FACULTAD EDUCACION Y CIENCIAS HUMANAS
PROGRAMA DE LICENCIATURA EN CIENCIAS
NATURALES Y EDUCACIÓN AMBIENTAL
INFORME DE LABORATORIO Nº3
EXTRACCIÓN DE ADN VEGETAL
DOCENTE
MÓNICA ISABEL MARTÍNEZ GERMÁN
PRESENTADO POR
JOSE CARLOS HERNÁNDEZ
ARTABAN PARDO
LEYNER DIAZ
CARLOS OCHOA
UNIVERSIDAD DE CÓRDOBA
FACULTAD DE EDUCACIÓN Y CIENCIAS
HUMANAS
LICENCIATURA EN CIENCIAS NATURALES Y EDUCACIÓN
AMBIENTAL CURSO DE GENÉTICA
MONTERÍA –
CÓRDOBA 2022
Por una universidad con calidad, moderna e incluyente
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INTRODUCCIÓN
En este informe nos referimos al material genético, el cual es cualquier material de origen vegetal,
animal u otro que tenga información genética y que la transmita de una generación a la otra. El
material genético está compuesto básicamente del ARN (Ácido Ribonucleico) y del ADN (Ácido
desoxirribonucleico), este último, es su compuesto principal, participando directamente en el
desarrollo, comportamiento y funcionamiento de los organismos.
OBJETIVOS
Aislar y observar el DNA de una banana con reactivos químicos y caseros.
Comprender los principios científicos de la extracción de ADN vegetal de materiales
cotidianos.
MATERIALES
1 banano.* 1 embudo.
1 trozo de tela para poder filtrar.(paño)* o Agua destilada.
papel filtro
1 pipeta de Pasteur. Beaker de 500 ml.
1 Licuadora Beaker de 50 ml
1 tubo de ensayo con tapa. Sal de mesa.*
Alcohol etílico Lava lozas (líquido). O shampoo de color claro*
1 varilla de vidrio. Microscopio.
Portaobjetos y cubreobjetos. Acetorceina
Hielo* Una cuchara plástica*
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MATERIALES Y PROCEDIMIENTO
En un tubo de ensayo vierte cierta cantidad de alcohol etílico y luego deja enfriar, si es
necesario rodéalo de hielo.
En una licuadora, mezclar una banana por taza de agua destilada (250ml).
Licuar por 15-20 segundos, hasta que la solución se mezcle.
En un beaker pequeño, preparar una solución consistente en una cucharadita pequeña de
shampoo y dos pizcas de sal.
Agregar 20 ml (4 cucharaditas) de agua destilada.
Disolver la sal y el shampoo revolviendo lentamente con la cuchara de plástico evitando
formar espuma.
A la solución preparada en el paso 4, agregar tres cucharaditas de la mezcla de banana
del paso 2.
Mezclar la solución con la cuchara por 5-10 minutos.
Mientras uno de los miembros del grupo mezcla la solución de banana, otro miembro
pondrá el filtro Nº 2 de café dentro de otro beaker. Doblar el borde del filtro alrededor del
beaker para que el filtro no toque el fondo del beaker.
Filtrar la mezcla vertiéndola dentro del filtro y dejar que la solución drene por algunos
minutos hasta que sean 5 ml aproximadamente de filtrado para testear.
Tomar un tubo de ensayo con alcohol frío. Para mejores resultados el alcohol debe estar
tan frío como sea posible.
Llenar la pipeta Pasteur con la solución de banana y agregarla al alcohol. El ADN no es
soluble en alcohol. Cuando el alcohol se agrega a la mezcla, los componentes, excepto el
ADN, permanecen en la solución mientras el ADN precipita en la capa de alcohol.
Dejar la solución reposar por 2 a 3 minutos sin mover. Es importante no batir el tubo de
ensayo. Se puede observar el ADN blanco el cual precipita en la capa de alcohol. Extrae
un poco de la mezcla y deposítala en el portaobjetos con un poco de azul de metileno
tíñela durante unos tres minutos. Lleva el portaobjetos con la mezcla de banano y observa
en el microscopio.
Cuando se obtienen buenos resultados, habrá suficiente ADN para levantar con una
varilla de vidrio (el ADN se enrolla a la varilla). O usando una pipeta de Pasteur que haya
sido calentada en la punta para formar un gancho, se puede recuperar (tomar) algo de
ADN. El ADN tiene la apariencia de mucus blanco y fibroso.
PROCEDIMIENTO.
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Licuado de banano sal
En nuestro procedimiento empezamos enfriando el alcohol en la nevera industrial luego el
licuado del banano en 250 ml de agua, posteriormente se le aplico 2 piscas de sal más 5ml de
champo, agua destilada (20ml) se disuelve sin formar espuma por 10 minutos, agregamos a la
anterior solución 15ml de solución de banano.
