UNIVERSIDAD JUÁREZ AUTÓNOMA DE TABASCO

DIVISIÓN ACADÉMICA DE CIENCIAS BÁSICAS

Lic. Químico Farmacéutico Biólogo

ASIGNATURA:
Laboratorio de Hematología

PRÁCTICA #8: TINCIÓN WRIGHT

ALUMNAS:
Ana Karina Arias Cruz. 182A20084
Haidee Teresa Cárdenas Domínguez. 182A20034

PROFESOR:
Dr. César Manuel Landa Pineda

FECHA DE REALIZACIÓN: FECHA DE ENTREGA:

25 de Mayo de 2022 30 de Mayo de 2022

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 PRÁCTICA 8: TINCIÓN WRIGHT

FUNDAMENTO
La tinción de Wright nació de la tinción de Romanowsky, que consiste en una
solución de alcohol metílico de un colorante ácido (eosina Y) y otro básico (azul de
metileno) y sus productos de oxidación.

La mezcla de colorantes usados en la tinción de Wright provoca el efecto conocido

como Romanowsky, es decir, proporciona una hermosa coloración púrpura a los
núcleos de los leucocitos y a los gránulos neutrofílicos, mientras que los glóbulos
rojos se tiñen de color rosado.

OBJETIVOS

Aprender a realizar de manera correcta la tinción de Wright, para diferenciar los

distintos componentes celulares de la sangre.

INTRODUCCIÓN
La tinción de Wrigth es una técnica de coloración creada por el patólogo
estadounidense James Homer Wright en 1902, a partir de la tinción de
Romanowsky. Como la tinción de Romanowsky era inestable, Wrigth incorporó el
metanol como disolvente y fijador.

Esta coloración es policromática, lo que quiere decir que genera varios colores
dependiendo de la estructura que absorbe el colorante. Esta técnica de coloración
ha sido muy utilizada para realizar recuentos diferenciales de glóbulos blancos y
estudiar la morfología de los glóbulos rojos, plaquetas y leucocitos en sangre
periférica y médula ósea.

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Su aplicación es muy importante, ya que se pueden apreciar anormalidades en las
diferentes líneas celulares de la sangre, facilitando el diagnóstico de enfermedades
como la leucemia o infecciones bacterianas o parasitarias (Figura 8.1).

Figura 8.1 Diversos frotis de sangre periférica teñidos con tinción de Wright. A. Leucemia aguda B. Plasmodium
vivax dentro del eritrocito. C. Plasmodium falciparum, macrogametocito. D. Linfocito. Tomado de: Gil, M.
(2018, diciembre 23). Tinción de Wright: Fundamento, materiales, técnica y usos. Lifeder.
https://www.lifeder.com/tincion-de-wright/

Las estructuras ácidas tales como los ácidos nucleicos, las proteínas nucleares y el
citoplasma inmaduro reactivo de algunos tipos de células, fijan el azul B (colorante
básico).

Mientras que las estructuras básicas tales como la hemoglobina, los gránulos de los
segmentados eosinófilos, entre otras estructuras celulares, fijan la eosina Y
(colorante ácido). (Gil, 2018)

Para el estudio de las células sanguíneas se recomienda utilizar el colorante de

Wright, mientras que para la tinción de parásitos sanguíneos se usa el colorante de
Giemsa (Perea, 2003).

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La tinción de Wright permite suministrar un medio para estudiar la sangre y
determinar las variaciones y anormalidades de estructura, forma y tamaño de los
eritrocitos, su contenido de hemoglobina y sus propiedades de coloración. La
información obtenida de un frote de sangre periférica depende en gran parte de la
calidad del frote y la coloración (Rodak, 2009 y Morales, 1982).

Para la interpretación, se observa el color de los glóbulos rojos (cantidad de

hemoglobina) y se examina detenidamente su forma y tamaño. También debe
observarse la presencia de plaquetas, su agrupación y distribución (Perea, 2003).

La tinción de Giemsa emplea como colorante fundamental, una mezcla de tiacínicos

catódicos, como el azur A,B y azul de metileno, que colorean el núcleo, mientras
que la eosina se usa para coloración citoplasmática, estas sustancias están
disueltas en alcohol metílico. Su fundamento está en la disociación controlada de
las sales de eosinato, que ocurre por la mezcla de Giemsa con agua destilada. La
cromatina nuclear adopta la tinción azul violácea algo distinta a la habitual para los
colorantes tiacínicos y que recibe la denominación de efecto Giemsa (Rodak, 2009).

Para la interpretación se observa: eritrocitos color rosado, gránulos neutrófilos de

rosa a lila, gránulos eosinófilos de rojo a anaranjado, gránulos basófilos azul
violáceo oscuro, citoplasma de neutrófilos color rosa claro, citoplasma de linfocitos
azul celeste claro, citoplasma de monocitos azul grisáceo, núcleo de neutrófilos y
linfocitos violeta oscuro, núcleo de monocitos púrpura azulado algo más claro que
los anteriores, eritrocitos policromatófilos azul violeta, punteado basófilo azul
oscuro, cuerpos de Howell-Jolly rojo púrpura, plaquetas púrpura oscuro o violeta
con un halo azul claro a su alrededor. La coloración celular es muy variable en
cuanto a tonalidades, dependiendo del tiempo de tinción y de los lotes de colorantes
(Brown, 1993).

