño del medio. Tan solo es necesario guardar ciertas precauciones en la elección del pH
inicial, debido a la relativa estabilidad de su perfil a lo largo de la incubación.

En este último tipo de sistemas resulta especial interés la elección del soporte solido inerte.
Aunque la variedad de materiales potencialmente utilizables es muy superior a los empleados en
los cultivos en estado solido en los que el sustrato y soporte coinciden, básicamente deben poseer
características físicas similares en cuanto a porosidad, dureza, tenacidad y bajo costo.

Destacan como materiales de soporte algunos residuos celulósicos agrícolas, previamente tratados
para desproveerlos de nutrientes. También se encuentran descrito el uso de materiales
inorgánicos como la vermiculita que , embebida en soluciones de almidón de 4% ( cuya elevada
viscosidad imposibilitaría la existencia de condiciones aeróbicas en cultivos sumergidos), se
emplea en la producción de amilasas o la perlita, silicato utilizado por su notable carácter inerte.
También se ha utilizado como soporte la amberlita, resina de intercambio iónico, embebida en una
solución nutritiva.
La utilización de plásticos y espumas sintéticas como soporte inerte merece una mención
particular. Su aplicación a los cultivos en estado solido es prácticamente inexistente a pesar de las
enormes potencialidades que ofrece debido a la casi ilimitada gama de porosidades, capacidades
absorbentes e hidrofilias. Además son materiales de gran resistencia mecánica y bajo costo que
pueden ser fácilmente regenerados y cuya manipulación resulta sencilla por su baja densidad,
permitiendo, sin aporte de impurezas, la recuperación de los productos de fermentación a
concentración elevada mediante un simple prensado. Por otro lado, dada la dificultad que entraña
la obtención de modelos de este tipo de cultivos cuando el soporte y sustrato coinciden parece
razonable suponer que la simplificación que supone el uso de espumas sintéticas permita, en un
futuro, obviar este problema.

VARIABLES QUE CONDICIONAN LOS CULTIVOS EN ESTADO SÓLIDO

Al igual que en los cultivos sumergidos, una adecuada selección y control de las variables que
influencian el proceso, condiciona el éxito de la fermentación en estado solido. Algunas de las mas
importantes son:

o Contenido en humedad del sustrato

Sin duda es el factor más decisivo sobre una fermentación en estado solido. El nivel adecuado es
en función de la naturaleza del sustrato, el tipo de producto final y los requerimientos del
microorganismo. Evidentemente se encuentra relacionado con la actividad de agua (aw) cuya
influencia sobre el crecimiento y las actividades metabólicas delos microorganismos está
ampliamente documentada.

Como ya se señalo , los microhongos los microorganismos mas adecuados, en función de su bajos
requerimientos de actividad de agua, para desarrollarse sobre sistemas en estado solido. Con
todo, se debe tener presente que los requerimientos de aw para la producción de metabolitos son
sensiblemente superiores a los necesarios para el crecimiento, por lo que el mantenimiento el
control de la humedad en los cultivos puede utilizarse como recurso para el control externo de
este tipo de procesos.

Asi un alto contenido de humedad en el sustrato provoca en numerosas situaciones descensos de


la porosidad y por consiguiente de la difusión del oxigeno, aumenta el riesgo de contaminación
bacteriana e incrementa la formación de micelio aéreo, efectos que es necesario prevenir en una
fermentación en estado solido.

Complementariamente en un fenómeno igualmentye indeseable se observa en cultivos con una


reducida actividad de agua ya que cuando esta desciende por debajo del limite de crecimiento, se
puede producir la esporulación del microorganismo.

Los mencionados efectos de la actividad de agua sobre el crecimiento y la producción de


metabolitos son consecuencia en mayor o menor medida de la acción que esta variable ejerce
sobre la estabilidad, actividad y especificidad de las enzimas tanto intra como extracelulares. Asi,
mientras que la estabilidad frente a la desnaturalización térmica se ve incrementada a bajos
niveles de aw, la especificidad y la actividad enzimática pueden verse deterioradas al dificultarse el
contacto de la enzima con el sustrato.

