UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO
FACULTAD DE INGENIERÍA QUÍMICA
ESCUELA DE INGENIERÍA QUÍMICA
Laboratorio 01: El Microscopio
Microbiología Industrial
Grupo: 02
Integrantes:
Alvarez Carhuatanta Bianca Nicole
Arteaga Villena Ilian Máryori
Castillo Nureña Katherine Aime
Díaz Alva Jhyan Franco
Saénz Becerra Sara Milagros
Mío Sebastían Yenefer Estefani
Valladolid Girón Yanided Milagros Génesis
Ing. Díaz Rodríguez Manuel Omar
Trujillo - Perú
2022
Índice
I. Objetivos ............................................................................................................................. 3
II. Introducción .................................................................................................................... 3
III. Fundamento..................................................................................................................... 3
A. Antecedentes ................................................................................................................... 3
B. Tipos ............................................................................................................................... 5
i. Microscopio según su microscopia óptica .................................................................. 5
ii. Microscopio según su trasmisión de luz ..................................................................... 7
iii. Microscopio según el número de lentes .................................................................. 8
iv. Microscopio según su microscopia electrónica ....................................................... 9
C. Características ............................................................................................................... 11
D. Importancia ................................................................................................................... 13
IV. Procedimiento de uso .................................................................................................... 16
V. Discusión .......................................................................................................................... 17
VI. Conclusiones y recomendaciones ................................................................................. 18
5.1. Conclusiones ................................................................................................................. 18
5.2. Recomendaciones .......................................................................................................... 18
Referencias ............................................................................................................................... 20
Anexos ..................................................................................................................................... 21
I. Objetivos
- Conocer la historia e importancia del microscopio a través del tiempo.
- Investigar los diferentes tipos de microscopios empleados en la industria.
II. Introducción
Algunos seres vivos pueden observarse a simple vista. Sin embargo, existen
organismos tan pequeños (alrededor de 0.1 mm) que a simple vista no los percibimos, por lo
que se recurre a instrumentos ópticos como la lupa o el microscopio ya sea para organismos
pequeños de menos de 0.1 mm o partes de organismos, ayudando a superar esta limitación.
El microscopio es un aparato de observación de cuerpos transparentes mientras que el
ojo humano tiene una capacidad de resolución relativamente alta, pero objetos y organismos
pequeños no son visibles a simple vista, por ello este instrumento tienen un poder de
resolución mucho más alto que el ojo humano, cuyo fin nos permite poder ver dos puntos
muy juntos con toda claridad, así como a determinar las características cualitativas y
cuantitativas de estructuras muy pequeñas mediante la práctica de montaje, enfoque y
observación; con el fin de penetrar al micro mundo que era casi inexistente hasta antes de su
invención.
III. Fundamento
A. Antecedentes
El microscopio fue inventado por Zacarías Janssen en 1595. Según Párraga A.
& Fernández R. (1994) este microscopio es utilizado y perfeccionado por varios
investigadores y conocido en todos los países, empleando su sistema óptico, como es
el caso de la astronomía por Galileo Galilei en 1610 quien publicó sus observaciones
junto con Kepler en 1611.
De 1617 a 1619, apareció el microscopio de dos lentes con un solo objetivo
convexo y un ocular, cuyo autor fue el físico Cornelius Drebbel. Siguiendo con la
línea de mejora del microscopio, en 1637 René Descartes en su libro “Dioptrique”,
descubre un microscopio compuesto, el cual está constituido por dos lentes, un ocular
plano-cóncavo y un objetivo biconvexo.
Tiempo después en 1665, Robert Hooke lo modificó (véase en la figura 1), y
publicó un libro denominado Micrographia, presentando en él, “dibujos pequeños”
observados a través del microscopio de luz (Reyes, J. 2020).
Figura 1. Microscopio utilizado por Hooke. Tomado de Historia de
la microscopía (p. 51), por M. Lanfranconi, Universidad Nacional
del Mar de Plata.
Posteriormente entre 1632 y 1723 Antony Van Leeuwehoek, crea y fabrica con
sus “propias manos” los auxiliares para un tipo de microscopio compuesto, cuya
capacidad óptica sería superada casi un siglo y medio después. Sumando en total 247
aparatos con 419 lentes constituye un valioso descubrimiento científico,
caracterizándose por tener objetivos con un diámetro pequeño y corta distancia focal
(Párraga A. & Fernández R. 1994).
