INSTITUTO TECNOLÓGICO DE LÁZARO CÁRDENAS
INGENIERÍA QUÍMICA
GRUPO: 41X
ANALISIS INSTRUMENTAL
QFB. ROSINA PEREZ SANCHEZ
PRÁCTICA 4: DETERMINACIÓN DE LA CURVA DE
CALIBRACIÓN DE FE.
EQUIPO 4
JONATHAN ALFARO TULAIS N.C.20560017
ALEYDIS CISNEROS VAZQUEZ N.C.20560076
GEMA IVETH HERNÁNDEZ REYES N.C.20560304
LISELDI KARMIN LUIS LUIS N.C.20560484
CD. LÁZARO CÁRDENAS, MICHOACÁN. A 18 DE MAYO DEL 2022.
OBJETIVO
Determinar la curva de calibración del Hierro por el método espectrofotometría del complejo
Hierro – ortofenantrolina.
MARCO TEÓRICO
La Espectrofotometría se refiere al uso de la luz para medir las concentraciones de sustancias
químicas; cuando una molécula absorbe un fotón para de un estado basal o fundamental, a un
estado excitado.
EQUIPO Y MATERIAL REACTIVO
Matraz aforado de 100 ml (6) Solución patrón de hierro: 0.04 mg de Fe ++/ml
Espectrofotómetro visible 100 ml de clorhidrato de hidroxilamina al 10%
Vaso de precipitado de 100 ml (2) Orto-fenantrolina al 0.1% (en frasco ámbar)
Cubetas para espectrofotómetro Buffer acetato de Sodio-acético pH 3.5 a 0.1M
Pipeta de 10 ml (1) Solución problema FeSO4 (0.01 gr/lt)
Perilla de seguridad (1)
Pipeta de 1 ml (1)
Pizeta
PROCEDIMIENTO:
1. Encender el equipo y calentador durante 15 minutos para estabilizarlo.
2. En matraces aforados de 100ml adicionar las cantidades correspondientes de los reactivos
a utilizar según la tabla siguiente y aforar con agua a 100ml.
TUBO
Ppm Fe ml Patrón ml Hidroxilamina ml buffer ml O-fenantrolina
S
Blanco 0.0 0.0 1.0 10.0 10.0
1 1.0 2.5 1.0 10.0 10.0
2 3.0 7.0 1.0 10.0 10.0
3 5.0 12.0 1.0 10.0 10.0
4 7.0 18.0 1.0 10.0 10.0
5 9.0 22.0 1.0 10.0 10.0
3. Se homogeniza y se deja reposar 5 minutos a que aparezca el color.
4. Se calibra el equipo a 0 y 100% de transmitancia con el blanco a 510nm de absorbancia
en los equipos manuales y en el espectrómetro Ekem se lleva la calibración a 546 nm.
5. Cuidar de no dejar huellas en las paredes de las celdas para dejar que pase bien la luz.
6. Tomar 1ml de la solución problema y añadir 1ml de hidroxilamina, 10ml de buffer y
10ml de orto-fenantrolina y aforar a 100ml y dejar reposar 15minutos y leer en el
espectrofotómetro, Se procede a la toma de las lecturas de cada tubo utilizando cualquiera
de los 3 espectrofotómetros disponibles en el laboratorio de química calibrando con agua
destilada, se efectúan las lecturas a 510 nm en los espectros manuales y en el
Espectrómetro Ekem la lectura se realiza a 546 nm.
7. Se hace una gráfica de la concentración contra la transmitancia o contra la absorbancia de
acuerdo al equipo utilizado y se examina la curva, si no todos los puntos caen dentro de la
línea recta, corregir por el método de mínimos cuadrados.
8. Se toma la lectura de una muestra problema de concentración desconocida proporcionada
por el instructor y por medio de la gráfica se determina la concentración de la misma
CUESTIONARIO:
1. Investigar el fundamento teórico del método de determinación de hierro por medio
de la formación de un complejo coloreado con Orto-fenantrolina.
En la determinación del Hierro con O-fenantrolina se debe presentar la siguiente
reacción: 2Fe+2+2NH2OH+2OH--- 2Fe+3 + N2+ 4H2O El hierro debe estar en estado de
oxidación +2, y el agente reductor se adiciona antes de desarrollar el color, en este caso
se usa hodroxilamina.
2. Cuál es la función de la hidroxilamina en el método de determinación de hierro por
formación de complejos con orto-fenantrolina.
La función de la hidroxilamina en este método es como agente reductor, todo esto para
que el hierro oxide y se formen los complejos
3. Graficar la curva de calibración de absorbancia (510nm) vs concentración hierro
(ppm).
ppm ABSORBANCIA 510nm
1 0.15854
3 0.34331
5 0.77691
7 1.21376
9 1.4047
ABSORBANCIA 510nm
1.6
1.4
1.2
1
Axis Title 0.8
0.6
0.4
0.2
0
1 3 5 7 9
ppm
4. Calcule la concentración de hierro de la solución problema.
El equipo arrojo que la solución problema tenía una concentración de 1.564ppm
OBSERVACIONES:
Se observó que entre más concentración (ppm en este caso) mayor es su absorbancia, a lo que
nos lleva a la ley de Beer, la cual explica que entre mayor concentración, mayor absorbancia y
transmitancia.
CONCLUSIONES:
De acuerdo a lo observado en los equipos utilizados para la calibración del Fe, podemos hacer la
comparación entre un espectrofotómetro manual y uno digital. En el manual se obtienen valores
de absorbancia no tan precisos ya que depende de la perspectiva de cada uno de donde vea la
flechita que marca el rango, así como también implica más trabajo a la hora de hacer las gráficas.
En cambio, en el digital los valores que nos arroja son precisos y nos muestra la gráfica de
absorbancia al instante sin necesidad de hacer cálculos, por lo que ahorra tiempo.
En esta práctica se usaron muestra con diferente cantidad patrón, por lo que eso varía en los
rangos de absorbancia. Comparando los resultados de cada muestra entre un espectrofotómetro y
otro, podemos decir que solo varían por algunos decimales.
CÁCULOS Y RESULTADOS:
No se realizaron cálculos para esta práctica, ya que el espectrofotómetro (Spectronic-21) que se
usó, da los resultados directamente, por lo que los resultados fueron los siguientes:
mL mL O-
Matraz Ppm Fe mL Patrón Buffer Absorción
Hidroxilamina Fenantrolina
Blanco 0 0.0 1 10 10 0
1 1 2.5 1 10 10 0.17
2 3 7.0 1 10 10 0.37
3 5 12.0 1 10 10 0.75
4 7 18.0 1 10 10 0.82
5 9 22.0 1 10 10 1.2
EVIDENCIA
Por otra parte, también se utilizó un espectrofotómetro eléctrico, donde nos da los resultados
directamente junto con la gráfica para cada solución y los resultados fueron los siguientes:
Matraz 1 de: 1 Ppm Fe
Matraz 2 de: 3 Ppm Fe
Matraz 3 de: 5 Ppm Fe
Matraz 4 de: 7 Ppm Fe
Matraz 5 de: 9 Ppm Fe