Generalmente el contenido inicial en humedad del sustrato oscila entre el 30% y el 75%. Durante
el curso de las fermentaciones se ocasionan reducciones de este nivel debidas tanto a perdidas
por evaporación como a la propia actividad metabólica de los microorganismos. Por ello es
frecuente la implementación de humidificadores en los fermentadores, o bien la simple adición a
intervalos de agua estéril al sistema.

o Temperatura

Es frecuente que, como consecuencia de la actividad metabolica de los microorganismos, se


produzca una elevación de la temperatura en los fermentadores, especialmente en las zonas
internas de sustrato. Este incremento térmico afecta directamente al crecimiento, germinación de
las esporas y/o a la formación del producto. Por ello, es conveniente dotar a los fermentadores de
mecanismos que permitan disipar el calor, siendo los mas frecuentes la circulación de aire en el
interior del reactor, inmersión en baños de agua o su instalación en habitaciones de temperatura
controlada.

En algunos casos -especialmente a escala de laboratorio- los cultivos poseen alta porosidad,
pequeño espesor de la capa de sustrato y partículas de granulometría adecuada para no provocar
compactaciones elevadas. En estas condiciones el calor generado durante la fermentación se
disipa sin dificultad, siendo necesario, por el contrario, un aporte externo de energía para
mantener una temperatura adecuada en cultivos.

La temperatura además, interacciona con otras variables como la actividad de agua, cuyos rangos
óptimos para el crecimiento y la producción de metabolitos se ve modificados con las variaciones
de la temperatura.

o pH

El seguimiento de este parámetro es particularmente dificultoso en un proceso de fermentación


en estado sólido.

Los sistemas de fermentación en estado sólido suelen poseer una relativa estabilidad frente al pH
debido a la elevada capacidad tampón de los sustratos usuales, por lo que mediante el ajuste
inicial de este parámetro en el sustratoes posible eliminar la necesidad de su control reduciendo la
incidencia real de esta variable.

Aun así resulta conveniente realizar la humectación de los sustratos con soluciones tampón para
evitar cambios de pH en áreas localizadas

. Esta estrategia resulta adecuada en los casos en los que los cultivos no se someten a agitación y
la fuente de nitrógeno se suministra como sales de amonio, circunstancias que promueven
bruscos descensos del pH.
Aireación y agitación

Mediante los sistemas de aireación y agitación se pretende favorecer los procesos de transferencia
de masa tanto a nivel interparticular como intraparticular.

A nivel interparticular el proceso de transferencia de masa más importante es la difusión de gases,


en especial la transferencia de oxigeno y depende esencialmente de la proporción de espacios
huecos en la masa de fermentación y de la aireación. La proporción de espacios huecos es, a su
vez, función de la geometría de las partículas de sustrato, del contenido en humedad y de la
naturaleza química del sustrato, y debe representar al menos un 305 del volumen total de la masa
de fermentación.

Aunque se han desarrollado métodos para determinar el coeficiente de difusión interparticular de


los gases en los sistemas en estado solido, continua siendo difícil establecer la existencia de
posibles limitaciones difusionales. Es por ello que normalmente se intenta evitar el problema
recurriendo a la aireación de los sistemas, tanto a escala laboratorio como industrial, mediante la
inyección en los fermentadores de aire esteril a presión. Las tasas de aireación se establecen de
acuerdo con el tipo de microorganismo, los requerimientos para la síntesis del producto objetivo,
el grado de eliminación del calor y CO2, el espesor de la capa de sustrato empleada y el numero de
espacios intesticiales que dejan las partículas de sustrato.

Es especialmente interesante aumentar, en la mayor parte de los procesos, la transferencia de


axigenos y la eliminación de CO2. Para ello es frecuente que los sistemas de aireación se
complementen con una agitación de los contenidos del fermentador. En este sentido la literatura
al respecto da cuenta de opiniones enfrentadas. Asi mientras para algunos es indispensable
efectuar agitaciones mas o menos intensas con el fin de permitir la eliminación de CO2 formado y
la renovación del aire en los espacios intersticiales, para otros las lesiones ocacionadas al micelio
sometido a agitación hacen desaconsejable tal medida. También aquí las espumas pueden
presentar ventajes sobre otros materiales mas abrasivos.

