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Analisis Cualitativo de Lipidos

Se realizó la extracción e identificación cualitativa de lípidos en la yema de huevo, incluyendo triglicéridos, colesterol y fosfolípidos como la lecitina. La extracción involucró cocción, maceración y filtración de la yema en una mezcla de etanol y éter, seguida de evaporación para obtener los lípidos totales. Métodos como el reactivo de Liberman-Burchard y la reacción de Salkowski identificaron la presencia de colesterol, mientras que las reacciones con
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Analisis Cualitativo de Lipidos

Se realizó la extracción e identificación cualitativa de lípidos en la yema de huevo, incluyendo triglicéridos, colesterol y fosfolípidos como la lecitina. La extracción involucró cocción, maceración y filtración de la yema en una mezcla de etanol y éter, seguida de evaporación para obtener los lípidos totales. Métodos como el reactivo de Liberman-Burchard y la reacción de Salkowski identificaron la presencia de colesterol, mientras que las reacciones con
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lOMoARcPSD|8911753

Nombre:
Lisa Nallely Pérez Gómez
Amelia Reyes Ramírez
Matricula:
20201-0429
20201-0431
Materia:
Bioquímica
Maestra:
Lolymar Romero
Tema:
Análisis cualitativo de lípidos
lOMoARcPSD|8911753
lOMoARcPSD|8911753

INFORME DE LABORATORIO DE BIOQUÍMICA.

ANALISIS CUALITATIVO DE LIPIDOS

Resumen

Los ácidos grasos hacen parte de las estructuras que son de gran importancia para los
diferentes organismos, como lo son las membranas celulares; estos a su vez pueden
ser saturados o insaturados, esto está determinado por la presencia o ausencia de dobles
enlaces en su estructura. Se realizó la extracción e identificación cualitativa de lípidos,
empleando para la extracción una mezcla de etanol éter 2:1 con una previa cocción de
la yema del huevo y una posterior maceración y filtración. Para la identificación de
lípidos se emplearon varios métodos como lo son: el reactivo de Liberman-Bburchard,
la reacción de Salkowski, identificación de fosfatos y la detección de colina.

Palabras clave: ácidos grasos, colesterol, identificación de lípidos.

Introducción 3, los cuales están presentes en una


gran variedad de pescados.
Los ácidos grasos, se caracterizan por
ser ácidos carboxílicos de cadena larga El colesterol por su parte está
que pueden tener en su estructura uno o relacionado con la alta tasa de
varios dobles enlaces, proporcionándole mortalidad en personas mayores de 50
así una instauración a dicha estructura. en los países desarrollados, por
Los ácidos grasos se encuentran enfermedades cardiovasculares.
haciendo parte de los lípidos de reserva
y de los lípidos que constituyen las
membranas celulares. Los ácidos grasos
insaturados generalmente se encuentran
en la configuración Cis, ocasionando
así que la cadena del hidrocarburo
sufra un doblez en su estructura. Los
ácidos grasos insaturados generalmente
se encuentran en los aceites
provenientes de las plantas y en los
omega
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Figura 1. Estructura del colesterol  Gradilla


(Disponible en: http://www.info-  Papel filtro
farmacia.com/bioquimica/derivados-del-  Embudo
colesterol)  Balanza
 Erlenmeyer
El colesterol se divide en dos grupos el
 Baño maría
HDL y el LDL, principalmente; el
 Varilla de vidrio
colesterol LDL, también conocido como
 Probeta
colesterol malo, se caracteriza por
extraer los ácidos grasos saturados del Reactivos
hígado y transportarlos por los vasos
sanguíneos, haciendo que se acumulen  Mezcla etanol. Éter 2:1
en las paredes de los vasos  Ácido sulfúrico concentrado
sanguíneos en forma de placas, que  Ácido ascórbico 1 mg/mL
pueden generar la ruptura de estos y  Mezcla cloroformo. Etanol 2:1
posteriormente la generación de un  Ácido fosfomolibdico
trombo, que termina reflejándose en la  Anhídrido acético
persona, como un infarto y finalmente
la muerte. El colesterol HDL o METODOLOGÍA
colesterol bueno, se caracteriza por
- Métodos
viajar por los vasos sanguíneos,
llevándose consigo el LDL que se
❖ Procedimiento general
encuentra localizado en los vasos
sanguíneos, y colocarlos en el hígado Se coció la yema de un huevo y se
donde posteriormente serán degradados pesó la mitad de esta, se le adicionaron
en forma de ácidos biliares o para la 10 mL de una mezcla de etanol:éter
utilización de nuevas lipoproteínas.[1] (2:1), se macero en un mortero y se dejó
en reposo durante
10 minutos con agitación ocasional.
Seguidamente se filtró la solución.