En 1742, John Cuff diseñó un microscopio compuesto, popularizado en el libro
de Henry Baker, donde se usa luz con longitudes de onda de 500nm. En 1897, Ernst
Abbe indicó que se había alcanzado la máxima resolución del microscopio de luz
(Reyes, J. 2020).
James Miller en 1940 construye un microscopio electrónico bajo la supervisión
de Vladimir K. Zworykin, inventando además el cinetoscopio de la televisión.
Tal como se planteó el microscopio debía de ser una especie cuyas posibilidades
se adapten a los deseos del usuario, desde los sencillos análisis de rutina hasta los más
complicados trabajos científicos (Párraga A. & Fernández R. 1994).
B. Tipos
Tipos de microscopios:
i. Microscopio según su microscopia óptica
Microscopio estereoscópico:
Los microscopios estereoscópicos son básicamente microscopios de luz reflejada. El
preparado se suele iluminar desde la parte superior o inferior. La mayoría de los microscopios
estereoscópicos permiten iluminar también desde la parte inferior. Algunos microscopios
estereoscópicos integran una lente de aumento integrada delante del objetivo. (Portiansky,
2010)
Figura 2. Microscopio estereoscópico.
Microscopio de fluorescencia:
Aquí se suele excitar desde un colorante fluorescente en la muestra mediante una luz
con una determinada longitud de onda desde el exterior. El colorante fluorescente emite la
luz. Esa luz tiene una longitud de onda más larga que la luz excitada, se puede separar
mediante filtros ópticos la luz fluorescente de la luz excitada, y enviarla al ocular o la cámara.
(Harr, 2018)
Figura 3. Microscopio de fluorescencia.
Microscopio confocal:
Este tipo de microscopía es una forma particular de la microscopía óptica o
fluorescente. En este caso se escanea secciones ópticas muy finas y se compone una imagen
tridimensional. Como cada sección es una imagen muy nítida, se consigue una imagen 3D
muy bien enfocada. (Portiansky, 2010).
Figura 4. Microscopio confocal.
ii. Microscopio según su trasmisión de luz
Microscopio de luz transmitida:
Los microscopios de luz transmitida sirven para contemplar preparados transparentes
y muy finos. Cuanto más fino sea el preparado, con más precisión se podrá observar. Sin
embargo, puede usar los microscopios de luz transmitida para ver la superficie de muestras de
cuerpos opacos, como, por ejemplo, granulados o sedimentos. En tales casos, el preparado se
observa como un juego de luz y sombras. (Harr, 2018)
Figura 5. Microscopio de luz transmitida
Microscopio de luz reflejada:
En este tipo de microscopio se ilumina el preparado desde la parte superior a través
del objetivo o lateralmente. La luz reflejada en el preparado es captada por el objetivo.
Gracias a esta técnica es posible usar preparados opacos o espesos. Los microscopios de luz
reflejada se usan con frecuencia en la microscopía de fluorescencia o en la mineralogía.
(Harr, 2018)
Figura 6. Microscopio de luz reflejada.
iii. Microscopio según el número de lentes
Microscopio simple:
El microscopio simple fue durante mucho tiempo el mejor instrumento con que se
contó para escudriñar el mundo microscópico. Su calidad es superior a la que se le atribuye
normalmente y permite observar casi todas las estructuras y orgánulos que se ven con un
moderno microscopio compuesto. Se explicará la forma de construir un potente microscopio
simple con más de 400 aumentos, usando una microesfera de vidrio. (Portiansky, 2010)
Figura 7. Microscopio simple.
Microscopio compuesto:
Es un microscopio óptico que tiene más de una lente de objetivo. Se utilizan
especialmente para examinar objetos transparentes, o cortados en láminas tan finas que se
transparentan. Además, se emplea para aumentar o ampliar las imágenes de objetos y
organismos no visibles a simple vista. (Portiansky, 2010)
Figura 8. Microscopio compuesto.
iv. Microscopio según su microscopia electrónica
Microscopio electrónico de transmisión (TEM):
En este caso un objeto es irradiado por electrones. Los microscopios TEM
(microscopios electrónicos de transmisión) son como los microscopios de luz transmitida,
donde la absorción juega un papel importante. Actualmente la resolución que se consigue es
de aprox. 0,05 nm. (Portiansky, 2010)
Figura 9. Microscopio electrónico de transmisión.
