Universidad de Concepción

Facultad de Ingeniería
Departamento de Ingeniería Química

INFORME LABORATORIO

DETERMINACIÓN DE LIGNINA Y
CARBOHIDRATOS EN MADERA Y
PULPA

Alumnos:

Ignacio Osben

Ignacio Fernández

Hernán Cifuentes

Profesores:

Miguel Ángel Pereira

Teresita Marzialetti

Martes 26 de julio, Concepción 2022.

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SUMARIO
Se determinó la cantidad de lignina de una muestra de astillas húmedas de pino
radiata llevando a cabo un proceso organosolv. Se utilizó etanol y ácido sulfúrico
como catalizador, para posteriormente realizar una caracterización química
obteniendo la lignina soluble e insoluble, y la concentración de los azúcares
monoméricos de la muestra, mediante una hidrolisis ácida, filtraciones y finalmente
utilizando un espectrofotómetro y un HPLC. Se obtuvo que la lignina presente en la
muestra de pino fue de un 16.7881%, lo cual no se condice con la bibliografía la
cual indica que debería ser de un 27.5%. A pesar de esto, las azucares
monoméricas presentes en la lignina soluble fueron glucosa, xilosa y arabinosa, lo
cual si coincide con la bibliografía estudiada.
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ÍNDICE DE CONTENIDOS
1. INTRODUCCIÓN...................................................................................................... 4
2. OBJETIVOS ............................................................................................................. 5
2.1. Objetivo general ....................................................................................................... 5
2.2. Objetivos específicos ................................................................................................ 5
3. MARCO TEÓRICO ................................................................................................... 6
4. METODOLOGÍA ...................................................................................................... 7
4.1. Equipos y materiales................................................................................................. 7
4.2. Metodología experimental ....................................................................................... 7
5. RESULTADOS ........................................................................................................ 10
6. DISCUSIÓN ........................................................................................................... 14
7. CONCLUSIONES .................................................................................................... 15
Bibliografía ................................................................................................................. 16

ÍNDICE DE TABLAS

TABLA 1. REACTIVOS Y CANTIDADES. .............................................................. 8

TABLA 2. MASA DE CADA MUESTRA. ................................................................. 9
TABLA 3. PARÁMETROS Y PORCENTAJE DE LIGNINA INSOLUBLE ............. 11
TABLA 4. PARÁMETROS Y PORCENTAJE DE LIGNINA SOLUBLE ................. 11
TABLA 5. RESULTADOS DE LA CROMATOGRAFÍA DE MUESTRA M1 ........... 12
TABLA 6. RESULTADOS DE LA CROMATOGRAFÍA DE MUESTRA M2 ........... 13
TABLA 7. RESULTADOS DE LA CROMATOGRAFÍA DE MUESTRA M3 ........... 13
TABLA 8. LIGNINA TOTAL RECUPERADA......................................................... 14

ÍNDICE DE FIUGRAS

FIGURA 1. CURVA DE CALENTAMIENTO REACTOR BATCH. ......................... 10

FIGURA 2. CROMATOGRAMA MUESTRA M1 .................................................... 12
FIGURA 3. CROMATOGRAMA MUESTRA M2 .................................................... 12
FIGURA 4. CROMATOGRAMA MUESTRA M3 .................................................... 13
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1. INTRODUCCIÓN

La biomasa representa una fuente viable y confiable de productos de alto valor

agregado, con infinitas aplicaciones a partir de esta materia prima. Desde
biocombustibles hasta papel o material textil. Muchos de los productos que se
pueden obtener de material lignocelulósico, proviene de la celulosa, uno de sus
componentes principales. Las plantas productoras de celulosa en Chile pueden
alcanzar juntas hasta 5mil ADT al año, lo que corresponde a tonelada con bajo
porcentajes de humedad (entre 4% y 10%), y sus principales exportadores son las
empresas Arauco y CMP.
Para la obtención de este polímero de alto valor, se deben emplear métodos de
separación, que buscan solubilizar y degradar la lignina contenida en la madera,
compuesto que cumple la función de cemento para la fibra de celulosa y
hemicelulosa. El método más empleado por la industria chilena es el pulpaje Kraft,
el cuál es un proceso químico que utiliza licores de pulpaje a base de hidróxido de
sodio y sulfuro de sodio. Otro método de separación utilizable es el pulpaje
Organosolv de celulosa, el cuál mediante solventes orgánicos y catalizador ácido
diluye la lignina y descompone la madera. Este informe es el desarrollo de este
último procedimiento, que busco extraer la lignina a escala de laboratorio con fines
analíticos.
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2. OBJETIVOS

2.1. Objetivo general

• Caracterizar una muestra de astillas de madera, de manera tal que se determine
el contenido de lignina en esta.

