Impregnación Argéntica en Nucleolos de A. cepa
Cargado por
Juan Llontop SolanoImpregnación Argéntica en Nucleolos de A. cepa
Cargado por
Juan Llontop SolanoUNIVERSIDAD NACIONAL MAYOR DE SAN MARCOS
Universidad del Perú, Decana de América
FACULTAD DE CIENCIAS BIOLÓGICAS
E.A.P. GENÉTICA Y BIOTECNOLOGÍA
LABORATORIO DE BIOLOGÍA CELULAR
Práctica Nº10: IMPREGNACIÓN ARGÉNTICA NUCLEOLAR
Horario : Miércoles de 8:00 a 10:00 (G2)
Fecha de realización de la práctica: 19 de junio de 2019
I. INTRODUCCIÓN
El nucleolo es una estructura transitoria encontrada en el núcleo de células eucariotas y cuya
función principal es la síntesis del RNA ribosómico y el ensamblaje de las proteínas con RNA
para su posterior transporte al citoplasma. Tiene una estructura proteica densa organizada en
una zona granular (gránulos de ribonucleoproteínas) y una zona fibrilar (filamentos de
cromatina). En células en proliferación el nucléolo presenta una fase de dispersión durante la
profase y reconstitución durante la telofase. Este comportamiento de desorganización y
reaparición del nucléolo es denominado ciclo nucleolar. El tamaño y número de nucleolos es
una medida de la intensidad de la síntesis de proteínas en la célula.
Algunos cromosomas, llamados cromosomas SAT, presentan una constricción secundaria antes
de una porción denominada satélite, que contiene a la región organizadora nucleolar (NOR),
relacionada con la formación del nucleolo después de la división celular. En células
meristemáticas de Allium cepa después del tratamiento con nitrato de plata se muestran
normalmente un par de nucleolos.
II. OBJETIVOS
- Distinguir nucleolos en el núcleo de células de Allium cepa a través de la impregnación
argéntica
- Reconocer el tamaño y número de nucleolos en una célula como un factor de actividad celular.
III. MATERIALES
- Láminas portaobjeto y cubreobjeto - Formol 10% - Hidroquinona 1% (1:1)
- Raíces de Allium cepa - Nitrato de plata 2%
IV. OBSERVACIONES Y RESULTADOS
A. OBSERVACIÓN DE NUCLEOLOS EN MERISTEMO APICAL DE RAÍZ DE A. cepa
Después de la impregnación argéntica, se observan los nucleolos en el interior del núcleo de las
células de meristemo apical de A. cepa. Su color es más oscuro que el resto del núcleo, su
forma es redonda y su tamaño es relativamente grande. Su número es variable, entre uno y tres
nucleolos.
El conteo de células con uno, dos y tres nucleolos se realizó en tres campos con un aumento
total de 400X. Los resultados se observan en la Tabla N.º 1:
Tabla N. º1: Conteo de células en meristemo apical de raíz de Allium cepa
N.º CAMPO Frec. CAMPO Frec. CAMPO Frec. FRECUENCIA
TOTAL
NUCLEOLOS #1 Rel. #2 Rel. #3 Rel. RELATIVA
UNO 14 0.167 14 0.149 11 0.130 39 0.148
DOS 58 0.690 65 0.691 59 0.694 182 0.692
TRES 12 0.143 15 0.160 15 0.176 42 0.160
263 1.000
B. DISCUSIÓN DE RESULTADOS
Todas las células observadas poseyeron nucleolos, lo que sugiere que se encuentran en
interfase. El conteo de células demuestra que la mayoría de células en A. cepa cuenta con dos
nucleolos, el mayor número de nucleolos encontrado fue de tres.
Esto se encuentra en relación con el número de regiones NOR en el núcleo de A. cepa. Las
regiones NOR se encuentran en los cromosomas SAT y se encargan de formar los nucleolos.
En A. cepa se encuentran cuatro cromosomas SAT (Panzera, 1996), cada uno de ellos con el
potencial de formar nucleolos; sin embargo, en condiciones normales solo dos están
activados, lo que explica la preponderancia de dos nucleolos. Las ocurrencia de tres nucleolos
y un nucleolo puede atribuirse a mayor y menor actividad de las regiones NOR,
respectivamente.
El número de nucleolos y su tamaño está en relación con la actividad transcripcional y síntesis
de proteínas en la célula, debido a que ellos se encargan de producir las unidades ribosomales.
La cantidad y tamaño de nucleolos hallado en las células meristemáticas evidencia la elevada
transcripción y expresión génica que se da en estas células proliferativas.
V. CONCLUSIONES
La impregnación argéntica permite visualizar los nucleolos, porque las partículas de plata se
adhieren al nucleolo por su contenido en ribonucleoproteínas.
En las células en interfase del meristemo de A. cepa se encuentran normalmente dos
nucleolos, lo que evidencia su alta actividad transcripcional.
El nucleolo atraviesa un ciclo de desorganización y reorganización en células proliferativas.
VI. CUESTIONARIO
1. ¿Qué se observa en las células interfásicas?
Después de la impregnación argéntica, las células meristemáticas de A. cepa que se hallaban en
interfase presentan mayormente dos nucleolos, aunque algunas presentaban hasta tres
nucleolos. Estos nucleolos se observan como gránulos oscuros en el interior del nucleoplasma.
El relativamente alto número de nucleolos y su tamaño son evidencia de la alta expresión
génica que se da en las células en proliferación.
2. ¿Qué forma adopta el nucleolo en la profase?
Durante la profase temprana, el nucleolo disminuye de tamaño y toma una forma irregular,
debido a la reorganización de las regiones organizadoras de nucleolos (NOR) por la
condensación de cromatina. Sin embargo, en la profase tardía el nucleolo se desorganiza
totalmente y no es observable como una estructura.
3. ¿Cómo se observa el nucleolo en la metafase y anafase?
Debido a su desorganización profásica, el nucleolo no se puede observar como una estructura
durante la metafase y anafase. Algunos de sus componentes aún permanecen en la célula: el
centro fibrilar, constituido por el NOR, sigue formando parte de los cromosomas; mientras que
las ribonucleoproteínas de la zona granular están dispersos en el citoplasma
4. ¿Qué sucede con el nucleolo en la temprana telofase y en la temprana interfase?
Durante la telofase temprana, se forman los cuerpos prenucleolares, que serán parte de la zona
granular del futuro nucleolo, a partir de la fusión de las ribonucleoproteínas dispersas en el
citoplasma provenientes de la desorganización del anterior nucleolo. En el resto de la telofase y
la interfase temprana, los componentes del nucleolo se reorganizan para formar los nucleolos
maduros: la cromatina en el interior del núcleo se descondensa y las regiones NOR se unen a
los cuerpos prenucleolares y al resto de componentes del nucleolo.
VII. FUENTES BIBLIOGRÁFICAS
Giménez G. (2001). Reiniciación de la transcripción en el ciclo celular: Nucleologénesis.
Anales de la Real Academia Nacional de Farmacia (Vol. 67, No. 1).
Karp G (2008). Biología celular y molecular. Conceptos y experimentos. 5ª edición.
MacGraw Hill Interamericana Editores.
Lacadena J. (1996). Citogenética. Editorial Complutense
Panzera F., Giménez M. (1996). Nucleolar organizer expression in Allium cepa L.
chromosomes. Chromosoma, 105(1), 12-19.
