PRÁCTICA Nª 02
IDENTIFICACIÓN, EXTRACCIÓN Y CUANTIFICACIÓN DE DISACÁRIDOS
I. INTRODUCCIÓN:
Los disacáridos son los oligosacáridos más sencillos. La forma en que se
encuentran unidos los dos azucares es el factor determinante para que sean
reductores o no reductores. Cuando el hidróxilo (α o β) del grupo reductor se
une a otro del azúcar contiguo que no sea el que porta el carbono anomerico,
se habla de disacáridos reductores: Por el contrario si el enlace se efectúa
entre los hidroxilos hemiacetálicos de ambos azúcares simples, el disacárido
pierde su poder reductor.
Estos azúcares pueden también denominarse biosas, triosas y tetrosas.
Teóricamente derivan de 2, 3, ó 4 moléculas de monosacáridos
respectivamente, con la eliminación de 1, 2, ó 3 moléculas de agua. Uno de
los disacáridos más comunes en las plantas es la sacarosa
II. OBJETIVOS:
Al término de la sesión práctica el alumno estará en condiciones de:
• Identificar los disacáridos mediante reacciones de coloración.
• Determinar el porcentaje de sacarosa y lactosa en una muestra dada.
III. MATERIAL, SOLVENTE Y REACTIVOS.
1. Material:
• Tubos de ensayo
• Matraces Erlenmeyer
• Pipetas
• Papel de tornasol
• Probetas
• Buretas.
• Refrigerante de reflujo
2.- Solventes:
• Agua destilada
3. Reactivos
• Nitrato de Cobalto
• Solución de NaOH 50%
• Sulfato cúprico
• Acetato de plomo
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• Solución de Ferricianuro de Potasio 15%
• Solución de Fehling A y B
• HCl 37%.
• Solución de azul de metileno
4.- Equipos.
• Cocina Eléctrica
5. Material para la Práctica
• Papel de filtro
• Leche
• Azúcar blanco
• Agua destilada
IV. PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL
A.- REACCIONES DE IDENTIFICACION DE SACAROSA
1. Reacción de Herail: En un tubo de ensayo colóquese 2 mL. de solución
de sacarosa y 1mL. de S.R. de Nitrato de Cobalto 15%. Agítese y añádase
2 mL. de NaOH 50% da color violeta amatista.
2. Reacción de Selivanoff: En un tubo de ensayo colóquese 2 mL. de
solución de sacarosa y 1 mL. del reactivo de Selivanoff. Llévese a ebullición.
Da coloración roja.
B.- DOSAJE DE SACAROSA CON LICOR DE FEHLING.
Tómese en un matraz Erlenmeyer un volumen de solución de sacarosa
(100mL) Añádase 3 mL. de HCl q.p. y llévese a ebullición durante 1 hora.
Enfríese y neutralícese con c.s. de solución de NaOH (papel indicador)
Afórese a un volumen determinado. Esta solución colóquese en la bureta
determínese la cantidad de azucares reductores (ART) mediante el Licor de
Fehling en la forma ya conocida.
Determínese el porcentaje de sacarosa en la solución teniendo en cuenta
que:
100 g de azúcar reductor equivalen a 95 g. de sacarosa
EJEMPLO:
Suponiendo que se tomó un volumen inicial de 10 mL. de solución de
sacarosa. Después de la hidrólisis quedó 20 mL. y esto se aforo a 50 mL.
Si el tÍtulo de Fehling fue 0.045 y el gasto fue de 15mL., entonces:
15 mL. Gasto _______ O.045 A.R.
50 mL aforo ________ X
X = 0.15g. A.R.
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Determinando el % A.R. tenemos:
0.15 g. A.R. están en 20 mL. (volumen después de la hidrólisis); pero es la
misma cantidad de AR. que están en los 100 mL. (volumen inicial); por lo
tanto 0.15 son los g % de A.R. en la solución problema.
Si se partiera de un volumen diferente de 100 mL. habría que hacer una
relación más.
Determinando el % de sacarosa tenemos:
100 g. A.R. ________ 95 g. Sacarosa
0.15 g. A.R. ________ X
X = 0.1425 g. % Sacarosa
C.- REACCIÓN DE IDENTIFICACIÓN DE LA LACTOSA
Añádase 5 mL. de S.R. de NaOH al 50% a 5 mL. de una solución de lactosa
caliente. Calentar moderadamente la mezcla: el líquido se vuelve amarillo y
finalmente verde parduzco. Por adición de una gotas de S.R. de sulfato
cúprico se formará un copioso precipitado color rojo.
D.- DOSAJE DE LACTOSA EN LECHE.
Método de Carrez:
Mídase con pipeta 10 mL. de leche y colóquese en una probeta o matraz
aforado. Añádase c.s. H20 destilada para obtener 50 mL. Agregar 1 mL. de
ferricianuro de potasio 15% y c.s. de solución de acetato de plomo. Afórese
con agua destilada a 100 mL. y fíltrese a través de un papel de filtro con
pliegues. Colóquese la solución en la bureta y dósese con licor de Fehling
según el método ya conocido.
NOTA: Tener en cuenta que para un licor de Fehling de titulo 0.05 le
corresponde en lactosa 0.07.
EJEMPLO: Suponiendo que llenamos la bureta con el filtrado y
gastamos 25 mL. en titular con licor de Fehling de factor 0.056, entonces:
0.050 g. Glucosa _________ 0.07 g. Lactosa
0.056 g. Glucosa _________ X
X = 0.079 g. lactosa.
En:
25 mL. Gasto _________ 0.079 g. lactosa
100 mL. _________ X
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X = 0.3160 g. lactosa
Pero:
10 mL. Leche ________ 0.3160 g. lactosa
100 mL. Leche ________ X
X = 3.160 g. lactosa
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INFORME Nº ___
I. PROCEDIMIENTO / ESQUEMAS
II. REACCIONES
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III. RESULTADOS
IV. DISCUSIONES
V. CONCLUSIONES
VI. BIBLIOGRAFÍA