Microscopio electrónico de barrido (REM):
Aquí se dirige un haz de electrones finamente concentrado en una retícula
determinada sobre la prueba metalizada. Los electrones secundarios (contraste) emitidos
desde la superficie se miden como señal y se convierten en una imagen óptica. Para alcanzar
un haz de electrones ininterrumpido, la medición se realiza en un alto vacío. (Portiansky,
2010)
Figura 10. Microscopio electrónico de barrido.
Microscopio de fuerza atómica (AFM):
Este método sirve para presentar una presentación superficial. La prueba es palpada
en una retícula predefinida por una punta afilada sujetada a un muelle de ballesta, su
deformación es captada por la reflexión del haz de luz láser por un sensor óptico, y
presentado por líneas. Según la rugosidad a comprobar, puede detectar diferencias en un
rango de 0,1 a 10 nm. (Portiansky, 2010)
Figura 11. Microscopio de fuerza atómica.
Microscopio de efecto túnel (STM):
En la microscopía de efecto túnel se presenta la superficie mediante la medición del
flujo de la corriente entre una punta conductora y la prueba que es también conductora. Las
pruebas que no sean conductoras deben ser metalizadas con oro, grafito o cromo. También en
este caso se palpa la superficie en una retícula predefinida. (Portiansky, 2010)
Figura 12. Microscopio de efecto túnel.
C. Características
Componentes del microscopio fotónico. El microscopio fotónico compuesto está
integrado por tres tipos de componentes:
a) Componentes mecánicos: Son aquellos que sirven de sostén, movimiento y
sujeción de los sistemas ópticos y de iluminación, así como de los objetos que se van
a observar (Montalvo, 2010).
o Base o pie. Es un soporte metálico, amplio y sólido en donde se apoyan y
sostienen los otros componentes del microscopio.
o Brazo, estativo o columna. Permite la sujeción y traslado del microscopio.
Soporta al tubo óptico, a la platina y el revólver.
o Platina. Superficie plana de posición horizontal que posee una perforación
circular central. En ella se apoya la preparación (lámina portaobjetos que
contiene a la muestra que se va a examinar) que se sujeta a la platina
mediante pinzas.
o Tubo óptico. Consiste en un cilindro metálico que suele medir 160mm o 170
mm de longitud (dependiendo del fabricante del microscopio) el cual, en un
extremo, está conectado al revólver o porta objetivos y en el otro se relaciona
con los oculares.
o Revolver o porta objetivos. Es un componente que gira alrededor de un eje
con la finalidad que los objetivos que sostiene coincidan de manera
perpendicular con la perforación central de la platina. En su superficie
inferior posee varios agujeros donde se atornillan los objetivos.
o Tornillos macrométrico y micrométrico. Generalmente están situados en la
parte inferior del brazo o columna. Pueden estar separados (en los
microscopios antiguos) o el tornillo micrométrico está incorporado en la
circunferencia del tornillo macrométrico (microscopios actuales). Ambos
tornillos permiten el desplazamiento de la platina hacia arriba y hacia abajo
con la finalidad de acercar o alejar la preparación hacia los objetivos y así
conseguir un enfoque óptimo de la imagen.
o Engranajes y cremallera. Constituyen mecanismos de desplazamientos de las
diferentes partes del microscopio.
o Cabezal. Es un componente situado en relación con el tubo del microscopio
que alberga principalmente prismas o espejos que sirven para acondicionar en
él dos o más oculares, o sistemas mecánicos que soportan cámaras
fotográficas, de vídeo o sistemas de proyección de la imagen.
b) Componentes Ópticos: Son los objetivos, los oculares, el condensador y los
prismas. Los tres primeros están constituidos por sistemas de lentes positivos y
negativos.
o Condensador: Es el componente óptico que tiene como función principal
concentrar y regular los rayos luminosos que provienen de la fuente luminosa.
o Ocular. Es otro componente óptico del microscopio, debe su nombre porque la
imagen final se observa a través de él acercando el ojo a la lente “ocular” del
componente.
o Objetivos. Los objetivos están considerados los elementos más importantes en la
formación de la imagen microscópica, ya que estos sistemas de lentes establecen
la calidad de la imagen en cuanto a su nitidez y la capacidad que tiene para
captar los detalles de la misma (poder de resolución). Están constituidos
también por un juego de lentes, en este caso, convergente y divergente, para
eliminar, en la medida de lo posible, una serie de aberraciones que afectarían la
calidad de las imágenes formadas.