Con respecto a los procesos de transferencia de masa intraparticulares los aspectos a considerar
se refieren por un lado a la difusión de nutrientes hacia el micelio y por otro a la degradación de
los sustratos solidos por las enzimas.

La difusión de los nutrientes hacia el micelio en el interior de las partículas puede evaluarse
mediante el factor de eficiencia (FE)que se define como la relación entre la velocidad total de
reacción con limitaciones difuncionales y la velocidad de reacción si todos los sustratos estuvieran
igualmente disponibles.

Debido a que la mayor parte de los sustratos empleados en los cultivos en estado solido son
poliméricos y necesitan ser previamente degradados por las enzimas extracelulares, las
limitaciones difuncionalesintraparticulares juegan un importante papel. Mientras para partículas
con tamaño de poro grande la resistencia a la transferencia de masa es prácticamente
insignificante, cuando el tamaño de poro es pequeño, es conveniente minimizar las limitaciones
difuncionales disminuyendo el diámetro de las partículas.

DISEÑO DE FERMENTADORES EN ESTADO SÓLIDO

Principios de diseño de un biorreactor

Un bio-reactor es simplemente un recipiente en el cual se lleva a cabo un proceso bioquímico que


involucra organismos o sustancias bioquímicamente activas derivadas de dichos organismos
(enzimas). Su función principal es proporcionar, junto con el medio de cultivo, un ambiente físico-
químico óptimo para llevar a cabo el bioproceso.

El uso de una matriz sólida, ya sea un soporte inerte o un soporte-sustrato, tienen implicaciones
relevantes sobre el diseño y operación de bio-reactores. La maximización de la velocidad de
formación del producto y/o microorganismo y su rendimiento dentro del biorreactor son claves en
la optimización del proceso.

En comparación con la fermentación sumergida, la fermentación en estado sólido (SSF) contiene


menor proporción de agua, pero una fase gaseosa importante existente en la estructura del medio
sólido. Esta característica es de gran importancia porque la conductividad térmica del aire es
mucho menor a la del agua.

Otro punto es la amplia variedad de matrices usadas en SSF, las cuales varían en términos de
composición, tamaño, resistencia mecánica, porosidad y capacidad de retención del agua. Todos
estos factores influyen en el diseño de reactor y las estrategias de control para los parámetros.

En los procesos de SSF la trasferencia de oxigeno puede ser un factor limitante para algunos
diseños, el problema es más complejo y afecta el control de dos importantes parámetros: la
temperatura y el contenido medio de agua en el sólido.

Otro factor que afecta el diseño del biorreactor: es la morfología del hongo y su resistencia
mecánica.

Clasificación de los Bio-reactores usados en SSF


Podemos clasificar a los biorreactores empleados en los procesos de fermentación en estado
sólido en dos categorías:

Bio-reactores empleados a escala de laboratorio, utilizando cantidades medias de solido seco que
van de unos pocos gramos a unos pocos kilogramos

Bio-reactores empleados a escala de planta piloto o industrial, donde se emplean cantidades que
van desde kilogramos hasta toneladas de medio de cultivo sólido.

Ambas categorías se operarán en condiciones asépticas

Consideraciones Que Afectan El Diseño Y La Operación

En un proceso de fermentación, el biorreactor provee del ambiente para el crecimiento y la


actividad de los microorganismos. El uso de una matriz sólida, ya sea un soporte inerte o un
soporte-sustrato, tiene implicaciones relevantes sobre el diseño y operación de biorreactores.

La maximización de la velocidad de formación de producto y su rendimiento dentro del


biorreactor son clave en la optimización del proceso.

Algunas de las características requeridas en un sistema de biorreactor de lecho sólido son las
siguientes:

 El material de construcción del biorreactor debe ser barato, inerte, resistente a la


corrosión y abrasión, no tóxico y capaz de soportar presión (generalmente presión de
vapor por esterilización).

 El biorreactor debe ser capaz de trabajar en condiciones asépticas, preferentemente libre


de contaminación microbiológica, para prevenir riesgos accidentales debido a la
contaminación biológica, sin embargo algunos procesos como el composteo pueden ser
tratados como no estéril.