2.2. Objetivos específicos

• Emplear un método organosolv para degradar la lignina soluble de la muestra.
• Aplicar una metodología experimental de norma TAPPI.
• Asociar conceptos de pulpaje y materiales lignocelulósicos a la práctica.
• Determinar los monómeros presentes en la lignina soluble utilizando un equipo
HPLC.
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3. MARCO TEÓRICO

La madera está compuesta principalmente por tres polímeros, los cuales son:
Hemicelulosa, Celulosa y Lignina.

• Hemicelulosa: Presente en la pared celular, dentro de la madera cumple la

función de soporte para las microfibrillas de celulosa. Cuando se realiza el
proceso de pulpaje se busca minimizar su degradación.
• Celulosa: La celulosa es un heteropolisacárido compuesto por una cadena
larga de celobiosas y su fórmula molecular es (C6H10O5)n.
• Lignina: La lignina es un polímero aromático heterogéneo, ramificado y
amorfo. Este carece de una estructura básica. Su función en la madera es de
cementarla, uniendo todas sus partes, y de aumentar su resistencia.

La cantidad de lignina en la madera puede ser determinada a través de diversos

métodos. En el presente informe se hará uso del pulpaje organosolv.
Pulpaje Organosolv: Es un proceso en el cual se utilizan solventes orgánicos para
producir pastas celulósicas, en este caso, se utilizará etanol. Se realiza una cocción
para solubilizar la lignina de manera total o parcial sin perder los otros carbohidratos.
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4. METODOLOGÍA

4.1. Equipos y materiales

• Astillas de pino radiata.
• Agua.
• Etanol.
• Ácido sulfúrico.
• Reactor (digestor).
• Bolsa de género.
• Pinzas
• Balanza
• Tubos de ensayo.
• Baño termostático.
• Bagueta.
• Matraz Erlenmeyer 250ml.
• Papel aluminio.
• Bandas elásticas.
• Matraz aforado 100 ml.
• Crisol filtrante gooch M.
• Estufa.
• Autoclave.
• Espectrofotómetro 205 nm.
• Cubetas de cuarzo.
• HPLC

4.2. Metodología experimental

Para la determinación de lignina en la madera de pino se seguirá el siguiente
diagrama:

Caracterización
química
Proceso
Pulpa seca • Lignina insoluble
organosolv
• Lignina insoluble
• Carbohidratos
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Pulpaje Organosolv:
Se preparan los reactivos de cocción, comenzando con 1 kg de astillas húmedas
(50% humedad) de pino radiata. Se trabaja con un hidromódulo 1:6, es decir, una
parte de sólido y seis de líquido. Además, el solvente usado estará compuesto por
Etanol al 50% y 2% p/p de ácido sulfúrico.
Resumiendo, los reactivos y sus cantidades se presentan en la siguiente tabla:
Tabla 1. Reactivos y cantidades.

Reactivo Cantidades

Madera (seca) 500 gr

Agua 1500 mL

Etanol 1500 mL

Ácido sulfúrico 60 mL

Se cargan los reactivos en la canastilla del reactor batch y este se pone en marcha.
El reactor opera subiendo la temperatura hasta 160°C durante 30 min para después
mantener la temperatura en 160°C por 30 minutos más.

Una vez terminado el tiempo de reacción, se espera que se enfríe la muestra y

posteriormente es lavada para eliminar todo resto de ácido en la madera.

Finalmente, se determina el porcentaje de humedad de la fracción solida de la

muestra.

Caracterización química:
Para la caracterización química, primero se miden tres muestras de la madera
obtenida al final del proceso organosolv, entre 0.3 y 0.33 g.
Las tres muestras obtenidas fueron:
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Tabla 2. Masa de cada muestra.

Muestra Masa

M1 0.3203 g

M2 0.3114 g

M3 0.3135 g

Luego, el proceso de caracterización se divide en dos partes.