O Prismas. En los microscopios modernos monoculares o binoculares, se requiere
el empleo de prismas, estructuras transparentes que, en el caso de los
microscopios monoculares, sirven para desviar los rayos luminosos de la
trayectoria rectilínea del eje óptico del objetivo y dirigirlos hacia el tubo óptico
ligeramente inclinado y luego hacia el ocular.
c) Componentes De Iluminación: Se consideran dentro de este grupo a los
instrumentos que proporcionan energía luminosa al microscopio. Las fuentes de
energía luminosa son de dos tipos: natural y artificial.
o La luz natural, emitida por el sol, se obtiene de manera indirecta mediante un
espejo que posee una superficie plana y otra cóncava. El espejo está situado en
la superficie superior de la base o pie. Un mecanismo especial permite orientarlo
hacia un lugar iluminado indirectamente por el sol (una ventana, por ejemplo) y
luego dirigir el haz luminoso hacia la lente del condensador.
• La luz artificial se genera a través de una lámpara de bajo voltaje (generalmente
de 6 voltios) que, mediante un reóstato regula la emisión y la intensidad de luz.
Al igual que el espejo, este sistema de iluminación se inserta en la base o pie del
microscopio.
D. Importancia
El microscopio es una herramienta que permite observar células, partículas, bacterias
y microbios, entre otros organismos y elementos que serían invisibles a simple vista. En los
primeros diseños contaba con un par de lentes de vidrio, para generar el aumento de la visión.
Con el paso del tiempo y la evolución en las técnicas, se llegó al microscopio electrónico, el
cual permite ver hasta el interior de una célula viva. La llegada del microscopio produjo una
revolución en el modo de pensar del ser humano, mediante la cual se comenzó a estudiar al
cuerpo y sus afecciones de manera científica, partiendo de la observación minuciosa del
mismo. Hoy en día, aprovechando los avances de la tecnología, los microscopios posibilitan
el estudio detallado de células y moléculas, entre otros, permitiendo una investigación
específica de fármacos y enfermedades. (Mejia J, 2020)
El uso del microscopio en prácticas de laboratorio son actividades de enseñanza durante las
cuales los alumnos no sólo manipulan y observan materiales haciendo uso del mismo sino
que también se involucran intelectualmente, usando y aplicando conceptos teóricos.
(Martorelli, 2016).
Según Mejia J, (2020) la importancia del microscopio en la ciencia.
● Salud: El microscopio ha tenido un gran impacto en el campo médico. Los médicos
usan las lentes de los microscopios para detectar células anormales e identificar
diferentes tipos de células. Esto ayuda a identificar y tratar enfermedades como la
anemia de células falciformes que son causadas por células anormales en forma de
hoz, por eso es porque es importante el microscopio en la ciencia.
● Biología: La salud de un ecosistema se examina con un microscopio. Los biólogos de
campo utilizan el microscopio para observar un entorno específico, como el entorno
marino, y para identificar los tipos y la cantidad de organismos que se encuentran en
las muestras del ecosistema. Esto ayuda a los científicos a definir el ecosistema,
identificar las amenazas a un ecosistema y determinar la relación de los organismos
con su entorno.
● Ciencia forense: El microscopio ha influido mucho en el campo de la medicina
forense. La ciencia forense es un área de la ciencia que recopila y analiza evidencia
para identificar hechos que se utilizan en un entorno legal. La importancia del
microscopio en la ciencia forense se debe a que el microscopio se utiliza para
examinar pruebas recopiladas en la escena de un crimen, cuya información puede no
ser visible a simple vista.
● Análisis de tejidos.
Los histólogos usan el microscopio para analizar tejidos y células. El microscopio,
junto con otras herramientas, se usa para buscar tejido anormal en el cuerpo. El
estudio ayudó a identificar tejido canceroso en un paciente.
● Estudio atomico:
La invención del poderoso microscopio de fuerza atómica permitió a los científicos
estudiar las células a nivel atómico. Esto permite a los científicos analizar virus a
nivel atómico e influir en ellos para aplicar tratamientos innovadores. El microscopio
de fuerza atómica también permite a los científicos estudiar los tipos de virus y
comprender cómo infectan el cuerpo. Con este microscopio, los científicos están
estudiando el proceso por el cual los virus sin envoltura usan proteínas para fusionarse
con las células huésped.
● Estudio de genética:
El microscopio tiene un gran impacto en el estudio de la genética. El científico utiliza
el microscopio para observar determinadas composiciones genéticas. También
permite a los científicos determinar anomalías genéticas, regeneración de tejidos y
muerte. El estudio de la genética se utiliza para estudiar el tejido infectado. A través
de este estudio, los histólogos pueden investigar futuros tratamientos y medicamentos
preventivos.
Ejemplos:
a) Poder realizar cirugías médicas con precisión.
b) Observación del interior de células
c) Divisar átomos.
d) Estudio de virus y estructuras moleculares.
e) determinar la cantidad, distribución y ubicación de una molécula dentro de una
célula.
f) Investigación de enfermedades.
IV. Procedimiento de uso
1.Transportar el microscopio con ambas manos, cuidando de no romper o dañar el equipo.
2. Mediante el revólver del microscopio colocar el objetivo de menor aumento (normalmente
4x) en posición de empleo y bajar la platina completamente. Las observaciones se empiezan
siempre con el aumento mínimo, a partir del cual se va aumentando hasta llegar al nivel de
aumento deseado.
3.Encender la luz del microscopio. Esto puede requerir enchufarlo a una corriente eléctrica o
verificar que las baterías estén cargadas.
4.Colocar la preparación sobre la platina sujetándola con las pinzas metálicas
5.Ajustar el tornillo macrométrico para que sea posible acercar la platina al objetivo. Esto
debe hacerse mirando directamente y no a través del ocular, ya que se corre el riesgo de
incrustar el objetivo en la preparación pudiéndose dañar alguno de ellos o ambos.
6.Mirar por el ocular, ajustar el condensador y el diafragma para maximizar la cantidad de luz
que llega a la muestra. Algunos microscopios tienen un pequeño espejo que dirige la luz
hacia la muestra. Si este es el caso de tu microscopio, ajusta también la posición del espejo
para que la muestra esté totalmente iluminada.
7.Posterior a esto, ajustar el tornillo micrométrico para mejorar el enfoque de la imagen y
obtener una observación nítida de la muestra.
8.A partir de este punto, si quieres observar la muestra con un mayor aumento puedes
seleccionar el siguiente objetivo (10x) mediante el revólver. Es posible que sea necesario un
pequeño ajuste del tornillo micrométrico para mantener el enfoque. Si no consigues enfocar
la muestra puedes repetir los procedimientos descritos a partir del paso 4 con el nuevo
objetivo.
9.Cuando finalices la observación apaga la luz y ajusta el tornillo macrométrico para
maximizar la distancia entre la muestra y el objetivo.
10.Retira la muestra y deja seleccionado el objetivo de mínimo aumento.
11. Una vez se terminó de utilizar el microscopio, taparlo con una funda para evitar la
acumulación de polvo.
V. Discusión
El microscopio es muy importante ya que permite al estudiante identificar y describir a
través del uso las partes que componen el sistema mecánico, óptico y de iluminación observar
y describir la estructura de microorganismos. Nos permite, por ejemplo, ver células,
microorganismos y bacterias, lo cual es imposible de observar a simple vista. Con el
microscopio hemos descubierto infinidades de cosas que nos han ayudado a evolucionar como
por ejemplo se han descubierto enfermedades que serían imposible de detectar sin la ayuda
del microscopio también hemos descubierto las cura para esas y muchas más enfermedades.