En una tinción ácida, los eritrocitos se tiñen bien pero los leucocitos se tiñen muy
pálidos o no se tiñen. Al contrario, en una tinción básica o alcalina los eritrocitos se
tiñen pálidos y el núcleo de los leucocitos excesivamente azules (Rodak, 2009).

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 EQUIPOS Y MATERIALES

MATERIALES Y MATERIALES Y
REACTIVOS REACTIVOS NO EQUIPO
BIOLÓGICOS BIOLÓGICOS
Sangre total Material necesario para Soporte para tinción
Colorante de Wright la extracción de sangre.
Solución amortiguadora
pH 7.2
Gasas o algodón
Pipeta graduada de 5mL
Propipeta

EMBALAJE
La FDA recomienda que las agujas y otros objetos punzocortantes usados sean
colocados de inmediato en recipientes aprobados por la FDA para desecho de
objetos punzocortantes. Los recipientes aprobados por la FDA para desecho de
objetos punzocortantes están hechos de plástico rígido y tienen una línea que marca
cuándo deben considerarse llenos, lo que significa que es momento de desechar el
recipiente. La manera más segura de desechar una aguja usada es colocarla de
inmediato en un recipiente para desecho de objetos punzocortantes, con el fin de
reducir el riesgo de pinchazos de aguja, cortadas y heridas punzantes causadas por
objetos punzocortantes sueltos.

METODOLOGÍA
1. Se extrajo la muestra sanguínea y se colocó en un tubo con anticoagulante
EDTA.
2. Se realizaron frotis sanguíneos y se dejaron secar.

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3. Se colocó el frotis secado al aire sobre un soporte para tinción con la sangre
hacia arriba.

4. Se cubrió completamente el portaobjetos con el colorante de Wright gota a

gota y se dejó por 2 min.

5. Posteriormente se le agregó al colorante un volumen igual de solución

amortiguadora para evitar la coloración débil. Se esperó la formación de brillo
metálico y se dejó por 2 min.

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 6. Se lavó con agua en el chorro cuidadosamente hasta que dejó de salir
colorante.
7. Se limpió el dorso del portaobjetos con una gasa o algodón humedecido en
alcohol para eliminar cualquier resto de colorante. Finalmente se dejó secar.

RESULTADOS
Los resultados obtenidos no fueron los que esperábamos, ya que la tinción se
observaba muy quemada, esto debido a que el colorante podría ya no servir.

DISCUSIÓN
Se tuvieron algunos imprevistos en la tinción esto podría deberse a que el colorante
no se encuentra en las condiciones adecuadas, sin embargo al observarlas al
microscopio se observó que no se tiñeron las células y la laminilla se veía como
quemada.

La coloración celular es muy variable en cuanto a tonalidades, dependiendo del

tiempo de tinción y de los lotes de colorantes.

Las posibles causas de error en el momento de la observación del frote pueden ser;

a) Tinción demasiado azulada:

1) Extensión demasiado gruesa. 2) Excesivo tiempo de tinción. 3) Lavado con poca
cantidad de agua. 4) Alcalinidad del colorante, del agua o tampón.

b) Tinción demasiado rosada:

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1) Tinción insuficiente. 2) Excesivo tiempo de lavado. 3) Acidez del colorante o
tampón.

c) Otras causas de error:

1) Utilización de porta objetos sucios. 2) Secado del colorante durante el periodo de
tinción. 3) Lavado inadecuado durante la tinción. 4) Presencia de polvo en el
portaobjeto. 5) Mala filtración del colorante antes de su uso. 6) pH inadecuado del
colorante o los diluyentes. 7) Agua destilada a pH inadecuado. 8) Precipitación del
colorante sobre el portaobjeto debido a inadecuado lavado o uso del colorante que
no ha sido filtrado adecuadamente. (Rodak, 2009)

CONCLUSIÓN
En conclusión podemos decir que la tinción de Wright está basada en una tinción
prototipo la cual fue tinción Romanowsky, que se realizó para poder estudiar
minuciosamente los tipos de células que existen. Sin embargo, con forme
fue avanzando el tiempo diversos científicos la fueron modificando para sus propios
fines de estudio.

BIBLIOGRAFÍA
 Perea, J. (2003). Reseña de "Cien Años del Colorante de Giemsa".
Biomédica, 23 (001), 5-18.
 Gil, M. (2018, diciembre 23). Tinción de Wright: Fundamento, materiales,
técnica y usos. Lifeder. Recuperado de: https://www.lifeder.com/tincion-de-
wright/
 Rodak, C.J. (2009). Atlas de Hematología Clínica (3ra ed.). (E.M.
Panamericana, Trad.) España: Elsevier.
 Morales, V. (1982). Extendidos de sangre periférica. Revista Médica de Costa
Rica.
 Brown AB. (1993). Hematology: Principles and Procedures (Lea & Febiger.
ed.). Philadelphia.