• Determinación de lignina insoluble:

Se colocan las 3 muestras en los tubos correspondientes rotulándolas para facilitar
su identificación, mientras se prepara el baño termostático a 30°C. Se le agregan 3
mL de H2SO4 a una concentración del 72% a cada tubo de ensayo, los cuales son
agitados cada 5 min durante 1 hora para la homogeneización del contenido.
Al término del tiempo, se trasvasija el contenido de cada tubo de muestra a un
matraz Erlenmeyer de 250 mL. Se lava el tubo de ensayo con 84 mL de agua
destilada para diluir el ácido a una concentración de 4%. Se tapa el matraz con
papel aluminio, se amarra con una banda elástica y se rotula con el nombre de
muestra correspondiente.
Luego, los matraces se calientan en el equipo autoclave a 150°C por 1 hora y
posteriormente se enfrían. En este punto se distinguen dos fases, una sólida y una
líquida. Usando un crisol Gooch M previamente tratado se filtra el sólido, se lava el
sólido y luego se seca a 105°C hasta peso constante. El filtrado se usará en el
siguiente ítem.

• Determinación de lignina soluble:

Se mide la absorbancia del filtrado por espectrofotometría poniendo parte del filtrado
en las cubetas de cuarzo.
Finalmente, se determina la cantidad de carbohidratos por HPLC, donde se pone
un vial con muestra de filtrado en el equipo.
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5. RESULTADOS

Una vez que el reactor reactor batch comenzó la etapa de calentamiento, se registró
la temperatura de éste cada 5 minutos. Se confeccionó una curva de calentamiento
que compara el crecimiento de temperatura con el tiempo transcurrido. Se puede
observar que en el minuto 25 ocurre un descenso de temperatura de 95 °C a 77 °C.
Lo anterior se debe a un fallo en el sello de la tapa del reactor, la cual comenzó con
un escape de vapor. Se dejó reposar el reactor para su enfriamiento, y luego se
reemplazó la goma sellante de éste. Solucionada la falla, se recuperó el
calentamiento y se comenzó nuevamente la medición de temperatura (curva azul).

Curva de calentamiento T(°C) vs t(min)

180

160

140

120

100

80

60

40

20

0
0 20 40 60 80 100 120

Figura 1. Curva de calentamiento reactor batch.

Tal como era de esperarse, alcanzado el minuto 63 se llegó a los 160 °C,
temperatura deseada para la reacción. En ese momento inició la etapa de cocción,
la cual tuvo una duración de 40 minutos aproximadamente.
Para calcular el porcentaje recuperado de lignina insoluble, es necesario calcular el
peso de lignina insoluble. Este se obtiene restando la masa del crisol Gooch con el
sólido seco a la masa del crisol Gooch vacío. El valor obtenido se divide por la masa
de la muestra correspondiente y luego se multiplica por 100.

𝑀𝑎𝑠𝑎 𝐺𝑜𝑜𝑐ℎ 𝑐𝑜𝑛 𝑠ó𝑙𝑖𝑑𝑜−𝑀𝑎𝑠𝑎 𝐺𝑜𝑜𝑐ℎ 𝑣𝑎𝑐í𝑜

𝑳𝒊𝒈𝒏𝒊𝒏𝒂 𝒊𝒏𝒔𝒐𝒍𝒖𝒃𝒍𝒆 = ∗ 100 , 𝑐𝑜𝑛 𝑖 = 1, 2, 3 (1)
𝑀𝑎𝑠𝑎 𝑀𝑖
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Se obtuvo los siguientes resultados:

Tabla 3. Parámetros y porcentaje de lignina insoluble
Nombre de Masa Masa Gooch con Masa Gooch % Lignina
muestra muestra sólido vacío insoluble
M1 0,3203 48,6175 48,5665 15,9226
M2 0,3114 51,1233 51,07 17,1162
M3 0,3135 51,0808 51,0265 17,3206

En segundo lugar, el porcentaje de lignina soluble recuperada se obtiene con la

siguiente fórmula:
𝐴∗𝑉∗100∗𝑓.𝑑.
𝑳𝒊𝒈𝒏𝒊𝒏𝒂 𝒔𝒐𝒍𝒖𝒃𝒍𝒆 = (2)
1000∗𝑀𝑎𝑠𝑎 𝑀𝑖∗110∗1

Donde:

• A: Absorbancia obtenida a 205 nm.

• V: Volumen de filtrado en mL.
• F.d.: Factor de dilución de la muestra.
• 1: Camino óptimo equivalente a 1 cm.
Se resumen los parámetros y resultados en la tabla 4.
Tabla 4. Parámetros y porcentaje de lignina soluble

Nombre de Masa muestra Absorbancia a Volumen del Factor de

muestra [g] 205 nm filtrado [mL] dilución Lignina soluble %
M1 0,3203 0,635 5 0,2 0,0018
M2 0,3114 0,525 5 0,2 0,0015
M3 0,3135 0,536 5 0,2 0,0016

Finalmente se obtuvieron las siguientes cromatografías y valores para las muestras

del filtrado.
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• Muestra 1:

Figura 2. Cromatograma muestra M1

Tabla 5. Resultados de la cromatografía de muestra M1

• Muestra 2:

Figura 3. Cromatograma muestra M2

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Tabla 6. Resultados de la cromatografía de muestra M2

• Muestra 3:

Figura 4. Cromatograma muestra M3

Tabla 7. Resultados de la cromatografía de muestra M3

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6. DISCUSIÓN
La cantidad de lignina recuperada en el proceso es la suma de la lignina insoluble y
la soluble. Los valores obtenidos son:
Tabla 8. Lignina total recuperada.
Nombre de
% Lignina recuperada
muestra
M1 15,9244
M2 17,1178
M3 17,3221

Debido a que el experimento se hizo por triplicado y no hay cambios en las

condiciones, se puede obtener un valor porcentual promedio entre las tres muestras.
Así, la lignina recuperada entre las muestras es 16.7881%.
Según los estudios de Mansilla et al (1991) y autores anteriores, la cantidad de
lignina presente en el pino radiata es de aproximadamente 27.5%. Es decir, se logra
recuperar un 61% de la lignina presente en el pino.
El obtener un valor más bajo de lignina presente en las muestras se puede deber a
un error en la operación del reactor del proceso organosolv, dónde el sello de la
tapa se venció, provocando pérdida de reactivo y una alteración en la curva de
calentamiento.
Analizando el cromatograma y las tablas 5, 6 y 7, se puede ver que se obtuvo lo
esperado: los monómeros que están en mayor proporción son la glucosa y la xilosa.
Cabe destacar que se obtuvieron trazas de celobiosa, menos de un 1% de este
monómero. La celobiosa es sabido que no se encuentra naturalmente, sino que se
obtiene desde la deshidratación de celulosa.
El producto final luego de la deslignificación fue astillas con más flexibilidad y menos
rigidez. Esto se debe a que la reducción de concentración de lignina en las astillas
fue parcial, por lo que luego del proceso de cocción no se obtuvo pulpa. Además,
que el ataque realizado por el proceso organosolv no fue intenso, esto implica que
la pérdida de fibra en el proceso no fue considerable.
Nota:
Al realizar el proceso de pulpaje, el reactor donde ocurrió la cocción se despresurizo
por un periodo extendido de tiempo debido a que la arandela sellante sufrió una
ruptura. Esto implico que el sistema perdiera cantidades no medibles de reactivo, y
el calentamiento se produjera de forma irregular. No obstante, una vez alcanzada la
temperatura deseada, se mantuvo el tiempo establecido de cocción a temperatura
y presión constate, con un sello nuevo operando en condiciones óptimas.
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7. CONCLUSIONES

Se caracterizó la muestra de astillas manipulada en el laboratorio, determinando un

promedio de lignina entre las tres submuestras obtenidas.
El método de degradación con organosolv se realizó con éxito, pero
lamentablemente debido a la falla del sellado del reactor no se logró una
recuperación óptima de lignina, la cual es de un 20-23% para este método.
Se determinó que el pretratamiento de la muestra de astillas es un proceso bastante
efectivo para facilitar el proceso de pulpaje, comprendiendo que a nivel industrial
esto podría ser una gran ventaja.
Gracias al cromatógrafo se logró identificar los monómeros presentes en la lignina
soluble: celobiosa, glucosa, xilosa, arabinosa, ácido acético, ácido levunílico y ácido
fórmico.
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Bibliografía

Cháevz-Sifontes, M. (2013). Lignina, estructura y aplicaciones: Métodos de

despolimerización para la obtención de derivados aromáticos de interés
industrial. Avances en Ciencias e Ingeniería.
Mansouri, N.-E. E. (2006). Despolimerización de lignina para su aprovechamiento
en adhesivos para producir tableros de partículas. Tarragona: Universitat
Rovira i Virgili.