PRÁCTICA 1: EXTRACCIÓN DE ADN
1. Objetivos
Objetivo general
Practicar un proceso fisicoquímico para la extracción de ADN de una
muestra vegetal con el fin de obtener la precipitación del ADN en base a su
polaridad.
Objetivos específicos
1. Extraer el ADN de una muestra vegetal a través de la separación
mecánica de las células y la disolución de las membranas para la
liberación del material genético.
2. Comprobar la acción de sales (NaCl) y solventes orgánicos (OH)
sobre el ADN para hacer evidente su presencia en la muestra.
2. Material Reactivos Equipos
2 Gasas 100 mL Agua 1 Licuadora
1 Jeringa 5 mL 5 mL Etanol 1 Báscula
1 Cuchara 5g Cloruro de sodio
1 Cuchara 10 mL Detergente líquido o
pastelera sólido
2 Vasos 20 g Muestras:
tequileros Plátano,Cebolla,
Jitomate
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3. Metodología
4. Resultados y discusión
Resultados con otros equipos
En cuanto a los resultados obtenidos del resto de los equipos podemos decir que
en su mayoría hay una comparación similar ya que si cumplieron con los objetivos
establecidos, es decir se cumplió la extracción de ADN de una muestra vegetal a
través de la separación mecánica de las células y de la disolución de la membrana,
puesto que con el equipo "Las mitocondrias" ellos utilizaron como muestra vegetal
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una fresa en donde al seguir el mismo procedimiento que nosotros obtuvieron la
precipitación de ADN en la interfase al igual que nuestro equipo justo como se
muestra en la figura 1.
Figura 1. Precipitado de ADN de una muestra de fresa.
*Nota: No se pudo comparar los resultados obtenidos con el resto de los demás
equipos debido a que no se obtuvo la información necesaria para comparar los
resultados.
Resultados propios
Según los objetivos planteados se pudo extraer el material genético de muestras
vegetales tales como un plátano, cebolla y jitomate, tal y como se muestra en la
tabla 1. Además se comprobó la acción que tuvo el cloruro de sodio y cómo influyó
el solvente orgánico, que en este caso fue etanol, para la obtener la precipitación
del ADN por lo que los resultados si cumplen con todos los objetivos planteados
tanto los generales como los específicos, sin embargo hubo diferencias respecto a
la obtención del ADN, ya que al ser diferentes vegetales se observaba un ligero
cambio en la interfase, es decir para el plátano se observaba mayor contenido de
ADN respecto al jitomate y de cebolla siendo este último con la menor visibilidad de
material genético tal y como se muestra en la tabla 1. En cuanto a la comparación
se tiene que posiblemente al utilizar detergente sólido, este hacía más visible el
material genético, esto en base a que en la muestra de plátano se utilizó detergente
sólido y por supuesto era mayormente visible en comparación a la de jitomate y
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cebolla en donde se utilizó detergente líquido, sin embargo para las 3 muestras se
obtuvo la precipitación en la interfase siendo de esta forma los resultados
esperados, puesto que para las 3 muestras se apreciaba el material genético.
Extracción de ADN
Plátano Jitomate Cebolla
Tabla 1. Comparación sobre la extracción de ADN de plátano, jitomate y
cebolla respectivamente.
Discusión de resultados
Como se analizó anteriormente, los resultados obtenidos fueron exitosos debido a
que se pudo extraer el ADN de las muestras vegetales elegidas a través de la
separación mecánica de las células y la disolución de las membranas para la
liberación del material genético. De acuerdo a los resultados obtenidos por el
equipo “Las mitocondrias”, fue semejante a los obtenidos por nosotros, alcanzando
los objetivos deseados.
Por ello es importante recalcar que se logró con éxito la precipitación del ADN, esto
gracias a la adición del cloruro de sodio que cumple con una función importante
dentro de esta práctica, ya que las mismas sales aumentan el poder iónico de la
solución, así como también la adición del etanol que permitió disminuir la constante
dieléctrica del solvente acuoso, ya que sin estos dos componentes no habría sido
posible llegar a los resultados obtenidos.
*Nota: No se pudo realizar una discusión más amplia debido a que no se contaba
con la información proporcionada por los demás equipos involucrados en la
elaboración de esta práctica, por lo que se procedió a trabajar con la información
proporcionada.
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5. Conclusiones
Cabe denotar, que el ADN va a estar constituído por dos cadenas de nucleótidos
las cuales están unidas entre sí formando una doble hélice; por tanto durante la
elaboración de la práctica se puede corroborar la separación que tiene el ADN con
los diferentes frutos utilizados, esta extracción consiste en aislar y purificar los
moléculas que cada uno de los frutos tiene mediante una precipitación al usar
alcohol etílico con ayuda de cationes que va ha ayudar a neutralizar las cargas
negativas que el ADN posee;en conclusión, al realizar el proceso de extracción de
ADN, se observa cómo las partículas se separan del filtrado llevando a cabo la
separación del ADN de la fruta, ; por tanto se llegó a los objetivos establecidos
durante la elaboración de la práctica a través de una separación mecánica de las
células y la disolución de las membranas para la liberación del material genético.
6. Cuestionario
1. ¿Qué función tiene el cloruro de sodio en el proceso?
● La función del cloruro de sodio es que las sales aumentan el poder iónico de
la solución, ocasionando la precipitación del ADN (Velasco Mosquera, 2005).
2. ¿Por qué se precipita el ADN al adicionar el alcohol?
● ADN es polímero de nucleótidos, es hidrofílico y tiene carga neta negativa
por la presencia de un grupo fosfato en cada monómero; en alcoholes, el
ADN no es soluble por tal motivo, al adicionar el alcohol al filtrado, este va
a disminuir la constante dieléctrica del solvente acuoso provocando una
precipitación (Ciochinni & Niemirowicz, 2018).
7. Bibliografía
Ciochinni, A., & Niemirowicz, G. (2018). Ácidos Nucleicos. Universidad
Nacional de San
Martín.http://www.iib.unsam.edu.ar/archivos/docencia/licenciatura/
biotecnologia/2018/QuimicaBiol/1527862563.pdf
Velasco Mosquera, R. (2005, 10 febrero). Marcadores moleculares y la
extracción de ADN. Facultad de Ciencias Agropecuarias. Recuperado 18 de
febrero de 2022, de https://dialnet.unirioja.es/descarga/articulo/6117966.pdf