Figura 2. Accion del LDL vs HDL


(Disponible en:
http://awentis.com/62/remedios-para-
bajar-el-colesterol.html#.WcfPnFvWzIU)
Figura 3. Filtrado de la yema de huevo
Materiales
en una mezcla de etanol:éter
 Mortero y mazo (2:1).
 Pipetas
 Tubos de ensayo
 Vasos de precipitado
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El filtrado obtenido se evaporo en Se tomó 1 mL del sobrenadante que


baño María, para posteriormente pesar se obtuvo en el primer paso y se
la cantidad de lípidos totales obtenidos. agregó un volumen igual de ácido
sulfúrico concentrado. Observar los
cambios.

❖ Identificación de fosfatos

Se disolvió el precipitado obtenido de


lecitina en 10 mL de una mezcla de
etanol:éter (2:1) y se filtró. Se tomó 1
mL del filtrado y se le adiciono 1 mL de
Figura 4. Evaporación de la solución de ácido molíbdico, agitando la solución,
lípidos totales obtenidos. después de pasados 3 minutos se
adiciono 1 mL de la solución de ácido
Se disolvieron los lípidos totales que
ascórbico, se observó lo que pasaba.
fueron 0,11 g en 5 mL de éter, y se
adicionaron 10 mL de acetona a dicha
solución obteniendo un precipitado
(contenido de licitina en la yema), y un  Detección de colina
sobrenadante (triglicéridos +
Se tomó igualmente 1 mL del filtrado
colesterol), ambos se pesaron.
utilizado para la identificación de fosfatos
y se calentó suavemente en un baño de
agua hirviendo, se observó lo que
pasaba.

RESULTADOS Y DISCUSIÓN

❖ Procedimiento general

Tabla 1. Composición química de


la yema de huevo.
Figura 5. Lecitina y triglicéridos +
colesterol. % En el % % % %
huevo Agua Proteína Grasa Ceniza

❖ Reactivo de Liberman-Burchard Yema 31 48,0 17,5 32,5 2,0

Se tomó 2 mL del sobrenadante que


La yema es la porción amarilla del
se obtuvo en el primer paso y se
huevo, está recubierta por la
agregaron 2 gotas de ácido
membrana vitelina que la separa de la
sulfúrico concentrado y 10 gotas de
clara y la protege de una posible rotura.
anhídrido acético. Se observó si la
El color está determinado
reacción presentaba un cambio en la
principalmente por la dieta de la gallina.
coloración.
Puede presentar una mancha rojiza, que
corresponde al disco germinativo, a
partir de la cual se desarrollaría el pollo
❖ Reacción de Salkowski en caso de que el huevo hubiera sido
fecundado. Es una dispersión de
diferentes tipos de particulas
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suspendidas en la solución proteica. La


cantidad de proteína sobre sustancia
seca es de 31,1% y de grasa del 65,8%,
con gran cantidad de lipoproteínas de
baja densidad (LDL) ricas en colesterol.
1

El contenido total de grasas es de 4 a


4.5 g por unidad de las cuales 1.5 g Figura 6. Estructura y diagrama de la
son grasa saturada y el resto fosfatidilcolina (Química Orgánica, Google
insaturada (predominando las Books. Disponible en:
monosaturadas, que son benéficas https://books.google.com.co/books?
para el organismo). 1 id=TL98uAXZ3JQC&pg=PA293&lpg=PA293&
dq=fosfatos+de+la+yema+de+huevo&sourc
El principal fosfolípido es la lecitina
e=bl&ots=xvyOwlIGLd&sig=wgDbkQRVVkKf
(fosfatidilcolina) con algo de
F7rM5frRbIeXw&hl=es&sa=X&ved=0ahUKE
fosfatidiletanolamina y pequeñas
wjpqnp27zWAhUGKCYKHVsNAuQQ6AEISjA
cantidades de fosfatidilserina. Los ácidos
J#v=onepage&q=fosfatos%20de%20la
grasos que se encuentran en los
%20yema%20de%20huevo&f=false).
triglicéridos de la yema son el oleico,
palmítico, esteárico y linoleico. 1 ❖ Reactivo de Liberman-Burchard

