INFORME DE LABORATORIO
MICROBIOLOGIA
Ficha:
2382954
INSTRUCTORA: INGRIS MONTERO
INTEGRANTES:
CELINDA ARDILA
ANGIE CORZO
JOHANA MORENO
MAYRA RIOS
HEIMY AREVALO
ESTEFANY ROSADO
INFORME DE LABORARORIO
TEMA: RECUENTO DE MOHOS Y LEVADURAS EN ALIMENTOS
OBJETIVOS:
Conocer el número de mohos y levaduras que tiene una muestra de galleta.
Determinar si la galleta es apta para el consumo humano según los resultados
encontrados.
INTRODUCCION
La contaminación fúngica de un alimento tiene mucha importancia, no tan sólo por su acción
deteriorante, que pudre y malogra materias primas y productos manufacturados, sino también por
la capacidad de algunos hongos para sintetizar gran variedad de mico toxinas, para provocar
infecciones y, incluso, para provocar reacciones alérgicas en personas hipersensibles a los
antígenos fúngicos. Por estos motivos, para conocer la calidad microbiológica de un producto, es
pertinente realizar un recuento de hongos y levaduras.
MATERIALES:
Material de vidrio (cajas Petri, pipetas graduadas, beackers, frascos schott, tubos de
ensayo)
Material metálico (Gradillas, espátulas)
Equipos (incubadoras, autoclaves, hornos de secado, balanza analítica)
Papel craff estéril, macro pipeta
PDA(potato dextrose Agar, Peptona, agua destilada
PROCEDIMIENTO:
El primer paso es hacer las ecuaciones correspondientes para sacar las medidas exactas
que vamos a necesitar para el medio.
Después de tener las cantidades exactas calculadas empezamos a preparar. Tomamos un
beackers y calculamos 138 ml de agua destilada y la agregamos en un frasco schott, luego
con el PDA nos dirigimos a la balanza para pesar 5,38 gr usando una espátula. Ya
después de haber pesado nuestro 5,38 gr lo agregamos al frasco schott ya con el agua
destilada agitamos bien y aflojamos un poco la tapa de esta para poner en una estufa y
poner a calentar, hasta ebullición para la total homogeneización y llevamos a la autoclave
por 40 minutos aproximadamente.
Después preparamos la peptona en un frasco schott Agregamos 117ml de agua destilada y
pesamos en la balanza 1,2gr de peptona y agitamos muy bien, luego en tubos de ensayo,
con 1 pipeta graduada tomamos 2 muestras de 9ml y ponemos nuestras 2 muestras en las
gradillas.
PROCEDIMIENTO REALIZADO EN LA
CABINA DE BIOSEGURIDAD: RECUENTO
EN PLACA
Mezclar muy bien la muestra (liquida) para asegurar su homogenización.
Desinfectar con alcohol al 75% el sitio por donde se valla a extraer la muestra.
Abrir asépticamente (con el mechero en medio) y adecuadamente la muestra
galleta.
Si es sólida tomar porciones y triturar de diferentes sitios de la muestra de galleta.
Pesar 11 gramos de la muestra en balanza analítica si es sólida, sobre un papel
Craff estéril o medir 11 mililitros si es líquida en recipiente estéril.
Macerar, picar o triturar.
Añadir al recipiente de dilución que contiene 99 ml de agua peptonada para
obtener la dilución de 101.
Mezclar al agitar vigorosamente el recipiente para homogenizar.
Preparar la dilución 102 trasfiriendo 1 ml de la dilución 101 a un tubo de Ensayo
que contiene 9 ml de agua peptonada, agitar cuidadosamente.
Preparar la dilución 103 trasfiriendo 1 ml de la dilución 10 2 a un tubo de ensayo
que contiene 9 ml de agua peptonada, agitar cuidadosamente.
Transferir por duplicado alícuotas de 1 ml de cada una de las diluciones
consecutivas en cajas de Petri estériles.
Verter en las cajas de Petri, 15 ml de agar PDA, OGY, YGC fundido y mantenido
a 45ºC
Mezclar el inoculo con el medio de cultivo fundido.
No debe transcurrir más de 20 minutos entre la realización de las diluciones y el
vertido del medio.
La manera más indicada para mezclar el inoculo con el medio es la siguiente:
Mover la caja de arriba hacia abajo 5 veces, rotar la caja cinco veces en el sentido
de las agujas del reloj, mover la caja 5 veces haciendo Angulo recto sobre el
movimiento y rotar la caja cinco veces en el sentido contrario de las agujas del
reloj.
Hacer control de esterilidad del medio de cultivo incubando una caja que contenga
Agar usado.
Una vez solidificado el medio de cultivo, invertir las placas e incubarlas a 23 +/-
2ºC (o temperatura ambiente) durante 3 a 5 días.
Cálculo e interpretación de los resultados.
Seleccionar las dos cajas correspondientes a la misma dilución que presenten
entre 20 y 100 colonias. Contar todas las colonias de cada caja. Hallar la media
aritmética de los dos valores y multiplicarlos por el factor de dilución.
Se reporta como” unidades formadoras de colonias (ufc) /g o ml.
Luego de realizada la siembra se dejan todas las cajas de forma invertida a temperatura
ambiente por 72horas.
Después de transcurrido el tiempo se hizo la correspondiente a la lectura de las placas y se
determinaron cuáles fueron las características macroscópicas y los microorganismos que
crecieron.
RESULTADO:
REFERENTES BILBIOGRÁFICOS
• NTC 4132 guía general para el recuento de mohos y levaduras, técnica de recuento de
colonia a 25°C
[Link]
mohos-y-levaduras/6491308
[Link]
HOLGUIN, M. (1998). Manual de técnicas de análisis para el control de calidad
microbiológico para consumo humano. División de laboratorios de alimentos y bebidas
alcohólicas INVIMA 1998,2002, 2006.