Sal+champo+agua Sal+champo+agua+solución de banano
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Filtrado de la solución filtrado terminado con alcohol
Luego se filtra la solución, al filtrado se le adiciono el alcohol previamente enfriado, se deja en
reposo durante 2 o 3 minutos, luego con una pipeta pasteur sacamos una pequeña muestra la cual
se ubica en el porta objetos, se le aplicó una gota de acetorceina y observamos al microscopio
mostrando como resultado en las siguientes imágenes.
Muestra con acetorceina Enfoque en 40x
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ANÁLISIS DE LOS RESULTADOS
Después de realizar esta práctica logramos cumplir con el proceso que permite extraer el ADN de
la planta, ya sea de banano, tomate, cilantro e incluso piña este laboratorio fue creado con el
propósito de extracción Mencionado anteriormente, también con los materiales y reactivos que nos
brindan en el laboratorio son muy necesarios para la realización de esta práctica.
Conclusión
En esta práctica de laboratorio fue excelente a la hora de darnos los resultados
Obtenidos, pudimos observar que hubo presencia de ADN, en las células de banana, y también
pudimos observar que la goma fibrosa de color blanca que representa el ADN en la parte
superior del tubo de ensayo lo cual nos indica que la muestra es heterogénea.
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PREGUNTAS PARA ANALIZAR LA EXPERIENCIA.
¿Por qué se puede suponer que la banana contiene ADN?
R//: La banana está compuesta por células eucariotas vegetales, estas células tienen ADN
alojado en su núcleo. Todo lo que está considerado vivo, debe tener ADN que es el que se
encarga de transmitir información. Una banana es una banana porque su ADN así lo dice. El
material genético ADN se encuentra en el núcleo de las células, Porque la banana es un fruto
vegetal (partenocárpico) contiene los óvulos o primordios seminales sin haber sido
fecundados por el anterozoide.
¿Dónde se encuentra ese ADN?
R//: El ADN se encuentra en las células del ser vivo, en concreto en el núcleo de las células y
forma parte de los cromosomas, dentro de los primordios seminales se encuentra el ADN
vegetal.
¿Qué otro tipo de sustancias es posible encontrar entre los componentes de la
banana?
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R//: En estos experimentos también podemos encontrar ARN y algunas proteínas, Rica en
minerales como el magnesio, potasio, ácido fólico y sustancias astringentes, la banana
también ofrece un elevado aporte de fibra, del tipo fruto-oligosacáridos. Es pobre en grasas y
en proteínas. Además posee betacaroteno, vitaminas del grupo B –sobre todo, ácido fólico– y
C y vestigios de vitamina E. Contiene Calorías, Hidratos de carbono , Grasas, Agua, Fibra,
Calcio, Hierro Yodo, Magnesio, Cinc, Sodio, Potasio, Vitamina A Viatamina B1, Vitamina
B3 Vitamina B6, Vitamina B9 , Vitamina C, Triptófano , Betacaroteno ,Cobre , manganeso
, Fósforo y Selenio, etc.
¿Por qué es necesaria la acción del detergente?
R//: El detergente líquido o el lavavajillas utilizado en el experimento tiene como función
destruir las membranas celulares del tejido vivo que estamos utilizando. ... Al romperse las
membranas celulares se permite la salida del ADN al exterior.
¿Cuál es la función de la sal en la experiencia?
R//: La sal en disolución actúa disminuyendo la solubilidad de las proteínas, lo que hace que
precipiten y se separen más fácilmente del ADN para poder obtenerlo con una mayor pureza
¿Cuál es la función del alcohol en la experiencia?
R//: Para aislar el ADN hay que hacer que precipite en alcohol, ya que el ADN es soluble en
agua, pero cuando se encuentra en alcohol precipita. ... Además de permitirnos distinguirlo, el
alcohol separa el ADN de otros componentes celulares, los cuales quedan en la solución
acuosa.
¿Pará qué se realiza el licuado?
R//: El licuado se realiza para poder exponer el ADN de la banana por lo tanto necesitamos
romper dichas células.
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Al finalizar la experiencia se obtiene un mucus blanco y fibroso que sería el ADN.
¿Es posible que la molécula de ADN se visualice a simple vista? ¿Por qué?
R//: Sí es posible observar las moléculas del ADN, porque como bien hemos dicho se puede
observar un mucus blanco y fibroso a simple vista que este sería el ADN.
A partir de la respuesta anterior, ¿qué creen que contiene “el ADN” obtenido en la
experiencia?