Tabla 2. Masa obtenida de lípidos El colesterol es un esterol, es decir


totales, licitina y triglicéridos + un lípido del grupo insaponificable
colesterol. (no posee ácidos grasos) que se
encuentra en las membranas
Lípidos totales Lecitina
celulares de nuestro organismo. El
0,11 g 0,04 g colesterol es esencial para el ser
humano, debido a que por medio de
este se sintetizan ácidos biliares,
vitamina D, hormonas sexuales y
La lecitina no solo se encuentra en los
otras sustancias. Es importante tener
seres humanos, puesto que varios
en cuenta que el exceso de este
estudios han demostrado una alta
también puede ser perjudicial para
probabilidad de desarrollar cáncer por
la salud, ya que, el exceso de
un déficit en lecitina en animales
colesterol en la sangre tapona la
experimentales. Además la colina
arterias y produce ateroesclerosis. 6
proviene de la lecitina y la colina está
presente en varios frutos de plantas, Las lipoproteínas están constituidas
por lo tanto en las plantas también se por una parte lipídica y otra proteica,
encuentra la lecitina. estas ayudan al transporte del
colesterol en la sangre. Entre estas
La lecitina es muy abundante en la yema
se encuentran (HDL), (VLDL) y
de huevo y la soya. La molécula de
(LDL). Estas deben ser contraladas
Lecitina tiene dos partes: la cabeza y la
en el cuerpo por eso tienen límites en
cola. En la cabeza se encuentran los
los que se deben encontrar, por
grupos iónicos fosfato y colina, y en la
ejemplo la HDL debe oscilar entre
cola las dos cadenas no polares de los
45mg/dl y 82 mg/dl, la LDL se
esteres de ácidos grasos. 2
recomienda tener por debajo de
100
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mg/dl, la VLDL debe estar entre debido a un mal proceso al momento


0mg/dl y 30mg/dl y la suma de estas de la prueba.
tres da el colesterol total que debe
estar por debajo de 200mg/dl. 7

Los triglicéridos también deben ser ❖ Reacción de Salkowski


monitorizados en el cuerpo y deben
La reacción de Salkoski además del
encontrarse por debajo de 150
reactivo de Liberman-Burchard
mg/dl. Dependiendo de la edad estos
también sirve para la identificación
rangos varían un poco pero siempre
de colesterol. Por ello se empleó el
tratan de mantener la misma línea.
sobrenadante extraído en el paso 1 y
El colesterol se sintetiza a partir de se añadió ácido sulfúrico
la acetil CoA y lleva su síntesis en concentrado; esta prueba es
el hígado. colorimétrica, es decir, se basa en
un cambio de color característico,
El colesterol es una sustancia que más precisamente en esta prueba
no presenta color. Por ello para el se forma un anillo café en la
reconocimiento del colesterol interfase como se muestra en la
contenido en el sobrenadante figura 8.
extraído en el punto 1 se realizó una
prueba con el reactivo de Liberman-
Burchard. Esta prueba tiene como
fundamento emplear anhídrido
acético y ácido sulfúrico
concentrado para obtener
colesterileno que presenta si presenta
un color verde debido a la
conjugación de sus enlaces.

Figura 8. Resultado obtenido de la


reacción de Salkowski.

❖ Identificación de fosfatos

Los fosfatos son las sales o los esteres


del ácido fosfórico. Tiene en común un
átomo de fosforo rodeado por cuatro
átomos de oxígeno en forma
Figura 7. Resultado obtenido de
tetraédrica. 3
la prueba con reactivo
Liberman- Burchard.

Se puede notar en la figura 7 que el


color no se presentó de la manera
esperada, esto
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Figura 9. Estructura del grupo fosfato


(Raúl Alcaraz, Fosfatos, Tiloom.com.
Disponible en:
http://www.tiloom.com/fosfatos/).

Los fosfatos secundarios y terciarios


son insolubles en agua, a excepción de
los de sodio, potasio y amonio. 3 Figura 11. Catión N,N,N-
trimetiletanolamina (con un contraión
indefinido) (Formula química estructural
y el modelo de la vitamina colina - b4, 3d
y 2d ilustración, aislado en blanco,
123RF Stock Photos. Disponible en:
https://es.123rf.com/photo_30028557_f-
rmula-qu-mica-estructural-y-el-modelo-
de-la-vitamina-colina--b4-3d-y-2d-
ilustraci-n-aislado-en-bla.html) .

