UNIVERSIDAD NACIONAL DE LOJA
FACULTAD AGROPECUARIA Y DE RECURSOS NATURALES RENOVABLES
CARRERA DE INGENIERIA AGRONÓMICA
INFORME DE PRÁCTICAS DEL ESTUDIANTE CON SUPERVICIÓN DOCENTE
NOMBRES Y Ronaldo Alexis Jimbo Villalta MÓDULO/ 7 mo ¨A¨
APELLIDOS: CICLO/
PARALELO:
ASIGNATUR Biotecnologìa vegetal NRO. DE 1
A: PRÁCTICA:
DOCENTE: Natalia Morales Palacio Ph.D. NRO. DE
GRUPO:
TÍTULO DE LA
PRÁCTICA: Extracción casera de ADN genómico
FECH 24 – 05 - 2022 HOR 12H00 CALIFICACIÓ
A: A: N:
OBJETIVOS:
- Aplicar una técnica sencilla para obtener ADN de células vegetales.
- Comprender el proceso necesario para la extracción del ADN.
FUNDAMENTO TEÓRICO DE LA PRÁCTICA A EJECUTAR:
Elección del material vegetal: Las plantas poseen tres tipos de ADN: el nuclear, el
mitocondrial y el cloroplástico. Además, la mayoría de las plantas presentan
poliploidia, esto es, la condición de algunas células u organismos de poseer más de
un juego de cromosomas. Las fresas cultivadas maduras son un material excelente
para extraer ADN. Son fáciles de triturar y contienen enzimas (pectinasas y
celulasas), que ayudan a romper las paredes celulares. Además, las fresas son
octoploides (7 cromosomas x 8 = 56 cromosomas), es decir, tienen ocho copias de
cada cromosoma, lo cual proporciona más ADN que la banana o el kiwi. El kiwi
tiene 29 cromosomas y es tetraploide. El guineo tiene 11 cromosomas y la mayoría
es triploide.
Rupturas de tejidos, paredes y membranas celulares:
Eliminación de proteínas y lípidos: Los componentes no solubles como el
material fibroso y las proteínas se separan del ADN por filtración.
Precipitación del ADN: El ADN se muestra como hebras blanquecinas entre el
alcohol y la solución acuosa. Después de que son eliminados los lípidos y las
proteínas, los grupos fosfato del ADN están cargados negativamente y son polares.
El ADN se disuelve en soluciones acuosas, pero es insoluble en alcohol. La adición
de alcohol y altas concentraciones de iones sodio que se unen a los grupos fosfato,
reduce las fuerzas repulsivas entre las cadenas y permite que el ADN se pliegue
sobre sí mismo haciéndolo insoluble. De esta forma precipita y forma una malla
filamentosa blanquecina que contienen proteínas y otros materiales.
MATERIALES Y REACTIVOS
• Material vegetal, fresas ( Fragaria vesca)
• 2 Vasos de vidrio
• Agua
• Jabón líquido
• Sal de cocina o cloruro de sodio NaCl
• Cuchara
• Papel de filtro
• Alcohol
• Funda Transparente
TÉCNICAS Y PROCEDIMIENTOS PARA EJECUTAR LA PRÁCTICA:
1. Primero se procedió a lavar el material vegetal a utilizar, en este caso se utilizó la fresa
(Fragaria vesca).
2. Seguidamente con ayuda de una funda plástica, se procedió a colocar las 2 fresas, para
así poder triturar y de esta manera extraer el ADN.
3. Una vez terminada de triturar las fresas, en el vaso con agua colocamos dos cucharadas
de sal y de jabón líquido, revolvemos con ayuda de una cuchara sin causar burbujas o
espuma.
4. Una vez que ya este todo listo, procedemos a colocar las presas trituradas dentro del vaso
de vidrio, colocamos alcohol alrededor de las paredes del vaso y esperamos a que se
desprenda el ADN, el cual será de color blanco.
5. Una vez desprendido el ADN procedemos a extraerlo con la cuchara, para poder
colocarlo en otro vaso y observar de mejor manera.
RESULTADOS DEL APRENDIZAJE:
PREGUNTAS DE CONTROL:
- ¿Cuál es el papel de la trituración?
En cuanto al papel de la trituración dentro de la extracción del ADN el cual se realizó en
la fresa con ayuda de una funda, se rompen las uniones entre las células y la pared
celular. Al realizar este tipo de practica podemos obtener una homogeneización, la cual,
facilita el efecto de lisis o ruptura que ayuda a liberar el material genético, es decir
rompen las paredes celulares y separar las células.
- ¿Cuál es el papel de la adición del detergente?
El papel primordial del jabón líquido, utilizado dentro de la practica ayuda a romper las
membranas celulares, las cuales, están compuestas por lípidos y liberan el ADN del
núcleo, en pocas palabras el jabón líquido o detergente ayuda o permite disolver la
membrana celular que es una bicapa lipídica, ya que las uniones que mantienen la
membrana junta. Cuando el detergente se pone en contacto con los lípidos éstos se
separan de la membrana rompiéndola.
- ¿Cuál es el papel de la sal cloruro de sodio?
El principal papel de cloruro de sodio so sale de cocina ayuda a separar algunas de las
proteínas las cuales están unidas al ADN. También mantiene las proteínas disueltas en la
capa acuosa de forma a impedir que estas precipiten también con el alcohol, junto con el
ADN.
- ¿Para qué sirve el alcohol en la extracción del ADN?
El alcohol ayuda a la extracción del ADN para de esta manera poder separar el agua del
recipiente, cuando el ADN se separa de la solución, tiende agruparse, y de esta manera el
ADN se puede hacer visible, mostrando ser una molécula muy larga, ayudando así a
separar o aislar el ADN cuando este se encuentra en alcohol precipita. Por este motivo,
nuestras hebras de ADN comienzan a hacerse visibles en la interfase entre la mezcla y el
alcohol.
BIBLIOGRAFÍA: FIRMA DEL FIRMA DEL DOCENTE:
ESTUDIANTE:
