Article 1
Article 1
Antecedentes: La sustitución de la osmolalidad del fue mayor que el plasma en 168 de 168
plasma por la osmolalidad de la sangre entera podría casos (100%) y distribuciones de datos superpuestas
acelerar los tratamientos que de otro modo se retrasarían poren un 27%. La diferencia media en la molaridad del
el tiempo requerido para separar los eritrocitos del sistema operativo fue de 0 ± 2 mmol/l. Sangre pura
plasma. El propósito de esto fue mayor que el plasma en 90 de 168 casos
estudio fue comparar la osmolaridad medida (mmol/kg) (56%) y distribuciones de datos superpuestas por
y la osmolaridad calculada (mmol/l) de sangre total y 90%. La brecha de osmol (osmolalidad ÿ osmolaridad)
plasma. fue de 16 ± 6 mmol para sangre completa
Métodos: La osmolalidad de la sangre entera y 7 ± 5 mmol para plasma. Diez voluntarios fueron
y el plasma se midió mediante congelación probados en una ocasión post hoc
punto de depresión por micro-osmómetro y para investigar los efectos potenciales del volumen de
osmolaridad calculada a partir de medidas de biosensor la muestra. La diferencia entre todo
de sodio, glucosa y urea en sangre sangre y plasma se redujo a 3 ± 2
nitrógeno. La influencia del volumen de la muestra mmol/kg con un volumen de muestra mayor (250 ÿl
también se investigó post hoc comparando la frente a 20 ÿl). Conclusiones: Esta investigación
osmolalidad medida a 20 y 250 ÿl. proporciona pruebas sólidas de que la sangre entera
Resultados: Sesenta y dos voluntarios proporcionaron 168 y la osmolalidad del plasma no son medidas
muestras pareadas de sangre entera y plasma intercambiables cuando se utiliza una muestra de 20 ÿl.
para analizar. La diferencia de medias (total se usa J. Clin. Laboratorio. Anal. 28:368–373,
sangre ÿ plasma; ± desviación estándar) en la os 2014. C 2014 Wiley Periodicals, Inc.
molalidad fue de 10 ± 3 mmol/kg. Sangre pura
Palabras clave: osmolaridad calculada; osmolalidad medida; brecha de osmol; volumen de la muestra
que la osmometría podría producir resultados diferentes entre suplementos dietéticos y cualquier medicamento que no sea un
sangre total y plasma. Por ejemplo, la sangre entera tiene también se prohibieron los anticonceptivos orales. Los voluntarios fueron
una viscosidad significativamente más alta que el plasma (30) y contiene proporcionaron sesiones informativas y dieron su consentimiento por
partículas suspendidas que pueden actuar como núcleos para la escrito voluntario e informado para participar. Los investigadores se
cristalización, lo que reduce potencialmente el punto de congelación y adhirieron a AR 70-25 y a la Investigación Médica del Ejército de EE. UU. y
aumento de la osmolaridad (31). Durante mucho tiempo se ha sospechado Regulación del Comando de Material 70-25 sobre el uso de voluntarios en
del carácter más heterogéneo de la sangre total (frente al plasma). investigación. El Instituto de Investigación del Ejército de EE.
ser problemático en lo que respecta a la osmometría (32), Comité de Revisión de Uso Humano de Medicina Ambiental
y puede ser particularmente desafiante en situaciones donde aprobó este estudio. Al llegar al laboratorio, se obtuvo la confirmación del
el volumen de la muestra es necesariamente pequeño (21, 24). cumplimiento de las restricciones del estudio.
A pesar de las limitaciones teóricas de realizar osmometría en muestras Luego se midió la masa corporal vestida (kg) (estacionario
de sangre entera, excelente concordancia escala, modelo WSI-600, Mettler Toledo, Toledo, OH), como
ha sido reportado entre sangre total y plasma en así como la altura de pie (cm; estadiómetro portátil, modelo
la forma de pequeñas diferencias de medias y una gran correlación 217, Seca, Hanover, MD) sin zapatos. Asignaturas
coeficientes (21, 22, 24, 32). Se ha utilizado una amplia gama de volúmenes luego se sentaron y después de un período de estabilización de 20 minutos,
de muestra al considerar tanto la presión de vapor se extrajo sangre de una vena antecubital sin estasis.
(5 ÿl) y técnicas de depresión del punto de congelación (20–200 ÿl). La Se recogieron dos muestras de sangre en 2,7 ml de litio (Newton, NC).