La colina y sus metabolitos son


Figura 10. Resultado obtenido de la
necesarios para tres fines fisiológicos
prueba de identificación de fosfatos.
importantes: integridad estructural y
❖ Detección de colina funciones de señalización
para las membranas
La colina está englobada dentro de celulares, neurotransmisores colinérgicos
las vitaminas del grupo B. Tiene (síntesis de acetilcolina), y también es
propiedades y funciones muy similares una fuente muy importante para los
al inositol (otra vitamina del grupo B). grupos metilos gracias a su
Es hidrosoluble y, por lo tanto, se metabolito, trimetilglicina
elimina a través de la orina. 8 (betaína), el cual participa en la síntesis
de las secuencias de S-
La colina es un nutriente esencial 4
adenosilmetionina (SAMe).
soluble en agua. El nombre colina hace
referencia generalmente a una serie de Al calentar el filtrado obtenido
sales cuaternarias de amonio que (correspondiente a la colina) de la
contienen el catión N,N,N- disolución de la licitina en la mezcla de
trimetiletanolamina. El catión aparece en etanol:éter (2:1) y su posterior filtración,
la cabeza de los grupos fosfatidilcolina y se desprendió un olor a pescado, esto
esfingomielina, dos clases de fosfolípidos es debido a que, la colina es un
que son abundantes en las membranas precursor de la trimetilamina (TMA), la
celulares. La colina es la molécula cual se produce principalmente por la
precursora de la acetilcolina, un degradación de la colina y trimetilamina
neurotransmisor que está involucrado nóxido (TMANO) por parte de las
en muchas funciones, entre las cuales bacterias intestinales, este exceso de
se incluye la memoria y el control del TMA es eliminado por las secreciones
musculo. La colina se usa en la síntesis corporales (orina, sudor aire espirado,
de componentes que forman parte de etc.) dando un característico olor a
las membranas celulares del cuerpo. 4 pescado. 4

Además la colina tiene una gran


importancia, puesto que ayuda a construir
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las membranas celulares y es F7rM5frRbIeXw&hl=es&sa=X&ved=0ahUKE


necesaria para el metabolismo de wjpqnp27zWAhUGKCYKHVsNAuQQ6AEISjA
lípidos, ya que inhibe la acumulación J#v=onepage&q=fosfatos%20de%20la
de lípidos en el hígado y favorece el %20yema%20de%20huevo&f=false
transporte y absorción en las células.
También cumple una importante (4) Fosfato – EcuRed, Ecured.cu.
función en la formación del feto. 8 Disponible en:
https://www.ecured.cu/Fosfato

(5) Antonio Luis Aguilar Shea, Síndrome


del olor a pescado (Trimetilaminuria), la
dieta es importante.
Disponible en:
http://scielo.isciii.es/scielo.php?
script=sci_arttext&pid=S2174-
51452016000300012

(6) Fundación hipercolesterolemia


familiar. Disponible en:
Figura 12. Síntesis de colina https://www.colesterolfamiliar.org/hipercol
(http://www.info esterolemia-familiar/colesterol-y-
farmacia.com/bioquimica/citicolina- trigliceridos/
aspectos-bioquimicos)
(7) Nivel normal de colesterol. Disponible
La colina se encuentra en productos en: http://colesterol.org.es/nivel-normal
como la yema de huevo, mariscos,
lentejas, cereales integrales como el (8) Colina-vitamina. Botánica online. Fecha
arroz, el maíz y el trigo; y también se de acceso: 27/09/2017. Disponible en:
encuentra en las semillas de sésamo, http://www.botanical-
girasol y lino, entre otros alimentos.8 online.com/medicinalescolina.htm

BIBLIOGRAFÍA

(1) UNAH-VS. Ácidos grasos


insaturados. Disponible en:
https://es.slideshare.net/josselynecerrato/
acidos-grasos-insaturados

(2) Unam, Avalon. Disponible en:


http://avalon.cuautitlan2.unam.mx/pollos/
m2_9.pdf

(3) Química Orgánica, Google Books.


Disponible en:
https://books.google.com.co/books?
id=TL98uAXZ3JQC&pg=PA293&lpg=PA293&
dq=fosfatos+de+la+yema+de+huevo&sourc
e=bl&ots=xvyOwlIGLd&sig=wgDbkQRVVkKf

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