 El control y regulación de los parámetros operacionales debe ser eficiente; de tal modo
que puede ser requerido un sistema de enfriamiento para controlar el calor metabólico
generado.

 El sistema del biorreactor debe tener los arreglos apropiados de aireación y agitación que
permitan la uniformidad en la biomasa.

 El diseño del biorreactor debe simplificar el mantenimiento, la carga-descarga, muestreo y


la recuperación del producto.
APLICACIÓN DE LA FERMENTACIÓN EN ESTADO SÓLIDO A LA INDUSTRIA ALIMENTARIA

Son tres los grupos principales de aplicaciones de la fermentación en estado sólido en la industria
alimentaria. En primer lugar las referidas a la obtención de alimentos tanto desde el punto de vista
de mejora de los procesos tradicionales de producción como del desarrollo de nuevos procesos. Se
incluyen en este grupo aquellas aplicaciones destinadas a mejorar la composición nutritiva,
obtención de aromas característicos, prevención del deterioro e incremento de la digestibilidad de
los alimentos. Aunque en ocasiones la producción de enzimas se realiza con alguna de las
finalidades anteriores, el notable desarrollo que ha experimentado este campo justifica que su
producción en estado solido pueda clasificarse en grupo aparte. Esto es así, especialmente en el
caso de obtención de amilasas, lipasas, proteasas y pectinasas. Por ultimo, la aplicación de esta
modalidad de cultivo a la obtención de moléculas de interés en tecnología de alimentos, tales
como ácidos orgánicos, etanol o colorantes.

Con respecto a los sustratos de fermentación utilizados en estas aplicaciones, es necesario señalar
que en los últimos años es creciente la tendencia a sustituir aquellas materias primas tradicionales
que constituyen en si misma alimentos (principalmente granos cereales) por subproductos y
materiales residuales o bajo coste la propia industria agroalimentaria. Esta estrategia presenta
importantes ventajas. Así, la composición de estos materiales es especialmente adecuada para ser
utilizados como sustrato y no suele ser necesario someterlos a pretratamiento. Por otro lado, es
así posible reducir los costes del proceso asociados al consumo de materia prima y, al convertirlos
en productos útiles, permite reintegrarlos en el ciclo productivo.

Por último, se muestra en la siguiente tabla, algunas aplicaciones alimentarias mas representativas
de procesos de fermentación en estado solido utilizando materias prima de carácter residual.
BALANCES DE MATERIA Y ENERGÍA EN BIORREACTORES

El biorreactor puede ser tratado como un todo si se dibuja una frontera al exterior del
biorreactor y solo se consideran los intercambios de masa y energía entre el biorreactor y
sus alrededores. Las corrientes de aire transportan masa (N2, CO2, O2 y vapor de agua) y
energía dentro y fuera del biorreactor. La tendencia para el aire es salir del biorreactor
más caliente y llevando consigo más agua que cuando entró, y una temperatura y
humedad más alta contribuye a la remoción global del calor del biorreactor. La
composición del aire puede ser diferente a la salida y a la entrada. El aire de salida
generalmente tiene más CO2, menos O2 y más agua que el de entrada. Por lo tanto en
términos de transferencia de masa, el efecto del flujo de aire no es solo proveer O2 y
remover CO2, si no también secar el biorreactor. Debe notarse que es casi imposible
prevenir este efecto de secado si el aire se calienta al pasar por el biorreactor.

Cualquiera de los siguientes procesos de transferencia de masa puede ser limitante para
el crecimiento global o para la formación de productos tipo de biorreactor, la naturaleza de
la matriz sólida y la cinética de las reacciones microbiológicas:

I. Difusión de gases hacia y desde las superficies sólidas.

II. Adsorción y desorción de los reactantes y productos sobre y desde la superficie.

III. Difusión de los reactantes y productos a lo largo de la superficie de las partículas.

IV. Difusión de los nutrientes y enzimas dentro de las partículas porosas.

La energía puede intercambiarse por transferencia convectiva de calor entre las paredes
del biorreactor y los alrededores. La convección de calor hacia el exterior de la pared del
biorreactor ocurrirá por convección libre si el exterior de la pared del biorreactor está en
contacto con el aire en los alrededores y no hay flujo forzado de este aire al pasar el
biorreactor. Si el biorreactor está enchaquetado se bombea agua a través de la chaqueta,
o si el aire es soplado al pasar sobre la superficie del biorreactor, entonces el aire será
removido por convección forzada.