R
apariencia de un acuerdo cercano puede ser tubos de heparina (la muestra de Sarstedt- Uno
algo engañoso, sin embargo. En un estudio que informa Monovette se reservó para el análisis inmediato de osmolalidad de la
diferencias medias aproximadas (sangre total-plasma) de sangre total, mientras que la otra muestra se centrifugó
menos de 1–2 mmol/kg y un coeficiente de correlación a 1.500 × g durante 15 min a 5ÿC para adquirir plasma. UN
de 0,96, las diferencias individuales fueron bastante grandes (+22 a Inmediatamente se transfirió una muestra alícuota de 20 µl de sangre total
ÿ18mmol/kg) (22). En todos los estudios en los que una correlación o plasma a cubetas de muestra para la determinación de la osmolalidad.
se reportó el coeficiente (21, 22, 24, 32), el relevante pero La osmometría de sangre total y plasma fue
amplio rango (70–200 mmol/kg) para medidas de osmolalidad realizado por triplicado a través de la depresión del punto de congelación con
también puede haber inflado la varianza explicada (33). un mas un microosmómetro calibrado (ClinitrolTM 290 Reference Solution,
R
Un estudio reciente con perros informó que la osmolalidad de la sangre Norwood, MA) (Fiske Micro-osmometer,
total fue consistentemente 10 mmol/kg más alta que la del plasma. Modelo 210, Norwood, MA) dedicado a análisis de sangre. Cuando las
cuando se utilizó un micro-osmómetro (20 ÿl) (34), que medidas intramuestra por triplicado diferían por
es similar a las observaciones inéditas de nuestro laboratorio. A la luz de ÿ3 mmol/kg (ÿ1%), se utilizó el valor de la mediana. Si el
los detalles limitados disponibles para comparar las medidas intramuestra por triplicado diferían en >3 mmol/kg,
concordancia y las mayores diferencias de medias entre se midieron dos muestras adicionales y la mediana
sangre y plasma informados más recientemente en perros (34), se utilizó el valor (35). Sangre total y plasma (150 ÿl)
parece prudente reconsiderar la conclusión general de que también se analizaron para sodio, potasio, calcio, magnesio y nitrógeno
la sangre total y el plasma son cantidades intercambiables. ureico en sangre mediante análisis selectivo de iones directo.
El propósito de este estudio fue comparar plasma y electrodo; la glucosa y el lactato se analizó por análisis enzimático
sangre completa en índices de osmolaridad medida y osmolaridad determinación; el hematocrito se midió por conductividad con corrección
calculada para comprender mejor el potencial de la sangre completa para de sodio y la hemoglobina se midió por reflectancia de longitud de onda
reemplazar el plasma cuando hay una múltiple con conductividad
deseo de medir rápidamente la osmolalidad de muestras pequeñas corrección; todos los análisis se realizaron con un Stat Pro file Critical Care
volúmenes Un propósito secundario, post hoc, del estudio fue Xpress (Nova Biomedical, Waltham,
comparar los resultados obtenidos con 20 y 250 ÿl de muestra MAMÁ). Las proteínas plasmáticas se midieron por refractometría.
volúmenes (1110400A Medidor de TS, AO Reichert Scientific Instruments,
Keene, Nueva Hampshire). La osmolaridad de la sangre total y del plasma fue
calculado a partir de sodio, glucosa y nitrógeno ureico en sangre
MATERIALES Y MÉTODOS
según Mahón et al. (36). La concentración de agua plasmática se calculó
Los participantes en esta investigación fueron estudiados en condiciones a partir de proteínas plasmáticas (37) y
de vida ordinarias (casi vida libre) entre las 0800 concentración de agua en sangre a partir de agua plasmática y hematocrito,
y 1200 h. Las instrucciones específicas se limitaron a solicitar que suponiendo una concentración de agua del 71 % para los eritrocitos
continuaran con su ingesta habitual de alimentos y líquidos. (29).