La imagen dada en todos los casos se apreciaba de manera nítida dejando ver diversos
detalles de los objetos que no son posibles de apreciar a simple vista; por ejemplo, al poner
un grano de azúcar y uno de sal en el estereoscopio se puede ver claramente la diferencia
entre la estructura cristalina y el tamaño de ambos granos, ya que los granos de azúcar son de
un mayor tamaño y tienen un forma más definida (parecida a la de un rectángulo) que las del
grano de sal, que presentaba un menor tamaño y formas variadas para cada grano de esta. Así
que para tener una buena observación deberemos tener en buen estado el microscopio tanto
en mecánica, óptima e iluminación lo cual nos permitiría realizar ciertas observaciones en
diferentes muestras necesarias o requeridas. También el uso correcto de ella ya que es un
equipo que se necesita mayor precisión para poder obtener los resultados requeridos y seguir
los pasos en su uso ya que en caso de no ser así podría dañar el equipo de muestra.
Así mismo la nula detección de los orgánulos en el interior de ambas se debe no solo a
que son minúsculos, también se debe a que son transparentes y mayoritariamente
incoloros y como consecuencia deben usarse colorantes que permitan diferenciar las
estructuras como lo son: el lugol que tiñe el almidón presente en las estructuras y el azul de
metileno para teñir células animales.
VI. Conclusiones y recomendaciones
5.1. Conclusiones
Los microscopios poseen una importancia enorme en la investigación científica,
gracias a ellos hemos descubierto miles de cosas que no se pueden ver a simple vista, pero a
la vez es muy importante saber de ellas como los microorganismos, además de ello conduce a
solucionar problemas en diversas áreas como la salud, industria alimentaria, la producción
animal entre otros.
5.2. Recomendaciones
5.2.1. Precauciones y seguridad
- La fuente de alimentación y las conexiones con el microscopio deben estar
bien aseguradas y estabilizadas, y no exponer al personal a riesgos de
electrocución.
- Ni el microscopio ni sus conexiones eléctricas deben estar expuestos al
contacto con el agua.
- Se deben adoptar precauciones para evitar daños oculares por la exposición a
la luz muy intensa de la bombilla halógena.
- El microscopio debe utilizarse de modo ergonómico para evitar la sobrecarga
física de la espalda y el cuello.
5.2.2. Aseguramiento de la calidad
- Se debe inspeccionar la instalación y el mantenimiento del microscopio
durante las visitas periódicas de supervisión. Se debe inspeccionar, asimismo,
el libro de registro del mantenimiento de los equipos de laboratorio.
- Se puede utilizar un calendario de mantenimiento del microscopio similar al
que se muestra al final del presente POE.
5.2.3. Causas de error
- Reparaciones no cualificadas de microscopios con problemas de
funcionamiento.
- Retirada de los oculares, a menos que estén diseñados para extraerlos e
introducirlos en el tubo.
- Retirada de los oculares en microscopios sellados, dejando los elementos
ópticos internos expuestos al polvo y los hongos.
5.2.4. Conservación
En los climas cálidos y húmedos es fácil que crezcan hongos sobre las lentes y
los prismas. Para evitar este crecimiento sobre las superficies de vidrio,
cuando no se esté utilizando, el microscopio deberá estar siempre guardado en
un lugar seco; por ejemplo, en un «armario caliente» con una temperatura
constante y baja humedad. Las lentes y la caja de prismas pueden conservarse
en cajas herméticas que contengan desecante (sin cloruro de cobalto). (D.M.P,
2016)
Referencias
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Mundial de la Salud. https://apps.who.int/iris/rest/bitstreams/1339586/retrieve
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Martolli, S.L (2016). Microscopios virtuales: Estudio y comparación. Tecnología informática
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Mejia J, T (2020). Importancia del microscopio en medicina, salud y ciencia general.
Lifeder.
Montalvo Arenas, C. E. (2010, agosto). Microscopio. Obtenido de:
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Párraga A. & Fernández R. (1994). Una mirada retrospectiva sobre la evolución histórica de
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Portiansky, E. L. (2010). Nuevas herramientas microscópicas e informáticas para el estudio
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56912020000200079&script=sci_arttext
Anexos
Link de diapositivas:
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gystN/view?usp=sharing
Link de video presentado en clase:
http://www.youtube.com/watch?v=QBDHzLu_cy0