Biorreactor de Columna

Dentro de los fermentadores empleados a escala de laboratorio nos encontramos con el


bio-reactor en columna, tal como el que muestra la figura N°1. El bio-reactor está
constituido por pequeñas columnas (de cuatro centímetros de diámetro y veinte
centímetros de altura) cargadas con el medio solido previamente inoculado y colocadas
en un baño termorregulador de agua. Cada columna cuenta con un humidificador que
proporciona aire saturado con agua, el cual pasa a través de cada columna. También, se
puede conectar cada columna a un cromatógrafo de gases, para estudiar la respiración
del microorganismo ya que el cromatógrafo nos permite determinar el CO2 producido por
el microrganismo.

Este equipo es conveniente en las primeras etapas del desarrollo de un bioproceso ya


que es adecuado para estudios de caracterización y optimización de la composición del
medio de cultivo y para cuantificar los datos necesarios para llevar a cabo el cálculo de
parámetros cinéticos.

Figura N°1. Biorreactor en columna a escala de laboratorio. Las columnas, detalladas en la parte derecha de
la figura, están ubicadas en un baño de agua para el control de temperatura

La figura N° 2 muestra otro tipo de bio-reactor de columna, este biorreactor trabaja con
un volumen de aproximadamente 1 L. Comparado con el modelo anterior, los principales
cambios introducidos son: un medidor de humedad relativa, un intercambiador de calor en
el circuito de aire y un sistema de calefacción en la cabeza de la columna. Estos cambios
permiten regular el contenido de agua durante el proceso.

El bio-reactor es cargado con el medio previamente inoculado. Es posible la toma de


muestras de la columna de forma aséptica abriendo la tapa superior, la cual dispone de
un dispositivo de flama que impide problemas de contaminación. Se trabaja normalmente
con varios bio-reactores conectados a un sistema de control automático por computadora,
el cual regula temperatura, humedad y aireación a través de la cama de sustrato. Debido
a que el equipo cuenta con un sistema de control, es adecuado para llevar estudios de
perfiles de velocidad de flujo de aire suministrado, así como de temperatura, permitiendo
evaluar parámetros necesarios para llevar a cabo estudios de escalamiento.
Figura 2. (1)Tapa de calefacción (2) Termómetro (3)Tamiz de acero (4)Medidor de temperatura del aire en la
entrada (5) Medidor de humedad relativa (6) Resistencia (7) Medidor de temperatura de agua (8) Medidor de
flujo másico (9) Medidor de nivel (10) Chaqueta aislante

Bio-reactor de tambor giratorio horizontal

Otros tipos de bio-reactores usados en SSF, basados en la agitación continua del medio
solido son los bio-reactores de tambor horizonta, los cuales pueden ser:

 de tambor giratorio horizontal (Figura 3)


 de tambor perforado(Figura 4) u
 horizontales con paletas (Figura 5)

Estos equipos proporcionan una agitación continua al sustrato sólido para incrementar el
contacto entre las paredes del biorreactor y el sustrato, así como, proveer mayor oxígeno
al microorganismo. Los equipos rotatorios, consisten de un cilindro, con o sin chaqueta
con agua para el control de temperatura, el cual gira lentamente volteando al medio de
cultivo ayudado de pestañas que seencuentran adheridas a la pared (Fig. 3). Este tipo de
biorreactor presenta dificultades en el control detemperatura y humedad debido a
problemas de aglomeramientos de células por ruptura micelial

En cambio, los biorreactores de tipo tambor con paletas, vuelve más eficiente la
trasferencia de oxígeno y disminuye la aglomeración de partículas de sustrato durante el
crecimiento microbiano (Fig. 5). Sin embargo, generalmente, un biorreactor de
fermentación sólida con agitación permanente, aunque sea suave, puede modificar la
estructura del medio sólido.
Dependiendo de la naturaleza del medio solido la agitación puede también puede resultar
muy abrasiva y muy dañina para el micelio.