y patrones de actividad física a lo largo de su participación en el estudio. Una pregunta secundaria del estudio de investigación post hoc fue
Las restricciones del estudio se limitaron a la abstención del consumo de investigado utilizando un número menor de voluntarios en
alcohol durante ÿ24 h y la ingesta de alimentos. quienes se obtuvo una sola muestra de sangre entera y plasma como se
y líquido ÿ90 min antes de cada visita. El uso de di describe anteriormente. Las muestras se analizaron sólo para
osmolalidad, pero se compararon usando tanto el 20 ÿl TABLA 1. Concentración (mmol/l) de sustancias seleccionadas en
R R Sangre Total y Plasma
Micro-osmómetro y un avanzado más grande de 250 ÿl
Osmómetro de muestra única Fiske Modelo 3250 (Norwood, MA). Sangre pura Plasma
La normalidad de los datos se probó utilizando el D'Agostino-Pearson
Prueba ómnibus de asimetría y curtosis. Las pruebas t pareadas fueron Sodio 139 ± 1 139 ± 1
Potasio 4,2 ± 0,2 4,1 ± 0,3
utilizado para comparar la significación estadística (P < 0.05) de
Cloruro 106 ± 2 1,2 107 ± 2
diferencias medias entre la sangre total y el plasma (osmolalidad y calcio ± 0,0 0,6 ± 1,2 ± 0,1
osmolaridad) al investigar las preguntas del estudio primario y secundario. Magnesioa 0,0 5,5 ± 0,6 ± 0,1
para la secundaria glucosab 0,6 1,6 ± 5,5 ± 0,6
lactato 0,7 5,5 ± 1,4 1,5 ± 0,7
pregunta de estudio, se realizó una corrección de Bonferroni adecuada
BOLLO 5,7 ± 1,4
(ÿ/4 = 0,01) para dar cuenta de las cuatro comparaciones
hecho. El grado de superposición de distribución se evaluó para BUN, nitrógeno ureico en sangre.
juzgar la importancia de las diferencias en el primario más grande aionizado.
muestra de estudio solamente (38). Coeficientes de correlación de Pearson b Medido enzimáticamente; valor de sangre total multiplicado por 1,11 para corregir las
se utilizaron para examinar asociaciones simples. Todo paramétrico diferencias en las concentraciones de agua en plasma y sangre total
(29).
los datos se describen utilizando la media ± desviación estándar.
Los datos no paramétricos se representan usando la mediana y
(distancia).
ciones para la osmolalidad y la osmolaridad de la sangre total y del plasma.
Una interpretación convincente de la magnitud de la
RESULTADOS 10 mmol/kg de diferencia entre sangre total y plasma
osmolalidad es que solo el 27% de las distribuciones se superponen
Los participantes de este estudio incluyeron una heterogénea
(73% unicidad) (38). Por el contrario, existe una superposición del 90% para
muestra de 62 soldados y civiles voluntarios sanos
osmolaridad del plasma y de la sangre total (10% de singularidad).
(44 hombres, 18 mujeres). Información descriptiva del voluntario
La brecha de osmol, calculada como la osmolalidad medida menos
incluyeron una mediana de edad de 24 años (19-46), altura de
osmolaridad calculada, fue de 16 ± 6 mmol para sangre total
173 cm (117–193) y peso de 78,3 kg (48,8–111,8).
y 7 ± 5 mmol para plasma.
Todos los voluntarios participaron en uno, dos o tres días de prueba.
La Tabla 2 proporciona los resultados de la investigación del estudio
El intervalo de tiempo medio entre los días repetidos fue de 2 días.
post hoc. La diferencia en la osmolaridad de la sangre total entre
(1–349). Un total de 168 pares de sangre entera y plasma
osmómetros fue de 13 ± 4 mmol/kg (P < 0,01), mientras que el
Se obtuvieron muestras para su análisis. Un separado más pequeño
diferencia en la osmolalidad del plasma entre los osmómetros fue
grupo de 10 soldados y voluntarios civiles (seis hombres, cuatro
4 ± 2 mmol/kg (P < 0,01). La diferencia entre todo
mujeres) participaron en la investigación del estudio post hoc.
La osmolaridad en sangre y plasma fue de 12 ± 4 mmol/kg utilizando
Los voluntarios tenían una mediana de edad de 29 años (23–47), altura
el micro-osmómetro de 20 ÿl (P < 0,01) y 3 ± 2 mmol/kg
de 175 cm (157-190), y peso de 73,9 kg (56,8-93,2).
para el osmómetro de 250 ÿl (P < 0,01).
Proteínas plasmáticas (75 ± 4 g/l), hematocrito (0,41 ± 0,03),
y hemoglobina (141 ± 12 g/l) estaban dentro de los límites típicos
(39). Las concentraciones de sangre entera y agua plasmática fueron
DISCUSIÓN
también típico en 84,0 ± 0,8% y 92,9 ± 0,3%, respectivamente.