R//: Es un cumulo de muchísimas moléculas de ADN juntas, posiblemente millones al grado
de poderse visualizar dado el tamaño de este.
Averigua las técnicas moleculares que se pueden emplear para el análisis del ADN
luego de haber realizado la extracción del mismo.
R//: Pruebas moleculares. El análisis directo de ADN se realiza cuando se conoce la secuencia
del gen de interés. Se puede realizar una prueba de ADN en cualquier muestra de tejido,
incluso con muestras muy pequeñas. Para realizar las pruebas, se pueden usar diferentes
tecnologías moleculares, como la secuenciación directa, los ensayos de reacción en cadena de
la polimerasa (PCR, por sus siglas en inglés) y la hibridación. La técnica de PCR es un
procedimiento usado para amplificar los segmentos deseados de ADN a través de la repetición
de los ciclos de desnaturalización (separación del ADN de doble cadena inducida por calor),
el apareamiento (unión de cebadores específicos del segmento deseado a una cadena parental
de ADN) y la elongación (extensión de las secuencias cebadoras para formar una nueva copia
de la secuencia deseada). Se pueden realizar otras pruebas sobre el producto amplificado. En
el caso de algunas enfermedades genéticas, se pueden dar muchas mutaciones diferentes en el
mismo gen y causar una enfermedad, lo que puede dificultar las pruebas moleculares. La
hibridación genómica comparativa (CGH, por sus siglas en inglés) o análisis de micro
matrices cromosómicas (CMA, por sus siglas en inglés) es un método citogenético molecular
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para analizar las ganancias o pérdidas del ADN y que no son detectables con los análisis
cromosómicos de rutina. Este método se basa en la proporción entre el ADN del paciente
etiquetado con moléculas fluorescentes y el ADN normal de referencia. La técnica CGH
puede detectar pequeñas eliminaciones o duplicaciones, pero no las modificaciones
cromosómicas como las inversiones o las translocaciones recíprocas equilibradas o las
alteraciones en el número de copias de cromosomas. (Análisis., 2008)
Consulta otra técnica para extracción de ADN.
R// Se optimizó un protocolo para la extracción de ADN genómico de Pinus tecunumanii
basado en el método de extracción de Doyle y Doyle (1990). Se probaron los mega
gametófitos de las semillas de árboles de P. tecunumanii muestreados en cinco poblaciones
naturales de Nicaragua. El método consta de maceración del tejido en tubos Eppendorf, una
extracción con bromuro trimetil amonio de cetilo (CTAB) empleando altas concentraciones
de sales, proteínas K, extracciones sucesivas con cloroformo-alcohol isoamílico y un
tratamiento con ARNasa A. El rendimiento fue aproximadamente 13 µg de ADN por 58.7 mg
de tejido inicial fresco. El ADN genómico obtenido por este método fue apropiado para ser
usado en reacciones RAPD (ADN polimórfico amplificado al azar).
(Díaz, 2013)
¿Cómo crees que esta práctica pueda contribuir en el desarrollo de competencias en
tus estudiantes de bachillerato?
R//: El trabajo práctico en ciencias mejora las actitudes e intereses de los estudiantes, estimula
su conocimiento de la ciencia, mejora el conocimiento empírico de conceptos científicos y
permite el desarrollo de muchas habilidades. Sin embargo, los resultados de las prácticas de
laboratorio habitualmente realizadas en institutos y departamentos, basados en el seguimiento
paulatino de las instrucciones autosuficientes, impartidas por el profesor en el temario, no son
satisfactorios. Ante esta situación, la enseñanza constructivista se propone desarrollar la
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Práctica entre quienes tratan a los estudiantes como investigadores jóvenes, mediante la
implementación de un modelo educativo directo y orientado a la investigación. Muchas
encuestas han demostrado que las actividades experimentales diseñadas como pequeñas
encuestas proporcionan mejores situaciones de aprendizaje. Por tanto, la orientación a la
investigación se considera ahora una herramienta valiosa en todos los niveles de la educación,
especialmente en la formación inicial de los profesores.
Bibliografías
Analysis., G. G. (2008). NCBI. Obtenido de NCBI:
www.ggc.org/diagnostics/cytogenetics/cytogenetics.htm
Díaz, D. C. (14 de 05 de 2013). Central American Journals Online. Obtenido de
https://lamjol.info/index.php/ENCUENTRO/article/view/1089
Wako Chemicals USA, I. (30 de Enero de 2014). FUJIFLIM. Obtenido de FUJIFILM:
https://www.wakolatinamerica.com/blog-reactivos/noticias-wako/post/10-metodos-de-
extraccion-de-adn/
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