Escuela: Instituto Tecnológico Superior de Apatzingán
Módulo: Cinética Química y Biológica
Unidad: No. 4
Actividad: Exposición
Profesor(a): Gámez Martínez Erika
Alumno: Santoyo Landeros Daniel
Inhibición enzimática
a) ¿A qué concentración de sustrato podrá una enzima operar a un
cuarto de su velocidad máxima (1/4 Vmax), si cuenta con una kcat
de 30.0 s-1 y una Km de 0.0050 M?
b) Determine la fracción de Vmax que se obtendría con las siguientes
concentraciones de sustrato [S]: 2 Km y 10 Km
a)
Inhibición enzimática
a) ¿A qué concentración de sustrato podrá una enzima operar a un
cuarto de su velocidad máxima (1/4 Vmax), si cuenta con una kcat
de 30.0 s-1 y una Km de 0.0050 M?
b) Determine la fracción de Vmax que se obtendría con las siguientes
concentraciones de sustrato [S]: 2 Km y 10 Km
b)
Inhibición enzimática
Se estudia la cinética de una enzima en ausencia y presencia de un
inhibidor A, a una concentración 10 mM. La velocidad inicial viene dada
en función de la concentracion de sustrato. Los datos obtenidos son:
a) Determina la Vmax y la Km en ausencia y presencia
a) Determina la Vmax y la Km en ausencia y presencia
Se utiliza la ecuación de Lineweaver-Burkque que relaciona la V0 con [S]:
La ecuaciones de la recta para cada enzima son
las siguientes:
Sin inhibición:
Y = 0.48798171x + 0.1910099, por lo que Vmax
es igual a 1/b por lo tanto:
Vmax = 1/0.1910099 = 5.2353 mM/min
X= -0.39, por lo que Km es igual a -1/Km
Km = -1/-0.39 = 2.564 mM
a) Determina la Vmax y la Km en ausencia y presencia
Se utiliza la ecuación de Lineweaver-Burkque que relaciona la V0 con [S]:
La ecuaciones de la recta para cada enzima son
las siguientes:
Con inhibición:
Y = 0.8446051x + 0.344724034 por lo que Vmax
es igual a 1/b por lo tanto:
Vmax = 1/0.344724034 = 2.90 mM/min
X= -0.40, por lo que Km =
a -1/Km Km = -1/-0.40 = 2.5 mM
Inhibición enzimática
En un experimento se midió la velocidad inicial de una reacción enzimática, a
varias concentraciones de sustrato [S]. La concentración de la enzima es 10
nM. Se grafica 1/v versus 1/[S] y se observa una línea recta en la cual el
intercepto y es 0.005 nM-1 seg. y la pendiente es 200 seg. a) ¿Cuál es el valor
de Km y el de Vmax para esta reacción enzimática?. b) Cuando se adicionaron
30 μMde un inhibidor, se observo que el intercepto-y es 0.0065 nM-1 seg y la
pendiente es 260 seg. ¿Que tipo de inhibición se observa?
a) b) Con inhibidor
b= 0.005 nM b= 0.0065 nM
m= 200 seg m= 260 seg
Vmax= 1/b = 1/0.005 = 200 nM/s Vmax= 1/b = 1/0.0065 = 153.84 nM/s Km=
Km= m*Vmax = 200*200 = 40000 nM m*Vmax = 260*153.84 = 39998.4 nM
Inhibición enzimática y inmovilizacion de enzimas.
En un cultivo de bacterias la velocidad de reacción de un enzima E fue
de 20Mg/min para una concentración de sustrato de 3mM. Si la
concentración de sustrato es igual o superior a 7mM la velocidad no
supera los 40Mg/min.
Al añadir un inhibidor competitivo la velocidad de la reacción fue de
20Mg/min para una concentración de sustrato de 8mM. Calcúlese la
Km, la Vmax y la Ki para esta enzima, sabiendo que la concentración
de inhibidor añadido es de 6m
[S] > 7 mM
La velocidad es 40Mg/min. Como es un inhibidor competitivo
Vmax=Vmax= 40 Mg/min y ½
Entonces la Vmax =
40Mg/min. Vmax = 20Mg/min. V = Vmax [S] /
Km + [S] 20 = 40 x 8 / Km + 8
½ Vmax será 20Mg/min Km= 8 Km = (1 / [I] / Ki) / Km Ki =
como esta velocidad se 3,6
consigue con una [S] igual a
3mM la Km es igual a 3mM.