El coeficiente analítico de variación para sangre total El objetivo principal de este estudio fue comparar
y la osmolalidad plasmática se calculó a partir de diez triplicados sangre total y plasma en índices de osmolalidad medida y osmolaridad
mide [(desviación estándar/media) × 100] y fue 0,6 calculada. Además, también investigamos el impacto potencial del volumen
y 0,5%, respectivamente. La Tabla 1 proporciona una comparación de la muestra en el
de las concentraciones molares de sustancias seleccionadas en su totalidad osmolalidad en una comparación de estudios post hoc. nuestro principal
sangre y plasma. La Figura 1 proporciona un gráfico de sangre total La conclusión es que la os molalidad medida en sangre total y plasma son
(eje x) versus plasma (eje y) osmolaridad (A) y osmolaridad (B). La significativamente diferentes cuando
diferencia media (sangre entera-plasma) en se utiliza un volumen de muestra de 20 ÿl.
la osmolalidad fue de 10 ± 3 mmol/kg (P < 0,001), por lo que La concentración molar de las sustancias individuales fue
la sangre total siempre fue mayor que el plasma (168/168 lo mismo en sangre entera y plasma (Tabla 1), de acuerdo con el principio
o 100%). La diferencia media en la osmolaridad fue de 0 ± de constancia osmótica dentro y fuera
2 mmol/l (P < 0,05), por lo que la sangre total fue mayor fuera de las células vivas (25–27). La osmolaridad calculada para
que el plasma en 90 de 168 casos (56%). La correlación plasma y sangre total, aunque significativamente diferentes
coeficiente entre sangre total y plasma fue el debido al gran tamaño de la muestra y al diseño pareado, también estuvo de acuerdo
mismo (r = 0.75, P < 0.05) para osmolaridad y osmolaridad. dentro de 1 mmol/l (Fig. 1B) y distribución compartida del 90 %
La figura 2A y B muestra la distribución de frecuencia gaussiana superposición (Fig. 2B). Es bien sabido que la conversión de
UN
320
295 ± 4
310
300
290
305 ± 5
280
280 290 300 310 320
WB-Osmolalidad (mmol/kg)
B
320
288 ± 3
310
300
290
Fig. 2. Distribuciones de frecuencia gaussianas para sangre total y plasma
en la concentración de masa de agua (15, 19, 31). Sin embargo, 5 299 289 285 284
6 303 289 291 288
la brecha osmolar media para el plasma (7 mmol) fue generalmente
7 306 293 290 289
aceptable (<10 mmol) mientras que la brecha osmolar para la sangre entera
8 297 284 287 281
(16 mmol) no era (10). Barr et al. (34) emplearon el mismo 9 307 290 290 287
fórmula (20) al calcular plasma y sangre entera 10 301 294 290 287
brechas de osmol y encontró resultados casi idénticos para el plasma Media ± DE 302 ± 5 291 ± 4 289 ± 3 287 ± 3
tan pequeña (3 ± 2 mmol/kg) como la variación diaria de la osmolaridad pruebas de laboratorio cuando se desea conocer la osmolalidad de la
plasmática (40) y menor que las fluctuaciones de la osmolaridad sangre.
plasmática asociadas con la osmorregulación perturbada (40–42). La
similitud de nuestros resultados con los de Barr et al. (34) están en
EXPRESIONES DE GRATITUD
contraste directo con solo otro estudio que utilizó un volumen de
muestra de 20 ÿl (24), el resto comprende osmometría de presión de Los autores agradecen a Elizabeth M. Caruso, Kurt J.
vapor (21) o volúmenes de muestra entre 100 y 200 ÿl (22, 32). Los
Sollanek, Jeffery S. Staab y Myra L. Jones por su asistencia experta.
coeficientes de correlación calculados aquí entre la osmolalidad de la
Los puntos de vista, opiniones y/o hallazgos contenidos en el artículo
sangre entera y del plasma fueron grandes (r = 0,75) y significativos (P
pertenecen a los autores y no deben interpretarse como una posición
< 0,05), pero comparativamente más pequeños que los informados por
o decisión oficial del Departamento del Ejército, a menos que así lo
Koumantakis y Weyland (24) (r = 0,91). La explicación más probable
indique otra documentación oficial.
(33) radica en el rango más pequeño de 27 mmol/kg de valores de
osmolalidad plasmática en este estudio en comparación con el rango
de 70 mmol/kg informado por Koumantakis y Weyland (24). Aunque
los rangos de muestra de osmolalidad plasmática más grandes tienen REFERENCIAS
una mayor relevancia clínica, nuestro rango más pequeño aún excedía
el intervalo de referencia típico para la osmolalidad plasmática (39). 1. Boyd D, Baker R. Osmometry: una nueva ayuda de laboratorio de cabecera
Otros factores disponibles para la comparación (p. ej., suministros o para el manejo de pacientes quirúrgicos. Surg Clin de N Am 1971;51(1):241–
250.
procedimientos operativos estándar) no revelan ninguna explicación
2. Cheuvront SN, Kenefick RW, Sollanek KJ, Ely BR, Sawka MN.
obvia para los resultados conflictivos. Ecuación del déficit hídrico: Análisis y mejora sistemática. Am J Clin Nutr
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