Figura 3. Bio-reactor de tambor rotatorio. (1) Entrada de aire (2) Unión rotatoria (3)
acoplamiento (4) Boquillas de entrada de aire (5) Línea de aire (6) Rodillos (7) Tambor
rotatorio(8) Medio solido (9) Aro

Figura [Link]-reactor de tambor perforado


Figura 5. Bio-reactor horizontal con paletas. (1) Entrada de aire (2)Medidor de
temperatura (3) Chaqueta de agua (4) Paletas (5) Salida de aire (6) Motor para agitación
(7) Reactor (8) Medio solido (9) Árbol de agitación

Bio-reactor Zymotis

Consiste de platos verticales por donde internamente hay transferencia de calor debido a
la circulación de agua fría, mientras, que el aire previamente termostatizado es introducido
por el fondo del sistema. Entre cada plato se carga el mediosólido previamente inoculado,
dicha cama se mantiene estática durante la fermentación. Este sistema es parecido a los
biorreactores de columna, con la diferencia de que las capas de sustrato están
verticalmente fijas, por lo tanto, es difícil trabajar en condiciones asépticas.
Figura [Link]-reactor Zymotis. (1) Platos verticales, intercambiadores de calor (2) Cama de
sustrato (3) Entrada de agua (4) Salida de agua (5) Termostato

Biorreactor Plafractor.

El sistema es higiénico y automatizado para un proceso de cultivo en bandeja. Esta


controlado por computadora. Todas las operaciones del proceso fermentativo, como
esterilización, enfriamiento, inoculación, control, recuperación de producto y post-
esterilización, se realiza en un solo equipo.

El equipo consta de bandejas selladas colocadas una sobre la otra formando dos torres
unidas por un eje central. Cada módulo cuenta con un brazo de mezclado, el cual rota
alrededor axialmente, y con canales de remoción de calor metabólico, control de
humedad, aireación y vapor para la esterilización. Este equipo fue diseñado con el
objetivo de reemplazar los cuartos de incubación por un equipo mas compacto.

El calor metabólico es removido por conducción. El reactor es construido por módulos


individuales apilados e interconectados.

Los canales no comunicados entregan fluidos fríos y calientes, los cuales están
intercalados entre dos láminas. Los canales comunicados pueden llevar fluidos
esterilizantes (vapor), para ajustar la humedad y el oxigeno que contiene y para extraer el
componente de interés luego del cultivo.
Biorreactor de bandeja

El cual consiste de una columna de 13 pulgadas de altura y un diámetro de 10 pulgadas


(Fig. 6). En su interior se encuentran ocho charolas perforadas, las cuales tiene una
capacidad de 140 mL cada una. La transferencia del oxígeno es por burbujeo a través de
un distribuidor de aire, permitiendo la transferencia a un flujo de 194 mL/min. La
temperatura es regulada por una chaqueta de enfriamiento y/o calentamiento, por lo que
es posible controlar y medir los cambios de temperatura. Bajo este sistema se permite
una mejor distribución de oxigeno por aireación hacia lascharolas.
Biorreactor de lecho fluidizado

Sistema de operación en modo continuo el cual puede ser operado por altos periodos de
tiempo a un alto valor de productividad. El principio del diseño se basa en proveer
agitación y aireación por flujo forzado de aire proveyéndolo por la parte del cilindro a
través de una bomba. El sistema provee un incremento en la transferencia de oxigeno a la
cama de sustrato, sin embargo, se presenta daño al inoculo por causa del gran esfuerzo
de corte generado, además de que se forman gradientes de temperatura a través de la
columna que pueden afectar al producto deseado.
APLICACIONES

La aplicación de cultivos en sustratos sólidos es muy amplia, pueden ser algunas


fermentaciones en estado sólido (FES) de las cuales se destacan el uso en
biorremediación y biodegradación de compuestos contaminantes, la transformación
biológica de residuos agroindustriales y en la fabricación de papel, en la producción de
compuestos bioactivos ( antibióticos, antioxidantes, antitumorales), de enzimas, de ácidos
orgánicos, biopesticidas, biocombustibles, y compuestos aromáticos (mercado de
sabores, fragancias y pigmentos para el usos en alimentos, bebidas), entre otros.

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